專利名稱：白介素與嘧啶核苷的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的藥物組合物。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及一種協(xié)同增效的抗腫瘤藥物組合物，該組合物包含一種有效量的白細(xì)胞介素-12(IL-12)和一種嘧啶核苷，及其轉(zhuǎn)化成氟尿嘧啶或其衍生物的水合物或溶劑化物，還包含有藥學(xué)上可接受的載體，還涉及一種治療各種癌癥的協(xié)同增效抗腫瘤藥物組合物及治療各種癌癥的方法。
5′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷(脫氧氟尿苷)，一種嘧啶核苷，可有效地治療各種惡性腫瘤疾病。嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)(包括胸苷和尿苷磷酸化酶)在體內(nèi)將5′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷(doxifluridine)轉(zhuǎn)化成活性藥物5-FU(氟尿嘧啶)。因此，嘧啶核苷磷酸化酶是脫氧氟尿苷(doxifluridine)發(fā)揮藥效的基本因素。實(shí)際上，這種酶含量非常低的腫瘤對(duì)脫氧氟尿苷是不敏感的，而PyNPase基因轉(zhuǎn)染可使腫瘤對(duì)此藥物更具敏感性。目前，已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)IL-12可以調(diào)節(jié)腫瘤組織中的PyNPase酶活性使其升高，從而增強(qiáng)了脫氧氟尿苷的抗腫瘤活性。IL-12也可以增強(qiáng)5′-脫氧-5-氟-N4-(n-戊基羰基)胞苷(Capecitabine)的活性，因該胞苷可以產(chǎn)生脫氧氟尿苷，并被PyNPase酶轉(zhuǎn)化成5-氟尿嘧啶。相反，IL-12對(duì)5-氟尿嘧啶抗腫瘤活性的增強(qiáng)程度要低于對(duì)脫氧氟尿苷抗腫瘤活性的增強(qiáng)程度。
已有報(bào)道指出某些炎性細(xì)胞激動(dòng)素，如，IL-1a，TNF-a和IFN-g可以升高腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)物中PyNPase酶的活性，并因此而增強(qiáng)了對(duì)脫氧氟尿苷的敏感性(參見(jiàn).Eda et al.Cancer Chemother Pharmacol.(1993)32333-339，和Jpn.J.Cancer Res.84，341-347，1993年3月)。這些細(xì)胞激動(dòng)素當(dāng)非腸胃道給藥時(shí)可以通過(guò)循環(huán)而分散到各種正常組織，并引起全身的副作用，如流感樣的(flu-like)綜合癥，白細(xì)胞減少，低血壓等。另外，這些細(xì)胞激動(dòng)素在分散到腫瘤組織的同時(shí)也分散到正常組織，同時(shí)增強(qiáng)這些組織中的PyNPase酶活性，使得正常組織和腫瘤組織對(duì)脫氧氟尿苷均更加敏感。因此，當(dāng)細(xì)胞激動(dòng)素與脫氧氟尿苷同時(shí)給藥時(shí)，前者既增加了后者的效果，也增加了其毒性。但是，當(dāng)非腸胃道給藥IL-12時(shí)，它在腫瘤組織中所誘導(dǎo)出的IFN-g比在正常組織中所誘導(dǎo)出的量要更高。因此，當(dāng)非腸道給藥IL-12時(shí)，它可以選擇性地增強(qiáng)腫瘤組織中PyNPase的活性，而不會(huì)引起IFN-g相關(guān)的全身副作用。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選方案中，嘧啶核苷是指分別由下式(I)或(II)代表的尿苷、胞苷或其衍生物
其中R1是氫或一種在生理?xiàng)l件下易于水解的基團(tuán)；R2是氫、氰、氟、可以被一個(gè)或兩個(gè)氟原子取代的低級(jí)烷基或低級(jí)亞烷基，或OR1；和R3是低級(jí)烷基、羥甲基、或CH2OR1，以及它們的一種水合物或溶劑化物。
上述式(I)和(II)中在生理?xiàng)l件下易于水解的優(yōu)選R1基團(tuán)是R4CO-，R4OCO-或R4SCO-，其中R4是烷基、環(huán)烷基、芳烷基或芳基。
而且R4所代表的烷基、環(huán)烷基、芳烷基、或芳基優(yōu)選是飽和的，直鏈或支鏈的烴基[其中此該烴基最長(zhǎng)直鏈中的碳原子數(shù)是3-7]，或通式為(CH2)n-y的一種基[其中當(dāng)y是環(huán)己基時(shí)n是0-4的整數(shù)，或當(dāng)y是帶有1-4個(gè)碳原子的低級(jí)烷氧基或苯基時(shí)，n是2-4的整數(shù)]。
