專利名稱：治療乳腺增生病的中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于治療乳腺增生病的中藥組合物及其制備方法，具體為治療乳腺增生病的中藥提取物制成的制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
乳腺增生病在中醫(yī)文獻中與“乳癖”的描述相似，最早見于《中藏經(jīng)》。國外1829年Cooper首先記述此病。本病的臨床特征是乳房疼痛和乳房腫塊。由于對本病研究角度和認識水平不同，故有許多不同的命名。目前，國外文獻常用乳腺纖維囊性病，乳腺良性上皮增生病，國內(nèi)常見的名稱有乳腺小葉增生癥，慢性纖維囊性乳腺病，乳腺囊腫增生病等，1978年全國腫瘤防治研究辦公室定名為“乳腺增生病”后國內(nèi)名稱漸趨一致。
乳腺增生病是婦女的常見病、多發(fā)病，發(fā)病率達30～50％。本病有一定的癌變率，嚴重危害廣大婦女的身心健康。治療乳腺增生病，預(yù)防癌變是目前醫(yī)學(xué)界正在研究的一個重要課題。目前西醫(yī)主要采用激素治療，但激素治療周期長，復(fù)發(fā)率高，副作用大，而且會進一步擾亂體內(nèi)激素的平衡。國內(nèi)大多采用中醫(yī)藥治療乳腺增生病。目前市售的治療乳腺增生病的中成藥有天冬素片、乳癖消、乳康片、乳增寧、小金丹，逍遙丸等，主要以疏肝理氣，活血化瘀為主，臨床使用療效多不夠理想。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是研制一種治療乳腺增生病的中藥組合物，使其不但活血化瘀，疏肝理氣，而且補腎溫陽，調(diào)節(jié)垂體-性腺軸的內(nèi)分泌功能，從而達到標(biāo)本兼治，提高療效，減少復(fù)發(fā)的目的。
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題還包括提供一種制備上述治療乳腺增生病中藥組合物的方法，將其制成劑量小、使用方便的現(xiàn)代制劑，該方法應(yīng)重現(xiàn)性好，可工業(yè)化生產(chǎn)。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供技術(shù)方案如下。
一種治療乳腺增生病的藥物組合物，其特征在于，由下述重量比原料組成鹿角3～9份 淫羊藿2.5～7.5份 白芍2.5～7.5份 王不留行2.5～7.5份 郁金2.5～7.5份 丹參4～12份。
所述治療乳腺增生病的藥物組合物，其較好的重量比原料組成為鹿角5～7份 淫羊藿4.0～5.5份 白芍4.0～5.5份 王不留行4.0～5.5份 郁金4.0～5.5份丹參6～10份。
所述治療乳腺增生病的藥物組合物，其特征在于，由下述重量比原料組成鹿角6份 淫羊藿5.0份 白芍5.0份 王不留行5.0份 郁金5.0份 丹參8份。
上述治療乳腺增生病的藥物組合物，其特征在于，所述藥物原料可與藥學(xué)上可接受的輔料混合，制成各種制劑。
一種治療乳腺增生病藥物組合物的制備方法，其特征在于按重量比取原料鹿角3～9份 淫羊藿2.5～7.5份 白芍2.5～7.5份 王不留行2.5～7.5份 郁金2.5～7.5份 丹參4～12份；將上述原料一并用水或含水乙醇提??；或者，先將鹿角用水提取，濃縮水提取液，得提取物A；再將其余諸藥用水提取，濃縮提取的水液，加乙醇醇沉，使醇濃度為40％-90％，取上清液，濃縮上清液，得提取物B；混合提取物A和提取物B，干燥，得治療乳腺增生病的藥物組合物。
所述治療乳腺增生病藥物組合物的較好的制備方法為按重量比取原料鹿角5～7份 淫羊藿4.0～5.5份 白芍4.0～5.5份 王不留行4.0～5.5份 郁金4.0～5.5份 丹參6～10份；先將鹿角用水提取，濃縮水提取液，得提取物A；再將其余諸藥用水提取，提取的水液濃縮至70-80℃溫度條件下相對密度為1.05～1.45時，加乙醇醇沉，使醇濃度為50％-80％，取上清液，濃縮上清液，得提取物B；混合提取物A和提取物B，干燥，得治療乳腺增生病藥物組合物。
所述治療乳腺增生病藥物組合物的制備方法，其特征在于按重量比取原料鹿角6份 淫羊藿5.0份 白芍5.0份 王不留行5.0份 郁金5.0份 丹參8份；先將鹿角用水回流提取，濃縮水提取液至70-80℃溫度條件下相對密度為1.10時，得提取物A；再將其余諸藥用水回流提取，提取的水液濃縮至70-80℃溫度條件下相對密度為1.15時，加乙醇醇沉，使醇濃度為70％，取上清液，濃縮上清液，得提取物B；混合提取物A和提取物B，干燥，得治療乳腺增生病藥物組合物。
上述治療乳腺增生病藥物組合物的制備方法，其中鹿角用水回流提取后的藥渣，還可加入其余諸藥中，再次用水提取。
所述治療乳腺增生病藥物組合物的制備方法，其特征在于混合提取物A和提取物B，可再與藥學(xué)上可接受的輔料混合，制成各種治療乳腺增生病藥物制劑。可以經(jīng)過濕法制?；蚋煞ㄖ屏?，再壓成片劑、灌制膠囊或制成顆粒劑、微囊劑。
本發(fā)明研制的治療乳腺增生病的中藥組合物，下簡稱“乳康舒”，不但活血化瘀，疏肝理氣，而且補腎溫陽，調(diào)節(jié)垂體-性腺軸的內(nèi)分泌功能，從而標(biāo)本兼治，提高療效，減少了復(fù)發(fā)，為臨床提供了療效良好的治療乳腺增生病的有效制劑。
