專利名稱：可用作hiv逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的三環(huán)化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明總的來講涉及三環(huán)化合物以及可用作HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的三環(huán)化合物、包含所述化合物的藥用組合物和診斷試劑盒、應用所述化合物治療病毒性感染或者作為測定標準品或試劑的方法及用于制備這類三環(huán)化合物的中間體和工藝。
背景技術(shù)：
兩種不同的逆轉(zhuǎn)錄病毒—人免疫缺陷病毒(HIV)1型(HIV-1)或2型(HIV-2)在病因?qū)W上與免疫抑制性疾病即獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)相關(guān)。HIV血清反應陽性個體起初無癥狀，但常常發(fā)生AIDS相關(guān)綜合征(ARC)，隨后發(fā)生AIDS?；颊弑憩F(xiàn)出使其易患致虛弱、最終導致致命性機會感染的嚴重免疫抑制。
艾滋病是HIV-1或HIV-2病毒在其復雜病毒生活周期后的結(jié)果。所述病毒體的生活周期包括通過所述病毒體的保護性外殼表面糖蛋白與淋巴細胞上的CD4糖蛋白的結(jié)合使所述病毒體本身與宿主人T-4淋巴細胞免疫細胞結(jié)合。一旦被結(jié)合，則所述病毒體脫去其糖蛋白外殼，穿入宿主細胞膜，然后脫殼釋放其RNA。病毒體酶即逆轉(zhuǎn)錄酶指導所述RNA轉(zhuǎn)錄為單鏈DNA的過程。所述病毒RNA被降解，產(chǎn)生第二DNA鏈。此時雙鏈DNA整合到人細胞基因中并且用所述經(jīng)整合的基因進行病毒繁殖。
RNA聚合酶將所述整合的病毒DNA轉(zhuǎn)錄成病毒mRNA。所述病毒RNA翻譯成前體gag-pol融合多蛋白。然后，所述多蛋白被HIV蛋白酶切割，產(chǎn)生成熟病毒蛋白。因此，HIV蛋白酶負責調(diào)節(jié)切割事件的級聯(lián)，致使所述病毒顆粒成熟為能夠具有完全感染性的病毒。
殺傷侵入性病毒體的典型人免疫系統(tǒng)應答負擔過重，因為所述病毒感染并殺傷免疫系統(tǒng)的T細胞。另外，病毒逆轉(zhuǎn)錄酶即產(chǎn)生新病毒體顆粒所用的酶沒有高特異性，因而引起轉(zhuǎn)錄錯誤，導致病毒保護性外殼表面糖蛋白不斷地發(fā)生改變。這種特異性缺乏降低免疫系統(tǒng)的效力，因為針對一種糖蛋白特異性產(chǎn)生的抗體對于另一種糖蛋白可能是無效的，因此減少了用來抵抗所述病毒的抗體數(shù)目。病毒不斷地繁殖，而免疫應答系統(tǒng)卻不斷地被削弱。在大多數(shù)不進行治療干預的情況下，HIV使宿主免疫系統(tǒng)衰弱，從而可以發(fā)生機會感染。如果不給予抗病毒藥、免疫調(diào)節(jié)劑或它們兩者，則可以導致死亡。
在HIV生活周期中已經(jīng)鑒定出抗病毒藥物的可能靶至少有三個關(guān)鍵點(1)病毒體與T-4淋巴細胞或巨噬細胞位點的起始結(jié)合，(2)使病毒RNA轉(zhuǎn)錄成病毒DNA(逆轉(zhuǎn)錄酶，RT)，和(3)HIV蛋白酶對gag-pol蛋白的加工。
在第二個關(guān)鍵點即病毒RNA至病毒DNA的轉(zhuǎn)錄過程抑制所述病毒提供各種各樣的用于治療AIDS的現(xiàn)有療法。因為所述病毒體的基因以RNA編碼，而宿主細胞僅轉(zhuǎn)錄DNA，所以該病毒體繁殖必須發(fā)生所述轉(zhuǎn)錄。通過引入阻斷完成病毒DNA形成的逆轉(zhuǎn)錄酶的藥物，可以終止HIV-1復制。
已經(jīng)開發(fā)出各種各樣的干擾病毒復制的化合物來治療AIDS。已經(jīng)表明例如3′-疊氮基-3′-二脫氧胸苷(AZT)、2′，3′-二脫氧胞苷(ddC)、2′，3′-二脫氧胸苷(thymidinene)(d4T)、2′，3′-二脫氧肌苷(ddI)和2′，3′-二脫氧-3′-噻-胞苷(3TC)等核苷類似物在逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)階段使HIV復制停止的某些情況下比較有效。
一個活躍的研究領(lǐng)域是發(fā)現(xiàn)了非核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTI)。作為一個實例，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)某些苯并噁嗪酮類和喹唑啉酮類在抑制HIV逆轉(zhuǎn)錄酶、預防或治療HIV感染以及治療AIDS方面有活性。
U.S.5,874,430描述了用于治療HIV的苯并噁嗪酮非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。U.S.5,519,021描述了具有下式的苯并噁嗪酮類的非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑 其中X為鹵素，Z可以為O。
EP 0,530,994和WO 93/04047描述了具有下式(A)的喹唑啉酮類的HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑 其中G為各種各樣的基團，R3和R4可以為H，Z可以為O，R2可以為未取代烷基、未取代鏈烯基、未取代鏈炔基、未取代環(huán)烷基、未取代雜環(huán)基和任選取代的芳基，且R1可以為各種各樣的基團，包括取代烷基。
WO 95/12583也描述了式A的HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。在該出版物中，G為各種各樣的基團，R3和R4可以為H，Z可以為O，R2為取代鏈烯基或取代鏈炔基，且R1為環(huán)烷基、鏈炔基、鏈烯基或氰基。WO 95/13273舉例說明了WO 95/12583中的一種化合物(S)-(-)-6-氯-4-環(huán)丙基-3，4-二氫-4-((2-吡啶基)乙炔基)-2(1H)-喹唑啉酮的不對稱合成。
用于制備喹唑啉酮類如上述喹唑啉酮的合成方法詳述于以下的參考文獻Houpis等，Tetr.Lett.1994，35(37)，6811-6814；Tucker等，J.Med.Chem.1994，37，2437-2444；和Huffman等，J.Org.Chem.1995，60，1590-1594。
DE 4,320,347舉例說明了下式的喹唑啉酮類 其中R為苯基、碳環(huán)或雜環(huán)。這類化合物不應認為是本發(fā)明的一部分。
WO01/29037描述了一系列為HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、具有下式的三環(huán)化合物 WO01/29037中所述的實例不應認為是本發(fā)明的一部分。
同逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的現(xiàn)有成功一樣，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)HIV患者可能對給定抑制劑產(chǎn)生抗性。因此，迫切需要開發(fā)另外的抑制劑，以進一步抵抗HIV感染。
發(fā)明概述因此，本發(fā)明提供新型逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。
本發(fā)明提供新型三環(huán)化合物。
本發(fā)明提供一種用于治療HIV感染的新方法，所述方法包括給予需要這種治療的宿主治療有效量的至少一種本發(fā)明化合物，包括其藥學上可接受的鹽形式。
本發(fā)明提供一種用于治療HIV感染的新方法，所述方法包括聯(lián)合給予需要這種治療的宿主治療有效量的(a)一種本發(fā)明化合物和(b)一種或多種選自以下的化合物HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和HIV蛋白酶抑制劑。
本發(fā)明提供具有逆轉(zhuǎn)錄酶抑制活性的藥用組合物，所述藥用組合物包含藥學上可接受的載體和治療有效量的至少一種本發(fā)明化合物或其藥學上可接受的鹽形式。
本發(fā)明提供用于治療的新型三環(huán)化合物。
此外，本發(fā)明提供新型三環(huán)化合物在生產(chǎn)用于治療HIV感染的藥物中的應用。
以上方面和其它方面在以下詳細描述中將變得顯而易見，它們的實現(xiàn)得益于本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了下式(I)的化合物、包括其任何立體異構(gòu)體形式、立體異構(gòu)體形式的混合物、復合物、前體藥物形式或藥學上可接受的鹽形式都是有效的逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑 其中R1、R2、X、Y和Z如下定義。
優(yōu)選實施方案的詳細描述因此，在第一個實施方案中，本發(fā)明提供下式(I)的化合物或其立體異構(gòu)體形式或立體異構(gòu)體形式的混合物或藥學上可接受的鹽形式 其中R1選自被0-7個鹵素取代的C1-3烷基；R2為-(CH2)OCH(CH3)2；X選自F、Cl、Br、I和CN；Y選自F、Cl、Br、I和CN；且
Z選自N和N-氧化物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供下式(I)的化合物或其立體異構(gòu)體形式、立體異構(gòu)體形式的混合物、復合物、前體藥物形式或藥學上可接受的鹽形式 其中R1選自被0-7個鹵素取代的C1-3烷基；R2為-(CH2)OCH(CH3)2；X選自F、Cl、Br、I和CN；Y選自F、Cl、Br和I；且Z選自N和N-氧化物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式(I)化合物，其中R1為CF3；X選自F、Cl和CN；且Y選自F和Cl。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式(I)化合物，其中Z為N。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式(I)化合物，其中Z為N-氧化物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式(I)化合物，其中R1選自被0-7個鹵素取代的C1-3烷基；X選自F、Cl和CN；且Y選自F、Cl和Br。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式(I)化合物，其中R1選自CH3CF2。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式(Ia)化合物，其中所述式(Ia)化合物如下 在另一個實施方案中，本發(fā)明提供式(Ib)化合物，其中所述式(Ib)化合物如下 本發(fā)明的另一個實施方案包括式(I)化合物，其中X選自F和Cl。
