專利名稱：作為抗炎劑的17β－硫代羧酸酯17α－芳基羰氧基雄甾烷衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新的抗炎和抗變應(yīng)的雄甾烷系列化合物并涉及它們的制備方法。本發(fā)明也涉及含有所述化合物的藥用制劑及其治療用途，特別是治療炎性疾病和變應(yīng)性疾病的用途。
背景技術(shù)：
具有抗炎特性的糖皮質(zhì)激素類化合物是眾所周知的，并廣泛用于治療炎性疾病或如哮喘和鼻炎的疾病。例如，美國(guó)專利4335121公開6α，9α-二氟-17α-(1-氧代丙氧基)-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯(通用名稱為氟替卡松丙酸酯)及其衍生物。由于糖皮質(zhì)激素類化合物具有潛在的副作用，所以它的用途，特別是對(duì)孩子而言一般限制在一定范圍內(nèi)。人們所擔(dān)心的糖皮質(zhì)激素類化合物的副作用包括抑制下丘腦垂體腎上腺(HPA)軸，影響孩子的骨生長(zhǎng)和中老年人的骨密度，眼睛并發(fā)癥(白內(nèi)障形成和青光眼)和皮膚萎縮。某些糖皮質(zhì)激素化合物也具有復(fù)雜的代謝途徑，其中產(chǎn)生的活性代謝物可使此類化合物的藥效學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)難于理解。雖然現(xiàn)代的類固醇比最初采用的那些要安全得多，但生產(chǎn)出具有預(yù)測(cè)的藥代學(xué)和藥效學(xué)性質(zhì)、具有吸引人的副作用和方便的治療方案，并具有優(yōu)良抗炎性質(zhì)的新分子仍然是一個(gè)研究的目標(biāo)。

發(fā)明內(nèi)容
我們已經(jīng)確定了能充分滿足這些目的的一類新糖皮質(zhì)激素類化合物。
因此，本發(fā)明的一個(gè)方面是提供一種式(I)化合物及其鹽和溶劑合物。
其中R1表示C1-6烷基或C1-6鹵代烷基；R2表示-C(＝O)-芳基或-C(＝O)-雜芳基；R3表示氫、甲基(其可為α或β構(gòu)型)或亞甲基；R4和R5相同或不同，各表示氫或鹵素；而 表示單鍵或雙鍵。
涉及的術(shù)語“芳基”包括可任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代的苯基。
涉及的術(shù)語“雜芳基”包括含有1-3個(gè)選自N、O和S的雜原子的5或6元雜芳環(huán)(如吡啶基、嘧啶基、噻吩基(如噻吩-2-基或噻吩-3-基)、呋喃基(如呋喃-2-基或呋喃-3-基)、吡咯基(如1H-吡咯-2-基)、噁唑基、噻二唑基(如1，2，3-噻二唑-5-基、1，2，5-噻二唑-3-基或1，2，3-噻二唑-4-基))。一方面優(yōu)選雜環(huán)是噻吩基、吡咯基或呋喃基，更優(yōu)選噻吩基或呋喃基。其他實(shí)例包括噻唑基(如1，3-噻唑基-5-基或1，3-噻唑基-4-基)、異噁唑基(如異噁唑-5-基或異噁唑-4-基)、異噻唑基(如異噻唑-3-基或異噻唑-5-基)、吡唑基(如1H-吡唑-5-基)和咪唑基(如1H-咪唑-5-基)。
前面所稱的所有雜環(huán)可任選被一個(gè)或多個(gè)(如1或2個(gè))取代基取代。
芳基和雜芳基的取代基實(shí)例包括C1-6烷基(如甲基)或鹵素(如氯或溴)。其它實(shí)例包括C1-6烷氧基(如甲氧基或乙氧基)。
取代的呋喃基的實(shí)例包括3-甲基-呋喃-2-基、5-溴-呋喃-2-基、2-甲基-呋喃-3-基和2，5-二甲基-呋喃-3-基。取代的噻吩基的實(shí)例包括3-甲基-噻吩-2-基、5-甲基-噻吩-2-基、5-氯-噻吩-2-基、3-氯-噻吩-2-基、3-溴-噻吩-2-基、3-乙氧基-噻吩-2-基、4-甲氧基-噻吩-3-基、2，5-二氯-噻吩-3-基和4-甲氧基-5-氯-噻吩-3-基。取代的吡咯基的實(shí)例包括1-甲基-1H-吡咯-2-基。取代的噻唑基的實(shí)例包括4-甲基-1，3-噻唑-5-基、2，4-二甲基-1，3-噻唑-5-基和2-甲基-1，3-噻唑-4-基。取代的噻二唑基的實(shí)例包括4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基。取代的異噁唑基的實(shí)例包括3-甲基-異噁唑-5-基、5-甲基-異噁唑-3-基、5-甲基-異噁唑-4-基和3，5-二甲基-異噁唑-4-基。取代的吡唑基的實(shí)例包括1，3-二甲基-1H-吡唑-5-基和1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-基。取代的咪唑基的實(shí)例包括1-甲基-1H-咪唑-5-基。
溶劑合物的實(shí)例包括水合物。
式(I)化合物的鹽的實(shí)例包括可與堿性化合物(如當(dāng)雜芳基為堿性時(shí))形成的生理學(xué)上可接受的鹽，如乙酸鹽、苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、富馬酸鹽和馬來酸鹽。
此后涉及到的本發(fā)明化合物包括式(I)化合物及其鹽和溶劑合物，特別是藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑合物。
應(yīng)該意識(shí)到本發(fā)明的范圍包括式(I)化合物的所有立體異構(gòu)體及其混合物。
優(yōu)選該絕對(duì)立體化學(xué)將在式(I)化合物的表達(dá)式中表示。
R1可表示的C1-6鹵代烷基的實(shí)例包括被1-3個(gè)鹵原子，優(yōu)選1個(gè)鹵原子取代的C1-6烷基。優(yōu)選的鹵原子選自溴、氯和氟。R1可表示的C1-6烷基的實(shí)例包括甲基。
我們優(yōu)選R1表示氟甲基、氯甲基、溴甲基或2′-氟乙基，尤其是氟甲基。
我們優(yōu)選R2表示-C(＝O)-雜芳基。優(yōu)選所述雜芳基為含有1到3個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子的5元雜芳環(huán)，該雜芳環(huán)可任選被取代。一方面，優(yōu)選的雜芳基表示呋喃基、吡咯基或噻吩基，更優(yōu)選呋喃基或噻吩基如2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基或3-噻吩基，尤其是呋喃基，特別是2-呋喃基。但也可以優(yōu)選雜芳基表示吡咯基或噻吩基，更優(yōu)選噻吩基如2-噻吩基或3-噻吩基，該吡咯基或噻吩基可任選被取代。
特別引人注意的是其中的雜芳基為含有2個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子的5元雜芳環(huán)的化合物。因此，優(yōu)選的另一組化合物為其中的R2表示任選取代的噻唑基的化合物。優(yōu)選的另一組化合物為其中的R2表示任選取代的異噻唑基的化合物。優(yōu)選的另一組化合物為其中的R2表示任選取代的吡唑基的化合物。優(yōu)選的另一組化合物為其中的R2表示任選取代的異噁唑基的化合物。優(yōu)選的另一組化合物為其中的R2表示任選取代的異噻唑基的化合物。優(yōu)選的另一組化合物為其中的R2表示任選取代的咪唑基的化合物。
特別引人注意的是其中所述的雜芳基為含有3個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子的5元雜芳環(huán)的化合物。因此，優(yōu)選的另一組化合物為其中的R2表示任選取代的噻二唑基的化合物。
其中R2表示-C(＝O)-芳基(優(yōu)選芳基表示苯基)的化合物也是特別引人注意的。
我們優(yōu)選R3表示甲基，尤其是α構(gòu)型的甲基。其中R3表示β構(gòu)型甲基的化合物也是特別引人注意的。
優(yōu)選其中的R4和R5可相同或不同，各表示氫、氟或氯，特別是氫或氟的式(I)化合物。尤其優(yōu)選其中的R4和R5皆為氟的化合物。
優(yōu)選 表示雙鍵。其中 表示單鍵的化合物也是引人注意的。
本發(fā)明的一組特別優(yōu)選的化合物為其中R1為氟甲基；R2為-C(＝O)-2-呋喃基；R3為甲基；R4和R5可相同或不同，各表示氫或氟，尤其是氟，而 表示單鍵或雙鍵的式(I)化合物。
應(yīng)該理解本發(fā)明包括以上涉及的所有具體的和優(yōu)選的基團(tuán)的組合。
優(yōu)選的式(I)化合物包括以下化合物或其鹽或溶劑合物
6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯；6α，9α-二氟-17α-[(3-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(2-噻吩基羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(3-噻吩基羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯；17α-(苯甲?；?氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯；9α-氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16β-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯；和6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-4-烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯。
特別優(yōu)選的式(I)化合物包括以下化合物或其鹽或溶劑合物6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯；6α，9α-二氟-17α-[(3-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(2-噻吩基羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(3-噻吩基羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯；6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-4-烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯。
稱為實(shí)施例8-43的化合物也是特別引人注意的，尤其是實(shí)施例8-22和24-43，最特別的是實(shí)施例8-9、11-13、15-22和24-43。
式(I)化合物潛在地具有有益的抗炎或抗變應(yīng)效果，特別是局部給藥時(shí)，例如通過它們結(jié)合糖皮質(zhì)激素受體的能力和經(jīng)該受體的非正常反應(yīng)證明了這一點(diǎn)。因此，式(I)化合物用于治療炎性和/或變應(yīng)性疾病。
預(yù)測(cè)式(I)化合物在大鼠和人的體外系統(tǒng)中經(jīng)高效的肝代謝而產(chǎn)生其中R2-R4和 如上定義的相應(yīng)17β-羧酸(X)作為唯一的主要代謝物。我們已經(jīng)確定實(shí)施例1為此種情況，并且已經(jīng)合成了實(shí)施例的代謝物(X)并證明在體外功能糖皮質(zhì)激素激動(dòng)劑分析中比所述母體化合物的活性低＞1000倍。預(yù)期其中R2表示2-呋喃基羰基之外的基團(tuán)的(X)類似物也具有極低的活性。
某些實(shí)施例的這種有效肝代謝通過大鼠體內(nèi)數(shù)據(jù)得到反映，所述數(shù)據(jù)已經(jīng)證明血漿清除以接近肝血流動(dòng)的速率進(jìn)行(實(shí)施例1、4、19、24、25和28)并且口服生物利用度＜1％，與廣泛的第一遍(first-pass)新陳代謝一致(實(shí)施例1)。