發(fā)明人數(shù)十年來一直致力于乳腺增生病的研究，總結(jié)開發(fā)和挖掘名老中醫(yī)經(jīng)驗，以中西醫(yī)結(jié)合來研究乳腺增生病的發(fā)病機制，結(jié)合病機建立了以補腎疏肝，行氣活血，調(diào)理沖任的組方原則，在中醫(yī)中藥防治乳腺增生病的理論、方法及療效上均有新的突破。
發(fā)明人選用目前臨床療效較為肯定的且功用主治與乳康舒藥物相近的藥物“乳增寧”作了療效對比，觀察了乳康舒治療乳腺增生病的療效，并還結(jié)合近年來國內(nèi)外的研究成果與科學(xué)的技術(shù)手段進展深入進行了實驗研究。
臨床研究證明乳康舒治療乳腺增生病的止痛和消塊療效，顯著高于乳增寧對照組，同時乳康舒還具有對黃體期內(nèi)分泌失調(diào)的調(diào)節(jié)作用。
1、乳康舒治療乳腺增生病的止痛和消塊療效。臨床觀察治療30例乳腺增生病患者，發(fā)現(xiàn)乳康舒臨床療效較好。疼痛消失23例，臨床痊愈率76.67％；腫塊消失17例，臨床痊愈率56.67％，總有效率96.67％；其臨床疼痛痊愈率及腫塊消退痊愈率顯著高于乳增寧對照組(30例)止痛痊愈率46.67％和消塊率40.00％。
2.乳康舒調(diào)節(jié)內(nèi)分泌的作用。對乳康舒試驗組治療前17例乳腺增生病患者作黃體期E2、P、PRL激素檢測，E2無明顯升高，P異常低者5例，9例PRL值明顯升高。治療后PRL值較治療前明顯下降(P＜0.05)，其中9例PRL值異常升高者均下降至正常值范圍內(nèi)，P值有升高趨勢，E2、E2/P比值有下降趨勢。說明乳康舒對黃體期內(nèi)分泌失調(diào)有調(diào)節(jié)作用。
與國內(nèi)外同類技術(shù)的比較目前市售的中成藥很多，如乳癖消，天冬素片，小金丹，逍遙丸，乳康片等，主要以疏肝理氣，活血化瘀為主，臨床使用療效多不理想。乳增寧組方除了活血化瘀，疏肝理氣外，加用了滋陰補腎藥，臨床療效有所提高。乳康舒課題組研究者認為，乳腺增生病的病因病理應(yīng)是腎虛肝郁，沖任失調(diào)，氣滯血瘀，腎虛主要是腎氣(陽)不足。治當(dāng)溫腎疏肝，行氣活血，調(diào)理沖任，止痛散結(jié)。
具體臨床與藥理實驗方法與數(shù)據(jù)如下。
一、臨床研究(一)、試驗方法1、試驗設(shè)計采用隨機分組法。
2、病例數(shù)1∶1對照，總例數(shù)60例。
3、對照對照組選用功用主治與試驗藥物相近，目前國內(nèi)療效較為肯定的同類藥物，符合公認，同類可比原則。(二)、治療方案1、藥品來源(1)試驗藥品本發(fā)明“乳康舒”膠囊。
(2)對照組藥品乳增寧片，由深圳三順制藥有限公司生產(chǎn)。據(jù)國家新藥注冊數(shù)據(jù)庫(1985-2000)資料檢索，乳增寧片的配方主要由艾葉、淫羊藿、天冬、柴胡(醋制)等組成；功能主治疏肝解郁，調(diào)理沖任。用于肝郁氣滯、沖任失調(diào)引起的乳痛癥及乳腺增生等癥。
2、服用方法(1)試驗藥品乳康舒膠囊，口服，每次3粒，1日3次，經(jīng)期停服。
(2)對照藥品乳增寧片，口服，每次3片，1日3次，經(jīng)期停服。
(3)療程服藥一個月經(jīng)周期為1個療程，可連服2～3個療程。觀察時間為月經(jīng)周期的同一時點±2天，連續(xù)觀察時間為2～4個月經(jīng)周期。
(4)合并用藥除試驗外，觀察期間禁止使用其它治療乳腺增生病有關(guān)的中藥和西藥。合并疾病所必須繼續(xù)服用的藥物，或其他治療必須在病例報告表中記錄藥名(或其它療法名)，用量，使用次數(shù)和時間等，以便總結(jié)時加以分析和報告。(三)觀察項目及指標(biāo)1、診斷指標(biāo)西醫(yī)診斷(乳腺增生病)，中醫(yī)辨證(腎虛肝郁、沖任失調(diào)證)病程，舌苔、脈象。
2、療效及安全性指標(biāo)(1)診斷性觀察癥狀、體征；必要時作B超、X線鉬靶、CT檢查。
(2)療效性觀察a、主要指標(biāo)主癥(乳房疼痛、乳房腫塊)b、次要指標(biāo)次癥(胸悶不舒、心煩易怒、腰酸乏力、月經(jīng)失調(diào))(3)安全性觀察a、血(HGB、RBC、WBC、GRA、PLT)、尿常規(guī)b、心電圖c、肝功能(GPT、GOT)、腎功能(BUN、CRE)(4)觀察時間a、癥狀體征治療前初診首日；經(jīng)治療復(fù)診、再診時間選擇在月經(jīng)初診的同一時點±2天。
b、輔助性的診斷性檢查項目于經(jīng)后期進行，安全性檢查項目治療前后各作1次。
(四)療效評定標(biāo)準(zhǔn)1、療效判斷標(biāo)準(zhǔn)參照衛(wèi)生部1997年制定發(fā)布的第三輯《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》所規(guī)定的療效評定標(biāo)準(zhǔn)。
臨床痊愈乳房疼痛消失，乳房腫塊消失。
顯效乳房疼痛減輕兩個等級或消失，腫塊變軟，“靶腫塊”縮小＞1/2。
有效乳房疼痛減輕一個等級以上或消失，腫塊變軟，“靶腫塊”縮小≤1/2。
無效乳房疼痛減輕或無變化，腫塊不縮小者。
2、安全性評價標(biāo)準(zhǔn)1級安全，無任何不良反應(yīng)。
2級比較安全，如有不良反應(yīng)，不需作任何處理可繼續(xù)給藥。