在上文中，術(shù)語(yǔ)“一種飽和的，直鏈或支鏈烴基[其中該烴基最長(zhǎng)直鏈中的碳原子數(shù)為3-7]”優(yōu)選的是指正-丙基，1-異丙基-2-甲基丙基，1，1，2-三甲基丙基，n-丁基，異丁基，2-乙基丁基，3，3-二甲基丁基，正-戊基，異戊基，新戊基，2-丙基戊基，正-己基，2-乙基己基，正-庚基，烯丙基，2-丁烯-1-基，3-丁烯-1-基，3-戊烯-1-基，4-戊烯-1-基，3-己烯-1-基，4-己烯-1-基，5-己烯-1-基，等。
該術(shù)語(yǔ)“通式為(CH2)n-y的基[其中當(dāng)y是環(huán)己基時(shí)n是0-4的整數(shù)，或當(dāng)y是帶有1-4個(gè)碳原子的低級(jí)烷氧基或苯基時(shí)，n是2-4的整數(shù)]”優(yōu)選的是指環(huán)己基，環(huán)己基甲基，2-環(huán)己基乙基，3-環(huán)己基丙基，4-環(huán)己基丁基，2-甲氧基乙基，2-乙氧基乙基，2-丙氧基乙基，3-甲氧基丙基，3-乙氧基丙基，4-甲氧基丁基，4-乙氧基丁基，苯乙基，3-苯丙基，4-苯丁基，等。
本發(fā)明優(yōu)選的嘧啶核苷是5′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷，5 -脫氧-5-氟胞嘧啶核苷，5′-脫氧-N4-(3，5-二甲氧基苯甲酰基)-5-氟胞苷，5′-脫氧-N4-(3，5-二甲基苯甲酰基)-5-氟胞苷，5′-脫氧-N4-[(2，4-二氯苯基)乙?；鵠-5-氟胞苷，5′-脫氧-N4-(吲哚-2-基乙酰基)-5-氟胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(3，4，5-三甲基苯基)胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(丙氧基羰基)胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(己氧基羰基)胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(異戊基氧基羰基)胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(新戊氧基羰基)胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-[(1，1，2-三甲基丙氧基)羰基]胞苷，5′-脫氧-N4-(3，3-二甲基丁氧基)羰基]-5-氟胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-[(1-異丙基-2-甲基丙氧基)羰基]胞苷，5′-脫氧-N4-[(2-乙基丁基)氧基羰基]-5-氟胞苷，N4-[(環(huán)己基甲氧基)羰基]-5′-脫氧-5-氟胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-[(2-苯基乙氧基)羰基]胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脫氧-5-氟-N4-(丙氧基羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙?；?N4-(丁氧基羰基)-5′-脫氧-5-氟胞苷，2′，3′-二-O-苯甲?；?N4-(丁氧基羰基)-5′-脫氧-5-氟胞苷，2′，3′-二-O-乙?；?5′-脫氧-5-氟-N4-(戊基氧基羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙?；?5′-脫氧-5-氟-N4-(異戊氧基羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙?；?5′-脫氧-5-氟-N4-(己氧基羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脫氧-N4-[(2-乙基丁基)氧基羰基]-5-氟胞苷，2′，3′-二-O-乙?