專利名稱：一種介孔鈣硅凝膠及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物工程領(lǐng)域，特別涉及ー種介孔鈣硅凝膠材料及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
介孔材料具有均一可調(diào)的介孔孔徑(2_50nm)、規(guī)則的納米孔道以及巨大的比表面積/孔容，可用作生物吸附劑、生物催化劑及載體，并在分離提純生物活性物質(zhì)和新型生物組裝材料等領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景。介孔材料的特點(diǎn)使其非常適用于蛋白質(zhì)、酶等活性分子的吸附固定。通過調(diào)節(jié)孔徑大小，介孔材料可選擇性地吸附生物活性分子。也可以將蛋白、生長(zhǎng)因子及酶等固定在其表面，通過表面修飾構(gòu)建新一代分子生物材料。介孔材料作為ー種新型的納米結(jié)構(gòu)材料，已成為國(guó)際上跨化學(xué)、物理、材料、生物等多學(xué)科研 究熱點(diǎn)和前沿之一。介孔硅基干凝膠由于具有規(guī)整的孔道結(jié)構(gòu)，巨大的比表面積，優(yōu)異的生物活性和生物相容性，可用于快速止血和骨組織修復(fù)等生物材料領(lǐng)域(Li XS, Lin W,Xin FL, et al. Adv Mater Res. 2011 ；340 (222) :222-228 ;Heinemann S, Heinemann C，Bernhardt R, et al. Acta Biomater. 2009 ;5 (6) : 1979-1990.)。另外，介孔娃基干凝膠在藥物控釋等領(lǐng)域顯示了其潛在的應(yīng)用前景(Lee EJ, Jun SH, Kim HE, et al. Silicaxerogel-chitosan nano-hybrids for use as drug eluting bone replacement. ChemMater Sci. 2010 ；21 (1) :207-214.)。以十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)為結(jié)構(gòu)導(dǎo)向劑，并引入鈣離子，制備了具有2. 62nm孔徑的鈣摻雜介孔ニ氧化硅微球，提高了其生物活性(Li X，乙hang LX, Dong XP,et al. Preparation of mesoporous calcium doped silica sphereswith narrow size dispersion and their drug loading and degradation behavior.Micropor Mesopor Mat. 2007 ；102 (1-3) :151-158.) □吳曉輝等通過溶膠-凝膠法制備了高比表面積(466.5m2/g)的有序介孔(3.7mn)鈣摻雜硅干凝膠，證實(shí)了其在體外具有優(yōu)良的生物活性(Wu XH, Ye L，Liu K，et al. Antibacterial properties of mesoporouscopper-doped silica xerogels. Biomed Mater. 2009 ；4 (4) :1_6.)。戴程龍等對(duì)介孔 I丐摻雜硅干凝膠進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，證實(shí)了該材料可用于快速止血及骨組織修復(fù)(Dai CL，L CS，Wei J.et al. Biomaterials. 2010 ；31 (30) :7620-7630. Dai CL，Guo H，Lu JX, etal. Biomaterials. 2011 ；32 (33) :8506-8517. ) 0然而，現(xiàn)有的鈣硅基干凝膠的介孔孔徑較小，其上限大約為8nm，材料對(duì)生物大分子如蛋白質(zhì)的負(fù)載主要依靠其表面的物理吸附作用，材料吸附大分子的量較少，而且吸附后的大分子不能在材料上緩慢釋放，出現(xiàn)瀑釋，從而使該材料在大分子的控制釋放等方面的應(yīng)用受到一定的限制(Aertsa CA，Verraedta E，Deplaa A. Int J Pharmaceut. 