專利名稱：新型維生素d同類物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及至今未知的一類化合物，該類化合物有消炎和免疫調(diào)節(jié)作用以及對某些細胞(包括癌細胞和皮細胞)的誘發(fā)分化和抑制不希望的增殖的強活性，涉及含這些化合物的藥物制劑、制劑的劑量單位和其在治療和預(yù)防甲狀旁腺機能亢進，特別是與腎衰竭有關(guān)的繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進，包括糖尿病、高血壓、痤瘡、脫發(fā)、皮膚老化、免疫系統(tǒng)失調(diào)的許多疾病。諸如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和氣喘的炎性疾病，以非正常細胞分化和/或細胞增殖為特征的疾病如牛皮癬和癌細胞中的應(yīng)用，涉及預(yù)防和/或治療類固醇誘發(fā)的皮膚萎縮以及促進骨生成和治療骨質(zhì)疏松。 在該通式中，X為氫或羥基；R1和R2可相同或不相同地代表氫或C1—4烴基；或者R1和R2一起與帶X基的碳原子形成C3—8碳環(huán)；Q為單鍵或C1—4亞烴基；R1、R2和/或Q可選擇性地以一個或多個氟原子取代。
在本發(fā)明的上下文中，烴基(亞烴基)指從直鏈、支鏈或環(huán)狀、飽和或不飽和烴除去1(2)個氫原子后的殘基。
R1和R2的例子分別包括(但不限于)氫、甲基、三氟甲基、乙基、乙烯基、正丙基、異丙基和環(huán)丙基以及丙烯—2—基。
R1和R2在一起的例子包括亞乙基、三—、四—、五亞甲基。
Q的例子包括(但不限于)單鍵、亞甲基、亞乙基、三亞甲基、二甲基亞甲基、CH＝CH、C≡C、CH2CH＝CH和CH2—C≡C。
本發(fā)明的化合物包括多于一個的非對映異構(gòu)體形式(例如C—20上的R或S構(gòu)型或星碳原子的構(gòu)型—R1和R2不同時；在22，23雙鍵上的E或Z構(gòu)型和Q基團中存在雙鍵時的E或Z構(gòu)型)。本發(fā)明涉及純態(tài)和混合態(tài)的所有這些非對映異構(gòu)體。另外，一個或多個羥基被保護成為在體內(nèi)可再轉(zhuǎn)變成羥基的基團的前藥也在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
其中X為羥基的化合物I是優(yōu)選的化合物，但其中X為氫的化合物實際上是另一類前藥，這些化合物在體外是相對無活性的，但在病人服用后由酶的側(cè)鏈羥基化轉(zhuǎn)變成式I活性化合物(其中X＝OH)。
業(yè)已顯示，1α，25—二羥基維生素D3(1，25(OH)2D3)影響白介素的作用和/或產(chǎn)生(Muller，K.等，Immunol.Lctt.17，361—366(1988))，指示出化合物在治療以免疫系統(tǒng)機能障礙為特征的疾病的潛在用途，例如自身免疫疾病、愛滋病、宿主/移植物反應(yīng)和移植排斥或以非正常白介素—1產(chǎn)生為特征的其它狀況，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和氣喘。
也已顯示，1α，25(OH)2D3能夠刺激細胞分化和抑制細胞過度增殖(Abe，E.等，Proc.Natl.Acad.Sci.，U.S.A..78，4990—4994(1981))，并且已有建議，此化合物可能用于以非正常細胞增殖和/或細胞分化為特征的疾病，諸如白血病、骨髓纖維變性和牛皮癬的治療。
同時也已建議用1，25(OH)2D3或其前藥1α—OH—D3治療高血壓(Lind，L.等，Acta Med.Scand.222，423—427(1987))和糖尿病(Inomatc，S.等，Bone Mineral 1，187—192(1986)。最近通過觀察維生素D遺傳抗性和脫發(fā)間的聯(lián)系，1，25(OH)2D3的另一適應(yīng)癥用1，25(OH)2D3處理可促進生發(fā)(Lancet社論，March 4，P478(1989))。1，25(OH)2D3的局部應(yīng)用減小雄性敘利亞大田鼠耳皮脂腺大小的事實顯示此化合物可能用于治療痤瘡(Malloy，V.L.等，The Tricontinental Meeting for Imvestigetive Dermatology，Washing-lon(1989))。然而，1，25(OH)2D3的這種適應(yīng)癥的治療可能性受到悉知的此激素對鈣代謝的強作用的極大限制；增高血濃度將迅速產(chǎn)生高鈣血。因此，此化合物和它的一些有效力的合成同類物對于用作藥物治療可能要求連續(xù)服用相對高劑量藥物的例如牛皮癬、白血病或免疫疾病是不能完全滿意的。
