專利名稱：一種復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及ー種外用抗真菌藥聯(lián)苯芐唑的復(fù)方配方，以及將該復(fù)方制備成ー種新劑型的方法，具體地說是ー種透明穩(wěn)定的水包油型復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
聯(lián)苯芐唑(Bifonazole)為咪唑類抗真菌藥，其抗菌機(jī)制為雙重抑制真菌細(xì)胞膜麥角固醇合成，除與其他咪唑類藥物一祥作用于P450-Ha去甲基外，還作用于羥甲基麩氨酸輔酶A還原酶，具有廣譜抗真菌作用，對(duì)90%的致病真菌有抑制作用。對(duì)皮膚真菌 (例如毛癬菌屬、小抱子菌屬)、酵母菌(例如念球菌屬、瓶形酵母菌、光滑球擬酵母菌)、霉菌 (例如曲霉屬)、絲狀菌、秕糠狀鱗斑霉菌，微小棒狀桿菌等有效，適用于淺表皮膚真菌感染， 如手足癬、體癬、股癬、花斑癬、皮膚念球菌病等。聯(lián)苯芐唑現(xiàn)有乳膏劑、栓劑、溶液、凝膠劑等，聯(lián)苯芐唑化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，脂溶性好，在水中幾乎不溶。把聯(lián)苯芐唑制成局部外用劑型，對(duì)治療部位具有針對(duì)性，能夠提高局部藥物的濃度。以往的技術(shù)都是將其溶于脂溶性半固體基質(zhì)，制成乳膏劑；或是分散于凝膠基質(zhì)中制成凝膠劑，所制備的凝膠劑吸水后不穩(wěn)定，易析出藥物。無論是乳膏劑還是凝膠劑，都存在一個(gè)透皮吸收效率不高的問題，導(dǎo)致治療時(shí)間長，治療效果受到影響。丙酸氯倍他索(Clobetasol Propionate)是目前臨床應(yīng)用的高效外用皮質(zhì)類固醇中藥效較強(qiáng)的ー種，具有抗炎、抗過敏、抗增生、免疫抑制作、抗瘙癢和毛細(xì)血管收縮作用， 其抗炎作用約為氫化可的松的112. 5倍，倍他米松磷酸鈉的2. 3倍，氟輕松的18. 7倍。臨床上用于治療銀屑病、濕疹、足部干裂、斑狀禿發(fā)、神經(jīng)性皮炎、掌跖膿皰病等皮膚疾病。本品不溶于水，臨床上常制成乳膏劑使用，因此透皮吸收效率有限，無疑延長了治療時(shí)間。由于丙酸氯倍他索不宜長期使用，長期用藥可能引起皮質(zhì)功能亢進(jìn)癥，因此大大限制了其在臨床上的應(yīng)用，一種能增加丙酸氯倍他索透皮吸收效率的劑型就顯得極為重要。肉桂醛(Cirmamaldehyde)是ー種醛類有機(jī)化合物，為黃色黏稠狀液體，大量存在于肉桂等植物體內(nèi)，現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，肉桂醛對(duì)真菌有顯著療效，對(duì)22種條件致病性真菌進(jìn)行肉桂醛抗真菌作用研究表明肉桂醛是抗真菌的活性物質(zhì)，主要是通過破壞真菌細(xì)胞壁， 使藥物滲入真菌細(xì)胞內(nèi)，破壞細(xì)胞器而起到殺菌作用。對(duì)大腸桿菌、枯草桿菌及金黃色葡萄菌、白色葡萄球菌、志賀氏痢疾桿菌、傷寒和副傷寒甲桿菌、肺炎球菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌、 炭疽桿菌、腸炎沙門氏菌，霍亂弧菌等有抑制作用。且對(duì)革蘭氏陽性菌殺菌效果顯著，可用于治療多種因細(xì)菌感染引起的疾病。最小抑制濃度(MIC)為0. 02—0. 07ul/ml，對(duì)深部致病真菌，MIC為0. 1-0. 3ul/ml。對(duì)人體無毒或低毒，而對(duì)微生物的繁殖能起到較強(qiáng)的抑制作用，對(duì)黃曲霉、黑曲霉、橘青霉、串珠鐮刀菌、交鏈孢霉、白地霉、酵母，均有強(qiáng)烈的抑菌效果。 目前鮮有將肉桂醛添加于外用抗真菌感染藥物的報(bào)道，肉桂醛不溶于水，限制了將其制成外用藥物的透皮吸收率。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的問題與缺陷，提供ー種溶解性好、透皮吸收效率高、生物利用度高、殺菌抑菌效果好、止癢迅速、物理性質(zhì)穩(wěn)定的復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑。實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的的技術(shù)方法是ー種復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，由下列組分的原料制成表面活性劑30% 40%、助表面活性劑3% 14%、油相5% 10%、聯(lián)苯芐唑0. 8% 2%、丙酸氯倍他索0. 02% 0. 1%、肉桂醛0. 01% 0. 2%、余量為去離子水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100%。制備本發(fā)明藥物的配方優(yōu)選質(zhì)量百分比范圍是表面活性劑30% 36%、助表面活性劑5% 12%、油相6% 9%、聯(lián)苯芐唑0. 8% 1. 5%、丙酸氯倍他索0. 02% 0. 05%、肉桂醛0. 03% 0. 1%、余量為去離子水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100%。制備本發(fā)明藥物的配方最佳質(zhì)量百分比是表面活性劑32%、助表面活性劑9. 5%、 油相7. 42%、聯(lián)苯芐唑1%、丙酸氯倍他索0. 03%、肉桂醛0. 05%、余量為去離子水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100%。所述的表面活性劑是EL-40、RH-40、吐溫-80和泊洛沙姆188中的ー種或幾種的混合物。所述的助表面活性劑是無水乙醇、1，2-丙ニ醇、丙三醇和聚乙ニ醇-400中的一種或幾種的混合物，本發(fā)明無助表面活性劑也能形成澄清透明，穩(wěn)定性好的納米乳。所述的油相為乙酸丁酷、肉豆蔻酸異丙酷、杏仁油、小麥胚芽油、三乙酸甘油酯和乙酸乙酯的ー種或幾種的混合物。本發(fā)明首次將聯(lián)苯芐唑、丙酸氯倍他索、肉桂醛聯(lián)合使用治療真菌感染導(dǎo)致的各種疾病。聯(lián)苯芐唑具有廣譜的抗真菌效果，主要通過抑制真菌細(xì)胞膜麥角固醇合成達(dá)到抑菌效果；肉桂醛破壞真菌細(xì)胞壁，使藥物滲入真菌細(xì)胞內(nèi)，破壞細(xì)胞器而起到殺菌作用；兩者聯(lián)合使用后，不僅對(duì)真菌具有雙重殺菌效果，通過破壞細(xì)胞壁，使聯(lián)苯芐唑更容易滲透到細(xì)胞質(zhì)中，成倍的増加了抗菌的效果。真菌感染時(shí)常伴有嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)，本發(fā)明通過添加強(qiáng)效抗炎藥丙酸氯倍他索，阻止了嚴(yán)重炎癥反應(yīng)的發(fā)生，減輕了患者的痛苦，縮短了療程。 本發(fā)明復(fù)方藥物的治療效果不僅限于殺真菌和抗炎癥，所含有效成分肉桂醛對(duì)于常見的并發(fā)細(xì)菌感染也具有很好的治療效果，丙酸氯倍他索與肉桂醛兼有止癢的作用，對(duì)螨蟲的感染也具有一定的療效。本發(fā)明在采用聯(lián)苯芐唑、丙酸氯倍他索、肉桂醛的復(fù)方的基礎(chǔ)上，將這三種有效成分同時(shí)制成納米乳，同時(shí)增強(qiáng)了三種藥物的透皮吸收率與生物利用度。這并不是將三個(gè)單獨(dú)成分的納米乳的簡單混合，要考慮到整個(gè)體系的穩(wěn)定性、三個(gè)成分的最佳配比、所用溶劑的相溶性等問題。經(jīng)過一系列探索與試驗(yàn)，制備成本發(fā)明ー種透明、穩(wěn)定、療效好的復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑。本發(fā)明還有ー個(gè)目的是提供上述復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑的制備方法，其特征在干，包括以下步驟
(1)稱取配方比例的表面活性剤、助表面活性剤、油相、聯(lián)苯芐唑、丙酸氯倍他索、肉桂醛、去離子水，備用；
(2)將表面活性劑與助表面活性劑混勻，然后加入油相，混勻；