；?N4-[(環(huán)己基甲氧基)羰基]-5′-脫氧-5-氟胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脫氧-5-氟-N4-[(2-苯基乙氧基)羰基]胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(異丁氧基羰基)胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-[(2-丙基戊基)氧基羰基]胞苷，5′-脫氧-N4-[(2-乙基己基)氧基羰基]-5′-氟胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(庚基氧基羰基)胞苷，N4-[(2-環(huán)己基乙氧基)羰基]-5′-脫氧-5-氟胞苷，N4-[(3-環(huán)己基丙基)氧基羰基]-5′-脫氧-5-氟胞苷，N4-(環(huán)己基氧基羰基)-5′-脫氧-5-氟胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-[(3-苯丙基)氧基羰基]胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-[(2-甲氧基乙氧基)羰基]胞苷，N4-(丁氧基羰基)-5′-脫氧-5-氟胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(戊基氧基羰基)胞苷，2′，2′-二氟脫氧胞苷，5′-氟-1-四氫呋喃-1-基尿嘧啶，2′-脫氧-2′-亞甲基-5-氟胞苷，2′-脫氧-2′-氰-5-氟胞苷以及它們的水合物或溶劑化物。
上述具體的化合物在下述文獻(xiàn)中分別有描述美國(guó)專利Nos.4,071,680和4,966,891；歐洲專利Nos.602290-Al；K.Takenuki et al.J.Med.Chem.31，1063(1988)，K.yamagami et al.Cancer Research 51，2319(1991)和A.Matsuda etal.J.Med.Chem.34，2917(1991)，并且這些化合物可以按照上述相關(guān)文獻(xiàn)中所述的方法或其類似方法進(jìn)行制備。
IL-12是由攜帶抗原的細(xì)胞產(chǎn)生的一種雜二聚體細(xì)胞激動(dòng)素，并且作為T和NK細(xì)胞功能的中樞調(diào)節(jié)因子(參見(jiàn)，Stern，A.S.et al.Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1990)87，6808-6812和Kobayashi，M.et al.J.Exp.Med.(1989)170，827-845)。與IL-2相關(guān)的生物活性包括它能夠增強(qiáng)自然殺傷/淋巴因子活化殺傷細(xì)胞的裂解活性；能夠通過(guò)休止和活化的T和NK細(xì)胞而誘導(dǎo)干擾素-g(IFN-g)的分泌；能夠刺激活化的T和NK細(xì)胞的增殖；能夠增強(qiáng)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的反應(yīng)以及能夠在促進(jìn)Th-1型細(xì)胞激動(dòng)素反應(yīng)過(guò)程中起重要和獨(dú)特的作用，從而增強(qiáng)細(xì)胞免疫(參見(jiàn)Brunda，M.J.J.leukocyte Biol.(1994)55，280-288和Taniguchi，G.Blood(1994)84，4008-4027)。
IL-12(包括人型和鼠型)是由兩個(gè)大小分別為35KDa和40KDa的二硫鍵連接的糖蛋白亞單位組成。已經(jīng)克隆出編碼IL-12的每個(gè)亞單位的cDNAs，并在中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)中共同表達(dá)而產(chǎn)生該分泌的生物活性雜二聚體淋巴因子(Gubler，U.et al.Proc.Natl.Acad.Scl.USA.(1991)88，4143-4147和Schaenhaut，D.S.et al.J.Immunel.(1992)148，3433-3440)。已選擇出分泌重組IL-12的轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞的一個(gè)克隆。使CHO細(xì)胞在無(wú)血清的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，并通過(guò)離子交換和凝膠過(guò)濾層析從該培養(yǎng)上清液中純化重組的IL-12。
