專利名稱：新的含有吡啶和環(huán)己烯基的吡咯并苯并二氮雜羧酰胺和其衍生物;保胎催產(chǎn)素受體拮抗劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的三環(huán)吡啶基羧酰胺，其用作有競爭力的催產(chǎn)素受體拮抗體，本發(fā)明還涉及它們的制備方法、利用這些化合物的治療方法和藥物組合物。
本發(fā)明的化合物是對哺乳動物的、特別是人有用的治療劑。更特別地，它們可用于預(yù)防和/或抑制早產(chǎn)、抑制剖腹產(chǎn)分娩之前的足月產(chǎn)、促進(jìn)對醫(yī)療設(shè)備的抗分娩輸送和治療痛經(jīng)。
這些化合物還用于為農(nóng)畜增強(qiáng)受精率、增強(qiáng)生存率和協(xié)調(diào)動情期；以及可用于預(yù)防和治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)中催產(chǎn)素系統(tǒng)功能異常，該功能異常包括強(qiáng)迫障礙(OCD)和神經(jīng)精神病學(xué)障礙。
背景技術(shù)：
提前分娩是出生時(shí)死亡和病態(tài)的主要原因。幼兒死亡率引人注目地隨胎齡的增加而降低。過早地出生的嬰兒的存活率從24周的20％增加到30周的94％。此外，與過早出生的嬰兒護(hù)理有關(guān)的成本極端地高。盡管在近40年來已經(jīng)開發(fā)出用于提前分娩治療的藥劑，未足月產(chǎn)和低出生重量嬰兒的發(fā)病率保持相對無變化。因此仍然需要用于提前分娩的安全和有效治療的開發(fā)。
當(dāng)前使用的保胎(子宮松弛)藥劑包括β2腎上腺素能受體拮抗劑，如利托君，它適度地有效抑制提前分娩，但與母親血壓過低、心動過速和新陳代謝的副作用有關(guān)。幾種其它藥劑已經(jīng)用于抑制提前分娩，包括其它β2腎上腺素能拮抗劑(間羥叔丁腎上腺素，舒喘寧)、硫酸鎂、NSAIDs(消炎痛)和鈣通道阻斷劑。一致的是這些藥劑沒有一種是非常有效的沒有臨床證據(jù)顯示這些化合物可延長妊娠超過7天(Johnson，Drugs，45，684-692(1993))。此外，它們的安全情況不理想。副作用包括呼吸抑制和心跳停止(硫酸鎂)、血液動力學(xué)效應(yīng)(鈣通道阻斷劑)、動脈導(dǎo)管的過早閉合和羊水過少(NSAIDs；前列腺素合酶抑制劑)。因此，仍然需要用于治療提前分娩的更安全和更有效藥劑，并且其具有更好的患者可容許性。關(guān)于安全的具體要求包括產(chǎn)品沒有心動過速或心動過速的速率很低、有限的焦慮、改善的胎兒安全性和幾乎沒有——如果有的話——有害的心血管效應(yīng)。
所關(guān)心的一個(gè)目標(biāo)是子宮中的催產(chǎn)素受體，已經(jīng)建議將選擇性催產(chǎn)素受體拮抗體作為理想的保胎藥劑。盡管還沒有清楚地確定催產(chǎn)素(OT)在分娩中的準(zhǔn)確作用，有證據(jù)強(qiáng)烈地說明它可在人分娩開始和進(jìn)行中起決定性的作用(Fuchs等人，Science 215，1396-1398(1982)；Maggi等人，J.Clin.Endocrinol.Metab.70，1142-1154(1990)；Akerlund，Reg.Pept.45，187-191(1993)；Akerlund，Int.Congr.Symp.Semin.Ser.Progress inEndocrinology，3，657-660(1993)；Akerlund等人，在Oxytocin，Ed.R.Ivell和J.Russel，Plenum Press，紐約，595-600頁(1995))。采用催產(chǎn)素受體拮抗體的初步臨床試驗(yàn)支持以下概念OT受體的阻斷減少了子宮的子宮肌層活性并延遲了分娩開始(Akerlund等人，Br.J.Obst.Gynaecol.94，1040-1044，(1987)；Andersen等人，Am.J.Perinatal.6，196-199(1989)；Melin，Reg.Pept.45，285-288(1993))。因此，期望選擇性催產(chǎn)素拮抗劑阻斷在足月時(shí)主要施加在子宮上的催產(chǎn)素的主要效果，并期望比現(xiàn)有療法更有效地治療提前分娩。依靠在子宮中對受體的直接作用，也期待催產(chǎn)素拮抗劑具有較少的副作用和改善的安全性。
以下現(xiàn)有技術(shù)參考文獻(xiàn)描述了肽催產(chǎn)素拮抗劑Hruby等，垂體神經(jīng)部肽的結(jié)構(gòu)-活性相互關(guān)系，肽分析，合成和生物學(xué)，Udenfriend和Meienhofer著，Academic Press，紐約，卷8，77-207(1987)；Pettibone等，內(nèi)分泌學(xué)，125，217(1989)；Manning等，加壓素和催產(chǎn)素的受體特異性激動劑和拮抗劑的合成和一些用途，J.Recept.Res.，13，195-214(1993)；Goodwin等，催產(chǎn)素拮抗劑阿托西班在治療早產(chǎn)中的劑量范圍研究，Obstet.Gynecol.，88，331-336(1996)。由于它們也顯示加壓素拮抗劑活性，因此肽催產(chǎn)素拮抗劑缺乏口腔活性，許多這些肽是非選擇性拮抗劑。Bock等[J.Med.Chem.33，2321(1990)]，Pettibone等.[J.Pharm.Exp.Ther.256，304(1991)]，和Williams等[J.Med.Chem.，35，3905(1992)]報(bào)導(dǎo)了有效的六肽催產(chǎn)素拮抗劑，它還在結(jié)合到V1和V2受體中顯示弱的加壓素拮抗活性。
各種非肽催產(chǎn)素拮抗劑和/或催產(chǎn)素/加壓素(AVP)拮抗劑近來由如下文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)Pettibone等，Endocrinology，125，217(1989)；Yamamura等，Science，252，572-574(1991)；Evans等，J.Med.Chem.，35，3919-3927(1992)；Pettibone等，J.Pharmacol.Exp.Ther，264，308-314(1992)；Ohnishi等，J.Clin.Pharmacol.33，230-238，(1993)；Evans等，J.Med.Chem.36，3993-4006(1993)；Pettibone等，Drug Dev.Res.30，129-142(1993)；Freidinger等，在肽模擬設(shè)計(jì)中的一般策略對催產(chǎn)素拮抗劑的應(yīng)用，PerspectMed.Chem.，179-193(1993)，Ed.B.Testa，Verlag，Basel，Switzerland；Serradeil-Legal，J.Clin.Invest，92，224-231(1993)；Williams等，J.Med.Chem.37，565-571(1994)；Williams等，Bioorg.Med.Chem.2，971-985(1994)；Yamamura等，Br.J.Pharmacol.，105，546-551(1995)；Pettibone等，實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)和生物學(xué)中的進(jìn)步395，601-612(1995)；Williams等，J.Med.Chem.38，46344636(1995)；Hobbs等，Biorg.Med.Chem.Lett.5，119(1995)；Williams等，Curr.Pharm.Des.2，41-58(1996)；Freidinger等，MedicinalResearch Reviews，17，1-16(1997)；Pettibone等，Biochem.Soc.Trans.25(3)，1051-1057(1997)；Bell等，J.Med.Chem.41，2146-2163(1998)；Kuo等，Bioorg.Med.Chem.Lett.8，3081-3086(1998)；Williams等，Biorg.Med.Chem.Lett.9，1311-1316(1999)。
某些喹諾酮衍生物和二環(huán)氮雜由Ogawa等人在WO94/01113(1994)中公開為催產(chǎn)素和加壓素拮抗劑；苯并噁嗪酮由Sparks等人在WO97/25992(1997)中公開為催產(chǎn)素和加壓素受體拮抗劑；Williams等人在WO96/22775(1996)中公開了哌啶催產(chǎn)素和加壓素受體拮抗劑；Bock等人在U.S.專利5,665,719(1997)中公開了用作催產(chǎn)素和加壓素受體拮抗劑的苯并噁嗪酮和苯并嘧啶酮；用作催產(chǎn)素和加壓素受體拮抗劑的哌嗪和螺哌啶由Evans等人在U.S.專利5,670,509(1997)和由Bock等人在U.S.專利5,756,504(1998)中公開；Bell等人在UK專利申請，GB2 326 639A(1998)中公開了哌嗪催產(chǎn)素受體拮抗劑；Bell等人在UK專利申請，GB2 326 410A(1998)中公開了苯并噁嗪酮和喹啉酮催產(chǎn)素受體拮抗劑；Bell等人在U.S.專利5,756,497(1998)中公開了苯并噁嗪酮催產(chǎn)素和加壓素受體拮抗劑；Matsuhisa等人在WO98/39325(1998)中公開了作為催產(chǎn)素拮抗劑的二氟四氫苯并氮雜衍生物；Ogawa等人在U.S.專利5,753,644(1998))中公開了具有加壓素和催產(chǎn)素拮抗劑活性的雜環(huán)雙酰胺；和Ogawa等人在WO97/22591(1997)and U.S.專利6,096,736(2000)中公開用作加壓素拮抗劑，加壓素激動劑和催產(chǎn)素拮抗劑的，具有抗加壓素活性，催產(chǎn)素拮抗活性和加壓素激動劑活性的苯并氮雜衍生物。
Trybulski等人在U.S.專利5,880,122(1999)中公開了具有加壓素拮抗劑活性的吡咯并苯并氮雜雙酰胺的3-羧酰胺衍生物；具有加壓素和催產(chǎn)素受體拮抗劑活性的雙環(huán)噻吩并氮雜由Albright等人在WO96/22294(1996)和U.S.專利5,654,297(1997)中公開；和具有加壓素和催產(chǎn)素受體拮抗劑活性的三環(huán)苯并氮雜由Albright等人U.S.專利5,849,735(1998)中公開。
Albright等人明確地在WO96/22282A1(1996)中公開了三環(huán)苯并氮雜拮抗劑，它在V1和/或V2受體具有拮抗活性和顯示體內(nèi)加壓素拮抗活性，以及在催產(chǎn)素受體的拮抗活性。
Venkatesan等人明白地在U.S.專利5,521,173(1996)、WO96/22292(1996)中，和在U.S.專利5,780,471(1998)中公開了具有加壓素和催產(chǎn)素拮抗活性的三環(huán)苯并氮雜，它在V1和/或V2受體具有拮抗活性和顯示體內(nèi)加壓素拮抗活性，以及在催產(chǎn)素受體的拮抗活性。
通過采用高親合力和選擇性結(jié)合到催產(chǎn)素受體上，因此防止催產(chǎn)素結(jié)合到它的受體上和在體內(nèi)發(fā)揮它的生物和藥物效應(yīng)，而用作有效催產(chǎn)素拮抗劑的化合物，可用于提前分娩的治療和/或預(yù)防和/或抑制，用于在剖腹分娩之前足孕分娩的抑制，和以促進(jìn)對醫(yī)療設(shè)備的抗生輸送。它們也可在給定的哺乳動物中產(chǎn)生避孕在于催產(chǎn)素拮抗劑已經(jīng)顯示為抑制催產(chǎn)素刺激成為黃體部分激素(LH)從垂體細(xì)胞的釋放(Rettori等人，Proc.Nat.Acad.Sci.U.S.A.94，2741-2744(1997)；Evans等人，J.Endocrinol.，122，107-116(1989)；Robinson等人，J.Endocrinol.125，425-432(1990))。
催產(chǎn)素拮抗劑進(jìn)一步具有緩和由催產(chǎn)素在哺乳動物中誘導(dǎo)的子宮收縮的能力和因此也可用于痛經(jīng)，以月經(jīng)期間疼痛為特征的狀態(tài)的治療。(Akerlund，Int.Congr.Symp.Semin.Ser.，內(nèi)分泌學(xué)的進(jìn)展3，657-660(1993)；Akerlund，Reg.Pept.45，187-191(1993)；Melin，Reg.Pept45，285-288(1993))。原發(fā)性痛經(jīng)與排卵周期數(shù)有關(guān)，和它是婦科病人最通常的抱怨。認(rèn)為子宮肌層的高收縮性和對子宮的降低血流是原發(fā)性痛經(jīng)癥狀的病因因素(Akerlund，Acta Obstet.Gynecol.Scand.66，459-461(1987)。特別地，認(rèn)為由加壓素和催產(chǎn)素的小子宮動脈的血管收縮產(chǎn)生組織缺血和疼痛(Jovanovic等人，Br.J.Pharmacol 12，1468-1474(91997)；Chen等人，Eur.J.Pharmacol.376，25-51(1999))。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在受精后催產(chǎn)素受體拮抗劑對農(nóng)畜的給藥通過阻斷導(dǎo)致胚胎死亡的催產(chǎn)素誘導(dǎo)的溶黃體而增強(qiáng)受精率(Hickey等人，WO96/09824 A1(1996)；Sparks等人，WO97/25992 A1(1997)；Sparks等人，U.S.專利5,726,172 A(1998))。因此，催產(chǎn)素受體拮抗劑可用于家畜管理以控制分娩的定時(shí)和初生仔畜的分娩，導(dǎo)致增強(qiáng)的存活率。它們也可通過防止催產(chǎn)素誘導(dǎo)的黃體退化和通過延遲動情期而用于發(fā)情同步化(Okano，J.Reprod.Dev.42(Suppl.)，67-70(1996))。此外，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)催產(chǎn)素受體拮抗劑在乳牛中抑制催產(chǎn)素誘導(dǎo)的排乳方面具有有力的效果(Wellnitz等人，Journal of Dairy Research 66，1-8(1999))。
催產(chǎn)素也在腦中合成和在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中釋放。近代研究已經(jīng)在認(rèn)知，認(rèn)同，性和生殖行為中，和在動物中調(diào)節(jié)飼養(yǎng)，舐毛和對應(yīng)力的響應(yīng)中建立起中樞催產(chǎn)素的重要性。催產(chǎn)素也可人的正常行為。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中結(jié)合到它的受體上的催產(chǎn)素的調(diào)諧劑可用于催產(chǎn)素系統(tǒng)功能異常的預(yù)防和治療，該功能異常包括強(qiáng)迫性障礙(OCD)和其它神經(jīng)精神病學(xué)障礙。(Kovacs等人，Psychoneuroendocrinology 23，945-962(1998)；McCarthy等人，U.K.Mol.Med.Today 3，269-275(1997)；Bohus，Peptidergic Neuron，[Int.Symp.Neurosecretion]，12th(1996)，267-277，Publ.Birkhauser，Basel，Switz.；Leckman等人，Psychoneuroendocrinology19，723-749(1994))。