3級有安全性問題，有中等程度的不良反應(yīng)，做處理后可繼續(xù)給藥。
4級因不良反應(yīng)中止試驗。
(五)、試驗結(jié)果試驗病例情況表1試驗病例情況入組病例數(shù)脫落例數(shù)(％)剔除例數(shù)(％)試驗例數(shù)試驗組對照組60 0 0 60 3030兩組試驗基線可比性分析1.年齡組別表2年齡組別年齡(周歲) 試驗組(30例) 對照組(30例)18-307 831-40151541-508 7x±s35.17±7.53 33.8±6.122.兩組臨床一般情況表3兩組臨床一般情況試驗組(30例) 對照組(30例)病程＜6月(例) 6 76-12月(例) 5 41-3年(例) 9 8＞3年(例) 10 11靶腫塊大小(x±s) 6.60±5.31 6.80±5.04癥侯總記分(x±s) 6.50±1.27 6.35±1.18注靶腫塊大小(cm2)＝靶腫塊長(cm)×靶腫塊寬(cm)表4兩組治療前腫塊質(zhì)地情況軟 中 硬韌試驗組(30例) 11 16 3對照組(30例) 15 13 2(六)主要觀察指標(biāo)結(jié)果及分析1.兩組治療前后腫塊變化表5治療前后乳房靶腫塊大小變化治療前 治療后Med X Med X試驗組 6 6.600.83對照組 5 6.811.62表6兩組治療前后乳房腫塊質(zhì)地的情況治療前治療后軟中硬 軟中硬試驗組1116 3 104 0對照組1513 2 144 02.兩組臨床證侯記分的比較表7兩組臨床癥狀記分平均等級變化情況治療前 治療后試驗組 對照組 試驗組 對照組乳房疼痛*2.60 2.63 0.230.73胸悶不舒 0.74 0.68 0.260.18
心煩易怒0.890.89 0.24 0.32腰酸乏力0.810.61 0.33 0.32月經(jīng)失調(diào)0.870.89 0.26 0.56證侯總積分 6.506.35 1.52 2.62注*無、輕、中、重記分為0，1，2，3分，其余為0，0.5，1，1.5分。
表8兩組陽性證侯治療消失率比較n 消失數(shù)(n) 消失率(％)乳房疼痛 試驗組 30 23 76.67Δ對照組 30 14 46.67胸悶不舒 試驗組 17 9 52.94對照組 14 7 50.00情緒狀況 試驗組 19 8 42.11對照組 19 6 31.58腰酸乏力 試驗組 18 6 33.33對照組 19 7 36.84月經(jīng)失調(diào) 試驗組 19 12 63.16Δ對照組 18 6 33.33注試驗組與對照組比較ΔP＜0.001。
試驗組17例患者治療前后黃體期血液激素變化情況表9試驗組治療前后激素測定值比較(x±s)

注與治療前比較，ΔP＜0.05(七)安全性及不良反應(yīng)分析安全性評價表10兩組安全性評價情況
n 1級 2級 3級4級試驗組30 30 0 0 0對照組30 30 0 0 0兩組不良事件評價本次試驗組均無不良反應(yīng)。
臨床研究試驗結(jié)論1.臨床研究結(jié)果表明乳康舒膠囊是目前治療乳腺增生病的理想藥物，其臨床痊愈率為56.67％，乳房疼痛消失率為76.67％，明顯優(yōu)于對照組乳增寧片40.00％的臨床痊愈率及46.67％的疼痛消失率。
2.乳康舒膠囊對黃體期的內(nèi)分泌激素失調(diào)有調(diào)整作用，治療高催乳素血癥效果較好。乳康舒膠囊試用于臨床，17例患者作了黃體期E2、P、PRL激素檢測，E2值、P值治療前后無明顯變化，但E2有下降趨勢，P值有上升趨勢，PRL值治療后較治療前明顯下降，其中9例PRL值高于正常的患者治療后均下降至正常范圍。PRL的異常升高可直接刺激乳腺組織或進一步刺激E2合成或抑制孕激素的分泌，從而使E2的相對含量及活性增高，導(dǎo)致E2長期過度刺激乳腺組織進而影響了乳腺組織正常節(jié)律性變化，使其增殖過度，復(fù)舊不全而發(fā)生乳腺增生病。乳康舒對黃體期內(nèi)分泌失調(diào)有調(diào)整作用，所以對乳腺增生病具有顯著的療效。
3.在應(yīng)用乳康舒治療乳腺增生病的過程中，觀察到患者月經(jīng)失調(diào)現(xiàn)象明顯改善，月經(jīng)失調(diào)消失率為63.17％，對照組為33.33％，明顯優(yōu)于對照組。因為乳康舒膠囊除了針對乳房局部病變，更注意調(diào)整垂體—性腺軸的內(nèi)分泌功能。
4.在應(yīng)用乳康舒治療過程中，我們觀察到病人乳房疼痛消失或減輕較快，1周疼痛消失的11例；腫塊消退相對較慢。影響治愈率的是腫塊的消退情況，服藥時間的延長，可能會進一步提高臨床治愈率。
