專利名稱：一種囊泡式藥物納米粒的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地說涉及一種囊泡式藥物納米粒的 制備方法。
背景技術(shù)：
據(jù)統(tǒng)計，目前至少有40%的藥物因水溶性問題而使用受限，一些藥物甚至難溶于有機溶剤。對于BCS第2和4類難溶性藥物，用于靜脈注射給藥吋，必須使用水性介質(zhì)。為了提高藥物水溶性和載藥量，常在處方中使用非水溶剤、增溶劑等，使得生物毒性和生物相容性等問題顯得相當(dāng)突出，如紫杉醇注射液使用了聚氧こ基代蓖麻油，多西他賽注射液使用吐溫-80和こ醇。1995年Milller等提出了一種新的藥物傳輸系統(tǒng)——納米混懸劑(nanosuspensions)。納米混懸劑是采用少量的表面活性劑或聚合物材料穩(wěn)定的“純”藥物粒子分散于液體中形成的一種亞微米膠體分散體系，既適用于水難溶性藥物，也適用于油水均難溶性藥物。它適合于各種難溶性藥物，尤其是高分子量、高熔點、低溶解度的藥物，即“磚灰型”藥物。由于納米混懸劑僅少量使用了聚合物材料和表面活性剤，盡可能地降低了輔料的毒副作用，因此有效地降低了傳統(tǒng)制劑中附加成分造成的刺激性和毒副作用。此外納米混懸劑提高制劑載藥量和藥物穩(wěn)定性，降低給藥體積；還有，經(jīng)過表面修飾可以將納米混懸劑制備成受體介導(dǎo)、抗體介導(dǎo)或PH敏感等主動靶向性制劑；同時還可以制備成緩控釋、長循環(huán)制劑。目前文獻報道和上市的藥物納米混懸劑有多種給藥途徑，如ロ服、注射、眼部、肺部給藥和經(jīng)皮給藥。ロ服給藥和肺部給藥納米混懸劑能提高難溶性藥物的溶解度和溶出速率，從而增加難溶性藥物的生物利用度。而眼部給藥和經(jīng)皮給藥納米混懸劑具有藥物貯庫和高滲透性的特性，體內(nèi)多表現(xiàn)為緩釋、長效的特征。注射給藥納米混懸劑擁有高載藥量、高穩(wěn)定性、低毒性等特點，依據(jù)粒徑的大小不同，注射給藥后的體內(nèi)行為有很大的差異，如國內(nèi)聞嘉等人制備的兩種粒徑分別為103nm,897nm的冬凌早素(ORI)納米混懸劑就是一個典型的例子，凍干固化后溶出測定結(jié)果表明前者在IOmin時即可完全溶出，而后者在2h時只溶出85. 2%，另外體內(nèi)藥動學(xué)實驗表明粒徑前者的AUC與MRT等同于溶液劑，而后者的AUC與MRT分別增加了 I倍和4倍，相對于溶液劑有明顯的緩釋效果。近幾年，納米混懸劑的國內(nèi)外研究主要集中于基礎(chǔ)理論、制備方法、理化性質(zhì)的表征、體內(nèi)外行為的研究。根據(jù)目前基礎(chǔ)理論研究可知，納米混懸劑的穩(wěn)定性主要來自于靜電排斥和/或空間位阻兩種作用，其中空間位阻作用占主導(dǎo)地位，如Anchalee Ain-Ai等人在研究萘普生納米混懸劑時，發(fā)現(xiàn)高濃度的單ー鹽酸精氨酸(靜電排斥型穩(wěn)定劑)也不足以穩(wěn)定高濃度的藥物納米粒(300mg/ mL),而4% (w/v)的輕丙基纖維素(空間位阻型穩(wěn)定劑)就足以穩(wěn)定300mg/mL的藥物納米粒，另外兩者聯(lián)合使用時能使更高濃度(900mg/mL)的藥物納米粒穩(wěn)定?？臻g位阻穩(wěn)定作用不僅受到穩(wěn)定劑在納米粒表面的覆蓋程度的影響，更重要的是依賴于穩(wěn)定劑與藥物納米粒表面之間的作用力，它主要包括穩(wěn)定劑與藥物表面之間的范德華力、氫鍵和疏水相親力。