用于競爭性抑制加壓素結(jié)合到它的受體上的化合物用于涉及哺乳動物中加壓素紊亂的疾病狀態(tài)的治療預(yù)防，該疾病包括血管舒張和aquaresis(無水利尿)，治療高血壓和抑制血小板凝聚。它們也用于充血性心力衰竭，硬化與腹水的治療，和用于抗利尿激素不相稱分泌的綜合癥(SIADH)。此外，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)加壓素受體拮抗劑用于治療內(nèi)耳的干擾和疾病，特別是涉及梅尼埃爾氏疾病的那些(Zenner等人，WO99/24051-A2(1999))；和用于眼睛循環(huán)障礙，特別是眼內(nèi)高血壓或青光眼和視覺障礙如近視的預(yù)防和治療(Ogawa等人，WO99/38533-A1(1999))；Ohtake等人，WO99/65525(1999))。
發(fā)明概述本發(fā)明包括選自那些式(I)的化合物
其中 是 或 R1和R2獨(dú)立地選自氫、(C1-C6)烷基、鹵素、氰基、三氟甲基、羥基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、-OCF3、(C1-C6烷氧基)羰基、-NHCO[(C1-C6)烷基]、羧基、-CONH2、-CONH(C1-C6)烷基或-CON[(C1-C6)烷基]2；R3是取代基，選自氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羥基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、-CO(C1-C6)烷基或鹵素；R4由部分B-C組成；其中B選自基團(tuán) 或 C定義為
或 其中A是CH或N；R5、R6、R7和R8獨(dú)立地選自氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)-烷氧基、羥基(C1-C6)烷基、低級烷氧基(C1-C6)烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、(C1-C6烷基)羰基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)鏈炔基、(C3-C8)環(huán)烷基、甲酰基、(C3-C8)環(huán)烷基羰基、羧基、低級烷氧基羰基、(C3-C8)環(huán)烷基氧羰基、(芳基低級烷基)氧羰基、氨基甲酰基、-O-CH2-CH＝CH2、鹵素、包括三氟甲基的鹵代低級烷基、-OCF3、-S(低級烷基)、-OC(O)N[低級烷基]2、-CONH(低級烷基)、-CON[低級烷基]2、低級烷基氨基、二低級烷基氨基、低級烷基二低級烷基氨基、羥基、氰基、三氟甲基硫基、硝基、氨基、低級烷基磺酰基、氨基磺酰基、低級烷基氨基磺?；?、 苯基或萘基；R9選自氫、低級烷基、羥基(C1-C6)烷基、低級烷氧基(C1-C6)烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、低級烷氧基羰基、-CON[(C1-C6)烷基]2、氰基；或任選被鹵素或低級烷氧基取代的芳基；R10表示一至兩個(gè)獨(dú)立選擇的取代基，其選自氫、低級烷基、羥基(C1-C6)烷基、低級烷氧基(C1-C6)烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、低級烷基羰基、 疊氮基、氨基、-NH[低級烷基]、-N[低級烷基]2、氨基羰基低級烷基、苯二酰亞氨基、氰基、鹵素、硫代低級烷基、芳氧基、芳基硫、任選被一個(gè)至三個(gè)選自(C1-C6)烷基、低級烷氧基或鹵素的取代基取代的芳基；羥基、低級烷氧基、-OSO2R17或OP’，其中P’是叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基、羰基低級烷基、羰基三氟代低級烷基、芳基低級烷基、芳基羰基、甲氧基甲基或甲硫基甲基；前提條件是當(dāng)R10表示兩個(gè)取代基時(shí)，所述兩個(gè)取代基可以和它們所連接的環(huán)己烯環(huán)一起形成一個(gè)C7-C12雙環(huán)體系，該體系非限制性地包括雙環(huán)[3.2.1]辛-2-烯或(6，6-二甲基)雙環(huán)[3.1.1]庚-2-烯；R11選自氫或(C1-C6)烷基；和R選自任何下列基團(tuán) 其中R12選自氫、(C1-C6)烷基、氰乙基或 R13和R14獨(dú)立地選自氫或(C1-C6)烷基；R15是一個(gè)或兩個(gè)取代基，其獨(dú)立地選自氫、(C1-C6)烷基、鹵素、三氟甲基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6烷氧基)羰基或 R16表示一至兩個(gè)取代基，獨(dú)立地選自氫或(C1-C6)烷基；R17選自氫、(C1-C6)烷基、三氟低級烷基或任選被低級烷基取代的芳基；m是0至2的整數(shù)；n是1至2的整數(shù)；和
p是0至1的整數(shù)；和其可藥用鹽或其前藥形式。
本發(fā)明更優(yōu)選的化合物是下式化合物 其中 是 或 R1和R2獨(dú)立地選自氫、(C1-C6)烷基、鹵素、氰基、三氟甲基、羥基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、-OCF3、(C1-C6烷氧基)羰基、-NHCO[(C1-C6)烷基]、羧基、-CONH2、-CONH(C1-C6)烷基或-CON[(C1-C6)烷基]2；R3是取代基，選自氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羥基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、-CO(C1-C6)烷基或鹵素；R4由部分B-C組成；其中B選自基團(tuán) 或
和C定義為 或 其中A是CH或N；R5、R6、R7和R8獨(dú)立選自H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羥基(C1-C6)烷基、低級烷氧基(C1-C6)烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、(C1-C6烷基)羰基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)鏈炔基、(C3-C8)環(huán)烷基、甲?；?C3-C8)環(huán)烷基羰基、羧基、(低級烷氧基)羰基、(C3-C8環(huán)烷基)氧基羰基、氨基甲?；?、-O-CH2-CH＝CH2、鹵素、鹵代低級烷基、三氟甲基、-OCF3、-S(低級烷基)、-OC(O)N[低級烷基]2、-CONH(低級烷基)、-CON[低級烷基]2、低級烷基氨基、二低級烷基氨基、低級烷基二低級烷基氨基、羥基、氰基、三氟甲基硫基、硝基、氨基、低級烷基磺?；被酋；虻图壨榛被酋；籖9選自H、低級烷基、羥基(C1-C6)烷基、低級烷氧基(C1-C6)-烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、低級烷氧基羰基、-CON[(C1-C6)烷基]2或氰基；R10表示一至兩個(gè)獨(dú)立選擇的取代基，其選自氫、低級烷基、羥基(C1-C6)烷基、低級烷氧基(C1-C6)烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、低級烷基羰基、疊氮基、氨基、-NH[低級烷基]、-N[低級烷基]2、氨基羰基低級烷基、苯二酰亞氨基、氰基、鹵素、硫代低級烷基、芳氧基、芳基硫、羥基、低級烷氧基、-OSO2R17，或OP’，其中P’是叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基、羰基低級烷基、羰基三氟代低級烷基、甲氧基甲基或甲硫基甲基；R11選自氫或(C1-C6)烷基；和R選自任何下列基團(tuán)
或 其中R12選自氫或(C1-C6)烷基；R13和R14獨(dú)立選自氫或(C1-C6)烷基；R15是一個(gè)或兩個(gè)取代基，其獨(dú)立地選自氫、(C1-C6)烷基、鹵素、三氟甲基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6烷氧基)羰基；R16和R16’獨(dú)立地選自氫或(C1-C6)烷基；m是0至2的整數(shù)；和p是0至1的整數(shù)；或其可藥用鹽或其前藥形式。
作為一個(gè)基團(tuán)或例如烷氧基或芳烷基的一個(gè)基團(tuán)的一部分，烷基的實(shí)例是1至6個(gè)碳的碳鏈的或1-4個(gè)碳原子的碳鏈，諸如甲基、乙基、丙基和丁基。
這里使用的與諸如烷氧基、鏈炔基、鏈烯基等碳鏈有關(guān)的術(shù)語″低級″理解為提到的那些基團(tuán)具有最多達(dá)6個(gè)碳原子，例如1-6、2-6。鹵素指的是氟、氯、溴或碘。環(huán)烷基，不論獨(dú)立地使用還是作為一個(gè)結(jié)合部分的一部分，指的是3至8個(gè)碳原子、優(yōu)選3至6個(gè)碳原子的環(huán)烷基基團(tuán)。
術(shù)語芳基作為一個(gè)基團(tuán)或一個(gè)基團(tuán)(例如芳基烷基、芳烷基、芳氧基)的一部分包括6至10個(gè)碳原子的碳環(huán)芳族基，例如苯基或萘基。術(shù)語?；?-7碳原子的基團(tuán)，例如(C1-C6烷基)羰基。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，根據(jù)R1、R2、R3、R4和R的定義，本發(fā)明的一些化合物可能含有一個(gè)或多個(gè)不對稱中心，因此可能產(chǎn)生對映異構(gòu)體和非對映體。本發(fā)明包括所有具有指明的活性的立體異構(gòu)體，包括單一的非對映體和解析的對映異構(gòu)純的R和S立體異構(gòu)體；以及外消旋物，以及所有其它R和S立體異構(gòu)體的混合物和其可藥用鹽。通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)方法可得到純凈形式的旋光異構(gòu)體。還應(yīng)理解，本發(fā)明包括所有可能的具有指明活性的位置異構(gòu)體、E/Z異構(gòu)體、內(nèi)型-、外型異構(gòu)體和其混合物。通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)分離方法可得到純凈形式的這類異構(gòu)體。本領(lǐng)域技術(shù)人員還應(yīng)理解到，取決于R5、R6、R7、R9和R10的定義，本發(fā)明的一些化合物可能由于位阻旋轉(zhuǎn)而呈手性，并由此得到阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體，其可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)方法解析并得到純凈的形式。本發(fā)明還包括所有本發(fā)明化合物的多晶型物和水合物。
發(fā)明詳述本發(fā)明包括上述化合物以及藥物組合物，所述的藥物組合物含有一種或多種制藥或治療有效量的本發(fā)明化合物，所述化合物與一種或多種可藥用載體或賦形劑組合或結(jié)合。本發(fā)明尤其提供一種藥物組合物，其包括治療或制藥有效量的一種或多種本發(fā)明化合物和一種可藥用載體或賦形劑。
本發(fā)明還包括用于治療、抑制或預(yù)防哺乳動物、優(yōu)選人的病癥的方法，該病癥通過催產(chǎn)素拮抗劑活性醫(yī)治或減輕，其非限制性包括每當(dāng)哺乳動物、優(yōu)選人需要的時(shí)候治療或預(yù)防早產(chǎn)、痛經(jīng)和抑制剖腹產(chǎn)分娩前的分娩。所述方法包括給予需要的哺乳動物制藥或治療有效量的一種或多種本發(fā)明化合物。
本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物與一種或多種用于治療諸如早產(chǎn)、痛經(jīng)病癥和在剖腹產(chǎn)分娩前抑制分娩的藥劑組合。更具體地說，本發(fā)明的化合物可以與有效量的其它的保胎藥劑結(jié)合有效地給藥，這些保胎藥劑用于治療或預(yù)防早產(chǎn)、痛經(jīng)或抑制在剖腹產(chǎn)分娩之前的分娩，包括β-腎上腺素拮抗劑、鈣通道阻斷劑、前列腺素合成抑制劑、其它的催產(chǎn)素拮抗劑(例如阿托西班)、硫酸鎂、乙醇和其它用于治療所述病癥的藥劑。應(yīng)認(rèn)為本發(fā)明包括本發(fā)明化合物與其它的保胎藥劑的任何組合同可用于治療哺乳動物早產(chǎn)、痛經(jīng)和抑制剖腹產(chǎn)分娩前分娩的任何藥物組合物的所有同時(shí)或交替的治療。
所述組合物優(yōu)選適合用于靜脈內(nèi)給藥和口服(丸劑和輸液)。但是，它們對于需要保胎藥劑的人或農(nóng)畜可以是適合其它給藥形式的，包括皮下、腹膜內(nèi)或肌肉給藥。
本發(fā)明的化合物可以衍生自藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽的形式使用。這些鹽非限制性地包括下列與無機(jī)酸形成的鹽，無機(jī)酸是諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸；以及，視情況而定，與有機(jī)酸形成的鹽，有機(jī)酸是諸如乙酸、草酸、檸檬酸、酒石酸、琥珀酸、馬來酸、苯甲酸、苯磺酸、富馬酸、蘋果酸、甲烷磺酸、雙羥萘酸酸和對甲苯磺酸。其它的鹽包括與堿金屬或堿土金屬形成的鹽，如鈉、鉀、鈣或鎂；或與有機(jī)堿形成的鹽，包括季銨鹽。所述化合物還可以以酯、氨基甲酸酯和其它常規(guī)的前藥的形式使用，一般說來，其應(yīng)當(dāng)是本發(fā)明化合物的官能衍生物，在體內(nèi)可容易地轉(zhuǎn)化為所述的活性片段。這意味著包括用本發(fā)明的化合物或用沒有具體地說明但是在給藥后在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成轉(zhuǎn)變成本發(fā)明化合物的化合物治療在上文描述的各種病癥。還包括本發(fā)明化合物的代謝產(chǎn)物，其定義為將本發(fā)明化合物引入生物系統(tǒng)中產(chǎn)生的活性化合物。
當(dāng)本發(fā)明化合物用于上述用途時(shí)，它們可以與一種或多種藥物可以接受的賦形劑或載體結(jié)合，例如溶劑、稀釋劑等，并且可以片劑、膠囊(包括定時(shí)釋放和持續(xù)釋放劑型)、藥丸、可分散性粉劑、顆?；蚝欣鐝?.05至5％的助懸劑的懸浮液、含有例如約10至50％的糖的糖漿和酏劑等的形式口服給藥，或不經(jīng)腸道以在等滲介質(zhì)中的無菌可注射溶液、含有約0.05至5％助懸劑的懸浮液或乳狀液的形式給藥。這種藥物制劑可能含有例如約25至約90％、更通常在約5％和60％wt之間的所述活性成分與載體結(jié)合。
