專利名稱：具有鈣拮抗劑活性的苯并砜的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用作鈣通道阻滯劑的新的苯并砜。這類化合物及相關(guān)的藥用組合物用于治療和預防多種疾病如過敏、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、支氣管痙攣、痛經(jīng)、食管痙攣、青光眼、早產(chǎn)、泌尿道疾病、胃腸動力障礙和心血管疾病。
背景技術(shù)：
硫代環(huán)烯并[3，2-b]吡啶是平滑肌組織攝取鈣離子的抑制劑。它們通過松弛或防止由鈣機理引起的組織收縮來起作用(Dodd等，DrugDes.Discov.1997 15135-48)。這些化合物為有效的抗高血壓藥和支氣管擴張藥。
硫代環(huán)烯并[3，2-b]吡啶也用于心血管疾病，包括高血壓、局部缺血、心絞痛、充血性心力衰竭、偏頭痛、心肌梗死和中風的治療。這類化合物也用于其它疾病如過敏、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、痛經(jīng)、食管痙攣、胃腸動力障礙、青光眼、早產(chǎn)和泌尿道疾病的治療。
Dodd等評估了一系列在砜環(huán)上有5-9個成員的硫代環(huán)烯并[3，2-b]吡啶的鈣拮抗劑活性。發(fā)現(xiàn)將砜環(huán)大小從5個成員增加到8個成員時，會引起體外藥效增加兩個數(shù)量級。發(fā)現(xiàn)有利于氣管作用超過主動脈作用的芳族取代形式是2-NO2和2-Cl、6-F。發(fā)現(xiàn)使體內(nèi)活性最大化的酯側(cè)鏈為N-苯基-N-甲基氨基乙基部分(Dodd等，Drug Des.Discov.1997，45135-48和Drug Des.Discov.1993 1065-75)。
如下列出版物所舉例說明的，已知大量的與硫代環(huán)烯并[3，2-b]吡啶有關(guān)的化合物。Straub的美國專利第5,708,177號，公開了通過氧化及后續(xù)的對其反向?qū)τ丑w的還原，制備旋光性的鄰位取代的4-芳基-或雜芳基-1，4-二氫吡啶的方法。Wustrow等的美國專利第5,075,440號，公開了用作具有心血管、抗哮喘和抗支氣管收縮活性的鈣通道拮抗劑的吡啶并[2，3-f][1，4]硫氮雜和吡啶并[3，2-b][1，5]苯并硫氮雜。Schwender和Dodd各自的美國專利第4,879,384和4,845,225號公開了取代的硫代環(huán)烯并[3，2-b]吡啶，它們也用作具有心血管、抗哮喘和抗支氣管收縮活性的鈣通道拮抗劑。美國專利第4,285,955和4,483,985號公開了具有鈣通道拮抗活性的、在簡單的二氫吡啶上的無環(huán)砜取代。美國專利第4,532,248號公開了許多種類的二氫吡啶，包括稠合于二氫吡啶核的環(huán)砜。公開了全部該類的強心活性。然而，這些化合物不是鈣通道阻滯劑。最后，Pagani(G.P.A.，J.Chem.Soc.PerkinTrans.2，1392(1974))公開了10-苯基-2H-噻喃并[3，2-b]喹啉。
“軟性藥物(Soft drugs)”(也稱作“前藥”)是有生物活性的藥物，在其設(shè)計的作用位點上達到其療效后它們被代謝失活。用軟性藥物代替其不可失活的類似物，可避免不需要的副作用。軟性藥物通常為已知的(參見，如，Biggadike等，2000，J.Med.Chem.4319-21；Lee等，1998，Curr.Opin.Drug Disc.Dev.1235-44)。然而，尚不知道二氫吡啶軟性藥物。
發(fā)明概述本發(fā)明提供如下定義的新的苯并砜及其制備方法。本發(fā)明也提供含有所述化合物和藥學上可接受的載體的藥用組合物。
本發(fā)明進一步提供治療患有其病情可通過減少流入細胞的鈣離子而被調(diào)節(jié)減輕的疾病的患者的方法，而鈣離子流入細胞的作用引起了該疾病，該方法包括給予患者治療有效劑量的本發(fā)明的藥用組合物。
本發(fā)明還進一步提供抑制患者疾病發(fā)作的方法，所述疾病的病情通過減少流入細胞的鈣離子而被調(diào)節(jié)減輕，而鈣離子流入細胞的作用引起了該疾病，該方法包括給患者預防有效劑量的本發(fā)明的藥用組合物。