本發(fā)明的另一個實施方案包括式(I)化合物，其中X為CN。
本發(fā)明的另一個實施方案包括式(I)化合物，其中X為F。
本發(fā)明的另一個實施方案包括式(I)化合物，其中X為Cl。
本發(fā)明的另一個實施方案包括式(I)化合物，其中X為I。
本發(fā)明的另一個實施方案包括式(I)化合物，其中Y為Cl。
本發(fā)明的另一個實施方案包括式(I)化合物，其中Y為CN。
本發(fā)明的另一個實施方案包括式(I)化合物，其中R1為CH3CF2。
本發(fā)明的另一個實施方案包括式(I)化合物，其中本發(fā)明的另一個實施方案包括式(I)化合物，其中所述化合物選自1.3，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘；2.3，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘1-氧化物；
3.3-氯-7-氟-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘；4.3-氯-7-氟-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘1-氧化物；5.3-氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-4a，5，10，10a-四氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘-7-甲腈；6.3-氯-5-異丙氧基甲基-1-氧基-5-三氟甲基-4a，5，10，10a-四氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘-7-甲腈；7.3-溴-7-氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘；8.3-溴-7-氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物；9.3，7-二氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘；10.3，7-二氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物；11.3，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物；12.7-氰基-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘；和13.3-氯-7-氰基-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘。
本發(fā)明的另一個實施方案包括式(I)化合物，其中所述化合物選自1.(R)3，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘；2.(R)3，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘1-氧化物；3.(R)3-氯-7-氟-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘；4.(R)3-氯-7-氟-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘1-氧化物；5.(R)3-氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-4a，5，10，10a-四氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘-7-甲腈；6.(R)3-氯-5-異丙氧基甲基-1-氧基-5-三氟甲基-4a，5，10，10a-四氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘-7-甲腈；7.(R)3-溴-7-氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘；8.(R)3-溴-7-氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物；9.(R)3，7-二氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘；10.(R)3，7-二氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物；11.(R)3，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物；12.(R)7-氰基-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘；和13.(R)3-氯-7-氰基-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘。
本發(fā)明也提供一種新型藥用組合物，所述藥用組合物包含藥學上可接受的載體和治療有效量的一種式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽形式。
包含本發(fā)明化合物的組合物和使用方法包括包含本發(fā)明化合物和其立體異構(gòu)體形式、其立體異構(gòu)體形式的混合物、其復合物、其結(jié)晶形式、其前體藥物形式及其藥學上可接受的鹽形式的組合物和使用方法。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供一種用于治療HIV感染的新方法，所述方法包括給予需要這種治療的宿主治療有效量的一種式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽形式。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供一種治療HIV感染的新方法，所述方法包括聯(lián)合給予需要這種治療的宿主治療有效量的(a)一種式(I)化合物；和(b)至少一種選自以下的化合物HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和HIV蛋白酶抑制劑。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供種一種治療HIV感染的新方法，所述方法包括聯(lián)合給予需要這種治療的宿主治療有效量的(a)一種式(I)化合物；和(b)至少一種選自以下的化合物HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、CCR-5抑制劑和融合抑制劑。
在另一個實施方案中，可用于治療HIV感染的上述方法中的逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑選自AZT、ddC、ddI、d4T、3TC、地位韋啶、依法韋侖、奈韋拉平、Ro 18893、曲韋定、MKC-442、HBY 097、HBY1293、GW867、ACT、UC-781、UC-782、RD4-2025、MEN 10979、AG1549(S1153)、TMC-120、TMC-125、紅厚殼屬植物提取物(Calanolide A)和PMPA。可用于治療HIV感染的上述方法中的優(yōu)選蛋白酶抑制劑選自沙奎那韋、利托那韋、茚地那韋、氨普奈韋、奈非那韋、帕利那韋、BMS-232623、GS3333、KNI-413、KNI-272、LG-71350、CGP-61755、PD 173606、PD 177298、PD 178390、PD 178392、U-140690、ABT-378、DMP-450、AG-1776、VX-175、MK-944和VX-478，所述CCR-5抑制劑選自TAK-779(Takeda)、SC-351125(SCH-C，Schering)和SCH-D(Schering)，所述融合抑制劑選自T-20和T1249。
在另一個實施方案中，所述逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑選自AZT、依法韋侖和3TC，所述蛋白酶抑制劑選自沙奎那韋、利托那韋、奈非那韋和茚地那韋。
在另一個實施方案中，所述逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑是AZT。
在另一個實施方案中，所述蛋白酶抑制劑是茚地那韋。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供一種可用于治療HIV感染的藥盒，所述藥盒在一個或多個無菌容器中包含治療有效量的(a)一種式(I)化合物；和(b)至少一種選自以下的化合物HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和HIV蛋白酶抑制劑。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供用于治療的新型三環(huán)化合物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供新型三環(huán)化合物在生產(chǎn)用于治療HIV感染的藥物中的應用。