最近報道過許多維生素D同類物，它們與對于鈣的代謝作用相比，在細胞分化誘導(dǎo)/細胞增殖抑制上顯示了某種程度的選擇性。維生素D同類物鈣泊三醇(Calcipotriol)(INN)或鈣泊三烯(Calcipotriene)(USAN)是世界公認的治療牛皮癬安全有效的藥物。
近期的研究(Colston，K.W.等，Biochem.Pharmacol.44，693—702(1992))支持這一觀點，即維生素D衍生物可能抑制體內(nèi)乳腺癌細胞增殖。維生素D同類物的有前途的免疫性質(zhì)已有報道(Binderup，L.Biochem.Pharmacol，43，1885—1892(1992))。
具有共軛不飽和側(cè)鏈的維生素D3同類物已有報道(PCT公告WO91/00855)(Binderup，E.等，Vitamin D，Gene Regulation，Structure—Fun—Ction Analysis and Clinical Application，ed.by Norman，A.W.，Bouillon，R.and Thomasset，M.，Walter der Gruyter，Berlin，(1991)，192—193)，特別是EB1089(1(S)，3(R)—二羥基—20(R)—(5’—乙基—5’—羥基—庚—1’(E)，3’(E)—二烯—1’—基)—9，10—斷孕甾—5(Z)，7(E)，10(19)—三烯，一有共軛二烯側(cè)鏈的骨化三醇同類物，是開拓抗癌藥深入研究的主題(參見第九次維生素D討論會摘要“Abstracts from Ninth Workshop onVitamin D”，May28—June2，1994，Orlando，F(xiàn)lorida，USA)。
維生素D同類物的細小結(jié)構(gòu)差異能在生物活性上產(chǎn)生大的變化這一事實(參見Binderup，L.等Biochem.Pharmacol.42，1569—1575(1991))意味著現(xiàn)有的知識狀況不能推斷出有優(yōu)勢選擇性程度的維生素D同類物的結(jié)構(gòu)，如與體外腸內(nèi)維生素D受體結(jié)合親和力相比體外較大的細胞分化活性所反映的選擇性。而且，由于體外受體結(jié)合親和力常常與體內(nèi)研究的結(jié)果不一致這一事實使事情復(fù)雜化，這或許反映了化合物之間的藥物動力學(xué)差異。
本發(fā)明的化合物是維生素D的22—烯—24—炔同類物，在結(jié)構(gòu)上與任何維生素D同類物不同。用本發(fā)明的方法制備了具有20S和20R構(gòu)型的兩類同類物。這些化合物的活性高，選擇性好。因此，與先有技術(shù)相比，式I的具體化合物顯示了下述的一個或多個優(yōu)點(a)對細胞分化或增殖的更強的效果；(b)與鈣的代謝作用對照在細胞分化/增殖的強作用上的較大的選擇性，(c)更高的酸穩(wěn)定性(對口服重要)。
下表是本發(fā)明化合物和先有技術(shù)化合物鈣泊三醇(見上)和EB1098(見上)的試驗數(shù)據(jù)
a)此試驗測定相對于1α，25(OH)2D3化合物對U937人類巨噬細胞白血病細胞的抗增殖效果。其數(shù)大于1時，說明與1α，25(OH2D3相比，化合物具有較高的抗增殖活性。試驗完全按下述文獻進行L.Binderup和E.Bramm，Biochem.Pharmacol.，37(1988)889—895。
b)此試驗測定化合物在大鼠中相對于1α，25(OH)2D3的尿鈣效應(yīng)。其數(shù)小于1小時，說明化合物與1α，25(OH)2D3相比，鈣分泌變化較小。此試驗與上述試驗相同，完全按下述文獻進行L，Binderup和E.Bramm，Biochem.Pharmacol.，37，(1988)889—895。
c)在此試驗中，化合物在25℃下用10微升(μl)濃2HCl/2H2O于0.6mlC2H3CN中的混合物處理，并用1H NMR(500MHz)測定近似半衰期。
從表中似乎可以得知，所希望有的抗增殖與不希望有的血鈣活性的比率，化合物101高于鈣泊三醇和EB1089。
因此，本發(fā)明的化合物特別適合于局部和全身治療和預(yù)防以非正常細胞增殖和/或細胞分化為特征的人畜疾病，諸如某些皮膚病，包括牛皮癬和某些癌形式和/或免疫系統(tǒng)的失調(diào)，例如自身免疫疾病，包括糖尿病、宿主/移植物反應(yīng)和移植排斥。本發(fā)明的化合物也適于炎性疾病的治療，諸如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和氣喘。痤瘡、脫發(fā)和高血壓是可用本發(fā)明化合物治療的其它一些病況。最后，在以本發(fā)明化合物作局部處理后，觀察到了皮膚的增厚，因此這些化合物可用于治療或預(yù)防皮膚萎縮和皮膚老化，包括光老化。
