專利名稱：水溶性喜樹堿衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及水溶性的7位取代的喜樹堿衍生物，它們在治療腫瘤上的應(yīng)用及其制備方法。
喜樹堿，一種天然細(xì)胞毒性生物堿，是一種局部異構(gòu)酶Ⅰ抑制劑和有效的抗腫瘤劑。它首次由Wall等(J.Am.Chem.Soc.883888(1966))于中國植物，喜樹(Camptotheca accuminata)的葉和樹皮中分離出。
如圖所示，喜樹堿是一個(gè)依次稠合于內(nèi)酯環(huán)(E)的α-吡啶酮環(huán)(D)，稠合于α-吡啶酮環(huán)的吡咯烷環(huán)(C)，稠合于吡咯烷環(huán)的喹啉環(huán)(A和B)構(gòu)成的稠環(huán)系。
其在20位上具有一個(gè)不對稱碳，可能形成兩個(gè)對映體。但是，天然存在的化合物是如上所示的“S”構(gòu)型。
細(xì)胞毒性劑，即化療劑經(jīng)常用于控制和根除腫瘤。喜樹堿的細(xì)胞毒性活性被認(rèn)為直接與作為局部異構(gòu)酶抑制劑的喜樹堿的效力有關(guān)。[局部異構(gòu)酶功能的詳細(xì)介紹見A.Lehninger，Principles of Biochemistry，813，Worth Publishers，New York(1982);L.F.Liu，"DNA Topoisomerases，"CRC Critical Review in Biochemistry，1-24，15(1983)和H Vosberg"DNA TopoisomerasesEnzymes that Control DNA Conformation，"Current Topics in Microbiology and Immunology，19，Springer-Verlag，Berlin(1985)]特別是在對試驗(yàn)動(dòng)物白血病(L-1210)和某些硬腫塊的治療上已表明喜樹堿是有效的，例如見Chem.Rev.23，385(1973)和Cancer Treat.Rep.，60，1007(1967)。
不幸地是，作為有效抗腫瘤劑的喜樹堿在臨床上并不完全象所想象的那樣，喜樹堿基本不溶于生理上適合的水介質(zhì)，其必須經(jīng)過改性以使其有足夠的溶解性以適于非腸道給藥-一種腫瘤治療中優(yōu)選的方式。通過形成其鈉鹽，也就是，通過用氫氧化鈉將內(nèi)酯開環(huán)可以將喜樹堿變成可溶性的(見F.M.Muggia等，Cancer Chemotherapy Reports，pt.1，56，No.4，515(1972))，但是，M.C.Wani等，J.Med.Chem，23，554(1980)發(fā)現(xiàn)環(huán)E的α-羥基內(nèi)酯基團(tuán)對于抗腫瘤活性是必不可少的。
在本領(lǐng)域有許多制備喜樹堿的變體和衍生物以增加其水溶性的實(shí)例，雖然其中許多衍生物在體外以及用白血病(L-1210)模型進(jìn)行的早期動(dòng)物研究中是有效的，但是它們對于慢性的、包括移植了硬腫塊的動(dòng)物模型則不理想。
Miyasaka等于美國專利4，399，282中公開了一組7位有取代基的，特別是有羥甲基和烷氧甲基取代的喜樹堿衍生物。另外Miyasaka等于美國專利4，399，276中公開了喜樹堿-7-醛和某些有關(guān)的醛衍生物如乙縮醛、肟和腙。最近，與Boehm等于歐洲專利032122A2中一樣，Vishnuvajjala等于美國專利4，943，579中公開了一系列在A環(huán)具有取代基的水溶性喜樹堿衍生物。Miyasaka等于美國專利4，473，692和4，545，880;以及W.Kingsbury等于J.Med.Chem.，34，98(1991)中公開了其它的喜樹堿衍生物的實(shí)例。但這些參考文獻(xiàn)中沒有一篇公開過比喜樹堿本身抗腫瘤活性強(qiáng)的化合物。
Wani及其同事曾報(bào)導(dǎo)10，11-亞甲二氧基喜樹堿較未取代的喜樹堿有更高的效力(見M.C.Wani等，J.Med.Chem，29，2358(1986)和30，2317(1987))。但其水溶性與喜樹堿一樣差，這就大大地限制了它在臨床上的應(yīng)用。
現(xiàn)在我們發(fā)現(xiàn)了在體外具有良好的局部異構(gòu)酶Ⅰ抑制劑活性和在體內(nèi)具有驚人的抗腫瘤活性的水溶性喜樹堿類似物。
一方面，本發(fā)明提供了下列式(Ⅰ)的水溶性喜樹堿類似物及其藥物上可接受的鹽，
其中n表示整數(shù)1或2;和ⅰ)R1和R2分別表示氫，低級烷基，(C3-7)環(huán)烷基，(C3-7)環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，羥基低級烷基，低級烷氧基低級烷基;
ⅱ)R1表示氫，低級烷基，(C3-7)環(huán)烷基，(C3-7)環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，羥基低級烷基或低級烷氧基低級烷基，和R2表示-COR3，其中R3表示氫，低級烷基，全鹵代-低級烷基，(C3-7)環(huán)烷基，(C3-7)環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，羥基低級烷基，低級烷氧基，低級烷氧基低級烷基;
或ⅲ)R1和R2與所連接的氮原子一起形成一個(gè)下列式(ⅠA)的飽和3-7元雜環(huán)基
其中Y表示O，S，CH2或NR4
其中R4表示氫，低級烷基，全鹵代-低級烷基，芳基，被一個(gè)或多個(gè)低級烷基、鹵素、硝基、氨基、低級烷氨基、全鹵代-低級烷基、羥基低級烷基、低級烷氧基、低級烷氧基低級烷基基團(tuán)取代的芳基;或-COR5，其中R5表示氫，低級烷基，全鹵代-低級烷基，低級烷氧基，芳基，被一個(gè)或多個(gè)低級烷基、全鹵代-低級烷基、羥基低級烷基、低級烷氧基低級烷基基團(tuán)取代的芳基。
藥物上可接受的鹽包括但不限于與無機(jī)酸如鹽酸、硫酸、磷酸、二磷酸、氫溴酸和硝酸形成的鹽或與有機(jī)酸如乙酸、蘋果酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、琥珀酸、檸檬酸、乳酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、棕櫚酸、水楊酸和硬脂酸形成的鹽。與其它酸如草酸，其本身為非藥物上可接受的但可用其制備本發(fā)明化合物及其藥物上可接受的鹽的中間體。
通過堿金屬或堿土金屬如氫氧化鈉或氫氧化鈣可以將內(nèi)酯環(huán)即環(huán)E開環(huán)，形成相應(yīng)的E環(huán)開環(huán)形式的式(Ⅰ)化合物的堿金屬或堿土金屬鹽。由于其在水中有較好的溶解性，因而E環(huán)開環(huán)的形式有利于通過常規(guī)重結(jié)晶技術(shù)純化。因此，所述E環(huán)開環(huán)形式可以用作生成式(Ⅰ)化合物的中間體，例如通過用酸例如鹽酸處理，從而制得純的式(Ⅰ)化合物。
如上所述，喜樹堿殘基的20位上有一個(gè)不對稱碳原子，可能存在兩個(gè)對映體即“R”和“S”構(gòu)型。本發(fā)明包括此兩種對映體及其任何結(jié)合形式。為了簡便，當(dāng)結(jié)構(gòu)式中沒有具體描繪20位的構(gòu)型時(shí)，則其被理解是表示兩個(gè)對映體形式和其混合物。除非另有說明，命名原則是，“(R，S)”表示外消旋的(幾乎等量的)R和S對映體混合物，而“(R)”和“(S)”分別表示基本上光學(xué)純的R和S對映體。本發(fā)明還包括式(Ⅰ)化合物的其它形式，例如溶劑化物，水合物，多晶型物等等。
另一方面，本發(fā)明提供了抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞中局部異構(gòu)酶Ⅰ型的方法，其包括給患者施予局部異構(gòu)酶抑制量的式(Ⅰ)化合物，和治療哺乳動(dòng)物腫瘤的方法，其包括給患有腫瘤的哺乳動(dòng)物施予抗腫瘤有效量的式(Ⅰ)化合物。另外，本發(fā)明還包括含有作為活性成分的式(Ⅰ)化合物的藥物配劑。正如此所說明的，式(Ⅰ)化合物的制備方法和用于合成中有關(guān)的新的化學(xué)中間體也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
在此所用的術(shù)語“低級”在烷基和烷氧基中是指1-6個(gè)碳原子和在鏈烯基中是指3-6個(gè)碳原子(條件是雙鍵不能與連接到氮原子上的碳原子相連)。術(shù)語“全鹵代”意思是指所有的氫全部被鹵素所取代，例如全鹵代低級烷基，如三氟甲基。術(shù)語“芳基”意思是指苯基或萘基。
特定的式(Ⅰ)化合物是其中具有下述定義的式(Ⅰ)化合物，其中R1和R2表示ⅰ)分別表示氫，(C1-4)烷基，(C3-7)環(huán)烷基，(C3-7)環(huán)烷基(C1-4)烷基，(C3-4)鏈烯基，羥基(C1-4)烷基，(C1-4)烷氧基(C1-4)烷基，或ⅱ)與氮碳原子一起形成氮丙啶，氮雜環(huán)丁烷，吡咯烷，哌啶，六亞甲基亞胺，咪唑烷，吡唑烷，異噁唑烷，哌嗪，N-甲基哌嗪，高哌嗪，N-甲基高哌嗪，噻唑烷，異噻唑烷，嗎啉或硫代嗎啉。
本發(fā)明優(yōu)選的一組化合物是下列定義的式(Ⅰ)化合物及其藥物上可接受的鹽，其中n表示整數(shù)1或2;和ⅰ)R1和R2分別表示氫，低級烷基(如甲基、乙基)或羥基低級烷基(如羥乙基);
ⅱ)R1表示氫和R2表示-COR3，其中R3表示全鹵代-低級烷基(如三氟甲基);或者ⅲ)R1和R2與所述連接的氮原子一起形成氮雜環(huán)丁烷，吡咯烷，哌嗪，嗎啉，硫代嗎啉或任意被低級烷基(如甲基);苯基;被一個(gè)或多個(gè)全鹵代-低級烷基(如三氟甲基)或低級烷氧基(如甲氧基)取代的苯基或-COR5，其中R5表示低級烷氧基(如丁氧基)N-取代的哌嗪。
特定的式(Ⅰ)化合物是實(shí)施 化合物名稱例號1.7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿;
2.7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿;
3.7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿;
4.7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿;
5.7-嗎啉代亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿;
6.7-嗎啉代亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿;