在不偏離本發(fā)明的精神或重要屬性的情況下，本發(fā)明可以以其它具體形式來表現(xiàn)。本發(fā)明也包括本文中所提及的本發(fā)明優(yōu)選方面的所有組合。人們知道，本發(fā)明的任何和所有實施方案可以與任何其它實施方案結(jié)合在一起來描述本發(fā)明的另外實施方案。此外，一種實施方案的任何因素必須與任一所述實施方案的任何和所有其它因素結(jié)合來描述另外的實施方案。
定義人們將會認識到，本發(fā)明的化合物含有不對稱的取代碳原子，并且可以以旋光或外消旋形式分離出來。本領(lǐng)域眾所周知如何制備旋光形式，例如通過外消旋形式的拆分或者通過從旋光原料合成。除非具體指專一性立體化學或異構(gòu)體形式，否則是指結(jié)構(gòu)的所有手性、非對映體、外消旋形式和所有的幾何異構(gòu)體形式。
本發(fā)明包括本發(fā)明化合物上存在的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序數(shù)但質(zhì)量數(shù)不同的那些原子。作為一般實例但并不限于此，氫的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括C-13和C-14。
本文所用的以下術(shù)語和表述具有所指定的含義。
本文所用的術(shù)語“烷基”意指包括具有規(guī)定數(shù)目的碳原子的支鏈和直鏈飽和脂族烴。舉例來說，術(shù)語“C1-10烷基”或“C1-C10烷基”意指包括C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C10烷基?！癈1-4烷基”意指包括C1、C2、C3和C4烷基。烷基的實例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和仲戊基。“鹵代烷基”意指包括具有規(guī)定數(shù)目的碳原子、被1個或多個鹵素取代的支鏈和直鏈飽和脂族烴(例如-CvFw，其中v＝1-3，而w＝1至(2v+1))。鹵代烷基的實例包括但不限于三氟甲基、三氯甲基、2，2，2-三氟乙基、3，3，3-三氟丙基、五氟乙基和五氯乙基。“烷氧基”代表如上定義的具有指定數(shù)目的碳原子的烷基通過氧橋連接的基團。C1-10烷氧基意指包括C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C10烷氧基。烷氧基的實例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基和仲戊氧基?！碍h(huán)烷基”意指包括飽和環(huán)基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基或環(huán)戊基。C3-7環(huán)烷基意指包括C3、C4、C5、C6和C7環(huán)烷基。“鏈烯基”意指包括直鏈或支鏈構(gòu)型且可以在沿所述鏈的任何穩(wěn)定點中存在一個或多個不飽和碳-碳鍵的烴鏈，例如乙烯基、丙烯基等。C2-10鏈烯基意指包括C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C10鏈烯基?！版溔不币庵赴ㄖ辨溁蛑ф湗?gòu)型且可以在沿所述鏈的任何穩(wěn)定點中存在一個或多個碳-碳叁鍵的烴鏈，例如乙炔基、丙炔基等。C2-10鏈炔基意指包括C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C10鏈炔基。
本文所用的“鹵代”或“鹵素”是指氟、氯、溴和碘?！跋喾措x子”用來代表小的帶負電荷離子，例如氯離子、溴離子、氫氧根、乙酸根、硫酸根等。
本文所用的“HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑”意指核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)抑制劑和非核苷RT抑制劑。核苷RT抑制劑的實例包括但不限于AZT、ddC、ddI、d4T和3TC。非核苷RT抑制劑的實例包括但不限于地位韋啶(Pharmacia and Upjohn U90152S)、依法韋侖(DuPont)、奈韋拉平(Boehringer Ingelheim)、Ro 18，893(Roche)、曲韋定(Lilly)、MKC-442(Triangle)、HBY 097(Hoechst)、HBY1293(Hoechst)、GW867(Glaxo Wellcome)、ACT(Korean Research Institute)、UC-781(RegaInstitute)、UC-782(Rega Institute)、RD4-2025(Tosoh Co.Ltd.)、MEN10979(Menarini Farmaceutici)、AG1549(S1153；Agouron)、TMC-120、TMC-125和紅厚殼屬植物提取物。
本文所用的“HIV蛋白酶抑制劑”意指抑制HIV蛋白酶的化合物。實例包括但不限于沙奎那韋(Roche，Ro31-8959)、利托那韋(Abbott，ABT-538)、茚地那韋(Merck，MK-639)、氨普奈韋(Vertex/GlaxoWellcome)、奈非那韋(Agouron，AG-1343)、帕利那韋(BoehringerIngelheim)、BMS-232623(Bristol-Myers Squibb)、GS3333(GileadSciences)、KNI-413(Japan Energy)、KNI-272(Japan Energy)、LG-71350(LG Chemical)、CGP-61755(Ciba-Geigy)、PD 173606(Parke Davis)、PD 177298(Parke Davis)、PD 178390(Parke Davis)、PD 178392(ParkeDavis)、U-140690(Pharmacia and Upjohn)、替拉那韋(Pharmacia andUpjohn，U-140690)、DMP-450(DuPont)、AG-1776、VX-175、MK-944、VX-478和ABT-378。另外的實例包括W093/07128、WO 94/19329、WO 94/22840和PCT申請?zhí)朥S96/03426中公開的環(huán)狀蛋白酶抑制劑。
本文所用的“N-氧化物”是指其中如實施例2中所述的化合物7中所示N被氧化的化合物。
本文所用的“藥學上可接受的鹽”是指所公開的化合物的衍生物，其中母體化合物經(jīng)修飾以制成其酸的鹽或堿的鹽。藥學上可接受的鹽的實例包括但不限于堿性殘基例如胺的無機酸或有機酸的鹽；酸性殘基例如羧酸的堿鹽或有機鹽等。所述藥學上可接受的鹽包括所得母體化合物的常規(guī)無毒鹽或季銨鹽，例如從無毒無機酸或有機酸生成的鹽。例如，這類常規(guī)無毒鹽包括無機酸衍生的鹽和從有機酸制備的鹽，所述無機酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等，所述有機酸例如乙酸、丙酸、琥珀酸、羥基乙酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、雙羥萘酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、對氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、草酸、羥乙磺酸等。
可以通過常規(guī)化學方法，從含有堿性或酸性部分的母體化合物合成本發(fā)明的藥學上可接受的鹽。一般而言，這樣的鹽可以通過使這些化合物的游離酸或堿形式與化學計量的水或有機溶劑或者水和有機溶劑的混合物中的適當堿或酸反應來制備；一般優(yōu)選非水性介質(zhì)如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。合適鹽的一覽表見于Remington′s Pharmaceutical Sciences，17th ed.，Mack PublishingCompany，Easton，PA，1985，第1418頁，該參考文獻的公開內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
短語“藥學上可接受的”本文用來指在合理的醫(yī)療判斷范圍內(nèi)適用于接觸人體組織和動物組織而沒有過度的毒性、刺激性、變態(tài)反應或其它問題或并發(fā)癥、而且具有合理利益/風險比的那些化合物、物質(zhì)、組合物和/或劑型。
由于已知前體藥物增強藥物的各種需要性質(zhì)(例如溶解度、生物利用度、生產(chǎn)等)，因此本發(fā)明的化合物可以以前體藥物形式給予。因此，本發(fā)明計劃包括本發(fā)明要求保護的化合物的前體藥物、給予所述前體藥物的方法和含有所述前體藥物的組合物。“前體藥物”意指包括當將所述前體藥物給予哺乳動物患者時在體內(nèi)釋放本發(fā)明的活性母體藥物的任何以共價鍵結(jié)合的載體。本發(fā)明的前體藥物通過修飾所述化合物中存在的官能團來制備，其修飾方式使得所述修飾或者在常規(guī)操作中或者在體內(nèi)被切割成母體化合物。前體藥物包括本發(fā)明的化合物，其中羥基、氨基或巰基與任何基團結(jié)合在一起，當將本發(fā)明的前體藥物給予哺乳動物患者時所述基團被切割分別形成游離羥基、游離氨基或游離巰基。前體藥物的實例包括但不限于本發(fā)明化合物中醇和胺官能團的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物。前體藥物的其它實例是C1-6烷羰基、C1-6烷氧基、C1-4烷氧羰基、C6-10芳氧基、C6-10芳氧羰基、C6-10芳基甲基羰基、C1-4烷羰氧基C1-4烷氧羰基、C6-10芳基羰基氧基C1-4烷氧羰基、C1-6烷基氨羰基、苯基氨羰基和苯基C14烷氧羰基。
“穩(wěn)定化合物”和“穩(wěn)定結(jié)構(gòu)”意指能夠以從反應混合物中以有效純度分離并配制成治療藥物的化合物。本發(fā)明僅考慮了穩(wěn)定化合物。