2010 ；397 (1-2) :84-91. Tourne-Peteilh C，Begu S，Lerner DA, et al. J Sol-Gel SciTechn. 2012 ；61 (3) :455-462.)。趙東元等在酸性條件下，利用非離子型嵌段共聚物為模板，制備了一系列具有高度有序孔結(jié)構(gòu)的六方介孔硅分子篩(SBA)，其孔徑分布在5-30mnZJl] (Zhao DY，F(xiàn)eng JL, Huo QS, et a_L Triblock copolymer syntheses of mesoporoussilica with periodic 50 to 300 angstrom pores. Science. 1998 ;279 (5350)548-552.)，這為我們制備適合負(fù)載生物大分子如蛋白質(zhì)的介孔材料提供了重要依據(jù)。外源性rhBMP-2是ー種生物大分子，具有很強(qiáng)的骨誘導(dǎo)活性(Pohla LM,Boergermannc jH, bchwaerzerc GK, et al.buriace immobilization of bonemorphogenetic protein 2 via a self-assembled monolayer formation induces celldifferentiation. Acta Biomater. 2012 ;8 (2) :772-780.)。然而，rhBMP-2 的體內(nèi)半衰期短，全身和局部應(yīng)用很快被稀釋代謝，達(dá)不到所期望的生物學(xué)效果。因此rhBMP-2要在骨缺損發(fā)揮作用，必須有一個(gè)合適的載體才能達(dá)到在體內(nèi)緩釋進(jìn)而長(zhǎng)效發(fā)揮促進(jìn)骨骼細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題就是針對(duì)現(xiàn)有的介孔鈣硅基凝膠材料(MCS，Mesoporous caclium silicate)介孔直徑較小,對(duì)蛋白質(zhì)等生物大分子或藥物分子的吸附量有限；而且該材料負(fù)載的生物大分子是以突釋或瀑釋方式(材料負(fù)載的生物大分子在很短時(shí)間內(nèi)就被完全釋放)從材料上釋放，無(wú)法起到長(zhǎng)效緩釋功能的缺陷，提供一種新的介孔鈣硅凝膠材料、所述介孔鈣硅凝膠的制備方法、所述介孔鈣硅凝膠在制備生物材料中的用途和所述的介孔鈣硅凝膠/生物大分子復(fù)合物。本發(fā)明人通過大量實(shí)驗(yàn)驚喜地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明制備的大孔徑介孔鈣硅凝膠不僅可作為細(xì)胞載體，而且可作為生物大分子的高容量載體，通過調(diào)控該材料的納米孔道結(jié)構(gòu)能夠?qū)崿F(xiàn)其負(fù)載的生物大分子的可控釋放，從而完成了本發(fā)明。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采取的技術(shù)方案之一是ー種介孔鈣硅凝膠，其中所述介孔I丐娃凝膠的比表面積為257. 8m2/g 485. 6m2/g,平均孔徑為3. 97nm 35nm,孔容為
0.48cm3/g I. 43cm3/g。本發(fā)明所述介孔鈣硅凝膠的比表面積較佳地為257.8m2/g，平均孔徑較佳地為35nm，孔容較佳地為I. 43cm3/g。其中所述的介孔鈣硅凝膠粉末X-射線衍射圖譜上在橫坐標(biāo)2 0為0 2°之間沒有衍射峰，而在2 0為10 40°有一個(gè)廣泛的吸收峰。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采取的技術(shù)方案之二是ー種如上所述介孔鈣硅凝膠的制備方法，其中所述制備方法包括以下步驟(I)將結(jié)構(gòu)導(dǎo)向劑溶解在水中，調(diào)節(jié)溶液pH值為I 3，加入擴(kuò)孔劑攪拌溶解，再加入硅源、鈣源和磷源，30 50°C下進(jìn)行反應(yīng)；(2)將步驟(I)所得反應(yīng)液pH值調(diào)節(jié)為9 13，80 120°C靜置12 48小時(shí)得到沉淀，將所得沉淀洗滌至PH7 7. 2，80 100°C干燥48 72小時(shí)后550°C 700°C焙燒2 8小時(shí)，得到最終產(chǎn)品。