(3)加入聯(lián)苯芐唑，混勻；(4)加入丙酸氯倍他索，混勻；
(5)加入肉桂醛，混勻；
(6)室溫下緩慢加入去離子水，且邊加去離子水邊攪拌，直至形成澄清透明、無色或微黃色、粘度小且流動(dòng)性好的液體，即得。本發(fā)明的一種復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑適用于治療淺表皮膚真菌感染(如手足癬，體、股癬，花斑癬，皮膚念珠菌病等)以及真菌性甲溝炎和念珠性外陰陰道炎，對(duì)外耳炎、 細(xì)菌性皮膚感染也有效。用法外用，涂搽于洗浄的患處，早晩各1次，癥狀消失后應(yīng)繼續(xù)用藥5 10天，以防復(fù)發(fā)。本發(fā)明經(jīng)透射電子顯微鏡檢測(cè)，液滴直徑分布在1 100 nm之間，外觀為黃色或無色透明液體，具有很好的穩(wěn)定性
1.經(jīng)時(shí)穩(wěn)定性
經(jīng)時(shí)穩(wěn)定性是指納米乳在室溫自然變化條件下貯藏時(shí)，外觀隨時(shí)間延長而發(fā)生變化的程度。該復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑持久透明，未發(fā)現(xiàn)渾濁或沉淀，說明其經(jīng)時(shí)穩(wěn)定性好。2.熱貯穩(wěn)定性
將該復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑置于試管，密封，置于37°C恒溫水浴箱中儲(chǔ)存14天，該液貯存后外觀透明。3.抗冷凍穩(wěn)定性
將該復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑于_4°C保存一周，取出后恢復(fù)至室溫。該復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑在_4°C時(shí)成固體，恢復(fù)至室溫后其恢復(fù)至透明，且放置一周后仍透明，說明該納米乳狀液抗冷凍性好。4.加速穩(wěn)定性
將該復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑置于試管中，密封，于15000 r/min離心20 min，未分層， 仍澄清透明。本發(fā)明的一種復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)
1)本發(fā)明復(fù)方納米乳滴粒徑小于100nm，藥物脂溶性高，藥物借助載體極易透過真菌、 細(xì)菌的細(xì)胞壁，能直接在菌體內(nèi)發(fā)揮抗菌或殺菌功能，極大的提高了聯(lián)苯芐唑、肉桂醛、丙酸氯倍他索的藥效，縮短了起效時(shí)間，從而減少了藥物的攝入量；
2)本發(fā)明由納米乳包裹的三種有效成分具有緩釋作用，不僅起效快，且藥物作用持續(xù)時(shí)間長；
3)針對(duì)真菌感染發(fā)病的特點(diǎn)，本發(fā)明同時(shí)具有殺真菌、殺細(xì)菌、抗炎、止癢、鎮(zhèn)痛、抑菌的多重作用，極大的減輕了患者的痛苦；
4)將本品涂抹于皮膚吸收迅速，輕輕拍打后可吸收完全，看不出涂藥痕跡；
5)無油膩感，無悶濕感，不會(huì)污染衣物，有淡淡類似桂皮的清香氣味；
6)熱力學(xué)穩(wěn)定性好，貯存穩(wěn)定性高，外觀澄清透明，藥物不會(huì)析出，感官品質(zhì)高；
7)制備エ藝簡單，適合規(guī)模化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式以下通過藥效學(xué)試驗(yàn)和對(duì)比試驗(yàn)來進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述藥物的有益效果。(所用納米乳配方為制備本發(fā)明藥物的配方最佳質(zhì)量百分比表面活性劑32%、助表面活性劑 9. 5%、油相7. 42%、聯(lián)苯芐唑1%、丙酸氯倍他索0. 03%、肉桂醛0. 05%、去離子水50%)。試驗(yàn)例1家兔皮膚給藥毒性試驗(yàn)