使用的活性成分的有效劑量可根據(jù)所用的特定化合物或鹽、給藥形式、患者年齡、體重、性別和醫(yī)療條件以及所治療病癥的嚴(yán)重程度而變化。普通的熟練內(nèi)科醫(yī)師、獸醫(yī)或臨床醫(yī)師可以容易地測定和指示預(yù)防、對抗或抑制病癥發(fā)展所需藥劑的有效量。但是，一般地，當(dāng)本發(fā)明化合物以約0.5至約500mg/公斤的哺乳動物體重的日劑量給藥時(shí)可得到令人滿意的結(jié)果，給藥優(yōu)選分成每天二至四次，或以持續(xù)釋放的形式給藥。對于大多數(shù)的哺乳動物，總的日常劑量為約0.5至100mg/公斤，優(yōu)選0.5至80mg/公斤。適合體內(nèi)使用的劑型包括約0.05-500mg的所述活性化合物，其與固體或液體藥學(xué)可以接受載體的充分混合?？梢哉{(diào)節(jié)這種給藥方案得到最佳的治療應(yīng)答。例如，若干分開劑量可以每日給藥，或所述劑量可以根據(jù)治療情況緊迫性的要求按比例降低。
這些活性化合物可以是口服給藥以及通過靜脈、肌肉或皮下途徑給藥。固體載體包括淀粉、乳糖、磷酸二鈣、微晶纖維素、蔗糖和高嶺土，液體載體包括無菌水、聚乙二醇、甘油、非離子型表面活性劑和食用油——如玉米、花生和芝麻油，它們與活性成分的性質(zhì)和期望的特定給藥形式相適應(yīng)。通常用于制備藥物組合物的助劑可有利地包括諸如增香劑、著色劑、防腐劑和抗氧化劑——如維生素E、抗壞血酸、BHT和BHA。
這些活性化合物還可不經(jīng)腸道給藥或腹膜內(nèi)給藥。這些活性化合物作為游離堿或可藥用鹽的溶液或懸浮液可以在水中適當(dāng)?shù)嘏c諸如羥丙基纖維素的表面活性劑混合制備。分散液還可以在甘油、液體聚乙二醇和其在油中的混合物中制備。在普通儲存和使用條件下，這些制劑含有防腐劑以阻止微生物的生長。
適合可注射使用的藥物形式包括無菌水溶液，或用于臨時(shí)制備無菌可注射溶液或分散液的分散液和無菌粉末。在任何場合，所述形式必須是無菌的并且必須是容易注射的液體。其必須在制備和儲存條件下穩(wěn)定并且必須防止諸如細(xì)菌和真菌的微生物的污染作用。載體可以是溶劑或分散介質(zhì)，含有例如水、乙醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇)、其合適的混合物和植物油。
此外，本發(fā)明的活性化合物可以使用適于鼻內(nèi)給藥的賦形劑鼻內(nèi)給藥，或使用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的透皮貼片透皮給藥。當(dāng)使用透皮給藥體系時(shí)，給藥劑量應(yīng)當(dāng)是連續(xù)的而不是單次劑量或每日分次劑量給藥。本發(fā)明的化合物還可以脂質(zhì)體釋放體系給藥，其中脂質(zhì)體雙層脂質(zhì)由各種磷脂形成。
本發(fā)明的化合物還可通過諸如活性化合物偶合的單克隆抗體載體供給。本發(fā)明的化合物此外可連接到作為藥物載體的可溶性聚合物上或連接到用于實(shí)現(xiàn)活性劑控制釋放的可生物降解的聚合物上。
此外，根據(jù)本發(fā)明，提供了用于制備本發(fā)明化合物的方法。
本發(fā)明的方法本發(fā)明的化合物可根據(jù)下文概括的一般方法中的一種制備。
通式(I)的化合物，其中 R、R3和R4定義如前，可如流程圖I所示方便地制備。
流程圖I 根據(jù)上述優(yōu)選的方法，式(1)的三環(huán)二氮雜，其中 R3和R4定義如上文，與全鹵代烷酰鹵，優(yōu)選三氯乙酰氯，在諸如N，N-二異丙基乙基胺(Hunig堿)的有機(jī)堿存在下、在諸如二氯甲烷的非質(zhì)子有機(jī)溶劑中、在-10℃至室溫的溫度范圍反應(yīng)，得到所需的式(2)三氯乙酰基中間體。隨后用堿水溶液，諸如氫氧化鈉，在諸如四氫呋喃或丙酮的有機(jī)溶劑中、在-10℃至室溫的溫度范圍水解(2)，生成式(3)的中間體酸?？捎萌舾煞椒ɑ罨人?3)用于隨后與式(5)的伯或仲胺結(jié)合。因此，(3)可以轉(zhuǎn)化為酰鹵，優(yōu)選式(4，J＝COCl或COBr)的氯化物或溴化物，以純反應(yīng)物的形式或在諸如碳酸鉀的無機(jī)堿存在下，或在諸如吡啶、4-(二甲基氨基)吡啶或叔胺，諸如三乙胺的有機(jī)堿存在下，在一種非質(zhì)子溶劑諸如二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或四氫呋喃中，在-5℃至50℃的溫度范圍，通過與亞硫酰氯(亞硫酰溴)或草酰氯(草酰溴)或本領(lǐng)域已知的類似反應(yīng)物反應(yīng)，得到中間體?；苌?4)。隨后酰氯(酰溴)(4，J＝COCl或COBr)與式(5)的適當(dāng)取代的伯或仲胺在化學(xué)計(jì)量量的Hunig堿存在下、在諸如二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或四氫呋喃的非質(zhì)子溶劑中、在室溫至溶劑回流溫度的溫度范圍偶合，得到期望的式(I)化合物，其中 R、R3和R4定義如上。
或者，根據(jù)Inanaga等人，Bull.Chem.Soc.Jpn.52，1989(1979)，酰化物可以是相應(yīng)羧酸的混合酸酐，諸如通過用2，4，6-三氯苯甲酰氯在諸如二氯甲烷的非質(zhì)子有機(jī)溶劑中處理所述式(3)的酸制備的那些。用式(5)適當(dāng)取代的伯或仲胺在諸如二氯甲烷的非質(zhì)子溶劑中、在室溫至溶劑回流溫度的溫度范圍處理式(4)所述混合酸酐，得到期望的式(I)化合物，其中 R、R3和R4定義如上。
或者，式(3)羧酸的酰胺化可通過用三光氣在諸如二氯甲烷的非質(zhì)子溶劑中處理所述的酸、然后使活化的中間體與式(5)適當(dāng)取代的伯或仲胺在諸如Hunig堿的有機(jī)堿存在下、在-10℃到室溫的溫度范圍反應(yīng)有效地進(jìn)行。
用于制備其中 R、R3和R4定義如上文的本發(fā)明式(I)化合物的另一個(gè)優(yōu)選方法包括用諸如N，N-二環(huán)己基碳二亞胺或1-乙基-3-(3-二甲基氨基-丙基)碳二亞胺鹽酸鹽的活化試劑在1-羥基苯并三唑存在下處理式(3)的酸、隨后使活化的中間體與式(5)適當(dāng)取代的伯或仲胺優(yōu)選在諸如Hunig堿的有機(jī)堿和催化量的4-(二甲基氨基)吡啶存在下、在諸如二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或四氫呋喃的非質(zhì)子溶劑中、在-10℃至室溫的溫度范圍反應(yīng)。
在另一個(gè)優(yōu)選方法中，所述酸(3)的活化可以通過用諸如N，N’-羰二咪唑的其它活性劑在諸如二氯甲烷或四氫呋喃的非質(zhì)子溶劑中、在-10℃至溶劑回流溫度的溫度范圍處理。隨后使中間體活化的咪唑化物與式(5)適當(dāng)取代的伯或仲胺反應(yīng)得到期望的式(I)化合物，其中 R、R3和R4定義如上。
或者，式(5)適當(dāng)取代的伯或仲胺與式(3)所述酸的偶合可通過用羥基苯并三唑四甲基脲鎓六氟磷酸鹽作為偶合劑，在諸如Hunig堿的有機(jī)堿存在下，在諸如N，N-二甲基甲酰胺的溶劑中，在-10℃至室溫的溫度范圍有效地進(jìn)行，以好的分離產(chǎn)率和純度得到期望的式(I)化合物，其中 R、R3和R4定義如上。
相關(guān)偶合劑，諸如二苯基磷酰基疊氮化物、氰基膦酸二乙酯、苯并三唑-1-基-氧代-三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸鹽和文獻(xiàn)中已知用于在肽合成中形成酰胺鍵的所有其它試劑也可用于制備式(I)的化合物，其中 R、R3和R4定義如上。
作為替代方案，式(2)的中間體3-三鹵代甲酮直接與式(5)的適當(dāng)取代的伯或仲胺反應(yīng)，同樣得到了期望的式(I)化合物，其中 R、R3和R4定義如上。用于從中間體羧酸(3)制備式(I)化合物的方法的選擇最終根據(jù)其與R、R3和R4基團(tuán)的相容性及其與式(1)三環(huán)苯并二氮雜的反應(yīng)性。
用于制備流程圖I的(I)的另一個(gè)優(yōu)選方法如流程圖II所示。式(1)的三環(huán)二氮雜與雙光氣在諸如二氯甲烷的非質(zhì)子溶劑中，優(yōu)選在諸如三乙胺的有機(jī)堿存在下反應(yīng)，然后將得到的?；说闹虚g體與式(5)適當(dāng)取代的伯或仲胺反應(yīng)，得到期望的式(I)化合物，其中 R、R3和R4定義如上。
流程圖II 流程圖(I)的式(1)三環(huán)二氮雜，其中R4定義如上，可以方便地如流程圖III所示制備。
流程圖III 因此，式(6)的三環(huán)二氮雜用適當(dāng)取代的?；瘎┨幚恚龅孽；瘎┦侵T如芳酰鹵，優(yōu)選適當(dāng)取代的式(7，J＝COCl或COBr)酰氯或酰溴，其中R4根據(jù)其與所述反應(yīng)流程的相容性進(jìn)行最終選擇，反應(yīng)在諸如碳酸鉀的無機(jī)堿存在下或在諸如吡啶、4-(二甲基氨基)吡啶或叔胺，諸如三乙胺或N，N-二異丙基乙基胺的有機(jī)堿存在下，在諸如二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或四氫呋喃的非質(zhì)子溶劑中、在-5℃至50℃的溫度范圍進(jìn)行，到得到通式(1)中間體，其中R4定義如上。
或者，式(7)酰化物可以是相應(yīng)羧酸的混合酸酐，諸如通過用2，4，6-三氯苯甲酰氯在諸如二氯甲烷的非質(zhì)子有機(jī)溶劑中根據(jù)Inanaga等人，Bull.Chem.Soc.Jpn.，52，1989(1979)的方法處理所述酸制備的那些。用式(6)三環(huán)二氮雜在諸如二氯甲烷的溶劑中，在諸如4-(二甲基氨基)吡啶的有機(jī)堿存在下，在0℃至溶劑回流溫度的溫度范圍處理通式(7)所述的混合酸酐，得到流程圖III的中間體酰化衍生物(1)。
式(7)的?；虚g體最終的選擇是根據(jù)其與R4基團(tuán)的相容性、與式(6)三環(huán)二氮雜的反應(yīng)性。
通過流程圖IV所示的方法可方便地制備期望的流程圖III的式(7)中間體，其中R4由部分B-C組成，其中B是(a)和C是(c)。因此，式(8)的適當(dāng)取代的芳基(雜芳基)碘化物(溴化物、氯化物或三氟甲烷磺酸酯)，其中P是羧酸保護(hù)基，優(yōu)選P＝烷基或芐基，M＝I、Br、Cl或OTf，A、R5、R6和R7定義如上，與式(9，W＝Sn(三烷基)3，優(yōu)選錫(n-Bu)3)三(烷基)錫(IV)衍生物在Pd(0)催化劑存在下、有或沒有無機(jī)鹽(例如LiCl)存在、在諸如二噁烷或N-甲基吡咯烷酮的非質(zhì)子溶劑中反應(yīng)，其中R9、R10的最終選擇是根據(jù)它們與本反應(yīng)流程的相容性，得到所述中間體酯(10)。隨后，通過水解、氫解或本領(lǐng)域已知的類似方法脫去羧基官能的保護(hù)，隨后活化中間體酸(11)，得到所期望的式(19)化合物，其中A、R5、R6、R7、R8、R9和R10定義如上，其適合與所述式(6)三環(huán)二氮雜偶合。
流程圖IV 流程圖III所期望的式(7)中間體，其中R4由部分B-C組成，其中B是(a)和C是(d)，或B是(b)和C是(c)或者(d)，可以通過用適當(dāng)取代的萘基、二氫萘基或二氫喹啉中間體替代式(8和9)中間體，以類似于流程圖IV舉例說明的方法制備。
或者，流程圖IV所述期望的式(10)中間體，其中R4由部分B-C組成，其中B是(a)和C是(c)，可以通過Suzuki偶合從碘化物(溴化物、氯化物或三氟甲烷磺酸酯)(8，M＝I、Br、Cl或OTf)和式(9，優(yōu)選W＝B(OH)2)的適當(dāng)取代的硼衍生物在諸如鈀(II)乙酸鹽或四(三苯基膦)鈀(0)的鈀催化劑和諸如三乙胺的有機(jī)堿或碳酸鈉(鉀或銫)的無機(jī)堿存在下，加入或不加入諸如鈉(鉀或銫)碳酸鹽，加入或不加入四丁銨溴化物(碘化物)，在諸如甲苯-乙醇-水、丙酮-水、水或水-乙腈的溶劑混合物中，在室溫至溶劑回流溫度的溫度范圍制備(Suzuki，Pure &Appl.Chem.66，213222(1994)，Badone等人，J.Org.Chem.62，7170-7173(1997)；Wolfe等人J.Am.Chem.Soc.121，9559(1999)；Shen，Tetr.Letters 38，5575(1997))。對于鹵化物和硼酸中間體的Suzuki偶合，根據(jù)作用物和取代基的性質(zhì)選擇確切的條件。流程圖IV的所期望式(10)中間體可類似地從溴化物(8，M＝溴)和硼酸(9)在諸如二噁烷、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亞砜的溶劑中，在磷酸鉀和Pd(0)催化劑存在下制備。
或者，式(9，W＝Br、I、OTf)的碘化物(溴化物或三氟甲烷磺酸酯)與式(8， B(OH)2，或SnBu3)的雙(頻那醇合)二硼[硼酸、或三烷基錫(IV)]衍生物交叉偶合反應(yīng)，生成所期望的式(10)中間體，其用流程圖IV的方法轉(zhuǎn)化為(I)。
流程圖III所期望的式(10)中間體，其中R4由部分B-C組成，其B是(a)和C是(d)，或B是(b)和C是(c)或者(d)，可以通過用適當(dāng)取代的萘基、二氫萘基或二氫喹啉中間體替代式(8和9)中間體，以類似的方法制備。
流程圖IV所需的式(8，M＝Br或I)的適當(dāng)取代的芳基(雜芳基)鹵化物可以從市場購買，或在本領(lǐng)域中已知，或可容易地通過重氮化相應(yīng)的取代苯胺(8，P＝H、烷基或芐基，M＝NH2)，然后基本上根據(jù)Street等人，J.Med.Chem.36，1529(1993)和Coffen等人，J.Org.Chem.49，296(1984)的方法在含水酸性介質(zhì)中使中間體重氮鹽分別與碘和碘化鉀反應(yīng)或與溴化銅(I)反應(yīng)(March，Advanced Organic Chemistry，3rd Edn.，p.647-648，John Wiley & Sons，New York(1985))，定量地高純度地得到。
或者，流程圖IV所期望的式(11，A＝CH)中間體，其中R4由部分B-C組成，其中B是(a)、A＝CH和C是(c)，可以方便地如流程圖V所示制備，即，式(13)適當(dāng)取代的頻那醇合硼烷——其中R9、R10根據(jù)它們與本反應(yīng)流程的相容性最終選擇——與式(14、Y＝OTf)的芳基三氟甲磺酸酯或芳基鹵(14，Y＝Br、I)根據(jù)Ishiyama等人，Tetr.Lett.38，3447-3450(1997)和Giroux等人Tetr.Lett.38，3841-3844(1997)的一般方法交叉偶合反應(yīng)，其中R5、R6和R7定義如上，隨后堿性水解或酸性水解式(15)中間體腈(參考March，Advanced Organic Chemistry，3rd Edn.，JohnWiley & Sons，New York，p.788(1985))。
流程圖V 或者，式(12，X＝Br、I、或OTf)的碘化物(溴化物或三氟甲烷磺酸酯)與式(14， B(OH)2或SnBu3)的雙(頻那醇合)二硼衍生物反應(yīng)，生成所期望的式(15)中間體，其用流程圖V的方法轉(zhuǎn)化為(11)。
流程圖IV所期望的式(11)中間體，其中R4由部分B-C組成，B是(a，A＝CH)和C是(d)，或B是(b)和C是(c)或者(d，A＝CH)，可以通過用適當(dāng)取代的萘基或者二氫萘基中間體替代式(13和14)中間體，以類似的方法制備。
流程圖V的所期望的式(13)硼酸酯可以方便地根據(jù)Ishiyama等人，J.Org.Chem.60，7508-7510(1995)和Giroux等人，Tetr.Lett.38，3841-3844(1997)描述的方法，使二硼酸的頻哪醇酯(16)與適當(dāng)取代的鹵代烯烴——優(yōu)選溴化物或碘化物(12，X＝Br、I)——或鏈烯基三氟甲烷磺酸酯(12，X＝OTf)進(jìn)行鈀催化的交叉偶合反應(yīng)制備。
或者，用流程圖VI所示的方法制備流程圖IV所期望的式(1)化合物，其中R4由部分B-C組成，其中B是(a)和C是(c)。
