專利名稱：法尼基轉移酶抑制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及通過抑制法尼基蛋白轉移酶(FPT酶)抑制基因產(chǎn)物的法尼基化的化合物。本發(fā)明也涉及制備該化合物的方法、藥用組合物和治療通過法尼基化介導的疾病，尤其是癌癥的方法。
背景技術：
據(jù)認為，癌癥涉及控制細胞生長和分化的基因的表達或功能上的改變。盡管不希望受到理論上的見解的束縛，以下內(nèi)容提出癌癥中ras的科學背景。Ras基因通常在腫瘤中突變。Ras基因編碼鳥苷三磷酸(GTP)結合蛋白，據(jù)認為該蛋白涉及信號轉導、增殖和惡變。H-、K-和N-ras基因已經(jīng)被鑒定為ras的突變形式(Barbacid M，Ann.Rev.Biochem.1987，56779-827)。Ras蛋白的翻譯后修飾對于生物活性是需要的。由FPT酶催化的ras的法尼基化被認為在ras加工中是必需的步驟。法尼基化通過轉移法尼焦磷酸(FPP)的法尼基到稱為CAAX序列區(qū)的結構基元中ras的C端四肽的半胱氨酸上而發(fā)生。在進一步翻譯后修飾(包括所述CAAX序列區(qū)半胱氨酸殘基上的蛋白酶剪切和該半胱氨酸羧基的甲基化)后，ras能夠附著在細胞膜表面以便轉發(fā)生長信號到細胞內(nèi)部。在正常的細胞中，據(jù)認為激活的ras與生長因子一起起作用以便刺激細胞生長。在腫瘤細胞中，據(jù)認為ras中的突變使得它刺激細胞分裂，甚至在缺乏生長因子的情況下也是如此(TravisJ.，Science 1993，2601877-1878)，這可能通過長期處于GTP激活形式而不是循環(huán)回到GDP失活形式進行的。抑制突變ras基因產(chǎn)物的法尼基化將阻止或降低活化。
一類已知的法尼基轉移酶抑制劑基于法尼焦磷酸類似物；參見如Merck的歐洲專利申請EP 534546。已經(jīng)報道了基于CAAX序列區(qū)擬態(tài)的法尼基轉移酶抑制劑。Reiss(1990)于Cell 62，81-8中公開了四肽例如CVIM(Cys-Val-Ile-Met)。James(1993)于Science260，1937-1942中公開了基于肽模擬化合物的苯并二氮雜。Lerner(1995)于J.Biol.Chem.270，26802和Eisai于國際專利申請WO 95/25086中公開了基于作為第一個殘基的Cys的其它肽模擬化合物。EP 696593和PCT/GB96/01810(公開號WO 97/06138)公開了包括吡咯烷衍生物的其它法尼基轉移酶抑制劑。此外，一系列ras法尼基化的抑制劑在PCT/GB99/00369(公開號WO 99/41235)中作了介紹并提出權利要求。

發(fā)明內(nèi)容
本申請人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)吡咯烷的特定取代提供了在抑制法尼基轉移酶方面的特殊的優(yōu)點。
根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供式(I)化合物或其鹽 其中R1和R2獨立選自氫或前藥部分；R3為氫或鹵素；R4為氫或鹵素；
L為-CH＝CH-或-CH2-Z-，其中Z為NH或O；Y為S、S(O)或S(O)2。
如在此所用，術語“烷基”指直鏈或支鏈的基團，除非另外指明，可以具有1-20個，優(yōu)選1-6個碳原子。術語“芳基”包括苯基。術語“鹵代基”包括氟代基、氯代基、溴代基和碘代基。
術語“雜環(huán)基”或“雜環(huán)的”包括具有4-10個環(huán)原子，其中最多可達5個選自氧、硫和氮的基團。所述環(huán)可以是單環(huán)或雙環(huán)，每個環(huán)在性質上可以是芳族或非芳族的。如果所述環(huán)的化合價容許，氮原子可以被氫原子或取代基例如烷基取代基取代。雜環(huán)中的硫原子可以被氧化成S(O)或S(O)2基團。
芳族5或6元雜環(huán)體系的實例包括咪唑、三唑、吡嗪、嘧啶、噠嗪、吡啶、異噁唑、噁唑、異噻唑、噻唑和噻吩。9或10元的雙環(huán)雜芳基環(huán)體系為包括稠合到5元環(huán)或另一個6元環(huán)上的6元環(huán)的芳族雙環(huán)體系。5/6和6/6雙環(huán)體系的實例包括苯并呋喃、苯并咪唑、苯并噻吩、苯并噻唑、苯并異噻唑、苯并噁唑、苯并異噁唑、吡啶并咪唑、嘧啶并咪唑、喹啉、異喹啉、喹喔啉、喹唑啉、2，3-二氮雜萘、肉啉和1，5-二氮雜萘。
優(yōu)選的單環(huán)雜芳環(huán)包含最多可達3個雜原子，優(yōu)選的雙環(huán)雜芳環(huán)含有最多可達5個雜原子。優(yōu)選的雜原子為氮和硫，尤其氮。一般而言，通過碳原子將雜環(huán)與其它基團連接。僅含有氮作為雜原子的合適的雜環(huán)基為吡咯、吡啶、吲哚、喹啉、異喹啉、咪唑、吡嗪、嘧啶、嘌呤和蝶啶。
以上芳族環(huán)的氫化或其它取代形式(它們可以是非芳族的)例如吡咯烷、哌啶或嗎啉環(huán)是非芳族雜環(huán)基的實例。
各種形式的前藥是本領域已知的。例如這類前藥衍生物可見a)Design of Prodrugs，H.Bundgaard編輯(Elsevier，1985)和Methods inEnzymology，42卷，309-396頁，K.Widder等編輯(Academic Press，1985)；
b)A Textbook of Drug Design and Development，Krogsgaard-Larsen編輯；c)H.Bundgaard，“Design and Application of Prodrugs”的第5章，H.Bundgaard編輯，113-191頁(1991)；d)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，8，1-38，(1992)；e)H.Bundgaard等，Journal of Pharmaceutical Sciences，77，285(1988)；和f)N.Kakeya等，Chem.Pharm Bull.32，692(1984)。
R1的合適的實例是氫或式RxC(O)的前藥基團，其中R5是任選取代的芳基或雜環(huán)基。尤其，Rx是任選取代的苯基、任選取代的吡啶基、任選取代的呋喃基、任選取代的異噁唑、任選取代的四氫吡啶基或任選取代的四氫呋喃基。
對于Rx的合適取代基包括烷基例如甲基、鹵代烷基例如三氟代甲基、羥基、烷氧基例如甲氧基或氰基。
Rx優(yōu)選為苯基、吡啶基或N-甲基哌啶。
對于R2的前藥基團的實例是藥學上可接受的酯的體內(nèi)可裂解的酯基，該酯在人或哺乳動物體內(nèi)裂解產(chǎn)生母體酸。R2與它所連接的羧基一起合適地形成藥學上可接受的酯例如C1-6烷基酯或C1-6環(huán)烷基酯例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基或環(huán)戊基酯；C1-6烷氧基甲酯例如甲氧基甲酯；C1-6鏈烷酰氧基甲酯例如新戊酰氧基甲酯；2-苯并[c]呋喃酮基酯；C3-8環(huán)烷氧基羰基氧基C1-6烷基酯例如1-環(huán)己基羰基氧基乙基酯；1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲酯例如5-甲基-1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲酯；C1-6烷氧基羰基氧基乙酯例如1-甲氧基羰基氧基乙酯；氨基羰基甲酯和其一-或二-N-(C1-6烷基)形式，例如N，N-二甲基氨基羰基甲酯和N-乙基氨基羰基甲酯和任選取代的雜環(huán)基團的藥學上可接受的酯。