本發(fā)明的藥物組合物可以以任何形式給藥，例如，片劑、丸劑、栓劑、膠囊劑、顆粒劑、粉劑等或乳劑。本發(fā)明的藥物組合物特別適合于肌肉內(nèi)、皮下、或靜脈內(nèi)給藥。適用于制備本發(fā)明藥物組合物的藥學(xué)上可接受的載體和賦型劑是常用的載體和賦形劑。藥學(xué)上可接受的物質(zhì)可以是適合于內(nèi)服、皮下或腸胃外給藥的有機(jī)或無(wú)機(jī)惰性載體物質(zhì)，如水、明膠、阿拉伯樹膠、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、滑石粉、植物油、聚(亞烷基)二醇和石油凝膠。本發(fā)明提供的藥物組合物可以口服給藥，如以片劑、膠囊、丸劑、粉劑、顆粒劑、溶液、糖漿、混懸劑或酏劑。也可以通過(guò)非腸道給藥，例如，無(wú)菌溶液劑型、混懸液或乳劑；或者局部給藥，如，溶液劑型、混懸液、油膏劑、粉劑或氣霧劑。該藥物組合物可以是無(wú)菌的和/或可以含有其它輔劑，如，防腐劑、穩(wěn)定劑、凝固劑、乳化劑、調(diào)味劑、用于改變滲透壓的鹽或作為緩沖劑的物質(zhì)。
本發(fā)明的協(xié)同效果的抗腫瘤藥物組合物包括一種單一的藥物組合物以及藥物組合物藥盒，各自含有所需劑型的單一活性成份。因此，本發(fā)明還涉及一種治療結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、宮頸癌、膀胱癌和其他惡性腫瘤疾病的藥盒，它含有第一藥物組合物，該組合物包括有效量的IL-12和一種藥學(xué)上可接受的載體，和第二藥物組合物，該組合物包括一種有效量的嘧啶核苷衍生物，以及它們的水合物或溶劑化物和一種藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明藥物組合物的劑量范圍可以由本領(lǐng)域中的熟練技術(shù)人員很容易地確定，并且取決于給藥途徑、病人的年齡、體重以及所要治療的具體疾病的癥狀。如果是對(duì)成人口服給藥、直腸給藥或非腸道給藥，劑量范圍大約是0.05mg/每人/天至大約500mg/每人/每天的IL-12和大約50mg/每人/每天至大約20,000mg/每人/每天的嘧啶核苷，一般它們的重量比范圍是大約1∶100至大約1∶400,000。優(yōu)選的重量比是大約1∶1,000至大約1∶10,000。本發(fā)明藥物組合物的優(yōu)選給藥途徑是直腸給藥和靜脈內(nèi)給藥。
本發(fā)明的藥物組合物適用于治療結(jié)腸直腸癌，乳腺癌、胃癌、肺癌、宮頸癌、膀胱癌和其他惡性腫瘤疾病等。
下面所描述的試驗(yàn)證明了本發(fā)明藥物組合物的協(xié)同增效抗腫瘤活性。(1)mIL-12提高酶的活性以活化脫氧氟尿苷和5′-脫氧-5-氟-N4-(n-戊基氧基羰基)胞苷(capecitabine)。
分別給六周齡的雌性C57BL/6s小鼠或雄性BALB/c小鼠接種A755乳腺癌(2×105個(gè)細(xì)胞)或接種Meth A纖維肉瘤(5×105個(gè)細(xì)胞)。在腫瘤接種之后的第7天和第8天開始每天分別給這些小鼠皮下給藥0.1mg/每鼠的鼠IL-12(mIL-12)或載體(0.1mg/ml的溶于磷酸緩沖鹽水溶液中的鼠血清白蛋白)。給藥7天。在此之后一天，按照Eda等人在Cancer Chemother.Pharmacol.1993；32333中所述的方法測(cè)定腫瘤組織中的PyNPase活性。用商業(yè)上可購(gòu)買到的ELISA系統(tǒng)(Intertest g.Genzyme)對(duì)腫瘤組織中的鼠IFN-g(mIFN-g)含量也進(jìn)行測(cè)定。
如表1所示，mIL-12可以增強(qiáng)A755腫瘤中的PyNPase活性11.9倍，可增強(qiáng)MethA腫瘤組織中的PyNPase活性2.4倍。這可能是mIFN-g的升高結(jié)果，它是PyNPase的增強(qiáng)因子。
表1mIL-12對(duì)PyNPase和mIFN-g的升高作用PyNPase mIFN-g腫瘤模型 給藥活性 含量(μg5-FU/mg/hr) (ng/g組織)A755乳腺癌 載體 4.4±4.6a)＜2.0mIL-1252.3±28.8*46.8±11.7*MethA纖維肉瘤載體21.4±2.6 ＜1.1mIL-12 51.7±9.4*6.7±2.1**與載體組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著差異(P＜0.05，學(xué)生t-檢驗(yàn))。a)6只鼠的平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤差(2)mIL-12在腫瘤組織中選擇性誘導(dǎo)mIFN-g的產(chǎn)生。
給六周齡的雌性C57BL/6小鼠接種A755乳腺癌(2×105個(gè)細(xì)胞)。在腫瘤接種后的第6天起給這些小鼠皮下給藥mIL-12 0.1mg/每鼠或載體(0.1mg/ml溶于磷酸緩沖鹽溶液中的鼠血清白蛋白)，每天給藥，共給藥7天。給藥結(jié)束后的一天，按照上述方法通過(guò)ELISA系統(tǒng)測(cè)定血清中和腫瘤及其他器官的組織勻漿中的mIFN-g含量。