“治療有效量”意指包括本發(fā)明化合物單獨使用或與其它有效成分聯(lián)合使用有效抑制宿主HIV感染或治療HIV感染癥狀的量，或者要求保護的化合物組合制品的有效抑制宿主HIV感染或治療HIV感染癥狀的的聯(lián)合用量?；衔锏慕M合優(yōu)選協(xié)同組合。例如由Chou和Talalay(Adv.Enzyme Regul.2227-55(1984))描述的協(xié)同作用，當所述化合物聯(lián)合給藥的作用(在這種情況下為抑制HIV復制)高于所述化合物作為單一藥物單獨給藥時的相加作用時即產(chǎn)生了協(xié)同作用。一般而言，協(xié)同作用在所述化合物的亞適濃度下最清楚地得到證實。與各個組分相比，協(xié)同作用表現(xiàn)為細胞毒性較低，抗病毒作用增強或者某些其它有益效應。
本文所用的“治療”包括對哺乳動物、尤其是人類的疾病狀態(tài)的治療，包括(a)預防哺乳動物存在的疾病狀態(tài)、特別是當所述哺乳動物易患所述疾病狀態(tài)但還沒有確診患病時哺乳動物存在的疾病狀態(tài)；(b)抑制所述疾病狀態(tài)，即抑制其發(fā)展；和/或(c)緩解所述疾病狀態(tài)，即使所述疾病狀態(tài)消退。
合成本發(fā)明的化合物可以以有機合成領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的各種各樣的方式來制備。本發(fā)明的化合可以用下述方法和合成有機化學領(lǐng)域已知的合成方法或者本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其改進方法來合成。優(yōu)選的方法包括但不限于以下描述的那些方法。
下述通用條件的例外情況在文中有描述。反應在氮氣氛圍下、室溫下進行，通過TLC監(jiān)測并大多數(shù)情況下不是優(yōu)化條件。為了使反應充分，將反應進行過夜。試劑原樣使用。二甲基甲酰胺、四氫呋喃和乙腈經(jīng)分子篩干燥。乙醇和甲醇是無水的，水為去離子水。熔點在Mel-Temp裝置上的開口毛細管中測定并且未經(jīng)校對。柱色譜在快速硅膠上進行。
實施例13-氯-7-氟-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘(6)的制備 采用與于2000年10月18日申請的美國專利申請順序號09/691,249中描述的關(guān)于7-氯-5-三氟甲基苯并[b][1，8]二氮雜萘即如下所述的化合物8的制備方法相同的方法，制備化合物1，所述專利申請的合成部分通過引用結(jié)合到本文中。
方法A將1(10.0g，37.6mmol)和KCN(2.93g，45.1mmol)的DMF(50mL)溶液的混合物攪拌4小時。反應物用乙酸乙酯(100mL)稀釋，用飽和NaHCO3(3×35mL)和飽和NaCl(5mL)洗滌，干燥(MgSO4)，用活性炭澄清并減壓蒸發(fā)。將殘余物在己烷/乙酸乙酯中研磨，得到為乳白色粉末的2，8.01g(73％)。
方法B向2(11.7g，39.9mmol)的二氯甲烷(150mL)溶液的冷凍(-50℃)混合物中加入1N DIBAL-H(80mL，80mmol的CH2Cl2溶液)，每5分鐘加5mL。冷反應物用1N HCl(2mL，滴加)猝滅，然后用額外的1N HCl(30mL，快速攪拌)仍在冷卻下水解。反應物用乙酸乙酯(150mL)稀釋，用0.1N HCl(3×75mL)和飽和NaCl(15mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓蒸發(fā)。將殘余物在乙醚/己烷中研磨，得到為乳白色粉末的3，8.01g(68％)。
方法C向3(4.57g，15.4mmol)和分子篩的原甲酸三異丙酯(34mL，154mmol)溶液的混合物中加入對甲苯磺酸水合物(8.80g，46.3mmol)，每15分鐘加0.5g。反應物用乙酸乙酯(100mL)稀釋，用10％NaCO3(3×30mL)和飽和NaCl(5mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓蒸發(fā)。將殘余物在乙醚中研磨，得到為褐色粉末的4，4.71g(77％)。
方法D向4(4.12g，10.4mmol)的冷凍(0℃)TFA(40mL)溶液中滴加硼烷-甲硫醚(5.82mL，62.2mmol)，每30分鐘滴加2mL。反應物減壓蒸發(fā)以除去大部分TFA，殘余物在含有4N HCl/二噁烷(15.5mL，62.2mmol)的甲醇(40mL)溶液中攪拌2小時。反應物減壓蒸發(fā)，將殘余物溶于乙酸乙酯(50mL)中，用飽和NaHCO3(3×25mL)和飽和NaCl(10mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓蒸發(fā)。將殘余物在乙醚/己烷中研磨，得到為褐色粉末的5，3.21g(91％)。
方法E將5(3.21g，9.44mmol)和NCS(1.32g，9.91mmol)的異丙醇(35mL)溶液的混合物回流10分鐘。反應物用乙酸乙酯(40mL)稀釋，用1N HCl(2×25mL)、飽和NaHCO3(25mL)和飽和NaCl(10mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓蒸發(fā)。殘余物經(jīng)色譜純化(己烷/乙酸乙酯，15％)，得到靜置結(jié)晶的淺黃色糖漿狀物的6，2.26g(64％)(mp 96-97℃，MS 375)。
實施例23-氯-7-氟-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘1-氧化物(7)的制備方法F將6(2.26g，6.04mmol)和mCPBA(1.66g，7.25mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液攪拌30分鐘。反應物用10％NaSO3猝滅，用乙酸乙酯(40mL)稀釋，用10％K2CO3(3×20mL)和飽和NaCl(10mL)洗滌，干燥(MgSO4)并減壓蒸發(fā)，得到棕色泡沫狀物。經(jīng)色譜純化(乙酸乙酯/甲醇，2％)，得到無色膜狀物。將該膜狀物從乙醚/己烷中結(jié)晶出來，得到為乳白色微晶粉末的7，1.90g(81％)(mp 165-166℃，MS391)。
實施例33，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘(9)的制備 采用以上在方法A-E中所描述的程序，由7-氯-5-三氟甲基-苯并[b][1，8]二氮雜萘8制備化合物9(mp137-138℃，MS 392)。化合物8的合成描述于2000年10月18日申請的美國專利申請順序號09/691,249，該專利申請的合成部分通過引用結(jié)合到本文中。
實施例43，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘1-氧化物(10)的制備采用如上所述的方法F由9制備10(mp 145-146℃，MS 392)。
借助手性HPLC分離法，分離活性單對映體，采用手性柱進行分離，得到(R)和(S)對映體，＞99％EE。
實施例53-氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-4a，5，10，10a-四氫-苯并[b][1，8]1，5-二氮雜萘-7-甲腈(12)的制備 采用于2000年10月18日申請的待審美國專利申請順序號09/691,249中所描述的方法，用碘代苯胺開始，制備碘代化合物11a 7-碘-5-三氟甲基-苯并[b][1，8]二氮雜萘，得到11a，該專利申請的方法部分通過引用結(jié)合到本文中。然后采用如上所述的方法A、B、C、D和E，制備化合物11b。
方法G將7-碘-9-三氟甲基-9-異丙氧基甲基-4-氮雜吖啶11b(0.142g，0.295mmol)的無水甲苯(2.0mL)溶液脫氣，先用氰化三丁基錫(0.182g，0.6mmol)處理，然后用Pd(PPh3)4(6.8mg，0.02mmol)處理。將反應混合物脫氣，并在125℃下攪拌。發(fā)現(xiàn)反應在4小時后完成。讓其冷卻并在乙酸乙酯和水之間分配。有機層用鹽水洗滌，然后經(jīng)無水硫酸鎂干燥。將其濃縮并經(jīng)色譜純化(硅膠，20％乙酸乙酯/己烷)。得到為灰白色固體的產(chǎn)物12(80mg，71％)。
實施例63-氯-5-異丙氧基甲基-1-氧基-5-三氟甲基-4a，5，10，10a-四氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘-7-甲腈(13)的制備采用上述方法F，由12制備13，得到標題化合物(MS 398)。
實施例73-溴-7-氰基-5-三氟甲基-異丙氧基甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘(15)的制備 在室溫下，向7-氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘(14)(61mg，0.176mmol)的無水乙腈(2mL)攪拌溶液中加入NBS(38mg，0.211mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌1小時30分鐘。反應物用1∶1飽和NaHCO3水溶液/水(20mL)猝滅，然后用EtOAc(2X)萃取。合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并真空濃縮。經(jīng)快速色譜純化(20％-30％EtOAc-己烷)，得到為灰白色固體的15(73mg，97％收率)m.p.76-77℃；低分辯質(zhì)譜(ESI)m/z 426.2[(M+H)+，C18H16BrF3N3O的計算值426.05]。
實施例83-溴-7-氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘1-N-氧化物(16)的制備在室溫下，向3-溴-7-氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘(15)(28mg，0.0657mmol)的無水二氯甲烷(1mL)攪拌溶液中加入MCPBA(77％(最大)，22mg，0.0986mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時20分鐘。反應物用1∶110％Na2S2O3水溶液/飽和NaHCO3水溶液(10mL)猝滅，用EtOAc(2X)萃取。合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并真空濃縮。經(jīng)快速色譜純化(60％-80％EtOAc-己烷)，得到為綠色固體的16(28mg，96％收率)m.p.226-227℃；低分辯質(zhì)譜(ESI)m/z 442.1[(M+H)+，C18H16BrF3N3O2的計算值442.04]。