流程圖VI 因此，式(6)的三環(huán)二氮雜用適當(dāng)取代的?；瘎T如鹵代芳?；?雜芳?；?鹵，優(yōu)選式(17，J＝COCl或COBr；X＝I、Br)碘代(溴代)芳?；?雜芳?；?氯化物(溴化物)，其中A、R5、R6和R7定義如上——使用在上文描述的任何方法處理，得到流程圖VI通式(18)的?；说闹虚g體。
或者，式(17)的?；锟梢允窍鄳?yīng)羧酸的混合酸酐。用式(6)的三環(huán)二氮雜根據(jù)在上文描述的方法處理通式(17)的所述混合酸酐，得到中間體?；说难苌?18)。
式(17)?；闹虚g體最終的選擇是根據(jù)其與A和R5、R6和R7基團(tuán)的相容性和其與式(6)三環(huán)二氮雜的反應(yīng)性。
(18，X＝I)與適當(dāng)取代的有機(jī)錫試劑進(jìn)行斯蒂勒(Stille)偶合反應(yīng)，有機(jī)錫試劑是諸如三烷基錫(IV)衍生物，優(yōu)選式(9，W＝SnBu3)的三正丁基錫(IV)，其中R9和R10根據(jù)它們與反應(yīng)流程的相容性最終選擇，反應(yīng)在諸如四(三苯基膦)鈀(0)的催化劑存在下，在諸如甲苯或N，N-二甲基甲酰胺的非質(zhì)子有機(jī)溶劑中，在從室溫到150℃的溫度范圍進(jìn)行(參見Farina等人，J.Org.Chem，59，5905(1994)和其中引用的參考文獻(xiàn))，提供所述期望的式(1)化合物，其中 A、R3、R5、R6、R7、R7、R9和R10定義如上。
或者，式(18，X＝Cl、Br或I)的化合物與式(9，W＝B(OH)2)的適當(dāng)取代的環(huán)己烯硼酸反應(yīng)，其中R9和R10根據(jù)它們與所述反應(yīng)流程的相容性選擇，反應(yīng)在諸如甲苯-乙醇-水的溶劑混合物中，在Pd(0)催化劑和諸如碳酸鈉的堿存在下，在從室溫到溶劑回流溫度的溫度范圍進(jìn)行，得到所期望的式(1)化合物，其中 A、R3、R5、R6、R7、R9和R10定義如上。
或者，式(18，X＝Br或I)的化合物與式(16)雙(頻那醇合)二硼在諸如二氯-[1，1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物和乙酸鉀的催化劑存在下，在諸如二甲亞砜的非質(zhì)子溶劑中，在從室溫到100℃的溫度范圍進(jìn)行交叉偶合反應(yīng)，得到式(18， )的中間體。隨后，(18)與式(9，W＝OTf)適當(dāng)取代的三氟甲烷磺酸酯在諸如碳酸鈉水溶液的堿存在下，在諸如N，N-二甲基甲酰胺的非質(zhì)子溶劑中，在在從室溫到溶劑回流溫度的溫度范圍反應(yīng)，得到所期望的式(1)化合物，其中 A、R3、R5、R6、R7、R9和R10定義如上。
流程圖VI的式(17)優(yōu)選的取代的芳?；?雜芳?；?氯化物(溴化物)(X＝I、Br；J＝COCl或COBr)，其中A、R5、R6和R7定義如上，可從市場購買，或是本領(lǐng)域已知的，或可通過類似于文獻(xiàn)中已知化合物的制備方法容易地制備。
流程圖VI式(9，W＝Sn(烷基)3，烷基＝正丁基)的中間體可從市場購買，或可如流程圖VII所示的方法從相應(yīng)的式(20)溴代原料方便地制備，其中R9、R10根據(jù)它們與所述反應(yīng)流程的相容性最終選擇，首先使原料與正丁基鋰反應(yīng)，隨后鋰化的中間體化合物與三烷基(優(yōu)選三甲基或者三正丁基)錫(IV)氯化物反應(yīng)。
流程圖VII 式(9，W＝B(OH)2)的優(yōu)選的取代硼酸可從市場購買，或是本領(lǐng)域已知的，或可以類似于文獻(xiàn)中已知化合物的制備方法容易的制備。
流程圖VI所期望的式(1)化合物，其中R4由部分B-C組成，B是(a)和C是(d)，或B是(b)和C是(c)或者(d)，可以通過用適當(dāng)取代的萘基、二氫萘基或二氫喹啉基中間體替代式(l7和9)中間體，以類似的方法制備。
或者，如流程圖VIII所示，適當(dāng)取代的芳酰基(雜芳?；?鹵化物，優(yōu)選式(21，J＝COCl)的芳?；?雜芳?；?氯化物，其中A、R5、R6和R7定義如上，與式(6)三環(huán)二氮雜反應(yīng)，得到式(22)所述中間體溴化物。隨后(22)與一種雙烷基錫試劑(優(yōu)選雙(三正丁基)錫(IV))在諸如四(三苯基膦)鈀(0)的Pd(0)催化劑和氯化鋰存在下反應(yīng)，得到所述式(23)氫化錫中間體。三正丁基錫(IV)衍生物(23)與式(24，M＝Br或I)適當(dāng)取代的鹵代烯烴進(jìn)一步反應(yīng)，其中R9、R10根據(jù)它們與本反應(yīng)流程的相容性最終選擇，反應(yīng)在諸如四(三苯基膦)鈀(0)的Pd(0)催化劑存在下進(jìn)行，得到所期望的式(1)化合物，其中R4由部分B-C組成，其中B是(a)和C是(c)， 和R5、R6、R7、R9和R10定義如上。
流程圖VIII
流程圖VIII所期望的式(1)化合物，其中R4由部分B-C組成，B是(a)和C是(d)，或B是(b)和C是(c)或者(d)，可以通過用適當(dāng)取代的萘基、二氫萘基或二氫喹啉基中間體替代式(21和24)中間體，以類似的方法制備。
流程圖IX表示了制備流程圖I式(1)化合物的優(yōu)選方法，其中 、R3、R5、R6和R7定義如上，R4由部分B-C組成，其中B是(a，A＝CH)和C是(c)，R10是羥基、烷氧基、OP’、疊氮基、苯二酰亞氨基、氰基、苯氧基、苯硫基、烷硫基和相關(guān)的親核基團(tuán)。
流程圖IX
根據(jù)所述優(yōu)選方法，式(25)適當(dāng)取代的二氮雜環(huán)己烯酮通過用優(yōu)選硼氫化鈉的金屬氫化物在氯化鈰(III)存在下，在諸如甲醇的羥基溶劑中，在-78℃至室溫的溫度范圍還原，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的環(huán)己烯醇(26)。(26)的羥基官能通過轉(zhuǎn)化成離去基團(tuán)(27，L＝離去基團(tuán))活化，離去基團(tuán)優(yōu)選是對甲苯磺酸酯、甲烷磺酸酯、三氟甲烷磺酸酯、磷酸酯等。
用諸如疊氮化物、酞酰亞胺、氰化物、鹵化物、苯酚、碳或硫親核基團(tuán)SN2置換離去基團(tuán)，得到所期望的化合物(1)，其中 和R3定義如上，R4由部分B-C組成，其中B是(a，A＝CH)和C是(c)，R5、R6、R7、R9和R10定義如上。
或者，根據(jù)流程圖X，式(26)的對映異構(gòu)環(huán)己烯醇通過手性HPLC分離成式(28)和(39)的各個(gè)對映異構(gòu)體。各個(gè)對映異構(gòu)體可以逐一地活化并用流程圖IX的方法用親核基團(tuán)進(jìn)行SN2置換。
流程圖X
或者，式(28)和(29)的對映異構(gòu)環(huán)己烯醇分別通過不對稱還原式(25)環(huán)己烯酮得到，反應(yīng)使用硼烷四氫呋喃絡(luò)合物，在諸如四氫呋喃的非質(zhì)子溶劑中在手性助劑存在下在室溫進(jìn)行，手性助劑是諸如(S)-四氫-1-甲基-3，3-二苯基-1H，3H-吡咯并[1，2-c][1，3，2]硼雜噁唑(oxazaborole)或(R)-四氫-1-甲基-3，3-二苯基-1H，3H-吡咯并[1，2-c][1，3，2]oxazaborole。
流程圖XI表示了用于制備流程

圖1式(I)化合物的優(yōu)選方法，其中R4由部分B-C組成，其中B是(a)和C是(d)，或B是(b)或(c)，和 A、R、R3、R5、R6、R7定義如上，其中R9和R10根據(jù)它們與所述反應(yīng)流程的相容性最終選擇，并且用流程圖VI式(17)酰化劑?；０分虚g體(30)。
流程圖XI
或者，流程圖XII表示了用于制備流程圖1式(I)化合物的優(yōu)選方法，其中R4由部分B-C組成，其中B是(a)，C是(c)，并且 A、R、R3、R5、R6、R7定義如上，其中R9和R10根據(jù)它們與所述反應(yīng)流程的相容性最終選擇，所述方法可使用流程圖VIII的方法，用式(21)的酰化劑?；鞒虉DXI的酰胺中間體(30)。
流程圖XII 根據(jù)下列方法檢驗(yàn)本發(fā)明化合物的生物活性。
在表達(dá)人加壓素V1a亞類受體的中國倉鼠卵巢細(xì)胞膜中加壓素的結(jié)合受體源由人加壓素V1a亞類受體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO細(xì)胞)從BioSignal Inc.，1744 rue Williams，蒙特利爾，魁北克，加拿大獲得或從M.Thibonnier，Case Western Reserve University School ofMedicine，Cleveland，OH獲得。
A.細(xì)胞的傳代和擴(kuò)增在T-150燒瓶中在無菌條件下，在F-12營養(yǎng)素混合物(HAM)與L-谷氨酰胺(Gibco Cat.#11765-054)的細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)中，該介質(zhì)包含15mMHEPES(Gibco Cat.#15630-080)、1％抗生素/抗霉菌素(每500mLF-12加入5mL 100×，Gibco Cat.#15240-062)、250μg/mL Zeocin(每500mLF-12加入1.25mL的100mg/mL Invitrogen R-250-01)和10％胎兒牛血清(合格的，熱失活的，Gibco Cat.#16140-063)，使從M.Thibonnier獲得的由人加壓素V1a亞類受體轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞(pZeoSV載體)生長到融合(大約＞90％)。由吸出而除去介質(zhì)和將細(xì)胞用10mLHank平衡鹽液(GibcoCat.#14175-095)洗滌。將所述鹽溶液吸出而除去和將細(xì)胞用5mL胰蛋白酶-EDTA(0.05％胰蛋白酶，0.53mM EDTA-4Na，Gibco Cat.#25300-070)消化1分鐘。將胰蛋白酶吸出而除去和將細(xì)胞由放液而取出。將細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)(如對于1∶30分裂的加30mL)立即加入和充分混合以使胰蛋白酶失活。將1mL分離的細(xì)胞加入到包含新鮮細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)的新培養(yǎng)瓶中(如每個(gè)T-150燒瓶加入25ml)，并溫和地混合。將細(xì)胞在37℃下在5％CO2中培育。以3-4天間隔(或適當(dāng)?shù)?改變介質(zhì)。細(xì)胞在7-8天內(nèi)生長到融合(大約＞75％-95％)。所有步驟在無菌條件下進(jìn)行。
B.膜制備將該細(xì)胞用Hank平衡鹽液溫和地洗滌兩次(如每個(gè)T-150燒瓶使用10mL)。將過量溶液除去和將細(xì)胞在無酶細(xì)胞解離緩沖劑(如每個(gè)T-150燒瓶使用8mLHank基，Gibco Cat.#13150-016)洗滌15-30分鐘，直到細(xì)胞松散。將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到保持在冰浴中的離心管(50mL)中。所有隨后的步驟在4℃下進(jìn)行。將離心管在300×g下離心15min(在SORVAL，型號RT 6000 D，1380rpm，使用50ml離心管的轉(zhuǎn)子)。將上清液拋棄和在均化緩沖劑(包含0.25M蔗糖和1mM EDTA的10mHTris-HCl，pH7.4)中懸浮細(xì)胞，保證緩沖劑的體積為細(xì)胞小球體積的約十倍。將該細(xì)胞傾入離心管(50mL)和用Polytron在第6檔均化10秒。將勻漿轉(zhuǎn)移至Potter-Elvjehm均化器和用3沖程均化。將勻漿在1500×g下在4℃離心10min(使用SORVAL，型號RT 6000 D，3100rpm，使用50mL離心管的轉(zhuǎn)子)。拋棄小球。將上清液在100,000×g下在4℃離心60min(Beckman L 8-80M超速離心機(jī)；對于50mL離心管使用70Ti型轉(zhuǎn)子，以37,500rpm旋轉(zhuǎn)；對于15mL離心管使用80Ti型轉(zhuǎn)子，38,000rpm，或用45Ti型轉(zhuǎn)子，35,800rpm)。將上清液拋棄和將小球在3-4mL三羥甲基氨基甲烷(Tris)緩沖液(50mM TRIS-HCl，pH7.4)中懸浮。由Bradford或Lowry方法測定蛋白質(zhì)含量。將膜懸浮液的體積用膜緩沖劑(包含0.1％BSA和0.1mM PMSF的50mM Tris-HCl)調(diào)節(jié)，以得到3.0mg/mL(或適當(dāng)?shù)?蛋白質(zhì)。將該膜在-70℃下等分和貯存。
C.放射性配體結(jié)合試驗(yàn)在96孔格式的微量滴定板的孔中，加入90、110或130μL(以組成200μL的最終體積)測定緩沖劑，該緩沖劑包含50mM的Tris-HCl(pH7.4)、BSA(熱失活的，無蛋白酶)、0.1％的5mM MgCl2、1mg％抑肽酶、1mg％亮肽素、2mg％1，10-菲咯啉、10mg％胰蛋白酶抑制劑和0.1mM PMSF。在實(shí)驗(yàn)日加入抑制劑。將各組分在室溫下混合，然后保持在冰浴中，隨后調(diào)節(jié)pH到7.4。
向每個(gè)孔中加入20μL未標(biāo)記的Manning配體(以得到用于標(biāo)準(zhǔn)曲線的0.1-10nM和用于非特異性結(jié)合的1000nM的最終濃度)或在50％DMSO中的試驗(yàn)化合物(如0.1-1000nM的最終濃度或適當(dāng)?shù)?或作為載體對照物的50％DMSO。加入20μL的50％DMSO用于Manning和其它肽配體和因此調(diào)節(jié)測試緩沖液的體積。
向每個(gè)孔中加入50μL冷凍的膜懸浮液，該懸浮液應(yīng)在使用之前即刻解凍和在測定緩沖液中稀釋到要求的濃度(如需要相當(dāng)于25-50μg蛋白質(zhì)/孔)。將在測定緩沖液中的20μL 8nM[3H]Manning配體加入，該配體在使用之前制備，和在室溫下培育60min，在機(jī)械振動機(jī)上先搖動該板15min。通過板內(nèi)容物的快速過濾使孵化停止，隨后使用細(xì)胞收集器(Tomtek and Printed濾墊-B濾紙)，用冰冷緩沖劑(50mM Tris-HCl，pH7.4)洗滌。將濾紙徹底地干燥(7-12min，在微波爐中)和用MeltiLexB/H熔融閃爍蠟板浸漬，和在β-板閃爍計(jì)數(shù)器中對放射性計(jì)數(shù)。
在表達(dá)人加壓素V2亞類受體的中國倉鼠卵巢細(xì)胞膜中加壓素的結(jié)合受體源由人加壓素V2亞類受體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO細(xì)胞)從M.Thibonnier，Case Western Reserve University School ofMedicine，Cleveland，OH獲得。