如表2所示，與正常器官中的mIFN-g含量相比mIL-12可以在很大程度上增加mIFN-g的含量。腫瘤組織中mIFN-g的含量比目前為止所測(cè)定的正常組織中mIFN-g含量高3至7倍，比血液循環(huán)中的mIFN-g含量高50倍。這些結(jié)果表明在腫瘤組織中通過(guò)IL-12選擇性地增加mIFN-g產(chǎn)量，mIL-12可以選擇性地增高腫瘤組織中PyNPase酶活性。
表2mIL-12在腫瘤組織中選擇性地誘導(dǎo)mIFN-g的產(chǎn)生mIFN-g含量(ng/g組織)a)器官 治療小鼠載體 mIL-12腫瘤 3.2±0.9 32.7±9.8*血清 0.27±0.050.66±0.22*小腸 ＜2.5 5.3±4.0大腸 2.8±0.8 4.3±0.5*脾臟 2.9±0.5 9.3±1.9*肝臟 2.1±1.0 4.2±0.6*腎臟 5.1±1.1 7.5±1.4*胸腺b)6.2 10.3*明顯高于載體組(P＜0.05)。a)平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤差。除胸腺組外，在載體和mIL-12組中n＝4和5。b)從4個(gè)胸腺的組合勻漿中獲得的數(shù)值。(3)脫氧氟尿苷或capecitabine與IL-12組合的抗腫瘤效果。1)A755乳腺癌模型將A755(2×105個(gè)細(xì)胞)給雌性C57BL/6小鼠接種。在腫瘤接種之后的第9天起，每天給小鼠給藥mIL-12(0.03μg/每鼠，皮下)、脫氧氟尿苷(1.5mmol/kg，口服)和它們的組合物，共給藥4周。
脫氧氟尿苷單獨(dú)使用時(shí)，由于A755腫瘤只有低含量的PyNPase酶，因此不表現(xiàn)出腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用，而使用mIL-12是有效的(表3)。mIL-12與脫氧氟尿苷組合使用比mIL-12單獨(dú)使用更有效，并且使腫瘤消退。
如果觀察存活期其組合效果是更明顯(表4)。脫氧氟尿苷也不能有效地延長(zhǎng)存活期，而IL-12可稍延長(zhǎng)存活期。相比而言，IL-12與脫氧氟尿苷組合使用比單獨(dú)使用IL-12的長(zhǎng)存活期延長(zhǎng)更多，并且有些小鼠可以治愈(3/5)。
表3脫氧氟尿苷、mIL-12和它們的組合物在A755乳腺癌模型中的抗腫瘤活性腫瘤生長(zhǎng)％治療25天時(shí)的腫瘤體積 與對(duì)照組相比 與只用mIL-12組相比(mm3)a)對(duì)照組 8969±4159b)100 -脫氧氟尿苷 8380±290793 -mIL-12 2399±1567c)22100脫氧氟尿苷 216±187c)d)-4-16+mIL-12a)只觀察了腫瘤接種后第26天的腫瘤體積，因?yàn)樵诖酥笥捎谀[瘤負(fù)擔(dān)大而對(duì)照組小鼠出現(xiàn)了死亡。在治療開始的第9天腫瘤體積是513±300mm3。b)平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤差。c)與對(duì)照組比較有顯著差異。P＜0.05d)與mIL-12組比較有顯著差異。P＜0.05
表4用脫氧氟尿苷、mIL-12和它們的組合物治療的A755乳腺癌模型中小鼠的存活情況治療平均存活天數(shù)(范圍) 生命期限的 在153天時(shí)的增加％ 存活數(shù)對(duì)照組 28(23-42) 00/5脫氧氟尿苷29(22-36) 40/5mIL-12 49(43-55)a)750/5脫氧氟尿苷＞153(51-＞153)a)b)＞446 3/5+mIL-12a)與對(duì)照組比較有顯著差異。P＜0.05b)與mIL-12組比較有顯著差異。P＜0.052)Meth A纖維肉瘤模型將Meth A纖維(5×105個(gè)細(xì)胞)皮下接種到雄性/BALB/c小鼠。在腫瘤接種后的第8天起，每天對(duì)小鼠給藥脫氧氟尿苷(0.5mmol/kg，口服)，5′-脫氧-5-氟-N4-(n-戊基氧基羰基)胞苷(capecitabine)(1.0mmol/kg，口服)，5-氟尿嘧啶(0.075mmol/kg，口服)，mIL-12(0.03μg/每鼠，皮下)和它們的組合物，共給藥3周。