人肝細(xì)胞的體外代謝研究已經(jīng)證明實(shí)施例1以相同的方式代謝為氟替卡松丙酸酯，但是實(shí)施例1轉(zhuǎn)化為無活性的酸代謝物比氟替卡松丙酸酯快大約5倍。預(yù)期這種十分有效的肝失活使人全身的接觸減到最少?gòu)亩鴮?dǎo)致安全性得到改善。
吸入的類固醇類化合物也通過肺吸收并且該吸收途徑顯著影響全身的接觸。因此減少肺吸收可提供改善的安全性。實(shí)施例1的研究顯示，在干燥粉末傳遞到麻醉豬的肺中后接觸的實(shí)施例1顯著低于氟替卡松丙酸酯。
當(dāng)每天給藥一次時(shí)，相信改善的安全性使式(I)化合物顯示所需的抗炎效果。對(duì)患者而言認(rèn)為每天一次的給藥方案明顯比每天兩次的給藥方案更加方便，而氟卡替松丙酸酯通常采用每天兩次的給藥方案。
本發(fā)明化合物對(duì)其有效的疾病的實(shí)例包括皮膚病，如濕疹、牛皮癬、變應(yīng)性皮炎、神經(jīng)性皮炎、瘙癢和超敏性反應(yīng)；鼻子、咽喉或肺部的炎性疾病，如哮喘(包括變應(yīng)原引起的哮喘反應(yīng))、鼻炎(包括枯草熱)、鼻息肉、慢性阻塞性肺病、間質(zhì)性肺部疾病和纖維變性；炎性腸病，如潰瘍性結(jié)腸炎和Crobn?。患白泽w免疫疾病，如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
本發(fā)明的化合物也可用于治療結(jié)膜和結(jié)膜炎。
本領(lǐng)域的技術(shù)人員將意識(shí)到此中涉及的治療延伸到預(yù)防以及已確定疾病的治療。
如上所述，式(I)化合物用于人藥或獸藥，特別是作為抗炎和抗變應(yīng)劑。
因此，本發(fā)明的另一方面提供用于人藥或獸藥，特別是用于治療患炎性和/或變應(yīng)性疾病的患者的式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物。
本發(fā)明的另一個(gè)方面提供式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物在制備用于治療患炎性和/或變應(yīng)性疾病的患者的藥物中的用途。
在另外一個(gè)或備選的方面，提供一種治療患炎性和/或變應(yīng)性疾病的人或動(dòng)物患者的方法，該方法包括給予所述人或動(dòng)物患者有效量的式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物。
本發(fā)明的化合物可以進(jìn)行配制，以便以任何常規(guī)的方式給藥，因此本發(fā)明的范圍也包括含有式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物以及一種或多種生理學(xué)上可接受的稀釋劑或載體(如果需要)的藥用組合物。
另外，提供一種制備此類藥用組合物的方法，該方法包括混合各種成分。
例如，本發(fā)明的化合物可以配制為用于口服給藥、口腔含化給藥、舌下給藥、胃腸外給藥、局部或直腸給藥，尤其是局部給藥。
此中使用的局部給藥包括通過吹入和吸入給藥。用于局部給藥的各類制劑的實(shí)例包括軟膏、洗液、乳膏、凝膠體、泡沫、通過透皮貼劑傳遞的制劑、散劑、噴霧劑、氣霧劑、膠囊或用于吸入器或吹入器的彈射劑或滴劑(滴眼劑或滴鼻劑)、用于噴霧的溶液/混懸液、栓劑、陰道栓劑、保留灌腸劑和可咀嚼的或可吮吸的片劑或藥丸(如治療口瘡性潰瘍)或脂質(zhì)體或微包囊制劑。
肺部局部給藥的便利組合物包括干粉組合物和噴霧組合物。
例如，局部傳遞到肺部的干粉組合物可以是膠囊或用于吸入器或吹入器的藥筒(cartridge)，例如明膠。為了吸入本發(fā)明的化合物，制劑通常含有粉末混合物和適宜的粉末基質(zhì)如乳糖或淀粉。每粒膠囊或藥筒通常可含有20μg-10mg的式(I)化合物?；蛘撸景l(fā)明化合物可以不含賦形劑。所述制劑的包裝可適于單位劑量或多劑量傳遞。在多劑量傳遞的情況下，所述制劑可以預(yù)計(jì)量(如在Diskus中，參見GB2242134或Diskhaler，參見GB2178965，2129691和2169265)或在使用時(shí)計(jì)量(如在Turbuhaler，參見EP69715)。單位劑量裝置的一個(gè)實(shí)例為Rotahaler(參見GB2064336)。所述Diskus吸入裝置包含一個(gè)底部薄片形成的伸長(zhǎng)帶，沿該帶的長(zhǎng)度方向具有很多個(gè)隔開的凹孔，以及一個(gè)用于限定多個(gè)容器、密封地但是可剝落地密封于其上的蓋片(lid sheet)，其中每個(gè)容器中含有可吸入制劑，該制劑含有最好與乳糖混合的式(I)化合物。優(yōu)選所述帶十分柔軟以便將其繞成一卷。所述蓋片和底部薄片最好具有多個(gè)彼此未密封的前端部分，并且使至少一個(gè)前端部分與卷繞裝置相連。而且，優(yōu)選底部和蓋片之間的密封遍布它們的整個(gè)寬度。蓋片可優(yōu)選在縱向上由所述底部薄片的第一個(gè)末端從底部薄片上剝落。
例如，噴霧組合物可配制為水溶液或混懸液或使用適當(dāng)?shù)囊夯瘨伾鋭┎⒂杉訅喊?，如?jì)量劑量的吸入器傳遞的氣霧劑。適宜于吸入的氣霧劑組合物可為混懸液或溶液，并且通常含有式(I)化合物和適宜的拋射劑如氟化碳或含氫的氯氟化碳或它們的混合物，特別是氫氟烷烴，具體地說為1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟-正丙烷或它們的混合物。所述氣霧劑組合物可任選含有本領(lǐng)域熟知的其他制劑賦形劑，如表面活性劑(如油酸或卵磷脂)和助溶劑(如乙醇)。制劑的一個(gè)例子不含賦形劑，并且基本上由式(I)化合物(任選與另一種活性成分一起)和選自1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟-正丙烷和它們的混合物的拋射劑組成。WO94/21229中所述的另一個(gè)制劑實(shí)例包含微粒狀的式(I)化合物、選自1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟-正丙烷和它們的混合物的拋射劑以及溶于所述拋射劑中的懸浮劑，如低聚乳酸或其衍生物。優(yōu)選的拋射劑為1，1，1，2-四氟乙烷。加壓的制劑通常被保留在用閥(如計(jì)量閥)關(guān)閉的小罐中(如鋁罐)并且該小罐被裝配到配有接口的傳動(dòng)裝置上。
希望通過吸入給予的藥物的粒徑在受控范圍內(nèi)。吸入支氣管系統(tǒng)的最佳粒徑通常為1-10μm，優(yōu)選2-5μm。當(dāng)吸入到細(xì)導(dǎo)氣管時(shí)，粒徑超過20μm的微粒通常太大。為了達(dá)到所述粒徑，可通過常規(guī)的方式如通過粉碎減小所產(chǎn)生的式(I)化合物微粒的粒徑?？赏ㄟ^風(fēng)力分級(jí)或篩分分離所需的部分。優(yōu)選所述微粒為例如通過下述方法制備的晶粒，所述方法包括在一個(gè)連續(xù)流動(dòng)室中，在超聲輻射的存在下，將作為藥物的式(I)化合物在液體溶劑中的流動(dòng)溶液與所述藥物的流動(dòng)液體反溶劑(antisolvent)混合(如國(guó)際專利申請(qǐng)PCT/GB99/04368中所述)，或通過另一種方法制備，該方法包括讓在液體溶劑中的所述物質(zhì)的溶液流和所述藥物的液體反溶劑流按切線方向進(jìn)入具有軸向出口的圓柱形混合室中，由此使所述液流通過形成渦流而充分地混合并因此引起所述物質(zhì)的晶粒沉淀(如在國(guó)際專利申請(qǐng)PCT/GB00/04327中所述)。當(dāng)采用賦形劑如乳糖時(shí)，通常所述賦形劑的粒徑將比所吸入的本發(fā)明藥物大得多。當(dāng)所述賦形劑為乳糖時(shí)，通常為粉碎的乳糖，其中至多85％的乳糖微粒的MMD為60-90μm，至少15％的乳糖微粒的MMD小于15μm。
局部對(duì)鼻給藥的制劑包括加壓的氣霧劑制劑和通過加壓泵對(duì)鼻給藥的水性制劑。
對(duì)肺部或鼻給藥的水性制劑可以包括常規(guī)的賦形劑如緩沖劑、張力改進(jìn)劑等。水性制劑也可通過霧化對(duì)鼻給藥。
其它可能的說明包括例如，軟膏、乳膏和凝膠可用水性或油性基質(zhì)與適宜的增稠劑和/或膠凝劑和/或溶劑進(jìn)行配制。因此，這樣的基質(zhì)可包括例如水和/或油如液體石蠟或植物油如花生油或蓖麻油，或溶劑如聚乙二醇?？梢愿鶕?jù)基質(zhì)的性質(zhì)使用的增稠劑和膠凝劑包括軟石蠟、硬脂酸鋁、十六醇十八醇混合物、聚乙二醇、羊毛脂、蜂蠟、羧基聚亞甲基和纖維素衍生物，和/或單硬脂酸甘油酯和/或非離子乳化劑。
洗劑可用水性或油性基質(zhì)配制，并且一般也含有一種或多種乳化劑、穩(wěn)定劑、分散劑、懸浮劑或增稠劑。
借助任何適宜的粉末基質(zhì)，例如，滑石粉、乳糖或淀粉可形成外用的粉末劑。可用水性或非水性基質(zhì)配制滴劑，所述滴劑也包括一種或多種分散劑、增溶劑、懸浮劑或防腐劑。
如果適當(dāng)，本發(fā)明的所述制劑可通過加入適宜的緩沖劑進(jìn)行緩沖。
按照本發(fā)明，在局部使用的組合物中式(I)的活性化合物的比例取決于待制備制劑的具體類型，但是通常在0.001到10％重量的范圍內(nèi)。可是通常對(duì)于大多數(shù)類型的制劑來說，所使用的比例最好在0.005到1％，并優(yōu)選0.01到0.5％的范圍內(nèi)。然而，在用于吸入或吹入的粉末中，所用的比例通常在0.1到5％的范圍內(nèi)。
優(yōu)選氣霧劑制劑能使每個(gè)計(jì)量劑量或“噴出”的氣霧劑含有1μg-2000μg，如20μg-2000μg，優(yōu)選約20μg-500μg的式(I)化合物。給藥可以每天一次或每天幾次，例如2、3、4或8次，例如每次給予1、2或3個(gè)劑量。優(yōu)選式(I)化合物每天給藥一次或兩次，更優(yōu)選每天一次。氣霧劑的總?cè)談┝客ǔＴ?0μg-10mg如100μg-10mg，優(yōu)選200μg-2000μg的范圍內(nèi)。
可通過每天施用一次或多次將局部制劑給予患部；可方便地在皮膚上使用封閉敷裹(occlusive dressings)?？梢酝ㄟ^一個(gè)粘性的貯藥庫(kù)體系來實(shí)現(xiàn)連續(xù)或延長(zhǎng)釋藥。
對(duì)于內(nèi)用藥，本發(fā)明的化合物可以例如用常規(guī)的方式配制，以用于口服、胃腸外或直腸給藥?？诜o藥的制劑包括糖漿劑、酏劑、散劑、顆粒劑、片劑和膠囊劑，適宜時(shí)，所述制劑通常含有常規(guī)的賦形劑，如粘合劑、填充劑、滑潤(rùn)劑、崩解劑、濕潤(rùn)劑、懸浮劑、乳化劑、防腐劑、緩沖鹽、調(diào)味劑、著色劑和/或甜味劑。但如下所述，優(yōu)選單位劑型。
內(nèi)用制劑的優(yōu)選劑型為單位劑型，即片劑和膠囊劑。此類單位劑型含有0.1mg到20mg，優(yōu)選2.5到10mg的本發(fā)明化合物。
在需要進(jìn)行全身腎上腺皮質(zhì)治療的情況下，通?？赏ㄟ^內(nèi)用給予本發(fā)明的化合物。
概括地說，內(nèi)用制劑可以含有0.05到10％的活性成分，這取決于有關(guān)制劑的類型。日劑量可在0.1mg到60mg，如5-30mg之間變化，這取決于所治療的疾病和所需治療的持續(xù)時(shí)間。
緩慢釋放或腸溶包衣制劑可能是有利的，對(duì)于炎性腸道疾病的治療尤為如此。
本發(fā)明的藥用組合物也可與另一種治療活性劑，例如β2腎上腺素受體激動(dòng)劑、抗組胺或抗變應(yīng)劑聯(lián)合使用。因此，本發(fā)明另一方面提供一種包含式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物以及另一種治療活性劑，如β2腎上腺素受體激動(dòng)劑、抗組胺或抗變應(yīng)劑的聯(lián)合療法。
