專利名稱：一種治療宮頸糜爛的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥創(chuàng)新藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種治療宮頸糜爛的藥物。
背景技術(shù)：
宮頸糜爛是一種慢性炎癥，即慢性宮頸炎的一種最常見(jiàn)類型。是由于炎癥刺激，宮頸表面的被覆上皮細(xì)胞脫落，而下方的柱狀上皮細(xì)胞向外突出，代替了脫落的被覆上皮，因柱狀上皮的毛細(xì)血管顯露，使炎癥區(qū)呈鮮紅色，故稱為宮頸糜爛。宮頸糜爛是婦女的常見(jiàn)病，多發(fā)病，多發(fā)生在已婚女性。
流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，農(nóng)村婦女的宮頸糜爛發(fā)病率更高。隨著現(xiàn)在人們生活環(huán)境和習(xí)慣的改變，宮頸糜爛在婦女中的發(fā)生率呈上升趨勢(shì)。有統(tǒng)計(jì)資料顯示，宮頸糜爛為35歲到50歲女性的常見(jiàn)婦科疾病，然而近年來(lái)的臨床統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，宮頸糜爛低齡化的現(xiàn)象日益嚴(yán)重，年輕化趨勢(shì)明顯。1996年北京航空航天大學(xué)醫(yī)院對(duì)婦女婦科普查結(jié)果顯示，婦科常見(jiàn)病患病率為50. 24%，其中，宮頸糜爛的患病率為39. 54%，位居?jì)D科疾病患病率之首，患病年齡統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，30 39歲婦女宮頸糜爛的患病率最高，為82. 73% ；2001年對(duì)江蘇省丹陽(yáng)市已婚婦女婦科普查結(jié)果顯示，婦女常見(jiàn)婦科病發(fā)病率前3位分別是宮頸糜爛22. 40%，子宮肌瘤2. 49%，乳房腫物2. 5 %，其中，宮頸糜爛21 25歲患病率最高，為33. 58% ；2002年以來(lái)，對(duì)山東省濱州市已婚育齡婦女健康檢查中，婦科疾病的患病率為52.2%,宮頸糜爛的發(fā)病率占婦科疾病總患病率的27%，其中宮頸糜爛I度占75. 5%，II度占 16. 7%, III 度占 I. 5%o目前，臨床用于治療婦科炎癥疾病的藥物品種較多，其中，我國(guó)傳統(tǒng)中成藥品種占據(jù)了 71%的市場(chǎng)份額，而化學(xué)藥物制劑僅占29%，然而臨床用于治療宮頸糜爛的產(chǎn)品還不足20個(gè)，其中部分散、膏、栓等傳統(tǒng)中藥制劑臨床已無(wú)使用。我國(guó)臨床用于治療宮頸糜爛的藥物主要有(I)消糜栓具有抗菌消炎，促進(jìn)炎癥吸收，創(chuàng)面愈合等作用，治療宮頸糜爛具有一定療效，臨床研究結(jié)果表明，其治愈率為60. I %。(2)愛(ài)寶療用于治療陰道和宮頸炎癥的進(jìn)口產(chǎn)品，有濃縮液和栓劑兩種制劑，其主要成分為聚甲酚磺醛，做為化學(xué)藥物，臨床應(yīng)用過(guò)程中并未顯示出顯著的治療優(yōu)勢(shì)，有研究結(jié)果表明，其治療輕度宮頸糜爛的治愈率為87. 3%，且I個(gè)療程的治愈率低，需堅(jiān)持2 3個(gè)療程，同時(shí)，愛(ài)寶療易造成藥物殘留滋生細(xì)菌，引發(fā)盆腔嚴(yán)等疾病，產(chǎn)品自身的不足必將對(duì)產(chǎn)品競(jìng)爭(zhēng)力帶來(lái)嚴(yán)重影響。(3)復(fù)方莪術(shù)油栓其主要成分為硝酸益康唑和莪術(shù)油，主治陰道炎及宮頸糜爛，具有抑菌、修復(fù)病變組織、促進(jìn)糜爛表面愈合的作用?！吨兴幮滤幣R床研究指導(dǎo)原則(第一輯)》中將宮頸糜爛按照中醫(yī)辯證分為濕熱下注證、脾腎虧損證、陰虛火旺證、脾虛帶下證、血瘀帶下證?！吨袊?guó)藥典》記載，蛇床子具有溫腎壯陽(yáng)，燥濕，祛風(fēng)，殺蟲(chóng)的功能。主要用于陽(yáng)痿，宮冷，寒濕帶下，濕痹腰痛；外治外陰濕疹，婦人陰癢，滴蟲(chóng)性陰道炎。