專利名稱：神經(jīng)激肽的新偽肽化合物，其制備方法和含有它們的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及神經(jīng)激肽的新偽肽化合物，它們的制備方法和含有它們的藥物組合物。
神經(jīng)激肽為一類在C—末端具有類似Phe—x—Gly—Leu—Met的結(jié)構(gòu)的神經(jīng)肽。這些神經(jīng)肽P物質(zhì)(SP)，神經(jīng)激肽A(NKA)和神經(jīng)激肽B(NKB)誘導(dǎo)平滑肌纖維的快速收縮，相反緩激肽產(chǎn)生慢收縮。SP、NKA和NKB的內(nèi)源性激動作用分別通過具有優(yōu)勢親和性的特異性受體NK1、NK2、NK3產(chǎn)生，它們廣泛分布在人體中，特別是中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)中。它們參與許多生理或病理生理過程，如傷害、血管通透性、平滑肌纖維收縮、分泌過多和免疫調(diào)節(jié)(OTSUKA M.等，Physiol.Rev.73，229—308，1993)。
文獻(xiàn)中已描述了大量作為神經(jīng)激的拮抗劑的肽，例如專利EP333174和EP394989或WO9222569中描述的化合物。
本發(fā)明目的是這樣一些偽肽，它們不僅是新的，而且由于其強藥理特性證明它們特別有價值。它們對神經(jīng)激肽受體，更特別是對NK1受體具有選擇性和強拮抗特性。
這些特性使它們可以特別用于治療疼痛、各種起因的炎癥、胃腸疾病、氣喘、變態(tài)反應(yīng)、泌尿科疾病、偏頭痛和中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。
本發(fā)明更具體涉及式(I)化合物 其中R代表萘基、5，6，7，8—四氫萘基、1，2，3，4—四氫萘基、噻吩基、苯基(由一個或多個鹵原子或直鏈或支鏈(C1—C6)烷基、直鏈或支鏈(C1—C6)烷氧基、羥基或三鹵甲基任意取代)或(C3—C7)環(huán)烷基，n代表1≤n≤8的整數(shù)，它們的對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體和差向異構(gòu)體以及與藥用酸或堿的加成鹽。
藥用酸的非限定性例子可提及鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸、酒石酸、馬來酸、檸檬酸、抗壞血酸、草酸、甲磺酸和樟腦酸等。
藥用堿的非限定性例子可提及氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙胺、叔丁胺等。
本發(fā)明還涉及式(I)化合物的制備方法，其中式(II)的保護(hù)的羥基脯氨酸(已任選分離了其異構(gòu)體)。 其中Fmoc代表9—芴基甲氧羰基，tBu代表叔丁基，在4—二甲氨基吡啶和N，N—二環(huán)己基碳化二亞胺存在下，用苯甲醇處理，得到式(III)化合物 其中Fmoc和tBu同上所定義，在吡啶介質(zhì)中將其胺官能團脫保護(hù)，得到(IV)化合物其中tBu同上所定義， 式(IV)化合物與吲哚—3—羧酸反應(yīng)，得到式(V)化合物 其中tBu同上所定義，通過催化氫化將其羧酸官能團脫保護(hù)，得到式(VI)化合物 其中tBu同上所定義，式(VI)化合物與式(VII)保護(hù)的氨基酸(任選已分離了其異構(gòu)體)反應(yīng) 其中R同式(I)中的定義，產(chǎn)生式(VIII)化合物 其中tBu和R同上所定義，式(VIII)化合物在硫酸氫化四丁基銨存在下與式(IX)的保護(hù)的四唑反應(yīng) 其中Trt代表三苯甲基，得到式(X)化合物 其中tBu、R和Trt同上所定義，其在三氟乙酸介質(zhì)中脫保護(hù)，得到式(I)化合物，—適當(dāng)時，它可按常規(guī)純化技術(shù)純化，—適當(dāng)時，其異構(gòu)體可按常規(guī)分離技術(shù)分離，—需要時，與藥用堿轉(zhuǎn)化成其加成鹽。