因為本發(fā)明化合物在連續(xù)使用時產(chǎn)生高鈣血的傾向較小，它們可望對長期治療甲狀旁腺機能亢進(特別是與腎衰竭相關(guān)的繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進)和促進骨生成以及治療骨質(zhì)疏松上是有價值的。
本發(fā)明的化合物可與其它的藥物聯(lián)合使用。本發(fā)明的化合物結(jié)合例如環(huán)孢菌素A治療，防止移植排斥和宿主/移植物反應(yīng)是很有利的。
式I的化合物可以方便地用方案1中的路線自維生素D衍生物1或2來制備。
本文中使用下面所列的標準縮寫形式DMF＝N，N—二甲基甲酰胺Et＝乙基“HF”＝5％氟化氫/乙腈∶水(7∶1，V/V)Me＝甲基pet.ether＝石油醚(以戊烷為主)PPTS＝甲苯—4—磺酸吡啶翁r.t＝室溫TBAF＝氟化四正丁銨·三水合物TBDMS＝叔丁基二甲基甲硅烷基THF＝四氫呋喃IHP＝四氫—4H—吡喃—2—基TMS＝三甲基甲硅烷基TsO＝甲基—4—磺酸鹽(酯)。
方案1式工化合物的合成 方案1注釋a)堿，例如正丁鋰/IV(Y＝(EtO)2P(O)，Z＝H或被保護醇，例如OTHP、OTMS、OSiPh2Me)/THF/—70至20℃/20—200分鐘b)汞燈/三重酶化劑，例如蒽醌/三乙胺/二氯甲烷/10—15℃/10—60分鐘c)所有醇基的去保護，例如用“HF”/乙酸乙酯/20—200分鐘，或用TBAF/THF/60℃/20—200分鐘和/或PPTS/EtOH/50℃/20—200分鐘 式中Z是氫、羥基、三烷基甲硅烷氧基或四氫—4—吡喃—2—基氧基。
通式II和III的化合物的合成敘述于制備實例5—12。
側(cè)鏈結(jié)構(gòu)單元通式IV的合成根據(jù)方案2所述的方法并敘述于制備實例1—4。
方案2側(cè)鏈結(jié)構(gòu)單元式IV的合成 Y ZHOOH or H↓ aTsO OH or H↓ bTsO 被保護醇或H↓ cBr被保護醇或H↓ d(EtO)2P(O) 被保護醇或HQ.R1，R2和Z的定義如上。
方案2注釋a)TsCl/堿，例如KOH或吡啶/乙醚或二氯甲烷/0—25℃/0.5—5小時b)Z＝OH時3，4—二氫—2H—吡喃/PPTS/二氯甲烷/r.t./2—20小時或氯化三烷基甲硅烷/堿，例如三乙胺/THF/r.
t./1—24小時c)溴化鈉/DMF/r.t/1—10小時a)亞磷酸三乙酯/110—150℃/0.4—4小時通式IV(其中Y＝OH，Z＝OH或H)的炔丙醇的合成敘述于化學(xué)文獻(例如Mclamore，W.M.等人，J.Org.Chem.，19，570—574(1954)；Gouge，M.，Ann.Chim.6，648—702(1951)；Colonge，J.，Bull.Soc.Chim.Fr.，1959，408—412)中和/或為本領(lǐng)域技術(shù)人員所已知。
本發(fā)明的化合物意欲在上述人畜疾病治療中有用的藥物組合物中使用。
式I化合物(下文稱活性組分)的有效治療要求量自然將根據(jù)具體的化合物、給藥方法和被治療的哺乳動物而有不同，本發(fā)明的化合物可經(jīng)非腸道、關(guān)節(jié)內(nèi)、腸道或局部方法給藥。腸道給藥能很好吸收，是在全身性疾病治療中的優(yōu)選方法。在象牛皮癬或眼疾的皮膚病治療中，局部或腸道給藥形式是優(yōu)先選擇的。象氣喘之類的呼吸道疾病，優(yōu)先選擇氣溶膠形式的給藥。
活性組分可以單獨以原料化學(xué)品使用，但最好將其置于藥物制劑中，通?；钚越M分為制劑重量的0.1ppm至0.1％。
“劑量單位”一詞即單一的整體量，例如能給病人使用的一次劑量，并且易于處理和包裝成為包括此活性組分或其與固、液藥物稀釋劑或載體的混合物的在物理和化學(xué)上穩(wěn)定的單位劑量。
本發(fā)明的人畜使用的制劑包括活性組分和其藥物學(xué)上可接受的載體，也可以加入其它的治療組分。載體必須在與制劑中其它組分相容性的意義上是“可接受的”，并且對其接受者無害。
制劑包括例如適合于經(jīng)口、直腸、非腸道(包括皮下、肌內(nèi)和靜脈)、關(guān)節(jié)內(nèi)和局部給藥的形式。
制劑可方便地制成劑量單位形式，并可用藥學(xué)領(lǐng)域中任何悉知的方法來制備，所有的方法都包括將活性組分與構(gòu)成一個或多個輔助組分的載體結(jié)合在一起的步驟。一般，制劑的制備是將活性組分與液體載體或極細的固體載體或者二者均勻而緊密地結(jié)合。然后在需要時將產(chǎn)品制成所要求的制劑形式。