7.7-吡咯烷基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿;
8.7-哌啶子基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿;
9.7-哌啶子基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿;
10.7-(4-甲基哌嗪基亞甲基)-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿;
11.7-(4-甲基哌嗪基亞甲基)-10，11-亞乙二氧基-20(R)-喜樹堿;
12.7-二乙氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿;
13.7-二乙氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿;
14.7-二乙氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿;
15.7-N-甲基乙醇氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿;
16.7-N-甲基乙醇氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿;
17.7-二乙醇氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿;
18.7-二乙醇氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿;
19.7-氮雜環(huán)丁烷基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿;
20.7-氮雜環(huán)丁烷基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿;
21.7-硫代嗎啉代亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿;
22.7-氮雜環(huán)丁烷基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿;
23.7-(4-甲基哌嗪基亞甲基)-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿;
24.7-三氟乙酰氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿;
25.7-三氟乙酰氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿;
26.7-氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿二氫氯酸鹽;
27.7-氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿二氫氯酸鹽;
28.7-叔丁氧羰基-哌嗪基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿;
29.7-哌嗪基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿三氟乙酸鹽;
30.7-(α，α，α-三氟-間甲苯基)-哌嗪基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿;
31.7-(2-甲氧苯基-哌嗪基)亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿;和32.7-苯基哌嗪基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿。
其它特定的式(Ⅰ)化合物是下列式(Ⅰ′)化合物及其藥物上可接受的鹽;
其中n表示整數(shù)1或2;和R1a和R2a表示ⅰ)分別表示氫，低級烷基，(C3-7)環(huán)烷基，(C3-7)環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，羥基低級烷基，低級烷氧基低級烷基，或ⅱ)與所述連接的氮原子一起形成下列式(ⅠA′)的3-7元雜環(huán)基
其中Ya表示O，S，CH2，NH或N(低級烷基)。
根據(jù)常規(guī)方法(A)，式Ⅰ化合物可以通過下列路線1中步驟2所示的方法制備
路線1在路線1步驟1中，根據(jù)Wall等于1990年1月16日公開的美國專利4，894，456(下文為′456)(在此作參考)中描述的方法，式(Ⅱ)化合物，其中X是離去基團(tuán)(如在J.March，Advanced Organic Chemistzy，第3版，第179頁，John Wiley & Sons，New York(1985)中的定義，例如鹵素，如氯，可以與式(Ⅲ)化合物反應(yīng)生成式(Ⅳ)化合物。
在步驟2(常規(guī)方法A)中，通過用式(Ⅴ)化合物，其中R1和R2如式(Ⅰ)中定義，取代離去基團(tuán)X可以將式(Ⅳ)化合物轉(zhuǎn)變成式(Ⅰ)化合物。此取代反應(yīng)通?？梢栽谟谢驔]有堿如碳酸鉀的情況下，在過量的胺即過量的式(Ⅴ)化合物存在下，在溶劑系統(tǒng)中，如水，(C1-4)鏈烷醇，(C2-4)鏈烷二醇，1-羥基-2-甲氧乙烷，二甲基乙酰胺(DMAC)，N-甲基吡咯烷酮，二甲基甲酰胺(DMF)，四氫呋喃(THF)，二甲亞砜(DMSO)，甲苯或這些溶劑的混合物中進(jìn)行。
此方法特別適于制備其中R1和R2均不為氫的式(Ⅰ)化合物。
根據(jù)另一常規(guī)方法(B)，式(Ⅰ)化合物可以通過下列路線1A中步驟2a所示的方法的制備
路線1A在步驟1a中，將式(Ⅴ)化合物與下式(Ⅱ)化合物反應(yīng)生成式(ⅡA)化合物，其中R1和R2如式(Ⅰ)中定義。此反應(yīng)可以在與常規(guī)方法(A)(路線1，步驟2)中描述的相同的條件下進(jìn)行。
在步驟2a(常規(guī)方法B)中，按照與上述路線1，步驟1中描述的相似的方法，將式(ⅡA)化合物與式(Ⅲ)化合物反應(yīng)生成式(Ⅰ)化合物。
在方法(B)的特殊實(shí)施方案中，式(Ⅰ)化合物可以通過下列路線1B所示的方法制備
在步驟1b中，于極性非質(zhì)子傳遞溶劑如乙腈中，在溶于極性非質(zhì)子傳遞溶劑的堿存在下，例如當(dāng)溶劑為乙腈時(shí)堿為碳酸銫，將式(Ⅴa)化合物(其中“Hal”是鹵素，即氟，氯，溴或碘)如三氟乙酰胺與式(Ⅱ)化合物反應(yīng)生成式(Ⅱb)化合物。
在步驟2b中，按照與路線1，步驟1中描述的相似方法，將式(Ⅱb)化合物與式(Ⅲ)化合物反應(yīng)生成式(Ⅳb)化合物。
在步驟3b中，將式(Ⅳb)化合物用酸H+B-，如無機(jī)酸，例如鹽酸處理生成式(Ⅰb)化合物，即式(Ⅰ)化合物的鹽。利用本領(lǐng)域常規(guī)方法可以用堿處理式(Ⅰb)化合物生成相應(yīng)的游離堿。如果需要，利用常規(guī)方法可以將游離堿轉(zhuǎn)變成藥物上可接受的鹽。
這一交替的方法特別適于制備其中R1和R2都是氫或R2是氫的式(Ⅰ)化合物。
式(Ⅱ)化合物可以根據(jù)路線Ⅱ所示的方法制備
路線Ⅱ
在路線Ⅱ步驟1中，在弱堿如碳酸鉀存在下，于極性非質(zhì)子傳遞溶劑如氯仿中，可將式(Ⅵ)化合物與?；瘎?C2-5)鏈烷酰鹵或(C2-5)鏈烷酸酐，例如乙酰氯或乙酸酐反應(yīng)，生成式(Ⅶ)化合物，其中Ac是(2-5)?；?。
在步驟2中，在金屬鹵化物如氯化鋅存在下，于極性非質(zhì)子傳遞溶劑如硝基甲烷中，將式(Ⅶ)化合物與式(Ⅷ)化合物反應(yīng)，其中Ⅹ是如式(Ⅳ)中定義的離去基團(tuán)和Hal是鹵素，生成式(Ⅸ)化合物。例如，式(Ⅷ)化合物可以是鹵代乙酰鹵，如氯代乙酰氯，或鹵代乙腈，如氯乙腈。
在步驟3中，根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法，如在T.Green，Protective Groups in Organic Chemistry，第7章，John Wiley，New York(1981)中描述的方法，通過脫除?；鵄c，即脫酰作用，由式(Ⅸ)化合物制成式(Ⅱ)化合物。例如，可以將式(Ⅸ)化合物于濃鹽酸中回流加熱，并用堿如氫氧化鈉中和生成的鹽制得式(Ⅱ)化合物。
在路線Ⅱ步驟2a中，當(dāng)式(Ⅵ)化合物是亞乙二氧基化合物時(shí)，即n等于2，不必先通過?；饔帽Ｗo(hù)氨基，其可以直接與式(Ⅷ)化合物反應(yīng)生成相應(yīng)的式(Ⅱ)化合物。
另外，式(Ⅱ)化合物可以根據(jù)T.Sugasawa等，J.Org.Chem.，44，578(1979)中公開的方法制備。
式(Ⅲ)化合物可以根據(jù)Wall等于′456第11列第30行起描述的方法制備。顯然由路線1可以看出式(Ⅲ)化合物不對稱碳原子的構(gòu)型控制著式(Ⅰ)化合物的構(gòu)型。式(Ⅲ)化合物的外消旋物可以參照Wani等于美國專利5，053，512(下文指“′512”的方法拆分成其對映體。
新的式(Ⅱ)、(ⅡA)和(Ⅳ)中間體化合物包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
根據(jù)另一常規(guī)方法(D)，用常規(guī)方法可以將本發(fā)明式(Ⅰ)化合物轉(zhuǎn)變成另一種本發(fā)明化合物。
例如，用常規(guī)方法可以將其中R1和R2中的一個(gè)或多個(gè)表示氫的式(Ⅰ)化合物烷基化。反應(yīng)可以用合適的烷基化試劑如烷基鹵、烷基甲苯磺酸酯或二烷基硫酸酯完成。烷基化反應(yīng)通常是在有機(jī)溶劑中如酰胺例如二甲基甲酰胺，或醚例如四氫呋喃中，優(yōu)選地是在有堿存在下進(jìn)行。合適的堿包括堿金屬氫化物，例如氫化鈉，堿金屬碳酸鹽，例如碳酸鈉，或堿金屬醇鹽，例如甲醇鈉或甲醇鉀，乙醇鈉，乙醇鉀或叔丁醇鈉，叔丁醇鉀。烷基化反應(yīng)通常是在25-100℃溫度下進(jìn)行。
另外，通過還原性烷基化作用可以將其中R1和R2中的一個(gè)或多個(gè)表示氫的式(Ⅰ)化合物轉(zhuǎn)變成另一種式(Ⅰ)化合物。以適宜的醛或酮進(jìn)行的還原性烷基化作用可以用堿土金屬硼氫化物或氰基硼氫化物完成。反應(yīng)可以在水或非水反應(yīng)介質(zhì)中，通常在醇如甲醇或乙醇或醚如二噁烷或四氫呋喃中，可選擇性地在水存在下進(jìn)行。反應(yīng)通常在0-100℃，優(yōu)選地是在5-50℃溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。
