專利名稱：一種葫蘆巴水提物及其制備和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物，具體地，涉及一種葫蘆巴水提物及其制備和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
糖尿病是一種胰島素絕對(duì)、相對(duì)不足或靶細(xì)胞對(duì)胰島素敏感性減低引起的以糖代謝紊亂為主的慢性綜合性疾病。其中，2型糖尿病也叫成人發(fā)病型糖尿病，多在35 40歲之后發(fā)病，占糖尿病患者90%以上。2型糖尿病病友體內(nèi)產(chǎn)生胰島素的能力并非完全喪失，有的患者體內(nèi)胰島素甚至產(chǎn)生過多，但胰島素的作用效果卻大打折扣，因此患者體內(nèi)的胰島素可能處于一種相對(duì)缺乏的狀態(tài)。可以通過某些口服藥物刺激體內(nèi)胰島素的分泌，但到后期仍有部分病人需要像I型糖尿病那樣進(jìn)行胰島素治療?？傊?型糖尿病治療的短期目標(biāo)是控制血糖，長(zhǎng)期目標(biāo)是預(yù)防相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展。其基礎(chǔ)治療方案主要由運(yùn)動(dòng)和飲 食構(gòu)成，但是藥物治療和血糖監(jiān)測(cè)往往也非常關(guān)鍵。隨著對(duì)糖尿病病理生理機(jī)制的深入認(rèn)識(shí)，針對(duì)不同作用靶點(diǎn)的藥物正在被不斷研發(fā)。二肽基肽酶IV (DPPIV)是研究治療2型糖尿病的新靶點(diǎn)，DPP IV能夠迅速滅活腸促胰島素胰高血糖素樣肽I(GLP-I)和糖依賴性胰島素釋放肽(GIP)等多種激素，使血糖升高。而DPP IV抑制劑則延長(zhǎng)和提高了內(nèi)源性GLP-I和GIP的活性，促進(jìn)胰島素分泌，降低血糖。目前，已有相關(guān)化學(xué)合成的DPP IV抑制劑，但是，它們的生理毒性較高、穩(wěn)定性較差。文獻(xiàn)報(bào)道，植物葫蘆巴有一定程度的降糖作用，但降糖機(jī)制尚不明確，其對(duì)DPP IV的影響也未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有的缺陷，提供了一種葫蘆巴水提物以及它的制備方法，該葫蘆巴水提物具有DPP IV抑制劑活性，并能夠用于治療2型糖尿病，由于葫蘆巴水提物為純天然植物提取物，因此，它對(duì)人體的生理毒害作用幾乎沒有。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案
一種葫蘆巴水提物，通過以下步驟制備完成
(1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，取出并保留濾
液；
(2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，保留濾液；
(3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物的制備方法，包括以下步驟
(1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，取出并保留濾
液；
(2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，保留濾液；
(3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。具體地，步驟(3)制得的葫蘆巴水提物的得率為18-25%。
本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物在制備二肽基肽酶IV抑制劑中的應(yīng)用。本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物在制備治療2型糖尿病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明具有以下有益效果
(1)本發(fā)明通過葫蘆巴種子提取了葫蘆巴水提物，其工藝簡(jiǎn)單、易操作，無需大型儀器的介入，特別適于大規(guī)模生產(chǎn)利用；
(2)本發(fā)明提取的了葫蘆巴水提物對(duì)DPPIV的活性具有明顯的抑制效果，其體外實(shí)驗(yàn)已充分證明，葫蘆巴水提物可以作為DPPIV抑制劑使用；
(3)通過小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明，葫蘆巴水提物對(duì)于小鼠的體重、血糖、血脂等指標(biāo)都有顯 著的影響，可以用作治療2型糖尿病的藥物使用。
具體實(shí)施例方式產(chǎn)品及制備實(shí)施例 實(shí)施例I
本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物，通過以下步驟制備完成
(1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡30分鐘，煮沸30分鐘，取出并保留濾液；
(2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡30分鐘，煮沸30分鐘，保留濾液；
(3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。通過以上步驟制備完成的葫蘆巴水提物，其得率為25%。實(shí)施例2
本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物，通過以下步驟制備完成
(1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡20分鐘，煮沸20分鐘，取出并保留濾液；