適合于口服的本發(fā)明制劑可以是不連續(xù)的單位形式，如膠囊、粉袋劑、片劑或錠劑，它們都含有預(yù)定量的活性組分；可以是粉劑或顆粒劑的形式；可以是在非水液體或水液體中的溶液或懸浮液的形式；或是水包油乳液或油包水乳液的形式?；钚越M分也可以以大團劑、干藥糖劑或膏劑給藥。
片劑可通過將活性組分與選擇使用的一種或多種輔助組分經(jīng)壓制或模制而成。壓制的片劑可通過在一適合的機器中加壓諸如粉狀或粒狀自由流動形式的活性組分而制備，也可選擇性地混合以粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、表面活性劑或分散劑。模制的藥片可通過在一適合的機器里模塑粉狀的活性組分和以惰性液體稀釋劑潤濕的適合載體的混合物來制取。
直腸用的制劑形式可為摻和了活性組分和如可可脂一類的載體的栓劑或用灌腸的形式。
適合的非腸道用制劑包括消毒的活性組分油制劑或水制劑，最好是與接受者的血等滲的。
適合的關(guān)節(jié)內(nèi)使用的制劑可以是消毒的活性組分(可以是微晶形式)水制劑，例如微晶水懸浮液。也可將活性組分以脂質(zhì)體制劑或可生物降解的聚合物體系用于關(guān)節(jié)內(nèi)和眼科使用。
適合的局部使用的包括眼用的制劑包括液體或半液體制劑，諸如搽劑、洗劑、凝膠、敷劑、水包油或油包水乳液(如霜劑、軟膏或糊劑)；溶液或懸浮液，諸如滴劑。
對氣喘的治療，可用吸粉、無噴罐的自推或噴霧制劑、微粉化或氣霧化器。使用這些制劑時，其粒度最好是在10—100微米的范圍。
這種制劑的最優(yōu)選形式是來自粉末吸入裝置或自推施粉制劑的肺部使用的細粉。如果是自推溶液和噴霧制劑，可選擇有所需噴霧特性的(即能夠產(chǎn)生有所需粒徑的噴霧)閥或使活性組分成為控制粒徑的懸浮粉塵來達到其作用。這些自推制劑可以是施粉制劑或是活性組分作為溶液或懸浮液液滴施撒的制劑。
自推施粉制劑最好包括固體活性組分的分散顆粒和大氣壓下沸點低于18℃的液體推進劑。液體推進劑可以是任何已知的適合于醫(yī)藥使用的推進劑，并可包括C1—6烷烴或鹵代C1—6烷烴或其混合物，氯化的或氟化的C1—6烷烴是特別優(yōu)選的。推進劑一般占制劑的45—99.9％(重量/重量)，活性組分為0.1ppm—0.1％(重量/重量)。
除上述組分外，本發(fā)明的制劑可包括一種或多種附加組分，諸如稀釋劑、緩沖劑、調(diào)味劑、粘合劑、表面活性劑、增稠劑、潤滑劑、防腐劑如羥基苯甲酸甲酯(包括抗氧化劑)、乳化劑等。組合物可進一步含其它常用于治療上述病理情況的治療活性化合物。
本發(fā)明還涉及有上述病理狀態(tài)的病人的治療方法。該方法包括給需要治療的病人施用有效量的一種或多種式I化合物，可以單獨施用，也可與一種或多種常用于治療所說病理狀態(tài)的治療活性化合物聯(lián)合施用。用本發(fā)明化合物和/或進一步用治療活性化合物治療可以是同時或間隔進行。
在治療全身性疾病時，式I化合物的日劑量為0.1—100μg，優(yōu)選0.2—25μg。在皮膚病的局部治療時，其軟膏、霜劑或洗劑含式I化合物0.1—500μg/g，優(yōu)選0.1—100μg/g。局部使用的眼膏、滴劑或凝膠含式I化合物0.1—500μg/g，優(yōu)選0.1—100μg/g?？诜M合物最好是片劑、膠囊或滴劑，每劑量單位含0.05—50μg/g，優(yōu)選0.1—25μg/g式I化合物。
本發(fā)明現(xiàn)以下述非限制性總體步驟、制備例和實施例進行進一步的描述。
總體步驟、制備例和實施例化合物I的實施例列于表1，通式II和III的化合物列于表2。
引用1H NMR(300MHz)重氫氯仿溶液相對于內(nèi)標四甲硅烷(δ＝0.00)或氯仿(δ＝7.25)的化學(xué)位移值(δ)，除非另外指明。多重峰的值，不管是標明(二重峰(d)，三重峰(t)，四重峰(q))或不標明(m)，給出了接近中點的值，除非引用了一范圍(S＝單峰，b＝寬峰)。偶合常數(shù)(J)以赫磁(Hz)表示，常近似到最接近的單位。
醚為乙醚，經(jīng)用鈉干燥。THF用鈉/二苯酮干燥。反應(yīng)在室溫下進行，除非另外注明。所指的后處理步驟包括用指定的溶劑(否則用有機反應(yīng)溶劑)稀釋、先用水然后用鹽水提取、用無水硫酸鎂干燥，并經(jīng)真空濃縮得到殘渣。用硅膠色譜法進行分離。
