專利名稱：骨質疏松癥的聯(lián)合治療的制作方法
骨質疏松癥描述了一組由不同病因引起但均以每單位體積中骨質量的凈損失為特點的疾病。這種骨質量損失的后果是骨架不能為人體提供足夠的結構支持，結果導致骨折。一種最常見的骨質疏松癥發(fā)生在停經后不久的婦女身上。大多數婦女在停經后3-6年內骨柱區(qū)域內損失20-60%的骨質量。這種快速的骨損失通常與骨吸收和骨形成兩者的增加有關。然而吸收循環(huán)較為主，其結果是骨質量的凈損失。
因此，在停經后的婦女中骨質疏松癥是一種常見的嚴重疾病。僅在美國估計就有兩千五百萬婦女患此疾病。這種疾病的結果是既造成身體的傷害也造成經濟損失。大量的經濟損失是由于該疾病的慢性特征，此疾病的后遺癥需要大量且長期的資金支持(醫(yī)院治療和家庭護理)。更年老的病人中這種損失尤其大。另外，雖然通常不認為骨質疏松癥是威脅生命的病癥，但是在老年婦女中20-30%的死亡率與臀部骨折有關。高百分數的死亡率直接與停經后骨質疏松癥有關。
骨中對停經后骨質疏松影響最敏感的組織是柱骨。這種組織經常是指松質骨，特別集中在靠近骨端、靠近關節(jié)和在脊椎骨的節(jié)中。小骨樣結構是柱體組織的特點，這些結構內部互相聯(lián)接，并與更堅固、更密實的皮質組織聯(lián)接，從而形成骨外表面和中心骨干。柱體(trabeculae)的這種互相交叉的網狀結構給外皮結構以側面支持，而且對整個結構的生物機械強度是重要的。主要是柱體的凈吸收和損失導致停經后骨質疏松患者的骨衰竭和骨折。從停經后婦女柱體損失的觀點來看，并不奇怪最通常的骨折都與下述骨有關，即高度依賴于柱體支持的骨例如脊椎骨、支持重量的骨(大腿骨)和前臂。確實，臀部骨折，collies骨折和脊椎骨粉碎性骨折是停經后骨質疏松癥的表征。
在治療和研究停經后骨質疏松癥方面一個很重要的概念是骨折閾的概念。骨折閾是一種點值，骨密度(從而骨強度)減少到該值時有很大的骨折可能性。這一點值對所有的婦女而言并不是一個通值而對個體來說是一個相對數，這一點值依賴于很多因素如重量、生活方式或其他有可能引起骨折的因素。
通常，大多數停經前婦女骨密度高于骨折閾，因此發(fā)生骨折的可能性較低。一個婦女停經前的骨密度和停經后的骨損失速率將決定她何時或是否將跨過骨折閾并處于骨折的危險之中。對因骨質疏松而已骨折的婦女來說，理想的療法是提高其骨密度(強度)，使之高于骨折閾值。另外，對骨密度仍然高于閾值的婦女來說，保持骨密度高于閾值是有利的。
如今，對停經后骨質疏松癥唯一適宜的有效治療是荷爾蒙替代療法，特別是雌激素替代療法，因為停經后婦女缺乏雌激素。在治療骨質疏松中，雌激素的作用機理尚不十分清楚，但普遍認為雌激素能抑制骨吸收。雌激素替代療法(ERT)的凈結果是保持婦女的骨密度在該療法開始時的水平，即此療法保持骨密度。當ERT開始時，如果一個婦女高于骨折閾，并且如果保持了ERT，她將保持高于此閾值而且骨折的危險性小。事實上在婦女停經時或停經后不久使用ERT尚有爭議。
然而對那些骨密度已經下降至骨折閾以下的婦女來說，ERT僅能保持其骨密度在她們開始此療法時的水平。因此這些婦女將保持在閾值以下，并處于骨折的進一步危險的境地。對這些婦女來說，ERT仍然是可行的，因為它們可以避免壞情況變得更壞。然而很明顯若有這樣的療法將是有利的，即該療法應能增加骨密度使之高于骨折閾，至更正常水平然后保持此水平。目前，還沒有有效的經批準的療法能夠提高骨密度至此水平。
如上所述，ERT是目前停經后骨質疏松癥的唯一有效的經批準的治療，對那些沒有子宮的婦女，可以單獨地給予雌激素(通常以雌甾酮的結合形式給予)。然而在大多數有子宮的停經婦女，未拮抗的雌激素提高了子宮內膜癌的危險性。因此也經常給予孕激素，既作為聯(lián)合用藥又可在循環(huán)療法中應用，從而減少上述的危險。