我們?cè)谥嗅t(yī)藥理論的指導(dǎo)下，結(jié)合現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)，以藥效學(xué)評(píng)價(jià)為指標(biāo)，最終選用由蛇床子提取得到的總香豆素有效部位作為治療宮頸糜爛的藥物，應(yīng)用先進(jìn)科技手段，制成符合新藥要求的現(xiàn)代中成藥。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種治療宮頸糜爛的藥物。目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，為廣大患者提供更好的用藥種類，以方便患者治療和康復(fù)。本發(fā)明的目地是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的I、一種治療宮頸糜爛的藥物，它是由以下重量配比的主藥和輔料制成的
蛇床子總香豆素提取物 240g朽1檬酸165g
聚乙二醇600025g氯化鈉15g
碳酸氫鈉195g羧甲基淀粉鈉 45g
微粉娃膠15g。2、其制備方法，包括以下步驟(I)取蛇床子藥材粗粉10kg，加80%乙醇回流提取3次，每次10倍量，每次I小時(shí)，合并藥液，回收乙醇并濃縮至在70°C下相對(duì)密度I. 15 I. 20的浸膏；(2)上述浸膏加5倍浸膏量(g/ml)的純化水，攪拌均勻，靜置3小時(shí)，濾過(guò)，沉淀加
I% NaOH溶液50°C使溶解，趁熱濾過(guò)，收集濾液，放冷；(3)堿水液加入10%的鹽酸溶液，邊加邊不斷攪拌，調(diào)pH至4左右，靜置24小時(shí)(避光)，濾過(guò)，沉淀物以純化水洗至中性，收集沉淀物，50°C干燥，得蛇床子總香豆素提取物；(4)取蛇床子總香豆素提取物240g、檸檬酸165g、聚乙二醇6000 25g和氯化鈉15g，混勻，過(guò)50目篩，備用；另取碳酸氫鈉195g和羧甲基淀粉鈉45g，混勻，過(guò)50目篩，將上述兩種粉末合并，加入微粉硅膠15g，混勻，壓制成1000片，即得。本發(fā)明藥物是在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，針對(duì)宮頸糜爛的主要病機(jī)，結(jié)合現(xiàn)代藥理研究成果，將蛇床子創(chuàng)新性的應(yīng)用于治療宮頸糜爛，開(kāi)發(fā)成為現(xiàn)代純中藥有效部位新藥，具有燥濕消炎，祛腐生肌的功效，主要用于濕熱下注所致的帶下病，癥見(jiàn)帶下量多，色黃或白，或呈膿性，腰腹墜脹，或小便淋漓澀痛，或陰癢，口苦咽干，舌紅，苔黃或膩，脈滑或弦滑；宮頸糜爛見(jiàn)上述證候者。并根據(jù)臨床應(yīng)用及藥效學(xué)研究，確定本品用法用量確定為外用，置陰道深部，每晚I片，或遵醫(yī)囑，相當(dāng)于日外用生藥量log。本品為現(xiàn)代純中藥有效部位新藥，與已上市用于治療宮頸糜爛的藥品相比，具有以下優(yōu)勢(shì)一、技術(shù)含量高，工藝穩(wěn)定，質(zhì)量可控。由于我國(guó)傳統(tǒng)中藥研究基礎(chǔ)薄弱，中藥材成分復(fù)雜，且多以中醫(yī)的君、臣、佐、使配伍理論，選用多味，甚至數(shù)十味中藥材配伍制成方劑，成分及機(jī)理不明，致使我國(guó)傳統(tǒng)中醫(yī)藥在技術(shù)、質(zhì)量等方面一直處于低端、被動(dòng)的發(fā)展境地。目前，我國(guó)已上市的用于治療宮頸糜爛的藥品以外用栓劑為主，且均為中藥復(fù)方制劑，質(zhì)黑量大，與之相比，本項(xiàng)目產(chǎn)品采用現(xiàn)代制備工藝，充分提取分離藥材有效成分，其有效成分含量高，為現(xiàn)代中藥研究的重要開(kāi)發(fā)成果。本項(xiàng)目研究是在我國(guó)傳統(tǒng)中醫(yī)理論與現(xiàn)代中藥研究基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代藥物研究體系與方法，對(duì)藥材有效部位進(jìn)行提取分離，并采用藥效篩選實(shí)驗(yàn)，確定其有效成分，在此基礎(chǔ)上，以工藝簡(jiǎn)單、安全、穩(wěn)定為目的，最大限度的提取藥材的有效成分，經(jīng)大量的工藝實(shí)驗(yàn)研究，確定了最佳提取、分離、純化方法，為確定的穩(wěn)定的技術(shù)參數(shù)；在不同產(chǎn)地藥材質(zhì)量差異較大的情況下，為確保產(chǎn)品質(zhì)量，從藥材采購(gòu)、中間體制備到成品檢驗(yàn)，采用國(guó)際公認(rèn)的指紋圖譜控制技術(shù)，為產(chǎn)品生產(chǎn)的全過(guò)程建立了完善的質(zhì)量控制體系。
