專利名稱：一種蒲公英中總黃酮的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物活性物質(zhì)的提取方法，具體的是涉及蒲公英中總黃酮的提取方法。
背景技術(shù)：
蒲公英，別名蒲公草、黃花地丁、婆婆丁屬菊科植物蒲公英屬的多種藥用蒲公英的統(tǒng)稱，是一種中草藥?！侗静菥V目》記載“蒲公英主治婦人乳癰腫，水煮汁飲及封之立消。解食毒，散滯氣、清熱毒、化食毒、消惡腫、結(jié)核?！?005年版中國(guó)藥典蒲公英項(xiàng)目中表明蒲公英的功能為清熱解毒、消腫散結(jié)、利尿通淋，用于治療乳癰、目赤、咽痛、肺痛、腸痛等，很多研究表明蒲公英具有廣譜抗菌作用、抗胃損傷作用、保單護(hù)肝作用、抗腫瘤作用、抗內(nèi)毒素作用、免疫調(diào)節(jié)作用、抗氧化自由基作用。 蒲公英中含有多種活性成分，如蒲公英留醇，蒲公英苦素、黃酮類、咖啡酸、綠原酸和多糖等。其中，蒲公英總黃酮對(duì)擬青霉菌和枯草桿菌具有良好的抑菌作用，并具有重要的抗氧化作用，能有效清除超氧陰離子自由基。目前蒲公英總黃酮的提取方法，已經(jīng)取得了很大進(jìn)展，歸納起來(lái)常用的方法是將蒲公英的醇提取物或水提取物懸浮于水中，依次用不同的溶劑萃取，常用的溶劑有氯仿、乙酸乙酯和飽和正丁醇。利用這種方法制取蒲公英中的總黃酮存在的主要問(wèn)題是(I)產(chǎn)品成本高，(2)產(chǎn)品中的雜質(zhì)，特別是有害物質(zhì)的含量較高，其中重金屬含量超過(guò)5ppm，農(nóng)藥殘留量大于lOppb，超過(guò)規(guī)定限度，同時(shí)不可避免地殘留毒性溶劑正丁醇等。中國(guó)專利號(hào)為CN 102133254的專利公開(kāi)了一種蒲公英總黃酮的提取方法，該方法蒲公英粉碎后，經(jīng)20目篩，再與石油醚混合均勻，濾紙過(guò)濾后，同30-50%的乙醇溶液按照料液比1:20-30進(jìn)行混合，搖勻后浸泡I小時(shí)，最后在溫度60-70°C、超聲頻率40KHz下提取20-35min得到總黃酮提取物。該專利進(jìn)行了超聲波處理之后未經(jīng)后處理操作，所得產(chǎn)品純度不夠高，同時(shí)，采用超聲波處理可能會(huì)對(duì)提取物的結(jié)構(gòu)造成影響，并且未進(jìn)行多次提取，導(dǎo)致提取效率偏低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種低成本、低毒性、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)破壞程度低的蒲公英中總黃酮的提取方法，其步驟如下
a.蒲公英去花粉碎后,過(guò)50-70目篩,得到蒲公英粉末，
b.將體積份數(shù)為65%-80%的乙醇溶液和a中所得的蒲公英粉末按照體積質(zhì)量比為3-15L/g混合，加熱回流提取1-5小時(shí)，過(guò)濾，得濾液和濾渣，
c.將b中蒲公英粉末換成b中所得濾渣重復(fù)步驟b—次，完成對(duì)濾渣的二次提取，得二次提取的濾渣和濾液，
d.將b和c中所得濾液減壓濃縮至乙醇濃度為1%_3%，得蒲公英總黃酮流浸膏，
e.步驟d中得到的流浸膏可以進(jìn)一步加入甘草粉末制顆粒，干燥，經(jīng)檢驗(yàn)合格后整粒。按常規(guī)方法制成膠囊劑、顆粒劑、片劑、丸劑等，其中甘草粉末和流浸膏的質(zhì)量比為1:6-10，如此得到的膠囊劑、顆粒劑、片劑或丸劑中總黃酮含量不少于260mg/100g。