實施例93，7-二氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘(17)的制備 將3-溴-7-氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘(15)(73mg，0.171mmol)、Zn(CN)2(20mg，0.171mmol)和Pd(PPh3)4(10mg，0.00855mmol)的無水DMF(2mL)溶液和脫氣混合物在100℃下加熱16小時30分鐘。讓反應混合物冷卻至室溫，用2NNH4OH(20mL)猝滅，用EtOAc(2X)萃取。合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并真空濃縮。經(jīng)快速色譜純化(20％-30％EtOAc-己烷)，得到為白色固體的17(38mg，60％收率)m.p.226-227℃；低分辯質(zhì)譜(ESI) m/z 371.2[(M-H)-，C19H14F3N4O的計算值371.11]。
實施例103，7-二氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物(18)的制備在室溫下，向3，7-二氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘(17)(38mg，0.102mmol)的無水二氯甲烷(2mL)的攪拌溶液中加入MCPBA(77％(最大)，34mg，0.153mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應物用1∶1 10％Na2S2O3水溶液/飽和NaHCO3水溶液(10mL)猝滅，用EtOAc(2X)萃取。合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并真空濃縮。經(jīng)快速色譜純化(60％EtOAc-己烷)，得到為灰白色固體的18(39mg，98％收率)m.p.229-230℃；低分辯質(zhì)譜(ESI)m/z 389.3[(M+H)+，C19H16F3N4O2的計算值389.12]。
實施例113，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物(20)的制備 在室溫下，向7-氯-5-異丙氧基甲基-5-(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物(19)(117mg，0.317mmol)的無水1∶4i-PrOH-MeCN(3mL)的攪拌溶液中加入NCS(52mg，0.380mmol)。將反應混合物加熱至回流達3小時30分鐘。反應物用飽和NaHCO3水溶液(15mL)猝滅，用EtOAc(2X)萃取。合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并真空濃縮。經(jīng)快速色譜純化(30％-40％EtOAc-己烷)，得到為黃色固體的20(54mg，42％收率)m.p.63-64℃；低分辯質(zhì)譜(ESI)m/z 403.2[(M+H)+，C18H19Cl2F2N2O2的計算值403.08]。
實施例127-氰基-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘(22)的制備 將7-氯-5-異丙氧基甲基-5-(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘(21)(2.501g，7.089mmol)、Zn(CN)2(849mg，7.089mmol)、Pd[P(t-Bu)3]2(1.479g，2.836mmol)和鋅粉(556mg，8.507mmol)的無水NMP(20mL)溶液的脫氣混合物在170℃下加熱22小時30分鐘。讓反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋，通過Celite墊過濾，用EtOAc洗滌。濾液用2N NH4OH(120mL)和鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并真空濃縮。經(jīng)快速色譜純化(30％-50％EtOAc-己烷)，得到為黃色固體的22(2.184g，90％收率)m.p.134-135℃；低分辯質(zhì)譜(ESI)m/z344.3[(M+H)+，C19H20F2N3O的計算值344.16]。
3-氯-7-氰基-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘(23)的制備在室溫下，向7-氰基-5-異丙氧基甲基-5-(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘(22)(2.184g，6.361mmol)的無水1∶4i-PrOH-MeCN(35mL)的攪拌溶液中加入NCS(1.040g，7.633mmol)。將反應混合物加熱至回流達2小時40分鐘。反應物用飽和NaHCO3水溶液(100mL)猝滅，用EtOAc(2X)萃取。合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并真空濃縮。經(jīng)快速色譜純化(20％-30％EtOAc-己烷)，得到為淡黃色固體的23(2.021g，84％收率)m.p.79-81℃；低分辯質(zhì)譜(ESI)m/z 378.3[(M+H)+，C19H19ClF2N3O的計算值378.12]。
實施例133-氯-7-氰基-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物(24)的制備在0℃下，向3-氯-7-氰基-5-異丙氧基甲基-5-(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘(23)(1.969g，5.212mmol)的無水二氯甲烷(52mL)的攪拌溶液中加入MCPBA(77％(最大)，1.752g，7.818mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌2小時30分鐘。反應物用1∶1 10％Na2S2O3水溶液/飽和NaHCO3水溶液(100mL)猝滅，用EtOAc(2X)萃取。合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并真空濃縮。經(jīng)快速色譜純化(50％-70％EtOAc-己烷)，得到為黃色晶體的24(1.962g，96％收率)m.p.175-176℃；低分辯質(zhì)譜(ESI)m/z 394.4[(M+H)+，C19H19ClF2N3O2的計算值394.12]。
應用性本發(fā)明的化合物具有逆轉(zhuǎn)錄酶抑制活性和HIV抑制效力。式(I)化合物具有HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制活性，因此可用作抗病毒藥，以治療HIV感染和相關(guān)疾病。式(I)化合物具有HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制活性，因而作為HIV生長抑制劑是有效的。本發(fā)明化合物抑制病毒生長或感染性的能力在病毒生長或感染性的標準測定中例如在采用以下所述的測定中得到證實。
本發(fā)明的式(I)化合物也可用于抑制含有HIV或預計暴露于HIV的離體樣品中的HIV。因此，本發(fā)明的化合物可用于抑制含有或懷疑含有或暴露于HIV的體液樣品(例如血清或精液樣品)中存在的HIV。
本發(fā)明提供的化合物也可用作供測定藥物抑制病毒復制和/或HIV逆轉(zhuǎn)錄酶的能力用檢驗或測定中(例如在藥物研究程序中)的標準品或參比化合物。因此，本發(fā)明的化合物可用作這類測定中的對照或參比化合物以及質(zhì)量控制標準品。本發(fā)明的化合物可以以市售藥盒或容器提供，以用作這樣的標準品或參比化合物。
由于本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出對HIV逆轉(zhuǎn)錄酶的特異性，因此本發(fā)明的化合物也可以在用于檢測HIV逆轉(zhuǎn)錄酶的診斷分析中用作診斷試劑。因此，本發(fā)明的化合物抑制測定(例如本文所述測定)中的逆轉(zhuǎn)錄酶活性將指示HIV逆轉(zhuǎn)錄酶和HIV病毒的存在。
本文所用的“μg”表示微克，“mg”表示毫克，“g”表示克，“μL”表示微升，“mL”表示毫升，“L”表示升，“nM”表示納摩爾，“μM”表示微摩爾，“mM”表示毫摩爾，“M”表示摩爾，“nm”表示納米。“Sigma”代表Sigma-Aldrich Corp.of St.Louis，MO。
下述測定中所測試的化合物如果它們表現(xiàn)出Ki≤10μM則應認為有活性。本發(fā)明的優(yōu)選化合物的Ki≤1μM。本發(fā)明的更優(yōu)選化合物的Ki≤0.1μM。本發(fā)明的甚至更優(yōu)選化合物的Ki≤0.01μM。本發(fā)明的再更優(yōu)選化合物的Ki≤0.001μM。
采用下述方法，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的許多化合物都表現(xiàn)出Ki≤10μM，從而證實本發(fā)明化合物可用作有效的HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。
HIV RNA測定DNA質(zhì)粒和體外RNA轉(zhuǎn)錄物依照Erickson-Viitanen等AIDS Research and Human Retroviruses1989，5，577，制備含有克隆到PTZ 19R中BH10(bp 113-1816)的gag序列和pol序列的質(zhì)粒pDAB 72。該質(zhì)粒在用含有T7 RNA聚合酶的Riboprobe Gemini系統(tǒng)II試劑盒(Promega)產(chǎn)生體外RNA轉(zhuǎn)錄物之前用Bam HI線性化。合成RNA如下純化通過用不含DNA酶的RNA酶(Promega)處理，苯酚-氯仿抽提，乙醇沉淀。將RNA轉(zhuǎn)錄物溶于水中，并貯存于-70℃。RNA的濃度根據(jù)A260進行測定。
