專利名稱：透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的應(yīng)用，特別是將透明質(zhì)酸作為一種用于提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀組合物中的主要功效成份的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
透明質(zhì)酸是人和動物體內(nèi)不可缺少的一種高分子生物粘多糖物質(zhì)，主要構(gòu)成為葡萄糖醛酸和乙酰氨基葡萄糖。透明質(zhì)酸廣泛存在于人和動物體內(nèi)的各種組織和細(xì)胞外基質(zhì)及細(xì)胞信息傳遞蛋白聚糖鏈中，從結(jié)締組織、皮膚、血清、眼玻璃體中都無處不在。透明質(zhì)酸由美國學(xué)者M(jìn)eyer和Palmer于1934年首先從牛眼中分離出來，經(jīng)幾代學(xué)者的研究，真正形成規(guī)?；a(chǎn)則是在90年代由Hatanaku等發(fā)明了用生物發(fā)酵法制取透明質(zhì)酸的方法以后。已有對透明質(zhì)酸的應(yīng)用，大多側(cè)重于眼科、外科創(chuàng)傷、護(hù)膚，以及肝功能檢測等疾病的臨床診斷。我國對透明質(zhì)酸的開發(fā)利用主要局限于眼科和保濕護(hù)膚等外用方面。本發(fā)明人經(jīng)過多年潛心研究實驗，首次發(fā)現(xiàn)了透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的顯著功效，并將其應(yīng)用于保健食品，并在應(yīng)用中取得了良好的成效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種透明質(zhì)酸的新用途，即透明質(zhì)酸在提高人體免疫力，改善免疫力缺乏癥狀方面的應(yīng)用，特別是以透明質(zhì)酸為功效成份的組合物，該組合物可用于許多領(lǐng)域，例如藥品、保健品、食品等，且這些產(chǎn)品無毒副作用，提高人體免疫力效果明顯。
本發(fā)明的創(chuàng)造性在于首次發(fā)現(xiàn)了透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的顯著功效，并提供了實現(xiàn)這種功效的方法。本發(fā)明的透明質(zhì)酸可采用口服的方法，例如口服液，也可以是其他劑型，例如片劑，膠囊等形式。本發(fā)明提供的組合劑，除含有一定量的透明質(zhì)酸作為主要功效成份，也可含有藥學(xué)或食物學(xué)中可接受的載體，如果是片劑等可加賦形劑，方法為混合，造粒，壓片等。本發(fā)明提供的透明質(zhì)酸制劑中的其它組份可以是甜味劑，調(diào)味劑，填充劑和其它輔助功效成份。本發(fā)明中的透明質(zhì)酸也可以作為食品添加劑加到食品中使用，例如用作各種飲料的營養(yǎng)添加劑，或固體食品的營養(yǎng)添加劑。
本發(fā)明中透明質(zhì)酸的應(yīng)用方法主要包括給免疫力下降或已經(jīng)具有免疫力缺乏癥狀的人服用一定量的透明質(zhì)酸，其用量為成人每人每天1克～0.001克。優(yōu)選為每人每天0.2克-0.01克。更優(yōu)選為每人每天0.1克-0.03克。
本發(fā)明中，由透明質(zhì)酸作為主要功效成份制得的口服液和其它劑型，經(jīng)國家有關(guān)衛(wèi)生防病中心和有關(guān)研究機(jī)構(gòu)作了多項免疫調(diào)節(jié)作用實驗和毒性實驗，該檢驗系依據(jù)“保健食品功能學(xué)評價程序和檢驗方法”進(jìn)行，具體實驗如下一、免疫調(diào)節(jié)作用實驗1、透明質(zhì)酸制劑對小鼠細(xì)胞免疫功能的影響表1透明質(zhì)酸制劑對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(足趾增厚法)的影響(均值±標(biāo)準(zhǔn)差)

由表1可見，低、中劑量組小鼠攻擊前后足趾厚度差值與對照組比較差異均有顯著性(p＜0.05)表2透明質(zhì)酸制劑對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(耳腫脹法)的影響(均值±標(biāo)準(zhǔn)差)

由表2可見，各劑量組小鼠左右耳重量差值與對照組比較差異無顯著性(p＜0.05)2、透明質(zhì)酸制劑對體液免疫的影響表3透明質(zhì)酸制劑對小鼠半數(shù)溶血值(HC50)的影響(均值±標(biāo)準(zhǔn)差)