其中步驟⑴所述的結(jié)構(gòu)導(dǎo)向劑為本領(lǐng)域常規(guī)的結(jié)構(gòu)導(dǎo)向劑，所述結(jié)構(gòu)導(dǎo)向劑較佳地包括非離子型表面活性剤、陽(yáng)離子型表面活性劑和陰離子表面活性劑中的一種或幾種。其中所述非離子型表面活性劑較佳地為EO2ciPO7ciEO2tl(Pluixmic P123)和EO106PO70EO106(Pluronic F127)中的ー種或兩種。本發(fā)明所述導(dǎo)向劑優(yōu)選地為非離子型嵌段共聚物 EO2qPO7qEO2q (Pluronic P123)。其中所述擴(kuò)孔劑為本領(lǐng)域常規(guī)的擴(kuò)孔劑，其中所述擴(kuò)孔劑較佳地包括1，3，5-均三甲苯(TMB)、癸烷(Decane)和聚こニ醇(PEG)中的ー種或幾種。本發(fā)明所述擴(kuò)孔劑優(yōu)選地為1，3，5-均三甲苯(TMB)。其中所述硅源為本領(lǐng)域常規(guī)的硅源。其中所述硅源較佳地包括正硅酸こ酯(TEOS)和正硅酸甲酯(TMOS)中的ー種或兩種。本發(fā)明所述硅源優(yōu)選地為正硅酸こ酷。其中所述的磷源為本領(lǐng)域常規(guī)的磷源。所述磷源較佳地包括磷酸三こ酯(TEP)和磷酸三甲酯(TMP)中的ー種或兩種。本發(fā)明所述磷源優(yōu)選地為磷酸三こ酷。其中所述鈣源為本領(lǐng)域常規(guī)的鈣源試劑，所述鈣源試劑較佳地選自氯化鈣、硝酸鈣和醋酸鈣中的ー種或幾種。本發(fā)明所述鈣源優(yōu)選地為Ca(NO3)2 4H20。其中所述結(jié)構(gòu)導(dǎo)向劑的添加量較佳地為2 4%，所述擴(kuò)孔劑的添加量較佳地為2 4%,所述娃源的添加量較佳地為3 4%,所述磷源的添加量為0. 5 3%,所述I丐源 的添加量較佳地為I 3%，上述百分比均為質(zhì)量百分比。步驟(I)所述調(diào)節(jié)溶液酸堿性方法為本領(lǐng)域常規(guī)方法，本發(fā)明優(yōu)選用鹽酸將溶液的PH值調(diào)節(jié)為I 3，所述攪拌時(shí)間較佳地為2 4小時(shí)，至溶液澄清后再加入硅源、鈣源和磷源，30 50°C反應(yīng)時(shí)間較佳地為12小時(shí) 36小時(shí)。其中所述步驟(2)調(diào)節(jié)溶液酸堿性方法為本領(lǐng)域常規(guī)方法，本發(fā)明優(yōu)選使用氨水將溶液PH值調(diào)節(jié)為9 13，靜置溫度較佳地為80 120°C，靜置時(shí)間較佳地為12 48小吋。將所得沉淀洗滌至中性，所述中性的PH值較佳地為7 7. 2，干燥溫度較佳地為80 100°C，干燥時(shí)間較佳地為48 72小時(shí)，煅燒溫度較佳地為550°C 700°C，焙燒時(shí)間較佳地為2 8小時(shí)，所述焙燒的升溫速率較佳地為1°C /min 5°C /min。本發(fā)明所述介孔鈣硅凝膠制備方法的優(yōu)選實(shí)例為將3 Sg非離子型嵌段共聚物EO20PO70EO20(Pluronic P123, Sigma-AIdrich)作為結(jié)構(gòu)導(dǎo)向劑(Mw = 5800)溶解在 200 300ml去離子水中，用磁力攪拌器強(qiáng)烈攪拌至溶液澄清；用37%濃鹽酸調(diào)節(jié)溶液體系的pH值至pHl 3,加入4 8g擴(kuò)孔劑1,3,5-均三甲苯,攪拌2 4h,至溶液成白色乳液,再將6 IOg正硅酸こ酷、5 8gCa (NO3)2 *4H20和I. 5g 4g磷酸三こ酯加入溶液反應(yīng)體系中，將反應(yīng)體系置于30°C 50°C水浴，繼續(xù)反應(yīng)12小吋 36小吋。用濃氨水將溶液反應(yīng)體系PH值調(diào)節(jié)至pH9 13，溶液反應(yīng)體系置于80°C 120°C烘箱，靜置12小時(shí) 48小時(shí)后，得到白色沉淀。將白色沉淀用去離子水洗滌至PH7 7.2，并于80°C 100°C干燥箱內(nèi)干燥48小時(shí) 72小時(shí)，用馬弗爐將材料于550°C 700°C焙燒2小時(shí) 8小時(shí)，焙燒升溫速率1°C /min 5°C /min,得到最終產(chǎn)品介孔I丐娃凝膠。