式(VII)化合物可這樣得到按照如W.KONIG和R.GEIGER(Ber.，103，788，1970)所描述的常規(guī)肽偶聯(lián)反應(yīng)，式(XI)的保護(hù)的氨基酸 其中R同式(I)中所定義，Boc代表叔丁氧羰基，與N—甲基芐胺反應(yīng)，得到式(XII)化合物 其中Boc和R同上所定義，其在鹽酸介質(zhì)中脫保護(hù)，得到式(VII)化合物。
式(IX)化合物按如下方法制得式(XIII)的腈Cl—(CH2)n—CN(XIII)其中n同上式(I)中所定義，在惰性氣氛下在氯化鋁存在下與疊氮化鈉反應(yīng)，得到式(XIV)化合物 其中n同式(I)中的定義，此化合物在三乙胺存在下與三苯甲基氯反應(yīng)，得到式(XV)化合物 其中n和Trf同上所定義，它然后用碘化鈉處理，得到相應(yīng)的碘化的式(IX)化合物。
本發(fā)明化合物具有很有價值的藥理特性。它們?yōu)樯窠?jīng)激肽受體的特異性配體，特別是對NK1受體有特別強的拮抗特性。NK1受體被認(rèn)為更具體地參與疼痛傳遞調(diào)節(jié)、由血管通透性增加產(chǎn)生的水腫、氣管支氣管和胃腸水平的分泌現(xiàn)象、流涎、通氣控制和血管緊張控制、及活化參與炎癥過程的細(xì)胞。另外，不象某些作為P物質(zhì)拮抗劑的偽肽化合物，這些化合物對肥大細(xì)胞沒有脫粒作用。
本發(fā)明的另一目的是僅含有作為活性成分的至少一種式(I)化合物，或還含有一種或多種無毒惰性賦形劑或載體的藥物組合物。
本發(fā)明的藥物組合物中，更具體可提及適于口服、非胃腸道給藥或鼻內(nèi)給藥的組合物，如簡單片劑或糖衣片劑、舌下含片、明膠膠囊、錠劑、栓劑、霜劑、軟膏、皮膚膠等。
所用劑量根據(jù)病人的年齡和體重、疾病性質(zhì)和嚴(yán)重程度以及給藥途徑變化。給藥途徑可為口服、鼻內(nèi)、直腸或非胃腸道給藥。一般地，單位劑量在0.2—100mg間變化，每24小時1—3劑。
下列實施例說明但不限制本發(fā)明。
所用起始物為已知物或按已知方法制得的物質(zhì)。制備例A和B不產(chǎn)生本發(fā)明的化合物，而是合成了在制備式(I)化合物中有用的中間體。在下述實施例和制備例中，縮寫以大寫字母開頭的氨基酸為L構(gòu)型，其縮寫以小寫字母開頭的氨基酸為D構(gòu)型。
在實施例和制備例中使用的縮寫如下Nal—NMeBzl代表下式(L)—N—甲基芐基氨基—萘—2—基丙氨酸殘基 Tna—NMeBzl代表下式(L)—N—甲基芐基氨基—5，6，7，8—四氫萘—2—基丙氨酸殘基 Thn—NMeBzl代表下式的(L)—N—甲基芐基氨基—1，2，3，4—四氫萘—2—基丙氨酸殘基 Thi—NMeBzl代表下式的(L)—N—甲基芐基氨基—噻吩—2—基丙氨酸殘基 Phe代表苯丙氨酰殘基，Cha—NMeBzl代表下式的(L)—N—甲基芐基氨基—環(huán)己基丙氨酸殘基 Boc代表叔丁氧基羰基，Hyp代表下式(R)—4—羥基—L—脯氨酰殘基 Fmoc代表9—芴基甲氧基羰基，tBu代表叔丁基，H—Hyp(tBu)—OBzl代表下式的殘基 制備例AH—Hal—NMeBzl鹽酸鹽A步(L)—Boc—Nal—NMeBzl將12.6mmol(L)—Boc—Nal—OH、13.9mmol 2—(1H—苯并三唑—1—基)—1，1，3，3—四甲基脲翁四氟硼酸鹽，和12.6mmolN—甲基芐基胺相繼加入到30cm2二氯甲烷中。向混合物中加入27.7mmol N，N—二異丙基乙基胺，并在冰浴上保持?jǐn)嚢?。?℃攪拌1小時后，將混合物調(diào)節(jié)至室溫，攪拌20小時。濃縮后，殘余油用乙酸乙酯溶解。