二、藥效學(xué)試驗1.乳康舒對家兔乳腺增生模型的影響采用摘除卵巢和肌肉注射苯甲酸雌二醇法造成家兔乳腺增生模型，造模后家兔乳腺直徑、乳頭高度比正常對照組的均有顯著增大(P＜0.001)，血沉、血漿粘度、切變率分別為120/s、80/s、40/s、8/s的全血粘度比正常對照組均有顯著增加(P＜0.05～0.001)，壓積比正常對照組顯著減少(P＜0.001)，血清E2、PRL比正常對照組均有顯著增加(P＜0.05～0.001)，P比正常對照組顯著減少(P＜0.01～0.001)。給家兔灌胃8、4、2g/kg的乳康舒4周和6周后，家兔的乳腺直徑、乳頭高度比模型對照組均有顯著減小(P＜0.05～0.001)，基本恢復(fù)到正常動物的水平。給家兔灌胃8、4、2g/kg的乳康舒4周后，血沉、壓積、血漿粘度、切變率分別為120/s、80/s全血粘度基本恢復(fù)到正常對照組的水平，切變率分別為40/s、8/s的全血粘度比正常對照組的仍有顯著增加(P＜0.05～0.001)，灌胃8、4g/kg家兔的纖維蛋白元比正常對照組有顯著減小(P＜0.05～0.01)。給家兔灌胃8、4g/kg的乳康舒4周后，血清SOD、GSH-Px活力比正常對照組均有顯著增加(P＜0.05～0.01)，各給藥組MDA含量與正常對照組相比無明顯變化。表明本品可顯著提高乳腺增生家兔血清SOD、GSH-Px活力，有一定的抗氧化作用。給家兔灌胃8、4、2g/kg的乳康舒4周后，E2、PRL、P含量基本恢復(fù)到正常對照組的水平。給家兔灌胃8g/kg的乳康舒6周后，E2含量比正常對照組顯著減少(P＜0.05)。病理組織學(xué)檢查及免疫組化試驗結(jié)果顯示用藥后家兔乳腺小葉中的腺泡數(shù)明顯減少，腺腔直徑有明顯減小，乳腺組織中的ER、PR及PCNA陽性率也明顯減少。表明本品對家兔的乳腺增生有明顯治療作用。
表11乳康舒對乳腺增生家兔乳腺直徑、乳頭高度變化的影響(mm，x±s)(n＝8)組別 劑量 給藥前 給藥后4周 給藥后6周(g/kg)乳腺直徑 乳頭高度乳腺直徑 乳頭高度乳腺直徑 乳頭高度正常對照組 / 6.2±1.1###3.4±0.5###7.4±1.5###4.5±0.9### 6.1±0.5##5.4±0.7#模型對照組 / 12.9±2.3***6.1±0.5***11.0±1.0***6.2±0.7***7.6±1.1**6.2±0.6*陽性藥組1.08 11.4±0.9***5.4±0.7***# 8.6±0.6*### 5.4±0.4*# 5.9±0.8##5.2±0.6##大劑量組 8 13.6±1.5***6.3±0.6***6.8±0.5###5.1±0.8# 6.2±1.4# 5.2±0.8#中劑量組 4 13.4±1.4***5.7±0.6***6.8±1.2###5.2±0.7# 5.6±0.5### 4.9±0.9##小劑量組 2 13.7±1.6***6.1±0.7***7.1±1.2###5.6±0.8*5.7±0.7### 5.2±0.8#注與正常對照組比較(t-檢驗)，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
與模型對照組比較(t-檢驗)，#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001。
表12乳康舒對乳腺增生家兔血液流變學(xué)的影響(x±s)(n＝8)指標(biāo) 正常對照組模型對照組 陽性藥組大劑量組 中劑量組小劑量組全血粘度 3.25±0.33# 3.84±0.54*3.31±0.33# 3.50±0.673.22±0.30# 3.56±0.44(mPa.s切變率120/s)全血粘度 3.72±0.36# 4.42±0.62*3.80±0.39# 4.06±0.653.74±0.33# 4.15±0.52(mPa.s切變率80/s)全血粘度 4.42±0.45# 5.59±1.06*4.73±0.61 4.95±0.51*4.68±0.50# 5.27±0.78*(mPa.s切變率40/s)全血粘度 6.83±0.985## 11.02±3.08**9.02±2.29*9.80±1.42***8.37±1.20*# 10.06±1.91***(mPa.s切變率8/s)血漿粘度 1.76±0.49### 3.72±1.11***1.59±0.65### 2.02±0.64## 2.30±0.73## 2.71±0.40***#(mPa.s)血 沉1.5±0.6##3.3±1.1**1.5±0.2### 1.4±0.3###1.8±0.6## 1.4±0.7##(mm/H)壓 積45.6±2.6### 36.9±3.4***45.1±3.8###42.8±2.9##41.4±2.5**##44.8±2.2###(％)纖維蛋白元1.61±0.471.72±0.53 0.94±0.56*# 0.84±0.36**##0.92±0.56*# 1.11±0.52#(g/L)血沉方程K值 6.08±2.529.07±3.49 5.86±0.92# 5.08±1.08## 5.90±1.50# 5.47±2.23#注與正常對照組比較(t-檢驗)，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。
與模型對照組比較(t-檢驗)，#P＜0.05；##P＜0.01；###P＜0.001。
表13乳康舒對乳腺增生家兔血清SOD、GSH-Px活力和MDA含量的影響(x±s)(n＝8)組別劑量 SOD GSH-Px MDA(g/kg) (NU/ml) (活力單位) (nmol/ml)正常對照組/ 473.04±36.99 378.91±4.29 4.17±0.82模型對照組/ 493.22±18.03 379.62±6.62 3.74±1.25陽性藥組 1.08512.53±22.25*381.29±12.35 3.51±0.96大劑量組 8 563.81±67.15**# 388.57±5.31**## 3.48±0.49中劑量組 4 519.94±43.75*386.26±5.36**# 4.06±1.46小劑量組 2 501.02±22.94 379.25±9.31 3.79±1.09注與正常對照組比較(t-檢驗)，*P＜0.05，**P＜0.01。