探針生物素化捕獲探針在Applied Biosystems(Foster City，CA)DNA合成儀上合成后通過HPLC純化，即通過采用Cocuzza(Tet.Lett.1989，30，6287)的生物素-亞磷酰胺試劑，將生物素添加到寡核苷酸5′末端。gag生物素化捕獲探針(如于2001年4月26日公布的WO01/29037中所述)與HXB2的核苷酸889-912互補，而pol生物素化捕獲探針(參見WO01/29037)與HXB2的核苷酸2374-2395互補。與用作報道探針的寡核苷酸綴合的堿性磷酸酶由Syngene(San Diego，CA.)制備。pol報道探針(參見WO01/29037)與HXB2的核苷酸2403-2425互補。gag報道探針(參見WO01/29037)與HXB2的核苷酸950-973互補。所有核苷酸位置是依照Genetics Computer Group Sequence AnalysisSoftware Package (Devereau Nucleic Acids Research 1984，12，387)登記的GenBank Genetic Sequence Data Bank的位置。所述報道探針制備為在2×SSC(0.3M NaCl，0.03M檸檬酸鈉)、0.05M Tris pH 8.8、1mg/mLBSA中的0.5μM原液。所述生物素化捕獲探針制備為100μM原液水溶液。
鏈霉抗生物素蛋白包被板鏈霉抗生物素蛋白包被板得自DuPont Biotechnology Systems(Boston，MA)。
細胞和病毒原液將MT-2細胞和MT-4細胞在補充5％胎牛血清(FCS)(對于MT-2細胞而言)或10％FCS(對于MT-4細胞而言)、2mM L-谷氨酰胺和50μg/mL慶大霉素(全都得自Gibco)的RPMI 1640中維持。讓HIV-1RF在相同培養(yǎng)液的MT-4細胞中繁殖。大約在急性感染MT-4細胞后10天制備病毒原液，作為等份樣品貯存于-70℃。根據(jù)MT-2細胞上的噬斑測定(參見下文)的測量，HIV-1(RF)原液的感染滴度為1-3×107PFU(噬斑形成單位)/mL。用于感染的每種等份病毒原液僅解凍1次。
為了評價抗病毒效力，待感染的細胞在感染前1天傳代培養(yǎng)。感染當天，將細胞以5×105細胞/mL重懸于含有5％FCS的RPMI 1640中(對于大劑量感染而言)或者以2×106/mL重懸于含有5％FCS的Dulbecco氏改良Eagles培養(yǎng)液中(對于微量滴定板感染而言)。加入病毒，讓其于37℃連續(xù)培養(yǎng)3天。
HIV RNA測定將細胞裂解液或純化RNA的3M或5M GED與5M GED和捕獲探針混合，至異硫氰酸胍的終濃度為3M，生物素寡核苷酸的終濃度為30nM。在密封U型底96孔組織培養(yǎng)板(Nunc或Costar)中，于37℃雜交16-20小時。將RNA雜交反應物用去離子水稀釋3倍，至異硫氰酸胍的終濃度為1M，然后將等份樣品(150μL)轉(zhuǎn)移到鏈霉抗生物素蛋白包被微量滴定板的各孔中。讓捕獲探針和捕獲探針-RNA雜交物與固定化鏈霉抗生物素蛋白在室溫下結(jié)合2小時，此后所述板用DuPont ELISA板洗滌緩沖液(磷酸緩沖鹽溶液(PBS)，0.05％Tween 20)洗滌6次。通過加入120μl含有4X SSC、0.66％Triton X100、6.66％去離子甲酰胺、1mg/mL BSA和5nM報道探針的雜交混合液，在經(jīng)洗滌的鏈霉抗生物素蛋白包被孔中使報道探針與捕獲探針和雜交靶RNA的固定化復合物進行第二次雜交。于37℃雜交1小時后，所述板再次洗滌6次。通過加入100μL 0.2mM 4-傘形基磷酸甲酯(MUBP，JBL Scientific)的緩沖液(2.5M二乙醇胺pH 8.9(JBLScientific)、10mM MgCl2、5mM乙酸鋅二水合物和5mM N-羥乙基-亞乙基-二胺-三乙酸)，檢測固定化堿性磷酸酶活性。將所述板于37℃保溫。采用在365nM下激發(fā)的微量板熒光計(Dynateck)，測量450nM的熒光。
受HIV-1感染的MT-2細胞中基于微量板的化合物評價將需要評價的化合物溶于DMSO中，在培養(yǎng)液中稀釋至最高試驗濃度的2倍且DMSO的最高濃度為2％。所述化合物在培養(yǎng)液中的進一步連續(xù)稀釋3倍直接在U型底微量滴定板(Nunc)中進行。化合物稀釋后，加入MT-2細胞(50μL)至終濃度為5×105/mL(1×105/孔)。將細胞與化合物在CO2培養(yǎng)箱中于37℃孵育30分鐘。為了評價抗病毒效力，將適當稀釋的HIV-1(RF)病毒原液(50μL)加入到含有細胞和不同稀釋度的試驗化合物的培養(yǎng)孔中。各孔的終體積為200μL。每板留下未用50μL加入病毒的培養(yǎng)液感染的8個孔，同時8個孔在不存在任何抗病毒化合物的情況下進行感染。為了評價化合物毒性，將未經(jīng)病毒感染的平行板進行培養(yǎng)。
在CO2培養(yǎng)箱的濕潤室一側(cè)中于37℃培養(yǎng)3天后，從所述HIV感染板中取出大約25μL培養(yǎng)液/孔。將37μL含有生物素化捕獲探針的5M GED加入到沉淀細胞和各孔剩余的培養(yǎng)液中，至終濃度為3M GED和30nM捕獲探針。在通過用板密封機(Costar)將所述板密封，在病毒培養(yǎng)物所用的同一微量板孔中進行所述捕獲探針與細胞裂解液中的HIV RNA的雜交，并且在37℃培養(yǎng)箱中保溫16-20小時。然后向各孔中加入蒸餾水，以將所述雜交反應物稀釋3倍，然后將該經(jīng)稀釋的混合物150μL轉(zhuǎn)移到鏈霉抗生物素蛋白包被微量滴定板中。如上所述對HIV RNA進行定量。在每個微量滴定板上運用通過向含有經(jīng)裂解的未感染細胞的各孔中加入已知量的pDAB 72體外RNA轉(zhuǎn)錄物而繪制的標準曲線，以便測定在所述感染期間產(chǎn)生的病毒RNA量。
為了將用于評價有抗病毒活性的化合物的病毒接種物標準化，選擇產(chǎn)生針對0.2μg/mL二脫氧胞苷(ddC)的IC90值(降低HIV RNA水平達90％所需的化合物濃度)的病毒稀釋液。比ddC或多或少有效的其它抗病毒化合物的IC90值當實施該方案時可用幾種HIV-1(RF)原液來再現(xiàn)。該病毒濃度相當于每個測定孔約3×105PFU(通過在MT-2細胞上噬斑測定測量的)，通常產(chǎn)生以任何病毒接種物可達到的最大病毒RNA水平的約75％。對于HIV RNA測定，相對于來自同一培養(yǎng)板上受感染、未經(jīng)治療的細胞凈信號，根據(jù)所述RNA測定中的凈信號(受感染細胞樣品的信號減去未受感染細胞樣品的信號)降低百分率，確定IC90值(8個孔的平均值)。依照3個標準，判斷各個感染和RNA測定試驗的有效性。要求病毒感染應導致RNA測定信號等于或大于2ng pDAB 72體外轉(zhuǎn)錄物產(chǎn)生的信號。在每輪測定中測定的ddC的IC90值應在0.1μg/mL和0.3μg/mL之間。最后，由有效逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑產(chǎn)生的病毒RNA的最高穩(wěn)定水平應該低于未受抑制感染中獲得的水平的10％。如果發(fā)現(xiàn)化合物的IC90值低于20μM，則認為所述化合物有活性。
對于抗病毒效力試驗，在向一排孔中最初加入濃縮2倍的化合物溶液后，采用Perkin Elmer/Cetus ProPette進行微量滴定板中的所有操作。
蛋白質(zhì)結(jié)合和突變體抗性為了表征NNRTI化合物的臨床功效，檢查血漿蛋白質(zhì)對抗病毒效力的潛在影響以及NNRTI針對HIV野生型和在已知結(jié)合部位中發(fā)生氨基酸變化的突變變異體的抗病毒效力的測量結(jié)果。該試驗策略的基本原理為以下兩方面1.許多藥物與血漿蛋白質(zhì)廣泛結(jié)合。雖然大多數(shù)藥對人血漿的主要組分即人血清白蛋白(HSA)或α-1-酸性糖蛋白(AAG)的結(jié)合親和力低，但是這些主要組分以在血液中高濃度存在。僅游離或未結(jié)合的藥物可穿過感染細胞膜，與靶位點(即HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶，HIV-1 RT)相互作用。因此，在組織培養(yǎng)物中加入的HSA+AAG對抗病毒效力的影響更接近地反映出給定化合物在臨床上的效力。根據(jù)靈敏的基于病毒RNA的檢測方法測定，病毒復制的90％抑制所需的化合物濃度被稱為IC90。然后計算反映體內(nèi)濃度的HAS和AAG存在或加入水平下(45mg/ml HSA，1mg/ml AAG)試驗化合物的表觀IC90的倍增數(shù)。倍增數(shù)越低，可與所述靶位點相互作用的化合物越多。
2.受感染個體中病毒復制的高速率和病毒RT的低保真度的聯(lián)合導致在受感染個體中產(chǎn)生準種或各種HIV的混合物。這些種將包括大多數(shù)野生型種，但也包括HIV的突變變異體，特定突變體的比例將反映出其相對適應性和復制速率。因為包括病毒RT的氨基酸序列發(fā)生變化的突變體在內(nèi)的突變變異體在受感染個體的準種中可能預先存在，所以在臨床上觀察到的總體效力將反映出藥物不僅抑制野生型HIV-1而且也抑制突變變異體的能力。因此，我們在已知的遺傳背景下構(gòu)建了在認為參與NNRTI結(jié)合的位置攜帶氨基酸取代的HIV-1突變變異體，并且測定試驗化合物抑制這些突變病毒復制的能力。根據(jù)靈敏的基于病毒RNA的檢測方法測定，病毒復制的90％抑制所需的化合物濃度被稱為IC90。最好有對各種突變體都有高活性的化合物。
在設計僅測量蛋白質(zhì)結(jié)合的測定中也測量所述化合物的蛋白質(zhì)結(jié)合。本發(fā)明化合物的體外蛋白質(zhì)結(jié)合采用混合人血清通過平衡透析來確定。將所述化合物加入到人血清中，至達到終濃度為10μM。然后將等份峰血清上樣到裝配型平衡透析聚四氟乙烯小室的一測，同時將磷酸鉀緩沖液(0.133M，pH 7.4)上樣至所述小室的另一側(cè)。于37℃保溫后，收集血清和緩沖液樣品，進行提取，并通過液相色譜質(zhì)譜分析測定所述化合物濃度。通過將緩沖液濃度除以血清濃度，然后乘以100，計算未結(jié)合藥物百分率。