用碳酸氫鈉、再用5％檸檬酸溶液、最后用氫化鈉飽和溶液洗滌。干燥并蒸發(fā)有機相，得到油狀目標(biāo)化合物。B步H—Nal—NMeBzl鹽酸鹽通過在乙酸乙酯中用6N鹽酸處理上步所得產(chǎn)品計90分鐘，來得到目標(biāo)產(chǎn)品。蒸發(fā)溶劑后，用乙醚再用戊烷溶解所得固體。過濾沉淀并干燥，得到目標(biāo)產(chǎn)物。制備例B5—(4—碘丁基)—1—三苯甲基—1H—四唑A步5—(4—氯丁基)四唑在惰性氣氛下，將100mmol 5—氯戊腈加到冰浴上的100ml無水四氫呋喃中。每次少量分批加入445mmol疊氮化鈉，再加入100mmol氯化鋁。加熱反應(yīng)混合物至80℃，并使其在攪拌下回流16小時。然后形成的復(fù)合物通過滴加150cm35％鹽酸來水解。得到的水相用乙酸乙酯萃取，然后用水、氯化鈉和溶液洗滌有機相，干燥并蒸發(fā)，殘余物回收在戊烷中。過濾形成的沉淀得到目標(biāo)產(chǎn)物。B步5—(4—氯丁基)—1—三苯甲基—1H—四唑?qū)?8mmol三乙胺和68mmol三苯甲基氯相繼加入到含68mmol上步所得化合物的80ml氯仿中。在室溫下攪拌此溶液15小時。蒸發(fā)后，殘余油用乙酸乙酯溶解。該溶液用5％碳酸氫鈉、5％檸檬酸和氯化鈉飽和溶液依次洗滌。干燥并蒸發(fā)后，用戊烷溶解、過濾并干燥后，得到固狀目標(biāo)產(chǎn)物。C步5—(4—碘丁基)—1—三苯甲基—1H—四唑向含25mmol上步所得化合物的100ml無水丙酮中加入25mmol碘化鈉。加熱混合物至60℃，并回流15小時。過濾沉淀后，真空濃縮濾液，得到目標(biāo)產(chǎn)物。實施例1{1—〔4—(1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Nal—NMeBzl，鉀鹽A步Fmoc—Hyp(tBu)—OBzl向用冰浴冷卻的、含61mmol Fmoc—Hyp(tBu)—OH、6.5m-mol芐氯和27mmol 4—二甲氨基吡啶和150ml二氯甲烷的混合物中加入65mmolN，N—二環(huán)己基碳化二亞胺。在0℃下一小時后，調(diào)節(jié)混合物至室溫，攪拌18小時。濾出二環(huán)己基脲沉淀，蒸發(fā)濾液。殘余油用乙酸乙酯溶解。該溶液用5％碳酸氫鈉、5％檸檬酸和氯化鈉飽和溶液依次洗滌。干燥、蒸發(fā)后，得到油狀目標(biāo)產(chǎn)物。B步H—Hyp(tBu)—OBzl上步所得油用240ml 20％呲啶乙醚溶液處理2小時30分鐘。濃縮后，殘余油在硅膠柱上用乙酸乙酯作為洗脫液純化，得到油狀目標(biāo)產(chǎn)物。C步(吲哚—3—基)羰基—Hyp(tBu)—OBzl向冰浴冷卻的、在80mmol二氯甲烷中含50mmol上步所得產(chǎn)物、65mmol吲哚—3—羧酸和75mmol溴—三吡咯烷基—鏻六氟磷酸鹽的混合物中，加入100mmol N，N—二異丙基乙胺。在0℃下30分鐘后，調(diào)節(jié)混合物至室溫，并攪拌17小時。蒸發(fā)后，殘余油用乙酸乙酯溶解。溶液用5％碳酸氫鈉、5％檸檬酸和氯化鈉飽和溶液依次洗滌。目標(biāo)產(chǎn)物結(jié)晶，過濾分離。D步(吲哚—3—基)羰基—Hyp(tBu)—OH加熱下，將23mmol上步所得產(chǎn)物溶解在1升無水甲醇中?；謴?fù)到室溫后，在惰性氣氛下，加入50ml冰醋酸和1g 1％鈀碳。該懸液在常溫常壓下氫化20小時。過濾催化劑，用甲醇洗，蒸發(fā)濾液。殘余物用乙酸乙酯溶解，結(jié)晶并過濾后得到目標(biāo)產(chǎn)物。E步(吲哚—3—基)羰基—Hyp(tBu)—Nal—NMeBzl向冰浴冷卻下的、在50ml二氯甲烷中含9.5mmol上步產(chǎn)品、10.5mmol制備例A中描述的化合物，10.5mmol 2—(1H—苯并三唑—1—基)—1，1，3，3—四甲基脲翁四氟硼酸鹽、10.5mmol羥基苯并三唑的混合物中，加入21mmol N，N—二異丙基乙胺、在0℃下一小時后，調(diào)節(jié)混合物至室溫，并攪拌16小時。