因此，R2尤其選自氫、C1-4烷基例如異丙基或環(huán)戊基，或者任選取代的雜環(huán)基例如N-甲基-四氫吡啶基。
R3適合為鹵原子，尤其是氟。
R4優(yōu)選為氫或氟，尤其是氫。
連接基L優(yōu)選為式CH2-Z-的基團，其中Z為NH或O。
基團Y優(yōu)選為S、S(O)或S(O)2。
可以理解，因為在以上定義的范圍內(nèi)的某些式I化合物由于一個或更多個不對稱碳原子可以旋光形式或外消旋形式存在，本發(fā)明在其定義中包括具有抑制FTP酶性質的任何這類旋光形式或外消旋形式。旋光形式的合成可以通過本領域熟知的有機化學標準技術進行，例如通過由旋光性原料合成或者通過拆分外消旋形式進行。與此類似，可以采用此后所述的標準實驗室技術評價針對FTP酶的抑制性質。
式I吡咯烷環(huán)的2和4位的手性碳原子優(yōu)選為(S)構型。
式I羰基和胺之間2位的手性碳原子優(yōu)選為(S)構型。
式I化合物可以形成本發(fā)明范圍內(nèi)的鹽。盡管可以在例如分離或純化化合物中使用其它鹽，但是優(yōu)選藥學上可接受的鹽。
當所述化合物含有堿性部分時，它可以與各種無機或有機酸形成藥學上可接受的鹽，所述酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、三氟乙酸、檸檬酸或馬來酸。當所述化合物含有酸性部分時，本發(fā)明的合適的藥學上可接受的鹽是堿金屬鹽例如鈉鹽或鉀鹽，堿土金屬鹽例如鈣鹽或鎂鹽，銨鹽或者與提供藥學上可接受的陽離子的有機堿形成的鹽，例如與甲胺、二甲胺、三甲胺、哌啶、嗎啉或三-(2-羥乙基)胺的鹽。本發(fā)明化合物的具體的鹽是乙酸鹽、烷基磺酸鹽例如甲基或乙基磺酸鹽、富馬酸鹽、甲酸鹽、琥珀酸鹽和葡糖酸鹽。
溶劑合物例如水合物也在本發(fā)明的范圍內(nèi)并且可以通過已知的通用方法制備。
具體的式(I)化合物的實例示于表1中
表1
根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，提供用作藥物的式I化合物。
本發(fā)明的另一個方面提供式I化合物在制備用于治療通過ras的法尼基化介導的疾病，尤其癌癥的藥物中的用途。
該化合物適合配制為用于該方面的藥用組合物。
因此，根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，提供含有以上所列出的式(I)化合物及其藥學上可接受的稀釋劑或載體的藥用組合物。
根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，提供治療ras介導的疾病，尤其癌癥的方法，該方法包括給予需要此治療的哺乳動物有效量的式I化合物。
根據(jù)本發(fā)明的另一個特征，提供用于通過醫(yī)療手段治療人或動物體的方法中的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。
本發(fā)明也提供式I化合物在制備用于治療法尼基化介導的疾病或醫(yī)學病癥例如癌癥的藥物中的用途。
可通過本發(fā)明的化合物或組合物治療的的具體癌癥包括-癌，包括膀胱癌、乳腺癌、結腸癌、腎癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宮頸癌、甲狀腺癌和皮膚癌；-淋巴譜系血細胞瘤，包括急性淋巴白血病、B細胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤；-骨髓譜系血細胞瘤，包括急性和慢性骨髓性白血病和早幼粒細胞白血病；
-來源于間充質的腫瘤，包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤；和-其它腫瘤，包括黑素瘤、精原細胞瘤、tetratocarcinoma、成神經(jīng)細胞瘤和神經(jīng)膠質瘤。
式I化合物尤其用于治療具有高發(fā)生率ras突變的腫瘤，例如結腸、肺和胰腺腫瘤。通過給予含有本發(fā)明化合物之一(或其組合)的組合物，降低了哺乳動物宿主體內(nèi)的腫瘤發(fā)展。
式I化合物也可以用于治療除癌癥外可能與通過ras操作的信號轉導途徑有關的疾病，例如多發(fā)性神經(jīng)纖維瘤。
式I化合物也可以用于治療與除ras外的含CAAX蛋白(例如核纖層蛋白和轉導素，它們也被法尼基蛋白轉移酶翻譯后修飾)有關的疾病。
本發(fā)明的組合物可以是適合口服使用的形式(例如片劑、錠劑、硬或軟膠囊、水性或油性懸浮液、乳劑、可分散的散劑或顆粒劑、糖漿或酏劑)、用于局部使用的形式(例如乳膏、軟膏、凝膠或者水性或油性溶液或懸浮液)、用于吸入使用的形式(例如細碎的粉末或液體氣溶膠)、用于吹入給藥的形式(例如細碎的粉末)或者用于胃腸外給藥的形式(例如作為無菌水性或油性溶液供靜脈、皮下、肌內(nèi)或肌內(nèi)給藥或者作為栓劑供直腸給藥)。
通過本領域熟知的常規(guī)的方法，使用本領域熟知的常規(guī)藥用賦形劑可以獲得本發(fā)明的組合物。因此，打算口服使用的組合物可以含有例如一種或更多種著色劑、甜味劑、矯味劑和/或防腐劑。
適合用于片劑制劑的藥學上可接受的賦形劑包括例如惰性稀釋劑如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣，成粒劑和崩解劑例如玉米淀粉或藻酸；粘合劑例如淀粉；潤滑劑例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石；防腐劑例如對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸丙酯以及抗氧化劑例如抗壞血酸。片劑可以不包衣或包衣以便改善其崩解性和隨后所述活性成分在胃腸道內(nèi)的吸收或者改善其穩(wěn)定性和/或外觀，在任何一種情況下，使用本領域熟知的常規(guī)包衣劑和包衣方法。
用于口服使用的組合物可以是硬明膠膠囊形式，其中將所述活性成分與惰性固體稀釋劑例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合，或者可以是軟明膠膠囊形式，其中將所述活性成分與水或油例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
水性懸浮液一般含有以細粉形式的活性成分以及一種或更多種懸浮劑例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍樹膠和阿拉伯膠；分散劑或潤濕劑例如卵磷脂或者烯化氧與脂肪酸的縮合產(chǎn)物(例如聚氧亞乙基硬脂酸酯)，或環(huán)氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物例如十七亞乙基氧基十六醇，或環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇的部分酯的縮合產(chǎn)物例如聚氧亞乙基山梨醇單油酸酯，或環(huán)氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物例如十七亞乙基氧基十六醇，或環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇的部分酯的縮合產(chǎn)物例如聚氧亞乙基山梨醇單油酸酯，或環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的部分酯的縮合產(chǎn)物例如聚亞乙基脫水山梨醇單油酸酯。水性懸浮液也可以含有一種或更多種防腐劑(例如對羥基苯甲酸乙酯或丙酯)、抗氧化劑(例如抗壞血酸)、著色劑、矯味劑和/或甜味劑(例如蔗糖、糖精或天冬甜素)。