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采取的技術(shù)方案之三是本發(fā)明所述的介孔鈣硅凝膠在制備生物材料中的用途。本發(fā)明所述介孔鈣硅凝膠在制備生物材料中的用途為本領(lǐng)域常規(guī)的用途。其中所述用途較佳地包括所述介孔鈣硅凝膠在制備生物材料支架的用途，在制備生物大分子和/或藥物緩釋載體的用途。本發(fā)明所述用途優(yōu)選地為所述介孔鈣硅凝膠在制備生物大分子和/或藥物緩釋載體中的用途。其中所述生物大分子是本領(lǐng)域常規(guī)使用的生物大分子。所述生物大分子較佳地包括蛋白質(zhì)、酶、核酸和碳?xì)浠衔镏械末`種或幾種。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采取的技術(shù)方案之四是一種介孔鈣硅凝膠復(fù)合物，所述的介孔鈣硅凝膠復(fù)合物中包含如上所述的介孔鈣硅凝膠以及該介孔鈣硅凝膠負(fù)載的蛋白質(zhì)分子和/或生物活性因子。
其中所述的生物活性因子是能改變細(xì)胞的行為或性質(zhì)，通過與細(xì)胞特異的受體結(jié)合而起作用的ー類分子的統(tǒng)稱。所述生物活性因子較佳地包括可溶性蛋白質(zhì)分子、核酸分子、多糖分子或其他碳?xì)浠衔镱惙肿又械末`種或幾種。其中所述蛋白質(zhì)分子為本領(lǐng)域常規(guī)的蛋白質(zhì)分子。所述蛋白質(zhì)分子是指生物體中廣泛存在的ー類生物大分子，由核酸編碼的a氨基酸之間通過a氨基和a羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈，經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的、有活性的大分子。本發(fā)明所述蛋白質(zhì)分子優(yōu)選地為rhBMP-2蛋白質(zhì)分子(重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2)。所述rhBMP-2蛋白分子屬于骨形態(tài)發(fā)生蛋白，該類蛋白具有誘導(dǎo)未分化間充質(zhì)細(xì)胞向軟骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞方向分化的作用，在骨折和骨損傷的修復(fù)過程中發(fā)揮重要作用。所述rhBMP-2蛋白來(lái)源 較佳地包括天然提取、人工合成或體外重組表達(dá)等途徑。天然提取是指從自然界的生物體中提取天然存在的rhBMP-2蛋白。人工合成是指通過化學(xué)方法在體外合成具有生物活性的rhBMP-2蛋白。體外重組表達(dá)是指在體外構(gòu)建表達(dá)該蛋白的載體，選擇合適的表達(dá)系統(tǒng)如原核表達(dá)系統(tǒng)或真核表達(dá)系統(tǒng)在體外表達(dá)、純化獲得具有生物活性的重組rhBMP-2蛋白。本發(fā)明所述介孔鈣硅凝膠復(fù)合物中介孔鈣硅凝膠成分的含量較佳地為0. 1% 99. 9%，優(yōu)選的含量為0. 5% 90%,所述百分比為質(zhì)量百分比。其中所述介孔鈣硅凝膠復(fù)合物的制備方法為本領(lǐng)域常規(guī)的制備方法，所述制備方法較佳地包括以下步驟將蛋白質(zhì)分子和/或生物活性因子溶于溶劑中，配制成蛋白質(zhì)分子和/或生物活性因子溶液，加入介孔鈣硅凝膠粉末，震蕩反應(yīng)、離心、烘干得到負(fù)載蛋白質(zhì)分子和/或生物活性因子的介孔鈣硅凝膠。其中所述蛋白質(zhì)分子和/或生物活性因子較佳地為rhBMP-2分子(重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2)，所述溶劑較佳地為0. 02 0. 05M稀醋酸溶液，所述蛋白質(zhì)分子溶液濃度較佳地為0. 5 lmg/mL。震蕩反應(yīng)溫度較佳地為35 37°C，震蕩頻率較佳地為80 IOOr/min,反應(yīng)時(shí)間較佳地為2 48小時(shí)，烘干溫度較佳地為37 42°C。本發(fā)明所用的原料或試劑除特別說(shuō)明之外，均市售可得。相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果如下本研究制備的大孔徑介孔鈣硅凝膠材料對(duì)生物活性因子具有容量高，緩慢釋放的特性，不僅可作為細(xì)胞載體，還可作為生物活性因子的高容量載體，并通過調(diào)控其納米孔道結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)其可控釋放功能。因此，該介孔鈣硅凝膠材料具有調(diào)控組織再生和緩釋生物活性因子的雙重功能。同時(shí)本發(fā)明所述大孔徑介孔鈣硅凝膠材料，能有效地保持生物大分子的生物活性，是生物活性因子如rhBMP-2的控制釋放的優(yōu)良載體，所述介孔鈣硅凝膠/rhBMP-2復(fù)合材料，對(duì)細(xì)胞増殖具有長(zhǎng)效的促進(jìn)作用。