范德華カ依賴原子間的距離，是ー種比較弱的、非特異性的作用力，穩(wěn)定效果較差；而氫鍵是由穩(wěn)定劑和藥物納米粒表面的氫鍵供體、受體的多少及各自的氫鍵結(jié)合能力來實現(xiàn)的，這就要求氫鍵供體和受體同時分布在穩(wěn)定劑和藥物納米粒表面上，并有很強的氫鍵結(jié)合能力，這一點已經(jīng)由Raghavan等人在研究卡馬西平納米混懸劑時證明。相比較來說，疏水相親カ雖然也依賴于兩種組分各自的疏水性，即兩者的疏水性越強，疏水親和カ就越強，制劑就越穩(wěn)定，但是Bernard Van Eerdenbrugh等人通過試驗已經(jīng)證明，単獨改變某個組分的疏水性就能明顯提高制備納米混懸劑的成功率和貯存穩(wěn)定性。但是對于難溶性的模型藥物來說，本身的疏水性是固有的、不可改變的，因此為了制備其穩(wěn)定的納米混懸劑，選擇強疏水性的穩(wěn)定劑、提高穩(wěn)定劑的吸附緊密性是極為必要的。目前人們對常用穩(wěn)定劑的改造、新型穩(wěn)定劑的設(shè)計、應(yīng)用及其分子作用機制的研究上仍然是一片空白，因此本發(fā)明借鑒聚合物膠束的形成機理，合成了一種以兩親性嵌段共聚物為穩(wěn)定劑， 并聯(lián)合層層組合(layer-by-layer assembly, LBL組合)技術(shù)制備了新型納米混懸劑-囊
核式納米混懸劑，此囊核式納米混懸劑不僅具有良好的穩(wěn)定性，還能達(dá)到釋藥速度準(zhǔn)確可控的作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種囊泡式藥物納米粒的制備方法。具有簡單、快速、耗能少、易規(guī)?；奶攸c，從而提供ー種解決難溶性藥物的低溶解度、高毒副作用、低生物利用度問題的制劑化方法和ー種開發(fā)難溶性藥物的新劑型。本發(fā)明的制備方法采用如下技術(shù)方案⑴設(shè)計功能性穩(wěn)定劑；⑵對功能性穩(wěn)定劑進行化學(xué)合成；(3)將模型藥物溶于ー種良溶劑中形成藥物溶液，功能性穩(wěn)定劑溶于另ー種溶劑中形成含穩(wěn)定劑的藥物不良溶液；(4)把藥物溶液與非良溶劑(即穩(wěn)定劑溶液)混合，自組裝形成平均有效粒徑小于IMffl的囊泡式納米結(jié)晶混懸液；(5)選擇多種模型藥物，研究藥物種類對制劑穩(wěn)定性的影響以及制劑的適用范圍。功能化穩(wěn)定劑的設(shè)計與合成過程以各種氨酸作為原料，通過聚合反應(yīng)制備聚氨酸類共聚物，并于末端處鍵合親水性高分子化合物，以將其轉(zhuǎn)化為兩親性共聚物。然后對兩親性共聚物進行功能性修飾，如采用PEG化、受體(如葉酸和半乳糖)或抗體(如抗人類表皮生長因子受體2抗體(Anti-HER2)和BI單克隆抗體)共價鍵合等技術(shù)制備成功能化穩(wěn)定齊 。功能化囊核式納米混懸劑制備過程將部分功能化穩(wěn)定劑與非功能化穩(wěn)定劑混合，全部或部分的隨藥物一起加入到良溶劑中，也可以加入到非良溶劑中，或者將兩種穩(wěn)定劑分別加入到良溶劑和非良溶劑中。在輕微的攪拌下將兩種溶液混合，使藥物與不良溶劑后形成微小的納米粒，而穩(wěn)定劑自組裝成膠束形式圍繞在納米粒，制備成具有控釋、靶向性的穩(wěn)定的囊核式納米混懸劑。其具體步驟為