“抗雌激素”是一個術語，它“已經廣泛應用于抑制或改變雌激素作用的幾種不同類型的化合物。孕激素和雄性激素被認為是抗雌激素的……”(GoodmanandGilman，ThePharmacologicalBasisofTherapeutics，6thEd，p1431.)。另外，某些合成化合物如他莫昔芬、克洛米芬、雷洛昔芬和萘福昔定被稱作為抗雌激素劑，這些化合物在實驗室和臨床上都已顯示出抑制雌激素的某些作用。合成的“抗雌激素劑”主要開發(fā)用于激素依賴型乳腺癌的治療。這些化合物是經典的混合型激動劑拮抗劑，它們顯示某些雌激素活性。例如廣泛用于抗雌激素的他莫昔芬，在人體內表現有雌激素作用。
最近，由雷洛昔芬(以前稱之為keoxifene)代表的“抗雌激素”組在動物實驗中表明能抑制骨損失，說明這些化合物在治療停經后骨質疏松癥方面是有用的。(參見我們共同未決的專利申請，題目為抑制骨損失的方法，專利申請?zhí)?7/920，933，1992年7月28日提交)。
我們已經發(fā)現將式Ⅰ的雷洛昔芬型化合物與某些孕激素一起給藥，可以使骨密度恢復至幾乎正常的水平，這是任何一個藥物都不能單獨起到的效果。
本發(fā)明提供了一種治療骨質疏松癥的新方法，該方法包括將1)式Ⅰ化合物或其藥學上適用的鹽或溶劑化物與2)選自甲羥孕酮、炔諾酮或異炔諾酮或者其藥學上適用的鹽的孕激素組合給藥，給藥劑量為使得其組合作用能保持或增強骨密度， 其中R和R1各自獨立地是氫、羥基、C1-C6烷氧基、C1-C6酰氧基、C1-C6烷氧基-C2-C6酰氧基、R2取代的芳氧基、R2取代的芳酰氧基、R3取代的羰氧基或鹵素;
R2是C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、氫或鹵素以及R3是C1-C6烷氧基或芳氧基
n為2、3或4p為4、5或6。
本發(fā)明還提供了抑制骨損失的藥物制劑，其中包括(1)式Ⅰ化合物或其藥學上適用的鹽或溶劑化物，和(2)選自甲羥孕酮、炔諾酮或異炔諾酮、或其藥學上適用的鹽的孕激素，以及一種或更多種藥學上適用的載體，劑量為使得其組合作用能抑制骨損失。
本發(fā)明涉及發(fā)現組合用藥療法在治療骨質疏松癥中特別有用，所述組合用藥療法包括將選自式Ⅰ的2-苯基-3-芳?；讲⑧绶灶?苯并噻吩類)中的一個成分和選自甲羥孕酮、炔諾酮或異炔諾酮的孕激素的第二個成分一起用藥。單獨使用時，式Ⅰ的苯并噻吩類抑制發(fā)生在骨質疏松癥患者中的骨損失，但不能增加骨密度使之恢復至在疾病過程開始前的正常水平。然而當與選定的孕激素聯(lián)合使用時，不僅能保持骨密度，而且能增加骨密度至正常水平(使骨密度“正常化”)。如前所討論，停經后骨質疏松癥是因缺乏內源性雌激素而引起，所述內源性雌激素缺乏例如是由于自然的、外科手術的、或其他過程繼發(fā)停經而發(fā)生于婦女中的內源性的雌激素缺乏。更少見地發(fā)生在男人身上的骨密度和骨質量的降低也與因為荷爾蒙調節(jié)損失有關，因此按照本發(fā)明方法，也是該療法的對象。
在式Ⅰ化合物中描述的總的化學術語具有普通意義。例如，術語“C1-C3烷基”包括甲基、乙基、丙基和異丙基。
術語“C1-C6烷氧基”包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基和己氧基，還包括側鏈結構例如異丙氧基和異丁氧基。
術語“C1-C6酰氧基”包括乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基、戊酰氧基、己酰氧基等，還包括側鏈結構例如2，2-二甲基丙酰氧基和3，3-二甲基丁酰氧基。