由表3可見，各劑量組小鼠半數(shù)溶血與對照組比較差異無顯著性(p＜0.05)表4透明質(zhì)酸制劑對小鼠抗體生成細(xì)胞的影響(均值±標(biāo)準(zhǔn)差)


由表4可見，各劑量組小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)與對照組相比，明顯增加，差異均有顯著性(p＜0.05)表5透明質(zhì)酸制劑對小鼠碳廓清試驗的影響(均值±標(biāo)準(zhǔn)差)

由表5可見，各劑量組小鼠吞噬指數(shù)與對照組比較，差異無顯著性(p＞0.05)3、小結(jié)經(jīng)口給予不同劑量的透明質(zhì)酸制劑20天后，遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)足趾增厚法中，低、中兩個劑量組與對照組相比，攻擊前后足趾厚度差值明顯增加，差異有顯著性(p＜0.05)?？贵w生成細(xì)胞試驗中，低、中、高三個劑量組與對照組相比抗體生成細(xì)胞明顯增加，差異有顯著性(p＜0.05)。其它各劑量組試驗均未見免疫抑制現(xiàn)象。檢驗結(jié)果表明，本樣品具有免疫調(diào)節(jié)作用。
二、動物毒性實驗1、透明質(zhì)酸制劑對大鼠體重、總食物利用率的影響由表1、表2可見，以0.075、0.15、0.30g/kg.bw的透明質(zhì)酸制劑摻入飼料中喂飼大鼠30天，動物未出現(xiàn)拒食現(xiàn)象，各劑量組動物體重及食物利用率與對照組比較，差異均無顯著性(P＞0.05)。
表1、透明質(zhì)酸制劑對大鼠體重影響