二、療效確切，安全無(wú)任何毒副作用。為探討本品的治療機(jī)理與藥效，我們選用不同的動(dòng)物模型進(jìn)行了藥效學(xué)試驗(yàn)研究。實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，本品能夠抑制由角叉菜膠引起的大鼠足跖腫脹，抑制由二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹，能夠提高豚鼠的致癢閾；能夠減輕苯酚膠漿所致宮頸組織病理性損傷，減輕白細(xì)胞浸潤(rùn)，鱗狀上皮增生、水腫、潰瘍、變性壞死、脫落，柱狀上皮鱗狀化生等，并可顯著抑制局部宮頸組織中PGE2的含量；體外抑菌實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，本品對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌有一定的抑制作用；本品可明顯降低大腸桿菌所致宮頸炎大鼠組織病理性損傷，顯著降低宮頸組織中IL-2的含量，可改善和減輕癥狀和異常體征，通過(guò)以上急性炎癥、慢性炎癥、止癢實(shí)驗(yàn)研究表明，本品具有較好的抗炎、抑菌、止癢作用。陰道刺激實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，本品對(duì)陰道粘膜無(wú)刺激及致炎作用；經(jīng)急性毒性和長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)研究結(jié)果表明，本品無(wú)任何毒副作用，臨床應(yīng)用非常安全。三、泡騰式崩解，生物利用度高。本品采用現(xiàn)代制劑方法，經(jīng)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用適宜的輔料，加工制成適于臨床應(yīng)用的現(xiàn)代藥物劑型陰道泡騰片。陰道泡騰片在微量生理性分泌物潤(rùn)濕條件下，發(fā)生酸堿中合反應(yīng)，緩緩泡騰崩解并產(chǎn)生細(xì)而持久的氣泡，可有效擴(kuò)大藥物與病變部位的接觸面積，提高藥效。陰道泡騰片與婦科常用栓劑相比，具有溶解速度快，起效快，吸收完全，不傷粘膜，使用方便，不污染衣物等特點(diǎn)，是婦科外用藥物中極具市場(chǎng)開(kāi)發(fā)前景的現(xiàn)代藥物劑型。四、工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，適于規(guī)?；a(chǎn)。本項(xiàng)目處方所用原料為臨床常用中藥材，國(guó)內(nèi)每年均有大量產(chǎn)出，且價(jià)廉易得；本品為陰道泡騰片，且生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，國(guó)內(nèi)擁有片劑生產(chǎn)線的中藥制藥企業(yè)均可生產(chǎn)，且無(wú)需購(gòu)置新的生產(chǎn)設(shè)備。綜上所述，本品具有技術(shù)含量高，生物利用度高，療效確切，安全無(wú)毒副作用，且工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低等特點(diǎn)，具有顯著的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展優(yōu)勢(shì)。為了驗(yàn)證本發(fā)明所具有的有益效果，申請(qǐng)人進(jìn)行了一系列試驗(yàn)研究，具體如下一、藥效學(xué)試驗(yàn)研究為驗(yàn)證本品相關(guān)藥理指標(biāo)的治療作用，我們從以下幾方面建立動(dòng)物模型，并以阿司匹林、地塞米松、潔爾陰泡騰片等作為陽(yáng)性對(duì)照藥觀察藥效作用。I、抗炎作用實(shí)驗(yàn)采用大鼠角足跖腫實(shí)驗(yàn)，本品在中、高的劑量下，對(duì)角叉菜膠所引起的大鼠足跖腫脹有明顯的抑制作用，與空白對(duì)照組比較，兩組差別有顯著意義(P < O. 05)。