油性懸浮液可以通過將所述活性成分懸浮在植物油(例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(例如液體石蠟)中來配制。所述油性懸浮液也可以含有增稠劑例如蜂蠟、硬石蠟或十六烷醇?？梢约尤肴缫陨纤岢龅奶鹞秳┖统C味劑以便提供可口的口服制劑。這些組合物可以通過加入抗氧化劑例如抗壞血酸防腐。
適合于加入水來制備水性懸浮液的可分散的粉末和顆粒劑一般含有所述活性成分以及分散劑或潤濕劑、懸浮劑和一種或更多種防腐劑。合適的分散劑或潤濕劑和懸浮劑為以上已經(jīng)舉例說明的那些試劑。也可以有其它的賦形劑例如甜味劑、矯味劑和著色劑。
本發(fā)明的藥用組合物也可以為水包油乳劑形式。其油相可以是植物油例如橄欖油或花生油，或礦物油例如液體石蠟或者它們的任意混合物。合適的乳化劑例如可以是天然存在的樹膠例如阿拉伯膠或黃蓍樹膠，天然存在的磷脂例如大豆磷脂、卵磷脂、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或部分酯(例如脫水山梨醇單油酸酯)和所述部分酯與烯化氧的縮合產(chǎn)物例如聚氧亞乙基脫水山梨醇單油酸酯。所述乳劑也可以含有甜味劑、矯味劑和防腐劑。
采用甜味劑例如甘油、丙二醇、山梨醇、天冬甜素或蔗糖可以配制糖漿和酏劑，它們也可以含有潤藥、防腐劑、矯味劑和/或著色劑。
所述藥用組合物也可以是無菌、可注射的水性或油性懸浮液形式，它們可以按照已知的方法，使用一種或更多種以上已經(jīng)提到的、合適的分散劑或潤濕劑和懸浮劑來配制。無菌的可注射制劑也可以是在無毒、胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌、可注射的溶液或懸浮液，例如1，3-丁二醇中的溶液。
通過將所述活性成分與合適的無刺激性賦形劑(它在常溫下為固體，但是在直腸溫度下為液體，因此，在直腸中熔化以便釋放藥物)混合可以制備栓劑。合適的賦形劑包括例如可可脂和聚乙二醇。
通常采用本領域熟知的常規(guī)方法，通過將活性成分與常規(guī)、局部可接受的介質或稀釋劑一起配制可以獲得局部用制劑例如乳膏、軟膏、凝膠以及水性或油性溶液或懸浮液。
供吹入給藥的組合物可以是含有平均粒徑為例如30μ或小得多的顆粒的細碎粉末形式，所述粉末本身含有單獨的活性成分或者用一種或更多種生理上可接受的載體例如乳糖稀釋。然后，通常將供吹入的粉末保存在膠囊中，該膠囊例如含有1-50mg與渦輪吸入裝置一起使用的活性成分，例如供吹入使用的已知的藥物色甘酸鈉。
供吸入給藥的組合物可以是裝配好的常規(guī)加壓氣溶膠形式，以便分配作為含有細碎的固體或液滴的氣溶膠的活性成分?？梢允褂贸Ｒ?guī)的氣溶膠拋射劑例如揮發(fā)性的氟代烴或烴，方便地裝配該氣溶膠裝置以便分配計量量的活性成分。
關于制劑的進一步的資料，讀者可以參閱ComprehensiveMedicinal Chemistry第5卷，25.2章(Corwin Hansch；Chairman ofEditorial Board)，Pergamon Press 1990。
與一種或更多種賦形劑混合形成單一劑型的活性成分的量需要根據(jù)所治療的宿主和具體的給藥途徑而變化。例如，供人口服的制劑一般含有例如與可以在總的組合物的約5-98％重量范圍內(nèi)變化的合適和方便量的賦形劑混合的0.5mg至2g活性藥物。單位劑型一般含有約1mg至500mg的活性成分。關于給藥途徑和劑量方案的進一步的資料，讀者可以參閱Comprehensive Medicinal Chemistry第5卷，25.3章(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board)，Pergamon Press1990。
用于治療或預防目的的式I化合物的劑量大小自然將根據(jù)所述癥狀的性質和嚴重性、所述動物或患者的年齡和性別以及給藥途徑，按照眾所周知的醫(yī)療原則而變化。如以上所述，式I化合物用于治療完全由于或部分由于ras的法尼基化作用的疾病或醫(yī)學癥狀。
在使用用于治療或預防目的的式I化合物的過程中，通常的給藥劑量是使得接受例如每kg體重0.5mg至75mg的日劑量，如果需要，以分劑量給予。當使用胃腸外途徑時，通常給予較低的劑量。因此，例如對于靜脈給藥而言，通常使用例如每kg體重0.5mg至30mg的劑量范圍。類似地，對于吸入給藥而言，將使用例如每kg體重0.5mg至25mg的劑量范圍。然而，優(yōu)選口服給藥。
以上限定的式(I)化合物可以作為單獨的治療手段使用或者除本發(fā)明的化合物外，可以包括一種或更多種其它的物質和/或治療手段。這種聯(lián)合治療可以通過同時、順序或分別給予該治療的各個成分來完成。在醫(yī)療腫瘤學領域中，采用不同的治療方式的聯(lián)合以便治療每個癌癥患者是一種慣例。在醫(yī)療腫瘤學中，除了此前限定的細胞周期抑制治療外，這類聯(lián)合治療的其它組成部分可以是外科手術、放療或化療。該化療可以包括三種主要類型的治療劑
(i)其它細胞周期抑制藥物，它們通過與此前限定的那些細胞周期抑制藥物相同或不同的機制發(fā)揮作用；(ii)細胞生長抑制劑例如抗雌激素類(例如fulvestrant、他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬、iodoxyfene)、孕激素類(例如醋酸甲地孕酮)、芳香酶抑制劑(例如anastrozole、來曲唑、伏氯唑(vorazole)、依西美坦)、抗孕激素、抗雄激素類(例如氟他胺、尼魯米特、比卡魯胺、醋酸環(huán)丙孕酮)、LHRH激動劑和拮抗劑(例如醋酸戈舍瑞林、luprolide)、睪酮5α-二氫還原酶(例如非那雄胺)、抗侵襲藥物(例如金屬蛋白酶抑制劑像marimastat和尿激酶型纖溶酶激活物受體功能抑制劑)和生長因子功能抑制劑(這類生長因子包括例如衍生自血小板的生長因子和肝細胞生長因子，這類抑制劑包括生長因子抗體、生長因子受體抗體、酪氨酸激酶抑制劑和絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑)；和(iii)如醫(yī)療腫瘤學中所使用的抗增生/抗腫瘤藥物及其組合，例如抗代謝物(例如葉酸拮抗劑像甲氨蝶呤、氟嘧啶像5-氟尿嘧啶、嘌呤和腺苷類似物、阿糖胞苷)；抗腫瘤抗生素(例如蒽環(huán)類抗生素像多柔比星、柔紅霉素、表柔比星、伊達比星、絲裂霉素-C、放線菌素D、普卡霉素)；鉑衍生物(例如順鉑、卡鉑)；烷化劑(例如氮芥、美法侖、苯丁酸氮芥、白消安、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、亞硝基脲、賽替派)；抗有絲分裂藥(例如長春花生物堿像長春新堿和taxoids像紫杉醇、taxotere)；拓撲異構酶抑制劑(例如表鬼臼毒素像依托泊苷、替尼泊苷、安吖啶、托泊替堪)。根據(jù)本發(fā)明的這個方面，提供含有如以上所限定的式(I)化合物和用于聯(lián)合治療癌癥的此前所限定的另一種抗腫瘤物質的藥用產(chǎn)物。
盡管式I化合物的主要價值是作為用于溫血動物(包括人)的治療藥，它們也可以用于需要抑制法尼基化的任何情況下。因此，它們用作開發(fā)新的生物試驗和尋找新的藥物中所用的藥理學標準品。