三種氟嘧啶或mIL-12在所用劑量下單獨(dú)給藥表現(xiàn)出中度的腫瘤生長(zhǎng)抑制活性。mIL-12與脫氧氟尿苷或5′-脫氧-5-氟-N4-(n-戊基氧基羰基)胞苷聯(lián)合給藥，比上述任何一種藥物單獨(dú)給藥都表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗腫瘤活性(P＜0.05)。另一方面，mIL-12與5-氟尿嘧啶組合給藥比它們單獨(dú)給藥只是效果稍有增加(在統(tǒng)計(jì)學(xué)上不明顯)。
表5三種氟嘧啶[脫氧氟尿苷、5′-脫氧-5-氟-N4-(n-戊基氧基羰基)胞苷、5-氟尿嘧啶]、mIL-12和它們的組合物在MethA纖維肉瘤模型中的抗腫瘤活性。
腫瘤生長(zhǎng)率％在第29天的治療a)腫瘤體積(mm3)與對(duì)照組比較與mIL-12比較對(duì)照組10489±2054b)100 -
脫氧氟尿苷5170±887c)48 -脫氧氟胞苷4941±1397c)46 -(capecitabine)5-氟尿嘧啶6168±530c)58 -mIL-12 4584±1198c)42 100mIL-12+脫氧氟尿苷1912±1322(de)16 39mIL-12+脫氧氟胞苷2199±1329(de)19 45mIL-12+5-氟尿嘧啶3503+1785(e)32 75a)表示了腫瘤接種后29天的腫瘤體積。治療開始第8天的平均腫瘤體積是230mm3。b)平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤差。c)與對(duì)照組比較有顯著差異。P＜0.05d)與mIL-12單獨(dú)給藥組比較有顯著差異。P＜0.05e)與相應(yīng)的氟嘧啶單獨(dú)給藥組比較有顯著差異。P＜0.05。
下面的實(shí)施例說(shuō)明了本發(fā)明的藥物制劑，并不限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1按常規(guī)方法生產(chǎn)一種含有下列組份的注射液脫氧氟尿苷1000mghIL-1250μgNaCl 41.4mgNaH2PO416.2mgNa2HPO436.7mg吐溫80 4mg用1.2N HCl或1N NaOH調(diào)pH至7.0，用注射用蒸餾水調(diào)節(jié)總量至20毫升。
實(shí)施例2按照常規(guī)方法生產(chǎn)含有下列組份的注射液脫氧氟胞苷(Capecitabine) 100mghIL-1250μgNaCl718.2mgNaH2PO481mg
Na2HPO4188mg吐溫80 20mg用1.2NHCl或1NNaOH調(diào)pH至7.0，用蒸餾水調(diào)節(jié)總量至100ml的注射液。
實(shí)施例3按照常規(guī)方法生產(chǎn)一種具有下述組份A和B的用于治療結(jié)腸直腸癌的藥盒組份A(用于口服給藥的顆粒劑)脫氧氟胞苷(Capecitabine) 150mg羥丙甲基纖維素2910 4.5mg晶狀纖維素14.7mgCroscarmellose Sodium(Ac-Di-Sol) 6.0mg硬脂酸鎂 1.8mg包衣劑 3.0mg總量 180mg組份B(用于注射的無(wú)菌溶液)人白介素(hIL-12)0.2-20mgNaCl 116mgNAH2PO462.2mgNa2HPO4115.8mg吐溫80 4mg用1.2N HCl或1N NaOH調(diào)pH至7.0，用注射用水調(diào)節(jié)總量至20毫升。
權(quán)利要求
1.一種協(xié)同抗腫瘤藥物組合物，含有有效量的白介素-12和一種嘧啶核苷衍生物或也可以是其已被轉(zhuǎn)化成氟尿嘧啶或其衍生物的一種水合物或溶劑化物，和一種藥學(xué)上可接受的鹽。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中的嘧啶核苷是分別由下式(I)或(II)代表的一種尿苷、胞苷或它們的衍生物
其中R1是氫或一種在生理?xiàng)l件下易于水解的基團(tuán)；R2是氫、氰、氟、可以被一個(gè)或兩個(gè)氟原子取代的低級(jí)烷基或低級(jí)亞烷基，或OR1；和R3是低級(jí)烷基、羥甲基、或CH2OR1，以及它們的一種水合物或溶劑化物。
3.權(quán)利要求2的組合物，其中易于水解的基團(tuán)是R4CO-、R4OCO-或R4SCO-，其中R4是烷基、環(huán)烷基、芳烷基或芳基。
4.權(quán)利要求3的組合物，其中由R4所表示的烷基、環(huán)烷基、芳烷基或芳基是一種飽和的、直鏈或支鏈的烴基，其中此烴基最長(zhǎng)直鏈中的碳原子數(shù)范圍是3-7，或一種通式為(CH2)n-y的一種基團(tuán)，其中當(dāng)y是環(huán)己基時(shí)n是0-4的整數(shù)，或當(dāng)y是帶有1至4個(gè)碳原子的烷氧基或苯基時(shí)n是2-4的整數(shù)。