I)聚氨基酸類嵌段(兩親性)共聚物的合成和エ藝優(yōu)化
以天冬氨酸等氨基酸類化合物作為原料，通過多分子單體聚合反應(yīng)制備成聚氨酸類嵌段(兩親性)共聚物，并于末端處鍵合親水性高分子化合物，以將其轉(zhuǎn)化為兩親性衍生物。此外控制反應(yīng)條件，選擇性提高產(chǎn)率、簡化操作。如采用苯甲醇保護的こ酰化天冬氨酸作為原料，通過開環(huán)聚合作用合成聚天冬氨酸，并用氨基化的親水性高分子化合物(如軟骨素-NH2、透明質(zhì)酸-NH2、殼聚糖-NH2等)終止反應(yīng)，兩步合成聚天冬氨酸類嵌段(兩親性)共聚物，再用堿水解法脫去保護基苯甲醇，最后通過各種常規(guī)方法(如滲析法、溶劑萃取法、溶劑重結(jié)晶法等)進行精制。2)功能化聚氨基酸類嵌段(兩親性)共聚物的合成
采用PEG化、受體( 如葉酸和半乳糖)或抗體(如抗人類表皮生長因子受體2抗體(Anti-HER2)和BI單克隆抗體)共價鍵合等技術(shù)制備成功能化穩(wěn)定劑。3)穩(wěn)定劑溶液的配制將全部或部分穩(wěn)定劑加到良溶劑中，50°C，300 rpm條件下加熱并攪拌，至穩(wěn)定劑完全溶解，0. 22Mm膜過濾,備用；剩余部分穩(wěn)定劑溶于不良溶劑中，制成含有穩(wěn)定劑的不良溶剤。4)藥物溶液的配制將藥物加到上述含有穩(wěn)定劑的良溶劑中，50°C，300 rpm條件下加熱并攪拌，至藥物完全溶解，繼續(xù)攪拌15min，放冷，0. 22Mm膜過濾，備用。5)功能化囊核式納米混懸劑的制備將過濾好的藥物溶液在5000-10000rpm攪拌條件下以3-5ml/s的速度注入穩(wěn)定劑溶液，同時保持穩(wěn)定劑溶液的溫度在0°C _5°C范圍內(nèi)，藥液加完后，維持同樣的條件繼續(xù)攪拌15min，制成功能化囊核式納米混懸劑。采用適當(dāng)?shù)姆椒ǔチ既軇詈笤僦苽涑筛鞣N形式的制劑。6)分裝用5ml安瓿取最后產(chǎn)品2ml測粒徑,其余樣品冷卻至1°C以下，向混懸液中充氮氣lOmin，但其要經(jīng)過0. 22Mm膜過濾，測粒徑后將每IOml混懸液分裝于西林瓶中，備用。7)凍干將樣品在_80°C下快速冷凍，并保持24h，然后在_40°C下凍干10h，接著快速升溫至_25°C，凍干6h，封裝即可。良溶劑可以選自N_甲基吡咯烷酮、2-吡咯烷酮、ニ甲基こ酰胺、乳酸、ニ甲基亞砜、甲醇、こ醇、異丙醇、丙醇、甘油、丙ニ醇、こニ醇、丁ニ醇、丙酮、ニ甲基甲酰胺、聚こニ醇、聚こニ醇酯、聚丙ニ醇等溶劑中的ー種或ー種以上的混合物；氨基酸類化合物可選自天冬氨酸、芐基天冬氨酸(PBLA)、聚谷氨酸、聚L-賴氨酸、聚組氨和聚精氨酸等化合物中的ー種或ー種以上的混合物。藥物納米粒制備技術(shù)在藥物溶液與不良溶劑混合過程中，應(yīng)嚴(yán)格控制穩(wěn)定劑的濃度和存在形式，可以選擇在藥物溶液和不良溶劑中加入一定量的穩(wěn)定劑，或者在藥物溶液中加入大量的穩(wěn)定劑。兩種溶劑混合時可以選擇高速分散勻質(zhì)機、超聲分散儀等快速分散混合儀。藥物納米粒制備技術(shù)最后制成的劑型可以是注射劑、凍干粉針劑、凝膠劑、粘膜黏附劑等各種劑型。本發(fā)明的優(yōu)點在于將難溶性藥物制成“純藥物”納米粒，可以提高藥物的飽和溶解度，從而提高藥物的血管外用藥的生物利用度；本發(fā)明是以較少量的輔料來穩(wěn)定高藥物含量的制劑，因此可以大幅度降低藥物制劑的使用體積，結(jié)果起到降低制劑中賦形劑、溶劑和增溶劑等輔料所引起的劑量依賴性毒副作用；另外，本發(fā)明中研究的制備方法具有エ藝簡單、制劑穩(wěn)定性好的特點；本發(fā)明中的納米粒具有被動靶向和緩控釋作用。
