專利名稱：一種新型腸道微生態(tài)制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種新型腸道微生態(tài)制劑，具體講是以中藥地黃制備而成的，能使人體內(nèi)自身雙歧桿菌成倍增生的口服制劑，屬于中藥領域。
微生態(tài)學研究發(fā)現(xiàn)，在人體腸道內(nèi)約有一百種百萬億個細菌棲居，它們分為有益菌、有害菌，菌群之間保持著平衡狀態(tài)，維持著人體的健康其中與人的健康最密切的是雙歧桿菌，它們定植于腸粘膜的深層，形成了一道生物屏障，阻止外襲菌的入侵，抑制腸內(nèi)腐敗、增強人體的免疫力，促進營養(yǎng)物的消化吸收，合成B族維生素及維生素K，減少腸源性內(nèi)毒素的來源，從而對保護肝臟、防治腫瘤以及抗衰老起到有益的作用、由于某種原因，如抗生素的大量或長期服用，免疫抑制劑，放療和化療的使用，手術或某種精神及肉體刺激或飲食不當?shù)仍蚴闺p歧桿菌減少時，其它有害菌就會趁機而入，引起菌群失調(diào)，代謝異常，各種毒素、腐敗物質(zhì)、致癌物質(zhì)增加，產(chǎn)生多種病變，如腹瀉、便秘、消化功能紊亂以及一些難以治愈的慢性疾病，如動脈硬化、肝臟損害、腸道癌變等，腹瀉為這些疾病中最明顯，發(fā)病率最高的病種之一在我國，每年腹瀉發(fā)病人數(shù)高達8億多人次，其中兒童占5億人次，嚴重地危害著人們的健康。而對于腹瀉的治療，既缺乏十分理想的藥物，又存在著不合理用藥的問題。對于急性性腹瀉無論是感染型或非感染型，人們常用抗生素或抗動力藥物療治療。目前濫用抗菌素情況已十分嚴重，在腹瀉治療中平均使用率已高達84％，而70％的感染性腹瀉并不需要抗菌素治療?？咕幍臑E用可導致菌群失調(diào)，甚至二重感染。在腹瀉治療中，抗動力藥的不恰當使用，抑制了病菌及毒素的排泄，會加重病情。對于慢性腹瀉有效的治療藥則更少。
近代研究結(jié)果證實，腹瀉引起菌群失調(diào)，尤為明顯的是雙歧桿菌數(shù)大大減少，保持和恢復腸道內(nèi)雙歧桿菌的優(yōu)勢，是預防和治療腹瀉的重要條件?；谶@種認識以及對人體腸道微生態(tài)的深入研究，近10年來以雙歧桿菌及其增生劑為代表的微生態(tài)療法受到了普遍關注。
針對這種情況，開發(fā)雙歧因子，通過增生雙歧桿菌，重建腸道天然生物屏障保護作用達到防治腹瀉的目的，無疑為腹瀉病的治療提供了新的治療手段，它完全避免了抗生素與抗動力藥過多使用所造成的副作用，可以說這種微生態(tài)療法使對腹瀉病的治療進入了一個完全嶄新的時代同時，由于雙歧桿菌具有多方畫的醫(yī)療保健作用，雙歧因子的開發(fā)，無疑會對增進人們的身體健康做出貢獻。
就活菌制劑而言，目本有16家廠商，生產(chǎn)20種包括乳酸菌、雙歧桿菌的單一或三聯(lián)的活菌制劑、雙歧桿菌的醫(yī)藥用制劑德國有三種、法國有二種，瑞士、南斯拉夫各一種。