與模型對照組比較(t-檢驗)，#P＜0.05，##P＜0.01。
表14乳康舒對乳腺增生家兔血清性激素水平的影響(x±s)(n＝8)時間指標(biāo) 正常對照組 模型對照組 陽性藥組大劑量組中劑量組 小劑量組造E2(pg/ml) 118.69±50.35 456.93±216.70***477.93±188.94***499.50±146.69***474.14±191.75***491.62±177.4***模P(ng/ml)0.734±0.4740.016±0.023***0.033±0.027***0.074±0.086**0.041 ±0.038**0.041±0.043**后PRL(ng/ml) 4.33±1.31 7.63±2.39**7.30±2.95*9.12±1.69***7.83±2.78***8.32±2.59**藥E2(pg/ml) 169.79±106.90### 412.91±102.80 194.09±67.41###162.68±101.37### 185.54±75.75### 182.76±141.99##后P(ng/ml)0.394±0.2990.274±0.325 0.439±0.3250.723±0.7520.339±0.229 0.503±0.7504 PRL(ng/ml) 1.84±1.21 1.29±1.54 2.57±2.01 1.64±1.69 1.65±1.83 1.02±1.15周藥E2(pg/ml) 155.37±74.76# 691.52±526.84 126.24±31.08## 85.37±40.25*##113.48±42.46##90.20±59.68##后P(ng/ml)0.373±0.5240.185±0.246 0.348±0.2580.681±0.6990.355±0.407 0.436±0.4976 PRL(ng/ml) 0.79±0.75 0.61±1.02 1.48±1.31 0.77±0.98 0.64±0.66 0.49±0.70周注與正常對照組比較(t-檢驗)，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。
與模型對照組比較(t-檢驗)，#P＜0.05，##P＜0.01；###P＜0.001。
2.乳康舒對大鼠乳腺增生模型的影響采用肌肉注射苯甲酸雌二醇和黃體酮法造成大鼠乳腺增生模型。造模后各組大鼠乳腺直徑比正常對照組均有顯著增大(P＜0.001)，給大白鼠灌胃12、6、3g/kg的乳康舒2周后，大鼠乳腺直徑比模型對照組均有顯著減小(P＜0.05)，4周后，比模型對照組均有顯著減小(P＜0.01～0.001)，基本恢復(fù)到正常對照組的水平。造模后大鼠血清SOD、GSH-Px活力和MDA含量與正常對照組相比無明顯變化。給大鼠灌胃12、6g/kg的乳康舒4周后，血清SOD活力比模型對照組均有顯著增加(P＜0.01～0.001)，給家兔灌胃12g/kg的乳康舒4周后，血清GSH-Px活力比模型對照組顯著增加(P＜0.001)，MDA含量顯著減少(P＜0.05)。表明本品可顯著提高乳腺增生大鼠血清SOD、GSH-Px活力，減少MDA含量，有一定的抗氧化作用。模型組大鼠的痛閾值(甩尾時間)與正常對照組相比無明顯變化。給大白鼠服用12、6g/kg的乳康舒膠囊后，各組動物的痛閾值比模型對照組均顯著延長(P＜0.01～0.001)。病理組織學(xué)檢查顯示用藥后大鼠乳腺小葉中的腺泡數(shù)也有明顯減少，腺腔直徑明顯減小。
表15乳康舒對乳腺增生大白鼠乳腺直徑變化的影響(mm，x±s)(n＝10)組別 劑量(g/kg) 給藥前 給藥后2周給藥后4周正常對照組/ 3.7±0.5***4.0±0.5***4.8±0.5**模型對照組/ 6.2±0.7 5.2±0.5 5.5±0.6陽性藥組 1.985.9±0.6### 4.8±0.4*###4.6±0.5**大劑量組 12 5.8±0.7### 4.7±0.6*# 4.4±0.5***中劑量組 6 5.8±0.5### 4.8±0.3*###4.5±0.7**小劑量組 3 5.9±0.6### 4.7±0.5*## 4.6±0.3***注與模型對照組比較(t-檢驗)，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
與正常對照組比較(t-檢驗)，#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001。
表16乳康舒對乳腺增生大鼠血清SOD、GSH-Px活力和MDA含量的影響(x±s)(n＝10)組別 劑量SODGSH-Px MDA(g/kg) (NU/ml) (活力單位) (nmol/ml)正常對照組 / 497.59±31.16 29.34±8.10 8.98±0.95模型對照組 / 493.61±16.29 30.54±5.28 8.62±0.71陽性藥組 1.98 524.46±28.17**33.54±5.88 7.60±0.58**大劑量組 12588.07±35.10***40.73±6.03***7.83±0.79*中劑量組 6 539.67±41.50**30.31±6.06 8.26±0.87小劑量組 3 501.79±35.90 33.85±13.12 8.42±1.57注與模型對照組比較(t-檢驗)，*P＜0.05，**P＜0.01。