表2、透明質(zhì)酸制劑對大鼠總食物利用率的影響劑量 動物數(shù) 體重增重 進(jìn)食量 食物利用率性別(g/kg.bw) (只)(g) (g)(％)0 10134.60±20.49 525.80±30.1825.60±3.580.075 10133.90±16.20 533.90±33.1325.06±2.42雄0.1510135.00±28.44 523.60±56.2125.62±3.490.3 10132.50±23.29 529.40±55.3424.97±3.320 1095.90±31.68471.80±54.8620.17±5.330.075 1097.60±13.15467.80±67.1821.04±2.85雌0.151097.20±28.93477.90±59.9020.00±3.540.3 1096.60±22.12480.30±35.7520.17±4.542、透明質(zhì)酸制劑對大鼠血液學(xué)指標(biāo)和WBC的影響由表3、表4可見各組動物的血紅蛋白、紅細(xì)胞總數(shù)、白細(xì)胞計數(shù)及其分類和WBC均在正常值范圍之內(nèi)。
表3、透明質(zhì)酸制劑30天喂養(yǎng)試驗血液學(xué)檢查結(jié)果劑量 動物數(shù) 血紅蛋白 紅細(xì)胞計數(shù) 白細(xì)胞計數(shù)性別(g/kg.bw) (只) g/L ×1012/L ×109/L0 10104.13±33.44 5.04±1.71 7.61±4.760.075 10124.00±22.21 5.90±0.72 9.80±2.96雄0.15 10121.88±22.24 6.17±1.23 10.10±4.000.310116.00±24.67 6.01±1.31 8.91±3.520 10121.10±14.34 5.94±0.54 9.40±1.290.075 10121.25±30.12 6.57±0.20 10.95±4.67雌0.15 10132.22±16.87 6.81±0.70 11.72±2.580.310107.00±30.80 5.06±1.58 6.74±4.30表4、透明質(zhì)酸制劑對大鼠WBC的影響劑量 動物數(shù)性別中性％淋巴％ 單核％(g/kg.bw)(只)0 10 4.67±3.1587.97±4.799.14±3.370.075 10 6.90±2.1783.45±3.459.65±1.85雄0.15 10 5.89±1.8485.56±2.678.55±1.460.310 4.56±2.3887.45±3.587.99±2.03
0 106.32±2.2584.52±1.769.15±1.850.075 106.84±2.7983.71±4.279.45±2.07雌0.15105.40±1.9086.01±2.108.59±1.720.3 103.40±1.9789.81±4.106.79±2.343、透明質(zhì)酸制劑對大鼠生物指標(biāo)的影響由表5可見各組動物的轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮、膽固醇、血糖、總蛋白及白蛋白均在正常值范圍內(nèi)。
表5、透明質(zhì)酸制劑30天喂養(yǎng)試驗?zāi)┢谏瘷z驗結(jié)果性別劑量動物數(shù) 轉(zhuǎn)氨酶尿素氮 膽固醇 血糖總蛋白 白蛋白(g/kg.b) (只) (U/L) (mmol/L)(mmol/L)(mmol/L) (g/L) (g/L)010101.88±13.93 9.25±0.79 2.29±0.37 2.50±1.08 71.79±6.48 39.03±3.250.0751076.00±14.94 8.58±0.89 2.58±0.58 2.06±0.41 68.01±3.98 38.27±2.16雄0.15 1074.40±9.777.55±1.06 2.56±0.61 2.27±0.48 64.81±2.80 36.51±1.700.3 1076.25±13.83 7.80±1.46 2.52±0.28 2.75±0.54 65.29±3.29 37.20±1.8401076.33±19.26 10.15±1.92 2.35±0.43 2.60±0.75 71.04±2.81 38.98±2.410.0751061.90±16.52 10.47±1.37 2.24±0.40 2.68±1.31 69.53±1.90 38.49±1.22雌0.15 1070.38±19.13 10.67±1.50 2.40±0.63 2.77±0.39 70.20±3.63 39.31±0.790.3 1064.00±8.909.51±1.63 2.13±0.34 3.26±0.45 65.42±3.21 37.37±1.744、對大鼠臟體系數(shù)的影響由表6可見，大體及組織學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)異常，解剖時亦未發(fā)現(xiàn)膀胱、肝總管結(jié)石。將對照組和高劑量組動物的肝、腎、胃、脾及十二指腸做病理學(xué)檢查，未見有意義的病理改變。臟體比值亦在正常值范圍內(nèi)。
表6、透明質(zhì)酸制劑對大鼠臟體系數(shù)的影響劑量動物數(shù)肝/體 腎/體 脾/體性別(g/kg.bw) (只) (％) (％) (％)0 10 3.37±0.360.68±0.060.31±0.070.075 10 3.32±0.210.72±0.070.28±0.06雄0.15 10 3.15±0.220.70±0.080.28±0.080.3 10 3.14±0.370.72±0.050.34±0.070 10 3.58±0.310.77±0.070.31±0.070.075 10 3.39±0.790.74±0.080.29±0.03雌0.15 10 3.42±0.190.75±0.060.31±0.060.3 10 3.40±0.610.82±0.150.32±0.105、透明質(zhì)酸制劑對小鼠臟器/體重比值的影響由表7可見，各劑量組小鼠脾臟、胸腺/體重比值與對照組比較，差異無顯著性。
表7透明質(zhì)酸制劑對小鼠臟器/體重比值的影響(均值±標(biāo)準(zhǔn)差)組別 動物數(shù)胸腺/體重比值脾臟/體重比值P值(ml/kg.bw)(只)(mg/g) (mg/g)對照 154.27±0.72 5.75±0.941.67 153.92±0.94 6.06±1.15＞0.055.00 154.03±0.83 5.57±0.74＞0.0515.00 153.82±0.51 5.56±0.72＞0.056、30天喂養(yǎng)試驗小結(jié)以0.075、0.15、0.30g/kg.bw的透明質(zhì)酸制劑摻入飼料中喂飼大鼠30天。在試驗期間，各組動物長發(fā)育良好，體重、增重及食物利用率與對照組相比，差異均無顯著性(P＞0.05)；血液學(xué)、生化指標(biāo)及臟體比值均在正常值范圍之內(nèi)；大體解剖及病理組織學(xué)檢查均未見異常。表明本品未見明顯的亞慢性毒性作用。
7、急性毒性試驗和三項遺傳毒性試驗小結(jié)經(jīng)透明質(zhì)酸制劑對兩種性別大、小鼠經(jīng)口急性毒性試驗，LD50均大于15g/kg.bw。根據(jù)急性毒性分級，透明質(zhì)酸制劑屬無毒物；經(jīng)三項遺傳毒性試驗(Ames試驗，小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗、小鼠睪丸染色體試驗)，結(jié)果均為陰性。
三、人體研究實驗透明質(zhì)酸口服液制劑，經(jīng)500余人平均3個月以上的連續(xù)服用，普遍反應(yīng)效果良好，特別是在增強(qiáng)人體免疫功能，改善人體免疫力缺乏癥狀方面效果顯著，同時未有一人反映出現(xiàn)毒副作用。
透明質(zhì)酸口服液使用效果評價表