術語“C1-C6烷氧基-C2-C6酰氧基”包括例如甲氧基乙酰氧基、甲氧基丙酰氧基、甲氧基丁酰氧基、甲氧基戊酰氧基、甲氧基己酰氧基、乙氧基乙酰氧基、乙氧基丙酰氧基、乙氧基丁酰氧基、乙氧基戊酰氧基、乙氧基己酰氧基、丙氧基乙酰氧基、丙氧基丙酰氧基、丙氧基丁酰氧基等。
本文中使用的烷基和烷氧基結構也包括環(huán)烷基和環(huán)烷基氧基，其中結構中碳數至少為3。
術語“R2取代的芳氧基“和“R2取代的芳酰氧基”包括基團例如苯氧基、噻吩氧基、呋喃氧基、萘氧基、苯甲酰氧基、噻吩甲酰氧基、呋喃甲酰氧基、萘甲酰氧基等，其中R2取代基可以為氫、羥基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基或鹵素。
術語“R3取代的羰氧基”(其中R3取代基可以為C1-C6烷氧基或芳氧基)包括碳酸酯結構如甲氧羰基氧基、乙氧羰基氧基、丙氧羰基氧基、丁氧羰基氧基、戊氧羰基氧基、己氧羰基氧基、苯氧羰基氧基、噻吩氧羰基氧基、呋喃氧羰基氧基和萘氧羰基氧基。
雷洛昔芬是下面的化合物
本發(fā)明優(yōu)選的方法和制劑包括應用式Ⅰ化合物，其中R、R1為羥基、C1-C6酰氧基、C1-C6烷氧基-C2-C6酰氧基、R2取代的芳酰氧基或R3取代的羰氧基，后面的基團代表酯和碳酸酯構型所選定的孕激素為炔諾酮或異炔諾酮。其他優(yōu)選的方法包括應用其中R、R1同上，n為2，p為5或6的式Ⅰ化合物并且所選定的孕激素為炔諾酮或異炔諾酮。
一個特別優(yōu)選的方法包括應用R、R1為羥基，n為2，p為4或5的式Ⅰ化合物所選定的孕激素為炔諾酮。本發(fā)明最優(yōu)選的實施方案涉及應用雷洛昔芬(特別是作為其鹽酸給藥時)和異炔諾酮。
可以按照已有方法制備本發(fā)明方法中的化合物，如按美國專利4，133，814和美國專利4，418，068和1992年7月28日提交的未決專利申請07/920，933中所述方法進行制備，所有這些文獻均收編在本發(fā)明中作為參考。一般來講，該方法從帶有6-羥基和2-(4-羥基苯基)基團的苯并[b]噻吩開始。起始化合物被保護、酰化或烷基化，并且進行脫保護，生成其中R、R1均為羥基的式Ⅰ化合物。如果需要，然后可形成醚、酯和碳酸酯形式的式Ⅰ化合物。以上美國專利敘述了制備上述化合物的實施例?？赡苄枰獙@些方法進行改進，以適應特定取代基的活性官能團。這種改進對于本領域技術人員而言將是顯而易見的。
式Ⅰ化合物可以與多種有機和無機酸、堿生成酸和堿加成鹽，酸和堿加成鹽包括通常用于藥物化學上的生理上適用的鹽。所述鹽也可用于本發(fā)明方法和制劑中。
用于生成上述鹽的典型的無機酸包括鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、硫酸、磷酸、連二磷酸等，可以應用由有機酸生成的鹽，有機酸例如有脂肪族一或二羧酸、苯基取代的鏈烷酸、羥基鏈烷酸和羥基鏈烷二酸，以及芳香族酸、脂肪族和芳香族磺酸。因此所述藥學上適用的鹽包括乙酸鹽、苯基乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙烯酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、氯代苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、鄰-乙酰氧基苯甲酸鹽、萘-2-苯甲酸鹽、溴化物、異丁酸鹽、苯基丁酸鹽、β-羥基丁酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