最后，本發(fā)明提供向患者給予所述藥用組合物的設(shè)備，它包括容器及其中的藥用組合物，其中容器有向患者傳遞治療和/或預防劑量的所述藥用組合物的裝置。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供式I化合物，式I 或其藥學上可接受的鹽，其中(a) R1、R2、R3、R4和R5獨立地選自H、OH、鹵素、氰基、NO2、烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基磺?；?、C1-4烷氧羰基、C1-8烷硫基、二氟甲氧基、二氟甲硫基、三氟甲基和噁二唑(由R1和R2形成)；(b) R6選自H、C1-5直鏈或支鏈烷基、烷基胺、芳基、3-哌啶基、N-取代的3-哌啶基和N-取代的2-吡咯烷基亞甲基，其中所述的N-取代的3-哌啶基和所述N-取代的2-吡咯烷基亞甲基可由C1-8直鏈或支鏈烷基或芐基取代，且所述的取代烷基可由C1-8烷氧基、C2-8鏈烷酰氧基、苯乙酰氧基、苯甲酰氧基、羥基、鹵素、對-甲苯磺?；趸?、甲磺酰基氧基、氨基、烷氧羰基或NR′R″取代，其中(i) R′和R″獨立地選自H、C1-8直鏈或支鏈烷基、C3-7環(huán)烷基、苯基、芐基和苯乙基，或(ii)R′和R″共同形成選自哌啶子基、吡咯烷基、嗎啉代、硫代嗎啉代、哌嗪基、2-噻吩基、3-噻吩基的雜環(huán)及所述雜環(huán)的N-取代衍生物，所述的N-取代衍生物由H、C1-8直鏈或支鏈烷基、芐基、二苯甲基、苯基和/或取代苯基(由NO2、鹵素、C1-8直鏈或支鏈烷基、C1-8烷氧基和/或三氟甲基所取代)取代；和(c) R7選自H、氨基、烷基、芳基、三氟甲基、烷氧甲基、2-噻吩并和3-噻吩基。
下列化合物為本發(fā)明的實施方案[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并(Benzothiepino)[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2-氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，甲酯，5，5-二氧化物。苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2，3-二氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，2-[甲基(苯基甲基)氨基]乙酯，5，5-二氧化物；[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2，3-二氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，甲酯，5，5-二氧化物；[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，1，4，6，7-四氫-2-甲基-4-(五氟代苯基)-，甲酯，5，5-二氧化物；[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，1，4，6，7-四氫-2-甲基-4-(2-硝基苯基)-，甲酯，5，5-二氧化物；[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(3-氯代苯苯基-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，甲酯，5，5-二氧化物；[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2，3-二氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，2-[甲基(2-噻吩基甲基)氨基]乙酯，5，5-二氧化物；[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，1，4，6，7-四氫-2-甲基-4-(3-硝基苯基)-，甲酯，5，5-二氧化物；[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2-氯-6-羥基苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，甲酯，5，5-二氧化物；[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2-氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，2-[甲基(2-噻吩基甲基)氨基]乙酯，5，5-二氧化物；和[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2-氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，2-[甲基(苯基甲基)氨基]乙酯，5，5-二氧化物。