具體實施例方式 下面的實例將為本發(fā)明作進ー步闡明。
實施例I羥基喜樹堿囊核式混懸液的制備
本發(fā)明在每IOOml羥基喜樹堿囊核式納米混懸液中含有以下組分
輕基喜樹堿500mg, ニ甲基亞砜I. 5ml,穩(wěn)定劑O. 2g,等滲調(diào)節(jié)劑2. 2g,其余為水。所述的穩(wěn)定劑為聚天冬氨酸-軟骨素嵌段共聚物，所述等滲調(diào)節(jié)劑為甘油。制備方法
I.聚天冬氨酸嵌段(兩親性)共聚物的合成和エ藝優(yōu)化
以苯甲醇保護天冬氨酸，然后進行N-羧酸酐化，再通過開環(huán)聚合作用合成聚天冬氨酸，并用氨基化的親水性高分子化合物軟骨素-NH2終止反應(yīng)，兩步合成聚天冬氨酸-軟骨素嵌段共聚物，再用堿水解法脫去保護基苯甲醇，最后通過各種常規(guī)方法(如滲析法、溶劑萃取法、溶劑重結(jié)晶法等)進行精制。2.功能化聚天冬氨酸-軟骨素嵌段共聚物的合成
采用共價鍵合等技木，以PEG鏈對聚天冬氨酸軟骨素-嵌段共聚物進行PEG化修飾，制備成PEG化的聚天冬氨酸-軟骨素嵌段共聚物，用作長循環(huán)化穩(wěn)定劑。3.穩(wěn)定劑溶液的配制將全部或部分穩(wěn)定劑(包括1/5的長循環(huán)化穩(wěn)定劑)加到良溶劑中，50°C,300 rpm條件下加熱并攪拌,至穩(wěn)定劑完全溶解,O. 22Mm膜過濾,備用；剩余部分穩(wěn)定劑溶于不良溶劑中，制成含有穩(wěn)定劑的不良溶劑。4.藥物溶液的配制將藥物加到上述含有穩(wěn)定劑的良溶劑中，50°C，300 rpm條件下加熱并攪拌，至藥物完全溶解，繼續(xù)攪拌15min，放冷，O. 22Mm膜過濾，備用。5.功能化囊核式納米混懸劑的制備將過濾好的藥物溶液在6000rpm攪拌條件下以3ml/s的速度注入穩(wěn)定劑溶液，同時保持穩(wěn)定劑溶液的溫度在0°C _5°C范圍內(nèi)，藥液加完后，維持同樣的條件繼續(xù)攪拌15min，制成功能化囊核式納米混懸劑。采用適當(dāng)?shù)姆椒ǔチ既軇?，最后再制備成各種形式的制劑。6.分裝用5ml安瓿取最后產(chǎn)品2ml測粒徑，其余樣品冷卻至1°C以下，向混懸液中充氮氣lOmin，但其要經(jīng)過O. 22ΜΠ1膜過濾，測粒徑后將每IOml混懸液分裝于西林瓶中，備用。7.凍干將樣品在-80°C下快速冷凍，并保持24h，然后在-40°C下凍干10h，接著快速升溫至_25°C，凍干6h，封裝即可。實施例2紫杉醇囊核式納米混懸液的制備
本發(fā)明在每IOOml紫杉醇囊核式納米混懸液中含有以下組分
紫杉醇O. 3g,こ醇6ml,穩(wěn)定劑O. lg，等滲調(diào)節(jié)劑2. Og,其余為水。所述的穩(wěn)定劑為聚谷氨酸-透明質(zhì)酸嵌段共聚物和Anti-HER2修飾的聚谷氨酸-透明質(zhì)酸嵌段共聚物，所述等滲調(diào)節(jié)劑為甘油。制備方法
I.聚谷氨酸嵌段(兩親性)共聚物的合成和エ藝優(yōu)化