本發(fā)明的化合物在黑猩猩體內(nèi)具有超過體內(nèi)臨床相關(guān)突變HIV-1病毒的IC90的足夠非蛋白質(zhì)結(jié)合的部分和藥代動力學。可以根據(jù)Corbett等，J.Med.Chem.(2000)，43，2019-2030中所述的方法，計算血漿IC90，所述參考文獻通過引用結(jié)合到本文中。
本發(fā)明化合物的其它改進是改進的藥代動力學特性。本發(fā)明的化合物在經(jīng)口服(p.o.)給藥的黑猩猩中已經(jīng)顯示改進的24小時血漿水平。
劑量和制劑本發(fā)明的抗病毒化合物可以作為針對病毒性感染的治療藥通過任何使所述有效成分與哺乳動物體內(nèi)的所述成分的作用位點即病毒逆轉(zhuǎn)錄酶接觸的方式給予。它們可以可與各種藥物一起通過可用的任何常規(guī)方式或者作為單獨治療藥或者與治療藥物組合藥物給予。它們可以單獨給予，但優(yōu)選與根據(jù)所選給藥途徑和標準藥物實踐選擇的藥用載體一起給予。
所給予的劑量自然根據(jù)已知因素例如具體藥劑的藥代動力學特征及其給藥模式和途徑、接受者的年齡、健康狀況和體重、癥狀的性質(zhì)和程度、現(xiàn)有治療的種類、治療頻率和所需效果而變化。預期有效成分的日劑量為約0.001毫克/千克體重至約1000毫克/千克體重，優(yōu)選劑量約0.1mg/kg至約30mg/kg。
適于給藥的組合物劑型每單位含有約1mg至約100mg有效成分。在這些藥用組合物中，所述有效成分基于所述組合物的總重量通常以約0.5-95％(重量)的量存在。所述有效成分可以以諸如膠囊劑、片劑和粉劑的固體劑型或者以諸如酏劑、糖漿劑和混懸劑的液體劑型口服給予。它也可以以無菌液體劑型胃腸外給予。
明膠膠囊劑含有所述有效成分和粉狀載體例如乳糖、淀粉、纖維素衍生物、硬脂酸鎂、硬脂酸等。相似的稀釋劑可以用于制備壓制片劑。片劑和膠囊劑均可以制成緩釋制劑，以達到在一定時間內(nèi)連續(xù)釋放藥物?？梢越o壓制片劑包糖衣或包膜，以掩蓋任何不愉快的味道并且保護片劑不接觸空氣，或者可以給壓制片劑包腸衣，以在胃腸道內(nèi)選擇性分解。用于口服給藥的液體劑型可以含有著色劑和矯味劑，以增加患者可接受性一般而言，水、合適的油、鹽水、水性葡萄糖和相關(guān)糖溶液及二元醇例如丙二醇或聚乙二醇都是胃腸外溶液劑的合適載體。用于胃腸外給藥的溶液劑最好含有所述有效成分的水溶性鹽、合適的穩(wěn)定劑、必要時含有緩沖物質(zhì)。抗氧化劑例如亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉或抗壞血酸或者單獨使用或者聯(lián)合使用都有是合適的穩(wěn)定劑。也使用檸檬酸及其鹽和EDTA鈉鹽。另外，胃腸外溶液劑可以含有防腐劑例如苯扎氯銨、羥苯甲酯或或羥苯丙酯及三氯叔丁醇。合適的藥用載體描述于本領(lǐng)域標準參考教科書Remington′s PharmaceuticalSciences，參見上文。
用于給予本發(fā)明化合物的有用藥用劑型可舉例說明如下膠囊劑本發(fā)明的膠囊制劑可以填充標準兩節(jié)硬明膠膠囊來制備，每粒膠囊劑含有100mg粉末狀有效成分、150mg乳糖、50mg纖維素和6mg硬脂酸鎂。
軟明膠膠囊劑本發(fā)明的軟明膠膠囊制劑可以如下制備?？芍苽浜行С煞值目上屠绱蠖褂?、棉籽油或橄欖油混合物，然后通過主動置換泵將所述混合物注射到明膠中，以形成含有100mg有效成分的軟明膠膠囊劑。然后將所述膠囊劑洗滌并干燥。
片劑本發(fā)明的片劑制劑可以通過常規(guī)方法來制備，致使所述劑量單位含100mg有效成分、0.2mg膠態(tài)二氧化硅、5毫克硬脂酸鎂、275mg微晶纖維素、11mg淀粉和98.8mg乳糖。合適的包衣劑可以用改善口感或者延遲吸收。
混懸劑可以制備用于口服給藥的水性混懸劑制劑，致使每5mL含有25mg精細有效成分、200mg羧甲基纖維素鈉、5mg苯甲酸鈉、1.0g山梨醇溶液U.S.P.和0.025mg香草醛。
注射劑適于注射給藥的胃腸外制劑可以通過將1.5％(重量)的有效成分在10％(體積)丙二醇和水中攪拌來制備。所述溶液劑通過常用技術(shù)進行除菌。
治療藥物的聯(lián)合給藥本發(fā)明提供一種用于治療HIV感染的方法，所述方法包括聯(lián)合給予需要這種治療的宿主治療有效量的、在一個或多個無菌容器中的以下成分(a)一種式(I)化合物；和(b)至少一種選自以下的化合物HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和HIV蛋白酶抑制劑。
該聯(lián)合給藥方法中各個治療藥物組分(即上述組分(a)和(b))可以在任何單獨劑型(例如上述劑型)中獨立給予，并且可以以如上所述的各種方式給予。在以下描述中，組分(b)應理解為代表如上所述的一種或多種藥物。包含組分(b)的各個治療藥物也可以在任何單獨劑型(例如上述劑型)中獨立給予，并且可以以如上所述的各種方式給予。
本發(fā)明聯(lián)合給藥方法中組分(a)和包含任何一種或多種藥物的組分(b)可以一起配制在一種劑量單位(即一起混合在一粒膠囊劑、一片片劑、一瓶粉劑或一瓶液體劑等中)中作為組合產(chǎn)品。當組分(a)和(b)沒有一起配制在一個劑量單位中時，組分(a)可以與組分(b)同時給予或者以任何順序給予；例如可以先給予本發(fā)明的組分(a)，然后給予組分(b)，或者它們可以以相反順序給予。如果組分(b)含有不止一種藥物例如一種RT抑制劑和一種蛋白酶抑制劑，則這些藥物可以一起給予或者以任何順序給予。當不同時給予時，組分(a)和(b)給藥的間隔時間最好在約1小時內(nèi)。組分(a)和(b)的給藥途徑優(yōu)選口服途徑。本文所用的術(shù)語口服藥物、口服抑制劑、口服化合物等表示可以口服給藥的化合物。雖然優(yōu)選組分(a)和組分(b)通過相同的途徑(也就是說，例如都為口服)或劑型給予，如有需要，它們可以通過不同的途徑或劑型給予(例如所述聯(lián)合給藥方法中一種組分可以口服給予，而另一種組分可以靜脈內(nèi)給予)。
如上所述，本領(lǐng)域醫(yī)師知道，本發(fā)明聯(lián)合療法的劑量可以根據(jù)各種因素例如具體藥物的藥代動力學特征及其給藥模式和途徑、接受者的年齡、健康狀況和體重、癥狀的性質(zhì)和程度、現(xiàn)有治療的種類、治療頻率和所需效果而變化。
根據(jù)本發(fā)明的公開內(nèi)容，本發(fā)明聯(lián)合給藥方法中組分(a)和(b)的適當劑量容易地由本領(lǐng)域醫(yī)師確定。作為一般指南，日劑量通?？梢允敲糠N組分約100毫克至約1.5克。如果組分(b)表示不止一種化合物，則日劑量通?？梢允墙M分(b)中每種藥物約100毫克至約1.5克。作為一般指南，當組分(a)和組分(b)的化合物聯(lián)合給予時，鑒于所述聯(lián)合給藥的協(xié)同作用，每種組分的劑量可以相對于當所述組分作為用于治療HIV感染的一種藥物而單獨給予時的常用劑量而言降低約70-80％。
可以配制本發(fā)明的組合產(chǎn)品，致使雖然所述有效成分混合在一種劑量單位中，但是使所述有效成分間的物理接觸最小化。為了使接觸最小化，例如在所述制劑口服給予的情況下，可以給一種有效成分包腸衣。借助給一種有效成分包腸衣，不僅使所述混合有效成分間的接觸最小化成為可能，而且控制這些組分中的某一組分在胃腸道中釋放以便這些組分中的一種組分不在胃中釋放而在腸道中釋放成為可能。當最好口服給藥時本發(fā)明的另一實施方案提供一種組合產(chǎn)品，其中一種有效成分用實現(xiàn)通過胃腸道緩慢釋放的緩釋材料包衣并且也用來使所述混合有效成分間的物理接觸最小化。此外，所述緩釋組分可以另外包腸衣，致使該組分的釋放僅在腸道中發(fā)生。再一方法包括制備一種組合產(chǎn)品，其中一種組分用緩釋和/或腸溶釋放聚合物包衣，而另一種組分也用諸如低粘度級的羥丙基甲基纖維素的聚合物或本領(lǐng)域已知的其它合適材料包衣，以便使所述有效成分進一步分開。所述聚合物包衣劑用來形成不與其它組分相互作用的額外屏障。在每種制劑中，其中通過包衣劑或某些其它材料防止組分(a)和(b)間的接觸，也可以防止組分(b)中各種藥物的接觸。
其中給一種有效成分包腸衣的本發(fā)明組合產(chǎn)品的劑型可以為片劑形式，以便將所述包腸衣組分和其它有效成分混合在一起，然后壓制成片劑，或者致將所述包腸衣組分壓制成一個片層，而將另一有效成分壓制成另一片層。任選的是，為了使所述兩個片層進一步分開，可以有一個或多個安慰劑片層，致使所述安慰劑片層位于有效成分的各層之間。另外，本發(fā)明的劑型可以為膠囊劑形式，其中一種有效成分壓制成片劑，或者為大量的微型片劑、微粒劑、小粒劑或non-perils的形式，然后將其包腸衣。然后將這些包腸衣的微型片劑、微粒劑、小粒劑或non-perils裝入膠囊中或者與其它有效成分一起制粒后擠壓到膠囊中。
根據(jù)本發(fā)明的公開內(nèi)容，使本發(fā)明組合產(chǎn)品的各組分間的接觸最小化的這些方式以及其它方式，無論是以一種劑型給藥還是以獨立形式但同時或都經(jīng)相同方式同時給藥，對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言都是顯而易見的。
可用于治療HIV感染的藥盒也在本發(fā)明的范圍內(nèi)，所述藥盒在一個或多個無菌容器中包含治療有效量的一種包含一種組分(a)化合物和組分(b)的一種或多種化合物的藥用組合物?？梢圆捎帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員熟知的常規(guī)滅菌方法，對所述容器進行滅菌。組分(a)和組分(b)可以在相同無菌容器中或者在不同無菌容器中。所述材料的無菌容器可以包括獨立容器，或者必要時包括一個或多個多區(qū)室容器。如上所述，組分(a)和組分(b)可以是獨立的或者在一種劑型或劑量單位中物理性混合。如果需要，這樣的試劑盒還可以包括各種常規(guī)藥盒組分中的一種或多種，例如一種或多種藥學上可接受的載體、將所述組分混合的所附管形瓶等，這些對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言都是顯而易見的。所述藥盒中也可以包括或者作為插頁或者作為標簽的說明，所述說明指示組分的給藥量、給藥指南和/或?qū)⑺鼋M分混合的指南。