表1化合物號 實施例號 通式 20 QR1R2X位構(gòu)型101 1 I R 單鍵 Et Et OH102 2 I S 單鍵 Et Et OH103 I R CH2Et Et OH104 I S CH2Et Et OH105 I R (CH2)2Et Et OH106 I S (CH2)2Et Et OH107 I R CH＝CHEt Et OH108 I S CH＝CHEt Et OH109 I R C≡C Et Et OH110 I S C≡C Et Et OH111 3 I R 單鍵 Me Me OH112 4 I S 單鍵 Me Me OH113 I R CH2Me Me OH114 I S CH2Me Me OH115 I R (CH2)2Me Me OH116 I S (CH2)2Me Me OH117 I R CH＝CHMe Me OH118 I S CH＝CHMe Me OH119 I R C≡C Me Me OH120 I S C≡C Me Me OH121 I R 單鍵 CF3CF3OH122 I S 單鍵 CF3CF3OH
表2化合物 制備 通式 20 QR1R2X號 例號 位構(gòu)型201 5 II R 單鍵Et Et OH202 6 II S 單鍵Et Et OH203 II R CH2Et Et OH204 II S CH2Et Et OH205 II R (CH2)2Et Et OH206 II S (CH2)2Et Et OH207 II R CH＝CH Et Et OH208 II S CH＝CH Et Et OH209 II R C≡CEt Et OH210 II S C≡CEt Et OH211 7 II R 單鍵Me Me OH212 8 II S 單鍵Me Me OH213 II R CH2Me Me OH214 II S CH2Me Me OH215 II R (CH2)2Me Me OH216 II S (CH2)2Me Me OH217 II R CH＝CH Me Me OH218 II S CH＝CH Me Me OH219 II R C≡CMe Me OH220 II S C≡CMe Me OH221 II R 單鍵CF3CF3OH222 II S 單鍵CF3CF3OH301 9 IIIR 單鍵Et Et OH302 10 IIIS 單鍵Et Et OH303 IIIR CH2Et Et OH304 IIIS CH2Et Et OH305 IIIR (CH2)2Et Et OH306 IIIS (CH2)2Et Et OH307 IIIR CH＝CH Et Et OH308 IIIS CH＝CH Et Et OH309 IIIR C≡CEt Et OH
表2(續(xù))化合物制備通式20 Q R1R2X號例號 位圖型310 IIIS C≡C Et Et OH31111 IIIR 單鍵 Me Me OH31212 IIIS 單鍵 Me Me OH313 IIIR CH2Me Me OH314 IIIS CH2Me Me OH315 IIIR (CH2)2Me Me OH316 IIIS (CH2)2Me Me OH317 IIIR CH＝CHMe Me OH318 IIIS CH＝CHMe Me OH319 IIIR C≡C Me Me OH320 IIIS C≡C Me Me OH321 IIIR 單鍵 CF3CF3OH322 IIIS 單鍵 CF3CF3OH總體步驟1化合物1或2與通式IV(Y＝(EtO)2P(O)，Z＝H或被保護羥基，例如OTHP、OTMS、OSiph2Me)的化合物縮合成通式II化合物將化合物1或2(0.5克)和通式IV化合物溶于THF(15ml)，并冷卻至-70℃。加入正丁鋰(0.6ml，1.5M于己烷)，混合物在-70℃下攪拌15分鐘，接著溫?zé)嶂潦覝亍＠^續(xù)攪拌1.5小時，經(jīng)用色譜法分離，得到通式II的化合物?？傮w步驟2通式II化合物至通式III化合物的異構(gòu)化將通式II化合物(0.1mmol)、蒽(0.2mmol)和三乙胺(0.05ml)于二氯甲烷中的溶液置于有氬氣保護的派力斯燒瓶中，在攪拌和約10℃的溫度下用TQ760Z2型(Hanau)高壓紫外燈的紫外線照射20分鐘。反應(yīng)混合物經(jīng)真空濃縮并用石油醚(2×5ml)處理。經(jīng)過濾后，濾液真空濃縮，色譜法純化(洗脫劑二氯甲烷和石油醚混合物)，得到標題化合物?？傮w步驟3用“HF”處理進行通式III化合物至相應(yīng)的化合物I的脫保護反應(yīng)在氬氣保護和攪拌下將乙腈(1.0ml)加入通式III的化合物(0.05mmol)于乙酸乙酯(0.25ml)中的溶液，接著加入5％的氫氟酸于乙腈/水(7∶1)中的溶液(0.8ml)。在環(huán)境溫度下繼續(xù)攪拌45分鐘。