以苯甲醇保護谷氨酸，然后進行N-羧酸酐化，再通過開環(huán)聚合作用制備成聚谷氨酸，并用氨基化的親水性高分子化合物透明質(zhì)酸終止反應(yīng)，兩步合成聚谷氨酸-透明質(zhì)酸共聚物，再用堿水解法脫去保護基苯甲醇，最后通過滲析法進行精制。2.功能化聚谷氨酸-透明質(zhì)酸嵌段共 聚物的合成
采用共價鍵合等技木，以Anti-HER2為靶向因子對聚谷氨酸_透明質(zhì)酸嵌段共聚物進行靶向性修飾，制備成Anti-HER2修飾的聚谷氨酸-透明質(zhì)酸嵌段共聚物，用作靶向性穩(wěn)定齊U。3.穩(wěn)定劑溶液的配制將全部或部分穩(wěn)定劑(包括1/10的Anti_HER2修飾的靶向性穩(wěn)定劑)加到良溶劑中，50°C,300 rpm條件下加熱并攪拌,至穩(wěn)定劑完全溶解,0. 22Mm膜過濾，備用；剩余部分穩(wěn)定劑溶于不良溶劑中，制成含有穩(wěn)定劑的不良溶剤。4.藥物溶液的配制將藥物加到上述含有穩(wěn)定劑的良溶劑中，50°C，300 rpm條件下加熱并攪拌，至藥物完全溶解，繼續(xù)攪拌15min，放冷，0. 22Mm膜過濾，備用。5.功能化囊核式納米混懸劑的制備將過濾好的藥物溶液在5000-10000rpm攪拌條件下以3-5ml/s的速度注入穩(wěn)定劑溶液，同時保持穩(wěn)定劑溶液的溫度在0°C _5°C范圍內(nèi)，藥液加完后，維持同樣的條件繼續(xù)攪拌15min，制成功能化囊核式納米混懸劑。采用適當(dāng)?shù)姆椒ǔチ既軇詈笤僦苽涑筛鞣N形式的制劑。 6.分裝用5ml安瓿取最后產(chǎn)品2ml測粒徑，其余樣品冷卻至1°C以下，向混懸液中充氮氣lOmin，但其要經(jīng)過0. 22Mm膜過濾，測粒徑后將每IOml混懸液分裝于西林瓶中，備用。7.凍干將樣品在-80°C下快速冷凍，并保持24h，然后在-40°C下凍干10h，接著快速升溫至_25°C，凍干6h，封裝即可。實施例3冬凌草甲素囊核式納米混懸液的制備
本發(fā)明在每IOOml冬凌草甲素囊核式納米混懸液中含有以下組分
冬凌草甲素lg，N-甲基吡咯烷酮10ml，穩(wěn)定劑0. 2g(包含靶向性穩(wěn)定劑50mg)，等滲調(diào)節(jié)劑2. 0g，其余為水。所述的穩(wěn)定劑為聚組氨酸-殼聚糖嵌段共聚物和葉酸修飾的聚組氨酸-殼聚糖嵌段共聚物，所述等滲調(diào)節(jié)劑為甘露醇。I.聚組氨酸嵌段(兩親性)共聚物的合成和エ藝優(yōu)化
以氯甲酸芐酯保護L-組氨酸的氨基，生成的中間體在堿性條件下與2，4_ ニ硝基氟苯發(fā)生親核取代反應(yīng)得到化合物Na-CBZ-Nim-DNP-L-組氨酸，在氯化亞砜的作用下，Na-CBZ-Nim-DNP-L-組氨酸發(fā)生分子內(nèi)縮合，生成酸酐Nim-DNP-L-組氨酸酸酐鹽酸鹽。Nim-DNP-L-組氨酸酸酐鹽酸鹽以己氨或異丙胺作為引發(fā)劑進行聚合反應(yīng)，得到不同分子量的聚合物聚Nim-DNP-L-組氨酸，用R-SH脫去DNP保護基，得到聚組氨酸。在DCC的作用下，聚組氨酸再與單羧酸-殼聚糖發(fā)生?；磻?yīng)，得到目標(biāo)產(chǎn)物聚L-組氨酸-殼聚糖嵌段共聚物。2.功能化聚組氨酸-殼聚糖嵌段共聚物的合成