β2腎上腺素受體激動(dòng)劑的實(shí)例包括沙美特羅(如作為外消旋物或單一的對(duì)映體如R-對(duì)映體)、沙丁胺醇、福莫特羅、沙甲胺醇、非諾特羅或特布他林及其鹽，例如沙美特羅的xinafoate鹽、沙丁胺醇的硫酸鹽或游離堿或福莫特羅的富馬酸鹽。抗組胺劑的實(shí)例包括美沙吡林或氯雷他定。
例如，其它適當(dāng)?shù)穆?lián)合藥物包括例如其它抗炎性劑如NSAIDs(如色甘酸鈉、萘多羅米鈉、PDE4抑制劑、白三烯拮抗劑、iNOS抑制劑、類胰蛋白酶和彈性蛋白酶抑制劑、β-2整聯(lián)蛋白拮抗劑和腺苷2a激動(dòng)劑)或抗感染劑(如抗生素、抗病毒劑)。
特別引人注意的是式(I)化合物與磷酸二酯酶4(PDE4)抑制劑的聯(lián)合使用。用于本發(fā)明的這一方面的PDE4-特異性抑制劑可以是已知抑制所述PDE4酶的任何化合物，或者是已發(fā)現(xiàn)其作為PDE4抑制劑的任何化合物，并且所述化合物僅僅為PDE4抑制劑，而不是抑制PDE家族的其它成員及PDE4的化合物。通常優(yōu)選使用具有大約0.1或更大的IC50比率的PDE4抑制劑，所述比率即高親和力結(jié)合咯利普蘭的PDE4催化形式的IC50除以低親和力結(jié)合咯利普蘭的形式的IC50。為了本公開的目的，低親和力結(jié)合R和S咯利普蘭的cAMP催化位點(diǎn)稱為“低親和力”結(jié)合位點(diǎn)(LPDE 4)，而高親和力結(jié)合咯利普蘭的該催化位點(diǎn)的其它形式稱為“高親和力”結(jié)合位點(diǎn)(HPDE4)。術(shù)語“HPDE 4”不應(yīng)該與術(shù)語“hPDE4”混淆，“hPDE4”用于表示人PDE4。進(jìn)行最初的實(shí)驗(yàn)以便建立和確認(rèn)[3H]-咯利普蘭結(jié)合分析。在以下詳細(xì)描述的結(jié)合分析中給出了該工作的詳細(xì)資料。
用于本發(fā)明的優(yōu)選的PDE4抑制劑將為那些具有有益的治療比率的化合物，即優(yōu)先抑制cAMP催化活性的化合物，其中所述酶為低親和力結(jié)合咯利普蘭的形式，因此降低顯然與抑制高親和力結(jié)合咯利普蘭的形式有關(guān)的副作用。闡述這點(diǎn)的另一種方式為優(yōu)選的化合物具有大約0.1或更大的IC50比率，即高親和力結(jié)合咯利普蘭的PDE4催化形式的IC50除以低親和力結(jié)合咯利普蘭形式的IC50的比率。
該標(biāo)準(zhǔn)的進(jìn)一步改進(jìn)在于其中PDE4抑制劑具有大約0.1或更大的IC50比率，以1μM[3H]-cAMP作為底物，所述比率為與1nM[3H]R-咯利普蘭競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合到高親和力結(jié)合咯利普蘭的PDE4形式上的IC50值與抑制低親和力結(jié)合咯利普蘭的形式的該P(yáng)DE4催化活性的IC50值的比率。
使用的PDE4抑制劑的實(shí)例為(R)-(+)-1-(4-溴芐基)-4-[(3-環(huán)戊基氧基)-4-甲氧基苯基]-2-吡咯烷酮；(R)-(+)-1-(4-溴芐基)-4-[(3-環(huán)戊基氧基)-4-甲氧基苯基]-2-吡咯烷酮；3-(環(huán)戊基氧基-4-甲氧基苯基)-1-(4-N′-[N2-氰基-S-甲基-異硫脲基]芐基)-2-吡咯烷酮；順4-氰基-4-(3-環(huán)戊基氧基-4-甲氧基苯基)環(huán)己-1-羧酸]；順-[4-氰基-4-(3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)環(huán)己-1-醇]；(R)-(+)-[4-(3-環(huán)戊基氧基-4-甲氧基苯基)吡咯烷-2-亞基(pyrrolidine-2-ylidene)]乙酸乙酯；和(S)-(-)-[4-(3-環(huán)戊基氧基-4-甲氧基苯基)吡咯烷-2-亞基]乙酸乙酯。
最優(yōu)選那些具有大于0.5的IC50比率的PDE4抑制劑，并且特別是那些具有大于1.0的比率的化合物。優(yōu)選的化合物為順4-氰基-4-(3-環(huán)戊基氧基-4-甲氧基苯基)環(huán)己-1-羧酸，2-甲酯基-4-氰基-4-(3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)環(huán)己-1-酮和順-[4-氰基-4-(3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)環(huán)己-1-醇]；這些是優(yōu)選結(jié)合到低親合力結(jié)合位點(diǎn)并具有0.1或更大的IC50比率的化合物的實(shí)例。
其它引人注意的化合物包括1996年9月3日頒發(fā)的美國(guó)專利5,552,438中闡述的化合物；該專利和其公開的化合物通過引用完整地結(jié)合到本文中。公開于美國(guó)專利5,552,438的特別引人注意的化合物為順-4-氰基-4-[3-(環(huán)戊基氧基)-4-甲氧基苯基]環(huán)己-1-羧酸(也稱為cilomalast)及其鹽、酯、藥物前體或物理形式；來自Astra(Hofgen，N等，第15 EFMC Int Symp Med Chem(Sept 6-10，Edinburgh)1998，Abst P.98)的AWD-12-281；命名為NCS-613(INSERM)的9-芐基腺嘌呤衍生物；來自Chiroscience和Schering-Plough的D-4418；確定為CI-1018(PD-168787；Parke-Davis/warner-Lambert)的苯并二氮雜PDE4抑制劑；Kyowa Hakko公開于WO9916766中的苯并間二氧雜環(huán)戊烯衍生物；來自Napp(Landells，L.J.等，Eur Resp J[Annu Cong Eur Resp Soc(Sept 19-23，Geneva)1998]1998，12(Suppt.28)Abst P2393)的V-11294A；羅氟司特(CAS參考號(hào)162401-32-3)和來自Byk-Gulden的pthalazinone(WO9947505)；或確定為T-440的化合物(Tanabe Seiyaku；Fuji，K.等.J Pharmacol Exp Ther，1998，284(1)162)。
磷酸二酯酶和咯利普蘭結(jié)合分析分析方法1A確定分離的人單核細(xì)胞PDE4和hrPDE(人重組PDE4)主要以低親和力的形式存在。因此，受試化合物抑制PDE4的低親和力形式的活性可用采用1μM[3H]-cAMP作為底物的PDE4催化活性的標(biāo)準(zhǔn)分析法進(jìn)行評(píng)價(jià)(Torphy等，J.of Biol.Chem.，267卷，3號(hào)，1798-1804頁，1992)。
使用大鼠大腦高速上清液作為蛋白質(zhì)源并且將[3H]-咯利普蘭的兩種對(duì)映體制備為25.6 Ci/mmol的特異性活性。由公開的程序修改標(biāo)準(zhǔn)分析條件以便與PDE分析條件一致，除了最后的cAMP之外50mMTrisHCl(pH7.5)，5mM MgCl2，50μM 5′-AMP和1nM[3H]-咯利普蘭(Torphy等，J.of Biol.Chem.，267卷，3號(hào)，1798-1804頁，1992)。在30℃進(jìn)行該分析1小時(shí)。終止該反應(yīng)并且用Brandel細(xì)胞收集器分離結(jié)合的配體與游離的配體。除了不存在[3H]-cAMP之外，在與測(cè)量低親和力PDE活性的條件相同的條件下，評(píng)估高親和力結(jié)合位點(diǎn)的競(jìng)爭(zhēng)。
分析方法1B測(cè)量磷酸二酯酶活性按照供應(yīng)商(Amersham Life Sciences)所述用[3H]cAMP SPA或[3H]cGMP SPA酶分析法分析PDE活性。在室溫下，在0.1ml含有以下成分(終濃度)的反應(yīng)緩沖液中，在96孔板中進(jìn)行該反應(yīng)50mM TrisHCl，pH 7.5，8.3mM MgCl2，1.7mM EGTA，[3H]cAMP或[3H]cGMP(大約2000dpm/pmol)，酶和各種濃度的抑制劑。使該分析進(jìn)行1小時(shí)并且在硫酸鋅的存在下通過加入50μl SPA硅酸釔珠終止該分析。振搖該板并使其在室溫下放置20分鐘。通過閃爍光譜測(cè)定法評(píng)價(jià)放射標(biāo)記產(chǎn)品的形成。
R-咯利普蘭結(jié)合分析通過修改的Schneider及其同事的方法進(jìn)行[3H]R-咯利普蘭結(jié)合分析，見Nicholson等，Trends Pharmacol.Sci.，12卷，19-27頁(1991)和McHale等，Mol.Pharmacol.，39卷，109-113(1991)。R-咯利普蘭結(jié)合到PDE4的所述催化位點(diǎn)，見Torphy等，Mol.Pharmacol.，39卷，376-384頁(1991)。因此，[3H]R-咯利普蘭結(jié)合的競(jìng)爭(zhēng)提供獨(dú)立的未標(biāo)記競(jìng)爭(zhēng)物的PDE4抑制劑效力的證明。在30℃下，在0.5μl含有以下成分(終濃度)的緩沖液中進(jìn)行該分析1小時(shí)50mM Tris HCl，pH 7.5，5mM MgCl2，0.05％牛血清白蛋白，2nM[3H]R-咯利普蘭(5.7×104dpm/pmol)和各種濃度的非放射性標(biāo)記抑制劑。通過加入2.5ml冰冷卻的反應(yīng)緩沖液(沒有[3H]-R-咯利普蘭)中止反應(yīng)并通過Whatman GF/B過濾器快速真空過濾(Brandel細(xì)胞收集器)，所述過濾器已浸在0.3％聚乙烯亞胺中。用另外7.5ml冷緩沖液洗滌該濾器、干燥并經(jīng)液體閃爍光譜測(cè)定法計(jì)數(shù)。
因此，本發(fā)明另一方面提供一種含有式(I)化合物或其生理上可接受的鹽或溶劑合物與PDE4抑制劑的組合。
涉及以上的組合可方便地存在用于形成藥用制劑，因此含有如上定義的組合與藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體的藥用制劑代表了本發(fā)明的另外一個(gè)方面。
此類組合的各化合物可順序或同時(shí)以單獨(dú)的或組合的藥用制劑給藥。本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易地確定已知治療劑的適宜劑量。
可通過此后描述的方法制備構(gòu)成本發(fā)明的另一方面的所述式(I)化合物及其鹽和溶劑合物。
一種本發(fā)明的制備式(I)化舍物或其鹽或溶劑合物的方法包括式(II)的硫代酸或其鹽的烷基化， 其中R2、R3、R4、R5和 如上定義。
在該方法中所述式(II)化合物可在標(biāo)準(zhǔn)條件下與其中L為離去基團(tuán)如鹵原子或甲苯磺?；蚣谆酋；鹊氖絉1-L的化合物，如適宜的烷基或鹵代烷基鹵化物反應(yīng)。
當(dāng)此類鹽可以以結(jié)晶形式制備時(shí)，所述式(II)化合物可方便地作為鹽使用。
當(dāng)R1表示氟甲基時(shí)，優(yōu)選的鹵代烷基鹵化物試劑為溴氟甲烷。
在一個(gè)制備式(I)化合物的優(yōu)選方法中，可任選在相轉(zhuǎn)移催化劑的存在下和任選在另外的堿的存在下用溴氟甲烷處理式(II)化合物或其鹽。優(yōu)選的溶劑為任選在水的存在下的乙酸甲酯，或更優(yōu)選乙酸乙酯。水的存在改善原料和產(chǎn)品的溶解性，使用相轉(zhuǎn)移催化劑導(dǎo)致反應(yīng)速率的增加?？梢允褂玫南噢D(zhuǎn)移催化劑的實(shí)例包括(但不限于)溴化四丁基銨、氯化四丁基銨、溴化芐基三丁基銨、氯化芐基三丁基銨、溴化芐基三乙基銨、氯化甲基三丁基銨和氯化甲基三辛基銨。THF也可有利地用作相轉(zhuǎn)移催化劑的溶劑。