根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，提供制備為以下實施例中提出的終產(chǎn)物的每個化合物及其鹽。
通過已知適用于制備這類化合物或結構相關化合物的任何方法，可以制備本發(fā)明的化合物或其鹽。通過下列代表性的方案說明這些方法，其中除非另外說明，可變化的基團具有任何對于式I所限定的意義。可以采用常規(guī)方法將官能團保護和去保護。對于保護基團例如氨基和羧酸的保護基團(以及形成方法和最終去保護的方法)，參見T.W.Greene和P.G.M.Wuts所著“Protective Groups in OrganicSynthesis”，第二版，John Wiley & Sons，New York，1991。所用的注釋性縮寫已經(jīng)列在以下實施例的前面。
保護基團可以通過如文獻中所述的或化學技術人員已知適合除去所涉及的保護基團的任何方便的方法除去，可以選擇這類方法以便完成所述保護基團的除去同時對分子中另外存在的基團具有最低的干擾。
為方便起見，以下給出保護基團的特定實例，其中“低級”指優(yōu)選具有1-4個碳原子的基團?？梢岳斫膺@些實例并非包羅無遺。當以下給出除去保護基團方法的特定實例時，它們同樣并非包羅無遺。當然，未特別提到的保護基團的用途和去保護的方法在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
羧基保護基團可以是成酯的脂族或芳脂族醇或成酯的硅烷醇的殘基(所述醇或硅烷醇(silanol)優(yōu)選含有1-20個碳原子)。
羧基保護基團的實例包括直鏈或支鏈的(1-12C)烷基(例如異丙基、叔丁基)；低級烷氧基低級烷基(例如甲氧基甲基、乙氧基甲基、異丁氧基甲基)；低級脂族酰氧基低級烷基(例如乙酰氧基甲基、丙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基)；低級烷氧基羰基氧基低級烷基(例如1-甲氧基羰基氧基乙基、1-乙氧基羰基氧基乙基)；芳基低級烷基(例如對甲氧基芐基、鄰硝基芐基、對硝基芐基、二苯甲基和2-苯并[c]呋喃酮基)；三(低級烷基)甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基)；三(低級烷基)甲硅烷基低級烷基(例如三甲基甲硅烷基乙基)；和(2-6C)鏈烯基(例如烯丙基和乙烯基乙基)。
對于除去羧基保護基特別合適的方法包括例如酸-、金屬-或酶-催化水解。
羥基保護基的實例包括低級鏈烯基(例如烯丙基)；低級鏈烷酰基(例如乙?；?；低級烷氧基羰基(例如叔丁氧基羰基)；低級鏈烯基氧基羰基(例如烯丙基氧基羰基)；芳基低級烷氧基羰基(例如苯甲酰氧基羰基、對甲氧基芐氧基羰基、鄰硝基芐氧基羰基、對硝基芐氧基羰基)；三低級烷基/芳基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基)；芳基低級烷基(例如芐基)；和三芳基低級烷基(例如三苯基甲基)。
氨基保護基團的實例包括甲?；⒎纪榛?例如芐基和取代的芐基例如對甲氧基芐基、硝基芐基和2，4-二甲氧基芐基以及三苯甲基)；二對茴香基甲基和呋喃基甲基；低級烷氧基羰基(例如叔丁氧基羰基)；低級鏈烯基氧基羰基(例如烯丙基氧基羰基)；芳基低級烷氧基羰基(例如芐氧基羰基、對甲氧基芐氧基羰基、鄰硝基芐氧基羰基、對硝基芐氧基羰基)；三烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基)；亞烷基(例如亞甲基)；亞芐基和取代的亞芐基。
適合用于除去羥基和氨基保護基的方法包括例如酸-、堿-、金屬-或酶-催化水解，或者對于基團例如鄰硝基芐氧基羰基的光分解，或者對于甲硅烷基采用氟離子。
對于酰胺基的保護基團的實例包括芳烷氧基甲基(例如芐氧基甲基和取代的芐氧基甲基)；烷氧基甲基(例如甲氧基甲基和三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)；三烷基/芳基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基)；三烷基/芳基甲硅烷基氧基甲基(例如叔丁基二甲基甲硅烷基氧基甲基、叔丁基二苯基甲硅烷基氧基甲基)；4-烷氧基苯基(例如4-甲氧基苯基)；2，4-二(烷氧基)苯基(例如2，4-二甲氧基苯基)；4-烷氧基芐基(例如4-甲氧基芐基)；2，4-二(烷氧基)芐基(例如2，4-二(甲氧基)芐基)；和鏈-1-烯基(例如烯丙基、丁-1-烯基和取代的乙烯基例如2-苯基乙烯基)。
通過使所述酰胺基與合適的芳烷氧基甲基氯反應可以將芳烷氧基甲基導入酰胺基上，通過催化氫化除去。通過使所述酰胺與合適的氯化物反應可以導入烷氧基甲基、三烷基/芳基甲硅烷基和三烷基/甲硅烷基氧基甲基并通過酸除去；或者在含有甲硅烷基的情況下，用氟離子除去。通過用合適的鹵化物芳基化或烷基化方便地導入烷氧基苯基和烷氧基芐基并通過用硝酸鈰銨氧化除去。最終通過使所述酰胺與合適的醛反應可以導入鏈-1-烯基并通過酸除去。
本發(fā)明也提供制備如上所限定的式(I)化合物的方法，該方法包括使式(II)化合物 其中L、R3和R4如式(I)中所限定，R1’為如式(I)中所限定的R1基團或其前體，R5為保護基團例如BOC，與式(III)化合物反應 其中Y如式(I)中所限定，R2’為如式(I)中所限定的R2或其前體；此后，如果需要或要求，進行以下一個或更多個步驟a)除去保護基團R5；b)將任何前體基團R1’和R2’轉變成基團R1和R2；和c)將所述基團轉變?yōu)椴煌腞1、R2基團。
式(II)和式(III)化合物之間的反應適合在有機溶劑例如二氯甲烷中，在堿例如N-甲基嗎啉和EDC存在下，并且任選在親核催化劑例如1-羥基苯并三唑存在下進行。使用合適的溫度例如0℃至50℃，合適在環(huán)境溫度下進行。
前體基團R1’和R2’可以包括保護基團例如酯，它們不是藥學上可接受的。使用如下說明的常規(guī)方法可以將這些基團轉變?yōu)闅浠蚱渌八幓鶊F。
除去保護基團R5的過程可以采用常規(guī)方法例如與TFA和/或三乙基硅烷反應進行。
通過將式(IV)化合物去保護合適地制備式(II)化合物 其中R1’、R3、R4、R5和L如式(II)中所限定，R6是保護基團，尤其是烷基例如甲基。使用強堿例如堿金屬氫氧化物尤其是氫氧化鈉合適地進行去保護。所述反應適合在溶劑例如含水醇，尤其是甲醇水溶液中，在升高的溫度下，合適在溶劑的回流溫度下進行。
通過式(V)化合物
其中R3、R4和R6如上所限定；與式(VI)的醛偶合 其中R1’和R5如上所限定，可以制備式(IV)化合物，其中L為-CH2NH-。
合適的偶合條件包括在合適的溶劑例如甲醇或乙醇和乙酸存在下，使用還原劑(例如硼烷.吡啶及乙酸、NaCNBH3、BH3、氫加催化劑、LiHBEt3、二異丁基氫化鋁、氫化鋰鋁、硼氫化鈉)。
通過還原式(VII)化合物 其中R1’和R5如上所限定，R6為烷基例如甲基，R7為烷氧基例如甲氧基，可以制備式(VI)醛。
使用合適的強還原劑例如氫化鋰鋁或DIBAL。所述反應在溶劑例如四氫呋喃中，在低溫例如-50℃至0℃，尤其在約-40℃下進行。
通過使式(VIII)化合物 其中R8為離去基團例如甲磺酰氧基，與式(IX)化合物反應，合適地制備式(VII)化合物 其中R1’如上所限定，尤其是三苯基甲基(即三苯甲基)。反應條件對于技術人員而言是顯而易見的，但是，通常所述反應在有機溶劑例如乙醇中，在合適的溫度例如0℃至60℃，優(yōu)選約40℃下進行。