5.權(quán)利要求2的組合物，其中的嘧啶核苷衍生物選自下列一組的組份5′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷；5-脫氧-5-氟胞嘧啶核苷；5′-脫氧-N4-(3，5-二甲氧基苯甲?；?-5-氟胞苷，5′-脫氧-N4-(3，5-二甲基苯甲酰基)-5-氟胞苷，5′-脫氧-N4-[(2，4-二氯苯基)乙?；鵠-5-氟胞苷，5′-脫氧-N4-(吲哚-2-基乙酰基)-5-氟胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(3，4，5-三甲基苯基)胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(丙氧基羰基)胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(己氧基羰基)胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(異戊基氧基羰基)胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(新戊氧基羰基)胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-[(1，1，2-三甲基丙氧基)羰基]胞苷，5′-脫氧-N4-[(3，3-二甲基丁氧基)羰基]-5-氟胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-[(1-異丙基-2-甲基丙氧基)羰基]胞苷，5′-脫氧-N4-[(2-乙基丁基)氧基羰基]-5-氟胞苷，N4-[(環(huán)己基甲氧基)羰基]-5′-脫氧-5-氟胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-[(2-苯基乙氧基)羰基]胞苷，2′，3′-二-O-乙?；?5′-脫氧-5-氟-N4-(丙氧基羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙?；?N4-(丁氧基羰基)-5′-脫氧-5-氟胞苷，2′，3′-二-O-苯甲酰基-N4-(丁氧基羰基)-5′-脫氧-5-氟胞苷，2′，3′-二-O-乙?；?5′-脫氧-5-氟-N4-(戊基氧基羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙?；?5′-脫氧-5-氟-N4-(異戊氧基羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脫氧-5-氟-N4-(己氧基羰基)胞苷，2′，3′-二-O-乙酰基-5′-脫氧-N4-[(2-乙基丁基)氧基羰基]-5-氟胞苷，2′，3′-二-O-乙?；?N4-[(環(huán)己基甲氧基)羰基]-5′-脫氧-5-氟胞苷，2′，3′-二-O-乙?；?5′-脫氧-5-氟-N4-[(2-苯基乙氧基)羰基]胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(異丁氧基羰基)胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-[(2-丙基戊基)氧基羰基]胞苷，5′-脫氧-N4-[(2-乙基己基)氧基羰基]-5′-氟胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(庚基氧基羰基)胞苷，N4-[(2-環(huán)己基乙氧基)羰基]-5′-脫氧-5-氟胞苷，N4-[(3-環(huán)己基丙基)氧基羰基]-5′-脫氧-5-氟胞苷，N4-(環(huán)己基氧基羰基)-5′-脫氧-5-氟胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-[(3-苯丙基)氧基羰基]胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-[(2-甲氧基乙氧基)羰基]胞苷，N4-(丁氧基羰基)-5′-脫氧-5-氟胞苷，5′-脫氧-5-氟-N4-(戊基氧基羰基)胞苷，2′，2′-二氟脫氧胞苷，5′-氟-1-四氫呋喃-1-基尿嘧啶，2′-脫氧-2′-亞甲基-5-氟胞苷，2′-脫氧-2′-氰-5-氟胞苷以及它們的水合物或溶劑化物。
6.權(quán)利要求1至5的任一組合物，其中白介素-12與嘧啶核苷的重量比是大約1∶100至大約1∶400,000。
7.權(quán)利要求1至5的任一組合物，其中白介素-12與嘧啶核苷的重量比是大約1∶1,000至大約1∶10,000。