例如，使用G.H.Phillipps等，(1994)Journal of MedicinalChemistry，37，3717-3729所述的方法可從相應(yīng)的式(III)的17α-羥基衍生物或其鹽制備式(II)化合物， 其中R3、R4、R5和 如上定義。例如所述步驟通常包括在溫和的堿如三乙基胺的存在下，向酯中加入適宜進(jìn)行酯化作用的試劑如芳基或雜芳基羰基鹵化物如2-呋喃甲酰氯。通常以式(III)化合物的至少2倍摩爾量使用芳基或雜芳基羰基鹵化物。第二摩爾的芳基或雜芳基羰基鹵化物趨向于與式(III)化合物的硫代酸部分反應(yīng)并且需要通過與胺如二乙胺反應(yīng)除去。
可依照GB 2088877B描述的方法制備式(III)化合物。
也可通過包括以下步驟的方法制備其中R3表示α構(gòu)型的甲基、 氛示雙鍵而R4和R5表示F的式(III)化合物 步驟(a)包括氧化含有式(V)化合物的溶液。優(yōu)選在包括甲醇、水、四氫呋喃、二噁烷或二甘醇二甲基醚的溶劑的存在下進(jìn)行步驟(a)。例如，為了提高產(chǎn)率和產(chǎn)量，優(yōu)選的溶劑為甲醇、水或四氫呋喃，而更優(yōu)選為水或四氫呋喃、特別是水和四氫呋喃作為溶劑。二噁烷和二甘醇二甲基醚也是優(yōu)選的溶劑，可任選(和優(yōu)選)與水一起使用。所述溶劑相對(duì)于原料的量(1wt.)優(yōu)選以3-10體積的量存在，更優(yōu)選4-6體積，特別是5體積。所述氧化劑相對(duì)于原料的量?jī)?yōu)選以1-9摩爾等價(jià)物的量存在。例如，當(dāng)采用50％w/w的高碘酸水溶液時(shí)，相對(duì)于原料的量(1wt)所述氧化劑的存在量可為1.1-10wt，更優(yōu)選1.1-3wt，特別是1.3wt。所述氧化步驟優(yōu)選包括使用化學(xué)氧化劑。更優(yōu)選所述氧化劑為高碘酸或碘酸或其鹽。最優(yōu)選所述氧化劑為高碘酸或高碘酸鈉，尤其為高碘酸?；蛘?或另外)，所述氧化步驟可包括任何適宜的氧化反應(yīng)，如利用空氣和/或氧的氧化反應(yīng)。當(dāng)所述氧化反應(yīng)利用空氣和/或氧時(shí)，在所述反應(yīng)中使用的溶劑優(yōu)選為甲醇。步驟(a)優(yōu)選包括在室溫或稍溫?zé)?，大約25℃下保溫所述試劑2小時(shí)。通過加入反溶劑從該反應(yīng)混合物中重結(jié)晶分離式(I)化合物。式(I)化合物的反溶劑適宜為水。令人驚訝地是我們發(fā)現(xiàn)通過加入反溶劑如水來控制所述式(IV)化合物沉淀的條件是非常理想的。當(dāng)用冷凍的水(如在0-5℃溫度下的水/冰混合物)進(jìn)行所述重結(jié)晶時(shí)，雖然可以期望更好的反溶劑性質(zhì)，我們發(fā)現(xiàn)所產(chǎn)生的結(jié)晶產(chǎn)物十分龐大，類似一種軟凝膠體并且很難過濾。不受理論限制，我們認(rèn)為該低密度產(chǎn)物在該晶格內(nèi)含有大量的溶劑化溶劑。相反當(dāng)使用大約10℃或更高(如環(huán)境溫度)的條件時(shí)，產(chǎn)生一種十分容易過濾的稠度類似沙的粒狀產(chǎn)物。在這些條件下，結(jié)晶通常在大約1小時(shí)后開始并且通常在幾小時(shí)(如2小時(shí))內(nèi)完成。不受理論限制我們認(rèn)為該粒狀產(chǎn)物在該晶格內(nèi)幾乎不含或不含溶劑化溶劑。
步驟(b)通常包括在適宜的溶劑如二甲基甲酰胺的存在下加入適宜于將羧酸轉(zhuǎn)化為硫代羧酸的試劑，如使用硫化氫氣體與適宜的偶合劑如羰基二咪唑(CDI)。
前述的方法可適于制備其它的式(III)化合物。
一種制備某些式(II)化合物的選擇性方法包括在適宜的溶劑如DMF的存在下用適宜將羧酸轉(zhuǎn)化為硫代羧酸的試劑處理式(X)的化合物，如使用硫化氫氣體與適宜的偶合劑如CDI。式(X)化合物可通過類似于本文中所述的方法制備。可類似地制備其它式(II)化合物。
一種制備其中R4為氟的式(I)合物或其鹽或溶劑合物的選擇性方法包括使式(VI)化合物與氟源反應(yīng)。
適宜的氟源的實(shí)例包括氟化物(如氟化鈉)或更優(yōu)選HF。優(yōu)選的試劑為含水HF?？蓱?yīng)用如THF或DMF的溶劑。
通過包括以下步驟的方法制備式(VI)化合物(a)使式(VII)化合物或其鹽烷基化； (b)使式(VIII)化合物與環(huán)氧化物形成試劑反應(yīng)；或 (c)使式(IX)化合物酯化。
在步驟(a)中，可以采用類似于上述那些將式(II)化合物轉(zhuǎn)化為式(I)化合物的條件。式(VII)化合物通常將在標(biāo)準(zhǔn)條件下與其中L為離去基團(tuán)(如鹵原子、甲磺?；蚣妆交酋；?的式R1-L化合物，如適宜的氟甲基鹵化物反應(yīng)。所述氟甲基鹵化物試劑優(yōu)選為溴氟甲烷。
步驟(b)優(yōu)選以兩步進(jìn)行(i)形成鹵代醇，具體地說形成溴代醇(如通過與bromodan或等效試劑反應(yīng))，隨后(ii)用堿如氫氧化鈉處理以便使環(huán)閉合。步驟(i)的產(chǎn)物為式(IXA)化合物，該化合物為一種新的中間體，如果需要可以分離， 其中X為鹵素，具體地說為Br。
在步驟(c)中，在有機(jī)堿如三乙胺存在下的適宜試劑將為芳基或雜芳基羧酸的活化衍生物如活化的酯，或優(yōu)選為酰鹵如酰氯。該反應(yīng)可在升高的溫度如大約60℃下進(jìn)行或在酰化催化劑如二甲基氨基吡啶(DMAP)的存在下于環(huán)境溫度進(jìn)行。
通過包括酯化式(XI)化合物的方法可制備式(VII)化合物。
可以采用類似于上述那些將式(III)化合物轉(zhuǎn)化為式(II)化合物的條件。例如，在有機(jī)堿如三乙胺存在下的適宜試劑將為芳基或雜芳基羧酸的活化衍生物如活化的酯，或優(yōu)選為酰鹵如酰氯。某些式(XI)化合物是已知的(J Labelled Compd Radiopharm(1997)39(7)567-584)而其它的可通過類似方法制備。
通過包括以下步驟的方法制備式(VIII)化合物(a)使式(XII)化合物或其鹽烷基化； 或者(b)使式(XII)化合物酯化； 在步驟(a)中，可以采用類似于上述那些將式(II)化合物轉(zhuǎn)化為式(I)化合物的條件。式(XII)化合物通常將在標(biāo)準(zhǔn)條件下與其中L為離去基團(tuán)(如鹵原子、甲磺?；蚣妆交酋；?的式R1-L化合物，如適宜的氟甲基鹵化物反應(yīng)。所述氟甲基鹵化物試劑優(yōu)選為溴氟甲烷。
在步驟(b)中，可以采用類似于上述那些將式(IX)化合物轉(zhuǎn)化為式(VI)化合物的條件。例如，在有機(jī)堿如三乙胺存在下的適宜試劑將為芳基或雜芳基羧酸的活化衍生物如活化的酯，或優(yōu)選為酰鹵如酰氯。
可通過用已經(jīng)描述的類似方法(如在標(biāo)準(zhǔn)條件下通過與其中L為離去基團(tuán)(如鹵原子、甲磺?；蚣妆交酋；?的式FCH2L化合物，如適宜的氟甲基鹵化物反應(yīng))使相應(yīng)的硫代酸(XI)和(XIV)(如下定義)烷基化制備式(IX)和(XIII)化合物。所述氟甲基鹵化物試劑優(yōu)選為溴氟甲烷。所述硫代酸(XI)是已知的化合物(J Labelled Compd Radiopharm(1997)39(7)567-584)或可通過類似方法制備。
可通過一種包括酯化式(XIV)化合物或其鹽的方法制備式(XII)化合物。
可用類似于已經(jīng)描述的方法進(jìn)行本方法。例如，在有機(jī)堿如三乙胺存在下的適宜試劑將為芳基或雜芳基羧酸的活化衍生物如活化的酯，或優(yōu)選為酰鹵如酰氯。
可通過例如類似于上述將式(IV)化合物轉(zhuǎn)化為式(III)化合物的方法從相應(yīng)的羧酸制備式(XIV)化合物。上述相應(yīng)的羧酸是已知的(Upjohn，WO90/15816)或可通過常規(guī)方法制備。
另外一個(gè)制備式(I)化合物或其鹽或溶劑合物的替代性方法包括使其中11-β-羥基基團(tuán)被保護(hù)或掩蔽的式(I)化合物去保護(hù)或去掩蔽。第一種此類方法包括使式(XV)化合物去保護(hù)，
其中P為羥基保護(hù)基團(tuán)。
羥基保護(hù)基團(tuán)P的實(shí)例描述于JFW McOmie編輯的《有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基團(tuán)》(Plenum Press 1973)中或Theodora W Green的《有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)》(John Wiley and Sons，1991)中。
適宜的羥基保護(hù)基團(tuán)P的實(shí)例包括選自以下的基團(tuán)碳酸酯、烷基(如叔丁基或甲氧基甲基)、芳烷基(如芐基、對(duì)硝基芐基、二苯甲基或三苯甲基)、雜環(huán)基團(tuán)如四氫吡喃基、?；?如乙酰基或芐基)和甲硅烷基如三烷基甲硅烷基(如叔丁基二甲基甲硅烷基)。通過常規(guī)的技術(shù)可除去所述羥基保護(hù)基團(tuán)。因此，例如通過用堿處理可除去碳酸酯，通過溶劑解如在酸或堿性條件下水解可除去烷基、甲硅烷基、酰基和雜環(huán)基團(tuán)。類似地可通過溶劑解如在酸性條件下水解除去芳烷基如三苯甲基。芳烷基如芐基或?qū)ο趸S基可通過在貴金屬催化劑如披鈀木炭的存在下氫解而開裂。對(duì)硝基芐基也可通過光解而開裂。
所述11-β-羥基基團(tuán)可被掩蔽為羰基基團(tuán)。因此第二種此類方法包括式(XVI)化合物的還原。
如通過用氫化物還原劑如硼氫化物如硼氫化鈉處理還原得到式(I)化合物。
11-酮(XVI)也可以被掩蔽。式(XVI)化合物的掩蔽衍生物的實(shí)例包括(i)酮縮醇衍生物，如通過用醇如甲醇、乙醇或乙-1，2-二醇處理式(XVI)化合物形成的酮縮醇，(ii)酮縮二硫醇(dithioketal)衍生物，如通過用硫醇如甲硫醇、乙硫醇或乙-1，2-二硫醇處理式(XVI)化合物形成的酮縮二硫醇，(iii)酮縮一硫醇衍生物，如通過用如1-羥基-乙-2-硫醇處理式(XVI)化合物形成的酮縮一硫醇，(iv)通過用醇胺如麻黃堿處理式(XVI)化合物形成的衍生物，(v)通過用胺處理式(XVI)化合物形成的亞胺，(vi)通過用羥基胺處理式(XVI)化合物形成的肟。作為本發(fā)明的一個(gè)方面，我們要求式(XVI)化合物的此類衍生物。
這些掩蔽衍生物可通過常規(guī)的方法轉(zhuǎn)化回所述酮，如通過用稀酸處理將酮縮醇、亞胺和肟轉(zhuǎn)化為羰基，通過P.C.Bulman Page等(1989)，Tetrahedron，45，7643-7677和其中的參考資料所描述的各種方法將酮縮二硫醇轉(zhuǎn)化為酮。
通過包括以下步驟的方法制備式(XV)化合物(a)使式(XVII)化合物或其鹽烷基化， 其中P為羥基保護(hù)基；或(b)使式(XVIII)化合物酯化；
在步驟(a)中，可以采用類似于上述那些將式(II)化合物轉(zhuǎn)化為式(I)化合物的條件。通常，式(XVII)化合物將在標(biāo)準(zhǔn)條件下與其中L為離去基團(tuán)(如鹵原子、甲磺?；蚣妆交酋；?的式R1-L化合物，如適宜的氟甲基鹵化物反應(yīng)。所述氟甲基鹵化物試劑優(yōu)選為溴氟甲烷。
在步驟(b)中，可以采用類似于上述那些將式(IX)化合物轉(zhuǎn)化為式(VI)化合物的條件。例如，在有機(jī)堿如三乙胺存在下的適宜試劑將為芳基或雜芳基羧酸的活化衍生物如活化的酯，或優(yōu)選為酰鹵如酰氯。
可通過用類似于已經(jīng)描述的方法(如在標(biāo)準(zhǔn)條件下通過與其中L為離去基團(tuán)(如鹵原子、甲磺酰基或甲苯磺?；?的式R1-L化合物，如適宜的氟甲基鹵化物反應(yīng))使相應(yīng)的硫代酸烷基化制備式(XVIII)化合物。當(dāng)R1為-CH2F時(shí)，所述氟甲基鹵化物試劑優(yōu)選為溴氟甲烷。所述相應(yīng)的硫代酸(XI)是已知的化合物或可通過已知方法進(jìn)行制備。作為選擇，可通過保護(hù)相應(yīng)的羥基衍生物制備式(XVIII)化合物。
