專利名稱：治療豬藍耳病的中草藥注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療豬病用的中草藥制劑，具體涉及一種治療豬藍耳病的中草藥注射液及其制備方法。
背景技術(shù)：
豬藍耳病即豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的豬的一種高度接觸性傳染病，不同年齡、品種和性別的豬均能感染，但以妊娠母豬和I月齡以內(nèi)的仔豬最易感染。該病以母豬流產(chǎn)、死胎、弱胎、木乃伊胎以及仔豬呼吸困難、敗血癥、高死亡率等為主要特征。因發(fā)病時部分病豬的特征表現(xiàn)是耳部發(fā)紫，故該病又稱為“豬藍耳病”。近年來普遍流行的高致病性豬藍耳病，是由PRRSV變異株引起的一種急性高致死性傳染病，仔豬發(fā)病率可達100%、死亡率可達50 %以上，母豬流產(chǎn)率可達30 %以上，育肥豬也可發(fā)病及死亡；PRRSV感染后，首先在局部的易感巨噬細胞中復制，然后迅速向全身淋巴組織和肺擴散，有時也向其他組織擴散。病毒在細胞內(nèi)增殖，使巨噬細胞破裂，溶解崩潰造成巨噬細胞數(shù)量減少，肺泡壁增厚，淋巴組織呈衰竭狀態(tài)，肺泡巨噬細胞對其他細菌和病毒疫苗的免疫力降低，易繼發(fā)感染豬瘟病毒(CSFV)、多殺性巴氏桿菌(PM)、鏈球菌(SS)、豬副嗜血桿菌(HP)、放線桿菌(AS)、支原體(MHR)、圓環(huán)病毒(PCV-2)等，這是本病與其他疾病混合或繼發(fā)感染的根本原因。同時因為毒株的變異導致免疫細胞識別能力降低，而逃避抗體的中和及細胞毒性T細胞的殺傷作用。因此，有效的防治豬藍耳病的治則是:清熱解毒，抗菌消炎，激活免疫系統(tǒng)，恢復巨噬細胞功能，抑制病毒繁殖，促進巨噬細胞攝取、處理和傳遞抗原，調(diào)節(jié)和增強T/B細胞的反應能力、增加T/B細胞的數(shù)量及促進其發(fā)育成熟，使豬在接種疫苗后能獲得高水平的免疫應答反應。目前，化學藥物增強機體免疫力都不同程度地存在著毒副作用、藥物殘留和階段性用藥達不到理想效果的弊端。中草藥屬于天然、綠色藥物，對動物及人類安全、無毒副作用，并且能從根本上調(diào)節(jié)機體免疫功能。目前中草藥制劑的研究有了較大發(fā)展，治療豬病的 獸用中草藥種類也較多，但能夠有效治療豬藍耳病的中草藥注射液尚未見有報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對上述問題，提供一種能夠有效治療豬藍耳病的中草藥注射液。本發(fā)明的目的還在于提供該中草藥注射液的制備方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是:一種治療豬藍耳病的中草藥注射液，它是由下述重量配比的原料藥制成:金銀花1-2份，連翹2-4份，黃芩1-2份，紫錐菊6-8份，黃芪4_6份。本發(fā)明治療豬藍耳病的中草藥注射液優(yōu)選的原料藥重量配比是:金銀花2份，連翹4份，黃芩2份，紫錐菊7份，黃芪5份。本發(fā)明治療豬藍耳病的中草藥注射液的制備方法包括以下步驟:
(I)按重量配比分別稱取金銀花、連翹、黃芩、紫錐菊、黃芪中草藥飲片，并分別粉碎成中草藥粗粉；
(2)取黃芩、黃芪中草藥粗粉，按步驟(I)得到的中草藥粗粉總重量的7倍加注射水浸泡1-1.5h，加熱煎煮25-35min，再加入金銀花、連翹、紫錐菊中草藥粗粉煎煮25-35 min，傾出第一次煮液，再按步驟(I)得到的中草藥粗粉總重量的5倍加注射水煎煮兩次，每次煎煮25-35min，得到第二次煮液和第三次煮液；
(3)合并步驟(2)得到的三次煮液，過濾，濃縮至每毫升注射水含生藥lg，得到濃縮煮
液；