采用抑制肉芽腫的形成實(shí)驗(yàn)，采用棉球植入法，產(chǎn)生與臨床某些炎癥后期病理變化相似的肉芽增生，來(lái)評(píng)定本品的抗增生的作用。結(jié)果表明高、中、低劑量組對(duì)肉芽增生均具有抑制作用，肉芽腫的濕重與空白組比較差別有顯著意義(P <0.05)，且中劑量組的抑制作用，好于陽(yáng)性對(duì)照組潔爾陰泡騰片組。采用苯酚膠漿致大鼠宮頸糜爛模型及大鼠宮頸PGE2含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)，用苯酚膠漿制作SD大鼠宮頸糜爛模型，取陰道、子宮進(jìn)行肉眼觀察。肉眼觀察，模型組陰道和宮頸組織充血、水腫明顯，顯微鏡下觀察模型組陰道、宮頸黏膜下可見(jiàn)大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，小血管擴(kuò)張、充血、水腫，少數(shù)已經(jīng)出現(xiàn)黏膜潰瘍，其鱗狀上皮增厚，鱗柱交界處可見(jiàn)柱狀上皮鱗狀化生，給藥組以上情況有明顯好轉(zhuǎn)。在苯酚致的大鼠宮頸炎模型的基礎(chǔ)上，對(duì)模型動(dòng)物宮頸組織中PGE2的含量進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，苯酚致的宮頸炎模型大鼠宮頸組織中PGE2的含量異常升高，而本品可抑制PGE2的含量升高，從而減輕炎癥反應(yīng)的發(fā)生。說(shuō)明本品在治療宮頸炎的作用中，降低組織局部PGE2的含量可能是其作用途徑之一。2、抑菌實(shí)驗(yàn)研究體外抗菌實(shí)驗(yàn)，本品大劑量對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌有一定的抑制作用，雖然無(wú)法與陽(yáng)性藥相比，但其抑菌作用隨著劑量增大而顯示出明顯的增強(qiáng)作用。大腸桿菌致宮頸糜爛模型及大鼠宮頸IL-2含量的測(cè)定，大腸桿菌模型與苯酚模型病理改變有所不同，前者以感染潰瘍?yōu)橹?，后者以水腫為主。本品高、中、低劑量組均可明顯降低大腸桿菌模型大鼠組織病理性損害，同時(shí)各劑量組均可顯著降低升高的宮頸組織中 IL-2含量(全部P < O. 05)，說(shuō)明降低IL-2的含量可能是其作用途徑之一。3、豚鼠組胺致癢反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)本品三個(gè)劑量組與空白對(duì)照組比較，差別有非常顯著意義(P <0.05)，提示本藥具有止癢的作用。綜上所述，可以初步判斷本品具有抗炎、抑菌、止癢等功效，對(duì)陰道沒(méi)有刺激作用，對(duì)宮頸糜爛具有一定的治療作用，適用于濕熱下注所致的帶下病，癥見(jiàn)帶下量多，色黃或白，或呈膿性，腰腹墜脹，或小便淋漓澀痛，或陰癢，口苦咽干，舌紅，苔黃或膩，脈滑或弦滑；宮頸糜爛見(jiàn)上述證候者。二、一般藥理試驗(yàn)研究本實(shí)驗(yàn)探討了蛇床子陰道泡騰片原料藥對(duì)大鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響以及對(duì)大鼠心血管系統(tǒng)及呼吸系統(tǒng)的影響。結(jié)果表明以陰道泡騰片原料藥陰道給藥，小劑量組O. 075g原料藥/kg · d(相當(dāng)于3g生藥/kg · d),中劑量組O. 15g原料藥/kg · d(相當(dāng)于6g生藥/kg · d),大劑量組O. 3g原料藥/kg · d(相當(dāng)于12g生藥/kg · d),其中小劑量組相當(dāng)于人臨床有效劑量。3個(gè)劑量組的自主活動(dòng)的頻率及強(qiáng)度，與對(duì)照組間差別無(wú)顯著性意義(P>O. 05)。對(duì)麻醉大鼠的收縮壓、舒張壓、呼吸頻率和幅度、心率和心律、心電圖的P、QRS、T波、ST和P-R間期無(wú)明顯影響(P > O. 05)。蛇床子陰道泡騰片原料藥的一般藥理學(xué)研究表明它對(duì)血壓、呼吸、心率和心電圖無(wú)明顯影響，具有輕微的鎮(zhèn)靜作用，但對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)無(wú)明顯其他影響。