本發(fā)明也提供式I化合物的軟性藥物類似物。這些軟性藥物的特征在于結(jié)合于酯基的化學不穩(wěn)定部分依次與二氫吡啶環(huán)結(jié)構(gòu)結(jié)合。該軟性藥物使所述藥品發(fā)揮其局部作用，并接著于血流中被代謝，因而減少了不希望的全身效應(yīng)(如低血壓)。使用該軟性藥物類似物，允許以較大劑量的要求保護的二氫吡啶化合物給藥，而不使患者經(jīng)受難以忍受水平的不需要的全身效應(yīng)。
特別地，本發(fā)明提供式II化合物， 式II或其藥學上可接受的鹽，其中(a) R1、R2、R3、R4和R5獨立地選自氫、OH、鹵素、氰基、NO2、烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基磺?；?、C1-4烷氧羰基、C1-8烷硫基、二氟甲氧基、二氟甲硫基、三氟甲基和噁二唑(由R1和R2形成)；(b) R7選自氫、氨基、烷基、芳基、三氟甲基、烷氧甲基、2-噻吩基和3-噻吩基；和(c) R8選自-烷基-OH、烷基胺、內(nèi)酯、環(huán)狀碳酸酯、烷基取代的環(huán)狀碳酸酯、芳基取代的環(huán)狀碳酸酯、-芳基-C(O)OR、-烷基-芳基-C(O)OR、-烷基-OC(O)R、-烷基-C(O)R、-烷基-C(O)OR、-烷基-N(R″)C(O)R及-烷基-N(R″″)C(O)OR，其中
R和R″″獨立地選自氫、氨基、烷基、芳基、芳基稠合的環(huán)烷基和雜環(huán)基，所述的氨基、烷基、芳基、芳基稠合的環(huán)烷基和雜環(huán)基任選被鹵素、氰基、NO2、內(nèi)酯、氨基、烷基氨基、芳基取代的烷基氨基、酰胺、氨基甲酸酯、氨基甲?；h(huán)狀碳酸酯、烷基、鹵素取代的烷基、芳烷基、烷氧基、雜環(huán)基和/或芳基(所述芳基任選被OH、鹵素、氰基、NO2、烷基、氨基、二甲氨基、烷氧基、烷基磺?；1-4烷氧羰基、烷硫基和/或三氟甲基取代)所取代。
上述式I化合物的每個實施方案也被設(shè)計為式II化合物的實施方案。另外，在式II化合物的一個實施方案中，R7為甲基且R1、R2、R3、R4和R5獨立地選自氫、鹵素、三氟甲基和NO2。在式II的另一實施方案中，R8選自-烷基-OH、烷基胺、內(nèi)酯、環(huán)狀碳酸酯、烷基取代的環(huán)狀碳酸酯、芳基取代的環(huán)狀碳酸酯、-芳基-C(O)OR，-烷基-芳基-C(O)OR、-烷基-C(O)R、-烷基-N(R″)C(O)R和-烷基-N(R″″)C(O)OR。更特別地，R8選自-(CH2)2OC(O)CH(CH2CH3)2、-(CH2)2OC(O)CH(CH3)2、-(CH2)2OC(O)PH-OCH(CH3)2、-CH2OC(O)CH2N(CH3)CH2PH、-CH2OC(O)CH2-PH-N(CH3)2和-CH2OC(O)CH(CH2)6。
除非另外說明，術(shù)語“烷基”指僅由碳和H組成的飽和直鏈、支鏈或環(huán)狀取代基。例如，烷基可被OH、鹵素、氰基、NO2、烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基磺?；?、C1-4烷氧羰基和C1-8烷硫基所取代。術(shù)語“烷氧基”指O-烷基，其中烷基如前定義。芳基取代基包括，例如，苯基、萘基、二苯基、氟代苯基、二氟代苯基、芐基、苯甲酰氧基苯基、乙酯基苯基、乙?；交⒁已趸交?、苯氧基苯基、羥苯基、羧基苯基、三氟甲基苯基、甲氧基乙基苯基、乙酰氨基苯基、甲苯基、二甲苯基、二甲基氨基甲酰苯基等。“Ar”可以是芳基或雜芳基。術(shù)語“雜環(huán)基”、“雜環(huán)”或“雜環(huán)殘基”表示單環(huán)或稠合的環(huán)或具有至少一個非碳原子作為環(huán)原子的環(huán)，如，吡啶、嘧啶、噁唑啉、吡咯、咪唑、嗎啉、呋喃、吲哚、苯并呋喃、吡唑、吡咯烷、哌啶、噻吩和苯并咪唑。例證的烷基胺包括-(CH2)2N(Me)CH2(Ar)如-(CH2)2N(Me)CH2(PH)、-CH2CH2-N(Me)-CH2(雜芳基)和 。符號“Ph”或“PH”指苯基。術(shù)語“鹵代基”指氟代基、氯代基、溴代基或碘代基。用于溶劑如CH2Cl2或甲苯中的“脫水劑”包括但不限于硫酸和乙酐?！蔼毩⒌亍敝府敶嬖诓恢烈粋€取代基時，所述取代基可不相同。