另外，可以將其中R1和R2中的一個(gè)或多個(gè)表示低級鏈烯基的式(Ⅰ)化合物轉(zhuǎn)變成其中R1和R2表示低級烷基的另一種式(Ⅰ)化合物。還原作用通?？梢栽跉浜徒饘俅呋瘎┤缛顑?nèi)鎳或可以載在例如活性炭上的貴重金屬催化劑如鈀、鉑、氧化鉑或銠的存在下完成。反應(yīng)可以在溶劑中，如醇例如乙醇中，并通常在-10-+50℃，優(yōu)選地是在20-30℃溫度下進(jìn)行。
另外，通過將其中R2表示基團(tuán)COR3而R3表示低級烷氧基的式(Ⅰ)化合物還原可制備其中R2表示羥烷基的式(Ⅰ)化合物。還原通?？梢杂煤线m的氫化物還原劑如氫化鋁鋰或三乙基硼氫化鋰，在合適的溶劑中，如醚例如乙醚、四氫呋喃或二噁烷，或烴如甲苯中進(jìn)行。反應(yīng)通常是在-78-100℃，優(yōu)選地是在約0℃下進(jìn)行。
根據(jù)另一常規(guī)方法(E)，本發(fā)明式(Ⅰ)化合物或其鹽可以通過將式(Ⅰ)被保護(hù)的衍生物或其鹽進(jìn)行脫保護(hù)基或基團(tuán)的反應(yīng)制得。
因而，在制備式(Ⅰ)化合物或其鹽之前，有必要和/或需要保護(hù)分子中的一個(gè)或多個(gè)敏感的基團(tuán)以防止不希望的副作用。
用于制備式(Ⅰ)化合物的保護(hù)基可以根據(jù)常規(guī)使用。例如見“Protective Groups in Organic Chemistry”編輯J.F.W.McOmie(Plenum Press 1973)或“Protetive Groups in Organic Synthesis”Theodora W Greene(John Wiley and Sons 1981)。
常規(guī)的氨基保護(hù)基可以包括例如芳烷基，例如芐基、二苯甲基或三苯甲基;和?；鏝-芐氧羰基或叔丁氧羰基。這樣，通過將相應(yīng)被保護(hù)的化合物脫保護(hù)可以制備其中R1和R2中的一個(gè)或多個(gè)表示氫的通式(Ⅰ)化合物。
羥基可以通過如芐烷基例如芐基、二苯甲基或三苯甲基，?；缫阴；?，硅保護(hù)基例如三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基或四氫吡喃衍生物保護(hù)。
存在的任意保護(hù)基的脫除可以通過常規(guī)方法實(shí)現(xiàn)。如芐基的芳烷基可以在催化劑(如鈀/碳)存在下通過加氫裂解，如N-芐氧羰基的?；梢杂美缫宜嶂械匿寤瘹渌饷摮蛲ㄟ^還原，例如通過催化氫化脫除;硅保護(hù)基可以通過例如用氟離子處理或通過酸性條件下水解脫除;四氫吡喃基團(tuán)可以通過在酸性條件下水解斷裂。
可以理解地是，在上述任一常規(guī)方法(A)-(D)中，有必要或需要按如上述保護(hù)分子中的敏感基團(tuán)。這樣，被保護(hù)的式(Ⅰ)化合物或其鹽的衍生物的脫保護(hù)反應(yīng)可以繼上述任一方法(A)-(D)后進(jìn)行。
而根據(jù)本發(fā)明，如有必要或需要，可以依任何適當(dāng)?shù)捻樞蚶^上述任一方法(A)-(D)后進(jìn)行下列反應(yīng)。
(ⅰ)脫除保護(hù)基;和(ⅱ)將式(Ⅰ)化合物或其鹽轉(zhuǎn)變成其藥物上可接受的鹽。
當(dāng)需要以鹽的形式分離本發(fā)明化合物時(shí)，例如酸加成鹽，可將通式(Ⅰ)的游離堿以適宜的酸，優(yōu)選地是用等當(dāng)量的酸或在合適的溶劑(如含水乙醇)中用硫酸肌酸酐處理實(shí)現(xiàn)。
在制備所需化合物中，用于在中間步驟引入所需基團(tuán)的上述本發(fā)明化合物的常規(guī)制備方法同樣也可以在制備順序中用作最后一步。因此，可以理解地是，在這種多步反應(yīng)過程中，應(yīng)根據(jù)對分子中存在的最終產(chǎn)物所需基團(tuán)無影響的反應(yīng)條件來選擇反應(yīng)順序。
式(Ⅰ)化合物的S對映體具有生物活性，而R對映體幾乎沒有或沒有活性。這樣，式(Ⅰ)化合物的S對映體通常優(yōu)選于R和S的混合物如外消旋混合物。但是，當(dāng)需要R對映體時(shí)，例如用于對照研究或其它化合物的合成，利用根據(jù)′512的方法制備的式(Ⅲ)化合物的R對映體通過上述方法應(yīng)當(dāng)能很方便地制得。
利用反應(yīng)路線Ⅰ，ⅠA或ⅠB制備的式(Ⅰ)化合物可以通過本領(lǐng)域的常規(guī)方法，例如色譜法，蒸餾或結(jié)晶純化。
卵裂體(Cleavable complex)的體外檢測下列表A中的數(shù)據(jù)表明相對于局部異構(gòu)酶1型式(Ⅰ)化合物的抑制活性。與腫瘤與腫瘤動(dòng)物模型中體內(nèi)局部異構(gòu)酶抑制劑抗腫瘤活性有關(guān)的此種檢測是根據(jù)Hsiang，Y等于J.Biol.Chem.，26014873-14878(1985)中描述的方法進(jìn)行，例如喜樹堿和其類似物。見Hsiang等，Cancer Research，494385-4389(1989)和Jaxel等，Cancer Research，491465-1469(1989)。
在大于2000nM的濃度(表A中“+”)具有明顯活性的化合物被認(rèn)為具有弱至中等活性，而在低于500nM濃度(表A中“++++”)具有活性的化合物則具有很強(qiáng)的活性。術(shù)語“IC50”意思是指局部異構(gòu)酶Ⅰ捕獲50%DNA底物時(shí)式(Ⅰ)化合物的濃度。
表A在卵裂體檢測中式(Ⅰ)化合物的局部異構(gòu)酶抑制活性實(shí)施例 異構(gòu)體 相對序號形式 IC50*2 (S) ++++6 (S) ++++11 (S) ++++1 (R,S) ++++
17 (R,S) ++++5 (R,S) ++++4 (S) +++9 (R,S) +++10 (R,S) +++13 (R,S) +++16 (R,S) ++7 (R,S) ++15 (R,S) ++16 (R,S) ++19 (R,S) ++8 (R,S) +＊IC50范圍符號 nM++++ ＜～500+++ ＜～1000＞～500++ ＜～2000＞～1000+ ＞～2000式(Ⅳ)化合物已被發(fā)現(xiàn)具有良好的局部異構(gòu)酶Ⅰ抑制活性。人體腫瘤異種移植近年來，經(jīng)異種移植到裸鼠的人體腫瘤異種移植已被廣泛地用于評估癌癥化療劑的抗腫瘤活性。見Giovanella，B.C.，Stehlin，Jr.，J.S.Shepard，R.C.和Williams，Jr.，L.J.，"Correlation between response to chemotherapy of human tumors in patients and in nude mice"，Cancer 521146-1152，(1983);Boven，E.和Winograd，B，Eds.The Nude Mouse in Oncology Research CRC Press，lnc.，Boca Raton，F(xiàn)L，(1991);和Fiebig，H.H.，"Comparison of tumor response in nude mice and in patients"，Human Tumour Xenografts in Anticancer Drug Development，Winograd，B.，Peckham，M.J.，和Pinedo，H.M.，Eds.，E.S.O.Mongraphs，Springer，Heidelberg，25(1988)。
通常，人體腫瘤異種移植不僅能保持其組織學(xué)特性、生物化學(xué)特性和抗原特性，而且也能保持起始腫瘤組織的化學(xué)敏感性(上述Boven等)。長期的研究提供的證據(jù)表明人體腫瘤異種移植保留了這些起始腫瘤的重要生物學(xué)性質(zhì)，包括已知的患者腫瘤中存在的生物不穩(wěn)定性(上述Boven等)。最重要的是，幾個(gè)研究者已發(fā)現(xiàn)在人體腫瘤異種移植中的藥效與人的臨床結(jié)果之間具有很好的關(guān)聯(lián)作用(上述Giovanella等，如Fiebig)。
人體結(jié)腸腺癌HT-29異種移植的體內(nèi)測定重為2.1±2g的雌性NU/NU小鼠用于B.C.Giovanella，等，Science，246 1046(1989)中描述的改性試驗(yàn)。在試驗(yàn)開始(0天)于對照和試驗(yàn)動(dòng)物的肩胛下部位皮下注射106活HT-29人體結(jié)腸腫瘤細(xì)胞懸浮液。在給藥之前，讓腫瘤生長2周。對每種藥物，根據(jù)其抗局部異構(gòu)酶Ⅰ的體外活性選擇幾種劑量。每個(gè)劑量級別組包含8只動(dòng)物。受試化合物或配制于0.1M乙酸鹽的緩沖液，pH5(載體“a”)中，或配制于87.5%磷酸鹽緩沖液鹽水、12.375%二甲亞砜，和0.125%吐溫80(ICI America的聚氧乙烯脫水山梨糖醇-油酸酯的商標(biāo))(載體“b”)中，并在試驗(yàn)開始的第14天每周皮下給藥2次，給藥5周。根據(jù)每籠的平均體重以mg/Kg為基準(zhǔn)給藥。
從兩次腫瘤的垂直厚度值，用公式腫瘤重量＝長度×寬度2÷2(單位毫米)而算出腫瘤重量。對每只動(dòng)物，腫瘤重量在實(shí)驗(yàn)的整個(gè)過程進(jìn)行監(jiān)視。對每組動(dòng)物，其結(jié)果以給藥5周(50天)的平均腫瘤重量除以給藥前(14天)的平均腫瘤重量的比率表示。結(jié)果描述于表B中。對每一種載體對照，其比率約20，表明在無藥物治療條件下，腫瘤重量較在試驗(yàn)過程增加約20倍。相反，比率為1表明腫瘤停滯，而比率小于1則表明腫瘤消退。因而，化合物4和6使腫瘤停滯，而化合物11和23引起腫瘤消退。抗腫瘤活性的標(biāo)準(zhǔn)為在給藥5周(50天)后，至少為50%地抑制腫瘤生長，所得比率小于或等于10。
表B體內(nèi)抗腫瘤活性最佳劑量化合物 (mg/Kg) 腫瘤重量(50天)/腫瘤重量(14天)對照 -- 20.0a, 21.8b(僅載體)2 0.8 1.8b4 7.0 1.3a, 1.0b6 1.0 1.0b11 9.0 0.6a14 2.0 2.0a20 1.5 1.5a22 12.0 1.6a23 3.0 0.5aapH5，0.1M乙酸鹽緩沖液的載體;
b87.5%磷酸鹽緩沖液鹽水，12.375%二甲亞砜，0.125%吐溫80的載體。
應(yīng)用鑒于這種活性，式(Ⅰ)化合物具有廣譜抗哺乳動(dòng)物(包括人類)腫瘤和癌性瘤的活性如下述癌癥口腔和咽(唇、舌、嘴、咽)癌，食道癌、胃癌、小腸癌、大腸癌、直腸癌;肝癌和膽道癌、胰腺癌、喉癌、肺癌(包括非小細(xì)胞肺癌)，骨癌、結(jié)締組織癌癥、皮膚癌、結(jié)腸癌、乳房癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、膀胱癌、腎癌和其它泌尿組織癌癥，眼癌、腦癌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥，甲狀腺癌和其它內(nèi)分泌腺癌，白血病(淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞和單核細(xì)胞白血病)何杰金氏病，非何杰金氏淋巴瘤，多發(fā)性骨髓瘤，等等。這里使用的術(shù)語“腫瘤”，“癌癥”和“癌性瘤”是同義詞。