A.細(xì)胞的傳代和擴(kuò)增在T-150燒瓶中在無菌條件下，在F-12營養(yǎng)素混合物(HAM)與L-谷氨酰胺(Gibco Cat.#11765-054)的細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)中，該介質(zhì)包含15mMHEPES(Gibco Cat.#15630-080)、1％抗生素/抗霉菌素(每500mLF-12加入5mL 100×，Gibco Cat.#15240-062)、250μg/mL Zeocin(每500mLF-12加入1.25mL的100mg/mL Invitrogen R-250-01)和10％胎兒牛血清(合格的，熱失活的，Gibco Cat.#16140-063)，使從M.Thibonnier獲得的由人加壓素V2亞類受體轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞(pZeoSV載體)生長到融合(大約＞90％)。由吸出而除去介質(zhì)和將細(xì)胞用10mLHank平衡鹽液(GibcoCat.#14175-095)洗滌。將該鹽溶液吸出而除去和將細(xì)胞用5mL胰蛋白酶-EDTA(0.05％胰蛋白酶，0.53mM EDTA-4Na，Gibco Cat.#25300-070)消化1min。將胰蛋白酶吸出而除去和將細(xì)胞由放液而取出。將細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)(如對于1∶30分裂的加入30mL)立即加入和充分混合以使胰蛋白酶失活。將1mL分離的細(xì)胞加入到包含新鮮細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)的新培養(yǎng)瓶中(如每個(gè)T-150燒瓶加入25ml)，并溫和地混合。將細(xì)胞在37℃下在5％CO2中培育。以3-4天間隔(或適當(dāng)?shù)?更換介質(zhì)。細(xì)胞在7-8天內(nèi)生長到融合(大約＞75％-95％)。所有步驟在無菌條件下進(jìn)行。
B.膜制備將所述細(xì)胞用Hank平衡鹽液溫和地洗滌兩次(如每個(gè)T-150燒瓶使用10mL)。將過量溶液除去和將細(xì)胞在無酶細(xì)胞解離緩沖劑(如每個(gè)T-150燒瓶使用8mLHank基，Gibco Cat.#13150-016)洗滌15-30分鐘，直到細(xì)胞松散。將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到保持在冰浴中的離心管(50mL)中。所有隨后的步驟在4℃下進(jìn)行。將離心管在300×g下離心15min(SORVAL，型號RT 6000 D，1380rpm，使用50ml離心管用的轉(zhuǎn)子)。將上清液拋棄和在均化緩沖劑(包含0.25M蔗糖和1mM EDTA的10mH Tris-HCl，pH7.4)中懸浮細(xì)胞，以確保緩沖劑的體積為細(xì)胞小球體積的約十倍。將所述細(xì)胞傾入離心管(50mL)和用Polytron在第6檔均化10sec。將勻漿轉(zhuǎn)移至Potter-Elvjehm均化器和用3沖程均化。將勻漿在1500×g下在4℃離心10min(使用SORVAL，型號RT 6000 D，3100rpm，使用50mL離心管的轉(zhuǎn)子)。拋棄小球。將上清液在100,000×g下在4℃離心60min(Beckman L 8-80M超速離心機(jī)；對于50mL離心管使用70Ti型轉(zhuǎn)子，以37,500rpm旋轉(zhuǎn)；對于15mL離心管使用80Ti型轉(zhuǎn)子，38,000rpm，或用45Ti型轉(zhuǎn)子，35,800rpm)。將上清液拋棄和將小球在3-4Ml Tris緩沖液(50mM TRIS-HCl，pH7.4)中懸浮。由Bradford或Lowry方法測定蛋白質(zhì)含量。將膜懸浮液的體積用膜緩沖劑(包含0.1％BSA和0.1mM PMSF的50mM Tris-HCl)調(diào)節(jié)，以得到3.0mg/mL(或適當(dāng)?shù)?蛋白質(zhì)。將該膜在-70℃下等分和貯存。
C.放射性配體結(jié)合試驗(yàn)在96孔格式的微量滴定板的孔中，加入90、110或130μL(以組成200μL的最終體積)測定緩沖劑，該緩沖劑包含50mM的Tris-HCl(pH7.4)、BSA(熱失效的，無蛋白酶)、0.1％的5mM MgCl2、1mg％抑肽酶、1mg％亮肽素、2mg％1，10-菲咯啉、10mg％胰蛋白酶抑制劑和0.1mM PMSF。在實(shí)驗(yàn)日加入抑制劑。將各組分在室溫下混合，和然后保持在冰浴中，隨后調(diào)節(jié)pH到7.4。
向每個(gè)孔中加入20μL未標(biāo)記的精氨酸加壓素(AVP)(以得到用于標(biāo)準(zhǔn)曲線的0.1-10nM和用于非特異性結(jié)合的1000nM的最終濃度)或在50％DMSO中的試驗(yàn)化合物(如0.1-1000nM的最終濃度或適當(dāng)?shù)?或作為載體對照物的50％DMSO。對于加壓素和其它肽配體，加入20μL的50％DMSO和相應(yīng)調(diào)節(jié)測試緩沖液的體積。
向每個(gè)孔中加入50μL冷凍的所述膜懸浮液，該懸浮液應(yīng)在使用之前即刻解凍和在測定緩沖液中稀釋到要求的濃度(如需要相當(dāng)于25-50μg蛋白質(zhì)/孔)。加入在測定緩沖液中的20μL 8nM[3H]精氨酸加壓素配體，該配體在使用之前制備，和在室溫下培育60min，在機(jī)械振動機(jī)上先搖動該板15min。通過該板內(nèi)容物的快速過濾使孵化停止，隨后使用細(xì)胞收集器(Tomtek and Printed濾墊-B濾紙)，用冰冷緩沖劑(50mM Tris-HCl，pH7.4)洗滌。將濾紙徹底地干燥(7-12min，在微波爐中)和用MeltiLex B/H熔融閃爍蠟板浸漬，和在β-板閃爍計(jì)數(shù)器上計(jì)數(shù)放射性。
在表達(dá)人催產(chǎn)素受體的中國倉鼠卵巢細(xì)胞膜中催產(chǎn)素的結(jié)合受體源由人催產(chǎn)素受體穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染的中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO細(xì)胞)(參見Rohto Pharmaceutical Co.Ltd.，大阪，日本的Tanizawa等人，U.S.專利5,466,584(1995))從M.Thibonnier，Case Western Reserve UniversitySchool of Medicine，Cleveland，OH獲得。
A.細(xì)胞的傳代與擴(kuò)增在T-150燒瓶中在無菌條件下，在F-12營養(yǎng)素混合物(HAM)與L-谷氨酰胺(Gibco Cat.#11765-054)的細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)中，該介質(zhì)包含15mMHEPES(Gibco Cat.#15630-080)、1％抗生素/抗霉菌素(每500mLF-12加入5mL 100×，Gibco Cat.#1 5240-062)，400μg/mL Geneticin(每500mL F-12加入4mL的50mg/mL)和10％胎兒牛血清(合格的，熱失活的，Gibco Cat.#16140-063)，使從M.Thibonnier獲得的由人催產(chǎn)素受體轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞(pcDNA3.1載體)生長到融合(大約＞90％)。吸出而除去介質(zhì)和將所述細(xì)胞用10mLHank平衡鹽液(Gibco Cat.#14175-095)洗滌。將該鹽溶液吸出而除去和將細(xì)胞用5mL胰蛋白酶-EDTA(0.05％胰蛋白酶，0.53mM EDTA-4Na，Gibco Cat.#25300-070)消化1min。將胰蛋白酶吸出而除去和將所述細(xì)胞由放液而取出。立即加入細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)(如對于1∶30分裂的加30mL)并充分混合以使胰蛋白酶失活。將1mL分離的細(xì)胞加入到包含新鮮細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)的新培養(yǎng)瓶中(如每個(gè)T-150燒瓶加入25m1)，和溫和地混合。將細(xì)胞在37℃在5％CO2中培育。以3-4天間隔(或適當(dāng)?shù)?更換介質(zhì)。細(xì)胞在7-8天內(nèi)生長到融合(大約＞75％-95％)。所有步驟在無菌條件下進(jìn)行。
B.膜制備將所述細(xì)胞用Hank平衡鹽液溫和地洗滌兩次(如每個(gè)T-150燒瓶使用10mL)。將過量溶液除去和將細(xì)胞在無酶細(xì)胞解離緩沖劑(如每個(gè)T-150燒瓶使用8mLHank基，Gibco Cat.#13150-016)洗滌15-30分鐘直到細(xì)胞松散。將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到保持在冰浴中的離心管(50mL)中。所有隨后的步驟在4℃下進(jìn)行。將離心管在300×g下離心15min(SORVAL，型號RT 6000 D，1380rpm，使用50ml離心管的轉(zhuǎn)子)。將上清液拋棄和在均化緩沖劑(包含0.25M蔗糖和1mM EDTA的10mH Tris-HCl，pH7.4)中懸浮細(xì)胞，以確保緩沖劑的體積為細(xì)胞小球體積的約十倍。將該細(xì)胞傾入離心管(50mL)和用Polytron在設(shè)定第6檔均化10sec。將勻漿轉(zhuǎn)移至Potter-Elvjehm均化器和用3沖程均化。將勻漿在1500×g下在4℃離心10min(使用SORVAL，型號RT 6000 D，3100rpm，使用50mL離心管的轉(zhuǎn)子)。拋棄小球。將上清液在100,000×g下在4℃下離心60min(Beckman L 8-80M超速離心機(jī)；對于50mL離心管使用70Ti型轉(zhuǎn)子，以37,500rpm旋轉(zhuǎn)；對于15mL離心管使用80Ti型轉(zhuǎn)子，38,000rpm，或用45Ti型轉(zhuǎn)子，35,800rpm)。將上清液拋棄和將小球在3-4mL Tris緩沖液(50mM TRIS-HCl，pH7.4)中懸浮。由Bradford或Lowry方法預(yù)計(jì)蛋白質(zhì)含量。將膜懸浮液的體積用膜緩沖劑(包含0.1％BSA和0.1mM PMSF的50mM Tris-HCl)調(diào)節(jié)，以得到3.0mg/mL(或適當(dāng)?shù)?蛋白質(zhì)。將膜在-70℃下等分和貯存。
C.放射性配體結(jié)合測定在96孔格式的微量滴定板的孔中，加入90、110或130μL(以組成200μL的最終體積)測定緩沖劑，該緩沖劑包含50mM的Tris-HCl(pH7.4)、BSA(熱失活的，無蛋白酶)、0.1％的5mM MgCl2、1mg％抑肽酶、1mg％亮肽素、2mg％1，10-菲咯啉、10mg％胰蛋白酶抑制劑和0.1mM PMSF。在實(shí)驗(yàn)日加入抑制劑。將各組分在室溫下混合，然后保持在冰浴中，隨后調(diào)節(jié)pH到7.4。
向每個(gè)孔中加入20μL未標(biāo)記的催產(chǎn)素(以得到用于標(biāo)準(zhǔn)曲線的0.1-10nM和用于非特異性結(jié)合的1000nM的最終濃度)或在50％DMSO中的試驗(yàn)化合物(如0.1-1000nM的最終濃度或適當(dāng)?shù)?或作為載體對照物的50％DMSO。對于催產(chǎn)素和其它肽配體，加入20μL 50％DMSO，和相應(yīng)調(diào)節(jié)測試緩沖液的體積。
向每個(gè)孔中加入50μL冷凍的所述膜懸浮液，該懸浮液應(yīng)在使用之前即刻解凍和在測定緩沖液中稀釋到要求的濃度(如需要相當(dāng)于25-50μg蛋白質(zhì)/孔)。加入在測定緩沖液中的20μL 8nM[3H]催產(chǎn)素，該測定緩沖液在使用之前制備，和在室溫下培育60min，在機(jī)械振動機(jī)上先搖動該板15min。通過該板內(nèi)容物的快速過濾使孵化停止，隨后使用細(xì)胞收集器(Tomtek and Printed濾墊-B濾紙)，用冰冷緩沖劑(50mMTris-HCl，pH7.4)洗滌。將濾紙徹底地干燥(7-12min，在微波爐中)和用MeltiLex B/H熔融閃爍蠟板浸漬，和在β-板閃爍計(jì)數(shù)器中計(jì)數(shù)放射性。
結(jié)合數(shù)據(jù)報(bào)導(dǎo)為在確定濃度下的抑制百分比，或如果計(jì)算IC50的話，報(bào)導(dǎo)為納摩爾濃度。
關(guān)于本發(fā)明典型化合物的這些試驗(yàn)的結(jié)果列于表1。
表1與用人加壓素V1a受體亞型、人加壓素V2受體亞型和人催產(chǎn)素受體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞系膜的結(jié)合
*在表達(dá)人加壓素V1a和V2亞型受體和人催產(chǎn)素受體的中國倉鼠卵巢細(xì)胞膜中的結(jié)合下列實(shí)施例用于非限制性地說明本發(fā)明。
實(shí)施例110-(5-氯-4-環(huán)己-1-烯-1-基-2-甲氧基苯甲酰基)-N-甲基-N-(吡啶-3-基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺步驟A.4-氨基-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯4-氨基-5-氯-2-甲氧基苯甲酸(50.0g、248mmol)懸浮在甲醇(500ml)中，所述漿液冷卻至0℃。然后用20分鐘滴加亞硫酰氯(54.3ml、744mmol)。開始形成透明溶液，隨后變成白色懸浮液。反應(yīng)升溫至室溫并且攪拌3小時(shí)。蒸發(fā)甲醇，所得淤漿懸浮在乙醚(1L)中。濾過固體，用乙醚充分清洗，得到標(biāo)題化合物鹽酸鹽(50.9g)。所述鹽懸浮在1NNaOH水溶液中，劇烈攪拌30分鐘。過濾并用水徹底清洗，得到標(biāo)題化合物游離堿白色固體，m.p.136-137℃。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.57(s，1H)，6.43(s，1H)，6.14(s，2H)，3.71(s，3H)，3.67(s，3H)。
C9H10ClNO3元素分析計(jì)算值C 50.13，H 4.67，N 6.50，測量值C49.85，H 4.46，N 6.65。
MS[(+)-APCI，m/z]216[M+H]+。C9H11ClNO3分子量計(jì)算值216.0428。
步驟B.5-氯-4-碘代-2-甲氧基苯甲酸甲酯步驟A的4-氨基-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(5.00g、23.2mmol)懸浮在水(52ml)中，然后加入濃硫酸(13ml)。所得懸浮液冷卻至-1℃，以保持溫度低于0℃的速度加入亞硝酸鈉(1.76g、25.5mmol)水(10ml)中的溶液，形成清澈的黃色溶液。然后滴加碘化鉀(4.23g、25.5mmol)和碘(3.24g、12.8mmol)中水(50ml)中的混合物，反應(yīng)在0℃攪拌1.5小時(shí)。反應(yīng)混合物升溫至室溫然后用乙酸乙酯(200ml)萃取。合并萃取液，順序用1M硫代硫酸鈉水溶液、1N氫氧化鈉和鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾然后濃縮，于是產(chǎn)物結(jié)晶。所得橙色晶體懸浮在石油醚中，過濾然后在真空中干燥，得到標(biāo)題化合物(6.38g)，m.p.72-73℃。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.72(s，1H)，7.66(s，1H)，3.83(s，3H)，3.77(s，3H)。