本發(fā)明的化合物在二氫吡啶環(huán)內(nèi)的4-位上是不對稱的，并因而作為旋光對映體存在。因此，由可存在于其旋光對映體、外消旋體和外消旋混合物中的其它不對稱中心產(chǎn)生的所有可能的光學異構(gòu)體、對映體、對映異構(gòu)體和非對映體也是本發(fā)明的一部分?？捎帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員所知道的方法，例如，對映體純的酸的非對映異構(gòu)體鹽的分級重結(jié)晶，分離對映體?；蛘?，可用層析法在Pirkle型柱中分離對映體。
如在本文中所用的，術(shù)語“藥學上可接受的鹽”指具有需要的游離堿的藥理學活性的游離堿的鹽，而這種游離堿不是生物學上或其它方面不需要的。這些鹽可衍生自無機酸或有機酸。無機酸的實例有鹽酸、硝酸、氫溴酸、硫酸和磷酸。有機酸的實例有乙酸、丙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、蘋果酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對-甲苯磺酸、甲磺酸、水楊酸等。
可用易購到的初始原料和本領(lǐng)域所熟知的反應(yīng)步驟制備所述化合物(Edema等，J.Org.Chem.585624-7，1993；Howard等J.Amer.Chem.Soc.82158-64，1960)本發(fā)明也提供包括所述化合物和藥學上可接受的載體的藥用組合物。
可根據(jù)常規(guī)的制藥技術(shù)制備含與藥用載體緊密混合的作為活性成分的本發(fā)明化合物的藥用組合物。取決于用藥，如全身用藥，包括但不限于靜脈內(nèi)、口服、經(jīng)鼻或不經(jīng)腸的要求的制劑形式，所述載體可采取各種形式。在制備口服劑型的組合物中，可采用任何常用的藥用載體，如在口服液體制劑(如，懸液、酏劑和溶液)的情況下有水、甘醇、油、醇、增香劑、防腐劑、著色劑、糖漿等，而在口服固體制劑(如，粉劑、膠囊和片劑)的情況下，載體有如淀粉、糖、稀釋劑、成粒劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等。
在一實施方案中，本發(fā)明的化合物通過吸入給藥。對于吸入給藥，所述化合物可以在打算通過計量劑量吸入器給藥的溶液中，或為打算用于干粉吸入器或吹入器的形式。更具體地，所述化合物可采用合適的推進劑，如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它適用氣體，從壓力容器、加壓包裝或噴霧器以氣霧劑形式方便地傳遞。通過提供傳遞計量的閥可確定劑量單位。用藥學上可接受的材料如明膠制備的、用于吸入器或吹入器的膠囊和藥物筒可配制成含有所述化合物和適用的粉末基質(zhì)如內(nèi)酯或淀粉的粉末混合物。
因給藥方便，片劑和膠囊代表有利的口服劑量單位形式，其中采用固體藥用載體。如需要，片劑可通過標準技術(shù)包有糖衣或腸溶衣。針對不經(jīng)腸給藥，載體通常會含滅菌水，盡管也可包括用來幫助溶解或用作防腐劑的其它成分。也可制備可注射的懸液，其中可采用適當?shù)囊后w載體、懸浮劑等。如上如述，所述化合物也可以霧化劑形式給藥。
本發(fā)明的藥用組合物每劑量單位(如，片劑、膠囊、粉劑、注射劑、一茶匙容量的液體劑(teaspooful)等)可含約0.001-約100mg/kg，優(yōu)選約0.01-約20mg/kg的本發(fā)明化合物。
本發(fā)明的化合物抑制鈣離子攝入平滑肌細胞內(nèi)，并因此起到了松馳或預防鈣離子介導的平滑肌組織的收縮的作用。
因而，本發(fā)明進一步提供治療患有可通過減少鈣離子流入細胞而緩解的疾病的患者的方法，而鈣離子流入細胞內(nèi)的作用是該疾病的原因，所述方法包括給予患者治療有效劑量的本發(fā)明藥用組合物。舉例來說，在患有哮喘的患者中，患者的氣管因氣管的平滑肌細胞(“SMC’S”)的發(fā)炎而收縮。鈣離子流入SMC’S(其作用是該疾病的原因)的減少將有望減輕所述疾病。
本發(fā)明還進一步提供抑制患者發(fā)生可通過減少鈣離子流入細胞而緩解的疾病的方法，而鈣離子流入細胞內(nèi)的作用是該疾病的原因，所述方法包括給予患者預防有效劑量的本發(fā)明的藥用組合物。
在一個實施方案中，所述疾病選自過敏、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、支氣管痙攣、痛經(jīng)、食管痙攣、青光眼、早產(chǎn)、泌尿道疾病、胃腸動力障礙和心血管疾病。在優(yōu)選的實施方案中，所述疾病為哮喘。心血管疾病可為，例如，高血壓、局部缺血、心絞痛、充血性心力衰竭、心肌梗死或中風。