、己炔-1，4-二酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、氯化物，肉桂酸鹽、檸檬酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、羥基乙酸鹽、庚酸鹽、馬尿酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、羥基馬來酸鹽、丙二酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、煙酸鹽、異煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、對苯二甲酸鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、丙炔酸鹽、丙酸鹽、苯基丙酸鹽、水楊酸鹽、癸二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、焦硫酸鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磺酸鹽、苯磺酸鹽、對溴苯磺酸鹽、氯代苯磺酸鹽、乙烷磺酸鹽、2-羥基乙烷磺酸鹽、甲磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、酒石酸鹽等。
酸加成鹽一般可通過式Ⅰ化合物與等摩爾或過量的酸反應制得。反應物通常于互溶劑如乙醚或苯中進行反應。鹽一般在約1小時～10天內從溶液中析出，并且可以經過濾分離，或者按常規(guī)方法除去溶劑。
通常用于生成鹽的堿包括氫氧化銨、堿金屬和堿土金屬氫氧化物和碳酸鹽，以及脂肪族和芳香族胺，脂肪族二胺和羥基烷胺。用于制備加成鹽的堿尤其包括氫氧化銨、碳酸鉀、氫氧化鈣、甲胺、二乙胺、乙二胺、環(huán)己胺和乙醇胺。
與化合物(由該化合物衍生得到鹽)相比較，藥學上適用的鹽一般具有提高溶解度的性質，因此它們通常更適用于配制液劑或乳劑。
另外，一些式Ⅰ化合物可以與水或有機溶劑如乙醇形成溶劑化物。這些溶劑化物也包括在本發(fā)明方法和制劑內。
本發(fā)明還提供了一種用于抑制骨損失的藥物制劑，該藥物制劑包括(1)式Ⅰ化合物或其藥學上適用的鹽或溶劑化物;(2)一種孕激素，選自甲羥孕酮、炔諾酮或異炔諾酮、或其藥學上適用的鹽;和(3)一種或更多種藥學上適用的賦形劑。
藥物制劑可以按本技術領域已知的方法制備。例如，將化合物與常用的賦形劑、稀釋劑或載體一起配制，并可配制成片劑、膠囊劑、混懸液劑、粉劑等。適用于上述制劑的賦形劑、稀釋劑和載體包括填充劑和增量劑如淀粉、糖、甘露糖醇以及硅衍生物;粘合劑如羧甲基纖維素和其他的纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡咯烷酮;濕潤劑如甘油;崩解劑如瓊脂、碳酸鈣和碳酸氫鈉;阻滯溶解劑如石蠟;吸收促進劑如季銨化合物;表面活性劑如鯨蠟醇、單硬脂酸甘油酯;吸附載體如高嶺土和膨潤土;以及潤滑劑如滑石、硬脂酸鈣和硬脂酸鎂以及固體聚乙二醇。
本發(fā)明化合物也可以配制成方便口服的酏劑或溶液劑，或者配制成適于非經胃腸道(如經肌內、皮下或靜脈途徑)給藥的溶液劑。另外，本發(fā)明化合物還非常適用于配制成緩釋劑型等。緩釋制劑可以這樣構成，以使它們僅僅或最好在腸道的特定部位并可能在一定時間內釋放活性成分。包衣材料、包袋材料和保護材料可以由例如聚合物質或蠟制得。