當(dāng)然，作為抗腫瘤劑的式(Ⅰ)化合物的有效量隨治療的各個(gè)哺乳動(dòng)物而變化，并最終由醫(yī)生和獸醫(yī)決定?？紤]的因素包括治療條件，給藥渠道，制劑性質(zhì)，哺乳動(dòng)物的體重、表面積、年齡和一般狀態(tài)，特別是給藥的化合物。然而，適宜的有效抗腫瘤劑量在每天約0.1-200mg/Kg體重，優(yōu)選的在每天約1-約100mg/Kg范圍?？偟娜談┝靠梢砸淮涡越o藥，多次給藥，如每天2-6次，或選擇持續(xù)時(shí)間內(nèi)靜脈輸注。大于或小于上述范圍的劑量也屬于本發(fā)明，如果需要或必需可將其施用于個(gè)別患者。
例如，體重75Kg的哺乳動(dòng)物，每天劑量約75到約7500mg，標(biāo)準(zhǔn)劑量每天800mg，如果選擇多次給藥形式，每天以200mg的式(Ⅰ)化合物給藥4次。
制劑作醫(yī)藥使用的本發(fā)明化合物的制劑，由活性化合物即式(Ⅰ)化合物與其可接受的載體和任意其它治療活性成分組成。載體必須是藥學(xué)上可接受的，與制劑中其它組分相容且對受者無害。
因而，本發(fā)明進(jìn)一步提供一種由式(Ⅰ)化合物與其藥學(xué)上可接受載體一起組成的藥物制劑。
制劑包括那些適合口服，直腸，陰道，經(jīng)皮膚或腸胃外(包括皮下，肌肉內(nèi)和靜脈內(nèi))給藥和形式。優(yōu)選的是那些適合于口服或腸胃外給藥形式。
制劑可以方便地制成單位劑量形式，以及以藥學(xué)領(lǐng)域中任意已知的方法制備。所有方法都包括將活性化合物與由一種或多種輔助成分構(gòu)成的載體相結(jié)合。通常，制劑的制備總是將活性化合物與液體載體或精細(xì)分成的固體載體均勻而緊密地結(jié)合，然后，如需要，將產(chǎn)品成型為所要的單位劑量形式。
本發(fā)明適合于口服給藥的制劑可以是分散單位形式如膠囊，扁囊劑，片劑或錠劑，其中每種形式中含有預(yù)定量的活性化合物;如粉末或顆粒;或懸浮液或水溶液或非水溶液，如糖漿，酏劑，乳液或頓服劑。
片劑可以任意地和一種或多種輔助成分一起通過壓片或模鑄制得。壓片可通過在一適宜的機(jī)器內(nèi)，將自由流動(dòng)形式的活性化合物如粉末或顆粒任意地與輔助成分如粘合劑，潤滑劑，惰性稀釋劑，表面活性劑或分散劑混合壓制而得。模鑄片劑可在一適宜的機(jī)器內(nèi)，將粉末化的活性化合物與任意適宜的載體的混合物進(jìn)行模鑄而得。
糖漿或懸浮液可通過將活性化合物加到濃縮的糖的水溶液中，如蔗糖，其中也可加進(jìn)任意的輔助成分。這樣的輔助成分包括調(diào)味劑，阻礙糖結(jié)晶的試劑或一種增加任意其它組分溶解性的試劑，例如多羥基醇如甘油或山梨醇。
直腸或陰道給藥的制劑可以是用常規(guī)的載體如可可脂或Witepsol S55(Dynamite Nobel Chemical，Germany栓劑基料的商標(biāo))制成的栓劑。
對經(jīng)皮膚給藥，本發(fā)明的化合物可以配制成乳油，凝膠，軟膏或洗劑或經(jīng)皮膚吸收的補(bǔ)片。這樣的組合物例如可以用水或油性基料加上適宜的增稠劑，膠凝劑，乳化劑，穩(wěn)定劑，分散劑，懸浮劑，和/或著色劑制成。
適合于腸胃外給藥的制劑較合適地包括能與患者血液等滲的活性化合物的無菌水制劑。這些制劑適宜地包括能與患者血液等滲的式(Ⅰ)化合物藥物或藥理上可接受的酸加鹽的懸浮液或溶液。因而，這些制劑通常含有蒸餾水，含5%葡萄糖的蒸餾水以及于這些溶劑中具有適宜的溶解性的藥理上或藥物上可接受的式(Ⅰ)化合物的酸加成鹽，如氫氯酸鹽?？捎玫闹苿┻€包括含式(Ⅰ)化合物的濃溶液或固體，其可以適宜的溶劑稀釋而得到適合于上述腸胃外給藥的溶液。
除前述的組分外，本發(fā)明的制劑還可進(jìn)一步包含一種或多種在藥物制劑領(lǐng)域中使用的任意的輔助成分，如稀釋劑，緩沖劑，調(diào)味劑，粘合劑，表面活性劑，增稠劑，潤滑劑，懸浮劑，防腐劑(包括抗氧化劑)等等。
實(shí)施例下述實(shí)施例說明本發(fā)明的要點(diǎn)，但不能推斷其為本發(fā)明的限制。這些實(shí)施例中所用的符號和習(xí)慣用法與目前化學(xué)文獻(xiàn)中使用的一致，如Joural of the American Chemical Society。這里使用的術(shù)語“室溫”示指約25℃。
例17-二甲基氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿(化合物1)(A)3，4-亞甲二氧基-N-乙酰苯胺在5℃，向從商業(yè)上可獲得的3，4-亞甲二氧基苯胺(17.0g，124mmol)和碳酸鈉(15.5g，136mmol)的氯仿(90mL)溶液中攪拌滴加乙酰氯(8.8g，124mmol)。此反應(yīng)熱至室溫，繼續(xù)攪拌約18小時(shí)。反應(yīng)混合物以約50mL的1NHCl洗滌兩次，干燥有機(jī)層(MgSO4)，移去溶劑得棕色固體。以水重結(jié)晶，活性炭處理，得3，4-亞甲二氧基-N-乙酰苯胺(9.34g，42.1%理論收率計(jì))淺棕色固體。
元素分析(C9H9NO3)%C %H %N實(shí)測值: 60.34 5.04 7.79計(jì)算值: 60.33 5.06 7.82(B)2′-乙酰氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-氯苯乙酮在氮?dú)獗Ｗo(hù)以及室溫和攪拌下，向氯化鋅(24.3g，178.3mmol)和氯乙酰氯(16.1mL，202.1mmol)于硝基甲烷(85mL)的混合物中滴加3，4-亞甲二氧基-N-乙酰苯胺(8.96g，50.0mmol)的硝基甲烷(15mL)溶液。所得混合物然后加熱回流1.5小時(shí)，讓其冷至室溫，傾入冰中，以二氯甲烷提取，然后通過蒸發(fā)將其除去，得一棕色固體。此固體從乙酸乙酯/己烷的混合物重結(jié)晶(其中包括以活性炭處理)得2′-乙酰氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-氯苯乙酮(831.3mg，6.5%理論產(chǎn)率計(jì))黃色結(jié)晶。
1H-NMR(CDCl3)δ8.45(s，1H);7.2(s，1H);6.09(s，2H);4.65(s，2H);2.25(s，3H)。
(C)3，4-亞甲二氧基-N-新戊酰苯胺;
本化合物以例1(a)的方法制得，只是以等當(dāng)量的2，2-二甲基丙酰氯代替乙酰氯。
(D)2′-新戊酰氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-氯苯乙酮此化合物以例1(B)的方法制得，只是以等當(dāng)量的3，4-亞甲二氧基-N-新戊酰苯胺代替3，4-亞甲二氧基-N-乙酰苯胺。
(E)2′-氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-氯苯乙酮在約5℃，向2′-乙酰氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-氯苯乙酮(0.9g，3.53mmol)或等當(dāng)量的2′-新戊酰氨基-4′，5′-亞甲基二氧基-2-氯苯乙酮的乙醇(60mL)中滴加濃HCl(12.5mL，149.7mmol)。反應(yīng)混合物然后加熱回流約1小時(shí)，然后傾入2N NaOH/冰(80mL/60g)中，以乙酸乙酯(3×70mL)洗滌。合并有機(jī)部分，以鹽水(50mL)洗滌，干燥(無水硫酸鈉)，真空濃縮得略帶綠的黃色固體。所得固體以乙酸乙酯/異丙醇/己烷重結(jié)晶，活性炭處理，得2′-氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-氯苯乙酮(0.39g，52%理論產(chǎn)率計(jì))元素分析(C9H8NO3Cl)%C %H %N實(shí)測值: 50.66 3.80 6.47計(jì)算值: 50.60 3.77 6.56(F)5′(R，S)-1，5-二氧代-(5′-乙基-5′-羥基-2′H，5′H，6′H-6-氧代吡喃并)[3′，4′-f]△6′8-四氫中氮茚和5′(S)-1，5-二氧代-(5′-乙基-5′-羥基-2′H，5′H，6′H-6-氧代吡喃并)[3′，4′-f]△6′8-四氫中氮茚(式Ⅲ化合物)
根據(jù)Wani等于′512中所述方法制得此化合物，其中在下文中“三環(huán)酮(R，S)”和“三環(huán)酮(S)”分別或共同指式(Ⅲ)化合物。要注意的是，相應(yīng)的R對映體也可以根據(jù)′512中所述方法制得。
(G)7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿下列喜樹堿的制備通法見′512，將2′-氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-氯苯乙酮于迪安-斯達(dá)克榻分水器中，在加有三環(huán)酮(R，S)(256.3mg，0.97mmol)的回流的甲苯(50mL)中攪拌0.5小時(shí)。反應(yīng)然后冷卻，過濾固體，以甲苯和乙醇洗滌得7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿，(408.5mg，68.8%)。
1H-300NMR(DMSO-d6)δ7.72(s，1H);7.55(s1H);7.2(s，1H);6.34(s，2H);5.42(s，2H);5.32(s，2H);5.24(s，2H);1.85(m，2H);0.88(t，3H)。
標(biāo)定質(zhì)譜M+1計(jì)算值441;
實(shí)測值441。
(H)7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿在約5℃，向攪拌下的7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-(R，S)-喜樹堿(0.11g，0.25mmol)和碳酸鉀(346mg，0.5mmol)在二甲基甲酰胺(DMF)(1mL)中的混合物中加入含3.73mg/mL二甲胺(6.1mL，0.5mmol)的四氫呋喃溶液。將反應(yīng)混合物安全塞好，讓其熱至室溫，攪拌約15小時(shí)，然后過濾，濾去固體物質(zhì)。所得濾液真空蒸發(fā)濃縮，得到的固體以乙腈研制，過濾。所得濾液真空蒸發(fā)濃縮得到稠的殘余物。殘余物以最小量的氯仿溶解，置之于30g閃式硅膠上進(jìn)行層析，依次以250ml乙酸乙酯，然后250ml(9∶1乙酸乙酯，異丙醇)最后以250ml(4∶1乙酸乙酯，異丙醇)洗脫。收集流分，用TLC(5%甲醇，乙酸乙酯)監(jiān)測，以UV燈顯色。集中適宜的流分，濃縮真空干燥得7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿(6.0mg，4.7%)。此化合物被制成其乙酸鹽。