8.一種用于治療結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、宮頸癌、膀胱癌和其他惡性疾病的協(xié)同抗腫瘤藥物組合物，它含有有效量的白介素-12和一種嘧啶核苷或也可以是其水合物或溶劑化物，它們是由嘧啶核苷磷酸化酶轉(zhuǎn)化成氟尿嘧啶或其他的活性代謝物，和一種藥學(xué)上可接受的載體。
9.權(quán)利要求8的組合物，其中的嘧啶核苷是一種分別由權(quán)利要求2所定義的式(I))或(II)代表的尿苷、胞苷或它們的衍生物或其水合物或溶劑化物。
10.權(quán)利要求8的組合物，其中易于水解的基團(tuán)是R4CO-、R4OCO-或R4SCO-，其中R4是烷基、環(huán)烷基、芳烷基或芳基。
11.權(quán)利要求10的組合物，其中由R4代表的烷基、環(huán)烷基、芳烷基、或芳基是一種飽和的、直鏈或支鏈的烴基，其中該烴基最長(zhǎng)直鏈中的碳原子數(shù)范圍是3-7，或一種通式為(CH2)n-y的一種基團(tuán)，其中當(dāng)y是環(huán)己基時(shí)，n是0-4的整數(shù)，或當(dāng)y是帶有1至4個(gè)碳原子的低級(jí)烷氧基或苯基時(shí)，n是2-4的整數(shù)。
12.權(quán)利要求9的組合物，其中的嘧啶核苷衍生物選自權(quán)利要求5所定義的化合物。
13.權(quán)利要求8-12的任一組合物，其中白介素-12與嘧啶核苷的重量比是約1∶100至約1∶400,000。
14.權(quán)利要求8-12的任一組合物，其中白介素-12與嘧啶核苷的重量比是約1∶1,000至大約1∶10,000。
15.一種治療結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、宮頸癌、膀胱癌和其他惡性疾病的方法，它包括給藥一種協(xié)同抗腫瘤藥物組合物，該組合物含有有效量的白介素-12和嘧啶核苷或也可以是其水合物或溶劑化物，它們是由嘧啶核苷磷酸化酶轉(zhuǎn)化成氟尿嘧啶或其他活性代謝物，以及藥學(xué)上可接受的載體。
16.權(quán)利要求15的方法，其中的嘧啶核苷是分別由權(quán)利要求2所定義的式(I))或(II)代表的尿苷、胞苷或它們的衍生物，也可以是它們的水合物或溶劑化物。
17.權(quán)利要求16的方法，其中易于水解的基團(tuán)是R4CO-、R4OCO-或R4SCO-，其中R4是烷基、環(huán)烷基、芳烷基或芳基。
18.權(quán)利要求17的方法，其中由R4代表的烷基、環(huán)烷基、芳烷基或芳基是一種飽和的、直鏈或支鏈的烴基，其中該烴基最長(zhǎng)直鏈中的碳原子數(shù)范圍是3-7，或一種通式為(CH2)n-y的基團(tuán)，其中當(dāng)y是環(huán)己基時(shí)，n是0-4的整數(shù)，當(dāng)y是帶有1-4個(gè)碳原子的低級(jí)烷氧基或苯基時(shí)，n是2-4的整數(shù)。
19.權(quán)利要求15的方法，其中的嘧啶核苷衍生物是選自權(quán)利要求5所定義的化合物中的一種，或它們的水合物或溶劑化物。
20.權(quán)利要求15-19的任何一種方法，其中白介素-12與嘧啶核苷的重量比是大約1∶100至約1∶400,000。
21.權(quán)利要求15-19的任何一種方法，其中白介素-12與嘧啶核苷的重量比是大約1∶1,000至1∶10,000。
22.一種用于治療結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、宮頸癌、膀胱癌和其他惡性疾病的藥盒，它包括含有一種有效量的白介素-12和一種藥學(xué)上可接受載體的第一藥物組合物，和含有一種有效量的嘧啶核苷衍生物，或其一種水合物或溶劑化物和一種藥學(xué)上可接受載體的第二藥物組合物。
23.白介素-12和一種藥用載體，及作為一種含有效量的一種嘧啶核苷衍生物，或其一種水合物或溶劑化物的第二藥物組合物在制備權(quán)利要求8或22的藥物組合物中的應(yīng)用。
全文摘要
一種具有協(xié)同效果的抗腫瘤藥物組合物,含有一種有效量的白介素－12和一種嘧啶核苷衍生物或其已被轉(zhuǎn)化成氟尿嘧啶或其衍生物的一種水合物或溶劑化物,以及一種藥學(xué)上可接受的載體。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1184430SQ96194016
公開日1998年6月10日 申請(qǐng)日期1996年5月15日 優(yōu)先權(quán)日1995年5月26日
發(fā)明者森一茂, 田中裕 申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司