三、毒理學(xué)試驗(yàn)研究(一 )急性毒性試驗(yàn)研究我們本次急性毒性試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用成年ICR小鼠和大耳白兔兩種動(dòng)物進(jìn)行。小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)，受試藥物為陰道泡騰片成品，加O. 5% CMC溶液配制成不同濃度混懸液，分別進(jìn)行小鼠口服LD50測(cè)定和小鼠口服最大耐受量(MTD)測(cè)定。未能測(cè)出小鼠LD50?？诜﨧TD測(cè)定結(jié)果顯示，每只一次性灌胃本品20g/kg。灌藥后I 2h小鼠倦縮少動(dòng)，基本不攝食、水，但呼吸等體征正常；2h后迅速恢復(fù)，活動(dòng)、攝食-水正常，14日內(nèi)沒(méi)有發(fā)生死亡，本品小鼠灌胃的最大耐受量為20g/kg相當(dāng)于臨床人用量的1600倍。大耳白兔急性毒性實(shí)驗(yàn)，受試藥物為陰道泡騰片總香豆素中間體，分別進(jìn)行LD50測(cè)定和陰道最大耐受量測(cè)定。未能測(cè)出大耳白兔的LD50。陰道MTD測(cè)定結(jié)果顯示，每次給本品總香豆素中間體lg，一天兩次。給藥后I 2h大耳白兔倦縮少動(dòng)，扭體，基本不攝食、水，但呼吸等體征正常；4h后逐漸恢復(fù)，活動(dòng)、攝食-水正常，14日內(nèi)沒(méi)有發(fā)生死亡，本品大耳白兔陰道的每天最大耐受量為O. 4g/kg相當(dāng)于臨床人用量的32倍。綜合兩項(xiàng)急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，顯示本品臨床使用應(yīng)非常安全。試驗(yàn)結(jié)果表明大白兔陰道給原料藥，分兩次，間隔6小時(shí)，每次給原料藥O. 2g/kg, I天給藥劑量為O. 4g原料藥/kg(相當(dāng)于16g生藥/kg · d),為人日用劑量O. 0125g原料藥/kg的32倍。給藥后觀察動(dòng)物外觀、四肢活動(dòng)、攝食、飲水、排泄未見(jiàn)異常。連續(xù)觀察14天，結(jié)果全部健康存活，體重增加，與空白對(duì)照組比較差異不顯著，肉眼觀察未見(jiàn)明顯毒性反應(yīng)，故認(rèn)為，該藥陰道給藥，臨床用藥相當(dāng)安全。
( 二 )長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)研究根據(jù)《藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》和《中藥、天然藥物長(zhǎng)期毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》，大鼠陰道給藥，給予陰道泡騰片3個(gè)月，并經(jīng)I個(gè)月的恢復(fù)期進(jìn)行大鼠重復(fù)給藥的毒性研究。試驗(yàn)設(shè)本品3個(gè)給藥劑量組和一個(gè)空白對(duì)照組，陰道泡騰片原料藥低劑量組O. 125g原料藥/kg · d(相當(dāng)于5g生藥/kg · d),中劑量組O. 25g原料藥/kg · d(相當(dāng)于IOg生藥/kg · d)，高劑量組O. 5g原料藥/kg · d(相當(dāng)于20g生藥/kg · d),分別為人臨床劑量O. 0125原料藥g/kg · d(相當(dāng)于O. 5g生藥/kg · d)的10、20、40倍，每組18只雌性大鼠，給藥體積按lml/lKg體重給大鼠分別陰道給藥。試驗(yàn)采用連續(xù)給藥6天、休息I天的方式進(jìn)行；每周測(cè)定體重I次，以測(cè)定的體重調(diào)整給藥體積；每天2次觀察動(dòng)物的一般狀態(tài)；每周測(cè)定I次動(dòng)物的7天進(jìn)食總量。在給藥3個(gè)月后，各劑量組分別取10只動(dòng)物；恢復(fù)期結(jié)束取全部劑量組剩余動(dòng)物，分別進(jìn)行以下檢查禁食14小時(shí)，腹腔注射4%水合氯醛O. 8ml/100g麻醉，從腹腔靜脈采血進(jìn)行血液學(xué)和血清生化學(xué)檢查,動(dòng)物剖檢的肉眼檢查。