采用共價鍵合等技術(shù)，以葉酸為靶向因子對聚組氨酸-殼聚糖嵌段共聚物進行靶向性修飾，制備成葉酸修飾的聚組氨酸-殼聚糖嵌段共聚物，用作靶向性穩(wěn)定劑。3.穩(wěn)定劑溶液的配制將全部或部分穩(wěn)定劑(包括1/4的葉酸修飾的靶向性穩(wěn)定劑)加到良溶劑中，500C, 600 rpm條件下加熱并攪拌,至穩(wěn)定劑完全溶解，0. 22Mm膜過濾,備用；剩余部分穩(wěn)定劑溶于不良溶劑中，制成含有穩(wěn)定劑的不良溶剤。4.藥物溶液的配制將藥物加到上述含有穩(wěn)定劑的良溶劑中，50°C，600 rpm條件下加熱并攪拌，至藥物完全溶解，繼續(xù)攪拌15min，放冷，0. 22Mm膜過濾，備用。5.功能化囊核式納米混懸劑的制備將過濾好的藥物溶液在IOOOOrpm攪拌條件下以5ml/s的速度注入穩(wěn)定劑溶液，同時保持穩(wěn)定劑溶液的溫度在(TC _5°C范圍內(nèi)，藥液加完后，維持同樣的條件繼續(xù)攪拌15min，制成功能化囊核式納米混懸劑。采用適當(dāng)?shù)姆椒ǔチ既軇詈笤僦苽涑筛鞣N形式的制劑。6.分裝用5ml安瓿取最后產(chǎn)品2ml測粒徑,其余樣品冷卻至1°C以下，向混懸液中充氮氣lOmin，但其要經(jīng)過O. 22ΜΠ1膜過濾，測粒徑后將每IOml混懸液分裝于西林瓶中，備用。
7.凍干將樣品在-80°C下快速冷凍，并保持24h，然后在-40°C下凍干10h，接著快速升溫至_25°C，凍干6h，封裝即可。實施例4長春新堿囊核式納米混懸液的制備
本發(fā)明在每IOOml長春新堿囊核式納米混懸液中含有以下組分
長春新堿300mg, ニ甲基甲酰胺2ml,穩(wěn)定劑IOOmg (包含革巴向性穩(wěn)定劑20mg),等滲調(diào)節(jié)劑2. Og,其余為水。所述的穩(wěn)定劑為聚天冬氨酸-軟骨素嵌段共聚物和BI單克隆抗體修飾的聚天冬氨酸-軟骨素嵌段共聚物(4:1)，所述等滲調(diào)節(jié)劑為聚こニ醇。I.聚天冬氨酸嵌段(兩親性)共聚物的合成和エ藝優(yōu)化
以苯甲醇保護天冬氨酸，然后進行N-羧酸酐化，再通過開環(huán)聚合作用合成聚天冬氨酸，并用氨基化的親水性高分子化合物軟骨素-NH2終止反應(yīng)，兩步合成聚天冬氨酸-軟骨素嵌段共聚物，再用堿水解法脫去保護基苯甲醇，最后通過滲析法進行精制。2.功能化聚天冬氨酸-軟骨素嵌段共聚物的合成
采用共價鍵合等技術(shù)，以BI單克隆抗體為靶向因子對聚天冬氨酸軟骨素嵌段共聚物進行靶向性修飾，制備成BI單克隆抗體修飾的聚天冬氨酸-軟骨素嵌段共聚物，用作靶向性穩(wěn)定劑。3.穩(wěn)定劑溶液的配制將全部或部分穩(wěn)定劑(包括1/5的BI單克隆抗體修飾的靶向性穩(wěn)定劑)加到良溶劑中，50°C,500 rpm條件下加熱并攪拌,至穩(wěn)定劑完全溶解,O. 22Mm膜過濾，備用；剩余部分穩(wěn)定劑溶于不良溶劑中，制成含有穩(wěn)定劑的不良溶剤。4.藥物溶液的配制將藥物加到上述含有穩(wěn)定劑的良溶劑中，50°C，500 rpm條件下加熱并攪拌，至藥物完全溶解，繼續(xù)攪拌15min，放冷，O. 22Mm膜過濾，備用。5.功能化囊核式納米混懸劑的制備將過濾好的藥物溶液在8000rpm攪拌條件下以3-3. 5ml/s的速度注入穩(wěn)定劑溶液，同時保持穩(wěn)定劑溶液的溫度在0°C _5°C范圍內(nèi)，藥液加完后，維持同樣的條件繼續(xù)攪拌15min，制成功能化囊核式納米混懸劑。采用適當(dāng)?shù)姆椒ǔチ既軇?，最后再制備成各種形式的制劑。6.分裝用5ml安瓿取最后產(chǎn)品2ml測粒徑,其余樣品冷卻至1°C以下，向混懸液中充氮氣lOmin，但其要經(jīng)過O. 22ΜΠ1膜過濾，測粒徑后將每IOml混懸液分裝于西林瓶中，備用。7.凍干將樣品在-80°C下快速冷凍，并保持24h，然后在-40°C下凍干10h，接著快速升溫至_25°C，凍干6h，封裝即可。證明本發(fā)明的有益技術(shù)效果的實驗數(shù)據(jù)