C9H8ClIO3分析計(jì)算值C 33.11，H 2.47；測量值C 33.21，H 2.23。
MS[(+)-APCI，m/z]327[M]+。C9H9ClIO3計(jì)算值326.9285。
步驟C.5-氯-4-碘代-2-甲氧基苯甲酸甲酯步驟B的5-氯-4-碘代-2-甲氧基苯甲酸甲酯(3.00g，9.19mmol)和氫氧化鈉(1.10g，27.6mmol)在甲醇(92ml)中的混合物回流12小時(shí)。所述反應(yīng)冷卻到室溫，然后蒸發(fā)溶劑。殘余物溶于1N氫氧化鈉(75ml)，溶液用乙醚洗滌，除去有機(jī)洗滌液。用2N HCl酸化水相，用乙醚萃取。合并的萃取液用無水硫酸鈉干燥，過濾然后濃縮，得到所述標(biāo)題羧酸(2.64g)橙色晶體，m.p.150-151℃。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ13.03(bs，1H)，7.70(s，1H)，7.63(s，1H)，3.82(s，3H)。
C8H6ClIO3分析計(jì)算值C 30.75，H 1.94，測量值C 31.28，H 1.78。
MS[(-)-APCI，m/z]311[M-H]-。C8H5ClIO3計(jì)算值310.8972。
步驟D.(10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-(2-甲氧基-4-碘代-5-氯苯基)-甲酮向步驟C的5-氯-4-碘代-2-甲氧基苯甲酸(0.900g，2.88mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(6.7μl，86.4μmol)在無水二氯甲烷(14.4ml)中的混合物滴加草酰氯(0.263ml，3.02mmol)。所述混合物加熱回流1小時(shí)，然后冷卻至室溫，然后蒸干。加入新鮮的無水二氯甲烷(25ml)，濃縮所得溶液，殘余物在真空中干燥。由此得到的粗酰氯和10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜(0.584g，3.17mmol)中無水二氯甲烷(14.4ml)中結(jié)合，隨后加入N，N-二異丙基乙基胺(0.447ml，3.46mmol)。在室溫下攪拌18小時(shí)以后，所述反應(yīng)混合物用二氯甲烷(15ml)稀釋，順序用1N鹽酸、1N氫氧化鈉和鹽水洗滌。有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥，過濾然后濃縮，得到粗標(biāo)題酰胺，從乙醚重結(jié)晶得到1.23g微橙色晶體，m.p.91-192℃。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.60-7.28(m，3H)，7.14-7.01(m，3H)，6.79(s，1H)，5.95(s，1H)，5.89(t，J＝3.1，1H)，5.15(bs，4H)，3.56(s，3H)。
C20H16ClIN2O2分析計(jì)算值C 50.18，H 3.37，N 5.85，測量值C50.47，H 3.28，N 5.74。
MS(EI，m/z)478[M]+。C20H16ClIN2O2計(jì)算值477.9946。
步驟E.(10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-[5-氯-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷(dioxaborolan)-2-基)-苯基]-甲酮步驟D的(10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-(2-甲氧基-4-碘代-5-氯苯基)-甲酮(0.500g，1.04mmol)、雙(頻那醇合)二硼(0.289g，1.14mmol)、乙酸鉀(0.306g，3.12mmol)和二氯-[1，1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物(0.025g，0.0312mmol)中無水二甲亞砜(5.2ml)中合并，然后加熱到80℃過夜。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋，然后用水以及鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥有機(jī)相，用己烷稀釋，通過二氧化硅膠體塞過濾。濾液濃縮成油，從乙醚/石油醚(-20℃)結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(0.430g)白色結(jié)晶固體，m.p.92-98℃。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)57.48-7.36(m，2H)，7.12-7.03(m，4H)，6.79(s，1H)，5.95(m，1H)，5.89(t，1H)，5.20(br，4H)，3.48(br，3H)，1.26(s，12H)。
C26H28BClN2O4分析計(jì)算值C 56.22，H 5.89，N 5.85，測量值C56.23，H 5.63，N 6.24。
MS[(+)-ESI，m/z]479[M+H]+.C26H29BClN2O4計(jì)算值479.1910。
步驟F.10-(5-氯-4-環(huán)己-1-烯-1-基-2-甲氧基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜步驟E的(10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-[5-氯-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-甲酮(0.220g，0.459mmol)、環(huán)己-1-烯-1-基三氟甲烷磺酸酯(0.116g，0.505mmol)和二氯[1，1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物(0.0110g，0.0138mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(2.3ml)中合并。加入碳酸鈉水溶液(2M，1.15ml，2.30mmol)，反應(yīng)加熱至60℃保持2小時(shí)。冷卻至室溫之后，用乙酸乙酯(50ml)稀釋反應(yīng)混合物，用水和鹽水洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機(jī)相，過濾然后濃縮。在硅膠上使用在己烷中溶劑梯度30至40％的乙酸乙酯進(jìn)行快速色譜，得到標(biāo)題化合物(0.140g)的油。所述油溶于乙醚/石油醚，然后濃縮得到無定形的白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.38(d，2H)，7.11(t，1H)，7.06-7.00(m，2H)，6.79(s，1H)，6.57(s，1H)，5.95(s，1H)，5.89(t，1H)，5.55(s，1H)，5.24-4.60(m，4H)，3.52(s，3H)，2.13-2.09(m，4H)，1.68-1.57(m，4H)。
C26H25ClN2O2+0.03C4H10O的分析計(jì)算值C 71.76，H 5.79，N6.44。測量值C 71.66，H 5.59，N 6.10。
MS[(+)-APCI，m/z]433[M+H]+.C26H26ClN2O2計(jì)算值433.1684。
步驟G.10-(5-氯-4-環(huán)己-1-烯-1-基-2-甲氧基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸步驟F的10-(5-氯-4-環(huán)己-1-烯-1-基-2-甲氧基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1c][1，4]苯并二氮雜(0.300g，0.693mmol)和N，N-二異丙基乙基胺(0.127ml，0.728mmol)溶于無水二氯甲烷(2.8ml)。滴加三氯乙?；然?0.116ml，1.04mmol)，反應(yīng)在室溫下攪拌3小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋混合物，用1N HCl、1N NaOH和鹽水洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機(jī)相，用己烷稀釋，在室溫下攪拌4小時(shí)，然后用1N鹽酸(50ml)稀釋，用乙醚萃取。有機(jī)相用使用在己烷中的30％乙酸乙酯濾過硅膠的1N鈉萃取。濃縮濾液得到粗三氯乙酸酯(0.360g)。該物質(zhì)溶于丙酮(4.2ml)，加入2.5N氫氧化鈉(0.750ml)。與氫氧化物反應(yīng)，合并的堿性萃取液用2N鹽酸酸化。水相用乙醚萃取，用無水硫酸鈉干燥萃取液，過濾然后濃縮，得到標(biāo)題化合物(0.280g)白色固體，m.p.192℃(分解)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.34(br，1H)，7.42(br，1H)，7.25(d，1H)，7.07(t，1H)，6.98(t，1H)，6.93(d，1H)，6.72(d，1H)，6.54(br，1H)，6.10(d，1H)，5.90-4.60(m，5H)，3.47(br，3H)，2.14-2.09(m，4H)，1.65-1.57(m，4H)。
C27H25ClN2O4分析計(jì)算值C 67.99，H 5.28，N 5.87。測量值C67.71，H 5.23，N 5.49。
MS[(-)-APCI，m/z]475[M-H]-.C27H24ClN2O4計(jì)算值475.1426。
步驟H.10-(5-氯-4-環(huán)己-1-烯-1-基-2-甲氧基苯甲酰基)-N-甲基-N-(吡啶-3-基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺步驟G的10-(5-氯-4-環(huán)己-1-烯-1-基-2-甲氧基苯甲酰)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸(0.125g，0.262mmol)、3-(甲基氨基甲基)吡啶(0.038g，0.314mmol)、1-羥基苯并三唑(0.039g，0.288mmol)和1-[(3-二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.055g，0.288mmol)在不含胺的N，N-二甲基甲酰胺(1.1ml)中合并，隨后加入N，N-二異丙基乙基胺(0.068ml，0.393mmol)。反應(yīng)在室溫下攪拌16小時(shí)，然后用乙酸乙酯稀釋，用水、飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。合并的含水洗滌液用氯化鈉飽和，用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥，過濾然后濃縮。殘余物通過在硅膠上的快速色譜提純，使用在氯仿中5％的甲醇洗脫，從乙醚/戊烷重結(jié)晶，得到0.140g的標(biāo)題化合物白色結(jié)晶固體，m.p.178-179℃，通過分析HPLC(PrimesphereC-18，2.0×150mm，45％乙腈/水，0.2ml/分鐘)得到98.0％純度。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.53-8.50(m，2H)，7.71(d，1H)，7.45-7.41(m，2H)，7.31(d，1H)，7.08(t，1H)，6.98(t，1H)，6.94(d，1H)，6.54(s，1H)，6.33(s，1H)，6.05(d，1H)，5.56(s，1H)，5.37(s，2H)，5.35-4.80(br，2H)，4.74(s，2H)，3.48(br，3H)，3.03(s，3H)，2.14-2.09(m，4H)，1.65-1.57(m，4H)。
C34H33ClN4O3分析計(jì)算值C 70.27，H 5.72，N 9.64。測量值C69.95，H 5.77，N 9.31。
MS[(+)-APCI，m/z]581.0[M+H]+.C34H33ClN4O3計(jì)算值581.2321。
實(shí)施例210-(5-氯-4-環(huán)己-1-烯-1-基-2-甲氧基苯甲?；?-N-甲基-N-(吡啶-3-基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺L-(+)-酒石酸鹽半水合物實(shí)施例1的10-(5-氯-4-環(huán)己-1-烯-1-基-2-甲氧基苯甲?；?-N-甲基-N-(吡啶-3-基-甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺(0.200g，0.344mmol)溶于沸騰的乙醚。加入L-(+)-酒石酸(0.0520g，0.344mmol)在熱甲醇(1ml)中的溶液，冷卻所述混合物，然后蒸發(fā)溶劑。將乙醚加入到所述殘余物中，形成白色固體，過濾然后在真空中干燥，得到0.252g標(biāo)題化合物酒石酸鹽，m.p.138-177℃。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.66(br，2H)，8.53-8.50(m，2H)，7.71(d，1H)，7.43-7.40(m，2H)，7.31(d1H)，7.08(t，1H)，6.98(t，1H)，6.93(d，1H)，6.54(s，1H)，6.33(s，1H)，6.05(d，1H)，5.57(s，1H)，5.37(s，2H)，5.35-4.80(br，4H)，4.74(s，2H)，4.30(s，2H)，3.48(br，3H)，3.03(s，3H)，2.14-2.09(m，4H)，1.65-1.57(m，4H)。
C34H33ClN4O3+1.00C4H6O6+0.50H2O分析計(jì)算值C 61.66，H 5.45，N 7.57。
測量值C 61.73，H 5.44，N 7.17。
MS[EI，m/z]580[M]+.C34H33ClN4O3計(jì)算值580.2243。