(2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡20分鐘，煮沸20分鐘，保留濾液；
(3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。通過以上步驟制備完成的葫蘆巴水提物，其得率為18%。實(shí)施例3
本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物，通過以下步驟制備完成
(1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡25分鐘，煮沸25分鐘，取出并保留濾液；
(2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡25分鐘，煮沸25分鐘，保留濾液；
(3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。通過以上步驟制備完成的葫蘆巴水提物，其得率為22%。葫蘆巴水提物在制備二肽基肽酶IV抑制劑中的應(yīng)用實(shí)施例 實(shí)驗(yàn)一葫蘆巴水提物對(duì)二肽基肽酶IV活性抑制的體外實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)中的材料及藥品
葫蘆巴種子采自新疆和田地區(qū)；
二妝基妝酶 IV (Dipeptidyl Peptidase IV, from porcine kidney D7052-1VL,美國(guó)sigma 公司)；
甘氨酰脯氨酸對(duì)硝基苯胺(G0513-25MG,美國(guó)sigma公司)；
Tris-HCL 緩沖液 PH=8. 2 ；
抑二肽素 A (IIe-Pro-IIe)美國(guó) sigma 公司)。
將葫蘆巴水提物(由產(chǎn)品實(shí)施例的實(shí)施例I制得)配制成不同濃度梯度的溶液，觀察抑制率的變化
實(shí)驗(yàn)分為4個(gè)組，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔，分別為
空白對(duì)照組(Tris-HCL緩沖液+甘氨酰脯氨酸對(duì)硝基苯胺)；
陰性對(duì)照組(二肽基肽酶IV +Tris-HCL緩沖液+甘氨酰脯氨酸對(duì)硝基苯胺)；
實(shí)驗(yàn)空白對(duì)照組(葫蘆巴水提物+Tris-HCL緩沖液+甘氨酰脯氨酸對(duì)硝基苯胺)； 實(shí)驗(yàn)組(葫蘆巴水提物+ 二肽基肽酶IV +Tris-HCL緩沖液+甘氨酰脯氨酸對(duì)硝基苯
胺)；
由于葫蘆巴水提物為有色物，在405nm處檢測(cè)時(shí)會(huì)出現(xiàn)自身顏色干擾，因此在檢測(cè)時(shí)設(shè)置每種提取物各濃度的空白盡量避免假陽(yáng)性現(xiàn)象。首先，將各濃度葫蘆巴水提物、二肽基肽酶IV、甘氨酰脯氨酸對(duì)硝基苯胺及Tris-HCL緩沖液在37°C溫度下水浴15_30min，然后按照葫蘆巴水提物、二肽基肽酶IV、Tris-HCL緩沖液、甘氨酰脯氨酸對(duì)硝基苯胺的順序依次加入96孔板中，加入量如表I :
_表I ■■抑制DPPIV活性反應(yīng)體系各組分加入量單位ML_
權(quán)利要求
1.一種葫蘆巴水提物，其特征在于，通過以下步驟制備完成 (1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，取出并保留濾液； (2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，保留濾液； (3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。
2.權(quán)利要求I所述的葫蘆巴水提物的制備方法，包括以下步驟 (1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，取出并保留濾液； (2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，保留濾液； (3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的葫蘆巴水提物的制備方法，其特征在于，步驟(3)制得的葫蘆巴水提物的得率為18-25%。
4.權(quán)利要求I所述的葫蘆巴水提物在制備ニ肽基肽酶IV抑制劑中的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求I所述的葫蘆巴水提物在制備治療2型糖尿病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種葫蘆巴水提物，通過以下步驟制備完成(1)取葫蘆巴種子，加10倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，取出并保留濾液；(2)在濾渣中再加8倍重量的水，浸泡20-30分鐘，煮沸20-30分鐘，保留濾液；(3)合并2次濾液，水浴干燥為粉末，制得葫蘆巴水提物。本發(fā)明提出的葫蘆巴水提物對(duì)DPPIV活性具有明顯的抑制作用，同時(shí)，可用于制備治療2型糖尿病的藥物。
文檔編號(hào)A61K36/48GK102670697SQ20121014794
公開日2012年9月19日 申請(qǐng)日期2012年5月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月14日
發(fā)明者李琳琳, 楊衛(wèi)星, 楊珍珍, 毛新民, 王燁, 陶義存, 駱新 申請(qǐng)人:新疆醫(yī)科大學(xué)