上述的步驟b和步驟c中的乙醇還可以含有體積分?jǐn)?shù)2%_15%的有機(jī)酸或者無(wú)機(jī)酸，所述的有機(jī)酸為甲酸、乙酸、甲磺酸、檸檬酸、酒石酸、馬來(lái)酸、富馬酸、蘋果酸、乳酸中的至少一種，所述的無(wú)機(jī)酸為硫酸、鹽酸、磷酸、硝酸、氫溴酸、氫碘酸中的至少一種。上述的步驟b和步驟c中的乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)優(yōu)選為70%，所述的含的酸性物質(zhì)優(yōu)選為8%的乙酸，此優(yōu)選方案是經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證而得的。本方案的有益效果可根據(jù)對(duì)上述方案的敘述得知，由于在該方案中沒(méi)有溶劑萃取，從而降低了產(chǎn)品的成本，同時(shí)，采用低毒性的有機(jī)酸或者無(wú)機(jī)酸，特別是乙酸的采用，減少了有毒物質(zhì)的含量，而減壓濃縮的提取方法，相對(duì)于超聲提取等方法，能更好的保持黃酮等結(jié)構(gòu)不被破壞。由此可見(jiàn)，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步，其實(shí)施的有益效果也是顯而易見(jiàn)的。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行詳細(xì)的說(shuō)明。實(shí)施例1:
凈選去花適當(dāng)粉碎的干燥蒲公英，經(jīng)60目篩后，取2kg置于圓底燒瓶中，加入含有5%甲酸的65%的乙醇15L，加熱回流提取3小時(shí)，過(guò)濾，濾液保留；藥渣以5L上述含2%乙酸的65%的乙醇進(jìn)行二次提取，回流I小時(shí)，過(guò)濾，合并兩次濾液。將濾液減壓濃縮得蒲公英流浸膏1. 82kg，經(jīng)紫外分光光度計(jì)檢測(cè)有效成分蒲公英總黃酮含量為26. 8%。在上述制得的流浸膏中加入甘草粉末0. 30kg制粒、干燥、整粒后制成膠囊劑、片劑或者丸劑，最后得藥劑中總黃酮含量為291mg/100g。實(shí)施例2
凈選去花適當(dāng)粉碎的干燥蒲公英，經(jīng)70目篩后，取2kg置于圓底燒瓶中，加入含有2%乙酸的75%的乙醇20L，加熱回流提取4小時(shí)，過(guò)濾，濾液保留；藥渣以6L上述含2%乙酸的75%的乙醇進(jìn)行二次提取，回流I小時(shí)，過(guò)濾，合并兩次濾液。將濾液減壓濃縮得蒲公英流浸膏1. 95kg，經(jīng)紫外分光光度計(jì)檢測(cè)有效成分蒲公英總黃酮含量為29. 5%。在上述制得的流浸膏中加入甘草粉末0. 32kg制粒、干燥、整粒后制成膠囊劑、片劑或者丸劑，最后得藥劑中總黃酮含量為289mg/100g。實(shí)施例3
凈選去花適當(dāng)粉碎的干燥蒲公英，經(jīng)80目篩后，取2kg置于圓底燒瓶中，加入含有2%乙酸的65%的乙醇15L，加熱回流提取5小時(shí)，過(guò)濾，濾液保留；藥渣以5L上述含2%乙酸的65%的乙醇進(jìn)行二次提取，回流I小時(shí)，過(guò)濾，合并兩次濾液。將濾液減壓濃縮得蒲公英流浸膏1. 98kg，經(jīng)紫外分光光度計(jì)檢測(cè)有效成分蒲公英總黃酮含量為32. 1%。在上述制得的流浸膏中加入甘草粉末0.33kg制粒、干燥、整粒后制成膠囊劑、片劑或者丸劑，最后得藥劑中總黃酮含量為287mg/100g。實(shí)施例4
凈選去花適當(dāng)粉碎的干燥蒲公英，經(jīng)80目篩后，取2kg置于圓底燒瓶中，加入含有2%乙酸的65%的乙醇25L，加熱回流提取5小時(shí)，過(guò)濾，濾液保留；藥渣以5L上述含2%乙酸的65%的乙醇進(jìn)行二次提取，回流5小時(shí)，過(guò)濾，合并兩次濾液。將濾液減壓濃縮得蒲公英流浸膏1. 90kg，經(jīng)紫外分光光度計(jì)檢測(cè)有效成分蒲公英總黃酮含量為34. 6%。
在上述制得的流浸膏中加入甘草粉末0. 31kg制粒、干燥、整粒后制成膠囊劑、片劑或者丸劑，最后得藥劑中總黃酮含量為296mg/100g。
本發(fā)明并不僅限于上述具體實(shí)施方式