通過式(X)化合物 其中R5、R6和R7如上所限定，與式(XI)化合物反應可以制備式(VIII)化合物R8-Z(XI)其中R8如上所限定和Z為離去基團例如鹵素，尤其是氯。所述反應合適在有機溶劑例如二氯甲烷中，在弱堿例如三乙胺存在下進行。
適合使用中等到低溫例如0-30℃。
通過式(XII)化合物
其中R5如上所限定，與式(XIII)化合物反應 其中R6和R7如上所限定，合適地制備式(X)化合物。式(XIII)化合物的一個具體的實例為N，O-二甲基羥基胺。所述反應合適在堿(例如N-甲基嗎啉及EDCI)存在下，在有機溶劑例如二氯甲烷中進行。
通過使用已知的方法將相應的羥基脯氨酸衍生物N-保護可以制備式(XII)的化合物。
通過將式(XIV)化合物氫化 其中R3、R4和R6如上所限定，合適地制備式(V)化合物。氫化適合在催化劑例如鈀催化劑存在下進行。
通過使式(XV)化合物
其中R6如上所限定，Z’為離去基團例如鹵素例如溴或氯，優(yōu)選氯，與式(XVI)化合物反應 其中R3和R4如上所限定，合適地制備式(XIV)化合物。所述反應適合在堿例如三丁基胺，優(yōu)選碳酸鈉溴化四丁基銨和催化劑例如鈀催化劑例如氯化雙(三苯膦)合鈀(II)存在下，在合適的溶劑優(yōu)選二甲基乙酰胺中進行。
通過使式(XVII)化合物 其中R3、R4和R6如上所限定，與式(XVIII)化合物反應
其中R1’和R5如上所限定，可以制備其中L代表-CH2O-的式(IV)化合物。該反應適合在與以上對于式(V)和(VI)化合物之間的反應所述的類似的條件下進行。
通過將式(VI)化合物例如采用還原劑如氫化鋰鋁還原，合適地制備式(XVIII)化合物。還原在常規(guī)條件下，在溶劑例如四氫呋喃中進行。
通過例如用醇，尤其是烷基醇，例如甲醇酯化所述酸來保護相應的羧酸可以制備式(XVII)的化合物。該反應合適在磺酰氯等的存在下，在升高的溫度下，方便地在溶劑的回流溫度下進行。
所述酸本身可以通過將式(XIX)化合物去保護制備 其中R3和R4如上所限定，R10和R11為保護基團例如烷基，尤其是甲基。合適的去保護條件包括將所述化合物與合適的試劑例如吡啶鹽酸鹽一起加熱到高溫，例如200-250℃，優(yōu)選約220℃。
通過將式(XX)化合物氫化得到式(XIX)化合物
其中R3、R4、R10和R11如上所述。合適的氫化條件包括以上對于氫化式(XIV)化合物所述的條件。
通過使式(XXI)化合物 其中R10和R11如上所限定，Z”是離去基團例如鹵素尤其是溴，使用類似于以上所述式(XV)化合物與式(XVI)化合物之間反應的條件，與如上限定的式(XVI)化合物反應，可以制備式(XX)化合物。
通過使如上限定的式(VI)化合物與式(XXII)化合物反應 其中R3、R4和R6如上限定，R12是磷酸根離子例如二乙基磷酸根或三苯基膦基團，合適地制備其中L是-CH＝CH-的式(IV)化合物。該反應為Wittig反應并且適合在常規(guī)條件下進行。合適的反應條件包括在有機溶劑(例如THF、甲苯、DMSO)存在下，任選在含水溶劑(兩相體系)存在下并且任選在催化劑絡合劑存在下使用堿(例如碳酸鉀、金屬氫化物、金屬醇鹽)，所述絡合劑使堿金屬離子溶于非極性溶劑中，所述非極性溶劑為例如1，4，7，10，13-五氧環(huán)十五烷(也稱作15-冠醚-5)或1，4，7，10，13，16-六氧環(huán)十八烷(也稱作18-冠醚-6)。
通過例如PCT/GB98/000230(公開號WO 98/32741)中所述的方法，特別是該申請的實施例19的方法，合適地制備式(XXII)的化合物。制備的細節(jié)進一步歸納在以下方案3中。
如果需要或要求，在任何上述制備方法后，使用常規(guī)的化學方法將基團R1和R2換成不同的這類基團，以下提供這類實施例。
如下檢測生物活性。經(jīng)硫酸銨分級分離，然后基本上如Ray和Lopez-Belmonte所述(Ray K P and Lopez-Belmonte J(1992)Biochemical Society Transations20494-497)經(jīng)單Q-Sepharose(Pharmacia，Inc)陰離子交換層析，從人胎盤部分純化法尼基蛋白轉移酶(FPT)。FPT的底物是Kras(CVIM C-端序列)。從質粒pSW11-1(ATCC)獲得人c-Ki-ras-24B的致癌va112變體的cDNA。然后，將其亞克隆到合適的表達載體例如pIC147的多位點接頭上。在大腸桿菌(E.coli)菌株BL21中表達后，得到所述Kras。Lowe等也報道了c-KI-ras-2 4B和va112變體在大腸桿菌中的表達和純化(Lowe P N et al.J.Biol.Chem.(1991)2661672-1678)。
與酶的孵育物含有300nM含氚的法尼焦磷酸(DuPont/NewEngland Nuclear)、120nM ras-CVIM、50mM Tris HCl pH 8.0、5mMMgCl2、10μM ZnCl2、5mM二硫蘇糖醇，并加入在DMSO中(在測試液和溶媒對照中的終濃度為3％)的合適濃度的化合物。于37℃孵育20分鐘，如Pompliano等所述(Pompliano D L et al(1992)313800-3807)，用含酸乙醇猝滅。然后，使用Tomtec細胞收獲器，經(jīng)玻璃纖維濾墊(B)收集沉淀的蛋白質并在Wallac1204β板閃爍計數(shù)器中測定氚標記物。
盡管如所預料的，式I化合物的藥理學性質隨著結構變化而改變，但是，一般而言，式I化合物在以上試驗中具有的IC50值在例如0.01-200μM的范圍內(nèi)。在本發(fā)明所測試的化合物的有效劑量下，沒有觀察到生理上不能接受的毒性。
具體實施例方式
現(xiàn)在在以下非限制性實施例中介紹本發(fā)明，其中除非另外說明，否則(i)蒸發(fā)通過旋轉蒸發(fā)儀在真空下進行，在經(jīng)過濾除去殘留的固體后，進行后處理過程；(ii)操作在室溫下，即在18-25℃的范圍內(nèi)，在惰性氣體環(huán)境例如氬氣下進行；(iii)柱層析(快速層析)和中壓液相層析(MPLC)在MerckKieselgel硅膠(Art.9385)或Merck Lichroprep RP-18(Art.9303)反相硅膠(來自E.Merck，Darmstadt，Germany)上進行；(iv)給出的收率僅是說明性的，不必是所能達到的最大收率；(v)式I的終產(chǎn)物具有令人滿意的微量分析值，其結構通過核磁共振(NMR)和質譜技術確證；化學位移值以δ標度測定；使用下列縮寫s，單峰；d，雙峰；t或tr，三重峰；m，多峰；br，寬；(vi)中間體通常沒有作全部鑒定，純度通過薄層層析、紅外(IR)或NMR分析評估；(vii)熔點未經(jīng)校正，使用Mettler SP62自動熔點儀或油浴設備測定；在從常規(guī)有機溶劑例如乙醇、甲醇、丙酮、乙醚或己烷(單獨或它們的混合物)中結晶后，測定式I終產(chǎn)物的熔點；和(viii)全文使用下列縮寫B(tài)OC叔丁氧基羰基