濃縮后，用乙酸乙酯溶解殘余物。該溶液用5％碳酸氫鈉、5％檸檬酸和氯化鈉飽和溶液洗滌。目標(biāo)產(chǎn)物結(jié)晶、過濾。F步{1—〔4—(4—三苯甲基—1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp(tBu)—Nal—NMeBzl將19mmol研成細(xì)小顆粒的氫氧化鈉加入到在70ml二氯甲烷中含4.76mmol上步化合物和0.05mmol硫酸氫化四丁銨的溶液中。攪拌該懸液5分鐘，加入14.3mmol制備例B中所得化合物。攪拌整個混合物24小時。蒸去溶劑后，殘余物用乙酸乙酯溶解。此溶液依次用5％碳酸氫鈉、5％檸檬酸和氯化鈉飽和溶液洗滌。干燥并蒸發(fā)后，殘余物在柱膠硅上用乙酸乙酯為洗脫液進(jìn)行純化，得到粉狀目標(biāo)產(chǎn)物。G步{1—〔4—(1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Nal—NMeBzl3.01mmol上步化合物在室溫下用500ml三氟乙酸/二氯甲烷混合物(50/50)處理3小時。濃縮后，殘余油用乙醚/戊烷混合物處理，過濾得到的沉淀用制備性HPLC純化C18反相柱，溶劑為水/乙腈系統(tǒng)，其中乙腈的百分比在1小時內(nèi)從30％變到40％。純化后冷干得到目標(biāo)產(chǎn)物。H步{1—〔4—(1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Nal—NMeBzl，鉀鹽向在水/乙腈混合物中含有1.89mmol上步化合物的冷溶液中，加入2.08mmol 0.1N氫氧化鉀，得到上步產(chǎn)物的鉀鹽。然后將此鹽冷凍干燥。元素分析C％H％N％理論值60.205.8913.96實測值59.825.5813.61實施例2{1—〔4—(1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Tna—NMeBzl，鉀鹽，和實施例3{1—(4—(1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Thn—NMeBzl，鉀鹽A步(L)—Boc—Tna—NMeBzl和〔(L，L)＋(L，D)〕—Boc—Thn—NMeRzl
向在20cm3甲醇中含7.17mmol的(L)—Boc—Nal—NMeBzl的溶液中，相繼加入10滴冰醋酸和1.5g鈀碳?；旌衔镌诔爻合職浠?天。過濾除去催化劑后，蒸發(fā)溶劑，得到無色油狀目標(biāo)產(chǎn)物，比例為(L)—Boc—Tna—NMeBzl/(L，L)—Boc—Thn—NMeBzl/(L，D)—Boc—Thn—NMeBzl60/20/20。B步H—Tna—NMeBzl三氟醋酸鹽＋H—Thn—NMeBzl三氟醋酸鹽上步油用100cm3三氟醋酸/二氯甲烷混合物(50/50)處理，并在室溫下攪拌2小時。真空濃縮后在戊烷中研制，得到油狀脫保護(hù)的混合物。C步(吲哚—3—基)羰基—Hyp(tBu)—Tna—NMeBzl＋(吲哚—3—基)羰基—Hyp(tBu)—Thn—NMeBzl將4.4mmol N，N—二異丙基乙胺加到在10ml二氯甲烷中含2mmol(吲哚—3—基)羰基—Hyp(tBu)—OH、2mmol上步B所述化合物，2.2mmol BTUT.2.2mmol HOBt的混合物中。攪拌此溶液8小時，然后用乙酸乙酯溶解。用水、5％碳酸氫鈉、5％檸檬酸和飽和氯化鈉溶液洗滌有機相后，干燥并真空濃縮，得到的結(jié)晶泡沫在硅膠上用100％乙酸乙酯為洗脫劑純化。