以下結(jié)合

本發(fā)明的特征和有益效果。圖I是介孔鈣硅凝膠材料及其復(fù)合材料制備流程示意圖。(a)是制備MCS的流程示意圖。(b)是制備MCS/rhBMP-2復(fù)合材料的制備流程示意圖。圖2是介孔鈣硅凝膠材料小角X射線衍射圖譜。a MCS-4 ；b MCS-35。圖3是介孔鈣硅凝膠材料廣角X射線衍射圖譜。a MCS-4 ；b MCS-35。圖4是介孔鈣硅凝膠材料傅里葉紅外光譜。a MCS-4 ；b MCS-35。
圖5是介孔鈣硅凝膠材料低溫氮?dú)馕?脫附等溫線。a MCS-4 ；b MCS-35。圖6是介孔鈣硅凝膠材料孔徑分布示意圖。a MCS-4 ；b MCS-35。圖7是介孔鈣硅凝膠材料的TEM照片。a，b MCS-4 ；c, d MCS-35。圖8是介孔鈣硅凝膠材料的SEM照片。a，b MCS-4 ；c, d MCS-35。圖9是介孔鈣硅凝膠材料的激光粒度分布圖。圖10是介孔鈣硅凝膠材料的EDS分析圖。a MCS-4 ；b MCS-35。圖11是介孔I丐娃凝膠材料對(duì)rhBMP-2的吸附曲線圖和釋放曲線圖b。其中a是吸附曲線圖，b是釋放曲線圖。圖12是介孔鈣硅凝膠材料在不同時(shí)間對(duì)細(xì)胞增殖的影響效果圖。
具體實(shí)施例方式下面用實(shí)施例來(lái)進(jìn)ー步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明并不受其限制。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。實(shí)施例中所述的“室溫”是指進(jìn)行試驗(yàn)的操作間的溫度，一般為25°C。實(shí)施例I.介孔鈣硅凝膠的制備采用模板誘導(dǎo)和自組裝方法合成介孔I丐娃凝膠(MCS, Mesoporous cacliumsilicate)材料。將4. 8g非離子型嵌段共聚物E02(lP07(lE02(l (Pluronic P123, Sigma-Aldrich)作為結(jié)構(gòu)導(dǎo)向劑(Mw = 5800)溶解在240ml去離子水中，用磁力攪拌器強(qiáng)烈攪拌至溶液澄清；用2ml 37% (v/v)濃鹽酸調(diào)節(jié)溶液體系的pH值至pH = I,加入6g I,3,5-均三甲苯(擴(kuò)孔劑)(TMB，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，AR)，攪拌2h，至溶液成白色乳液，再將8ml正硅酸こ酯(TE0S，上海凌峰化學(xué)試劑有限公司，AR)、3. 75g Ca(NO3)2 4H20和2. 5g磷酸三こ酷(TEP，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，AR)加入溶液反應(yīng)體系中，將反應(yīng)體系置于45°C水浴，再反應(yīng)24h。用濃度為13M的氨水將溶液反應(yīng)體系pH值調(diào)節(jié)至pH = 10，溶液反應(yīng)體系置于100°C烘箱，靜置48h后，得到白色沉淀。將白色沉淀用去離子水洗滌至pH值為7，并于80°C干燥箱內(nèi)干燥12小時(shí)，用馬弗爐將材料于550°C焙燒6h，升溫速率1°C /min，得到最終產(chǎn)品。介孔鈣硅凝膠制備流程如圖1(a)所示。采用同樣的方法，但不加入擴(kuò)孔劑TMB，制備介孔鈣硅凝膠材料作為對(duì)照組；所制備的兩種介孔鈣硅凝膠材料的配方如表I所示。表I MCS的組成成分
權(quán)利要求
1.一種介孔鈣硅凝膠，其特征在于，所述介孔鈣硅凝膠的比表面積為257. 8m2/g 485. 6m2/g，平均孔徑為 3. 97nm 35nm，孔容為 O. 48cm3/g I. 43cm3/g。