，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在本發(fā)明的實(shí)質(zhì)范圍內(nèi)做出的變化、改型、添加或替換，也應(yīng)屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種蒲公英中總黃酮的提取方法，其特征是，該方法包括以下步驟 a.蒲公英去花粉碎后,過(guò)50-70目篩,得到蒲公英粉末，b.將a中蒲公英粉末和乙醇溶液混合，加熱回流提取1-5小時(shí)，過(guò)濾，得濾液和濾渣，c.將b中所得濾渣和乙醇溶液混合，加熱回流提取1-5小時(shí)，過(guò)濾，得濾液和濾渣，d.將b和c中所得濾液減壓濃縮至乙醇濃度為1%_3%，得蒲公英總黃酮流浸膏。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蒲公英中總黃酮的提取方法，其特征是所述的步驟b中乙醇和蒲公英粉末的體積重量比為3-15L/kg。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蒲公英中總黃酮的提取方法，其特征是所述的步驟b和步驟c中的乙醇溶液的體積份數(shù)為65%-80%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蒲公英中總黃酮的提取方法，其特征是所述的步驟b和步驟c中的乙醇還含有體積分?jǐn)?shù)2%-15%的有機(jī)酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蒲公英中總黃酮的提取方法，其特征是所述的步驟b和步驟c中的乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)為70%。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的蒲公英中總黃酮的提取方法，其特征是所述的有機(jī)酸為甲酸、乙酸、甲磺酸、檸檬酸、酒石酸、馬來(lái)酸、富馬酸、蘋果酸、乳酸中的至少一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蒲公英中總黃酮的提取方法，其特征是所述的步驟b和步驟c中乙醇還含有體積分?jǐn)?shù)2%-15%的無(wú)機(jī)酸。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的蒲公英中總黃酮的提取方法，其特征是所述的無(wú)機(jī)酸為硫酸、鹽酸、磷酸、硝酸、氫溴酸、氫碘酸中的至少一種。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蒲公英中總黃酮的提取方法，其特征是所述的步驟b和步驟c中的乙醇還含有體積分?jǐn)?shù)8%的乙酸。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蒲公英中總黃酮的提取方法，其特征是所述的步驟d中得到的總黃酮流浸膏，可以與甘草粉末按質(zhì)量比為6-10 1制粒、干燥、整粒后制成膠囊劑、片劑或者丸劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種生物活性物質(zhì)的提取方法，具體的是涉及蒲公英中總黃酮的提取方法，其步驟為先將蒲公英去花粉碎后，過(guò)篩，得到蒲公英粉末；再將所得的蒲公英粉末和乙醇溶液混合，加熱回流提取，過(guò)濾，得濾液和濾渣，然后將濾渣重復(fù)提取一次，得二次提取的濾渣和濾液，最后將兩次過(guò)濾所得濾液減壓濃縮至乙醇濃度為1%-3%，得蒲公英總黃酮流浸膏，所得的流浸膏可以進(jìn)一步加入甘草粉末制顆粒，干燥，經(jīng)檢驗(yàn)合格后整粒。按常規(guī)方法制成膠囊劑、顆粒劑、片劑、丸劑等。本方法具有低成本、低毒性、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)破壞程度低的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/288GK102988448SQ20121052187
公開(kāi)日2013年3月27日 申請(qǐng)日期2012年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月7日
發(fā)明者張成如 申請(qǐng)人:山東大學(xué)