我國從80年代開始進行將微生態(tài)制劑應用于醫(yī)療的研究，于90年代開發(fā)出了作為藥物的雙歧桿菌的單一和三聯(lián)活菌制劑麗珠腸樂和培菲康，圍繞雙歧桿菌的基礎及臨床研究正日益深入。這些研究肯定了雙歧桿菌多方面的醫(yī)療作用，調(diào)節(jié)腸道菌群，防治腹瀉便秘，降低血內(nèi)毒素，保護肝臟，對癌癥的防治作用，預防衰老作用，其中最多的是其對各種腹瀉如痢疾，小兒輪狀病毒感染性腹瀉，腸炎等的治療，可以說雙歧桿菌的醫(yī)療作用在國內(nèi)外均已得到了肯定。圍繞雙歧桿菌的各種產(chǎn)品也與日俱增。但是由于雙歧桿菌活菌劑技術要求高。若不嚴格控制條件質(zhì)量難以保證，且會有一些潛在危險，另外，由于活菌制劑的使用、保存等都有一定特殊要求，因此，尋求既能補充雙歧桿菌數(shù)量，又避免活菌制劑不足的一種新型制劑，成為醫(yī)藥工作者的研究方向。雙歧桿菌增生因子就是基于這一追求應運而生的優(yōu)良產(chǎn)品。
本發(fā)明目的是提供一種以中藥為原料制備的具有促進人體內(nèi)雙歧桿菌增生作用的口服制劑。
本發(fā)明的口服制劑是以大然中草藥鮮地黃或鮮地黃干片為原料，經(jīng)提取分離制備而成。具體制備工藝如下(1)提取取鮮地黃或鮮地黃干片加水或含醇量在95％以下的乙醇水溶液提取兩次，第一次加溶媒10-20倍量，第二次加溶媒5-10倍量，合并兩次提取液，如果提取液含有乙醇，則回收乙醇至無醇味，備用。
(2)脫色將提取液加3％-20％活性碳脫色，溫度為80℃，脫色后得淡黃或灰黃色液體。
(3)過濾將提取脫色后的液體采用下述方法進行過濾。
首先，以5000-20,000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘；然后，用砂芯(10-15μ)過濾，減壓軸濾；再進行微孔膜過濾，孔徑0.15μ。
(4)濃縮冷藏將濾液減壓濃縮至比重1.05-1.27(25℃)，濃縮液冷藏24-48小時。
(5)分離將冷藏的上清液采用下述四種方法之一進行分離。
方法一將冷藏液進行活性碳柱層析，留取前2/3的洗脫液。
方法二將冷藏液進行大孔吸附樹脂(ZTC-I型及II型，上海試劑-刀柱層析，留取前2/3的洗脫液方法三將冷藏液進行C18柱層析(粒度為50-100μ)，留取前2/3的洗脫液方法四將冷藏液用醇沉法收集沉淀部分
(6)配制將柱層析前2/3的洗脫液減壓濃縮至比重為1.05-1.45(室溫)，或?qū)⒋汲敛糠謸]去醇味加水制成溶液，比重為1.05-1.45(室溫)。
本發(fā)明上述提取液可以按照常規(guī)的制劑工藝制備成任何一種口服制劑，如口服固體制劑，包括片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊劑、丹劑等；半固體制劑，如膏劑等；液體制劑，如口服液、混懸劑、乳劑等。
本發(fā)明優(yōu)選口服液劑型，口服液的制備方法是將上述提取液加水勾兌成含水蘇糖150-300毫克/毫升的液體，灌裝，滅菌即得。
本發(fā)明的上清液可以進一步稀釋，稀釋液冷凍干燥制得干粉。
還可以將本發(fā)明提取液進一步濃縮成浸膏，制成口服膏劑。
在上述制備過程中使用了一種鮮地黃干片原料，這是發(fā)明人的另一項發(fā)明(已另案申請)，現(xiàn)將該鮮地黃干片的炮制方法描述如下將鮮地黃切成厚度為2-5毫米的飲片，放在烘盤上烘烤，飲片在烘盤上的存度為5-10毫米，烘烤溫度在30-95℃之間，烘房溫球溫度在15-38℃之間，烘烤時間為4-12小時。