m.p.＞250℃。
元素分析(C24H23N3O3·C2H4O2)%C %H %N實(shí)測值: 61.64 5.17 8.73計(jì)算值: 61.29 5.34 8.25(Ⅰ)E環(huán)的開環(huán)(H)部分的化合物以等當(dāng)量的氫氧化鈉處理形成相應(yīng)的E環(huán)的開環(huán)形式。后者以等當(dāng)量的鹽酸處理E環(huán)閉環(huán)則又形成(H)部分的化合物。
例27-二甲氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物2)(A)7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)喜樹堿除了在(G)部分以等當(dāng)量的三環(huán)酮(S)代替三環(huán)酮(R，S)外，本化合物按例1的方法制得。
m.p.＞250℃。
(B)7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿除了以等當(dāng)量的按例2，(A)部分制備的7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿外，此化合物按例1，(H)部分的方法制得。
m.p.＞250℃標(biāo)定質(zhì)譜(Nominal Mass Spectrum)M+1計(jì)算值450實(shí)測值450。
例37-二甲氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿(化合物3)(A)7-氯甲基-10，11-亞乙基二氧基-20-(R，S)-喜樹堿除在(A)和(C)部分以等當(dāng)量的3，4-亞乙二氧基苯胺代替3，4-亞甲二氧基苯胺外，此化合物以例1方法制備。
高分辨質(zhì)譜M+1計(jì)算值455.1009實(shí)測值455.1005(B)7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿除了以等當(dāng)量的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿替代7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿外，此化合物按例1，(H)部分的方法制備。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值464.1821實(shí)測值464.1833。
例47-二甲氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物4)(A)7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿本化合物以例1的方法制得，只是在(A)和(C)部分以等當(dāng)量的3，4-亞乙二氧基苯胺代替3，4-亞甲二氧基苯胺，在(G)部分，以等當(dāng)量的三環(huán)酮(S)代替三環(huán)酮(R，S)。
高分辨質(zhì)譜M+1計(jì)算值455.1009實(shí)測值455.1000。
(B)7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿此化合物以例1，(H)部分的方法制備，只是以等當(dāng)量的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿替代7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
高分辨質(zhì)譜
計(jì)算值464.1821實(shí)測值464.1811。
例57-嗎啉代亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿(化合物5)以例1，(H)部分同樣的方法制得本化合物只是以等當(dāng)量的嗎啉代替二甲胺，以及以等當(dāng)量的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿(其制備根據(jù)例3，(B)部分的方法)代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值506.1942實(shí)測值506.1925。
例67-嗎啉代亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物6)本化合物以與例1，(H)部分同樣的方法制備，只是以等當(dāng)量的嗎啉代替二甲胺和以等當(dāng)量的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(其制備根據(jù)例4，(B)部分方法)代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值506.1942實(shí)測值505.1929。
例77-吡咯烷基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿(化合物7)本化合物按例1，(H)部分同樣的方法制得，只是以等當(dāng)量的吡咯烷代替二甲胺，以及以按例3，(A)部分制得的等當(dāng)量的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值490.1978實(shí)測值490.1988。
例87-哌啶子基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿(化合物8)此化合物以與例1，(H)部分相同的方法制得，只是以等當(dāng)量的哌啶替代二甲基胺。
標(biāo)定質(zhì)譜M+1計(jì)算值490實(shí)測值4901H-300NMR(DMSO-d6)δ7.95(s，1H);7.62(s，1H);7.29(s，1H);6.35(s，2H);5.49(s，2H);5.41(s，2H);4.85(寬s，2H);1.9-0.7(m，11H)。
例97-哌啶子亞甲基-10，11-亞乙二甲基-20(R，S)-喜樹堿(化合物9)按例1，(H)部分同樣的方法制備標(biāo)題化合物，只是以等當(dāng)量的哌啶代替二甲胺，以及以根據(jù)例3，(A)部分方法制備的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值504.2127實(shí)測值504.2129。
例107-(4-甲基哌嗪基亞甲基)-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿(化合物10)本化合物以相同于例1，(H)部分的方法制得，只是以等當(dāng)量的4-甲基哌嗪代替二甲胺，以等當(dāng)量的根據(jù)例3，(A)部分制得的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值519.2236實(shí)測值519.2246。
例117-(4-甲基哌嗪基亞甲基)-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物11)本化合物以例1，(H)部分相同的方法制得，只是以等當(dāng)量的4-甲基哌嗪代替二甲胺，以等當(dāng)量的按例4，(A)部分制備的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
m.p.261-264℃標(biāo)標(biāo)定質(zhì)譜M+1計(jì)算值519實(shí)測值519。
例127-二乙氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物12)此化合物以例1，(H)部分的方法制備，只是以等當(dāng)量的二乙胺代替二甲胺，以等當(dāng)量的根據(jù)例2，(A)部分制得的7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)喜樹堿。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值478.1978實(shí)測值478.1963。
例137-二乙氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿(化合物13)以例1，(H)部分相同的方法制備本化合物，只是以等當(dāng)量的二乙胺代替二甲胺，以及用根據(jù)例3，(A)部分制備的等當(dāng)量的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
高分辨質(zhì)譜
計(jì)算值492.2134實(shí)測值492.2140。
例147-二乙氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物14)以例1，(H)部分相同的方法制備本化合物，只是以等當(dāng)量的二乙胺代替二甲胺，以根據(jù)例4，(A)部分制得的等當(dāng)量的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值492.2134實(shí)測值492.2122。
例157-N-甲基乙醇氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿(化合物15)以例1，(H)部分相同的方法，只是以等當(dāng)量的N-甲基乙醇胺取代二甲胺而制得此化合物。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值480.1771實(shí)測值480.1776。
例167-N-甲基乙醇氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿(化合物16)以相同于例1，(H)部分的方法，只是以等當(dāng)量的N-甲基乙醇胺代替二甲胺，以等當(dāng)量的根據(jù)例3，(A)部分制得的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿，制得標(biāo)題化合物。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值494.1927實(shí)測值494.1929。