對于羥基喜樹堿囊核式納米混懸液，其載藥量為O. 5%(w/v)，最大耐受量為15mg/kg，4°C儲存24個月穩(wěn)定保持穩(wěn)定；紫杉醇囊核式納米混懸液，其載藥量為2%(w/v)，最高有效劑量為60mg/kg，4°C儲存16個月穩(wěn)定保持穩(wěn)定；冬凌草素囊核式納米混懸液，其載藥量為1%，最大耐受量為15mg/kg，4°C儲存18個月穩(wěn)定保持穩(wěn)定；長春新堿囊核式納米混懸液，其載藥量為0.6%，最大耐受量為20mg/kg,4C儲存15個月穩(wěn)定保持穩(wěn)定。
權(quán)利要求
1.一種囊泡式藥物納米粒的制備方法，其特征在于包含如下幾個步驟 1)聚氨基酸類嵌段共聚物的合成和工藝優(yōu)化 以天冬氨酸等氨基酸類化合物作為原料，通過多分子單體聚合反應(yīng)制備成聚氨酸類嵌段共聚物，并于末端處鍵合親水性高分子化合物，以將其轉(zhuǎn)化為兩親性衍生物，此外控制反應(yīng)條件，選擇性提高產(chǎn)率、簡化操作；如采用苯甲醇保護的乙?；於彼嶙鳛樵?，通過開環(huán)聚合作用合成聚天冬氨酸，并用氨基化的親水性高分子化合物終止反應(yīng)，兩步合成聚天冬氨酸類嵌段共聚物，再用堿水解法脫去保護基苯甲醇，最后通過各種常規(guī)方法進行精制； 2)功能化聚氨基酸類嵌段共聚物的合成； 采用PEG化、受體共價鍵合技術(shù)制備成功能化穩(wěn)定劑； 3)穩(wěn)定劑溶液的配制將全部或部分穩(wěn)定劑加到良溶劑中，50°C，300rpm條件下加熱并攪拌，至穩(wěn)定劑完全溶解，O. 22Mm膜過濾,備用；剩余部分穩(wěn)定劑溶于不良溶劑中，制成含有穩(wěn)定劑的不良溶劑； 4)藥物溶液的配制將藥物加到上述含有穩(wěn)定劑的良溶劑中，50°C，300rpm條件下加熱并攪拌，至藥物完全溶解，繼續(xù)攪拌15min,放冷,0. 22Mm膜過濾,備用； 5)功能化囊核式納米混懸劑的制備將過濾好的藥物溶液在5000-10000rpm攪拌條件下以3-5ml/s的速度注入穩(wěn)定劑溶液，同時保持穩(wěn)定劑溶液的溫度在0°C _5°C范圍內(nèi)，藥液加完后，維持同樣的條件繼續(xù)攪拌15min，制成功能化囊核式納米混懸劑； 6)分裝用5ml安瓿取最后產(chǎn)品2ml測粒徑，其余樣品冷卻至1°C以下，向混懸液中充氮氣lOmin，但其要經(jīng)過O. 22ΜΠ1膜過濾，測粒徑后將每IOml混懸液分裝于西林瓶中，備用； 7)凍干將樣品在_80°C下快速冷凍，并保持24h，然后在-40°C下凍干10h，接著快速升溫至_25°C，凍干6h，封裝即可。