參加本評價試驗的服用者共38人，年齡為35-85歲，每人每天服用1-2支透明質(zhì)酸口服液，每支容量10ml，每支透明質(zhì)酸含量為0.05克，連續(xù)服用一個月。
具體實施例方式
。
實施例1軟膠囊在食用油(橄欖油)90g中加入超精細(xì)透明質(zhì)酸粉5g，攪拌后制成懸浮液，灌入軟膠囊成型，每粒軟膠囊凈重為0.5g或1g，其中含透明質(zhì)酸0.025g或0.05g，用量日服1--2次，每次1--2粒。
實施例2片劑將透明質(zhì)酸5g，營養(yǎng)成份如蘆薈粉或人參粉5g，與低聚糖90g混合均勻后壓制成型，每片凈重0.2g--0.5g，其中含透明質(zhì)酸0.01g--0.025g，用量為日服1--2次，每次1--3片。
實施例3口服液將透明質(zhì)酸5g與純水870g混合，攪拌均勻，將上述物料與蘆薈粉等20g、蜂蜜或糖100g，檸檬酸5g(用于調(diào)PH值4---4.5)，混合攪拌，然后滅菌，灌裝，制得口服液產(chǎn)品，每瓶10ml或20ml，其中含透明質(zhì)酸0.05g或0.1g，每日服1---2次，每次一瓶。
本發(fā)明的優(yōu)點本發(fā)明提供一種透明質(zhì)酸的新用途，即透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的應(yīng)用，它包括給免疫力下降或已經(jīng)具有免疫力缺乏癥狀的人服用透明質(zhì)酸，或者是服用以透明質(zhì)酸為功效成份的組合物，其劑型可以是口服液、片劑、泡騰片、膠囊。該組合物可加工成藥品、保健品、食品等，產(chǎn)品無毒副作用，提高人體免疫力效果明顯。
權(quán)利要求
1.一種透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的應(yīng)用。
2.一種用于提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的方法，包括給免疫力下降或已經(jīng)具有免疫力缺乏癥狀的人服用一定量的透明質(zhì)酸。
3根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的應(yīng)用，其特征在于它是以透明質(zhì)酸為功效成份的組合物。
4.據(jù)權(quán)利要求3所述的一種透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的應(yīng)用，其特征在于給免疫力下降或已經(jīng)具有免疫缺乏癥狀的人服用一定量的含有透明質(zhì)酸的組合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求2或4所述的一種透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的應(yīng)用，其特征在于給免疫力下降或已經(jīng)具有免疫缺乏癥狀的人服用一定量的含有透明質(zhì)酸的組合物，其中透明質(zhì)酸的用量以成人計為1克～0.001克/天/人。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的應(yīng)用，其特征在于給免疫力下降或已經(jīng)具有免疫缺乏癥狀的人服用一定量的含有透明質(zhì)酸的組合物，其中透明質(zhì)酸的用量以成人計為0.2克～0.01克/天/人。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的應(yīng)用，其特征在于給免疫力下降或已經(jīng)具有免疫缺乏癥狀的人服用一定量的含有透明質(zhì)酸的組合物，其中透明質(zhì)酸的用量以成人計為0.1克～0.03克/天/人。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的應(yīng)用，其特征在于所述的以透明質(zhì)酸為功效成份的組合物，其劑型可以是口服液、片劑、泡騰片、膠囊。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種透明質(zhì)酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏癥狀方面的應(yīng)用。它包括給免疫力下降或已經(jīng)具有免疫力缺乏癥狀的人服用透明質(zhì)酸，或者是服用以透明質(zhì)酸為功效成分的組合物，其劑型可以是口服液、片劑、泡騰片、膠囊。該組合物可加工成藥品、保健品、食品等，產(chǎn)品無毒副作用，提高人體免疫力效果明顯。
文檔編號A61K31/728GK1498626SQ02146200
公開日2004年5月26日 申請日期2002年11月4日 優(yōu)先權(quán)日2002年11月4日
發(fā)明者張曉崧 申請人:張曉崧