正如本領(lǐng)域技術(shù)人員所認識到的，根據(jù)以上敘述，本發(fā)明的各種修改和改變是可能的。因此，人們知道，在所附權(quán)利要求書的范圍內(nèi)，可以實施本發(fā)明而不限于本文中具體描述的實施方案。
權(quán)利要求
1.一種式(I)化合物或其立體異構(gòu)體形式或立體異構(gòu)體形式的混合物或藥學上可接受的鹽形式 其中R1選自被0-7個鹵素取代的C1-3烷基；R2為-(CH2)OCH(CH3)2；X選自F、Cl、Br、I和CN；Y選自F、Cl、Br、I和CN；且Z選自N和N-氧化物。
2.一種權(quán)利要求1的化合物，其中R1選自被0-7個鹵素取代的C1-3烷基；R2為-(CH2)OCH(CH3)2；X選自F、Cl、Br、I和CN；Y選自F、Cl、Br和I；且Z選自N和N-氧化物。
3.一種權(quán)利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽形式，其中R1為CF3；X選自F、Cl和CN；且Y選自F和Cl。
4.一種權(quán)利要求1-2的化合物，其中Z為N。
5.一種權(quán)利要求1-2的化合物或其藥學上可接受的鹽形式，其中Z為N-氧化物。
6.一種權(quán)利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽形式，其中所述化合物為以下的式(Ia)化合物
7.一種權(quán)利要求1的化合物，其中R1選自被0-7個鹵素取代的C1-3烷基；X選自F、Cl和CN；且Y選自F、Cl和Br。
8.一種權(quán)利要求7的化合物，其中R1選自CH3CF2。
9.一種權(quán)利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽形式，其中所述式(I)化合物選自1 3，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘；2 3，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘1-氧化物；3 3-氯-7-氟-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘；4 3-氯-7-氟-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘1-氧化物；5 3-氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-4a，5，10，10a-四氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘-7-甲腈；6 3-氯-5-異丙氧基甲基-1-氧基-5-三氟甲基-4a，5，10，10a-四氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘-7-甲腈；7 3-溴-7-氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘；8 3-溴-7-氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜奈-1-N-氧化物；9 3，7-二氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘；10 3，7-二氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物；11 3，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物；12 7-氰基-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘；和13 3-氯-7-氰基-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘。
10.一種權(quán)利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽形式，其中所述式(I)化合物選自1 (R)3，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘；2 (R)3，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘1-氧化物；3 (R)3-氯-7-氟-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘；4 (R)3-氯-7-氟-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-5，10-二氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘1-氧化物；5 (R)3-氯-5-異丙氧基甲基-5-三氟甲基-4a，5，10，10a-四氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘-7-甲腈；6 (R)3-氯-5-異丙氧基甲基-1-氧基-5-三氟甲基-4a，5，10，10a-四氫-苯并[b][1，8]二氮雜萘-7-甲腈；7 (R)3-溴-7-氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘；8 (R)3-溴-7-氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物；9 (R)3，7-二氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘；10 (R)3，7-二氰基-5-三氟甲基-5-異丙氧基甲基-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物；11 (R)3，7-二氯-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘-1-N-氧化物；12 (R)7-氰基-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘；和13 (R)3-氯-7-氰基-5-異丙氧基甲基-5(1，1-二氟乙基)-5，10-二氫苯并[b][1，8]二氮雜萘。
11.一種藥用組合物，所述藥用組合物包含藥學上可接受的載體和治療有效量的一種權(quán)利要求1-10的化合物或其藥學上可接受的鹽形式。
12.一種治療HIV感染的方法，所述方法包括給予需要這種治療的宿主治療有效量的一種權(quán)利要求1-10的化合物或其藥學上可接受的鹽形式。
13.一種治療HIV感染的方法，所述方法包括聯(lián)合給予需要這種治療的宿主治療有效量的(a)一種權(quán)利要求1-10的化合物；和(b)至少一種選自以下的化合物HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、CCR-5抑制劑和融合抑制劑。
14.一種權(quán)利要求13的方法，其中所述逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑選自AZT、ddC、ddI、d4T、3TC、地位韋啶、依法韋侖、奈韋拉平、Ro 18893、曲韋定、MKC-442、HBY 097、HBY1293、GW867、ACT、UC-781、UC-782、RD4-2025、MEN 10979、AG1549(S1153)、TMC-120、TMC-125、紅厚殼屬植物提取物和PMPA，而所述蛋白酶抑制劑選自沙奎那韋、利托那韋、茚地那韋、氨普奈韋、奈非那韋、帕利那韋、BMS-232623、GS3333、KNI-413、KNI-272、LG-71350、CGP-61755、PD 173606、PD 177298、PD 178390、PD 178392、U-140690、ABT-378、DMP-450、AG-1776、VX-175、MK-944和VX-478，所述CCR-5抑制劑選自TAK-779(Takeda)、SC-351125(SCH-C，Schering)和SCH-D(Schering)，而所述融合抑制劑選自T-20和T1249。
15.一種權(quán)利要求14的方法，其中所述逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑選自AZT、依法韋侖和3TC，而所述蛋白酶抑制劑選自沙奎那韋、利托那韋、奈非那韋和茚地那韋。
16.一種權(quán)利要求15的方法，其中所述逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑是AZT。
17.一種權(quán)利要求16的方法，其中所述蛋白酶抑制劑是茚地那韋。
18.一種可用于治療HIV感染的藥盒，所述藥盒在一個或多個無菌容器中包含治療有效量的(a)一種權(quán)利要求1-10的化合物；和(b)至少一種選自以下的化合物HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和HIV蛋白酶抑制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及可用作HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的式(I)的三環(huán)化合物或其立體異構(gòu)體形式、立體異構(gòu)體混合物或藥學上可接受的鹽形式，并且涉及包含所述化合物的藥用組合物和診斷試劑盒，以及應用所述化合物治療病毒性感染或者作為測定標準品或試劑的方法。
文檔編號A61P31/18GK1649591SQ02811966
公開日2005年8月3日 申請日期2002年4月17日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月19日
發(fā)明者B·L·約翰遜, J·D·羅杰斯, Q·林, A·S·斯里瓦斯塔瓦 申請人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司