表17乳康舒膠囊對乳腺增生大白鼠的鎮(zhèn)痛作用(x±s)
組別動物數(shù)(只)劑量(g/kg)甩尾時間(s)正常對照組 10 / 3.08±0.32模型對照組 10 / 3.19±0.52鹽酸嗎啡組 10 0.01 5.45±0.76***大劑量組 10 125.29±1.00***中劑量組 10 6 4.73±1.34**小劑量組 10 3 4.20±2.01注與模型對照組比較(t-檢驗)，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。表18乳康舒對乳腺增生大白鼠血清性激素水平的影響(x±s)(n＝10)組別 劑量(g/kg)E2(pg/ml) PRL(ng/ml) P(ng/ml)正常對照組/ 9.01±2.89***5.07±1.00 25.29±10.34*模型對照組/ 115.40±51.485.42±0.94 15.06±9.33陽性藥組 1.98 8.59±3.57***5.06±0.71 15.77±10.50大劑量組 127.80±4.42***4.55±0.66*14.61±6.59#中劑量組 6 5.31±3.83***# 5.91±0.89 19.66±9.07小劑量組 3 6.66±3.76***5.64±1.98 21.89±15.54注與模型對照組比較(t-檢驗)，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
與正常對照組比較(t-檢驗)，#P＜0.05。
3.乳康舒對二甲苯致小白鼠耳廓腫脹的影響按24、12和6g生藥/kg的劑量給小白鼠灌胃乳康舒膠囊連續(xù)三天，末次給藥1h后，采用小白鼠耳廓二甲苯致炎法觀察本品的消炎作用。結(jié)果各給藥組動物耳廓的腫脹度與空白對照組相比，均有顯著降低(P＜0.05～0.001)。乳康舒膠囊各組動物在給藥后的腫脹抑制百分率均達到54.8％以上。提示口服乳康舒膠囊具有抑制小白鼠耳廓腫脹的作用。
表19乳康舒對二甲苯致小白鼠耳廓腫脹的影響(x±s)組別 劑量 動物數(shù) 右耳重 左耳重 腫脹度 抑制率(g/kg) (只) (mg)(mg) (mg)(％)正常對照組 / 10 35.4±8.8 18.8±1.2 16.60±8.14 /
乙酰水楊酸組0.2 1022.3±3.5 18.2±2.5 4.10±2.28***75.30乳康舒大劑量組 24 1026.2±6.1 21.8±3.9 4.40±5.23***73.49乳康舒中劑量組 12 1032.0±8.3 25.5±5.4 6.50±6.20**60.84乳康舒小劑量組 6 1028.6±9.5 21.1±4.6 7.50±6.13*54.82注與正常對照組比較，*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001。
4.乳康舒抑制大白鼠肉芽腫試驗采用大白鼠慢性炎癥性瓊脂肉芽腫法，給大白鼠連續(xù)7天灌胃乳康舒膠囊12、6和3g生藥/Kg后，給藥組動物的肉芽腫濕重與模型對照組相比，均有顯著降低(P＜0.001)，抑制率大于33.2％。提示灌胃一定劑量的乳康舒膠囊對大鼠慢性炎癥性瓊脂肉芽腫具有明顯的抑制作用。
表20乳康舒膠囊對大白鼠慢性炎癥瓊脂肉芽腫的影響(x±s)組別 劑量 動物數(shù) 肉芽腫濕重抑制率(g/Kg) (只) (g) (％)模型對照組 / 102.604±0.443/乙酰水楊酸組0.1101.703±0.345***34.65乳增寧組1.98 101.644±0.493***36.94大劑量組12 101.568±0.500***39.83中劑量組6 101.500±0.585***42.44小劑量組3 101.741±0.350***33.19注與模型對照組比較，***P＜0.001。
5.乳康舒膠囊對小白鼠的鎮(zhèn)痛作用(扭體法)小白鼠灌胃給予24、12或6g/kg的乳康舒膠囊后，經(jīng)扭體法試驗發(fā)現(xiàn)動物的扭體次數(shù)比正常對照組均有顯著減少(P＜0.05～0.001)；小白鼠用24g/kg的乳康舒膠囊，其發(fā)生扭體的潛伏期比正常對照組明顯延長(P＜0.05)。表明乳康舒膠囊對小白鼠具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。
表21乳康舒膠囊對小白鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(扭體法，x±s)組 別動物數(shù)(只) 劑量(g/kg) 潛伏期(S) 扭體次數(shù)(次/15min)正常對照組 10/ 206.1±53.5 24.4±11.1乙酰水楊酸對照組10 0.2 645.6±280.6***2.4±2.8***乳增寧對照組10 4517.6±332.6**9.1±9.7**乳康舒大劑量組 10 24 439.9±326.6*5.6±4.9***乳康舒中劑量組 10 12 385.5±282.98.5±6.2***乳康舒小劑量組 10 6286.1±167.513.7±8.6*注***p＜0.001，**p＜0.01，*p＜0.05.