對(duì)測(cè)得的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，試驗(yàn)結(jié)果如下對(duì)一般活動(dòng)狀況及死亡的影響試驗(yàn)期間，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)明顯的與本品相關(guān)的動(dòng)物異?；顒?dòng)，所有劑量組動(dòng)物的飲食、飲水、糞便等均正常。在全部試驗(yàn)周期中未發(fā)生因給予本品引起大鼠瀕死和死亡的毒性反應(yīng)。對(duì)動(dòng)物攝食量的影響試驗(yàn)期間，沒(méi)有引起與本品相關(guān)的動(dòng)物進(jìn)食量的明顯改變。對(duì)動(dòng)物的體重增長(zhǎng)的影響與空白對(duì)照組比較，其它組別動(dòng)物的體重增長(zhǎng)未見(jiàn)異
堂
巾O對(duì)血液生化指標(biāo)的影響經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析表明大鼠陰道給藥本品3個(gè)月，雌鼠中劑量組血紅蛋白(HGB)含量降低，與空白對(duì)照組比較差異有顯著性意義(P <0.05)。在恢復(fù)期后上述指標(biāo)的改變均恢復(fù)正常。大鼠陰道給藥本品3個(gè)月及恢復(fù)期I個(gè)月對(duì)血液學(xué)指標(biāo)中紅細(xì)胞數(shù)(RBC)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白(MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)、血小板(PLT)數(shù)、血小板壓積(PCT)、血小板分布寬度(PDW)、平均血小板體積(MPV)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞分類(淋巴細(xì)胞(LY))、單核細(xì)胞(MO)、中性粒細(xì)胞(GR)、凝血酶原時(shí)間和活化部分凝血激酶時(shí)間未引起毒理學(xué)意義上的顯著性改變。
對(duì)血清生化學(xué)的影響經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析表明大鼠陰道給藥本品3個(gè)月及恢復(fù)期I個(gè)月對(duì)動(dòng)物的血清生化學(xué)指標(biāo)包括天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(ALT)、尿素(Urea)、總膽固醇(T-CHO)、葡萄糖(GLU)、總膽紅素(T-BIL)、肌酐(Crea)、堿性磷酸酶(ALP)、r-谷氨?；D(zhuǎn)移酶(r-GT)、甘油三酯(TG)、肌酸激酶(CK)、總蛋白質(zhì)(TP)和白蛋白(ALB)。其中高劑量組在給藥3個(gè)月后肌酐(Crea)r-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶(r_GT)有所降低，與空白組比較有顯著差異(P < O. 05)，但停藥I個(gè)月后二者指標(biāo)恢復(fù)正常，與空白組比較未見(jiàn)顯著差異。其余指標(biāo)均沒(méi)有引起毒理學(xué)意義上的顯著性改變。對(duì)臟器重量的影響在給藥3個(gè)月和恢復(fù)期I個(gè)月結(jié)束時(shí)，分別解剖預(yù)定剖殺的全部劑量組的動(dòng)物的心臟、肝臟、脾臟、肺、腎臟、腦、胸腺、腎上腺、子宮、卵巢進(jìn)行了臟器重量稱量測(cè)定，并根據(jù)體重進(jìn)行了相對(duì)臟器重量的轉(zhuǎn)化計(jì)算。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析表明，大鼠陰道給藥本品各劑量均未引起相關(guān)的臟器重量改變。病理解剖肉眼觀察給藥3個(gè)月時(shí)剖檢各組10只動(dòng)物，恢復(fù)期結(jié)束時(shí)剖檢全部劑量組的剩余動(dòng)物，肉眼觀察解剖動(dòng)物的心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腎上腺、胸腺、主動(dòng)脈、 腦(大腦、小腦、腦干)、胰腺、胃、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸、直腸、淋巴結(jié)、膀胱、子宮、卵巢、脊髓、骨髓、垂體、甲狀腺、唾液腺、氣管、食管等，未見(jiàn)與本品毒性作用相關(guān)的病理學(xué)變化。