專利名稱：色素性視網(wǎng)膜炎的酶治療法以及試劑盒形式的相關藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及借助酶對色素性視網(wǎng)膜炎的治療以及可用于此治療的試劑盒形式的藥物組合物。
現(xiàn)有技術的描述色素性視網(wǎng)膜炎是一種視網(wǎng)膜疾病，呈多種不同的病理表現(xiàn)當其影響到視網(wǎng)膜的外周區(qū)域時，可導致視野受限并且導致越來越難以適應黑暗和半黑暗，視網(wǎng)膜的外周區(qū)域容納著大部分的視桿細胞，而視桿細胞負責在半黑暗條件下引起可能的視覺以及對旁側區(qū)域中的運動的感知；或者當視錐細胞經(jīng)歷改變時，可導致中心視力的喪失。該病的進展速度因人而異。一般規(guī)律是，色素性視網(wǎng)膜炎在青年期出現(xiàn)，但也常常影響兒童并以潛伏方式作用。
引起此缺陷的原因至今尚不清楚，因此，不存在任何針對患此病病人的治療手段。專家處理時唯一的確定信息是色素性視網(wǎng)膜炎的遺傳來源，即遵循遺傳學家所知的機制，部分是通過遺傳從一代傳給下一代。大部分色素性視網(wǎng)膜炎形式是遺傳性的，迄今為止已經(jīng)確定了三種傳播模式常染色體顯性遺傳、常染色體隱性遺傳和與性別密切相關(X-染色體連鎖)。
該病的主要癥狀是黃昏和夜間失明，即當光照條件差時視覺困難，以及從光線好的環(huán)境到黑暗環(huán)境時或反之亦然的適應問題。這個現(xiàn)象(至少在大部分病例中)是由于在疾病早期發(fā)展階段，侵襲集中在視桿細胞上。其它典型癥狀是對極強光的反應(目眩)，視野的逐漸縮小，其表現(xiàn)形式為感知放在任一側的物體時困難，或者過臺階或其它低障礙物時絆倒，最終完全失明。
該病的進程是極其多變的過程，但總是漸進的并最終導致殘疾。在大部分的病例中，前述癥狀開始加重，視野變得越來越小，最終完全關閉。在那些目眩的人中，其它癥狀傾向于表現(xiàn)不能分辨顏色以及特殊形式的白內(nèi)障。很不幸，在很多病例中，最后的結果是完全失明。
為了診斷該疾病，通常依賴一些檢查，如眼底檢查、視野檢查、視網(wǎng)膜電流圖、熒光血管造影及視力檢查。
-眼底檢查旨在評估視網(wǎng)膜的狀況和查找在視網(wǎng)膜表面是否有典型的色素斑點存在，在該疾病中認為這些斑點呈典型的“成骨細胞樣”外觀。盡管表現(xiàn)相同的癥狀，然而一些罕見形式的色素性視網(wǎng)膜炎不以眼底斑點為特征。
-視野檢查可以評價多個視網(wǎng)膜區(qū)域?qū)獯碳さ拿舾行?。這對客觀記錄患者視覺感知的困難程度是有用的。
-視網(wǎng)膜電流圖(EGR)由記錄視網(wǎng)膜電流活動對特殊光刺激的反應組成，由此可以確切評估兩種不同形式的光感受器(即視錐細胞和視桿細胞)的功能。視網(wǎng)膜電流圖是診斷色素性視網(wǎng)膜炎的非常重要的一項檢查，因為即使在疾病的最初階段，報告跡線也幾乎總是或者很平坦或完全消失。
-熒光血管造影是通過靜脈注射熒光底物，隨后在不同時間對視網(wǎng)膜成像來進行。事實上，熒光底物通過血液循環(huán)到達視網(wǎng)膜，它給動脈、毛細血管和靜脈標上顏色，以使它們及其壁的功能狀態(tài)可被觀察到。
-視力檢查是對視敏清晰度進行評估，由患者在三米的距離讀取大小不同的字母組成。
盡管在大約上世紀中期，色素性視網(wǎng)膜炎已經(jīng)得到鑒定和分類，但不論在可能的治療手段方面還是在同樣重要的了解決定和調(diào)控其進程的原因方面，幾乎沒有獲得具體的進展。目前國際研究最廣泛遵循的幾條線路分別是遺傳學途徑，即尋找某個或某些導致該病的基因，從而通過現(xiàn)代基因工程技術進行干涉；移植途徑，其旨在完善技術，使視網(wǎng)膜組織移植或至少使健康的細胞移植至患病視網(wǎng)膜成為可能；以及免疫學途徑，著手于證明一些理論，這些理論假設該病歸因于免疫系統(tǒng)的某些改變。
本發(fā)明的目的是提供將使色素性視網(wǎng)膜炎得到有效治療的試劑盒形式的藥物組合物。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種治療色素性視網(wǎng)膜炎的方法，此方法將使視敏度逐漸恢復、視野擴大、視像清晰、感知顏色并且最后重新形成正常的視網(wǎng)膜電流圖。
根據(jù)本發(fā)明，通過使用一些特定的酶來實現(xiàn)了這些目的，這些酶摻入試劑盒形式的藥物組合物，以用于以注射至眼球后組織的方法治療色素性視網(wǎng)膜炎，所有這些如權利要求1所述。
更具體地，所用的酶是谷胱甘肽過氧化物酶(下文稱為酶A)，氨酰基脯氨酸二肽酶(下文稱為酶B)，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(下文稱為酶C)，這些酶依據(jù)下文進一步詳述的時間順序和形式給藥。
任選地，治療方法也提供醛糖還原酶(下文稱為酶D)的應用，發(fā)現(xiàn)酶D在病人抱怨視覺模糊時(這種情況發(fā)生在較大部分的病例中)是有用的。
根據(jù)本發(fā)明的治療方法中所用的酶可以以凍干形式在商業(yè)上獲得，并可溶于生理溶液中以使其可用于治療。