在C18反相柱上用洗脫劑A水/三氟乙酸0.1％；B乙腈/三氟乙酸0.1％(其中90分鐘內(nèi)從35％B到65％B的梯度)進(jìn)行制備性HPLC來純化，可以將分別含Tna或Thn的兩種衍生物分離。另外，在這些條件下不可能將Thn加合物的兩種非對映異構(gòu)體分離。實施例2{1—〔4—(1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Tna—NMeBzl，鉀鹽按照實施例1的步驟F、G和H，從上步C中得到的(吲哚—3—基)羰基—Hyp(fBu)—Tna—N4eBzl，制備目標(biāo)產(chǎn)物。元素分析C％H％N％理論值64.846.1215.12實測值65.325.8814.46FAB質(zhì)譜〔M＋H〕+m/z＝741實施例3{1—〔4—(1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Thn—NMeBzl，鉀鹽按照實施例1的步驟F、G和H，從上步C中得到的(吲哚—3—基)羰基—Hyp(tBu)—Thn—NMeBzl，制備目標(biāo)產(chǎn)物。FAB質(zhì)譜〔M＋H〕+m/z＝741實施例4{1—〔(1H—四唑—5—基)甲基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Nal—NMeBzl，鉀鹽按照與實施例1的相同步驟，用按制備例B從氯乙腈得到的5—碘甲基—1—三苯甲基—1H—四唑制備此化合物。元素分析C％ H％ N％理論值63.965.0816.13實測值63.575.0115.93FAB質(zhì)譜〔M＋H〕+m/z＝695實施例5{1—〔2—(1H—四唑—5—基)乙基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Nal—NMeBzl，鉀鹽A步〔1—(2—氰基乙基)吲哚—3—基〕羰基—Hyp(tBu)—Nal-NMeBzl將1.58mmol氫化鈉小批量加到在10ml無水四氫呋喃中含0.79mmol(吲哚—3—基)羰基—Hyp(tBu)—Nal—NMeBzl(實施例1的E步)和0.87mmol 3—溴丙腈的溶液中。室溫攪拌24小時后，真空除去溶劑，殘余物溶解在乙酸乙酯中。形成的溶液用水、5％碳酸氫鈉、5％檸檬酸和氯化鈉飽和溶液洗滌，用Na2SO4干燥。蒸發(fā)溶劑后，混合物在硅膠上用洗脫劑二氯甲烷/丙酮80/20快速層析純化。真空濃縮流份，得到白色粉狀目標(biāo)產(chǎn)物。B步{1—〔2—(1H—四唑—5—基)乙基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp(tBu)—Nal—NMeBzl將1.75mmol三甲基甲硅烷基疊氮化物和0.09mmol二丁基錫氧化物加入在10ml甲苯中含有0.44mmol上步所得肽的溶液中。在80℃下攪拌反應(yīng)混合物24小時，然后蒸去甲苯。殘余物用甲醇溶解兩次，真空濃縮，并用乙酸乙酯溶解。該溶液用5％檸檬酸和氯化鈉飽和溶液洗滌，用Na2SO4干燥，真空濃縮，得到白色粉狀目標(biāo)產(chǎn)物。C步{1—〔2—(1H—四唑—5—基)乙基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Nal—NMeBzl0.35mmol上步得到的化合物用20ml三氟乙酸/二氯甲烷混合物(50/50)在室溫下處理5小時。濃縮后，形成的油用乙醚處理，得到沉淀，過濾沉淀并在C18反相柱上進(jìn)行制備性HPLC而純化，洗脫劑水/乙腈系統(tǒng)，其中乙腈的百分比在30分鐘內(nèi)由35％變到50％。純化得到該產(chǎn)物，然后冷干。D步{1—〔2—(1H—四唑—5—基)乙基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Nal—NMeBzl，鉀鹽向冷卻的在水/乙腈混合物中含0.110mmol上步所得化合物的溶液中，加入0.111mmol 0.1N氫氧化鉀，得到上步所述產(chǎn)物的鉀鹽。然后將此鹽冷干。