參考經(jīng)皮膚給藥的毒性試驗(yàn)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)方法取家兔對(duì)只(體重2.0士0.5 kg)隨機(jī)分為4組，分別為I完整皮膚用藥組、II完整皮膚對(duì)照組、III破損皮膚用藥組、IV破損皮膚對(duì)照組，每組6只，雌雄各半。給藥前24h用電推剪在背部脫毛，脫毛面積約150 cm2。破損皮膚組先用75%酒精消毒，然后用無菌刀片在背部脫毛區(qū)劃“井”字，以滲血為度。I、III 組家兔在脫毛區(qū)分別涂抹本發(fā)明ー種復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，II、IV組家兔在脫毛區(qū)分別涂抹生理鹽水形成空白對(duì)照，早晩各一次。給藥后連續(xù)觀察14d，每天觀察兩次，每日觀察動(dòng)物的皮膚毛發(fā)、飲食、ニ便、呼吸、眼和黏膜的變化、精神狀態(tài)，四肢活動(dòng)及死亡情況。如遇死亡，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行尸檢和肉眼觀察，當(dāng)肉眼可見病變吋，應(yīng)進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。結(jié)果顯示 各組家兔皮毛光澤正常，對(duì)家兔的飲食、ニ便、呼吸、眼和黏膜變化。精神狀態(tài)，四肢活動(dòng)均未造成任何影響，破損皮膚家兔均在給藥后第2d開始結(jié)痂，7d左右脫痂痊愈，在觀察期14d 內(nèi)未出現(xiàn)急性毒性反應(yīng)，無一只家兔死亡。結(jié)果表明本發(fā)明ー種復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑經(jīng)皮膚給藥安全無毒。試驗(yàn)例2豚鼠體外抗真菌試驗(yàn)
取100只豚鼠(體重250士50 g)，試驗(yàn)前一天用電推剪在雙側(cè)背部脫毛，脫毛面積為 5X5cm2，用無菌砂紙?jiān)诿撁珔^(qū)中央磨損皮膚2X2cm2，重度滲血。將4種常見皮膚感染真菌 (紅色毛癬菌、犬小孢子菌、石膏樣毛癬菌、白色念珠菌)108CFU/ml菌懸液20μ1涂于皮膚擦傷區(qū)，于第7天，選感染明顯(局部紅腫、滲出、皮膚出現(xiàn)鱗片樣改變)、局部取樣檢測(cè)為陽性的豚鼠84只，隨機(jī)分為7組，每組12只，雌雄各半。I組為本發(fā)明復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑組；II組復(fù)方聯(lián)苯芐唑乙醇溶液組(其中聯(lián)苯芐唑、丙酸氯倍他索、肉桂醛的含量與I組相同);III組單方聯(lián)苯芐唑納米乳組(聯(lián)苯芐唑含量與本發(fā)明相同，自制);IV組單方丙酸氯倍他索納米乳組(丙酸氯倍他索含量與本發(fā)明相同，自制)；V組單方肉桂醛納米乳組(肉桂醛含量與本發(fā)明相同，自制)；VI組市售聯(lián)苯芐唑乳膏組。各組分別取5 mg/kg該組藥物涂抹于患處，每日2次，連續(xù)14天，每周觀察記錄病情。ΥΠ組僅涂抹生理鹽水做陽性對(duì)照。每周觀察有無瘙癢、紅斑、丘疹、水皰、鱗屑、角化、浸漬等臨床癥狀。按照臨床和實(shí)驗(yàn)室觀察指標(biāo)在治療前和14天后分別進(jìn)行評(píng)價(jià)。作療效評(píng)價(jià)時(shí)1) 皮損完全消退或僅遺留色素斑，癢感消失，真菌鏡檢陰性為痊愈；2)皮損消退> 60%，癢感明顯減輕，真菌鏡檢陰性為顯效；3)將痊愈病例與顯效病例合計(jì)為有效病例，計(jì)為有效；4) 皮損消退209Γ60%，癢感較輕，真菌鏡檢陽性為好轉(zhuǎn)；5)皮損消退< 20%或繼續(xù)加重，癢感同前或加劇，真菌鏡檢陽性為無效。試驗(yàn)結(jié)果見表1。表1 一種復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑用于豚鼠體外抗真菌療效對(duì)比試驗(yàn)
