專利名稱：一種采用速凍與脈沖技術(shù)提高藤本豆總黃酮提取率的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種采用速凍與脈沖技術(shù)提高藤本豆總黃酮提取率的方法，屬于天然藥物化學(xué)提取技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
藤本豆是利用野生“藤本豆”母本雄性不孕與大油豆雜交、粒性誘發(fā)、自交分離、風(fēng)土馴化等科技手段，研發(fā)出的一種高效農(nóng)業(yè)蔬菜新物種，兼?zhèn)浼Z、油、菜、林、花、飲、藥等多樣型。研究表明，藤本豆?fàn)I養(yǎng)極其豐富，富含全價(jià)優(yōu)質(zhì)蛋白和配比均衡的十八種氨基酸，其對(duì)人體所必需氨基酸含量高達(dá)50%以上，是一種比大豆蛋白更具營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的優(yōu)質(zhì)蛋白資源。另外，藤本豆含黃酮、多糖等多種活性成分，藥用和保健功能顯著，能明顯增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的增殖，特別是對(duì)高膽固醇癥，具有調(diào)節(jié)血清膽固醇水平功能，對(duì)心腦血管有很好的保健功效。黃酮類化合物是一類在自然界廣泛分布的多酚類物質(zhì)，也是目前備受關(guān)注的天然活性產(chǎn)物之一。目前，黃酮的主要提取方法有:熱水提取法、有機(jī)溶劑萃取法、堿性水提法、超聲提取法、微波法、超臨界萃取法。其中，熱水提取法設(shè)備簡(jiǎn)單，但提取率低；有機(jī)溶劑萃取法是目前國(guó)內(nèi)外使用最廣泛的提取方法，但存在排污量大、有效成分損失多、容積殘留及提取效率低等缺陷；堿性水提法具有簡(jiǎn)單易行、經(jīng)濟(jì)方便等特點(diǎn)，但存在強(qiáng)堿污染環(huán)境問題；超聲提取法能耗低、不破壞有效成分，但大量提取時(shí)效率低；微波法提取時(shí)間短、提取率高，但其成品的組成不是非常穩(wěn)定；超臨界萃取法速度快、滲透能力強(qiáng)、溶解萃取效率高，但設(shè)備投資高，提取成本高。而本項(xiàng)目采用速凍與脈沖強(qiáng)光聯(lián)合處理提取藤本豆總黃酮，提取率高、成本低，且無環(huán)境污染。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種采用速凍與脈沖技術(shù)提高藤本豆總黃酮提取率的方法，該方法具有提取率高、無污染、過程易控制等特點(diǎn)。本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
所述方法包括如下步驟:
(1)干燥:采收后的鮮藤本豆經(jīng)曬干、剝殼、整理后得到干燥后的藤本豆籽粒；
(2)粉碎:將干燥后的藤本豆籽粒進(jìn)行粉碎，粒度為20 40目，得到藤本豆粉；
(3)速凍:將藤本豆粉放入-40 -18°C速凍設(shè)備中速凍1.5 2.5h ;
(4)脈沖強(qiáng)光輔助提取:以w/vl:15 25的固液比迅速將速凍后的藤本豆粉與體積比為50 60%乙醇混勻后，放入容器中即刻進(jìn)行脈沖強(qiáng)光照射；然后在溫度40 60°C下提取I 2h，最后過濾并收集提取液，得到藤本豆黃酮粗品。其中w/v表示質(zhì)量體積比,單位為g/mL或kg/L。步驟(I)中曬干后的藤本豆的含水量為12 14%。步驟(4)中所述容器為正方形或長(zhǎng)方形，照射時(shí)物料容器表面開口，且容器內(nèi)物料層厚度為4 8 cm。步驟(4)中所述脈沖強(qiáng)光的強(qiáng)度為3.2 4.9J/cm2,照射距離為6 12cm，照射時(shí)間為2 4s，每秒閃照3次。本發(fā)明的顯著優(yōu)點(diǎn):
a)本發(fā)明采用速凍及脈沖強(qiáng)光聯(lián)合處理技術(shù)進(jìn)行藤本豆總黃酮的制備，可以獲得提取率高、質(zhì)量?jī)?yōu)且無污染的黃酮類產(chǎn)品。b)本發(fā)明采用速凍及脈沖強(qiáng)光聯(lián)合處理技術(shù)進(jìn)行藤本豆總黃酮的制備，一方面利用速凍及脈沖強(qiáng)光聯(lián)合處理破壞了藤本豆細(xì)胞壁，有利于細(xì)胞內(nèi)黃酮的浸出，最大程度提高了提取率；另一方面利用脈沖強(qiáng)光瞬時(shí)、高強(qiáng)度的脈沖光能量，縮短了后續(xù)提取時(shí)間，大大提聞了提取效率。c)本發(fā)明采用速凍及脈沖強(qiáng)光聯(lián)合處理技術(shù)進(jìn)行藤本豆總黃酮的制備，制備工藝簡(jiǎn)單，操作方便，能滿足工業(yè)化生產(chǎn)的要求。