元素分析C％H％ N％理論值64.395.2615.81實測值63.755.0015.26FAB質(zhì)譜〔M＋H〕+m/z＝709實施例6{1—〔3—(1H—四唑—5—基)丙基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Nal—NMeBzl，鉀鹽按照與實施例1相同的步驟，用如制備例B中所述從4—氯丁腈得到的5—(3—碘丙基)—1—三苯甲基—1H—四唑制得此化合物。元素分析C％ H％ N％理論值64.805.4415.50實測值64.785.2415.27FAB質(zhì)譜〔M＋H〕+m/z＝723實施例7{1—〔5—(1H—四唑—5—基)戊基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Nal—NMeBzl，鉀鹽按照與實施例5的化合物的相同步驟，從6—溴己腈開始制備了該產(chǎn)品。元素分析C％ H％ N％理論值65.585.7714.92實測值64.855.6114.38FAB質(zhì)譜〔M＋H〕+m/z＝751從按照制備例A中步驟得到的起始物，按照實施例1中描述的步驟制備了實施例8—11。實施例8{1—〔4—(1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Thi—NMeBzl，鉀鹽元素分析C％ H％ N％理論值59.025.2416.20實測值59.025.1215.68FAB質(zhì)譜〔M＋H〕+m/z＝655實施例9{1—〔4—1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—(4—氯)Phe—NMeBzl，鉀鹽FAB質(zhì)譜〔M＋H〕+m/z譜721實施例10{1—〔4—(1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp(3，4—二甲氧基)Phe—NMeBzl，鉀鹽FAB質(zhì)譜〔M＋H〕+m/z＝747實施例11{1—〔4—(1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Cha—NMeBzl，鉀鹽FAB質(zhì)譜〔M＋H〕+m/z＝693實施例12與人NK1和NK2受體的親和性與人NK1和NK2受體的親和性的研究是在如D.G.PAYAN等(J.Biol.Chem.1986，261，14321—14329)所述的、特異地表達(dá)NK1受體的人成淋巴細(xì)胞上和在基于“Cellphect transfection”試劑盒(pharmacia)的用NK2受體轉(zhuǎn)染的CHO—K1細(xì)胞上進(jìn)行的。
本發(fā)明化合物顯示對NK1受體特異的優(yōu)良親和性。結(jié)果示于下表中
實施例13對分離的平滑肌的試驗為了評價本發(fā)明化合物作為神經(jīng)激肽拮抗劑的功能活性，使用了三種從平滑肌分離的標(biāo)本兔腔靜脈(RVC)、無內(nèi)皮的兔肺動脈(RPA)和大鼠門靜脈(RatPV)，如D.JUKIC等(Life Sci.1991，49，1463—1469)所指出的那樣，它們的收縮反應(yīng)分別由NK1、NK2和NK3受體介導(dǎo)。
本發(fā)明化合物的拮抗能力用O.ARUNLAKSHANA和H.O.SCHILD(Brit.J.Pharmacol.1959，14，48—58)所定義的pA2形式表示。
本發(fā)明化合物顯示對NK1受體的強拮抗活性，而對NK2和NK3受體的拮抗活性低。實施例1、2和3的化合物所得結(jié)果示于下表中