可通過包括酯化式(XIX)化合物或其鹽的方法制備式(XVII)化合物， 其中P為羥基保護(hù)基。
可用類似于已經(jīng)描述的那些方法進(jìn)行本方法。例如，在有機(jī)堿如三乙胺存在下的適宜試劑將為芳基或雜芳基羧酸的活化衍生物如活化的酯，或優(yōu)選為酰鹵如酰氯。
通過保護(hù)相應(yīng)的羥基衍生物，首先保護(hù)所述硫代酸，然后去保護(hù)，制備式(XIX)化合物。相應(yīng)的羥基衍生物是已知的化合物或可通過已知的方法制備。
通過包括以下步驟的方法制備式(XVI)化合物(a)使式(XX)化合物或其鹽或其中11-羰基被掩蔽的衍生物烷基化； 或者(b)使式(XXI)化合物或其中11-羰基基團(tuán)被掩蔽的衍生物酯化。
在步驟(a)中，可以采用類似于上述那些將式(III)化合物轉(zhuǎn)化為式(II)化合物的條件。式(XX)化合物通常將在標(biāo)準(zhǔn)條件下與其中L為離去基團(tuán)(如鹵原子、甲磺?；蚣妆交酋；?的式R1-L化合物，如適宜的氟甲基鹵化物反應(yīng)。所述氟甲基鹵化物試劑優(yōu)選為溴氟甲烷。
在步驟(b)中，可以采用類似于上述那些將式(IX)化合物轉(zhuǎn)化為式(VI)化合物的條件。例如，在有機(jī)堿如三乙胺存在下的適宜試劑將為芳基或雜芳基羧酸的活化衍生物如活化的酯，或優(yōu)選為酰鹵如酰氯。
可通過用類似于已經(jīng)描述的方法(如通過在標(biāo)準(zhǔn)條件下與其中L為離去基團(tuán)(如鹵原子、甲磺?；蚣妆交酋；?的式R1-L化合物，如適宜的氟甲基鹵化物反應(yīng))使相應(yīng)的硫代酸烷基化制備式(XXI)化合物或其中11-酮基團(tuán)被掩蔽的衍生物。所述氟甲基鹵化物試劑優(yōu)選為溴氟甲烷。所述相應(yīng)的硫代酸是已知的化合物。
可通過包括酯化式(XXII)化合物或其鹽或其中11-酮基團(tuán)被掩蔽的衍生物的方法制備式(XX)化合物。
可用類似于已經(jīng)描述的那些方法進(jìn)行本方法。例如，在有機(jī)堿如三乙胺存在下的適宜試劑將為芳基或雜芳基羧酸的活化衍生物如活化的酯，或優(yōu)選為酰鹵如酰氯。
可通過氧化相應(yīng)的羥基衍生物(IV)(或其類似物)，隨后掩蔽該酮并接著將所述羧酸基團(tuán)轉(zhuǎn)化為硫代酸(參見例如式(IV)化合物轉(zhuǎn)化為(III))制備式(XXII)化合物和其中11-酮被掩蔽的衍生物。
作為選擇，另外一種制備其中R1為-CH2F的式(I)化合物的方法包括式(XXIII)化合物與氟源的反應(yīng)， 其中L為離去基團(tuán)(如氟化物以外的鹵化物如氯化物、碘化物，或磺酸酯如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、triflate)。
所述氟源優(yōu)選為氟化物離子如KF。所述轉(zhuǎn)化的更詳細(xì)資料可通過參考G.H.Phillipps等，(1994)Journal of Medicinal Chemistry，37，3717-3729或J Labelled Compd Radiopharm(1997)39(7)567-584而獲得。
某些式(XXIII)化合物為式(I)化合物?？赏ㄟ^類似于那些本文中所述的方法制備式(XXIII)化合物。作為本發(fā)明的一個(gè)方面，要求相應(yīng)的新中間體式(VI)、(VIII)、(IX)、(IXA)、(XV)和(XVI)化合物，其中的-CH2F部分被-CH2L部分代替(其中L為氟以外的離去基團(tuán))。
作為選擇，制備式(I)化合物或其溶劑合物的另外一種方法包括使其中3-羰基被保護(hù)或掩蔽的式(I)化合物的衍生物去保護(hù)或去掩蔽。
用與上述掩蔽11-羰基位置有關(guān)的類似方法掩蔽所述3-羰基。因此所述3-羰基基團(tuán)可掩蔽為酮縮醇、酮縮一硫醇、酮縮二硫醇、與醇胺形成的衍生物、肟或亞胺。通過常規(guī)的方法可恢復(fù)該羰基，如通過用稀酸處理將酮縮醇轉(zhuǎn)化為羰基，通過P.C.Bulman Page等(1989)，Tetrahedron，45 7643-7677及文中參考資料所述的各種方法將酮縮二硫醇轉(zhuǎn)化為酮。
某些中間體化合物是新的，作為本發(fā)明的一個(gè)方面，我們提供這些化合物以及它們的適宜的鹽和溶劑合物。
所述式(I)化合物和/或其鹽或溶劑合物的優(yōu)點(diǎn)可包括所述物質(zhì)似乎證明具有極好的抗炎性質(zhì)的事實(shí)、具有可預(yù)測(cè)的藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)行為，具有吸引人的副作用(例如通過增加對(duì)糖皮質(zhì)激素受體的選擇性超過對(duì)黃體酮受體的選擇性而證明)并且與病人的常規(guī)治療方案相一致。另外的優(yōu)點(diǎn)可包括所述物質(zhì)具有理想的物理和化學(xué)性質(zhì)，使其容易生產(chǎn)和儲(chǔ)存。
具體實(shí)施例方式
以下非限制性實(shí)施例闡述本發(fā)明
實(shí)施例概要在400MHz記錄1H-NMR波譜并以相對(duì)于四甲基硅烷的ppm表示化學(xué)位移。使用以下縮寫描述信號(hào)的多重性s(單峰)、d(雙峰)、t(三重峰)、q(四重峰、m(多重峰)、dd(二個(gè)雙峰)、dt(二個(gè)三峰)和b(寬峰)。Biotage是指裝有在快速12i層析模塊上進(jìn)行的KP-Sil的預(yù)填充硅膠柱。LCMS在Supelcosil LCABZ+PLUS柱(3.3cm×4.6mmID)上進(jìn)行，用0.1％HCO2H和0.01M乙酸銨水溶液(溶劑A)，及0.05％HCO2H、5％水的乙腈溶液(溶劑B)，使用以下洗脫梯度以3ml/分鐘的流速洗脫0-0.7分鐘0％B，0.7-4.2分鐘100％B，4.2-5.3分鐘0％B，5.3-5.5分鐘0％B。使用電噴射正和負(fù)模式(ES+ve和ES-ve)在FisonsVG Platform分光計(jì)上記錄質(zhì)譜。
中間體中間體16α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸在＜5℃下，用2-呋喃甲酰氯(11.24ml，114mmol)的無水二氯甲烷(100ml)溶液處理6α，9α-二氟-11β，17α-二羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸(按照GB2088877B描述的方法制備)(18g，43.64mmol)在無水二氯甲烷(200ml)和三乙胺(15.94ml，114mmol)中的溶液近40分鐘。在＜5℃下攪拌該溶液30分鐘，過濾收集產(chǎn)生的固體，順序用3.5％碳酸氫鈉水溶液、水、1M鹽酸和水洗滌，并于60℃真空干燥，得到乳白色固體。所述二氯甲烷濾液順序用3.5％碳酸氫鈉水溶液、水、1M鹽酸、水洗滌，干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)，得到乳白色固體，將其與以上分離的固體合并。將合并的固體(26.9g)懸浮在丙酮(450ml)中并攪拌。加入二乙胺(16.8ml，162mmol)并在室溫下攪拌該混合物4.5小時(shí)。濃縮該混合物并過濾收集沉淀，用少量丙酮洗滌。合并洗液和濾液，濃縮并上樣到硅膠Biotage柱上，該柱用24∶1的氯仿∶甲醇洗脫。合并含有極性較強(qiáng)成分的流分并蒸發(fā)得到乳白色固體。將其與以上分離的固體合并，真空干燥得到淺米色固體(19.7g)。將其溶解于溫水中，用濃鹽酸將pH調(diào)節(jié)到2并用乙酸乙酯萃取該混合物。干燥(Na2SO4)該有機(jī)萃取液并蒸發(fā)，在50℃干燥后得到標(biāo)題化合物，為乳白色固體(18.081g，82％)LCMS保留時(shí)間3.88分鐘，m/z 507 MH+，NMR δ(CDCl3)包括7.61(1H，m)，7.18-7.12(2H，m)，6.52(1H，dd，J 4，2Hz)，6.46(1H，s)，6.41(1H，dd，J 10，2Hz)，5.47和5.35(1H，2m)，4.47(1H，bd，J9Hz)，3.37(1H，m)，1.55(3H，s)，1.21(3H，s)，1.06(3H，d，J 7Hz)。
使用類似于制備中間體1的方法制備以下中間體中間體26α，9α-二氟-17α-[(3-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.75分鐘，m/z 507 MH+。
中間體36α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(2-噻吩基羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.93分鐘，m/z 523 MH+。
中間體46α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(3-噻吩基羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.95分鐘，m/z 523 MH+。
中間體517α-(苯甲?；?氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.02分鐘，m/z 517 MH+。
中間體69α-氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16β-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸由11β，17α-二羥基-9α-氟-16β-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸(依照Phillips等，(1994)J.Med.Chem.37，3717-3729中所述制備)制備中間體6。
LCMS保留時(shí)間3.61分鐘，m/z 489 MH+。
中間體76α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(5-甲基噻吩-2-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.01分鐘，m/z 537 MH+。
中間體86α，9α-二氟-11β-羥基-17α-[(異噁唑-5-羰基)氧基]-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.69分鐘，m/z 508 MH+。
中間體917α-[(5-氯噻吩-2-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.36分鐘，m/z 557/559 MH+。
中間體106α，9α-二氟-17α-[(3，5-二甲基異噁唑-4-羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.71分鐘，m/z 536 MH+。
中間體1117α-[(5-氯-4-甲氧基-噻吩-3-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.18分鐘，m/z 587/589 MH+。
中間體126α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α[(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.06分鐘，m/z 539 MH+。
中間體1317α-[(3-溴噻吩-2-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.31分鐘，m/z 601/603 MH+。
中間體1417α-[(2，5-二氯噻吩-3-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.59分鐘，m/z 591/593/595 MH+。