例177-二乙醇氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)喜樹堿(化合物17)以例1，(H)部分相同的方法，只是使用等當(dāng)量的二乙醇胺代替二甲胺，以等當(dāng)量的根據(jù)例3，(A)部分制得的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿代替7-氯甲堿-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。而制得標(biāo)題化合物。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值524.2024實(shí)測值524.2026。
例187-二乙醇氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物18)以例1，(H)部分相同的方法，只是以等當(dāng)量的二乙醇胺代替二甲胺，以等當(dāng)量的根據(jù)例4，(A)部分制備的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
m.p.230-233℃。
標(biāo)定質(zhì)譜M+1計(jì)算值524實(shí)測值524。
例197-氮雜環(huán)丁烷基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿(化合物19)以相同于例1，(H)部分的方法，只是以等當(dāng)量的氮雜環(huán)丁烷代替二甲胺而制得。
m.p.＞250℃標(biāo)定質(zhì)譜M+1計(jì)算值462實(shí)測值462。
例207-氮雜環(huán)丁烷基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物20)本化合物以例1的方法制得，只是在(G)部分，以等當(dāng)量的三環(huán)酮(S)替代三環(huán)酮(R，S);在(H)部分，以等當(dāng)量的氮雜環(huán)丁烷替代二甲胺。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值462.1665實(shí)測值462.1667。
例21
7-硫代嗎啉代亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物21)以例1，(H)部分相同的方法制得，只是以等當(dāng)量的硫代嗎啉代替二甲胺，以等當(dāng)量的用例4，(A)部分制得的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
m.p.249-252℃。
標(biāo)定質(zhì)譜M+1計(jì)算值522實(shí)測值522。
例227-氮雜環(huán)丁烷基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物22)以例1，(H)部分相同的方法制得，只是以等當(dāng)量的氮雜環(huán)丁烷代替二甲胺，以等當(dāng)量的按例4，(A)部分制得的7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿代替7-氯甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
m.p.208-210(分解)低分辨質(zhì)譜476.2(電子噴射)。
例237-(4-甲基哌嗪基亞甲基)-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物23)目的化合物以例1的方法制得，只是在(G)部分，以等當(dāng)量的三環(huán)酮(S)代替三環(huán)酮(R，S)，在(H)部分，以等當(dāng)量的4-甲基哌嗪代替二甲胺。
高分辨質(zhì)譜計(jì)算值505.2083實(shí)測值505.2087。
例247-三氟乙酰氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物24)(A)2′-氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-三氟乙酰氨基苯乙酮在室溫氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將三氟乙酰胺(227mg，2mmol)加到碳酸銫(1.63g，5mmol)的無水乙腈(15ml)溶液中。然后加入2′-氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-氯苯乙酮，將混合物置于預(yù)先加熱至90℃的油浴中30分鐘。反應(yīng)冷卻至室溫將其直接傾于燒結(jié)玻璃漏斗中的硅膠填充柱(15g)上。硅膠用EtOAc洗滌兩次，真空移去合并的洗液的中的揮發(fā)物。用乙醚研制殘留物，得淺橙色固體，通過過濾收集，真空干燥。(498mg，86%)Mp＝219-220℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ4.44(d，2H);5.96(s，2H);6.35(s，1H);7.21(s，1H);7.40(bs，2H);9.59(t，1H)。
標(biāo)定質(zhì)譜MH+＝291m/z。實(shí)測MH+＝291m/z。
(B)2′-氨基-4′，5′-亞乙二氧基-2-三氟乙酰氨基苯乙酮此化合物以上述方法制備，除了以等當(dāng)量的2′-氨基-4′，5′-亞乙二氧基-2-氯苯乙酮代替2′-氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-氯苯乙酮。分離得到綠色固體，產(chǎn)率74%。Mp＝154-155℃。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.08(m，2H);4.13(m，2H);4.60(d，2H);6.0(bs，2H);6.08(s，1H);7.04(s，1H);7.60(t，1H)。
標(biāo)定質(zhì)譜MH+＝305m/z。實(shí)測值MH+＝305m/z。
(C)10，11-亞乙二氧基-7-三氟乙酰氨基亞甲基-20(S)-喜樹堿在60℃氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將2′-氨基-4′，5′-亞乙二氧基-2-三氟乙酰氨基苯乙酮(71mg，0.234mmol)，三環(huán)酮(S)(61mg，0.234mmol)，無水甲苯(2.0ml)合并。在加入催化量的冰乙酸和一水合對甲苯磺酸后，將反應(yīng)溫度升至回流。反應(yīng)回流16小時(shí)，然后降至室溫。經(jīng)過濾收集黃綠色固體，以乙醇和乙醚洗滌，真空干燥。(101mg，84%)Mp＝249℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.91(t，3H);1.91(m，2H);4.40(s，4H);4.83(d，2H);5.39(s，2H);5.41(s，2H);6.48(s，1H);7.22(s，1H);7.58(s，1H);7.77(s，1H);10.20(t，1H)。
標(biāo)定質(zhì)譜MH+＝532m/z。實(shí)測值MH+＝532m/z。
例257-三氟乙酰氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物25)此化合物以上述例24的方法制得，只是以等當(dāng)量的2′-氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-三氟乙酰氨基苯乙酮代替2′-氨基-4′，5′-亞乙二氧基-2-三氟乙酰氨基苯乙酮。分離得黃綠色固體，產(chǎn)率為15%，mp＝238℃(分解)。
1H-300NMR(DMSO-d6)δ0.91(t，3H);1.95(m，2H);4.92(s，2H);5.38(s，2H);5.40(s，2H);6.28(s，2H);6.49(s，1H);7.13(s，1H);7.58(s，1H);7.78(s，1H);10.21(t，1H)。標(biāo)定質(zhì)譜MH+＝518m/z。實(shí)測值MH+＝518m/z。
例267-氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿二氫氯酸鹽(化合物26)在一個(gè)開口的燒瓶中將2N鹽酸(1.2ml)水溶液中的7-三氟乙酰氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(65mg，0.12mmol)加熱至105℃20分鐘。真空移去揮發(fā)性成分，所得殘存物以乙酸乙酯研制，過濾收集，亮黃色固體以乙酸乙酯(3ml)，乙醇(2ml)和乙醚(2ml)洗滌，真空干燥得62mg(100%)。mp＞300℃。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.90(t，3H);1.95(m，2H);4.41(s，4H);4.61(d，2H);5.40(s，2H);5.45(s，2H);7.24(s，1H);7.60(s，1H);7.81(s，1H);8.40(bs，2H)。
標(biāo)定質(zhì)譜MH+＝436m/z。實(shí)測值MH+＝436m/z。
例277-氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿二氫氯酸鹽(化合物27)此化合物以上述例26的方法制備，除了以等當(dāng)量的7-三氟乙酰氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿替代7-三氟乙酰氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿。定量分離得金黃色固體產(chǎn)物。Mp＝270℃(分解)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.90(t，3H);1.9(m，2H);4.6(m，2H);5.4(s，2H);5.5(s，2H);6.3(s，2H);7.2(s，1H);7.6(s，1H);7.9(s，1H);8.4(bs，2H)。標(biāo)定質(zhì)譜MH+＝422m/z。實(shí)測值MH+＝422m/z。