每種酶以酶溶液的形式、連續(xù)三天向每只眼睛眼球后注射的方法來給藥，在另外兩個時間重復給藥，每次與上次間隔一個月時間(對于每種酶)。在實踐中，程序如下-在治療開始時，連續(xù)三天將酶A的一個劑量注射到每只眼睛的眼球后組織，在第二和第三個月重復此治療；-在第四、第五和第六個月連續(xù)三天將酶B的一個劑量注射到每只眼睛的眼球后組織；-在第七、第八和第九個月連續(xù)三天將酶C的一個劑量注射到每只眼睛的眼球后組織；-如果需要，然后在接下來的三個月每個月連續(xù)三天用酶D繼續(xù)治療，給藥方式與前述完全一樣。
不同酶用于每次注射(用于每只眼睛)的劑量如下
酶A 0.03-0.05U.I.
酶B 5-7U.I.
酶C 7-9U.I.
酶D 7-9U.I.
不同的酶每次注射的優(yōu)選劑量如下酶A 0.04U.I.
酶B 6.67U.I.
酶C 8.00U.I.
酶D 8.00U.I.
這些劑量對所有的患者保持一致，完全不依賴于類型學的變化。具體地，這些酶溶液以這樣一種方式配制，使得以上所列的劑量可以包含在0.4ml注射劑中。例如，適用于提供0.4ml注射劑量的含有上述優(yōu)選的酶量的酶溶液如下配制酶A含有10U.I.凍干酶的小瓶，用生理溶液加至100ml。
酶B含有1000U.I.凍干酶的小瓶，用生理溶液加至60ml。
酶C含有2000U.I.凍干酶的小瓶，用生理溶液加至100ml。
酶D含有2000U.I.凍干酶的小瓶，用生理溶液加至100ml。
當然，在上述劑量范圍內(nèi)，如果決定改變?nèi)我环N酶的劑量，這些比例應該進行調(diào)整。
這些酶要按上述的順序給藥，而且注射周期必須不間斷地連續(xù)進行。
根據(jù)本發(fā)明的用于治療色素性視網(wǎng)膜炎的試劑盒以適合于給藥的等分部分及相互作用的量包含上述酶a)酶A，在0.4ml生理溶液中含0.03至0.05U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，連續(xù)三天并用于每只眼睛；
b)酶B，從酶A最后一次給藥的下月開始，在0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛；c)酶C，從酶B最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含7至9U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛。
任選地，該試劑盒也可以包含待施用的酶D，從酶C最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛。
具體地，在每個試劑盒中，這些酶以凍干形式存在，其含量足以用于至少一個給藥完整周期，將每種酶分成等分部分，包含足以用于一輪三個月注射循環(huán)(即十八次注射)或用于一天給藥(即兩次注射)的劑量，而且任選地包含適當量的用于組成上述等分部分的生理溶液。具體地，在每個試劑盒中，不同的酶被分成一個或多個等分部分，每個等分部分以上述優(yōu)選的劑量形式包含0.04U.I.至0.72U.I.的酶A，6.67U.I.至120U.I.的酶B，8U.I.至144U.I.的酶C，和可能地，8U.I.至144U.I.的酶D。也可能存在每種0.4ml至7.2ml生理溶液中的三種或更多種的等分部分。
接受根據(jù)本發(fā)明的治療的患者，其視敏度、視野、顏色感知及視像清晰(清晰度)得到逐步改善。他們的視網(wǎng)膜電流圖一點點好轉，最終基本得到恢復。雖然時間周期不同，但在所有的患者中，給藥治療都得到了積極結果。5-8年后的復查表明，得到的改善是持久的，而且沒有產(chǎn)生任何形式的副作用。
一些實驗數(shù)據(jù)證實了一種假說，即色素性視網(wǎng)膜炎可能起因于改變視網(wǎng)膜代謝的某種酶缺失，這種代謝改變不僅改變了視覺過程，而且促使色素堆積，色素堆積是該疾病的典型特征。
申請者之一在兔子(新西蘭/Fulvo di Borgogna)上進行的研究顯示，一些酶的完全抑制引起視網(wǎng)膜電流圖的改變，去極化波減少直至消失，并顯示在眼球后施用谷胱甘肽過氧化物酶(酶A)和氨?；彼岫拿?酶B)后正常跡線的恢復。其后，通過與沒有患色素性視網(wǎng)膜炎、表面上健康狀況良好的受試者的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶之紅細胞水平相比較，證明了患有色素性視網(wǎng)膜炎的病人，其葡萄糖-6-磷酸脫氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶的紅細胞水平降低，兩組之間在性別和年齡方面相似。
權利要求
1.一種用于治療色素性視網(wǎng)膜炎的藥物試劑盒，包含谷胱甘肽過氧化物酶(酶A)，氨?；彼岫拿?酶B)，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(酶C)，以及任選地，醛糖還原酶(酶D)，以適于給藥的等分部分及相互作用的量存在a)酶A，以0.4ml生理溶液中含0.03至0.05U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛；b)酶B，從酶A最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.L.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛；c)酶C，從酶B最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含7至9U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛；d)酶D，從酶C最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛。