2.如權(quán)利要求I所述的介孔鈣硅凝膠，其特征在于，所述介孔鈣硅凝膠粉末X-射線衍射圖譜在橫坐標(biāo)2 Θ為10 40°有一個(gè)廣泛的吸收峰。
3.—種如權(quán)利要求I所述的介孔鈣硅凝膠的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟 (1)將結(jié)構(gòu)導(dǎo)向劑溶解在水中，調(diào)節(jié)溶液PH值為I 3，加入擴(kuò)孔劑攪拌溶解，再加入硅源、鈣源和磷源，30 50°C下進(jìn)行反應(yīng)； (2)將步驟⑴所得反應(yīng)液pH值調(diào)節(jié)為9 13，80 120°C靜置12 48小時(shí)得到沉淀，將所得沉淀洗滌至PH7 7. 2，80 100°C干燥48 72小時(shí)后550°C 700°C焙燒2 8小時(shí)，得到最終產(chǎn)品。
4.如權(quán)利要求3所述的介孔鈣硅凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(I)所述結(jié)構(gòu)導(dǎo)向劑包括非離子型表面活性劑、陽(yáng)離子型表面活性劑和陰離子表面活性劑中的一種或幾種。
5.如權(quán)利要求4所述的介孔鈣硅凝膠的制備方法，其特征在于，其中所述的非離子型表面活性劑包括EO20PO70EO20和EO106PO70EO106中的一種或兩種。
6.如權(quán)利要求3所述的介孔鈣硅凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(I)所述所述擴(kuò)孔劑包括1，3，5-均三甲苯、癸烷和聚乙二醇中的一種或幾種，所述硅源包括正硅酸乙酯和正硅酸甲酯中的一種或兩種，所述鈣源包括Ca(NO3)2 · 4H20、氯化鈣和醋酸鈣中的一種或幾種，所述磷源包括磷酸三乙酯和磷酸三甲酯中的一種或兩種。
7.如權(quán)利要求3所述的介孔鈣硅凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(I)所述所述導(dǎo)向劑的添加量為2 4%,所述擴(kuò)孔劑的添加量為2 4%,所述I丐源的添加量為I 3%,所述硅源的添加量為3 4%，所述磷源的添加量為O. 5 3 %，上述百分比均為質(zhì)量百分比。
8.如權(quán)利要求3所述的介孔鈣硅凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(I)所述加入擴(kuò)孔劑攪拌時(shí)間為2 4小時(shí)，30 50°C進(jìn)行反應(yīng)的時(shí)間為12 36小時(shí)；步驟⑵所述焙燒升溫速率是I 5°C /min。
9.權(quán)利要求I所述的介孔鈣硅凝膠在制備生物材料中的用途。
10.一種介孔鈣硅凝膠復(fù)合物，其特征在于，所述介孔鈣硅凝膠復(fù)合物中包含如權(quán)利要求I所述的介孔鈣硅凝膠以及該介孔鈣硅凝膠負(fù)載的蛋白質(zhì)分子和/或生物活性因子。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種大孔徑介孔鈣硅凝膠，該材料的比表面積257.8m2/g～485.6m2/g，平均孔徑3.97nm～35nm，孔容0.48cm3/g～1.43cm3/g。該材料的制備方法包括將結(jié)構(gòu)導(dǎo)向劑、擴(kuò)孔劑溶于水中，pH1～3下水浴加熱攪拌，加入鈣源、硅源和磷源，將所得反應(yīng)液pH值調(diào)節(jié)為9～13，80～120℃靜置12～48小時(shí)得到沉淀，將所得沉淀洗滌至pH7～7.2，80～100℃干燥48～72小時(shí)后550℃～700℃焙燒2～8小時(shí)，得到最終產(chǎn)品。還公開了一種介孔鈣硅凝膠復(fù)合物，該材料能很好地吸附并緩釋生物活性因子，具有很好的細(xì)胞相容性并且能夠有效促進(jìn)細(xì)胞增殖。
文檔編號(hào)A61L31/06GK102755650SQ20121026431
公開日2012年10月31日 申請(qǐng)日期2012年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月27日
發(fā)明者關(guān)曼, 劉昌勝, 吳釗英, 宋文華, 李享德, 王永麗, 鄧玉虎, 魏杰 申請(qǐng)人:華東理工大學(xué)