中間體1517α-[(5-溴呋喃-2-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.14分鐘，m/z 585/587 MH+。
中間體166α，9α-二氟-17α-[(2，5-二甲基呋喃-3-羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.02分鐘，m/z 535 MH+。
中間體1717α-[(3-氯噻吩-2-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.27分鐘，m/z 557/559 MH+。
中間體186α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(2-甲基呋喃-3-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.92分鐘，m/z 521 MH+。
中間體196α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(3-甲基呋喃-2-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.85分鐘，m/z 521 MH+。
中間體206α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(5-甲基異噁唑-4-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.74分鐘，m/z 522 MH+。
中間體216α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(1-甲基-1H-吡咯-2-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.78分鐘，m/z 520 MH+。
中間體226α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(1，3-噻唑-4-羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.48分鐘，m/z 524 MH+。
中間體236α，9α-二氟-17α-[(2，4-二甲基-1，3-噻唑-5-羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.72分鐘，m/z 552 MH+。
中間體246α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(5-甲基異噁唑-3-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.72分鐘，m/z 522 MH+。
中間體256α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(3-甲基異噁唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.84分鐘，m/z 522 MH+。
中間體266α，9α-二氟-17α-[(1，3-二甲基-1H-吡唑-5-羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.72分鐘，m/z 535 MH+。
中間體276α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(1，2，3-噻二唑-5-羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.89分鐘，m/z 525 MH+。
中間體286α，9α-二氟-11β-羥基-17α-[(異噁唑-3-羰基)氧基]-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.78分鐘，m/z 508 MH+。
中間體296α，9α-二氟-11β-羥基-17α-[(4-甲氧基-噻吩-3-羰基)氧基]-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.74分鐘，m/z 553 MH+。
中間體306α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[2-甲基-1，3-噻唑-4-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.70分鐘，m/z 538 MH+。
中間體316α，9α-二氟-17α-[(3-乙氧基-噻吩-2-羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.85分鐘，m/z 567 MH+。
中間體326α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(1，2，3-噻二唑-4-羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.70分鐘，m/z 526 MH+。
中間體336α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(1H-吡咯-2-羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.75分鐘，m/z 506 MH+。
中間體346α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(1，3-噻唑-5-羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.29分鐘，m/z 524 MH+。
中間體356α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(1，2，5-噻二唑-3-羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.65分鐘，m/z 525 MH+。
中間體366α，9α-二氟-11β-羥基-17α-[(異噻唑-3-羰基)氧基]-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.44分鐘，m/z 524 MH+。
中間體376α，9α-二氟-11β-羥基-17α-[(異噻唑-5-羰基)氧基]-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.60分鐘，m/z 524 MH+。
中間體386α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(3-甲基噻吩-2-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.31分鐘，m/z 537 MH+。
中間體396α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(4-甲基-1，3-噻唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.19分鐘，m/z 538 MH+。
中間體4017α-[(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間4.33分鐘，m/z 549 MH+。
中間體416α，9α-二氟-17α-[(1-甲基-1H-咪唑-5-羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸LCMS保留時(shí)間3.91分鐘，m/z 521 MH+。
實(shí)施例實(shí)施例16α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯將中間體1(2.5g，4.94mmol)的懸浮液溶解于無水N，N-二甲基甲酰胺(25ml)中并加入碳酸氫鈉(465mg，5.53mmol)。在-20℃攪拌該混合物并加入溴氟甲烷(0.77ml，6.37mmol)并在-20℃攪拌該混合物2小時(shí)。加入二乙胺(2.57ml，24.7mmol)，在-20℃攪拌該混合物30分鐘。將該混合物加入到2M鹽酸(93ml)中并攪拌30分鐘。加入水(300ml)并過濾收集沉淀，用水洗滌并于50℃真空干燥，得到白色固體，將其在丙酮/水中重結(jié)晶，于50℃真空干燥，得到標(biāo)題化合物(2.351g，88％)LCMS保留時(shí)間3.66分鐘，m/z 539 MH+，NMRδ(CDCl3)包括7.60(1H，m)，7.18-7.11(2H，m)，6.52(1H，dd，J 4.2Hz)，6.46(1H，s)，6.41(1H，dd，J10，2Hz)，5.95和5.82(2H dd，J51，9Hz)，5.48和5.35(1H，2m)，4.48(1H，m)，3.48(1H，m)，1.55(3H，s)，1.16(3H，s)，1.06(3H，d，J 7Hz)。
實(shí)施例26α，9α-二氟-17α-[(3-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體2制備實(shí)施例2。
LCMS保留時(shí)間3.72分鐘，m/z 539 MH+。
實(shí)施例36α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(2-噻吩基羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體3制備實(shí)施例3。
LCMS保留時(shí)間3.81分鐘，m/z 555 MH+。
實(shí)施例46α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(3-噻吩基羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體4制備實(shí)施例4。
LCMS保留時(shí)間3.82分鐘，m/z 555 MH+。
實(shí)施例517α-(苯甲?；?氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體5制備實(shí)施例5。
LCMS保留時(shí)間3.73分鐘，m/z 549 MH+。
實(shí)施例69α-氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16β-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體6制備實(shí)施例6。
LCMS保留時(shí)間3.61分鐘，m/z 521 MH+。
實(shí)施例76α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-4-烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯在氫氣氣氛下攪拌實(shí)施例1(500mg，0.93mmol)和Wilkinson’s催化劑(150mg)在甲苯(14ml)和乙醇(7ml)混和物中的溶液23小時(shí)。蒸發(fā)該溶液至干并通過Biotage層析純化殘余物，用乙酸乙酯∶石油醚(1∶2)作為洗脫劑，得到黃色固體(435mg)，重結(jié)晶該固體(乙酸乙酯/石油醚)，得到標(biāo)題化合物(364mg，72％)。
LCMS保留時(shí)間3.57分鐘，m/z 541 MH+。
實(shí)施例86α，9α-二氟-11β-羥基-17α-[(異噁唑-5-羰基)氧基]-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體8制備實(shí)施例8。
LCMS保留時(shí)間3.47分鐘，m/z 540 MH+。