本發(fā)明藥物具有如下的突出醫(yī)療效果1、使體內(nèi)固有雙歧桿菌增生與雙歧桿菌活菌制劑不同，本發(fā)明藥物使人體固有的雙歧桿菌增生，而不是補充外來菌種。人體從出生至死亡，隨著年齡的增長，體內(nèi)雙歧桿菌的組成和種類是不同的，其發(fā)揮的生理作用也不盡相同。因此，使人體自身固有的雙歧桿菌增生具有其特殊的意義。本發(fā)明藥物正是通過激發(fā)人體自身固有的雙歧桿菌增殖活力而達到增生雙歧桿菌的目的。這不僅避免了活菌制劑只能單純地補充一種菌種的不足；而且不存在外來菌定植及人體排異的問題。
2、使體內(nèi)多種雙歧桿菌同時增殖正常人消化道中的雙歧桿菌有9個種，其中主要的有兩歧雙歧桿菌(B.bifidum)、短雙歧桿菌(B.breve)、長雙歧桿菌(B.longum)、嬰兒雙歧桿菌(B.infanris)、青春雙歧桿菌(B.adolescentis)5種菌。雙歧桿菌活菌制劑一般選用1種菌株，因此其中體內(nèi)對雙歧桿菌的增殖也是單一的。而本發(fā)明藥物可使體內(nèi)固有的兩歧雙歧、短雙歧、長雙歧、嬰兒雙歧、青春雙歧桿菌增殖，并且兩周內(nèi)可在體內(nèi)雙歧桿菌倍增10倍以上，特別是對于雙歧桿菌數(shù)量低于正常值的患者，倍增效果可以達到一萬倍。這些是任何活菌制劑所不能比的，因此可以說本發(fā)明藥物是一種難得的雙歧桿菌增生劑。
3.作為治療腹瀉的藥，本發(fā)明藥物基本達到了WHO治療腹瀉用藥的6條標準。即高效、可口服、可與口服補液聯(lián)合應用、不被腸道吸收、不影響腸道的吸收功能，尤其是葡萄糖和氨基酸的吸收，可抵卸一系列的腸道病原體。并且它不存在抗生素及抗動力藥的副作用，因此，本發(fā)明藥物是一理想的抗腹瀉藥物。
4、可與抗菌素同服，對抗抗生素引起菌群失調(diào)的副作用。
雙歧活菌對多數(shù)抗菌素均十分敏感，因此雙歧桿菌活菌制劑難于與抗生素同服而發(fā)揮療效。而本發(fā)明藥物可選擇性地增生雙歧桿菌，對抗抗生素引起菌群失調(diào)的副作用，從而保護機體內(nèi)菌群的正常。
5、安全無毒，適合于各種人群。嬰幼兒、老年人、極度衰弱者以及糖尿病人均可放心服用。
經(jīng)嚴格的動物急性毒性和長期毒性實驗，以及大量臨床例觀察，均未見任何毒性反應，適于長期服用本產(chǎn)品的有效成分是一類難消化物質(zhì)，產(chǎn)品雖甜，但其中可吸收糖含量極低，糖尿病、肥胖者均可安全服用應用本發(fā)明的藥物治療急慢性腹瀉取得了良好的效果用本發(fā)明藥物治療50例不明原因的慢性腹瀉患者，結(jié)果顯示雙歧因子口服液對癥狀緩解較快，療效較好，有效率為100％，其中顯效率為78％治療過程中，未發(fā)現(xiàn)任何不良反應。用雙歧因子口服液治療86例成人及兒童的急性腹瀉臨床療效總結(jié)，結(jié)果表明該藥尤論對一般腸炎、感染性腹瀉還是菌痢或抗生素所致的菌群失調(diào)都有明顯的療效，成人總有效率100％，其中顯效為40.8％，兒童總有效率為93.3％，其中顯效率為60％。