DCCI1，3-二環(huán)己基碳二亞胺DMA N，N-二甲基乙酰胺DMAP4-二甲基氨基吡啶DMF N，N-二甲基甲酰胺DMSO二甲亞砜EDC 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺EEDQ2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氫喹啉HOBT1-羥基苯并三唑NMM N-甲基嗎啉NMM-O 4-甲基嗎啉-N-氧化物TFA 三氟乙酸THF 四氫呋喃TMSI三甲基甲硅烷基碘TPAP過鐐酸(perruthenate)四丙基銨實施例1表1中化合物6的制備所依照的方法歸納于此后的方案1中。尤其是，于環(huán)境溫度下，在氮氣氛中將其中R是N-甲基哌啶的化合物(xv)(4.8g)、三乙基硅烷(10ml)和TFA(200ml)的混合物攪拌1小時。蒸發(fā)去TFA并將殘留物溶于乙酸乙酯(50ml)中。加入氯化氫的乙醚溶液(1M，100ml)，然后再加入乙醚(100ml)。通過離心分離所得到的白色固體，進一步用乙醚洗滌并再離心(總共4次)。在高真空下干燥該固體得到表1中的化合物6，為鹽酸鹽(4.5g)。
化合物61H NMR數(shù)據(jù)(DMSO d6)δ1.14(6H，m)，1.7(1H，m)，1.8-2.11(7H，m)，2.02(3H，s)，2.29-3.0(10H，m)，2.66(3H，d)，3.16(1H，m)，3.2-3.52(3H，m)，3.62(1H，m)，3.78(1H，m)，4.0(1H，m)，4.46(1H，q)，4.9(1H，m)，6.60(2H，m)，6.9-7.10(3H，m)，7.19(2H，m)，8.59(1H，d)。MS(ES+)m/z673.7(M+H)+如下制備原料即其中R是N-甲基哌啶的方案1的化合物(xv)化合物(xii)為已知的化合物并且如PCT/GB99/00369(公開號WO99/41235)的實施例6中所述制備。于環(huán)境溫度下，將化合物(xii)(50g)、L-甲硫氨酸異丙酯鹽酸鹽(19.0g)、DMAP(42.6g)和EDC(20.0g)在二氯甲烷(500ml)中的混合物攪拌18小時。用檸檬酸水溶液(1M)、鹽水洗滌該溶液并干燥。將其用同樣量的異己烷稀釋并直接加到硅膠快速柱上，用乙酸乙酯/異己烷(20∶80，30∶70)洗脫得到方案1中的化合物(xiii)(58.6g)，為固體狀白色泡沫狀物。
化合物(xiii)1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3)δ1.26(6H，m)，1.38(9H，s)，1.41(1H，m)，1.58(1H，m)，2.02(1H，m)，2.05(3H，s)，2.15-2.4(2H，m)，2.47-2.7(2H，m)，2.7-2.98(6H，m)，3.06-3.34(2H，m)，3.9(1H，m)，4.79(2H，m)，5.08(1H，m)，6.34(1H，d)，6.38(2H，m)，6.91(3H，m)，7.09(2H，m)，7.18-7.35(9H，m)，7.43(6H，m)。
MS(ES+)m/z 890.5(M+H)+在氮氣氛下，將TFA(80ml)加入到化合物(xiii)(58.6g)和三乙基硅烷(80ml)在二氯甲烷(41.)中的快速攪拌的溶液中。然后，將該溶液在環(huán)境溫度下攪拌4.5小時，用飽和碳酸氫鈉溶液堿化并分離二氯甲烷層。干燥后，蒸發(fā)至較小的體積(500ml)，將其直接加到硅膠快速柱上，用乙酸乙酯/異己烷(30∶70，50∶50)洗脫得到方案1的化合物(xiv)(35.5g)，為白色固體。
化合物(xiv)1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3)δ1.25(6H，m)，1.46(9H，s)，1.5(1H，m)，1.68(1H，m)，1.70(1H，d)，2.00(1H，m)，2.08(3H，s)，2.21(1H，m)，2.56(2H，m)，2.75-2.97(4H，m)，3.05(1H，m)，3.26(2H，m)，3.4(1H，m)，3.85-4.3(2H，m)，4.8(2H，q)，5.05(1H，m)，6.35(1H，d)，6.6(2H，m)，6.92(3H，m)，7.1(2H，m)。
MS(ES+)m/z 648.7(M+H)+在氮氣氛下，將化合物(xiv)(4.5g)、N-甲基哌啶-4-羧酸(1.5g)、N-甲基哌啶(3.5g)、EDC(1.6g)和HOBT(0.94g)在二氯甲烷(100ml)中的混合物攪拌18小時。然而，將其直接加入到硅膠快速柱上，用乙酸乙酯/異己烷(1∶1)、乙酸乙酯、甲醇/乙酸乙酯(10∶90，20∶80)洗脫，得到其中R是N-甲基哌啶的方案1的化合物xv(4.8g)，為白色泡沫狀物。
1H NMR數(shù)據(jù)(DMSO d6)δ1.15(6H，m)，1.4(9H，s)，1.69(1H，m)，1.7-2.0(7H，m)，2.01(3H，s)，2.11(3H，s)，2.4-2.6(4H，m)，2.63-2.82(6H，m)，3.04(2H，m)，3.28(1H，m)，3.42(1H，m)，3.7-4.0(3H，m)，4.44(1H，m)，4.9(1H，m)，5.82(1H，t)，6.6(2H，m)，6.9(1H，m)，7.03(2H，t)，7.38(2H，m)，8.55(1H，d)。
MS(ES+)m/z 773.6(M+H)+實施例2使用類似于實施例1中所述的方法，采用合適的中間體，由方案1中的化合物(xiv)制備表1中化合物4和8。
其中R是苯基的方案1中的化合物(xv)1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3)δ1.28(6H，m)，1.50(9H，s)，1.50(1H，m)，1.90(1H，m)，2.05(1H，m)，2.07(3H，s)，2.23(1H，m)，2.57(2H，m)，2.69(1H，m)，2.82(2H，m)，2.90(2H，m)，3.27(2H，m)，3.46(1H，m)，4.1(1H，m)，4.23(1H，m)，4.80(2H，m)，5.07(1H，m)，6.40(1H，d)，6.68(2H，m)，6.93(3H，m)，7.1(2H，m)，7.46(2H，m)，7.59(1H，m)，7.94(2H，d)。
MS(ES+)m/z 752.71(M+H)+表1的化合物41H NMR數(shù)據(jù)(DMSO d6)δ1.16(7H，m)，1.82(1H，m)，1.98(2H，m)，2.01(3H，s)，3.4-3.9(6H，m)，3.22(1H，m)，3.42(2H，m)，3.80(2H，m)，4.20(1H，m)，4.47(1H，q)，4.90(1H，m)，6.62(2H，m)，6.93-7.10(3H，m)，7.1 9(2H，m)，7.57(2H，t)，7.70(1H，t)，7.89(2H，d)，8.60(1H，d)。
MS(ES+)m/z652(M+H)+
其中R是3-吡啶基的方案1中的化合物(xv)1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3)δ1.27(6H，m)，1.49(9H，s)，1.50(1H，m)，1.92(1H，m)，2.04(1H，m)，2.10(3H，s)，2.23(1H，m)，2.56(2H，m)，2.70(1H，m)，2.83(2H，m)，2.92(2H，m)，3.28(2H，m)，3.45(1H，m)，4.14(1H，m)，4.25(1H，m)，4.80(2H，m.)，5.08(1H，m)，6.40(1H，d)，6.65(2H，m)，6.93(3H，m)，7.10(2H，m)，7.42(1H，m)，8.18(1H，m)，8.80(1H，m)，9.13(1H，m)。