本文所用的，“治療”疾病是指減輕或改善其病因和/或影響?！耙种啤奔膊〉陌l(fā)生是指預防、延緩或降低這樣的發(fā)病的可能性。
術(shù)語“患者”包括，但不限于任何動物或人工改良的動物。在優(yōu)選的實施方案中，所述患者為人。
確定所述藥用組合物的治療和預防有效劑量的方法為本領(lǐng)域已知的。
例如，可由動物研究結(jié)果經(jīng)數(shù)學處理確定所述藥用組合物對人體給藥的有效劑量。
本發(fā)明進一步提供給予患者本發(fā)明的藥用組合物的設(shè)備，它包括容器及其中的藥用組合物，其中所述容器具有向患者傳遞治療和/或預防劑量的所述藥用組合物的裝置。在優(yōu)選的實施方案中，該設(shè)備為通過局部呼吸給藥用于治療和/或預防哮喘的氣霧劑噴霧裝置。最后，本發(fā)明提供制備式I化合物的方法， 式I該方法包括使化合物1a與式1b和1c的化合物反應(yīng)，生成式1d的相應(yīng)化合物。 通過參考下面的實驗詳述可更好地理解本發(fā)明，但本領(lǐng)域的技術(shù)人員很容易理解，這些只是后文的權(quán)利要求中更充分描述的本發(fā)明的示例性說明。另外，在本申請中，引用了各種出版物。這些出版物公開內(nèi)容通過引用結(jié)合到本申請中，以更加充分的描述本發(fā)明實驗詳述A.流程與合成可根據(jù)下列概述于流程I的通用方法制備式I化合物。初始原料都是本領(lǐng)域所熟知且易于獲得的(1，3，5，6-四氫-2H-4，1-苯并thiazocin-2-one的合成，Nair等，Indian J.Chem.，Sect.B(1980)，19B(9)，765-6.CODENIJSBDB，ISSN0376-4699.CAN 94121488 AN1981121488 CAPLUS)。 流程I制備二氫吡啶的方法可以從本領(lǐng)域的許多文獻中得到引證，如在Eistert等(Chem.Ber.110，1069-1085，1977)，G.A.Pagani(J.Chem.Soc.，Perkin Trans.2，1392-7，1974)、Mason等(J.Chem.Soc.(C)2171-76，1967)，E.A.Fehnel(J.Amer.Chem.Soc.74，1569-74，1952)和M.Seiyaku(日本專利申請第58201764號，1984)所示。
根據(jù)流程II可制備式II化合物，其中R1-8如上所述，優(yōu)選在有機溶劑如二甲基甲酰胺(DMF)中的K2CO3或CsCO3的存在下。 流程II根據(jù)流程III也可制備式II化合物，其中R1-8如上所述，優(yōu)選分別在甲酸或NaOH(水溶液)的存在下。 流程III下列實施例更詳細地描述本發(fā)明的代表性化合物的化學合成。本文中公開的其余化合物同樣可根據(jù)這些方法中的一種或多種類似地制備。未作出使這些合成的得率最大化的嘗試，但改變反應(yīng)時間、溫度、溶劑和/或試劑，可以用來提高這樣的得率，這對本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說是顯而易見的。
下表1列出了待測的本發(fā)明化合物的質(zhì)譜數(shù)據(jù)、對尼群地平結(jié)合的抑制和對鈣依賴的平滑肌收縮的抑制。
表1化合物1-11的分子量、質(zhì)譜數(shù)據(jù)和鈣通道拮抗劑活性 式1a化合 尼群地平物編 結(jié)合測定號 R1R2R3R4R5R6分子量 質(zhì)譜 IC50nM1HHHH Cl Me 429.92 M+H＝430 6122HHHClCl (CH2)2N(CH3)CH2Ph 597.56 M+H＝597 1183HHHClCl Me 464.37 M+H＝454 384FFFF F Me 485.43 M+H＝486 2615HHHH NO2Me 440.47 M+Na＝46319006HHHClH Me 429.92 M+H＝430 3377HHHClCl 603.59 M+H ＝603388HHHNO2H Me 440.47 M+Na＝4632619Cl HHH OH Ma 445.92 M+Na＝468130010HHHH Cl (CH2)2N(CH3)CH2Ph 569.14 M+H＝589 9911Cl HHH H (CH2)2N(CH3)CH2Ph 563.1169 M+H＝563 453