加入碳酸氫鈉飽和水溶液(10ml)，并將反應(yīng)混合物進行后處理(乙酸乙酯)。殘渣用色譜法純化(洗脫劑乙酸乙酯，或乙酸乙酯和己烷或戊烷的混合物)，得到標題化合物?？傮w步驟4用氟化四正丁銨處理進行通式化合物III至相應(yīng)化合物I的脫保護反應(yīng)在60℃和氬氣保護下將TBAF(300mg)于THF(5ml)中的溶液加入通式III的化合物(0.16mmol)于THF(5ml)中的溶液，同時攪拌。然后在60℃下繼續(xù)攪拌1小時。反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后進行后處理(乙酸乙酯)。殘渣用色譜法純化(洗脫劑0％—50％石油醚于乙酸乙酯中的溶液)，得到標題化合物?？傮w步驟5用甲苯—4—磺酸吡啶鎓處里進行通式III的化合物至相應(yīng)化合物I的脫保護反應(yīng)將PPIS(2mg)加入通式III化合物(0.16mmol)于99％乙醇(2ml)中的溶液，此混合物于50℃和氬氣保護下攪拌1小時。用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌混合物，然后進行后處理(乙酸乙酯)。粗產(chǎn)物用色譜法純化(洗脫劑0％—50％石油醚于乙酸乙酯中的溶液)，得到標題化合物。制備例13—乙基—6—(4—甲苯磺酰氧基)—己—4—炔—3—醇，化合物401將冰冷卻的4—甲苯磺酰氯(6.4g)和4—乙基己—2—炔—1，4—二醇(Mclamore，W.M.等，J.Org，Chem.，19，570—574(1954)和Gouge，M.，Ann，Chim.，6，648—702(1951))(4.0g)于乙醚(40ml)中的溶液與粉狀氫氧化鉀(15g)一起攪拌2小時。加水后，將混合物用乙醚(2×250ml)提取。處理后用色譜法純化(洗脫液乙醚/戊烷1∶1(V/V))，得到標題化合物(6.5g)。
1H NMR0.91(t，6H)，1.55(q，4H)，1.83(S，1H)，2.45(s，2H)，4.76(S，2H)，7.36(d，2H)，7.82(d，2H)。制備例24—乙基—4—(四氫—4H—吡喃—2—基氧基)—1—(4—甲苯磺酰氧基)己—2—炔，化合物402
在室溫下將化合物401(6.5g)、PPTS(0.73g)和3，4—二氫—2H—吡喃(2g)于二氯甲烷(33ml)中的溶液攪拌17小時。加入二氯甲烷(250ml)，用鹽水(250ml)洗滌溶液。用色譜法進行處理(洗脫劑乙醚/戊烷1∶1(V/V))，得到標題化合物(7.1g)。
1H NMR0.85(t，6H)，1.55(q，4H)，1.42—1.90(m，6H)，2.45(S，3H)，3.47(m，1H)，3.89(m，1H)，4.79(S，2H)，4.85(m，1H)，7.35(d，2H)，7.82(d，2H)。制備例31—溴—4—乙基—4—(四氫—4H—吡喃—2—基氧基)己—2—炔，化合物403在室溫下將化合物402(7.0g)和溴化鈉(7.0g)于DMF(50ml)中的混合物攪拌4小時。加入乙醚(300ml)，混合物用色譜法處理(洗脫劑乙醚/戊烷1∶1(V/V))，得到標題化合物(3.9g)。
1H NMR0.96(t，3H)，0.96(t，3H)，1.45—1.90(m，10H)，3.51(m，1H)，3.95(m，1H)，3.98(s，2H)，5.00(m，1H)。制備例44—乙基—4—(四氫—4H—吡喃—2—基氧基)己—2—炔—1—基膦酸二乙酯，化合物404將化合物403(2.0g)和亞膦酸三乙酯(4.2ml)的混合物加熱至130℃1.5小時。真空(油泵)除剩余亞磷酸三乙酯2小時，得到標題化合物(2.2g)。
1H NMR0.96(m，6H)，1.35(t，6H)，1.45—1.95(m，10H)，2.81(d，J＝21.7Hz，2H)，3.5(m，1H)，3.93(m，1H)，4.18(m，4H)，5.05(m，1H)。制備例5化合物201總體步驟1；化合物1原料化合物IV化合物404色譜洗脫劑乙醚/戊烷1∶3(V/V)1H NMR0.05(m，12H)，0.56(s，3H)，0.85(s，9H)，0.89(s，9H)，0.94(t，6H)，1.05(d，3H)，1.10-2.25(m，24H)，2.30(bd，1H)，2.55(dd，1H)，2.87(bd，1H)，3.48(m，1H)，3.93(m，1H)，4.21(m，1H)，4.52(m，1H)，4.93(m，1H)，4.98(m，1H)，5.05(m，1H)，5.44(d，J＝15.8 Hz，1H)，5.82(d，1H)，5.99(dd，J＝15.8Hz and J＝8.8Hz，1H)，6.44(d，1H).