2.根據(jù)權利要求1的試劑盒，其中酶A的濃度是0.4ml生理溶液中含0.04U.I.，酶B的濃度是0.4ml生理溶液中含6.67U.I.，酶C的濃度是0.4ml生理溶液中含8U.I.，任選的酶D的濃度等于0.4ml生理溶液中含8U.I.。
3.根據(jù)權利要求1或權利要求2的試劑盒，其中所述試劑盒包含凍干形式的所述酶，其含量足以用于至少一組從a)到c)和任選地d)的給藥，所述酶分裝入等分部分，對每一種酶而言，等分部分包含足夠組成所述等分部分的酶量。
4.根據(jù)權利要求1-3的任意一項的試劑盒，其中所述試劑盒包含凍干形式的分裝入一個或多個等分部分的所述酶，每個中含有0.04U.I.至0.72U.I.的酶A，0.67至120U.I.的酶B，8至144U.I.的酶C，以及任選地，8至144U.I.的酶D，并且，任選地，包含每個為0.4ml至7.2ml生理溶液的三個或更多個等分部分。
5.谷胱甘肽過氧化物酶(酶A)、氨?；彼岫拿?酶B)、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(酶C)以及任選地，醛糖還原酶(酶D)的用途，用于制備以注射至眼球后組織的方式治療色素性視網(wǎng)膜炎的試劑盒形式的藥物組合物，所述試劑盒含有等分部分形式的、適于給藥的相互作用的量的所述酶a)酶A，以0.4ml生理溶液中含0.03至0.05U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛；b)酶B，從酶A最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛；c)酶C，從酶B最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含7至9U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛；d)酶D，從酶C最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛。
6.根據(jù)權利要求6的酶的用途，其中酶A的濃度是0.4ml生理溶液中含0.04U.I.，酶B的濃度是0.4ml生理溶液中含6.67U.I.，酶C的濃度是0.4ml生理溶液中含8U.I.，任選的酶D的濃度等于0.4ml生理溶液中含8U.I.。
7.根據(jù)權利要求5或6的酶的用途，其中所述試劑盒包含凍干形式的所述酶，其量足以用于至少一組從a)到c)和任選地d)的給藥，所述酶分裝入等分部分，對每一種酶而言，等分部分包含足夠組成所述等分部分的酶量。
8.根據(jù)前述權利要求的任意一項的酶的用途，其中所述試劑盒包含以凍干形式分裝入一個或多個等分部分的所述酶，每個含有0.04U.I.至0.72U.I.的酶A，0.67至120U.I.的酶B，8至144U.I.的酶C，以及任選地，8至144U.I.的酶D，并且，任選地，包含每個為0.4ml至7.2ml生理溶液的三個或更多個等分部分。
9.一種以注射至眼球后組織的方式實現(xiàn)如下物質(zhì)給藥治療色素性視網(wǎng)膜炎的方法a)酶A，以0.4ml生理溶液中含0.03至0.05U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛；b)酶B，從酶A最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛；c)酶C，從酶B最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含7至9U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛；d)任選地，酶D，從酶C最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個月并用于每只眼睛。
10.根據(jù)權利要求9的方法，其中酶A的濃度是0.4ml生理溶液中含0.04U.I.，酶B的濃度是0.4ml生理溶液中含有6.67U.I.，酶C的濃度是0.4ml生理溶液中含8U.I.，任選的酶D的濃度等于0.4ml生理溶液中含8U.I.。
全文摘要
一種用于治療色素性視網(wǎng)膜炎的試劑盒，包含谷胱甘肽過氧化物酶，氨?；彼岫拿?，葡萄糖－6－磷酸脫氫酶，以及任選地醛糖還原酶，其以適合于按預定時間順序施用酶的等分部分及相互作用的量存在。
文檔編號A61K38/48GK1671411SQ02829703
公開日2005年9月21日 申請日期2002年10月1日 優(yōu)先權日2002年10月1日
發(fā)明者保拉·阿曼納蒂, 羅伯托·焦爾達尼 申請人:保拉·阿曼納蒂, 羅伯托·焦爾達尼