具體實(shí)施例方式以下是本發(fā)明的幾個(gè)具 體實(shí)施例，進(jìn)一步說明本發(fā)明，但是本發(fā)明不僅限于此。實(shí)施例1
取IOOg鮮藤本豆經(jīng)曬干(含水率12.6%)、剝殼、整理后，粉碎至40目，放入-40°C速凍設(shè)備中速凍1.5h ;然后加入體積分?jǐn)?shù)55%的乙醇(固液比1:20)混均，裝入容器后(物料層厚度4 cm)用脈沖強(qiáng)光照射4s (脈沖強(qiáng)光的強(qiáng)度為4.9J/cm2,照射距離為12cm);再在40°C下提取2h后過濾并收集提取液，制得藤本豆黃酮粗品。測(cè)定:采用紫外分光光度法，以蘆丁作為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品，繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)定藤本豆中總黃酮的含量。(I)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
準(zhǔn)確稱取120°C下干燥恒重的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品12.5mg，用濃度為60%的微熱乙醇定容至50.0mL，搖勻，待用。準(zhǔn)確吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品0、0.4,0.8,1.2,1.6,2.0,2.4mL于6支比色管中，分別加入濃度為60%的乙醇至2.4 mL，然后加入0.4 mL 5%亞硝酸鈉，搖勻，放置6min ;力口人0.4mL10%硝酸鋁溶液，搖勻，放置6 min;再加入4.0ml lmol/L氫氧化鈉，搖勻，放置l(Tl5min，測(cè)定吸光度。以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品濃度(C)為橫坐標(biāo)，吸光度(y)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(2)藤本豆中總黃酮含量的測(cè)定
精密吸取樣品溶液2mL，置于IOmL帶塞玻璃管中，按標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定總黃酮含量，根據(jù)下列公式計(jì)算總黃酮提取率?？傸S酮提取率Y(mg/g) =CV/M 式中:C為樣品溶液中黃酮濃度mg/mL ；
V為樣品溶液總體積mL ；
M為稱取的藤本豆質(zhì)量g。根據(jù)上述公式，藤本豆中總黃酮的提取率為5.32 mg/g ;不經(jīng)速凍與脈沖強(qiáng)光處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為4.96 mg/g ;不經(jīng)脈沖強(qiáng)光處理而經(jīng)速凍處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為5.07mg/g ;不經(jīng)速凍處理而經(jīng)脈沖強(qiáng)光處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為5.12 mg/g?？梢姡捎盟賰黾懊}沖強(qiáng)光聯(lián)合處理技術(shù)進(jìn)行藤本豆總黃酮的制備，可以獲得提取率高、質(zhì)量?jī)?yōu)且無污染的黃酮類產(chǎn)品。實(shí)施例2
取200g鮮藤本豆經(jīng)曬干(含水率13.1%)、剝殼、整理后，粉碎至20目，放入-18°C速凍設(shè)備中速凍2.5h ;然后加入體積分?jǐn)?shù)60%的乙醇(固液比1:25)混均，裝入容器后(物料層厚度6cm)用脈沖強(qiáng)光照射2s (脈沖強(qiáng)光的強(qiáng)度為4.9J/cm2,照射距離為6cm);再在50°C下提取1.5h后過濾并收集提取液，制得藤本豆黃酮粗品。測(cè)定方法同實(shí)施例1:采用紫外分光光度法，以蘆丁作為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品，繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)定藤本豆中總黃酮的含量為5.21 mg/g ;不經(jīng)速凍與脈沖強(qiáng)光處理的20目藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為4.85 mg/g ;不經(jīng)脈沖強(qiáng)光處理而經(jīng)速凍處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為4.95mg/g ;不經(jīng)速凍處理而經(jīng)脈沖強(qiáng)光處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為5.03 mg/g。實(shí)施例3