制備例6化合物202總體步驟1；化合物2原料化合物IV化合物404色譜洗脫劑二氯甲烷/戊烷2∶1(V/V)1H NMR0.06(m，12H)，0.50(s，3H)，0.85(s，9H)，0.89(s，9H)，0.82-1.00(m，9H)，1.00-2.20(m，24H)，2.30(bd，1H)，2.55(dd，1H)，2.86(bd，1H)，3.46(m，1H)，3.94(m，1H)，4.21(m，1H)，4.52(m，1H)，4.93(m，1H)，4.98(m，1H)，5.01(m，1H)，5.43(d，J＝15.9Hz，1H)，5.81(d，1H)，5.98(dd，J＝15.9Hz and J＝9.6Hz，1H)，6.44(d，1H).制備7化合物211總體步驟1化合物1原料化合物II4—甲基—4—(四氫—4H—吡喃—2—基氧基)戊—2—炔—1—基膦酸二乙酯，由4—甲基戊—2—炔—1，4—二醇(Gouge，M.，Ann，Chim.，6，648—702(1951))制備，如方案2所述。
色譜洗脫劑乙醚/戊烷1∶10(V/V)。制備例8化合物212總體步驟1；化合物2原料化合物II4—甲基—4—(四氫—4H—吡喃—2—基氧基)戊—2—炔—1—基膦酸二乙酯(見制備7)。
色譜洗脫劑乙醚/戊烷1∶10(V/V)制備例9化合物301總體步驟2原料化合物II化合物201色譜洗脫劑乙醚/戊烷1∶10(V/V)1H NMR0.05(m，12H)，0.54(s，3H)，0.86(s，18H)，0.95(m，6H)，1.05(d，3H)，1.08-2.25(m，25H)，2.43(dd，1H)，2.82(bd，1H)，3.48(m，1H)，3.91(m，1H)，4.18(m，1H)，4.34(m，1H)，4.85(m，1H)，5.03(m，1H)，5.17(m，1H)，5.43(d，J＝15.8Hz，1H)，5.99(dd，J＝15.8Hz and J＝8.7Hz，1H)，6.00(d，1H)，6.44(d，1H).制備例10化合物302總體步驟2原料化合物II，化合物202色譜洗脫劑二氯甲烷/戊烷4∶1(V/V)
1H NMR0.05(m，12H)，0.49(s，3H)，0.86(s，18H)，0.75-2.00(m，32H)，2.11(m，1H)，2.20(dd，1H)，2.44(dd，1H)，2.81(bd，1H)，3.47(m，1H)，3.95(m，1H)，4.18(m，1H)，4.36(m，1H)，4.85(m，1H)，5.01(m，1H)，5.17(m，1H)，5.43(d，J＝15.9Hz，1H)，5.97(dd，J＝15.9Hz and J＝9.6Hz，1H)，6.00(d，1H)，6.22(d，1H).制備例11化合物311總體步驟2原料化合物II化合物211色譜洗脫劑二氯甲烷/戊烷4∶1(V/V)制備12化合物312總體步驟2原料化合物II化合物212色譜洗脫劑二氯甲烷/戊烷4∶1(V/V)實施例11(S)，3(R)—二羥基—20(R)—(5—乙基—5—羥基—庚—1(E)—烯—3—炔—1—基—9，10—斷—孕甾—5(Z)，7(E)，10(19)—三烯(化合物101)方法總體步驟3原料化合物301色譜洗脫劑乙酸乙酯1H NMR0.56(s，3H)，1.03(t，6H)，1.05(d，3H)，1.15-2.25(m，21H)，2.31(dd，1H)，2.60(m，1H)，2.83(m，1H)，4.23(m，1H)，4.43(m，1H)，5.00(m，1H)，5.33(m，1H)，5.43(d，J＝15.8Hz，1H)，5.99(dd，J＝15.8Hz and 8.8Hz，1H)，6.01(d，1H)，6.37(d，1H).實施例21(S)，3(R)—二羥基—20(S)—(5—乙基—5—羥基—庚—1(E)—烯—3—炔—1—基—9，10—斷孕甾—5(Z)，7(E)，10(19)—三烯(化合物102)方法總體步驟3原料化合物302色譜洗脫劑乙酸乙酯1H NMR0.50(s，3H)，0.95(d，3H)，1.03(t，6H)，1.10-2.25(m，21H)，2.31(dd，1H)，2.60(m，1H)，2.83(dd，1H)，4.23(m，1H)，4.43(m，1H)，5.00(m，1H)，5.28(m，1H)，5.42(d，J＝15.9Hz，1H)，5.98(dd，J＝15.9Hz and 9.7Hz，1H)，6.01(d，1H)，6.37(d，1H).