6.乳康舒膠囊對小白鼠的鎮(zhèn)痛作用(熱板法)小白鼠灌胃給藥24g/kg的乳康舒膠囊后，熱板法實驗表明動物的痛閾值在給藥后1、2h比給藥前有顯著提高(P＜0.05)；灌胃給藥12g/kg乳康舒膠囊的小鼠1h后痛閾值有顯著提高(P＜0.05)。提示本品有一定的鎮(zhèn)痛作用。
表22乳康舒膠囊對小白鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(熱板法x±s)組別 動物數(shù) 劑量藥前痛閾值 藥后1h痛閾值 痛閾提高率 藥后2h痛閾值 痛閾提高率(只) (g/kg) (s)(s) (％) (s) (％)正常對照組 10 / 17.0±3.1 17.8±5.2 4.717.2±4.71.2乙酰水楊酸對照組10 0.218.0±5.0 28.1±8.1** 56.6 34.6±18.7* 92.8乳增寧對照組10 4 18.1±3.5 25.1±9.3* 39.1 24.8±18.7 37.4乳康舒大劑量組 10 24 17.5±5.3 25.6±8.5* 46.7 26.6±10.9* 52.4乳康舒中劑量組 10 12 16.3±4.0 26.9±12.0* 65.5 20.1±4.423.7乳康舒小劑量組 10 6 19.2±4.7 25.4±8.8 32.3 19.8±9.23.1注 **p＜0.01，*p＜0.05.
動物急性毒性試驗結(jié)果顯示小鼠灌胃給藥的最大給藥量為268g生藥/kg，相當(dāng)于擬臨床人用量的472.9倍，未見明顯毒性反應(yīng)。
大鼠連續(xù)給藥3個月的長期毒性試驗表明用相當(dāng)于生藥材12.5、25.0和50.0g/kg劑量的乳康舒膠囊給SD大鼠連續(xù)灌胃90天，未見有明顯毒性反應(yīng)，使用安全。
本發(fā)明提供的制備所述治療乳腺增生病中藥組合物的方法，將其制成劑量小、使用方便的現(xiàn)代制劑，該方法應(yīng)重現(xiàn)性好，可工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施例方式
實施例1取市售藥材鹿角3g 淫羊藿2.5g 白芍2.5g 王不留行2.5g 郁金2.5g丹參4g。
將鹿角用水煎煮提取2次，每次加12倍量水，每次提取2小時，合并煎液，濃縮至相對密度1.10(70℃)，得提取物A；其余諸藥與鹿角藥渣混勻，分別加10倍量水，浸泡1小時，水煎煮3次，每次1h，合并煎煮液濃縮至相對密度1.15(70℃)，加乙醇醇沉，使醇濃度為70％，回收并揮盡乙醇，濃縮至相對密度為1.10(70℃)，與A混勻，噴霧干燥，干法制粒，裝膠囊中，每粒0.38g。
實施例2取市售藥材鹿角9g 淫羊藿7.5g 白芍7.5g 王不留行7.5g 郁金7.5g丹參12g。
將鹿角用水煎煮提取2次，每次加10倍量水，每次提取2小時，合并煎煮液，濃縮至相對密度1.10(80℃)，得提取物A。
其余諸藥與鹿角藥渣混勻，分別加10倍量水，浸泡1小時，水煎煮3次，每次1h，合并煎煮液濃縮至相對密度1.15(80℃)，加乙醇醇沉，使醇濃度為60％，回收并揮盡乙醇，濃縮至相對密度為1.10(80℃)，得提取物B，將其與A混勻，噴霧干燥，常規(guī)濕法制粒，裝膠囊中，每粒0.38g。
實施例3取市售藥材鹿角5g 淫羊藿4g 白芍4g 王不留行4g 郁金2.5-7.5g 丹參6g。
將鹿角用水煎煮提取2次，每次加12倍量水，每次提取2小時，合并煎煮液，濃縮至相對密度1.05(90℃)，得提取物A。
其余諸藥與鹿角藥渣混勻，分別加10倍量水，浸泡1小時，煎煮提取3次，每次1h，合并煎煮液，濃縮至相對密度1.04(90℃)，加乙醇醇沉，使醇濃度為80％，回收并揮盡乙醇，得提取物B。
將提取物A和B混勻得總提取物C，真空干燥，常規(guī)制粒，壓片。
實施例4取市售藥材鹿角7g 淫羊藿5g 白芍5g 王不留行5g 郁金5g 丹參10g。
將鹿角用水煎煮提取2次，每次加12倍量水，每次提取2小時，合并煎煮液濃縮相對密度1.10(70℃)，得提取物A其余諸藥分別加10倍量水，浸泡1小時，煎煮提取3次，每次1h，合并煎煮液，濃縮至相對密度1.15(80℃)，加乙醇醇沉，使醇濃度為75％，回收并揮盡乙醇，濃縮至相對密度為1.45(20℃)，與A混勻，常壓干燥，常規(guī)制粒，裝膠囊。
權(quán)利要求