結(jié)論分別以O(shè). 125原料藥g/kg、0. 25原料藥g/kg、0. 5g原料藥/kg (為臨床擬用劑量10倍、20倍和40倍)的劑量，大鼠陰道給藥本品3個(gè)月，在各劑量下，均未引起雌性大鼠各器官重量系數(shù)的增加，在給藥后3個(gè)月后及停藥I個(gè)月未發(fā)現(xiàn)其它明顯的毒副反應(yīng)。同時(shí)高劑量組在給藥3個(gè)月后肌酐(Crea)r-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶(r_GT)有所降低，與空白組比較有顯著差異(P < O. 05)，但停藥I個(gè)月后二者指標(biāo)恢復(fù)正常，與空白組比較未見(jiàn)顯著差異。其余指標(biāo)均沒(méi)有引起毒理學(xué)意義上的顯著性改變。因此在本試驗(yàn)條件下，本品的無(wú)毒劑量為O. 5g原料藥/kg(相當(dāng)于臨床擬定人用劑量的40倍)。以下通過(guò)實(shí)驗(yàn)例形式的具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。
具體實(shí)施例方式實(shí)驗(yàn)例I藥材提取工藝考察I. I提取溶劑考察色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(55 45)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為310nm ;柱溫為25°C ;流速為lml/min。對(duì)照品溶液的制備取蛇床子素適量，精密稱定，加乙醇制成每Iml含100 μ g的溶液，即得。供試品溶液的制備取蛇床子粉末(過(guò)三號(hào)篩)約100g，三份，精密稱定，置圓底燒瓶中，分別加入乙醇、水、乙酸乙酯10倍量，回流提取三次，每次I小時(shí)，合并濾液，減壓回收溶劑，低溫干燥。取適量干膏，用無(wú)水乙醇溶解至IOml容量瓶中并定容，搖勻，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和各供試品溶液，注入液相色譜儀中，測(cè)定即得。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表I。表I提取溶劑考察結(jié)果
蛇床子量( g)溶劑種類蛇床子素含量(％)
100.05乙醇I. 7
100.11水0.2
100. 37乙酸乙酯0.9試驗(yàn)結(jié)果表明不同溶劑對(duì)蛇床子素的提取能力從大到小依次為乙醇>乙酸乙酯>水，故選用乙醇為提取溶劑。I. 2提取方法考察色譜條件、對(duì)照品溶液的制備、測(cè)定方法同上。供試品溶液的制備取蛇床子粉末(過(guò)三號(hào)篩)約100g，精密稱定，置圓底燒瓶中，加入10倍量無(wú)水乙醇，回流提取3次，每次I小時(shí)。合并濾液，減壓回收溶劑，低溫干燥。另取蛇床子粉末(過(guò)三號(hào)篩)約100g，精密稱定，置適當(dāng)容器中，加入I倍量的無(wú)水乙醇，拌勻，密閉放置I小時(shí)。將其裝入滲漉筒中，加入10倍量的溶劑，浸潰24小時(shí)。然后用20倍量的溶劑滲漉提取，流速為lml/min，收集滲漉液，其他操作同上。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。表2提取方法考察結(jié)果蛇床子質(zhì)量(g) 提取方法蛇床子素含量)100. 12滲漉I. I100. 98回流I. 8試驗(yàn)結(jié)果表明回流提取對(duì)蛇床子素的提取率優(yōu)于滲漉提取，所以選擇回流提取。I. 3乙醇濃度考察色譜條件、對(duì)照品溶液的制備、測(cè)定方法同上。供試品溶液的制備取蛇床子粉末(過(guò)三號(hào)篩)約100g，精密稱定，置圓底燒瓶中，分別加入無(wú)水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇10倍量，加熱回流提取3次，每次I小時(shí)，合并濾液，其他操作同上。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表3。表3乙醇濃度考察結(jié)果