取180g鮮藤本豆經(jīng)曬干(含水率12.3%)、剝殼、整理后，粉碎至30目，放入_30°C速凍設(shè)備中速凍2h ;然后加入體積分?jǐn)?shù)50%的乙醇(固液比1:15)混均，裝入容器后(物料層厚度8cm)用脈沖強(qiáng)光照射3s (脈沖強(qiáng)光的強(qiáng)度為3.2J/cm2，照射距離為8cm);再在60°C下提取Ih后過濾并收集提取液，制得藤本豆黃酮粗品。測(cè)定方法同實(shí)施例1:采用紫外分光光度法，以蘆丁作為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品，繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)定藤本豆中總黃酮的含量為5.42 mg/g ;不經(jīng)速凍與脈沖強(qiáng)光處理的20目藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為5.01 mg/g ;不經(jīng)脈沖強(qiáng)光處理而經(jīng)速凍處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為5 .12mg/g ;不經(jīng)速凍處理而經(jīng)脈沖強(qiáng)光處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為5.17mg/g。
權(quán)利要求
1.一種采用速凍與脈沖技術(shù)提高藤本豆總黃酮提取率的方法，其特征在于所述方法包括如下步驟: (1)干燥:采收后的鮮藤本豆經(jīng)曬干、剝殼、整理后得到干燥后的藤本豆籽粒； (2)粉碎:將干燥后的藤本豆籽粒進(jìn)行粉碎，粒度為20 40目，得到藤本豆粉； (3)速凍:將藤本豆粉放入-40 -18°C速凍設(shè)備中速凍1.5 2.5h ; (4)脈沖強(qiáng)光輔助提取:以w/vl:15 25的固液比迅速將速凍后的藤本豆粉與體積比為50 60%乙醇混勻后，放入容器中即刻進(jìn)行脈沖強(qiáng)光照射；然后在溫度40 60°C下提取I 2h，最后過濾并收集提取液，得到藤本豆黃酮粗品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用速凍與脈沖技術(shù)提高藤本豆總黃酮提取率的方法，其特征在于:步驟(I)中曬干后的藤本豆的含水量為12 14%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用速凍與脈沖技術(shù)提高藤本豆總黃酮提取率的方法，其特征在于:步驟(4)中所述容器為正方形或長(zhǎng)方形，照射時(shí)物料容器表面開口，且容器內(nèi)物料層厚度為4 8 cm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用速凍與脈沖技術(shù)提高藤本豆總黃酮提取率的方法，其特征在于:步驟(4)中所述脈沖強(qiáng)光的強(qiáng)度為3.2 4.9J/cm2，照射距離為6 12cm，照射時(shí)間為2 4s，每秒閃照3 次。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種采用速凍與脈沖技術(shù)提高藤本豆總黃酮提取率的方法，屬于天然藥物化學(xué)提取技術(shù)領(lǐng)域。該方法通過將干燥后的藤本豆籽粒進(jìn)行粉碎、速凍，然后結(jié)合脈沖強(qiáng)光輔助提取，最后過濾并收集提取液，得到藤本豆黃酮粗品。通過速凍及脈沖強(qiáng)光聯(lián)合處理技術(shù)制備藤本豆總黃酮，工藝科學(xué)合理、操作簡(jiǎn)單、步驟少、提取流程快、提取得率高、成品穩(wěn)定、成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)要求，且無環(huán)境污染。
文檔編號(hào)A61K36/48GK103191177SQ20131011735
公開日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2013年4月7日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月7日
發(fā)明者陳君琛, 沈恒勝, 賴譜富, 翁敏劼, 賴鋒連 申請(qǐng)人:福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究所