例287-叔丁氧基羰基-哌嗪基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物28)向-50°下的(S)-(-)-10，11-亞乙二氧基-7-氯甲基-喜樹堿(35.8mg，78.7×10-3mmol)溶液中滴加1-哌嗪羧酸叔丁基酯(34.6mg，186×10-3mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(0.45mL)溶液。將棕黑色反應(yīng)混合物于-50℃下攪拌10分鐘，熱至0℃。加入另外的1-哌嗪羧酸叔丁酯(8mg，43×10-3mmol)的DMF(0.2mL)溶液，混合物熱至室溫。所得混合物再攪拌90分鐘，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器脫去溶劑得棕色殘留物粗產(chǎn)物。經(jīng)硅膠色譜(以100%乙酸乙酯洗脫)純化得20.7mg(58%產(chǎn)率)淺黃色固體產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.04(t，3H，J＝7);1.45(s，9H);1.87(m，2H);2.46(s，4H);3.41(s，4H);3.94(s，2H);4.43(s，4H);5.29(s，2H);5.30(d，1H，J＝16);5.75(d，1H，J＝16);7.59(s，1H);7.65(s，1H);7.73(s，1H)。
標(biāo)定質(zhì)譜(M+1)605。
例297-哌嗪基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿三氟乙酸鹽(化合物29)向0℃下的7-叔丁氧基羰基-哌嗪甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(16.7mg，27.6×10-3mmol)的無水CH2Cl2(5.0mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5mL)。將深黃色溶液熱至室溫，攪拌14小時(shí)?；旌衔镆孕D(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮，殘留物經(jīng)反相HPLC(Rainin Dynamax 60A柱，以49∶10∶2.5∶1的水/乙腈/THF/三氟乙酸洗脫)純化，濃縮及冷凍干燥后(主要UV活性峰以254nm的紫外光監(jiān)測)得21.7mg黃色松散性固體粉末。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.88(t，3H，J＝7);1.87(m，2H);2.60-2.80(m，4H);3.00-3.20(bs，4H);5.29(s，2H);5.41(s，2H);6.5(bs，1H);7.25(s，1H);7.56(s，1H);7.80(s，1H);8.50(bs，2H)。
標(biāo)定質(zhì)譜(M+1)505。
mp315℃(分解)。
例307-(α，α，α-三氟-間甲苯基)-哌嗪基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物30)將7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(5.2mg，11.4×10-3mmol)的無水DMSO(200μl)溶液滴加到0℃的1-(α，α，α-三氟間甲苯基)-哌嗪(10μl，53×10-3mmol)的無水甲苯(500μl)溶液中。所得棕黑色混合物于0℃攪拌90分鐘，使其熱至室溫。以旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器脫去溶劑，進(jìn)一步在高真空下用泵抽提，留下粗產(chǎn)物，將其于硅膠色譜(以100%的乙酸乙酯，然后用6∶5∶1乙酸乙酯/氯仿/甲醇洗脫)純化，得3.7mg(50%產(chǎn)率)產(chǎn)物，為淺黃色固體。
1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ0.90(t，3H，J＝7);1.95(q，2H，J＝7);2.60-2.70(m，4H);3.20-3.30(m，4H);4.10(s，2H);4.50(s，4H);5.30(s，2H);5.45(s，2H);6.55(s，1H);7.40(t，1H，J＝7);7.60(s，1H);7.85(s，1H)。
標(biāo)定質(zhì)譜(M+1)649。
例317-(2-甲氧基苯基-哌嗪基)亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物31)在0℃，向0℃的2-甲氧基苯基哌嗪(17.9μl，102×10-3mmol)的無水甲苯(1mL)溶液中加入7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(10mg，22×10-3mmol)的DMSO(200μl)溶液。所得黑色混合物于0℃攪拌10分鐘，讓其熱至室溫，攪拌3小時(shí)。反應(yīng)混合物以旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮，殘存的溶劑以高真空泵抽提，得粗產(chǎn)物。經(jīng)硅膠色譜(依次以1∶1的己烷/乙酸乙酯和6∶5∶1的乙酸乙酯/氯仿/甲醇洗脫)純化得3。4mg(25%產(chǎn)率)的黃色固體產(chǎn)物。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.05(t，3H，J＝7);1.90(m，2H);2.75(bs，4H);3.10(bs，4H);3.75(s，1H);3.85(s，3H);4.01(bs，2H);5.35(s，1H);5.30(d，1H，J＝18);5.35(s，1H);5.75(s，1H，J＝18);6.80-7.00(m，4H);7.60(s，1H);7.65(s，1H);7.75(s，1H)。
標(biāo)定質(zhì)譜(M+1)計(jì)算值611實(shí)測值611。
例327-苯基哌嗪基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(化合物32)向0℃的苯基哌嗪(15.6μl，102×10-3mmol)無水甲苯(1mL)溶液中加入7-氯甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿(10.6mg，22×10-3mmol)的DMSO(300μl)溶液。所得黑色混合物在0℃攪拌10分鐘，將其熱至室溫，攪拌3小時(shí)。以旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮混合物，殘留的溶劑經(jīng)高真空泵抽提，得黑色殘存物粗產(chǎn)物。經(jīng)硅膠色譜(依次經(jīng)1∶1己烷/乙酸乙酯和6∶5∶1的乙酸乙酯/氯仿/甲醇洗脫)純化得3.6mg(30%產(chǎn)率)，黃色固體產(chǎn)物。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.00(t，3H，J＝7);1.90(m，2H);2.75(bs，4H);3.20(bs，4H);3.75(s，1H);4.05(s，2H);4.45(bs，4H);5.35(s，2H);5.30(d，1H，J＝18);5.35(s，2H);5.75(d，1H);6.80-7.00(m，3H);7.20-7.35(m，2H);7.60(s，1H);7.65(s，1H);7.80(s，1H)。
標(biāo)定質(zhì)譜(M+1)581。
例332′-氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-二甲氨基苯乙酮例1，(B)部分制得的2′-乙酰氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-氯苯乙酮，在和例1，(H)部分相似的條件下和過量的二甲胺反應(yīng)，得到2′-乙酰氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-二甲氨基苯乙酮，將其以例1，(E)部分的方法去保護(hù)得到2′-氨基-4′，5′-亞甲二氧基-2-二甲氨基苯乙酮。
標(biāo)定質(zhì)譜M+1計(jì)算值223實(shí)測值223。
例34-38下列式(Ⅰ)化合物以反應(yīng)路線Ⅰ，ⅠA或ⅠB所述的類似于例1-32的方法制得，其中使用了適宜的式(Ⅱ)，(Ⅲ)，(Ⅳ)和(Ⅴ)中間體化合物。
34 7-(甲基-2-甲氧基乙基氨基亞甲基)-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
35 7-環(huán)己基氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R)-喜樹堿36 7-(2-丁烯基)氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿37 7-環(huán)己基甲基氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R)-喜樹堿 以及38 7-噻唑烷基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿。
例39藥物制劑(A)經(jīng)皮膚吸收系統(tǒng)(transdermal system)組分 含量活性化合物 600.0mg硅酮液 450.0mg
膠體二氧化硅 25.0mg將硅酮和活性化合物一起混合，與膠體二氧化硅作用以增加粘性。然后將其加到隨后要熱封的如下構(gòu)成的聚合物薄疊層上，該疊層含有聚酯釋放墊，由硅酮或丙烯酸聚合物組成的表皮接觸膠粘劑，聚烯烴、(如聚乙烯)、聚乙烯乙酸酯或聚氨基甲酸乙酯控制膜，以及由聚酯疊層組成的不透性基膜。所述結(jié)構(gòu)為每片10平方厘米。
(B)口服片劑組分 含量活性化合物 200.0mg淀粉 20.0mg硬脂酸鎂 1.0mg用水將活性化合物和淀粉制成顆粒干燥。將硬脂酸鎂加到上述干燥的顆粒中，混合物徹底摻和。將摻和的混合物壓成片劑。
(C)栓劑組分 含量活性化合物 150.0mg水楊酸鈉可可堿 250.0mgWitepsol S55 1725.0mg將非活性組分混合，熔化。然后將活性化合物分散于熔化的混合物中，傾入模具中，讓其冷卻。
(D)注射劑組分 含量活性化合物 20.0mg緩沖劑 適量丙二醇 0.4注射用水 0.6ml在約50℃，將活性化合物和緩沖劑溶于丙二醇中。攪拌后加入注射用水，所得溶液過濾，充入安瓿中，密封，經(jīng)壓熱器處理滅菌。
(E)膠囊組分 含量活性化合物 200.0mg乳糖 450.0mg硬脂酸鎂 5.0mg精細(xì)研磨的活性化合物與乳糖和硬脂酸鹽混合，裝入膠囊中。
權(quán)利要求
1.式(Ⅰ)化合物及其藥物上可接受的鹽和其溶劑化物的制備方法