實(shí)施例310-[4-((3R)-3-羥基-2-甲基-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸甲基-吡啶-3-基甲基酰胺步驟A.(10，1-二氫-5H-吡咯并[2，1q-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-[(3-氧代-2-甲基環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯基]甲酮實(shí)施例5步驟B的(10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-[3-甲基4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-甲酮(6.75g，15.8mmol)、3-氧代-2-甲基環(huán)己-1-烯-1-基三氟甲烷磺酸酯(4.49g，17.4mmol)和二氯[1，1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物(0.387g，0.474mmol)在二甲亞砜(79ml)中合并。加入碳酸鈉水溶液(2M，39.5ml，79.0mmol)，所述反應(yīng)加熱至60℃保持3小時(shí)。冷卻至室溫后，反應(yīng)混合物用水稀釋，然后用乙酸乙酯洗滌。合并的萃取液用水和鹽水洗滌。有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，通過硅膠過濾然后濃縮。殘余物用在硅膠上的快速色譜提純，用在己烷中50％的乙酸乙酯洗脫，得到3.55g標(biāo)題化合物淡橙色泡沫。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.45(dd，1H)，7.24(s，1H)，7.17(t，1H)，7.07(t，1H)，7.05(d，1H)，6.91(d，1H)，6.85(d，1H)，6.82(t，1H)，5.94(s，1H)，5.91(t，1H)，5.34-4.65(br，4H)，2.42-2.32(m，4H)，2.02(s，3H)，2.00-1.93(m，2H)，1.25(s，3H)。
C27H26N2O2+0.50H2O+0.05C6H14分析計(jì)算值C 77.37，H 6.59，N 6.60。測量值C 77.40，H 6.76，N 6.51。
MS[(+)-APCI，m/z]411.1[M+H]+.C27H27N2O2計(jì)算值411.2078。
步驟B.(10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-[4-((3R)-3-羥基-2-甲基-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯基]-甲酮(S)-(-)-四氫-1-甲基-3，3-二苯基-1H，3H-吡咯并[1，2-c][1，3，2]硼雜噁唑(oxazaborole)[(S)-(-)-CBS-硼雜噁唑烷(oxazaborolidine)](在THF中1.0M，1.06ml，1.06mmol)溶于無水四氫呋喃(53.1ml，從鈉/二苯甲酮羰游基蒸餾)。向該溶液中同時(shí)通過注射器泵送(1.6ml/分鐘)加入步驟A的(10，1-二氫-5H-吡咯并[2，1q-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-[(3-氧代-2-甲基環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯基]甲酮(2.18g，5.31mmol)在無水四氫呋喃(20ml)中的溶液和硼烷-四氫呋喃絡(luò)合物(在四氫呋喃中1.0M，3.19ml，3.19mmol)，采用的泵送速率使得在加入大約2/3的硼烷-四氫呋喃絡(luò)合物后結(jié)束烯酮加成。加入硼烷-四氫呋喃絡(luò)合物結(jié)束后，反應(yīng)混合物用水稀釋，用乙酸乙酯萃取。合并的萃取液用1N氫氧化鈉、1N鹽酸和鹽水洗滌，然后用無水硫酸鎂干燥，過濾然后濃縮。殘余物通過在硅膠上的快速色譜提純，用在己烷中的50％乙酸乙酯洗脫，隨后從乙醚中通過加入石油醚沉淀，得到2.02g標(biāo)題化合物白色固體。分析HPLC(Chiralpak AD，4.6×250mm，50％乙醇/己烷，0.5mL/分鐘)顯示對映異構(gòu)過量(enantiomeric excess)96.4％，[α]589＝+34.30(c＝1.0，氯仿)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.45(dd，1H)，7.18-7.14(m，2H)，7.07(t，1H)，6.95(t，1H)，6.88(d，1H)，6.81(t，1H)，6.73(t，1H)，5.93(s，1H)，5.91(t，1H)，5.27(br，2H)，5.25-4.80(br，2H)，3.90-3.84(m，1H)，1.99(d，3H)，1.90(br，2H)，1.75-1.59(m，3H)，1.541.49(m，1H)，1.24(s，3H)。
C27H28N2O2+0.50H2O+0.10C4H10O分析計(jì)算值C 75.60，H 6.81，N 6.53。測量值C 75.52，H 6.92，N 6.54。
MS[(+)-APCI，m/z]413.2[M+H]+.C27H29N2O2計(jì)算值413.2230。
步驟C.10-[4-((3R)-3-羥基-2-甲基-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸步驟B的(10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-[4-((3R)-3-羥基-2-甲基環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯基]-甲酮(0.500g，1.21mmol)和N，N-二異丙基乙基胺(0.442ml，2.54mmol)溶于無水二氯甲烷(12.1ml)。然后滴加三氯乙?；然?0.297ml，2.66mmol)，所述反應(yīng)在室溫下攪拌3.5小時(shí)，用乙酸乙酯稀釋，用1N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥有機(jī)相，過濾然后濃縮。殘余物通過硅膠塞過濾，用在己烷中30％的乙酸乙酯洗脫，然后濃縮濾液，得到粗雙-三氯乙酸酯棕色泡沫。該物質(zhì)溶于丙酮(8.1ml)，用2.5N氫氧化鈉(1.94ml，4.84mmol)處理。在室溫下攪拌2.5小時(shí)之后，反應(yīng)混合物用1N鹽酸(50ml)酸化，然后用乙醚萃取。合并的有機(jī)萃取液用1N氫氧化鈉萃取，合并堿性萃取液，用2N鹽酸酸化。通過酸化，形成沉淀物，過濾然后干燥，得到0.510g標(biāo)題化合物棕色固體，[α]589＝+17.84(c＝1.0，氯仿)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.33(br，1H)，7.33(dd，1H)，7.14-7.11(m，2H)，7.02(t，1H)，6.94(t，1H)，6.82(d，1H)，6.76-6.71(m，2H)，6.09(d，1H)，6.04-5.76(br，2H)，5.44-4.90(br，2H)，4.63(t，1H)，3.89-3.83(m，1H)，1.99(dd，3H)，1.90(br，2H)，1.72-1.59(m，3H)，1.53-1.49(m，1H)，1.25(s，3H)。
C28H28N2O4分析計(jì)算值C 73.66，H 6.18，N 6.14。測量值C 66.75，H 5.97，N 5.04。
MS[(-)-ESI，m/z]455.4[M-H]-.C28H27N2O4計(jì)算值455.1972。
步驟D.10-[4-((3R)-3-羥基-2-甲基-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸甲基-吡啶-3-基甲基酰胺步驟C的10-[4-((3R)-3-羥基-2-甲基環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸(0.250g，0.548mmol)、3-(甲基氨基甲基)吡啶(0.080ml，0.658mmol)、1-羥基苯并三唑(0.081g，0.603mmol)和1-[(3-二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.116g，0.603mmol)在不含胺的N，N-二甲基甲酰胺(2.2ml)中合并，隨后加入N，N-二異丙基乙基胺(0.143ml，0.822mmol)。反應(yīng)在室溫下攪拌18小時(shí)，然后用乙酸乙酯稀釋，用水、飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。合并的含水洗滌液用氯化鈉飽和，然后用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)相，用無水硫酸鈉干燥，過濾然后濃縮。殘余物通過在硅膠上快速色譜提純，用在氯仿中0至8％溶劑梯度的甲醇洗脫，得到0.270g標(biāo)題化合物油，其溶于乙醚然后用石油醚沉淀，得到白色固體，m.p.100-144℃，[α]589＝+18.49(c＝1.0，氯仿)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.54(s，1H)，8.51(dd，1H)，7.72(d，1H)，7.42(dd，1H)，7.37(d，1H)，7.15-7.11(m，2H)，7.02(dt，1H)，6.94(t，1H)，6.83(d，1H)，6.73(t，1H)，6.35(br，1H)，6.04(d，1H)，5.45(s，2H)，5.35-4.85(br，2H)，4.75(s，2H)，4.62(t，1H)，3.89-3.84(m，1H)，3.04(s，3H)，1.99(d，3H)，1.90(br，2H)，1.76-1.60(m，3H)，1.54-1.51(m，1H)，1.25(s，3H)。
C35H36N4O3+0.15C4H10O分析計(jì)算值C 73.52，H 6.35，N 9.80；測量值C 73.68，H 6.67，N 9.42。
MS[(+)-ESI，m/z]561.3[M+H]+.C35H37N4O3計(jì)算值561.2867。
實(shí)施例410-[4-((3R)-3-羥基-2-甲基-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸甲基-吡啶-3-基甲基酰胺L-(+)-酒石酸鹽實(shí)施例3的10-[4-((3R)-3-羥基-2-甲基-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸甲基-吡啶-3-基甲基酰胺(0.120g，0.214mmol)溶于沸騰的乙醚。加入L-(+)-酒石酸(0.0320g，0.214mmol)在熱甲醇(1ml)中的溶液，冷卻混合物然后蒸發(fā)溶劑。將乙醚加入所述殘余物，形成白色固體，其過濾然后在真空中干燥，得到0.152g標(biāo)題化合物酒石酸鹽。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.67(br，2H)，8.54(s，1H)，8.51(dd，1H)，7.72(d，1H)，7.42(dd，1H)，7.37(d，1H)，7.13-7.11(m，2H)，7.02(t，1H)，6.94(t，1H)，6.83(d，J1H)，6.73(t，1H)，6.35(br，1H)，6.05(d，1H)，5.46(s，2H)，5.07(br，4H)，4.75(s，2H)，4.63(br，1H)，4.30(s，2H)，3.86(d，1H)，3.04(s，3H)，1.99(d，3H)，1.90(bs，2H)，1.77-1.60(m，3H)，1.56-1.50(m，1H)，1.24(s，3H)。
C35H36N4O3+1.00C4H6O6+0.33C4H10O分析計(jì)算值C 63.71，H5.76，N 7.62。測量值C 63.00，H 6.14，N 6.91。
MS[(+)-ESI，m/z]561.2[M+H]+.C35H37N4O3計(jì)算值561.2867。
實(shí)施例510-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-N-(2-吡啶基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺步驟A.(10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-(4-溴-3-甲基-苯基)-甲酮向4-溴-3-甲基苯甲酸(21.5g，100mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(0.251ml，3.00mmol)在無水二氯甲烷(200ml)的攪拌的混合物中滴加草酰氯(9.16ml，105mmol)。加熱混合物至回流1.5小時(shí)，然后冷卻至室溫，蒸發(fā)溶劑。加入新鮮的無水二氯甲烷(200ml)，濃縮所得溶液，殘余物在真空中干燥。由此得到的粗酰氯和10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜(17.5g，95.0mmol)在無水二氯甲烷(200ml)中合并，隨后加入N，N-二異丙基乙基胺(19.2ml，3.46mmol)。在室溫下攪拌18小時(shí)之后，反應(yīng)混合物用1N鹽酸、1N氫氧化鈉和鹽水洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機(jī)相，過濾然后濃縮，得到粗酰胺，其從乙酸乙酯重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物淡橙色晶體(34.8g)，m.p.175-176℃。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.45(dd，1H)，7.38(d，1H)，7.33(d，1H)，7.18(dt，1H)，7.10(t，1H)，6.92(s，1H)，6.90(s，1H)，6.82(t，1H)，5.94(s，1H)，5.91(t，1H)，5.27-4.80(br，4H)，2.22(s，3H)。
C20H17BrN2O+0.20H2O分析計(jì)算值C 62.42，H 4.56，N 7.28。測量值C 62.43，H 4.60，N 7.24。
MS[(+)-ESI，m/z]381[M+H]+.C20H18BrN2O計(jì)算值381.0598。
步驟B.(10，11-二氫-3H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-[3-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-甲酮步驟A的(10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-(2-溴-3-甲基苯基)-甲酮(20.0g，52.5mmol)、雙(頻那醇合)二硼(14.7g，57.8mmol)、乙酸鉀(15.5g，158mmol)和二氯-[1，1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物(1.29g，1.58mmol)中無水二甲亞砜(263ml)中合并，然后加熱到80℃保持18小時(shí)。反應(yīng)冷卻至室溫，然后加入另外的催化劑(1.29g，1.58mmol)和雙(頻那醇合)二硼(3.33g，13.1mmol)。重新在80℃開始加熱另外18小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物至室溫，用乙酸乙酯(500ml)稀釋，通過硅膠過濾。用水和鹽水洗滌濾液。用無水硫酸鈉干燥有機(jī)相，用己烷稀釋，通過二氧化硅凝膠塞過濾。濃縮濾液得到油，加入戊烷使產(chǎn)物結(jié)晶。過濾黃白色晶體，在真空中干燥，得到18.4g標(biāo)題化合物，m.p.190-193℃。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.45(dd，1H)，7.39(d，1H)，7.18-7.06(m，3H)，6.98(d，1H)，6.91(br，1H)，6.81(t，1H)，5.94(br，1H)，5.91(t，1H)，5.33-4.60(br，4H)，2.32(s，3H)，1.25(s，12H).