MS(ES+)m/z 753.71(M+H)+表1中的化合物81H NMR數(shù)據(jù)(DMSO d6)δ1.15(6H，m)，1.20(1H，m)，1.86(1H，m)，1.97(2H，m)，2.02(3H，s)，2.40-2.92(5H，m)，3.29(1H，m)，3.37-3.60(2H，m)，3.68-3.94(2H，m)，4.28(1H，m)，4.48(1H，m)，4.89(1H，m)，6.67(2H，m)，7.00(4H，m)，7.19(2H，t.)，7.68(1H，m)，8.33(1H，m)，8.61(1H，d)，8.80(1H，m)，9.06(1H，m)。
MS(ES+)m/z 653.56(M+H)+實施例3表1中化合物7的制備采用類似于用于將方案1的化合物(xv)轉化為化合物6的實施例1中所述的方法，由方案2的化合物(xxviii)合成表1中的化合物7。表1中的化合物71H NMR數(shù)據(jù)(DMSO d6+CD3COOD)δ1.1-1.25(6H，m)，1.8-2.05(1H，m)，2.05-2.35(2H，m)，2.6-3.05(5H，m)，2.95(3H，s)，3.05-3.4(3H，m)，3.82(1H，dd)，4.0-4.2(1H，m)，4.2-4.4(3H，m)，4.4-4.6(1H，m)，4.85-5.0(1H，m)，6.9-7.1(4H，m)，7.1-7.3(3H，m)，7.65(1H，dd)，8.3(1H，dd)，8.87(1H，dd)，9.07(1H，d)。
MS(ES+)m/z 686.5(M+H)+對于C34H40N3S2O7F，2HCl，2H2O的分析計算值C，51.4；H，5.8；N，5.3；S，8.0；Cl，8.9實測值C，51.2；H，5.39；N，5.2；S，7.84；Cl，9.2
以類似于用于制備方案1中的化合物(xv)的實施例1中所述的方法，采用合適的中間體，由方案2中的化合物(xxv)合成原料即化合物(xxviii)。采用在PCT/GB99/00369(公開號WO99/41235)的實施例12中所述的方法(概括于方案2中)，獲得化合物(xxv)。
方案2中的化合物(xxvi)1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3)δ1.2-1.35(6H，m)，1.35(9H，s)，1.8-2.05(1H，m)，2.15-2.4(1H，m)，2.45-3.3(10H，m)，2.85(3H，s)，3.7-4.3(4H，m)，4.7-4.85(1H，m)，5.0-5.2(1H，m)，6.5(1H，d)，6.8-7.0(4H，m)，7.0-7.15(3H，m)，7.15-7.4(9H，m)，7.4-7.6(6H，m)。
MS(ES+)m/z 945.1(M+Na)+。
方案2的化合物(xxvii)1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3)δ1.2-1.35(6H，m)，1.45(9H，m)，1.75(1H，d)，1.9-2.1(1H，m)，2.2-2.4(1H，m)，2.45-2.7(2H，m)，2.8-3.4(8H，m)，2.85(3H，s)，3.8-4.4(4H，m)，4.7-4.85(1H，m)，5.0-5.2(1H，m)，6.55(1H，d)，6.8-7.2(7H，m)。
MS(ES+)m/z 681.2(M+H)+MS(ES-)m/z 679.2(M-H)-方案2的化合物(xxviii)1H NMR數(shù)據(jù)(CDCl3)δ1.2-1.35(6H，m)，1.45(9H，s)，2.1-2.4(2H，m)，2.45-2.65(1H，m)，2.65-2.8(1H，m)，2.8-3.45(8H，m)，2.85(3H，s)，4.0-4.4(4H，m)，4.7-4.85(1H，m)，5.0-5.2(1H，m)，6.55(1H，d)，6.8-7.2(7H，m)，7.42(1H，dd)，8.18(1H，d)，8.8(1H，d)，9.15(1H，s)。
MS(ES+)m/z 786.7(M+H)+MS(ES-)m/z 784.6(M-H)-實施例4表1中的化合物9的制備采用類似于用于將方案1中的化合物(xv)轉化為表1中的化合物6的實施例1中所述的方法，由方案3中的化合物(xxxxi)合成表1中的化合物9。
表1中的化合物91H NMR數(shù)據(jù)(DMSO d6)δ1.13-1.22(6H，m)，1.92-2.06(6H，m)，2.39-2.46(1H，m)，2.54-2.62(2H，m)，2.66-2.83(3H，m)，2.92-3.00(2H，m)，3.31(1H，m)，3.81(1H，m)，4.30-4.39(1H，m)，4.47-4.57(1H，m)，4.90(1H，m)，6.37(1H，dd)，6.81(1H，d)，7.04(2H，t.)，7.15-7.25(3H，m)，7.39-7.46(2H，m)，7.61(1H，dd)，8.27(1H，m)，8.79(1H，d)，8.87(1H，dd)，9.05(1H，d)。
MS(ES+)m/z 650.1(M+H)+采用下列方法，由方案3中所示的化合物(xxxv)合成原料(方案3的化合物(xxxxi))。如PCT/GB98/00230(公開號WO98/32741)的實施例21所述并歸納在方案3中，得到化合物xxxv本身。
將方案3中的化合物(xxxv)(20g)溶解于亞磷酸三乙酯(100ml)中并且在氮氣氛下加熱至160℃達18小時。將該溶液蒸發(fā)至干，將殘留物溶于二氯甲烷中，直接加到硅膠快速柱上，用乙酸乙酯/異己烷(50∶50，100∶0)洗脫得到化合物(xxxvi)，為無色結晶固體(19.4g)。
方案3中的化合物(xxxvi)1H NMR數(shù)據(jù)(DMSO d6)δ1.15(6H，t)，2.79(2H，t)，3.10(2H，t)，3.24(2H，d)，3.81(3H，s)，3.88-3.98(4H，m)，7.02-7.10(2H，m)，7.16-7.27(3H，m)，7.35-7.40(1H，m)，7.72(1H，s)。
MS(ES+)m/z 409.3(M+H)+在氮氣氛下，將方案3中的化合物(xxxvi)(17.5g)溶于四氫呋喃(500ml)中，冷卻到-50℃。于-40℃，緩慢加入正丁基鋰(1.6M)(26.9ml)，接著加入化合物(x)(18.5g)的四氫呋喃(100ml)溶液。然后，將該混合物溫熱至0℃。然后，加入飽和氯化銨水溶液(300ml)，分離有機物，經(jīng)硫酸鎂干燥。將該溶液蒸發(fā)至干，將殘留物溶于二氯甲烷中，經(jīng)快速柱層析純化，用乙酸乙酯/異己烷(20∶80，30∶70)洗脫得到方案3的化合物(xxxvii)，為無色固體狀泡沫物(10.4g)。
方案3的化合物(xxxvii)1H NMR數(shù)據(jù)(DMSO d6)δ1.16-1.30(10H，m)，1.52-1.65(1H，m)，2.68-2.80(5H，m)，3.04-3.14(2H，m)，3.80(3H，s)，4.04(1H，m)，6.12(1H，dd)，6.34(1H，d)，7.06(2H，t)，7.15-7.40(18H，m)，7.48(1H，dd)，7.74(1H，d)。
MS(ES+)m/z 728.8(M+H)+使用類似于用于制備方案1中化合物(xv)的實施例1中所述的方法，采用合適的中間體，將方案3中的化合物(xxxvii)轉化為方案3中的化合物(xxxxi)。
方案3中的化合物(xxxviii)1H NMR數(shù)據(jù)(DMSO d6)δ1.14-1.35(10H，m)，1.53-1.66(1H，m)，2.68-2.81(5H，m)，3.10(2H，t)，4.04(1H，m)，6.10(1H，dd)，6.34(1H，d)，7.05(2H，t)，7.14-7.39(18H，m)，7.43(1H，d)，7.76(1H，s)，12.90(1H，br s)。