(4)將步驟(3)得到的濃縮煮液加入3倍重量的濃度為95%的乙醇，邊加入邊攪拌，靜置24h，除去沉淀并回收乙醇，濃縮至每毫升注射水含生藥2g，得到濃縮藥液；
(5)滴加稀氫氧化·鈉使步驟(4)得到的濃縮藥液的pH達到7.0，按所述濃縮藥液重量的0.15%加入活性炭，煮沸25-30min，放置12h，再按所述濃縮藥液重量的1%各加入苯甲醇和吐溫-80，攪勻，G-3號垂熔玻璃漏斗過濾，濾液用注射水補足至每毫升注射水含生藥2g，灌裝，滅菌，即得本發(fā)明治療豬藍耳病的中草藥注射液。本發(fā)明組方中各組份藥理功效是:
1.金銀花功效:金銀花為忍冬科忍冬屬植物忍冬及同屬植物干燥花蕾或初開的花。性甘、寒，氣芳香。歸肺，胃，心，大腸經(jīng)。金銀花含綠原酸，異綠原酸，白果醇，β_谷甾醇，豆甾醇，β_谷留醇-D-葡萄糖甙，豆留醇-D-葡萄糖甙。還含揮發(fā)油，其成分有芳樟醇，左旋-順三甲基-2-乙烯基-5-羥基-四氫吡喃，棕櫚酸乙酯，1，1-聯(lián)二環(huán)已烷，亞油酸甲酯，3-甲基-2- (2-戊烯基)-2_環(huán)戊烯-1-酮，亞麻酸乙酯，順-3-已烯-1-醇，α-松油醇，丁香油酚及香荊芥酚等數(shù)十種。所含成分氯原酸等有機酸及黃酮類物質(zhì)，是其主要的抗菌有效成分。金銀花水煎劑對流感病毒、孤兒病毒、皰疹病毒均有抑制作用，能抑制病毒的復制，延緩病毒所致細胞病變的發(fā)生，并有一定的抗炎解熱、抗內(nèi)毒素作用。此外，尚能促進白細胞吞噬能力，提高淋巴細胞轉(zhuǎn)化率。具有清熱解毒、疏散風熱之功效。主治溫病熱入氣分或營血，身發(fā)斑疹，熱毒癰腫瘡毒。2.連翹功效:連翹又名黃花條、連殼、青翹、落翹、黃奇丹等。味苦，微寒。歸肺、心、小腸經(jīng)。含有連翹酚，連翹甙、連翹甙元，齊墩果酸、白樺脂酸、熊果酸、松脂素、馬苔樹脂醇甙，尚含有多種烴類、醛酮類、醇酯醚類揮發(fā)性成分如α-菔烯、莰烯、β-菔烯等，樟腦、香葉醛，龍腦、α-萜品醇、黃樟醚、芳樟醇、松油烯醇-4、去甲拉帕醇以及香豆素、蘆丁等。連翹對多種革蘭陽性及陰性細菌均有抑制作用。其濃縮煎劑在體外可抑制傷寒桿菌、副傷寒桿菌、大腸桿菌、痢疾桿菌、白喉桿菌及霍亂弧菌、葡萄球菌、鏈球菌等。體外實驗表明連翹對亞洲甲型流感病毒、鼻病毒-17型有抑制作用，連翹子揮發(fā)油在體外對金黃色葡萄球菌也有明顯的抗菌作用，還有明顯抑制金黃色葡萄球菌血漿凝固酶對血漿的凝固作用。有清熱解毒，消腫散結(jié)之功效。用于癰疽，瘰疬，風熱感冒，溫病初起，溫熱入營，高熱煩渴。主治熱病初起，風熱感冒，發(fā)熱等。3.黃芩功效:黃芩別名山茶根、黃芩茶、土金茶根等。為唇形科植物黃芩，以根入藥。味苦，寒。歸肺、膽、脾、大腸、小腸經(jīng)。黃岑根含黃酮類化合物:黃岑素，黃岑新素，黃芩甙，漢黃芩素，漢黃芩甙，木蝴蝶素Α，7-甲氧基黃芩素，二氫木蝴蝶素，白楊素，另外還含β-谷留醇，菜油留醇及豆留醇等有效成分。對痢疾桿菌、大腸桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌、葡萄球菌、溶血性璉球菌等有抑制作用。有清熱燥濕，涼血安胎，解毒之功效。主治溫熱病、上呼吸道感染、肺熱咳嗽、濕熱黃膽、肺炎、痢疾等癥。4.紫錐菊功效:紫錐菊含有多糖、黃酮、咖啡酸的衍生物、精油、多炔、烷基胺和生物堿。紫錐菊有免疫刺激作用，減少發(fā)炎，而且?guī)椭鷻C體對抗細菌和病毒。有關(guān)試驗表明用紫錐菊飼喂動物，可提高嗜中性粒細胞的吞噬能力及外周淋巴細胞的數(shù)量，有效刺激動物機體的免疫活性；將紫錐菊根制成飼料添加劑喂雞，可明顯增加實驗組體重和降低球蟲的感染率。5.黃芪功效:黃芪別稱棉芪，黃耆，獨椹，蜀脂，百本。味甘，微溫。歸肺，脾，肝，腎經(jīng)。