C26H29BN2O3+0.12C4H8O2分析計(jì)算值C 72.46，H 6.88，N 6.38。測量值C 70.80，H 6.83，N 6.06。
MS[(+)-ESI，m/z]429[M+H]+.C26H30BN2O3計(jì)算值429.2348。
步驟C.(10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基-苯基)-甲酮步驟B的(10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-[3-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-甲酮(3.50g，8.17mmol)、環(huán)己-1-烯-1-基三氟甲烷磺酸酯(2.26g，9.80mmol)和二氯[1，1’雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物(0.200g，0.245mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(40.9ml)中合并。加入碳酸鈉水溶液(2M，20.5ml，40.9mmol)，反應(yīng)加熱至60℃過夜。冷卻至室溫后，所述反應(yīng)混合物用乙酸乙酯洗滌，有機(jī)層用水和鹽水洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機(jī)相，過濾然后濃縮。殘余物溶于熱乙酸乙酯/石油醚(1∶1)然后過濾。濃縮濾液然后從石油醚重結(jié)晶殘余物，得到2.52g標(biāo)題化合物淺棕色晶體，m.p.182-183℃。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.47(dd，1H)，7.21-7.10(m，3H)，6.93(d，2H)，6.83(d，1H)，6.81(t，1H)，5.93-5.91(m，2H)，5.43(m，1H)，5.26(br，2H)，5.20-4.80(br，2H)，2.11(s，3H)，2.09-2.05(m，4H)，1.67-1.56(m，4H)。
C26H26N2O+0.15H2O分析計(jì)算值C 81.07，H 6.88，N 7.27。測量值C 81.03，H 6.86，N 7.24。
MS[(+)-ESI，m/z]383[M+H]+.C26H27N2O計(jì)算值383.2128。
步驟D.2，2，2-三氯-1-[10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-基]-甲酮步驟C的(10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-10-基)-(4-環(huán)己-1-烯基-3-甲基苯基)-甲酮(1.03g，2.69mmol)和N，N-二異丙基乙基胺(0.937ml 5.38mmol)溶于無水二氯甲烷(13.5ml)，然后滴加三氯乙?；然?0.901ml，8.07mmol)。反應(yīng)在室溫下攪拌3小時(shí)，然后蒸發(fā)溶劑。殘余物用乙酸乙酯稀釋然后通過硅膠塞過濾。濾液用0.1N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾然后濃縮。殘余物從乙酸乙酯/己烷結(jié)晶，得到1.41g標(biāo)題化合物白色晶體，m.p.149-150℃。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.46-7.43(m，2H)，7.21-7.16(m，2H)，7.12(dt，1H)，6.95-6.90(m，2H)，6.85(d，1H)，6.34(d，1H)，5.95(br，2H)，5.44(m，1H)，5.27(br，2H)，2.12(s，3H)，2.10-2.05(m，4H)，1.68-1.55(m，4H)。
C28H25Cl3N2O2分析計(jì)算值C 63.71，H 4.77，N 5.31。測量值C63.35，H 4.62，N 5.24。
MS[(+)-ESI，m/z]527.2[M+H]+.C28H26Cl3N2O2計(jì)算值527.1058。
步驟E.10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸步驟D的2，2，2-三氯-1-[10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基苯甲酰基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-基]-甲酮(0.700g、1.33mmol)溶于丙酮(8.9ml)，隨后加入2.5N氫氧化鈉(1.60ml、3.99mmol)。反應(yīng)在室溫下攪拌3小時(shí)，用2N鹽酸酸化。用乙醚萃取酸性混合物，用1N氫氧化鈉萃取有機(jī)相。合并的堿性萃取液用2N鹽酸酸化，用乙醚萃取。萃取液用無水硫酸鈉干燥，過濾然后濃縮。殘余物從乙醚重結(jié)晶，得到0.450g標(biāo)題化合物白色晶體，193℃(分解)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.31(s，1H)，7.35(dd，1H)，7.17-7.13(m，2H)，7.07(dt，1H)，6.91(dd，1H)，6.85(t，2H)，6.75(d，1H)，6.08(d，1H)，5.92(br，2H)，5.43(m，1H)，5.14(br，2H)，2.11(s，3H)，2.10-2.05(m，4H)，1.67-1.55(m，4H)。
C27H26N2O3的分析計(jì)算值C 76.03，H 6.14，N 6.57。測量值C75.71，H 6.16，N 6.48。
MS[(-)-ESI，m/z]425.2[M-H]-.C27H25N2O3計(jì)算值425.1862。
步驟F.10-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-N-(2-吡啶基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺按實(shí)施例3步驟D的方法，通過將實(shí)施例5步驟E的10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基苯甲酰基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸用[(2-吡啶基)甲基]胺酰化制備。
HRMS[(+)-ESI，m/z]517.25972[M+H]+.C33H33N4O2計(jì)算值517.25981實(shí)施例610-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-N-(3-吡啶基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺按實(shí)施例3步驟D的方法，通過將實(shí)施例5步驟E的10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸用[(3-吡啶基)甲基]胺?；苽?。
HRMS[(+)-ESI，m/z]517.25943[M+H]+.C33H33N4O2計(jì)算值517.25981實(shí)施例710-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-N-(2-(2-吡啶基)乙基)-10，1 1-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺按實(shí)施例3步驟D的方法，通過將實(shí)施例5步驟E的10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基苯甲酰基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸用[(2-吡啶基)乙基]胺酰化制備。
HRMS[(+)-ESI，m/z]531.27522[M+H]+.C34H35N4O2計(jì)算值531.27546。
實(shí)施例810-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-N-甲基-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺按實(shí)施例3步驟D的方法，通過將實(shí)施例5步驟E的10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸用N-甲基-N-[2-(2-吡啶基)乙基]胺?；苽洹?br> HRMS[(+)-ESI，m/z]545.29048[M+H]+.C35H37N4O2計(jì)算值545.29111實(shí)施例9{10-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲酰基]-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-基}[4-(2-吡啶基)-1-哌嗪基]甲酮按實(shí)施例3步驟D的方法，通過將實(shí)施例5步驟E的10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-2-甲基苯甲酰基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-2-羧酸用4-(2-吡啶基)-1-哌嗪?；苽?。
HRMS[(+)-ESI，m/z]572.30182[M+H]+.C36H38N5O2計(jì)算值572.30201。
實(shí)施例1010-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-N-(4-吡啶基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺按實(shí)施例3步驟D的方法，通過將實(shí)施例5步驟E的10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基苯甲酰基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-4-羧酸用[(4-吡啶基)甲基]胺?；苽?。
HRMS[(+)-ESI，m/z]517.25954[M+H]+.C33H33N4O2計(jì)算值517.25981。
實(shí)施例1110-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-N-甲基-N-(3-吡啶基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺按實(shí)施例3步驟D的方法，通過將實(shí)施例5步驟E的10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸用N-甲基-N-[(3-吡啶基)甲基]胺?；苽?。
HRMS[(+)-ESI，m/z]531.27554[M+H]+.C34H35N4O2計(jì)算值531.27546。
實(shí)施例12{10-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-基}[4-(4-吡啶基)-1-哌嗪基]甲酮按實(shí)施例3步驟D的方法，通過將實(shí)施例5步驟E的10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸用4-(4-吡啶基)-1-哌嗪?；苽?。
HRMS[(+)-ESI，m/z]572.30113[M+H]+.C36H38N5O2計(jì)算值572.30201。
實(shí)施例1310-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；鵠-N-甲基-N-[2-(4-吡啶基)乙基]-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺按照實(shí)施例3步驟D的方法，通過將實(shí)施例5步驟E的10-(4-環(huán)己-1-烯基-3-甲基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸用N-甲基-N-[2-(4-吡啶基)乙基]胺?；苽?。
HRMS[(+)-ESI，m/z]545.29081[M+H]+.C35H37N4O2計(jì)算值545.2911權(quán)利要求
1.通式(I)的化合物 其中 是 或 R1和R2獨(dú)立地選自氫、(C1-C6)烷基、鹵素、氰基、三氟甲基、羥基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、-OCF3、(C1-C6烷氧基)羰基、-NHCO[(C1-C6)烷基]、羧基、-CONH2、-CONH(C1-C6)烷基或-CON[(C1-C6)烷基]2；R3是取代基，選自氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羥基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、-CO(C1-C6)烷基或鹵素；R4由部分B-C組成；其中B選自基團(tuán) 或 C定義為 或 其中A是CH或N；R5、R6、R7和R8獨(dú)立地選自氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羥基(C1-C6)烷基、低級烷氧基(C1-C6)烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、(C1-C6烷基)羰基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)鏈炔基、(C3-C8)環(huán)烷基、甲?；?、(C3-C8)環(huán)烷基羰基、羧基、低級烷氧基羰基、(C3-C8)環(huán)烷基氧羰基、(芳基低級烷基)氧羰基、氨基甲?；?、-O-CH2-CH＝CH2、鹵素、包括三氟甲基的鹵代低級烷基、-OCF3、-S(低級烷基)、-OC(O)N[低級烷基]2、-CONH(低級烷基)、-CON[低級烷基]2、低級烷基氨基、二低級烷基-氨基、二低級烷基氨基低級烷基、羥基、氰基、三氟甲基硫基、硝基、氨基、低級烷基磺?；?、氨基磺酰基、低級烷基氨基磺?；?苯基或萘基；R9選自氫、低級烷基、羥基(C1-C6)烷基、低級烷氧基(C1-C6)烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、(低級烷氧基)羰基、-CON[(C1-C6)烷基]2、氰基；或任選被鹵素或低級烷氧基取代的芳基；R10表示一至兩個(gè)獨(dú)立選擇的取代基，其選自氫、低級烷基、低級烷基羰基、 疊氮基、氨基、-NH[低級烷基]、-N[低級烷基]2、氨基羰基低級烷基、苯二酰亞氨基、氰基、鹵素、硫代低級烷基、芳氧基、芳基硫、任選被一個(gè)至三個(gè)選自(C1-C6)烷基、低級烷氧基或鹵素的取代基取代的芳基；羥基、低級烷氧基、-OSO2R17或OP’，其中P’是叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基、羰基低級烷基、羰基三氟代低級烷基、芳基低級烷基、芳基羰基、甲氧基甲基或甲硫基甲基；前提條件是當(dāng)R10表示兩個(gè)取代基時(shí)，所述兩個(gè)取代基可以和它們所連接的環(huán)己烯環(huán)一起形成一個(gè)C7-C12雙環(huán)體系；R11選自氫或(C1-C6)烷基；和R選自任何下列基團(tuán) 其中R12選自氫、(C1-C6)烷基、氰乙基或 R13和R14獨(dú)立地選自氫或(C1-C6)烷基；R15是一個(gè)或兩個(gè)取代基，其獨(dú)立地選自氫、(C1-C6)烷基、鹵素、三氟甲基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6烷氧基)羰基或 R16表示一至兩個(gè)取代基，獨(dú)立地選自氫或(C1-C6)烷基；R17選自氫、(C1-C6)烷基、三氟低級烷基或任選被低級烷基取代的芳基；m是0至2的整數(shù)；n是1至2的整數(shù)；和p是0至1的整數(shù)；和其可藥用鹽或其前藥形式。
2.下式的權(quán)利要求1的化合物 其中 是 或 R1和R2獨(dú)立地選自氫、(C1-C6)烷基、鹵素、氰基、三氟甲基、羥基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、-OCF3、(C1-C6烷氧基)羰基、-NHCO[(C1-C6)烷基]、羧基、-CONH2、-CONH(C1-C6)烷基或-CON[(C1-C6)烷基]2；R3是取代基，選自氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羥基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、-CO(C1-C6)烷基或鹵素；R4由部分B-C組成；其中B選自基團(tuán) 或 和C定義為 或 其中A是CH或N；R5、R6、R7和R8獨(dú)立選自H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羥基(C1-C6)烷基、低級烷氧基(C1-C6)烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、(C1-C6烷基)羰基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)鏈炔基、(C3-C8)環(huán)烷基、甲?；?、(C3-C8環(huán)烷基)羰基、羧基、(低級烷氧基)羰基、(C3-C8環(huán)烷基)氧基羰基、氨基甲?；?、-O-CH2-CH＝CH2、鹵素、包括三氟甲基的鹵代低級烷基、-OCF3、-S(低級烷基)、-OC(O)N[低級烷基]2、-CONH(低級烷基)、-CON[低級烷基]2、低級烷基氨基、二低級烷基氨基、低級烷基二低級烷基氨基、羥基、氰基、三氟甲基硫基、硝基、氨基、低級烷基磺?；?、氨基磺酰基或低級烷基氨基磺?；?；R9選自H、低級烷基、羥基(C1-C6)烷基、烷氧基(C1-C6)烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、(低級烷氧基)羰基、-CON[(C1-C6)烷基]2或氰基；R10表示一至兩個(gè)獨(dú)立選擇的取代基，其選自氫、低級烷基、羥基(C1-C6)烷基、低級烷氧基(C1-C6)烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、低級烷基羰基、疊氮基、氨基、-NH[低級烷基]、-N[低級烷基]2、氨基羰基低級烷基、苯二酰亞氨基、氰基、鹵素、硫代低級烷基、芳氧基、芳基硫、羥基、低級烷氧基、-OSO2R17，或OP’，其中P’是叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基、羰基低級烷基、羰基三氟代低級烷基、甲氧基甲基或甲硫基甲基；R11選自氫或(C1-C6)烷基；和R選自任何下列基團(tuán) 或 其中R12選自氫、(C1-C6)烷基或氰乙基；R13和R14獨(dú)立選自氫或(C1-C6)烷基；R15是一個(gè)或兩個(gè)取代基，其獨(dú)立地選自氫、(C1-C6)烷基、鹵素、三氟甲基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6烷氧基)羰基；R16和R16’獨(dú)立地選自氫或(C1-C6)烷基；m是0至2的整數(shù)；和p是0至1的整數(shù)；或其可藥用鹽或其前藥形式。
3.權(quán)利要求書1的化合物，選自a)10-(5-氯-4-環(huán)己-1-烯-1-基-2-甲氧基苯甲?；?-N-甲基-N-(吡啶-3-基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺；b)10-(5-氯-4-環(huán)己-1-烯-1-基-2-甲氧基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸；c)10-[4-((3R)-3-羥基-2-甲基-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基-苯甲酰基]-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸甲基-吡啶-3-基甲基酰胺；d)10-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；?-N-(2-吡啶基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺；或e)2，2，2-三氯-1-[10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-基]-甲酮；或其可藥用鹽。
4.權(quán)利要求1的化合物，選自a)10-(4-環(huán)己-1-烯-1-基-3-甲基苯甲?；?-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酸；b)10-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；?-N-(3-吡啶基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺；c)10-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；?-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺；d)10-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；?-N-甲基-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-d][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺；或e){10-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲酰基]-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-基}[4-(2-吡啶基)-1-哌嗪基]甲酮；或其可藥用鹽。
5.權(quán)利要求1的化合物，選自a)10-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；?-N-(4-吡啶基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺；b)10-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；?-N-甲基-N-(3-吡啶基甲基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺；c){10-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲酰基)-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-3-基}[4-(4-吡啶基)-1-哌嗪基]甲酮；或d)10-[4-(1-環(huán)己-1-烯-1-基)-3-甲基苯甲?；?-N-甲基-N-[2-(4-吡啶基)乙基]-10，11-二氫-5H-吡咯并[2，1-d][1，4]苯并二氮雜-3-羧酰胺；或其可藥用鹽。
6.一種藥物組合物，含有權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的化合物或其可藥用鹽或其前藥，以及可藥用載體或賦形劑。
7.一種用于抑制或防止早產(chǎn)、痛經(jīng)、子宮內(nèi)膜炎以及用于抑制哺乳動物剖腹產(chǎn)分娩前分娩的方法，所述方法包括給予需要的哺乳動物制藥有效量的權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的化合物和其可藥用鹽或其前藥。
全文摘要
本發(fā)明提供新的三環(huán)吡啶基羧酰胺以及方法和利用它們的藥物組合物，其用于處理和/或預(yù)防和/或抑制病癥，這些病癥可以通過催產(chǎn)素拮抗劑活性醫(yī)治或減輕，包括預(yù)防和/或抑制早產(chǎn)、抑制剖腹產(chǎn)分娩前的足月分娩以及用于治療痛經(jīng)。這些化合物還用于為農(nóng)畜提高受胎率、提高生存率和協(xié)調(diào)動情期；可以用于預(yù)防和醫(yī)治中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)催產(chǎn)素體系的機(jī)能失調(diào)，包括強(qiáng)迫癥(OCD)和神經(jīng)精神病學(xué)障礙。
文檔編號A61P5/24GK1501930SQ02808033
公開日2004年6月2日 申請日期2002年4月11日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月12日
發(fā)明者阿米德·阿圖羅·法伊利, 威廉·詹寧斯·桑德斯, 尤金·約翰·特雷布爾斯基, 約翰 特雷布爾斯基, 詹寧斯 桑德斯, 阿米德 阿圖羅 法伊利 申請人:惠氏公司