專利名稱：雜色豹皮花總甾體皂苷提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離領(lǐng)域，特別是涉及雜色豹皮花總留體皂苷提取物及其制備方法。
背景技術(shù)：
雜色豹皮花variegata L.為蘿蘑科豹皮花屬植物,是中國(guó)的特有植物，分布在非洲及中國(guó)大陸南方等地，目前已由人工引種栽培。雜色豹皮花的主要化學(xué)成分為甾體皂苷類化合物。藥理研究表明，這些雜色豹皮花留體皂苷均具有一定的溶血活性。目前對(duì)雜色豹皮花的研究較少，尚未見(jiàn)從雜色豹皮花提取制備 留體皂苷的方法專利和文獻(xiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供雜色豹皮花總留體皂苷提取物及其制備方法，為雜色豹皮花總留體皂苷制備提供一種簡(jiǎn)便易行的方法。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的
雜色豹皮花總留體皂苷提取物及其制備方法，其特征在于包括以下步驟
1)取雜色豹皮花地上部分粉碎，加生物酶酶解1-3天，得酶解原料；
2)將上述步驟所得酶解原料加入萃取釜，采用超臨界CO2萃取，以乙醇溶液為夾帶劑，萃取2-3小時(shí),解析萃取液回收試劑,得到萃取物；
3)將上述所得萃取物，加熱水分散，加入大孔樹(shù)脂柱吸附，乙醇溶液洗脫，收集洗脫液濃縮成浸膏，加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥即得產(chǎn)品。步驟I)所述生物酶可選果膠酶、纖維素酶和淀粉酶中的任一種，用量為原料重量的 O. 1-0. 8%O步驟2)所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為48_60°C，萃取壓力為23_35MPa，CO2流量為20-25L/h，萃取時(shí)間為3-6h，分離釜I溫度為35_50°C，壓力為8_12MPa，分離釜II溫度為28-40°C，壓力為4-8MPa。步驟3)中所述大孔樹(shù)脂可選D101、AB-8或HPD100中的一種。步驟3)中所述大孔樹(shù)脂洗脫，依次以水、30%_40%乙醇、70%_85%乙醇洗脫，收集70%-85%乙醇洗脫部分。本發(fā)明的有益效果是采用生物酶解原料，提高了提取率，縮短了提取時(shí)間；方法采用超臨界CO2萃取，提取時(shí)間短，效率高，能耗較低，綠色環(huán)保；采用大孔樹(shù)脂富集分離，大孔樹(shù)脂可多次利用，降低了生產(chǎn)成本。
具體實(shí)施例方式 下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。實(shí)施例I :取雜色豹皮花地上部分粉碎，稱量IOkg加入2倍量pH5的酸水拌濕，加36g纖維素酶，常溫酶解2天，酶解原料加入萃取釜，加入超臨界CO2萃取釜中，設(shè)置設(shè)備參數(shù)萃取溫度為48°C，萃取壓力為35MPa，分離釜I溫度為50°C，壓力為lOMPa，分離釜II溫度為37°C，壓力為6MPa。通入液體CO2,達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)節(jié)CO2流速22L/h，并夾帶乙醇5L/h，萃取3h，解析萃取液回收試劑，收集雜色豹皮花留體皂苷萃取物，加熱水分散后加入DlOl大孔樹(shù)脂柱吸附，依次用水、30%乙醇、70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓回收試劑，濃縮成浸膏，邊攪拌邊加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥得雜色豹皮花總留體皂苷，其中甾體皂苷含量為84%。實(shí)施例2:
取雜色豹皮花地上部分粉碎，稱量IOkg加入2. 5倍量pH4的酸水拌濕，加80g纖維素酶，常溫酶解3天，酶解原料加入萃取釜，加入超臨界CO2萃取釜中，設(shè)置設(shè)備參數(shù)萃取溫度為60°C，萃取壓力為27MPa，分離釜I溫度為40°C，壓力為12MPa，分離釜II溫度為30°C，壓力為8MPa。通入液體CO2，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)節(jié)CO2流速20L/h，并夾帶乙醇6L/h，萃取
4.5h，解析萃取液回收試劑，收集雜色豹皮花留體皂苷萃取物，加熱水分散后加入HPDlOO大孔樹(shù)脂柱吸附，依次用水、35%乙醇、80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，減壓回收試劑，濃縮成浸膏，邊攪拌邊加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥得雜色豹皮花總甾體皂苷，其中留體皂苷含量為83%。實(shí)施例3
取雜色豹皮花地上部分粉碎，稱量IOkg加入I. 5倍量pH3. 5的酸水拌濕，加54g果膠酶，常溫酶解2. 5天，酶解原料加入萃取釜，加入超臨界CO2萃取釜中，設(shè)置設(shè)備參數(shù)萃取溫度為52°C，萃取壓力為30MPa，分離釜I溫度為35°C，壓力為8MPa，分離釜II溫度為28°C，壓力為4MPa。通入液體CO2，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)節(jié)CO2流速24L/h，并夾帶乙醇8L/h，萃取6h，解析萃取液回收試劑，收集雜色豹皮花留體皂苷萃取物，加熱水分散后加入DlOl大孔樹(shù)脂柱吸附，依次用水、30%乙醇、85%乙醇洗脫，收集85%乙醇洗脫液，減壓回收試劑，濃縮成浸膏，邊攪拌邊加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥得雜色豹皮花總留體皂苷，其中留體皂苷含量為81%。實(shí)施例4:
取雜色豹皮花地上部分粉碎，稱量IOkg加入3倍量pH3的酸水拌濕，加70g果膠酶，常溫酶解2天，酶解原料加入萃取釜，加入超臨界CO2萃取釜中，設(shè)置設(shè)備參數(shù)萃取溫度為58 V，萃取壓力為32MPa，分離釜I溫度為38°C，壓力為9MPa，分離釜II溫度為40°C，壓力為7MPa。通入液體CO2,達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)節(jié)CO2流速25L/h，并夾帶乙醇4L/h，萃取4h，解析萃取液回收試劑，收集雜色豹皮花留體皂苷萃取物，加熱水分散后加入AB-8大孔樹(shù)脂柱吸附，依次用水、40%乙醇、70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓回收試劑,濃縮成浸膏,邊攪拌邊加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥得雜色豹皮花總留體皂苷，其中甾體皂苷含量為86%。實(shí)施例5:
取雜色豹皮花地上部分粉碎，稱量IOkg加入3倍量pH3. 5的酸水拌濕，加14g淀粉酶，常溫酶解3天，酶解原料加入萃取釜，加入超臨界CO2萃取釜中，設(shè)置設(shè)備參數(shù)萃取溫度為50°C，萃取壓力為23MPa，分離釜I溫度為42°C，壓力為lOMPa，分離釜II溫度為31°C，壓力為5MPa。通入液體CO2,達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)節(jié)CO2流速23L/h，并夾帶乙醇6L/h，萃取5h，解析萃取液回收試劑，收集雜色豹皮花留體皂苷萃取物，加熱水分散后加入HPD100大孔樹(shù)脂 柱吸附,依次用水、40%乙醇、75%乙醇洗脫，收集75%乙醇洗脫液，減壓回收試劑，濃縮成浸膏，邊攪拌邊加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥得雜色豹皮花總留體皂苷，其中留體皂苷含量為83%。
權(quán)利要求
1.雜色豹皮花總留體皂苷提取物及其制備方法，其特征在于包括以下步驟 1)取雜色豹皮花地上部分粉碎，加生物酶酶解1-3天，得酶解原料； 2)將上述步驟所得酶解原料加入萃取釜，采用超臨界CO2萃取，以乙醇溶液為夾帶劑，萃取2-3小時(shí),解析萃取液回收試劑,得到萃取物； 3)將上述所得萃取物，加熱水分散，加入大孔樹(shù)脂柱吸附，乙醇溶液洗脫，收集洗脫液濃縮成浸膏，加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，沉淀經(jīng)低溫干燥即得產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述雜色豹皮花總留體皂苷的制備方法，其特征在于步驟I)所述生物酶可選果膠酶、纖維素酶和淀粉酶中的任一種，用量為原料重量的0. 1-0. 8%。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述雜色豹皮花總留體皂苷的制備方法，其特征在于步驟2)所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為48-60°C，萃取壓力為23-35MPa，CO2流量為20_25L/h，萃取時(shí)間為3-6h，分離釜I溫度為35-50°C，壓力為8-12MPa，分離釜II溫度為28_40°C，壓力為 4-8MPa。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述雜色豹皮花總留體皂苷的制備方法，其特征在于步驟3)中所述大孔樹(shù)脂可選D101、AB-8或HPD100中的一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述雜色豹皮花總留體皂苷的制備方法，其特征在于步驟3)中所述大孔樹(shù)脂洗脫，依次以水、30%-40%乙醇、70%-85%乙醇洗脫，收集70%-85%乙醇洗脫部分。
全文摘要
本發(fā)明涉及雜色豹皮花總甾體皂苷提取物及其制備方法。方法是取雜色豹皮花原料粉碎，加生物酶酶解1-3天，酶解原料加入萃取釜，采用超臨界CO2萃取，以乙醇溶液為夾帶劑，萃取2-3小時(shí)，解析萃取液回收試劑，得到的萃取物加熱水分散，加入大孔樹(shù)脂柱吸附，乙醇溶液洗脫，收集洗脫液濃縮成浸膏，低溫干燥即得產(chǎn)品。本發(fā)明采用超臨界CO2萃取和大孔樹(shù)脂柱分離，是一種高效、環(huán)保的提取方法，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/27GK102846688SQ20121036024
公開(kāi)日2013年1月2日 申請(qǐng)日期2012年9月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月25日
發(fā)明者蘇劉花 申請(qǐng)人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司