MS(ES-)m/z 712.6(M-H)-方案3中的化合物(xxxx)MS(ES+)m/z 645.6(M+H)+化合物(xxxxi)MS(ES+)m/z 750.6(M+H)+實施例5藥用組合物以下說明如在此限定的本發(fā)明的、用于人體治療或預防的代表性藥用劑型(所述活性成分稱為“化合物X”)(a)片劑I mg/片化合物X.................................. 100乳糖Ph.Eur............................... 182.75交聯(lián)羧甲基纖維素鈉....................... 12.0玉米淀粉糊(5％w/v糊)..................... 2.25硬脂酸鎂................................. 3.0(b)片劑IImg/片化合物X..................................50乳糖Ph.Eur...............................223.75交聯(lián)羧甲基纖維素鈉.......................6.0玉米淀粉.................................15.0聚乙烯吡咯烷酮(5％w/v糊).................2.25硬脂酸鎂.................................3.0(c)片劑III mg/片化合物X..................................1.0乳糖Ph.Eur...............................93.25交聯(lián)羧甲基纖維素鈉.......................4.0玉米淀粉糊(5％w/v糊).....................0.75硬脂酸鎂.................................1.0(d)膠囊劑 mg/膠囊化合物X..................................10乳糖Ph.Eur...............................488.5硬脂酸鎂.................................1.5(e)注射劑I (50mg/ml)化合物X..................................5.0％w/v1M氫氧化鈉溶液...........................15.0％v/v0.1M鹽酸(調節(jié)到pH 7.6)聚乙二醇400..............................4.5％w/v注射用水到100％..........................
(f)注射劑II (10mg/ml)化合物X..................................1.0％w/v
磷酸鈉BP................................3.6％w/v0.1M氫氧化鈉溶液........................15.0％v/v注射用水到100％(g)注射劑III (1mg/ml，緩沖到pH6)化合物X.................................0.1％w/v磷酸鈉BP................................2.26％w/v檸檬酸..................................0.38％w/v聚乙二醇400.............................3.5％w/v注射用水到100％(h)氣溶膠I mg/ml化合物X.................................10.0三油酸脫水山梨醇酯......................13.5三氯氟代甲烷............................910.0二氯代二氟代甲烷........................490.0(i)氣溶膠IImg/ml化合物X.................................0.2三油酸脫水山梨醇酯......................0.27三氯氟代甲烷............................70.0二氯代二氟代甲烷........................280.0二氯代四氟代乙烷........................1094.0(j)氣溶膠III mg/ml化合物X.................................2.5三油酸脫水山梨醇酯......................3.38三氯氟代甲烷............................67.5
二氯代二氟代甲烷........................1086.0二氯代四氟代乙烷........................191.6(k)氣溶膠IVmg/ml化合物X.................................2.5大豆卵磷脂..............................2.7三氯氟代甲烷............................67.5二氯代二氟代甲烷........................1086.0二氯代四氟代乙烷........................191.6(l)軟膏ml化合物X.................................40mg乙醇....................................300μl水......................................300μl1-十二烷基氮雜環(huán)庚烷-2-酮...............50μl丙二醇..................................至1ml注釋通過藥學領域眾所周知的常規(guī)方法可以獲得以上制劑。通過常規(guī)手段例如提供乙酸鄰苯二甲酸纖維素涂層，可以將片劑(a)-(c)包腸溶衣。氣溶膠制劑(h)-(k)可以與標準、計量劑量的氣溶膠分散劑結合使用，可以用另一種懸浮劑例如脫水山梨醇單油酸酯、脫水山梨醇倍半油酸酯、聚山梨酯80、聚甘油油酸酯或油酸代替所述懸浮劑三油酸脫水山梨醇酯和大豆卵磷脂。
方案1

方案2
方案3
權利要求
1.(2S)-2-({2-(4-氟代苯乙基)-5-[({(2S，4S)-4-(巰基)四氫-1H-吡咯-2-基}甲基)氨基]苯甲?；鶀氨基)-4-(甲基硫基)丁酸或其鹽。
2.(2S)-2-({2-(4-氟代苯乙基)-5-[({(2S，4S)-4-(巰基)四氫-1H-吡咯-2-基}甲基)氨基]苯甲?；鶀氨基)-4-(甲基硫基)丁酸異丙酯或其鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過抑制法尼基蛋白轉移酶(FPT酶)，抑制基因產(chǎn)物的法尼基化的化合物。本發(fā)明也涉及制備該化合物的方法、藥用組合物和治療通過法尼基化介導的疾病，尤其是癌癥的方法。
文檔編號A61K31/454GK1680313SQ20051005633
公開日2005年10月12日 申請日期2000年12月18日 優(yōu)先權日1999年12月22日
發(fā)明者F·T·博伊爾, J·M·瓦德勒沃斯, Z·馬圖斯爾克 申請人:阿斯特拉曾尼卡有限公司