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種囊泡式藥物納米粒的制備方法，其特征在于氨基酸類化合物可選自于天冬氨酸、芐基天冬氨酸、聚谷氨酸、聚L-賴氨酸、聚組氨和聚精氨酸等化合物中的一種或一種以上的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種囊泡式藥物納米粒的制備方法，其特征在于聚氨基酸類嵌段共聚物的功能化試劑可選自于PEG鏈、葉酸、半乳糖、抗人類表皮生長因子受體2抗體，和BI單克隆抗體等功能性基團中的一種或一種以上的混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種囊泡式藥物納米粒的制備方法，其特征在于良溶劑可以選自于N-甲基吡咯烷酮、2-吡咯烷酮、二甲基乙酰胺、乳酸、二甲基亞砜、甲醇、乙醇、異丙醇、丙醇、甘油、丙二醇、乙二醇、丁二醇、丙酮、二甲基甲酰胺、聚乙二醇、聚乙二醇酯、聚丙二醇等溶劑中的一種或一種以上的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種囊泡式藥物納米粒的制備方法，其特征在于功能化囊核式納米混懸劑的制備中，穩(wěn)定劑溶液應(yīng)控制溫度在0°c - 5°C內(nèi)，且攪拌速度應(yīng)控制在5000 - IOOOOrpm0
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種囊泡式藥物納米粒的制備方法，其特征在于高壓勻質(zhì)過程中，可以選擇超聲和高速分散勻質(zhì)等快速分散混合儀中的一種或一種以上的聯(lián)合方法。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種囊泡式藥物納米粒的制備方法，其特征在于將混懸液用離心、超濾、透析、噴霧干燥、冷凍干燥中的一種或一種以上的聯(lián)合方法除去良溶劑，最后再制備成各種劑型。
8.根據(jù)權(quán)利要求書7所述的一種囊泡式藥物納米粒的制備方法，其特征在于所述的劑型為注射劑、凍干粉針劑、凝膠劑、粘膜黏附劑等各種劑型。
9.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種囊泡式藥物納米粒的制備方法，其特征在于受體是葉酸和半乳糖，抗體是抗人類表皮生長因子受體2抗體和BI單克隆抗體。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及難溶性藥物的囊泡式納米粒的設(shè)計、制備和應(yīng)用。它包括以下幾個方面(1)將模型藥物溶于一種良溶劑中形成藥物溶液，功能性穩(wěn)定劑溶于另一種溶劑中形成藥物不良溶液；(2)把藥物溶液與非良溶劑混合，自組裝形成平均有效粒徑小于1μm的囊泡式納米結(jié)晶混懸液。本發(fā)明選擇兼容性強的小分子材料，運用共價結(jié)合技術(shù)合成高分子聚合物穩(wěn)定劑；并采用微沉淀、自組裝和表面修飾技術(shù)，將藥物以純的納米結(jié)晶穩(wěn)定于非良溶劑中，解決了難溶性藥物不易制成溶液劑和傳統(tǒng)納米粒突釋與被動性的問題，與傳統(tǒng)劑型相比，其不良反應(yīng)降低，毒副作用減小，生物利用度提高，且有控釋、主動靶向作用，方便患者使用。
文檔編號A61K9/52GK102614152SQ20121006440
公開日2012年8月1日 申請日期2012年1月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月13日
發(fā)明者劉偉芬, 李祿輝, 楊浩, 蒲曉輝, 袁琦, 趙輝, 郭允 申請人:河南大學(xué)