為治療骨質疏松癥或抑制骨損失，需應用的本發(fā)明的式Ⅰ化合物和所選定的孕激素的具體劑量將取決于由主治醫(yī)師決定的病癥的嚴重性、給藥途徑以及有關的因素。一般來講，式Ⅰ化合物的有效劑量為約0.1-1000mg，一般為約50-400mg，最優(yōu)選的是約50-200mg。一般來講，選定的孕激素的有效劑量為約0.01-500mg，優(yōu)選約1-200mg。該劑量每天將給需要這種治療的患者一次或分大約三次，或根據需要分多次施用，以便有效地抑制骨損失過程。
實施例1在這些實施例中，使用停經后骨質疏松癥模型，其中測定了不同治療方法對股骨密度的影響。
75日齡SpragueDawley雌鼠(重量范圍為225-275g)由CharlesRiverLaboratories(Portage，MI)提供。將這些大鼠分成3組房養(yǎng)，大鼠可隨意接近食物(鈣含量約1%)和水。室溫保持在22.2°±1.7℃，最低相對濕度為40%，室內光照時間為12小時光亮，12小時黑暗。
到達后一周，在麻醉狀態(tài)(肌內給藥44mg/kg氯胺酮和5mg/kg賽拉嗪(Butler，Indianapolis，IN))對鼠進行雙側卵巢切除術。在外科麻醉手術恢復后的當天或者在外科手術后35天開始用賦形劑或本發(fā)明指示的化合物進行治療。
口服劑量通過在0.5ml1%羧甲基纖維素(CMC)中用管飼法進行。
在外科手術時測量體重，以后在研究期間每周測量體重，劑量隨著體重的變化而調整。用每一實驗組平行評估賦形劑治療的切除卵巢(ovex)的大鼠和未切除卵巢(Intact)的大鼠用作陰性和陽性對照。
每天治療大鼠，持繼35天(每個治療組6只大鼠)，在第36天上通過斷頭活殺。35天的時間是以使骨密度最大程度的減少，如下文所述進行測量。在活殺時，取出子宮，分離出無關的組織，在測量濕重前除去液體成分，以確證與完全卵巢切除有關的雌激素缺乏。由于卵巢切除術子宮的重量一般減少約75%，然后將子宮放在10%的中性緩沖的富爾馬林中，以備隨后的組織學分析。
切除右股骨，在遠干骺端離膝蓋骨溝1mm處，用單光吸光測定法掃描。測量的光密度的結果代表作為骨礦物質含量和骨寬度的函數的骨密度計算值。(EE2＝乙炔基雌二醇，Ral＝雷洛昔芬，Provera＝普維拉)。
試驗1化合物骨密度A)EE2(100μg/kg)28.270B)Ovex(未加化合物)8.033C)Intact(未加化合物)42.403D)Provera(10mg/kg)34.132E)Ral(0.01mg/kg)4.823F)Ral(0.1mg/kg)2.928G)Ral(1mg/kg)15.400H)Ral10mg/kg18.017I)D+E36.820J)D+F38.902K)D+G51.935L)D+H61.528
試驗2化合物骨密度A)EE2(100μg/kg)53.122B)Ovex(未加化合物)25.918C)Intact(未加化合物)49.627D)炔諾酮(10mg/kg)42.087E)Ral(0.01mg/kg)15.672F)Ral(0.10mg/kg)30.265G)Ral(1mg/kg)46.237H)Ral10mg/kg35.765I)D+E38.795J)D+F53.122K)D+G59.155L)D+H57.485試驗3化合物骨密度A)EE2(100μg/kg)46.670B)Ovex(未加化合物)20.340C)Intact(未加化合物)47.867D)異炔諾酮(10mg/kg)35.563E)Ral(0.01mg/kg)11.208F)Ral(0.1mg/kg)19.693G)Ral(1mg/kg)30.012H)Ral(10mg/kg)30.325I)D+E43.948J)D+F37.777K)D+G54.773L)D+H42.283