含皂甙、黃酮、多糖、多種氨基酸、葉酸及硒、鋅、銅等多種微量元素，具有增強機體免疫功能、保肝、利尿、降壓、抗衰老、抗缺氧、抗輻射、抗應激、耐低溫和耐高溫作用。動物試驗證明，能夠增加網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能，促進抗體形成，提高E-玫瑰花環(huán)率，促進T細胞的分化與成熟，增強NK細胞的細胞毒活性，誘導產(chǎn)生干擾素；對細菌脂多糖誘導的雞外周血B淋巴細胞體外增殖也有明顯的促進作用；有加強毛細血管抵抗力的作用，可對抗組織胺、氯仿造成的毛細血管滲透性增加的現(xiàn)象。黃芪在體外對痢疾桿菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌等有較強的抗菌作用，對動物流感病毒、腺病毒等所致的細胞病變有抑制作用。有益氣固表、斂汗固脫、托瘡生肌、利水消腫之功效。用于治療氣虛乏力，中氣下陷，表虛自汗，癰疽難潰，久潰不斂，血虛萎黃，內(nèi)熱消渴等癥。本發(fā)明組方依據(jù):本組方以扶正祛邪，增強豬抗病、防病能力，提高免疫力為原則。方中金銀花、連翹為清熱、解毒主藥，黃芩為清熱、解毒、抗菌、消炎輔藥，紫錐菊具有免疫刺激作用，減少發(fā)炎，而且可幫助機體對抗細菌和病毒；黃芪有補中益氣，生津養(yǎng)血，扶正祛邪，調(diào)節(jié)機體免疫功能。方中諸藥相和，共奏清熱解毒，抗菌消炎，提高機體免疫力和抗病能力的功效。為增強治療效果，制成注射液。本發(fā)明中草藥注射液適用于由豬藍耳病病毒及其因豬藍耳病病毒感染引起的各種細菌的繼發(fā)感染、藥物使用不當?shù)仍蛞鸬拿庖咭种?。本發(fā)明中草藥注射液具有清熱解毒、抗菌消炎功效，能增強豬抗病、防病能力，提高免疫力，作為治療豬藍耳病的中草藥制劑，具有良好的效果。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明。實施例:
1、分別稱取原料藥(中草藥飲片):金銀花100g，連翹200 g，黃芩100 g，紫錐菊350g，黃苗 250 g ；
2、將上述原料藥分別粉碎成中草藥粗粉；
3、將黃芩、黃芪兩味中草藥粗粉混合，加水7000mL浸泡I h，文火煎煮30 min，再放入金銀花、連翹、紫錐菊中草藥粗粉，文火煎煮30 min，得到第一次煮液，然后再每次加水5000mL煎煮二次，每次煎煮30 min，得到第二次煮液和第三次煮液；
4、合并上述三次煮液，過濾，濃縮至每毫升注射水含生藥lg，得到濃縮煮液，然后加入濃度為95%的乙醇1500 mL，邊加入邊攪拌，靜置24h，去沉淀取上清液，蒸去乙醇，濃縮至每毫升注射水含生藥2g，得到濃縮藥液；
5、滴加稀氫氧化鈉使上述濃縮藥液的pH達到7.0， 加該濃縮藥液重量0.15%的活性炭煮沸30min，放置12h，過濾，按該濃縮藥液重量各加入1%的苯甲醇和吐溫_80，攪勻，G-3號垂榕玻璃漏斗過濾，濾液用注射水補足500mL，灌裝每瓶10mL，100°C >30 min滅菌，即得本發(fā)明治療豬藍耳病的中草藥注射液。利用本發(fā)明進行的一些試驗情況如下:
1、本發(fā)明中草藥注射液對PRRSV的抑制作用
中藥有效成分抗病毒作用的機理，一般認為主要有2條途徑，一是直接殺滅病毒，二是抑制病毒的繁殖。本實驗按抑制病毒的繁殖途徑設(shè)計了 I組試驗，即先接種病毒后加本發(fā)明中草藥注射液以觀察中草藥樣品能否對細胞內(nèi)的PRRSV起抑制作用，即抑制其生物合成及成熟釋放。本發(fā)明中草藥注射液對PRRSV的抑制作用測定實驗是這樣實現(xiàn)的:將100TCID50 PRRSV接種至長成單層猴胚胎腎上皮細胞(Marc-145)的96孔細胞培養(yǎng)板上，