蛇床子質(zhì)量(g)乙醇濃度(％)蛇床子素含量(％)
100.23無(wú)水乙醇1.6
100.0895% 乙醇1.8
100.8680% 乙醇1.8
100.4770% 乙醇1.3試驗(yàn)結(jié)果表明不同濃度的乙醇對(duì)蛇床子素的提取能力依次為95%乙醇=80%乙醇 >無(wú)水乙醇> 70 %乙醇，鑒于95 %乙醇與80 %乙醇沒(méi)有太大的差別，所以選擇80 %乙醇為提取溶劑。I. 4提取條件的優(yōu)化稱取藥材粉末約lOOOg，共9份，按照下表的因素水平設(shè)計(jì)進(jìn)行正交試驗(yàn)，提取溶液濾過(guò)，收集濾液，減壓回收溶劑并干燥。按藥材含量測(cè)定方法測(cè)定干膏中蛇床子素含量。表4正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表
權(quán)利要求
1.一種治療宮頸糜爛的藥物，其特征在于它是由以下重量配比的主藥和輔料制成的蛇床子總香豆素提取物 240g朽1檬酸165g聚乙二醇600025g氯化鈉15g碳酸氫鈉195g羧甲基淀粉鈉 45g 微粉娃膠15g。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種治療宮頸糜爛的藥物，其蛇床子總香豆素提取物的制備工藝，包括以下步驟； (1)取蛇床子藥材粗粉10kg，加80%乙醇回流提取3次，每次10倍量，每次I小時(shí)，合并藥液，回收乙醇并濃縮至在70°C下相對(duì)密度I. 15 I. 20的浸膏； (2)上述浸膏加5倍浸膏量(g/ml)的純化水，攪拌均勻，靜置3小時(shí)，濾過(guò)，沉淀加1%NaOH溶液50°C使溶解，趁熱濾過(guò)，收集濾液，放冷； (3)堿水液加入10%的鹽酸溶液，邊加邊不斷攪拌，調(diào)pH至4左右，靜置24小時(shí)(避光)，濾過(guò)，沉淀物以純化水洗至中性，收集沉淀物，50°C干燥，即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種治療宮頸糜爛的藥物，其制劑成型工藝為 取蛇床子總香豆素提取物240g、檸檬酸165g、聚乙二醇6000 25g和氯化鈉15g，混勻，過(guò)50目篩，備用；另取碳酸氫鈉195g和羧甲基淀粉鈉45g，混勻，過(guò)50目篩，將上述兩種粉末合并，加入微粉硅膠15g，混勻，壓制成1000片，即得。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種治療盆腔炎中藥有效部位創(chuàng)新藥物，它的功能主治是具有燥濕消炎，祛腐生肌的功效，主要用于濕熱下注所致的帶下病，癥見(jiàn)帶下量多，色黃或白，或呈膿性，腰腹墜脹，或小便淋漓澀痛，或陰癢，口苦咽干，舌紅，苔黃或膩，脈滑或弦滑；宮頸糜爛見(jiàn)上述證候者。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療宮頸糜爛的藥物，屬于中藥創(chuàng)新藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域。本品是以我國(guó)傳統(tǒng)中藥材蛇床子為原料，經(jīng)醇提、濃縮、酸堿純化等工藝提取得到的有效部位總香豆素，采用現(xiàn)代制劑技術(shù)加工制成的陰道泡騰片。由于其崩解產(chǎn)生的大量泡沫增加了藥物與病變部位的直接接觸，更好地發(fā)揮其療效作用，適合用于陰道疾病的防治用藥，并且具有崩解快速、起效迅速，生物利用度高，并且保存和攜帶方便。本發(fā)明藥物具有燥濕消炎，祛腐生肌的功效，主要用于濕熱下注所致的帶下病，癥見(jiàn)帶下量多，色黃或白，或呈膿性，腰腹墜脹，或小便淋漓澀痛，或陰癢，口苦咽干，舌紅，苔黃或膩，脈滑或弦滑；宮頸糜爛見(jiàn)上述證候者。
文檔編號(hào)A61K36/234GK102772458SQ20121013462
公開(kāi)日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年5月2日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月2日
發(fā)明者伍榮林 申請(qǐng)人:北京天科仁祥醫(yī)藥科技有限公司