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，其特征在干，由下述質(zhì)量百分比的原料制成 表面活性劑30% 40%、助表面活性劑3% 14%、油相5% 10%、聯(lián)苯節(jié)唑0. 8% 2%、丙酸氯倍他索0. 02% 0. 1%、肉桂醛0. 01% 0. 2%、余量為去離子水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100% ；所述的表面活性劑是EL-40、RH-40、吐溫-80和泊洛沙姆188中的ー種或幾種的混合物；所述的助表面活性劑是無水乙醇、1，2-丙ニ醇、丙三醇和聚乙ニ醇-400中的一種或幾種的混合物，本發(fā)明無助表面活性劑也能形成澄清透明，穩(wěn)定性好的納米乳；所述的油相為乙酸丁酷、肉豆蔻酸異丙酷、杏仁油、小麥胚芽油、三乙酸甘油酯和乙酸乙酷的ー種或幾種的混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，其特征在干，由下述質(zhì)量百分比的原料制成表面活性劑30% 36%、助表面活性劑5% 12%、油相6% 9%、聯(lián)苯節(jié)唑0. 8% 1. 5%、 丙酸氯倍他索0. 02% 0. 05%、肉桂醛0. 03% 0. 1%、余量為去離子水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，其特征在干，由下列組分的原料制成表面活性劑32%、助表面活性劑9. 5%、油相7. 42%、聯(lián)苯芐唑1%、丙酸氯倍他索0. 03%、肉桂醛0. 05%、余量為去離子水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的ー種復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，其特征在干，該納米乳的粒徑為1 nm 100 nm。
5.權(quán)利要求1所述的復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑的制備方法，其特征在干，包括以下步驟(1)稱取配方比例的表面活性剤、助表面活性剤、油相、聯(lián)苯芐唑、丙酸氯倍他索、肉桂醛、去離子水，備用；(2)將表面活性劑與助表面活性劑混勻，然后加入油相，混勻；(3)加入聯(lián)苯芐唑，混勻；(4)加入丙酸氯倍他索，混勻；(5)加入肉桂醛，混勻；(6)室溫下緩慢加入去離子水，且邊加去離子水邊攪拌，直至形成澄清透明、無色或微黃色、粘度小且流動(dòng)性好的液體，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種復(fù)方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，該納米乳的粒徑為1nm～100nm，由下述質(zhì)量百分比的原料制成表面活性劑30%～40%、助表面活性劑3%～14%、油相5%～10%、聯(lián)苯芐唑0.8%～2%、丙酸氯倍他索0.02%～0.1%、肉桂醛0.01%～0.2%、余量為去離子水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100%。本發(fā)明具有殺真菌、殺細(xì)菌、抗細(xì)菌、抗真菌、消炎、止癢等多種作用，治療淺表皮膚真菌感染以及真菌性甲溝炎和念珠性外陰陰道炎，對(duì)外耳炎、細(xì)菌性皮膚感染也有效。本發(fā)明制備的復(fù)方納米乳，顯著提高了三種藥物的活性，殺菌止癢效果迅速，不易復(fù)發(fā)，制備簡單，在醫(yī)藥領(lǐng)域有廣闊的市場(chǎng)前景。
文檔編號(hào)A61K31/4174GK102526070SQ20121000090
公開日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2012年1月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月4日
發(fā)明者周瑩, 歐陽五慶, 歐陽伸雨 申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)