實施例1[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2，3-二氯苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，2-[甲基(苯基甲基)氨基]乙酯，5，5-二氧化物 按上面的流程II制備化合物2。制備詳述如下將0.37g(1.76mmol)苯并酮基砜(benzoketosulfone)、0.31g(1.76mmol)2，3-二氯苯甲醛和0.44g(1.76mmol)2-(N-芐基-N-甲基氨基)乙基-3-氨基巴豆酸酯在5ml二噁烷中的溶液回流加熱18小時。將該反應(yīng)物冷卻至室溫，用100ml乙酸乙酯稀釋，并用2×60ml水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，真空濃縮得到黃色油，從二乙醚中固化，得到0.4224g灰白色固體的二氫吡啶。B.測定實施例2尼群地平結(jié)合物抑制作用的測定使雌性新西蘭白兔(1-2公斤)經(jīng)頸脫位處死，立即取出其心臟，洗凈、切成小片。于5倍體積的pH7.4的0.05M Hepes緩沖液中勻化該組織。勻漿以4000g離心10分鐘，上清液以42,000×g再離心90分鐘。生成的膜沉淀再懸浮(0.7ml/g重量)于0.05M的pH7.4的Hepes緩沖液中，并于70℃下貯存至使用。各結(jié)合測定試管中的1.0ml總體積中含有3H-尼群地平(0.05-0.50nM)、緩沖液、膜(0.10ml)測試化合物。90分鐘后，于4℃下，在Whatman GF/C過濾器上過濾，使結(jié)合的尼群地平與非結(jié)合的尼群地平分離。漂洗后，干燥濾膜并用液體閃爍計數(shù)器計數(shù)。
從總結(jié)合中減去非特異性結(jié)合的3H-尼群地平(即在過量的未標記尼群地平存在下結(jié)合的量)，以得到特異性結(jié)合的放射標記的尼群地平。將在測試化合物存在下的特異性結(jié)合的尼群地平的量與無該化合物時結(jié)合的量比較。則可計算出置換(或抑制)百分率。
實施例3對鈣依賴平滑肌收縮的抑制作用的試驗將取自因注射過量KCl處死的狗的氣管和主動脈在4℃下于充氧克-漢(krebs-Henseleit)緩沖液中貯存過夜。從支氣管的末端起始處切下一個軟骨節(jié)片寬度(5-10mm)的氣管軟骨環(huán)。還制備同樣寬度的主動脈組織環(huán)。切下軟骨后，于37℃下，在25ml組織浴中，將氣管肌組織和主動脈組織懸浮于充氧克-漢緩沖液中。60分鐘的平衡期之后，用10μM碳酰膽堿攻擊該組織。5分鐘后，漂洗該組織并放置50分鐘。然后用50mM KCl攻擊該組織，并于30分鐘后對其收縮進行定量。然后漂洗該組織并再平衡50分鐘。然后用10分鐘加入測試化合物，用50mM KCl再次攻擊該組織。30分鐘后，記錄其收縮。則可計算出平滑肌收縮的抑制百分率。
權(quán)利要求
1.一種式I化合物 式I或其藥學上可接受的鹽，其中(a) R1、R2、R3、R4和R5獨立地選自H、OH、鹵素、氰基、NO2、烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基磺?；1-4烷氧羰基、C1-8烷硫基、二氟甲氧基、二氟甲硫基、三氟甲基和噁二唑(由R1和R2形成)；(b) R6選自H、C1-5直鏈或支鏈烷基、烷基胺、芳基、3-哌啶基、N-取代的3-哌啶基，和N-取代的2-吡咯烷基亞甲基，其中所述的N-取代的3-哌啶基和所述的N-取代的2-吡咯烷基亞甲基可由C1-8直鏈或支鏈烷基或芐基取代，且所述的取代烷基可由C1-8烷氧基、C2-8鏈烷酰氧基、苯乙酰氧基、苯甲酰氧基、羥基、鹵素、對-甲苯磺酰氧基、甲磺酰氧基、氨基、烷氧羰基或NR′R″取代，其中(i)R′和R″獨立地選自H、C1-8直鏈或支鏈烷基、C3-7環(huán)烷基、苯基、芐基和苯乙基，或(ii)R′和R″共同形成選自哌啶子基、吡咯烷基、嗎啉代、硫代嗎啉代、哌嗪基、2-噻吩基、3-噻吩基的雜環(huán)及所述雜環(huán)的N-取代衍生物，所述的N-取代衍生物由H、C1-8直鏈或支鏈烷基、芐基、二苯甲基、苯基和/或被取代的苯基(由NO2、鹵素、C1-8直鏈或支鏈烷基、C1-8烷氧基和/或三氟甲基取代)取代；和(c) R7選自H、氨基、烷基、芳基、三氟甲基、烷氧甲基、2-噻吩基和3-噻吩基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R6選自甲基、-(CH2)2N(CH3)CH2PH和
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R4為NO2而R7為甲基。