其中n表示整數(shù)1或2；和i)R1和R2分別表示氫，低級烷基，(C3-7)環(huán)烷基，(C3-7)環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，羥基低級烷基，低級烷氧基低級烷基；ii)R1表示氫，低級烷基，(C3-7)環(huán)烷基，(C3-7)環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，羥基低級烷基或低級烷氧基低級烷基，和R2表示-COR3其中R3表示氫，低級烷基，全鹵代-低級烷基，(C3-7)環(huán)烷基，(C3-7)環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，羥基低級烷基，低級烷氧基，低級烷氧基低級烷基；或iii)R1和R2與連接的氮原子一起形成下列式(IA)的飽和3-7元雜環(huán)基；
其中Y表示O，S，CH2或NR4其中R4表示氫，低級烷基，全鹵代-低級烷基，芳基，被一個(gè)或多個(gè)低級烷基、鹵素、硝基、氨基、低級烷氨基、全鹵代-低級烷基、羥基低級烷基、低級烷氧基、低級烷氧基低級烷基基團(tuán)取代的芳基；或-COR5其中R5表示氫，低級烷基，全鹵代-低級烷基，低級烷氧基，芳基，被一個(gè)或多個(gè)低級烷基、全鹵代-低級烷基、羥基低級烷基、低級烷氧基低級烷基基團(tuán)取代的芳基。其特征在于(a)將式(Ⅳ)化合物
其中X是鹵素，與式(Ⅴ)化合物反應(yīng)其中R1和R2如式(Ⅰ)化合物中定義；或(b)將式(Ⅱa)化合物
其中R1和R2如式(Ⅰ)化合物中定義，與式(Ⅲ)化合物反應(yīng)
如必要和/或需要，可將如此獲得的化合物再進(jìn)一步以下一或多步反應(yīng)(i)將獲得的式(Ⅰ)化合物或其鹽或其被保護(hù)的衍生物轉(zhuǎn)變成為另一種式(Ⅰ)化合物和/或(ii)脫除任意的保護(hù)基或基團(tuán)和/或(iii)將式(Ⅰ)化合物或其鹽轉(zhuǎn)變成其藥理上可接受的鹽或其溶劑化物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述低級烷基是(C1-4)烷基，所述低級烷氧基是(C1-4)烷氧基和所述低級鏈烯基中(C3-4)鏈烯基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中R1和2一起形成選自下列的雜環(huán)基氮丙啶，氮雜環(huán)丁烷，吡咯烷，哌啶，六亞甲基亞胺，咪唑烷，吡唑烷，異噁唑烷，哌嗪，N-甲基哌嗪，高哌嗪，N-甲基高哌嗪，噻唑烷，異噻唑烷，嗎啉或硫代嗎啉。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一權(quán)利要求的方法，其中n表示整數(shù)1或2;和ⅰ)R1和R2分別表示氫，低級烷基或羥基低級烷基;ⅱ)R1表示氫和R2表示-COR3，其中R3表示全鹵代-低級烷基;或ⅲ)R1和R2與所連接的氮原子一起形成氮雜環(huán)丁烷，吡咯烷，哌啶，嗎啉，硫代嗎啉或被低級烷基;苯基;被一個(gè)或多個(gè)全鹵代-低級烷基或低級烷氧基取代的苯基;或-COR5，其中R5表示低級烷氧基任意N-取代的哌嗪。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中產(chǎn)物選自7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿，7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿，7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿，7-二甲氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿，7-嗎啉代亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿，7-嗎啉代亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿，7-吡咯烷基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿，7-哌啶子基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿，7-哌啶子基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿，7-(4-甲基哌嗪基亞甲基)-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿，7-(4-甲基哌嗪基亞甲基)-10，11-亞乙二氧基-20(R)-喜樹堿，7-二乙氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿，7-二乙氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿，7-二乙氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿，7-N-甲基乙醇氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(R，S)-喜樹堿，7-N-甲基乙醇氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿，7-二乙醇氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(R，S)-喜樹堿，7-二乙醇氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿，7-氮雜環(huán)丁烷基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S，R)-喜樹堿，7-氮雜環(huán)丁烷基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿，7-硫代嗎啉代亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿，7-氮雜丁烷基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿，7-(4-甲基哌嗪基亞甲基)-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿，7-三氟乙酰氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿，7-三氟乙酰氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿，7-氨基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿二氫氯酸鹽，7-氨基亞甲基-10，11-亞甲二氧基-20(S)-喜樹堿二氫氯酸鹽，7-叔丁氧羰基-哌嗪基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿，7-哌嗪基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-(S)-喜樹堿三氟乙酸鹽，7-(α，α，α-三氟-間甲苯基)-哌嗪基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿，7-(2-甲氧苯基-哌嗪基)亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿，和7-苯基哌嗪基亞甲基-10，11-亞乙二氧基-20(S)-喜樹堿，及其藥物上可接受的鹽和溶劑化物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一方法，其中步驟(A)的反應(yīng)是在過量的式(Ⅴ)化合物存在下于溶劑系統(tǒng)中進(jìn)行。
7.制備藥物制劑的方法，其包括將權(quán)利要求1定義的式(Ⅰ)化合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物與藥物上可接受的載體一起混合。
8.權(quán)利要求1-5中任一權(quán)利要求限定的R構(gòu)型的化合物。
9.權(quán)利要求1定義的化合物，其中E環(huán)是開環(huán)的。
10.式(ⅡA)化合物
其中n表示整數(shù)1或2;和ⅰ)R1和R2分別表示氫，低級烷基，(C3-7)環(huán)烷基，(C3-7)環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，羥基低級烷基，低級烷氧基低級烷基;ⅱ)R1表示氫，低級烷基，(C3-7)環(huán)烷基，(C3-7)環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，羥基低級烷基或低級烷氧基低級烷基，和R2表示-COR3其中R3表示氫，低級烷基，全鹵代-低級烷基，(C3-7)環(huán)烷基，(C3-7)環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，羥基低級烷基，低級烷氧基，低級烷氧基低級烷基;或ⅲ)R1和R2與所述的氮原子一起形成下列式(ⅠA)的飽和3-7元雜環(huán)基
其中Y表示O，S，CH2或NR4其中R4表示氫，低級烷基，全鹵代-低級烷基，芳基，被一個(gè)或多個(gè)低級烷基、鹵素、硝基、氨基、低級烷基氨基、全鹵代-低級烷基、羥基低級烷基、低級烷氧基、低級烷氧基低級烷基取代的芳基;或-COR5，其中R5表示氫，低級烷基，全鹵代-低級烷基，低級烷氧基，芳基，被一個(gè)或多個(gè)低級烷基、全鹵代-低級烷基、羥基低級烷基或低級烷氧基低級烷基取代的芳基。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中R1和R2一起形成選自下列雜環(huán)基氮丙啶，氮雜環(huán)丁烷，吡咯烷，哌啶，六亞甲基亞胺，咪唑烷，吡唑烷，異噁唑烷，哌嗪，N-甲基哌嗪，高哌嗪，N-甲基高哌嗪，噻唑烷，異噻唑烷，嗎啉或硫代嗎啉。
12.式(Ⅱ)化合物
其中n是整數(shù)1或2和X是鹵素。
全文摘要
本發(fā)明涉及制備式(I)水溶性喜樹堿衍生物及其藥物上可接受的鹽的方法。R
文檔編號A61K31/5377GK1072683SQ9211378
公開日1993年6月2日 申請日期1992年10月28日 優(yōu)先權(quán)日1991年10月29日
發(fā)明者M·J·盧齊奧, J·M·貝斯特曼, M·G·埃文斯, P·L·邁爾斯 申請人:格拉克索有限公司