實(shí)施例917α-[(5-氯噻吩-2-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體9制備實(shí)施例9。
LCMS保留時(shí)間3.89分鐘，m/z 589/591 MH+。
實(shí)施例106α，9α-二氟-17α-[(3，5-二甲基異噁唑-4-羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體10制備實(shí)施例10。
LCMS保留時(shí)間3.70分鐘，m/z 568 MH+。
實(shí)施例1117α-[(5-氯-4-甲氧基-噻吩-3-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體11制備實(shí)施例11。
LCMS保留時(shí)間3.99分鐘，m/z 619/621 MH+。
實(shí)施例126α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體12制備實(shí)施例12。
LCMS保留時(shí)間3.74分鐘，m/z 571 MH+。
實(shí)施例1317α-[(3-溴噻吩-2-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體13制備實(shí)施例13。
LCMS保留時(shí)間3.92分鐘，m/z 633/635 MH+。
實(shí)施例1417α-[(2，5-二氯噻吩-3-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體14制備實(shí)施例14。
LCMS保留時(shí)間4.17分鐘，m/z 623/625/627 MH+。
實(shí)施例1517α-[(5-溴呋喃-2-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體15制備實(shí)施例15。
LCMS保留時(shí)間3.78分鐘，m/z 615/617 MH+。
實(shí)施例166α，9α-二氟-17α-[(2，5-二甲基呋喃-3-羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體16制備實(shí)施例16。
LCMS保留時(shí)間3.85分鐘，m/z 576 MH+。
實(shí)施例1717α-[(3-氯噻吩-2-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體17制備實(shí)施例17。
LCMS保留時(shí)間3.88分鐘，m/z 589/591 MH+。
實(shí)施例186α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(2-甲基呋喃-3-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體18制備實(shí)施例18。
LCMS保留時(shí)間3.74分鐘，m/z 553 MH+。
實(shí)施例196α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(3-甲基呋喃-2-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體19制備實(shí)施例19。
LCMS保留時(shí)間3.66分鐘，m/z 553 MH+。
實(shí)施例206α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(5-甲基異噁唑-4-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體20制備實(shí)施例20。
LCMS保留時(shí)間3.60分鐘，m/z 554 MH+。
實(shí)施例216α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(1-甲基-1H-吡咯-2-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體21制備實(shí)施例21。
LCMS保留時(shí)間3.72分鐘，m/z 552 MH+。
實(shí)施例226α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(1，3-噻唑-4-羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體22制備實(shí)施例22。
LCMS保留時(shí)間3.47分鐘，m/z 552 MH+。
實(shí)施例236α，9α-二氟-17α-[(2，4-二甲基-1，3-噻唑-5-羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體23制備實(shí)施例23。
LCMS保留時(shí)間3.51分鐘，m/z 584 MH+。
實(shí)施例246α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(5-甲基異噁唑-3-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體24制備實(shí)施例24。
LCMS保留時(shí)間3.65分鐘，m/z 554 MH+。
實(shí)施例256α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(3-甲基異噁唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體25制備實(shí)施例25。
LCMS保留時(shí)間3.52分鐘，m/z 554 MH+。
實(shí)施例266α，9α-二氟-17α-[(1，3-二甲基-1H-吡唑-5-羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體26制備實(shí)施例26。
LCMS保留時(shí)間3.52分鐘，m/z 567 MH+。
實(shí)施例276α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(1，2，3-噻二唑-5-羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體27制備實(shí)施例27。
LCMS保留時(shí)間3.47分鐘，m/z 557 MH+。
實(shí)施例286α，9α-二氟-11β-羥基-17α-[(異噁唑-3-羰基)氧基]-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體28制備實(shí)施例28。
LCMS保留時(shí)間3.48分鐘，m/z 540 MH+。
實(shí)施例296α，9α-二氟-11β-羥基-17α-[(4-甲氧基-噻吩-3-羰基)氧基]-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體29制備實(shí)施例29。
LCMS保留時(shí)間3.69分鐘，m/z 585 MH+。
實(shí)施例306α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(2-甲基-1，3-噻唑-4-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體30制備實(shí)施例30。
LCMS保留時(shí)間3.47分鐘，m/z 570 MH+。
實(shí)施例316α，9α-二氟-17α-[(3-乙氧基-噻吩-2-羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體31制備實(shí)施例31。
LCMS保留時(shí)間3.68分鐘，m/z 599 MH+。
實(shí)施例326α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(1，2，3-噻二唑-4-羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體32制備實(shí)施例32。
LCMS保留時(shí)間3.30分鐘，m/z 557 MH+。
實(shí)施例336α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(1H-吡咯-2-羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體33制備實(shí)施例33。
LCMS保留時(shí)間3.42分鐘，m/z 528 MH+。
實(shí)施例346α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(1，3-噻唑-5-羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體34制備實(shí)施例34。
LCMS保留時(shí)間3.44分鐘，m/z 556 MH+。
實(shí)施例356α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-[(1，2，5-噻二唑-3-羰基)氧基]-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體35制備實(shí)施例35。
LCMS保留時(shí)間3.53分鐘，m/z 557 MH+。
實(shí)施例366α，9α-二氟-11β-羥基-17α-[(異噻唑-3-羰基)氧基]-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體36制備實(shí)施例36。
LCMS保留時(shí)間3.51分鐘，m/z 556 MH+。
實(shí)施例376α，9α-二氟-11β-羥基-17α-[(異噻唑-5-羰基)氧基]-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體37制備實(shí)施例37。
LCMS保留時(shí)間3.59分鐘，m/z 556 MH+。
實(shí)施例386α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(5-甲基噻吩-2-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體7制備實(shí)施例38。
LCMS保留時(shí)間3.78分鐘，m/z 569 MH+。
實(shí)施例396α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-甲酯將中間體1(507mg，1mmol)的懸浮液溶解于無水N，N-二甲基甲酰胺(5ml)中并加入碳酸氫鈉(92mg，1.1mmol)。在0℃攪拌該混合物并加入碘甲烷(0.125ml，2mmol)，在0-5℃攪拌該混合物2.5小時(shí)。加入二乙胺(0.41ml，4mmol)并在5℃攪拌該混合物30分鐘。將該混合物加入到2M鹽酸(25ml)中，得到白色沉淀。加入水(75ml)并過濾收集沉淀，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(456mg，88％)LCMS保留時(shí)間3.54分鐘，m/z 521 MH+。
實(shí)施例406α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(3-甲基噻吩-2-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體38制備實(shí)施例40。
LCMS保留時(shí)間3.78分鐘，m/z 569 MH+。