實施例1取鮮地黃5000克，加20％乙醇7.5升，回流提取2小時，過濾，濾液備用；過濾后的藥渣再加20％乙醇5升，回流提取1小時，過濾，合并兩次濾液，回收乙醇至無醇味，將回收后的溶液加8％活性碳脫色，溫度為81℃，得到淡黃色液體，再以15000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，上清液再以砂芯(10-30μ)過濾，然后進行微孔膜過濾(0.15μ)，濾液減壓濃縮至比重1.28(25℃)，濃縮液冷藏24小時，傾出上清液，進行活性炭柱層析，收集前15000毫升，洗脫液減壓濃縮至比重為1.19(25℃)，濃縮液冷藏24小時，傾出上清液，進一步濃縮至比重1.39(25℃)，得到地黃浸膏，灌裝，滅菌。
實施例2取鮮地黃干片1000克，加水煎煮兩次，第1次加水15升，第二次加水10升，合并兩次煎煮液，加3％活性碳85℃脫色，得淡黃色液體，以10000轉(zhuǎn)/分離心5分種，再將上清液以砂芯過濾，再進行微孔膜過濾(0.15μ)，濾液減壓濃縮至比重1.10，濃縮液冷藏48小時，傾出上清液，進行大孔吸附樹脂層析，收集20000毫升洗脫液，將洗脫液濃縮至比重1.28，濃縮液冷藏48小時，傾出上清液，加水勾兌成含水蘇糖150毫克/毫升的液體，灌封，滅菌，即得
權利要求
1.一種促進體內(nèi)雙歧桿菌增殖的藥物，其特征在于它是以下述方法制備的藥劑取鮮地黃或鮮地黃干片用0-95％的乙醇水溶液提取兩次，第一次加溶媒10-20倍量，第二次加溶媒5-10倍量，合并兩次提取液，回收乙醇至無醇味；將提取液加3％-20％活性碳脫色，進行過濾，濾液減壓濃縮至比重1.05-1.27，濃縮液冷藏24-48小時，傾出的上清液進行柱層析分離，將柱層前2/3的洗脫液減壓濃縮至比重為1.05-1.45，再配制成常規(guī)藥劑。
2.根據(jù)權利要求1所述的藥物，其特征在于該藥物制備方法中，過濾方法是將脫色液以5000-20000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，然后用10-15μ砂芯減壓抽濾，再進行0.15μ孔徑的微孔膜過濾
3.根據(jù)權利要求1所述的藥物，其特征在于該藥物制備方法中，柱層析分離是將冷藏藏后的上清液進行活性碳柱層析。
4.根據(jù)權利要求1所述的藥物，其特征在于該藥物制備方法中，柱層析分離是將冷藏后的上清液進行大孔吸附樹脂柱層析
5.根據(jù)權利要求4所述的藥物，其特征在于該藥物制備方法中所述的大孔吸附樹脂為ZTC-I型或II型樹脂。
6.根據(jù)權利要求1所述的藥物，其特征在于該藥物制備方法中，柱層析是將冷藏液進行C18柱層析，粒度為10-100μ。
7.根據(jù)權利要求2所述的藥物，其特征在于該藥物制備方法中，將冷藏后傾出的上清液用醇沉法收集沉淀部分，揮去醇味加水制成比重為1.05-1.45的溶液，再配制成藥劑。
8.根據(jù)權利要求1所述的藥物，其特征在于該藥物的劑型為口服液體制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種能使人體內(nèi)雙歧桿菌增生的藥物制劑,該藥物是將鮮地黃或鮮地黃干片用0—95%的乙醇水溶液提取,過濾,脫色,分離,制成藥劑;該藥劑可調(diào)整人體內(nèi)微生態(tài)平衡,治療急慢性腹瀉。
文檔編號A61P1/00GK1188000SQ9710026
公開日1998年7月22日 申請日期1997年1月16日 優(yōu)先權日1997年1月16日
發(fā)明者羅燕燕, 李光慧, 郝仙娣, 索建政, 龔韜 申請人:北京市中藥綜合研究所