4.權(quán)利要求2的化合物，其中R4和R5為Cl，和R7為甲基。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R7為甲基。
6.權(quán)利要求1的化合物，它為[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2-氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，甲酯，5，5-二氧化物。
7.權(quán)利要求1的化合物，它為[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2，3-二氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，2-[甲基(苯基甲基)氨基]乙酯，5，5-二氧化物。
8.權(quán)利要求1的化合物，它為[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2，3-二氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，甲酯，5，5-二氧化物。
9.權(quán)利要求1的化合物，它為[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，1，4，6，7-四氫-2-甲基-4-(五氟代苯基)-，甲酯，5，5-二氧化物。
10.權(quán)利要求1的化合物，它為[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，1，4，6，7-四氫-2-甲基-4-(2-硝基苯基)-，甲酯，5，5-二氧化物。
11.權(quán)利要求1的化合物，它為[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(3-氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，甲酯，5，5-二氧化物。
12.權(quán)利要求1的化合物，它為[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2，3-二氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，2-[甲基(2-噻吩基甲基)氨基]乙酯，5，5-二氧化物。
13.權(quán)利要求1的化合物，它為[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，1，4，6，7-四氫-2-甲基-4-(3-硝基苯基)-，甲酯，5，5-二氧化物。
14.權(quán)利要求1的化合物，它為[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2-氯-6-羥基苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，甲酯，5，5-二氧化物。
15.權(quán)利要求1的化合物，它為[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2-氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，2-[甲基(2-噻吩基甲基)氨基]乙酯，5，5-二氧化物。
16.權(quán)利要求1的化合物，它為[3]苯并硫雜環(huán)庚烯并[1，2-b]吡啶-3-羧酸，4-(2-氯代苯基)-1，4，6，7-四氫-2-甲基-，2-[甲基(苯基甲基)氨基]乙酯，5，5-二氧化物。
17.一種式II化合物， 式II或其藥學上可接受的鹽，其中(a) R1、R2、R3、R4和R5獨立地選自氫、OH、鹵素、氰基、NO2、烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基磺酰基、C1-4烷氧羰基、C1-8烷硫基、二氟甲氧基、二氟甲硫基、三氟甲基和噁二唑(由R1和R2形成)；(b) R7選自氫、氨基、烷基、芳基、三氟甲基、烷氧甲基、2-噻吩基和3-噻吩基；和(c) R8選自-烷基-OH、烷基胺、內(nèi)酯、環(huán)狀碳酸酯、烷基取代的環(huán)狀碳酸酯、芳基取代的環(huán)狀碳酸酯、-芳基-C(O)OR、-烷基-芳基-C(O)OR、-烷基-OC(O)R、-烷基-C(O)R、-烷基-C(O)OR、-烷基-N(R″)C(O)R及-烷基-N(R″″)C(O)OR，其中R和R″″獨立地選自氫、氨基、烷基、芳基、芳基稠合的環(huán)烷基和雜環(huán)基，所述的氨基、烷基、芳基、芳基稠合的環(huán)烷基和雜環(huán)基任選被鹵素、氰基、NO2、內(nèi)酯、氨基、烷基氨基、芳基取代的烷基氨基、酰胺、氨基甲酸酯、氨基甲酰基、環(huán)狀碳酸酯、烷基、鹵素取代的烷基、芳烷基、烷氧基、雜環(huán)基和/或芳基(所述芳基任選被OH、鹵素、氰基、NO2、烷基、氨基、二甲氨基、烷氧基、烷基磺酰基、C1-4烷氧羰基、烷硫基和/或三氟甲基取代)取代。