實施例14抗傷害能力的研究—小鼠Eddy試驗因為傷害傳遞在脊柱水平有P物質(zhì)參與(M.OTSUKA和S.KONISHI，TINS，6，3l7—320，1983)。特別是熱致疼痛中(A.W.DUGGAN等，Brain Research，1987，403，345—349)，所以本發(fā)明化合物的體內(nèi)藥理活性的研究在小鼠中用N.B.EDDY等(J.Phar-macol.Exp，Ther，1953，107，385—393)最先描述的熱痛覺過敏試驗進(jìn)行。該試驗是測量對熱的反應(yīng)時間，這是由將小鼠(CDI雄性，Ch.River，25—30g)置于加熱至55℃的金屬板上至小鼠
后肢的時間決定的。
動物在被置于熱板上之前10分鐘，靜脈給予本發(fā)明化合物。
每組給藥動物(每批12只小鼠)得到的平均反應(yīng)時間與相應(yīng)的對照組的平均值比較。結(jié)果用ED50表示．它相當(dāng)于反應(yīng)時間增加50％時的劑量。
脊柱內(nèi)施用P物質(zhì)減小了動物的反應(yīng)時間，而靜脈注射本發(fā)明化合物增加了反應(yīng)時間。例如．實施例1的化合物的ED50為0.0l8mg/kg(置倍區(qū)間p＝0.05∶0.001—0.322)，嗎啉的ED50為0.30mg/kg(0.03—2.90)。與嗎啉相反，本發(fā)明化合物的活性不被納洛酮所拮抗。實施例15抑制豚鼠中P物質(zhì)誘導(dǎo)的血漿外滲的研究按照C.GARRET等描述的對大鼠的方法(Proc.Natl.Acad.Sci.，USA1991，88，10208—20212)，以豚鼠膀胱評價本發(fā)明化合物對靜脈注射P物質(zhì)引起的血漿外滲的作用。用丙酮萃取色素后，用分光光度計對與P物質(zhì)同時及處死前10分鐘靜脈注射的Evans藍(lán)的膀胱集累進(jìn)行定量。在給予物質(zhì)前5分鐘靜脈給藥后，這些化合物的抑制活性用與對照組相比的抑制百分?jǐn)?shù)(％)，表示(每組8只動物)。例如，實施例1的化合物劑量為0.1mg/kg時活性為56％。實施例16抑制豚鼠中P物質(zhì)誘導(dǎo)的支氣管收縮的研究用平均重量為300—400g的雄性Hartley豚鼠進(jìn)行研究。使用三乙碘化三(β—二乙氨乙氧基)苯箭毒化(0.2mg/kg，iv)的麻醉動物(碳酸乙酯1.5g/kg)，以每分鐘60次及標(biāo)準(zhǔn)體積10ml/kg通氣。動物用吡拉明(1mg/kgiv)、萘心安(1mg/kg，iv)預(yù)處理動物。
支氣管收縮的評價標(biāo)準(zhǔn)是以2nM/kgiv劑量靜脈注射P物質(zhì)所誘導(dǎo)的氣管注氣壓力(TIP)的增加，每只動物作為自身的對照。相對時間T0注射進(jìn)行試驗物質(zhì)的注射。
結(jié)果表示為P物質(zhì)誘導(dǎo)的支氣管收縮抑制百分比，按下式計算該比例(給藥前ΔTIP—給藥后ΔTIP)/給藥前ΔTIP(以百分?jǐn)?shù)表示)。結(jié)果列于下表中<
>實施例17體外肥大細(xì)胞脫粒研究用雄性Sprague—Dauley大鼠的腹膜肥大細(xì)胞進(jìn)行研究，大鼠平均重為350—400g，通過吸入CO2進(jìn)行安死術(shù)處死。用20ml緩沖液(NaCl 150mM，KCl 2.7mM，CaCl20.9mM，Na2HPO43mM，KH2PO43.5mM，葡萄糖5.6mM，牛血清白蛋白1mg/ml，pH6.8)進(jìn)行腹腔灌洗。將灌洗液在4℃下400g離心10分鐘，回收在一緩沖液中，密度為2×104肥大細(xì)胞/ml。試驗化合物以遞增濃度孵育20分鐘。將管置于冰中停止反應(yīng)，4℃，700g離心10分鐘。與鄰苯二甲醛縮合后，用熒光測定法檢測上清液和顆粒。如此測得的細(xì)胞釋放到上清液中的組胺用細(xì)胞的組胺總含量的百分比表示。在此試驗中，實施例1的化合物在濃度高達(dá)10-4M時不引起肥大細(xì)胞脫粒。實施例18片劑制備1000片含2mg劑量的片劑的配方實施例1的化合物2g羥丙基纖維素 2g小麥淀粉 10g乳糖 100g硬脂酸鎂 3g滑石 3g