1.一種治療乳腺增生病的藥物組合物，其特征在于，由下述重量比原料組成鹿角3～9份 淫羊藿2.5～7.5份 白芍2.5～7.5份 王不留行2.5～7.5份郁金2.5～7.5份 丹參4～12份
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述治療乳腺增生病的藥物組合物，其特征在于，由下述重量比原料組成鹿角5～7份 淫羊藿4.0～5.5份 白芍4.0～5.5份王不留行4.0～5.5份郁金4.0～5.5份 丹參6～10份
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述治療乳腺增生病的藥物組合物，其特征在于，由下述重量比原料組成鹿角6份 淫羊藿5.0份 白芍5.0份王不留行5.0份郁金5.0份 丹參8份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3之一所述治療乳腺增生病的藥物組合物，其特征在于，所述藥物原料可與藥學(xué)上可接受的輔料混合，制成各種制劑。
5.一種治療乳腺增生病藥物組合物的制備方法，其特征在于按重量比取原料鹿角3～9份 淫羊藿2.5～7.5份 白芍2.5～7.5份 王不留行2.5～7.5份 郁金2.5～7.5份 丹參4～12份；將上述原料一并用水或含水乙醇提取；或者，先將鹿角用水提取，濃縮水提取液，得提取物A；再將其余諸藥用水提取，濃縮提取的水液，加乙醇醇沉，使醇濃度為40％-90％，取上清液，濃縮上清液，得提取物B；混合提取物A和提取物B，干燥，得治療乳腺增生病的藥物組合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述治療乳腺增生病藥物組合物的制備方法，其特征在于按重量比取原料鹿角5～7份淫羊藿4.0～5.5份 白芍4.0～5.5份 王不留行4.0～5.5份郁金4.0～5.5份丹參6～10份；先將鹿角用水提取，濃縮水提取液，得提取物A；再將其余諸藥用水提取，提取的水液濃縮至70-80℃溫度條件下相對密度為1.05～1.45時，加乙醇醇沉，使醇濃度為50％-80％，取上清液，濃縮上清液，得提取物B；混合提取物A和提取物B，干燥，得治療乳腺增生病藥物組合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述治療乳腺增生病藥物組合物的制備方法，其特征在于按重量比取原料鹿角6份 淫羊藿5.0份 白芍5.0份王不留行5.0份郁金5.0份丹參8份；先將鹿角用水回流提取，濃縮水提取液至70-80℃溫度條件下相對密度為1.10時，得提取物A；再將其余諸藥用水回流提取，提取的水液濃縮至70-80℃溫度條件下相對密度為1.15時，加乙醇醇沉，使醇濃度為70％，取上清液，濃縮上清液，得提取物B；混合提取物A和提取物B，干燥，得治療乳腺增生病藥物組合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求5至7之一所述治療乳腺增生病藥物組合物的制備方法，其特征在于鹿角用水回流提取后的藥渣，還可加入其余諸藥中，再次用水提取。
9.根據(jù)權(quán)利要求5至7之一所述治療乳腺增生病藥物組合物的制備方法，其特征在于混合提取物A和提取物B，可再與藥學(xué)上可接受的輔料混合，制成各種治療乳腺增生病藥物制劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述治療乳腺增生病藥物組合物的制備方法，其特征在于混合提取物A和提取物B，可再與藥學(xué)上可接受的輔料混合，濕法制粒或干法制粒，再壓成片劑、灌制膠囊或制成顆粒劑、微囊劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療乳腺增生病的中藥組合物(簡稱“乳康舒”)及其制備方法，其由鹿角3～9份、淫羊藿2.5～7.5份、白芍2.5～7.5份、王不留行2.5～7.5份、郁金2.5～7.5份、丹參4～12份組成，不但活血化瘀，疏肝理氣，而且補腎溫陽，調(diào)節(jié)垂體—性腺軸的內(nèi)分泌功能，從而標(biāo)本兼治，提高療效，減少了復(fù)發(fā)。
文檔編號A61P15/00GK1390601SQ02138009
公開日2003年1月15日 申請日期2002年7月25日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月25日
發(fā)明者樊鳳英, 鞠建明 申請人:江蘇省中醫(yī)藥研究院