試驗4化合物骨密度A)EE2(100μg/kg)59.802B)Ovex(未加化合物)33.538C)Intact(未加化合物)68.317D)異炔諾酮(10mg/kg)38.895E)Ral(0.01mg/kg)28.363F)Ral(0.10mg/kg)56.207G)Ral(1mg/kg)45.712H)Ral10mg/kg51.533I)D+E26.328J)D+F48.057K)D+G38.270L)D+H53.903試驗5化合物骨密度A)EE2(100μg/kg)50.700B)Ovex(未加化合物)26.700C)Intact(未加化合物)28.545D)Provera(10mg/kg)60.832E)*化合物A(1mg/kg) 34.650F)化合物A(10mg/kg)48.688G)D+E61.273H)D+F58.472＊化合物A為其中n為2，p＝5，R、R1均為 正丁基的式Ⅰ化合物的鹽酸鹽。
試驗6化合物骨密度A)EE2(100μg/kg)50.700B)Ovex(未加化合物)26.700C)Intact(未加化合物)28.545D)Provera(10mg/kg)60.832E)*化合物B(1mg/kg) 37.937F)化合物B(10mg/kg)42.873G)D+E75.498H)D+F68.163＊化合物B為其中n＝2，p＝5，R、R1均為 叔丁基的式Ⅰ化合物的鹽酸鹽。
權利要求
1.組合用于保持或增加骨密度或者抑制骨損失的式Ⅰ化合物或其藥學上適用的鹽或溶劑化物，以及一種選自甲羥孕酮、炔諾酮或異炔諾酮或者其藥學上適用的鹽的孕激素， 其中，R、R1各自獨立地為氫、羥基、C1-C6烷氧基、C1-C6酰氧基、C1-C6烷氧基-C2-C6酰氧基、R2取代的芳氧基、R2取代的芳酰氧基、R3取代的羰氧基或鹵素；R2為C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、氫或鹵素、R3為C1-C6烷氧基或芳氧基；n為2、3或4；p為4、5或6。
2.權利要求1中所述的化合物，其中式Ⅰ化合物的給藥量為0.1-約1000mg/kg體重，所選擇的孕激素的給藥量為約0.01-500mg/kg體重。
3.抑制骨損失的藥物制劑，其中含有作為活性成分的(1)式Ⅰ化合物或其藥學上適用的鹽或溶劑化物和(2)一種選自甲羥孕酮、炔諾酮或異炔諾酮或者其藥學上適用的鹽的孕激素，以及一或多種藥學上適用的載體;劑量為使得其組合作用能抑制骨損失; 其中，R、R1各自獨立地為氫、羥基、C1-C6烷氧基、C1-C6酰氧基、C1-C6烷氧基-C2-C6酰氧基、R2取代的芳氧基、R2取代的芳酰氧基、R3取代的羰氧基或鹵素;R2為C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、氫或鹵素;和R3為C1-C6烷氧基或芳氧基;n為2、3或4和p為4、5或6。
全文摘要
本發(fā)明提供治療骨質疏松癥的新方法，該方法包括將式I化合物或其藥用鹽或溶劑化物與選自甲羥孕酮、炔諾酮、異炔諾酮或其藥用鹽的孕激素以能組合保持或增加骨密度的劑量給藥；還提供抑制骨損失的藥物制劑，該制劑包括式I化合物或其藥用鹽或溶劑化物和選自甲羥孕酮、炔諾酮、異炔諾酮或其藥用鹽的孕激素，以及一或多種藥學上適用的載體，其劑量為使得其結合作用能抑制骨損失，其中R、R
文檔編號A61K31/40GK1111511SQ95101458
公開日1995年11月15日 申請日期1995年1月26日 優(yōu)先權日1994年1月28日
發(fā)明者L·J·布拉克, G·J·庫里南 申請人:伊萊利利公司