實(shí)施例416α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[4-甲基-1，3-噻唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體39制備實(shí)施例41。
LCMS保留時(shí)間3.51分鐘，m/z 570 MH+。
實(shí)施例4217α-[(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基)氧基]-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體40制備實(shí)施例42。
LCMS保留時(shí)間3.64分鐘，m/z 581 MH+。
實(shí)施例436α，9α-二氟-17α-[(1-甲基-1H-咪唑-5-羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲酯使用類似于實(shí)施例1所描述的方法由中間體41制備實(shí)施例43。
LCMS保留時(shí)間3.14分鐘，m/z 553 MH+。
藥理學(xué)活性體外藥理學(xué)活性用糖皮質(zhì)激素激動(dòng)劑活性的體外功能分析評(píng)估藥理學(xué)活性，所述糖皮質(zhì)激素激動(dòng)劑活性通常預(yù)示體內(nèi)的抗炎或抗變應(yīng)活性。
所述功能分析以K.P.Ray等，Biochem J.(1997)，328，707-715所述為基礎(chǔ)。在37℃用適宜劑量的試驗(yàn)化合物處理用報(bào)道基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的A549細(xì)胞1小時(shí)，所述報(bào)道基因含有來自偶合于sPAP(分泌堿性磷酸酶)的ELAM基因啟動(dòng)子的NF-κB效應(yīng)元件。然后用腫瘤壞死因子(TNF，10ng/ml)刺激細(xì)胞16小時(shí)，此時(shí)用標(biāo)準(zhǔn)的比色分析法測(cè)量產(chǎn)生的堿性磷酸酶的量。建立劑量響應(yīng)曲線，從該曲線估計(jì)EC50值。
在該試驗(yàn)中實(shí)施例1-9、11-13、15-22和24-42的化合物顯示出EC50值＜1nM。在該試驗(yàn)中實(shí)施例10、14和23的化合物分別顯示出1、2和17nM的EC50值。
糖皮質(zhì)激素受體(GR)可以以至少兩種不同的機(jī)理發(fā)揮其功能，即通過直接將GR結(jié)合到基因啟動(dòng)子的特定序列上向上調(diào)節(jié)基因表達(dá)，以及通過其直接與GR相互作用向下調(diào)節(jié)基因表達(dá)，該表達(dá)受其它轉(zhuǎn)錄因子(如NFκB或AP-I)驅(qū)動(dòng)。
在上述方法的變形中，為了監(jiān)測(cè)這些功能，產(chǎn)生兩種報(bào)道質(zhì)粒并通過轉(zhuǎn)染分別引入A549人肺上皮細(xì)胞。在合成啟動(dòng)子的控制下第一個(gè)細(xì)胞系含有螢火蟲熒光素酶報(bào)道基因，當(dāng)用TNFα刺激時(shí)所述合成啟動(dòng)子對(duì)轉(zhuǎn)錄因子NFκB的激活作出特異性響應(yīng)。在合成啟動(dòng)子的控制下，第二個(gè)細(xì)胞系含有renilla熒光素酶報(bào)道基因，所述合成啟動(dòng)子包含共有糖皮質(zhì)激素效應(yīng)元件的3個(gè)拷貝，并且對(duì)糖皮質(zhì)激素的直接刺激作出響應(yīng)。通過以1∶1的比率在96孔板中混合兩個(gè)細(xì)胞系(每孔40000細(xì)胞)并在37℃生長(zhǎng)過夜同時(shí)測(cè)量反式激活和反式阻抑。將試驗(yàn)化合物溶解于DMSO中并以0.7％的DMSO終濃度將其加入到所述細(xì)胞中。在孵育1小時(shí)后加入0.5ng/ml TNFα(R&D Systems)，在37℃下再經(jīng)15小時(shí)后，按照生產(chǎn)商的說明用Packard Firelite試劑盒測(cè)量螢火蟲和renilla的熒光素酶水平。建立劑量響應(yīng)曲線，從該曲線確定EC50值。
反式激活(GR)反式阻抑(NFκB)ED50(nM) ED50(nM)實(shí)施例1 0.060.20代謝物(X) ＞250 ＞1000氟替卡松丙酸酯0.070.16黃體酮受體活性的篩選據(jù)報(bào)道在對(duì)黃體酮的響應(yīng)中人乳癌細(xì)胞系T47D向上調(diào)節(jié)內(nèi)生性堿性磷酸酯酶(Di Lorenzo等，Cancer Research(1991)51，4470-4475)。在37℃下將T47D細(xì)胞以每孔1×105細(xì)胞的密度接種在96孔板中并生長(zhǎng)過夜。將類固醇溶解于DMSO中，加入到細(xì)胞中(DMSO的終濃度為0.7％)并在37℃孵育24小時(shí)。然后用PBS洗滌該細(xì)胞并用RIPA緩沖液(1％IGEPAL，0.5％脫氧膽酸鈉，0.1％SDS的磷酸鹽緩沖鹽溶液)使細(xì)胞溶解。用對(duì)硝基苯基磷酸酯(1.5mg/ml)作為底物溶解于1M二乙醇胺、0.28M NaCl、0.5mM MgCl2中，通過分光光度法(405nm)測(cè)量堿性磷酸酯酶的活性。建立劑量響應(yīng)曲線，從該曲線估計(jì)EC50值。
依照上述篩選測(cè)試實(shí)施例12的黃體酮活性并通過用糖皮質(zhì)激素受體的ED50值除黃體酮受體的ED50值確定選擇性。
實(shí)施例12的選擇性為364(與選擇性＝23的氟替卡松丙酸酯相比)。
體內(nèi)的藥理活性以卵清蛋白致敏的Brown Norway大鼠嗜酸性粒細(xì)胞增多模型評(píng)估體內(nèi)的藥理學(xué)活性。設(shè)計(jì)該模型以模擬變應(yīng)原誘導(dǎo)的肺嗜酸性粒細(xì)胞增多，一種在哮喘肺炎中的主要成分。
在卵白蛋白刺激前30分鐘在經(jīng)氣管內(nèi)(IT)給予在鹽水中的懸浮液后，實(shí)施例1在該模型中產(chǎn)生肺嗜酸性粒細(xì)胞增多的依賴劑量的抑制。在單次給予30μg實(shí)施例1后達(dá)到顯著的抑制并且該響應(yīng)顯著(p＝0.016)大于等劑量的氟替卡松丙酸酯在同樣研究中所觀察到的響應(yīng)(實(shí)施例1的69％抑制對(duì)氟替卡松丙酸酯的41％抑制)。
在胸腺退化的大鼠模型中，每日3次經(jīng)IT給予100μg的實(shí)施例1與在同樣研究中給予等劑量的氟替卡松丙酸酯相比，明顯地使胸腺的重量減輕更小(p＝0.004)(實(shí)施例1減輕胸腺重量67％對(duì)氟替卡松丙酸酯減輕胸腺重量78％)。
綜合這些結(jié)果顯示實(shí)施例1比氟替卡松丙酸酯具有更優(yōu)越的治療指數(shù)。
在大鼠和人肝細(xì)胞中的體外代謝將實(shí)施例1與大鼠或人肝細(xì)胞一起培養(yǎng)顯示所述化合物是以與氟替卡松丙酸酯相同方式進(jìn)行代謝，17-β羧酸(X)是產(chǎn)生的唯一重要的代謝產(chǎn)物。對(duì)于將實(shí)施例1與人肝細(xì)胞一起培養(yǎng)(37℃，10μM藥物濃度，來自3個(gè)患者的肝細(xì)胞，0.2和0.7百萬個(gè)細(xì)胞/ml)時(shí)該代謝物出現(xiàn)的速率的研究顯示實(shí)施例1的代謝比氟替卡松丙酸酯快5倍

對(duì)于實(shí)施例1平均代謝物產(chǎn)生102-118pmol/h，而對(duì)于氟替卡松丙酸酯是18.8-23.0pmol/h。
在大鼠中靜脈內(nèi)(IV)或口服給藥后的藥動(dòng)學(xué)對(duì)雄性Wistar Han大鼠口服給予(0.1mg/kg)和靜脈內(nèi)給予(0.1mg/kg)實(shí)施例1并且測(cè)定藥動(dòng)學(xué)參數(shù)?；衔?I)顯示可以忽略的口服生物利用度(0.9％)和47.3ml/分鐘/kg的血漿清除率，接近肝血流(氟替卡松丙酸酯的血漿清除率為45.2ml/分鐘/kg)。
對(duì)雄性Wistar Han大鼠靜脈內(nèi)給予(0.1mg/kg)實(shí)施例4、19、24、25和28并確定血漿清除率分別為49、48、47、46和51ml/分鐘/kg。
在豬中氣管內(nèi)干粉給藥后的藥動(dòng)學(xué)氣管內(nèi)給予麻醉豬(2)一種作為在乳糖(10％w/w)中的干粉混合物的實(shí)施例1(1mg)和氟替卡松丙酸酯(1mg)的均勻混合物。在給藥8小時(shí)后采集系列血樣。在萃取后測(cè)定實(shí)施例1和氟替卡松丙酸酯的血漿水平并用LC-MS/MS方法分析，對(duì)于實(shí)施例1和氟替卡松丙酸酯，所述方法的低限量分別為10和20pg/ml。使用這些方法在給藥后最多2小時(shí)實(shí)施例1是可以計(jì)量的而氟替卡松丙酸酯在給藥后最多8小時(shí)是可以計(jì)量的。兩種化合物在給藥后15分鐘內(nèi)觀察到最大血漿濃度。1γ給藥(0.1mg/kg)所獲得的血漿半衰期數(shù)據(jù)用于計(jì)算實(shí)施例1的AUC(0-inf)值。這補(bǔ)償了IT給藥后僅限于2小時(shí)內(nèi)的實(shí)施例1的血漿分布并消除了因?qū)嵤├?和氟替卡松丙酸酯之間有限數(shù)據(jù)的任何偏差。
與氟替卡松丙酸酯比較，Cmax和AUC(0-inf)值顯示顯著地降低系統(tǒng)對(duì)實(shí)施例1的接觸

在麻醉豬中靜脈內(nèi)給予0.1mg/kg兩種化合物的混合物后，實(shí)施例1和氟替卡松丙酸酯的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)是相同的。在本實(shí)驗(yàn)的豬模型中，這兩種糖皮質(zhì)激素的清除率類似。
除上下文要求外，整個(gè)說明書和之后的權(quán)利要求中的術(shù)語“包括(comprise)”和變換的說法如“comprises”和“comprising”均指包括，并應(yīng)當(dāng)理解包括所述的整體或整體的步驟或基團(tuán)，但不排除任何其它整體或整體的步驟或基團(tuán)或步驟。
本說明書和權(quán)利要求構(gòu)成其一部分的申請(qǐng)可用作任何后來申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)的基礎(chǔ)。此類后來申請(qǐng)的權(quán)利要求可指向任何本文中描述的特征或特征的組合。它們可以采取產(chǎn)品、組合物、方法或用途權(quán)利要求的形式并且可以通過示例的方式?jīng)]有限制性地包括以下權(quán)利要求。
在本申請(qǐng)中描述的專利和專利申請(qǐng)通過引用結(jié)合到本文中。
權(quán)利要求
1.一種式(VII)化合物或其鹽， 其中R2表示-C(＝O)-苯基，所述苯基可被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，或-C(＝O)-雜芳基，所述雜芳基為可被一個(gè)或多個(gè)取代基取代的含有1-3個(gè)選自N、O和S的雜原子的5或6元雜芳環(huán)；R3表示氫、α或β構(gòu)型的甲基或亞甲基；R5表示氫或鹵素；而 表示單鍵或雙鍵。
2.一種式(VIII)化合物， 其中R1表示C1-6烷基或C1-6鹵代烷基；R2、R3、R5和 如權(quán)利要求1所定義。
全文摘要
本發(fā)明提供式(I)化合物及其鹽和溶劑合物，其中R
文檔編號(hào)A61K47/06GK1680425SQ20051005303
公開日2005年10月12日 申請(qǐng)日期2001年8月3日 優(yōu)先權(quán)日2000年8月5日
發(fā)明者K·比加迪克, P·瓊斯, J·J·佩尼 申請(qǐng)人:葛蘭素集團(tuán)有限公司