0.1 11117孔，371:吸附1.5 h，棄去PRRSV液，用磷酸鹽緩沖液PBS液洗2次，加入倍比稀釋的單味中藥和本發(fā)明中草藥注射液，0.1 mL/孔，每個稀釋度重復4孔，另設(shè)細胞對照和PRRSV對照，5% C02培養(yǎng)箱37 °C培養(yǎng)，結(jié)果見表I。試驗結(jié)果表明，金銀花、連翹、黃芩、紫錐菊、黃芪水提物對PRRSV在Marc-145細胞上的增殖具有明顯的抑制作用，5種單味中藥提取物分別在 0.25 mg/mL、0.25 mg/mL、0.25 mg/mL、0.125 mg/mL 濃度時仍具有顯著的抑制 CPE 作用，其中紫錐菊水提物對PRRSV引起的細胞病變CPE最小抑制濃度最低，為0.0625 mg/mL ；本發(fā)明中草藥注射液對PRRSV引起的CPE最小抑制濃度也最低，為0.0625 mg/mL。表I本發(fā)明中草藥注射液對PRRSV在Marc-145細胞上增殖的抑制作用
權(quán)利要求
1.一種治療豬藍耳病的中草藥注射液，其特征在于它是由下述重量配比的原料藥制成:金銀花1-2份，連翹2-4份，黃芩1-2份，紫錐菊6-8份，黃芪4-6份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療豬藍耳病的中草藥注射液，其特征在于它是由下述重量配比的原料藥制成:金銀花2份，連翹4份，黃芩2份，紫錐菊7份，黃芪5份。
3.一種治療豬藍耳病的中草藥注射液的制備方法，其特征在于它包括以下步驟: (1)按重量配比分別稱取金銀花、連翹、黃芩、紫錐菊、黃芪中草藥飲片，并分別粉碎成中草藥粗粉； (2)取黃芩、黃芪中草藥粗粉，按步驟(I)得到的中草藥粗粉總重量的7倍加注射水浸泡1-1.5h，加熱煎煮25-35min，再加入金銀花、連翹、紫錐菊中草藥粗粉煎煮25-35 min，傾出第一次煮液，再按步驟(I)得到的中草藥粗粉總重量的5倍加注射水煎煮兩次，每次煎煮25-35min，得到第二次煮液和第三次煮液； (3)合并步驟(2)得到的三次煮液，過濾，濃縮至每毫升注射水含生藥lg，得到濃縮煮液； (4)將步驟(3)得到的濃縮煮液加入3倍重量的濃度為95%的乙醇，邊加入邊攪拌，靜置24h，除去沉淀并回收乙醇，濃縮至每毫升注射水含生藥2g，得到濃縮藥液； (5)滴加稀氫氧化鈉使步驟(4)得到的濃縮藥液的pH達到7.0，按所述濃縮藥液重量的0.15%加入活性炭，煮沸25-30min，放置12h，再按所述濃縮藥液重量的1%各加入苯甲醇和吐溫-80，攪勻，G-3號垂熔玻璃漏斗過濾，濾液用注射水補足至每毫升注射水含生藥2g，灌裝，滅菌，即得本發(fā) 明治療豬藍耳病的中草藥注射液。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療豬藍耳病的中草藥注射液及其制備方法，該中草藥注射液由下述重量配比的原料藥制成金銀花1-2份，連翹2-4份，黃芩1-2份，紫錐菊6-8份，黃芪4-6份。上述原料經(jīng)過粉碎，配料，三次水煮浸提，合并三次濾液，濃縮后醇沉，調(diào)pH，活性炭脫色，吐溫-80助溶，按定量加入防腐劑，攪勻，過濾，灌裝，滅菌，制成本發(fā)明治療豬藍耳病的中草藥注射液。本發(fā)明中草藥注射液對治療豬藍耳病有很好的效果。
文檔編號A61P31/14GK103142702SQ20131009168
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月21日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月21日
發(fā)明者史秋梅, 高桂生, 楊彩然, 沈萍, 張艷英, 高光平 申請人:河北科技師范學院