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物，它們的對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體和差向異構(gòu)體以及它們與藥用酸或堿的加成鹽 其中R代表萘基、5，6，7，8—四氫萘基、1，2，3，4—四氫萘基、噻吩基、苯基(被一個或多個鹵原子或直鏈或支鏈(C1—C6)烷基、直鏈或支鏈(C1—C6)烷氧基、羥基或三鹵甲基任意取代)或(C3—C7)環(huán)烷基，n代表1≤n≤8的整數(shù)。
2.權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中n等于4。
3.權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中R代表萘基。
4.權(quán)利要求3的式(I)化合物，其中R代表2—萘基。
5.權(quán)利要求1的式(I)化合物，它為{1—〔4—(1H—四唑—5—基)丁基〕吲哚—3—基}羰基—Hyp—Nal—NMeBzl及其相應(yīng)的鉀鹽。
6.權(quán)利要求1的式(I)化合物的制備方法，其中式(II)的保護(hù)的羥基脯氨酸(任選已分離了其異構(gòu)體) 其中Fmoc代表9—芴基甲氧羰基，tBu代表叔丁基，在4—二甲氨基呲啶和N，N—二環(huán)己基碳化二亞胺存在下，用苯甲醇處理，得到式(III)化合物 其中Fmoc和tBu同上所定義，在吡啶介質(zhì)中將其胺官能團脫保護(hù)，得到(IV)化合物 其中tBu同上所定義，式(IV)化合物與吲哚—3—羧酸反應(yīng)，得到式(V)化合物 其中tBu同上所定義，通過催化氫化將其羧酸官能團脫保護(hù)，得到式(VI)化合物 其中tBu同上所定義，式(VI)化合物與式(VII)保護(hù)的氨基酸(任選已分離了其異構(gòu)體)反應(yīng) 其中R同式(I)中的定義，產(chǎn)生式(VIII)化合物 其中tBu和R同上所定義，式(VIII)化合物在硫酸氫化四丁基銨存在下與式(IX)的保護(hù)的四唑反應(yīng) 其中Trt代表三苯甲基，得到式(X)化合物 其中tBu、R和Trt同上所定義，其在三氟乙酸介質(zhì)中脫保護(hù)，得到式(I)化合物，—適當(dāng)時，它可按常規(guī)純化技術(shù)純化，—適當(dāng)時，其異構(gòu)體可按常規(guī)分離技術(shù)分離，—需要時，與藥用堿轉(zhuǎn)化成其加成鹽。
7.藥物組合物，它僅含有作為活性成分的至少一種權(quán)利要求1—5任一項要求的化合物，或與一種或多種藥用的無毒惰性賦形劑或載體結(jié)合。
8.權(quán)利要求7的藥物組合物，它含有權(quán)利要求1—5任一項所要求的至少一種活性成分，該組合物在疼痛、炎癥、胃腸或泌尿系統(tǒng)疾病、氣喘、變態(tài)反應(yīng)、偏頭痛和中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的治療中用作P物質(zhì)拮抗劑。
全文摘要
公開了式(I)化合物、它們的對映異構(gòu)體、非對映異物體和差向異構(gòu)體以及它們與藥用酸或堿的加成鹽，式中R代表萘基、5，6，7，8-四氫萘，1，2，3，4-四氫萘、噻吩、任意取代的苯基或(C
文檔編號A61P37/08GK1120548SQ9510505
公開日1996年4月17日 申請日期1995年4月27日 優(yōu)先權(quán)日1994年4月28日
發(fā)明者J·L·福奇爾, N·庫查茲科-吉特里, J·帕拉迪諾, J·伯尼特, E·卡內(nèi)特, G·比勒爾 申請人:阿迪爾公司