18.權(quán)利要求17的化合物，其中R7為甲基，而R1、R2、R3、R4和R5獨立地選自氫、鹵素、三氟甲基和NO2。
19.權(quán)利要求17的化合物，其中R8選自-烷基-OH、烷基胺、內(nèi)酯、環(huán)狀碳酸酯、烷基取代的環(huán)狀碳酸酯、芳基取代的環(huán)狀碳酸酯、-芳基-C(O)OR、-烷基-芳基-C(O)OR、-烷基-C(O)R、-烷基-N(R″)C(O)R和-烷基-N(R″″)C(O)OR。
20.權(quán)利要求17的化合物，其中R8選自-(CH2)2OC(O)CH(CH2CH3)2、-(CH2)2OC(O)CH(CH3)2、-(CH2)2OC(O)PH-OCH(CH3)2、-CH2OC(O)CH2N(CH3)CH2PH、-CH2OC(O)CH2-PH-N(CH3)2和-CH2OC(O)CH(CH2)6。
21.一種藥用組合物，它包括權(quán)利要求1或17的化合物和藥學上可接受的載體。
22.一種治療患有其病情可通過減少流入細胞的鈣離子而被調(diào)節(jié)減輕的疾病的患者的方法，而鈣離子流入細胞的作用引起了該疾病，該方法包括給予患者治療有效劑量的權(quán)利要求21的藥用組合物。
23.權(quán)利要求22的方法，其中所述患者有正常血壓或低血壓。
24.權(quán)利要求22的方法，其中所述疾病選自過敏、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、支氣管痙攣、痛經(jīng)、食管痙攣、青光眼、早產(chǎn)、泌尿道疾病、胃腸動力障礙和心血管疾病。
25.權(quán)利要求24的方法，其中所述疾病為哮喘。
26.權(quán)利要求24的方法，其中所述心血管疾病選自高血壓、局部缺血、心絞痛、充血性心力衰竭、心肌梗死和中風。
27.一種抑制患者疾病發(fā)作的方法，所述疾病的病情通過減少流入細胞的鈣離子而被調(diào)節(jié)減輕，鈣離子流入細胞的作用引起了該疾病，該方法包括給患者預防有效劑量的權(quán)利要求21的藥用組合物。
28.權(quán)利要求27的方法，其中所述患者有正常血壓或低血壓。
29.權(quán)利要求27的方法，其中所述疾病選自過敏、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、支氣管痙攣、痛經(jīng)、食管痙攣、青光眼、早產(chǎn)、泌尿道疾病、胃腸動力障礙和心血管疾病。
30.權(quán)利要求29的方法，其中所述疾病為哮喘。
31.權(quán)利要求29的方法，其中所述心血管疾病選自高血壓、局部缺血、心絞痛、充血性心力衰竭、心肌梗死和中風。
32.一種向患者給予權(quán)利要求21的藥用組合物的設(shè)備，它包括容器和其中的藥用組合物，其中所述容器有向患者傳遞治療和/或預防劑量的所述藥用組合物的裝置。
33.一種制備式I化合物的方法， 式I它包括使式1a化合物與式1b和1c化合物反應(yīng)，生成式1d化合物。
全文摘要
本發(fā)明提供式(I)和(II)的新的苯并呋喃。這些化合物可用作具有心血管、抗哮喘和抗支氣管收縮活性的鈣通道阻滯劑。因此，本發(fā)明也提供藥用組合物和方法，以預防和治療疾病如過敏、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、支氣管痙攣、痛經(jīng)、食管痙攣、青光眼、早產(chǎn)、泌尿道疾病、胃腸動力障礙和心血管疾病。
文檔編號A61P43/00GK1451010SQ00819303
公開日2003年10月22日 申請日期2000年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2000年1月12日
發(fā)明者J·H·多德, J·L·布林頓, K·C·魯珀特, D·A·哈爾 申請人:奧索-麥克尼爾藥品公司