實施例31(S)，3(R)—二羥基—20(R)—(5—甲基—5—羥基—己—1(E)—烯—3—炔—1—基)—9，10—斷—孕甾—5(Z)，7(E)，10(19)—三烯(化合物111)方法總體步驟3原料化合物311色譜洗脫劑乙酸乙酯實施例41(S)，3(S)—二羥基—20(S)—(5—甲基—5—羥基—己—1(E)—烯—3—炔—1—基—9，10—斷—孕甾—5(Z)，7(E)，10(19)—三烯(化合物112)方法總體步驟3原料化合物312色譜洗脫劑乙酸乙酯實施例5含化合物101的膠囊將化合物101溶于花生油至最后濃度為1μg/ml油。加熱混合10重量份明膠、5重量份甘油。0.08重量份山梨酸鉀和14重量份蒸餾水，并將其制成明膠軟膠囊。每個軟膠囊裝入100μl化合物101的油溶液。實施例6含化合物101的皮膚用霜劑將化合物101(0.05mg)溶于杏仁油(1g)。在此溶液中加入礦油(40g)和自乳化蜂蠟(20g)?；旌衔锛訜嵋夯＜尤霟崴?40m1)后，將混合物充分混合。所得到的霜劑每克含約0.5μg化合物101。
權(quán)利要求
1.式I的化合物 式中X是氫或羥基；R1和R2可相同或不相同地代表氫或C1—4烴基；或者R1和R2一起與帶X基的碳原子形成C3-8碳環(huán)；Q為單鍵或C1-4亞烴基，烴基(亞烴基)系指從一直鏈、支鏈或環(huán)狀飽和或不飽和碳氫化合物除去1(2)個氫原子后的殘余基團；R1、R2和/或Q可選擇性地被一個或多個氟原子所取代；和I的前藥，前藥中的一個或多個羥基被保護成為在體內(nèi)可再轉(zhuǎn)變成羥基的基團。
2.權(quán)利要求1的式I化合物，其中Q為單鍵。
3.權(quán)利要求1的式1化合物，其中X為羥基。
4.權(quán)利要求1—3任一項的化合物的純立體異構(gòu)體，或這種立體異構(gòu)體的混合物。
5.權(quán)利要求4的化合物的立體異構(gòu)體，該異構(gòu)體的C—20為R構(gòu)型。
6.權(quán)利要求1的化合物，該化合物為1(S)，3(R)—二羥基—20(R)—(5—乙基—5—羥基—庚—1(E)—烯—3—炔—1—基)—9，10—斷—孕甾—5(Z)，(7E)，10(19)—三烯。
7.生產(chǎn)權(quán)利要求1的式I化合物的方法，該方法是將1(S)，3(R)—雙(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)—20(R或S)—甲?；?，10—斷—孕甾—5(E)，7(E)，10(19)—三烯在四氫呋喃中、在一強堿(諸如正丁鋰)存在下于—70至20℃下與通式IV的化合物反應(yīng)10—100分鐘， 產(chǎn)生通式II的化合物， 式中Y為(EtO)2PO；Z＝H或被保護醇，例如四氫吡喃氧基、三甲基甲硅烷氧基；Q、R1、R2定義如權(quán)利要求1；式II化合物經(jīng)5E至5Z的三重敏化光異構(gòu)化，接著用氫氟酸、氟化四正丁銨和/或?qū)妆交撬徇拎ゆf脫甲硅烷基化以形成所需要的權(quán)利要求1的式I化合物。
8.一種藥物組合物，該組合物含有效量的權(quán)利要求1—6的一種或多種化合物和藥物上可接受的無毒載體和/或輔助劑。
9.權(quán)利要求8的藥物組合物，該組合物呈劑量單位形式，含劑量單位重0.1ppm至0.1％的式I化合物。
10.一種治療和預(yù)防下列許多疾病的方法，該疾病包括甲狀旁腺機能亢進和自身免疫疾病(包括糖尿病)、高血壓、痤瘡、脫發(fā)、皮膚老化(包括光老化)、免疫系統(tǒng)失調(diào)、諸如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和氣喘等炎性疾病、諸如牛皮癬之類的以非正常細胞分化和/或細胞增殖為特征的疾病、甾體誘發(fā)的皮膚萎縮，以及促進骨生成和治療骨質(zhì)疏松的方法，該方法包括對需要治療的病人給以有效量的權(quán)利要求8的藥物組合物。
11.權(quán)利要求1—6任一項的化合物在制備用于治療和預(yù)防下列許多疾病的藥物中的用途，其中所述疾病包括甲狀旁腺機能亢進和自身免疫疾病(包括糖尿病)、高血壓、痤瘡、脫發(fā)、皮膚老化(包括光老化)、免疫系統(tǒng)失調(diào)、諸如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和氣喘等炎性疾病、諸如牛皮癬之類的以非正常細胞分化和/或細胞增殖為特征的疾病、甾體誘發(fā)的皮膚萎縮，以及在制備用于促進骨生成和治療骨質(zhì)疏松的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I的化合物，其中X為氫或羥在；R
文檔編號A61P17/00GK1125941SQ94192588
公開日1996年7月3日 申請日期1994年7月1日 優(yōu)先權(quán)日1993年7月12日
發(fā)明者G·格魯索倫森 申請人:里奧藥物制品有限公司