專利名稱：一種提高紫杉醇口服生物利用度的復(fù)方藥物組合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本申請(qǐng)是針對(duì)申請(qǐng)?zhí)枮?01110004638. 9，申請(qǐng)日為2011年I月11日，名稱為“一種提高紫杉醇口服生物利用度的復(fù)方藥物組合物及其應(yīng)用”的發(fā)明專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。本發(fā)明涉及藥物組合物領(lǐng)域，具體涉及一種提高紫杉醇口服生物利用度的復(fù)方藥物組合物及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
紫杉醇作為一種具有特殊機(jī)制的化療抗癌藥物，在臨床上運(yùn)用于治療多種惡性腫瘤，例如卵巢癌、子宮頸癌、乳腺癌、喉癌、食道癌等。目前臨床上使用的紫杉醇制劑為注射齊U，由于紫杉醇在水中溶解度很低，現(xiàn)在使用的注射劑大部分采用聚氧乙烯蓖麻油/無水乙醇(I :1，v/v)作為輔料來提高紫杉醇的溶解度，使用前用葡萄糖或生理鹽水溶液稀釋(楊濤，吳宗群.抗腫瘤紫杉醇的實(shí)驗(yàn)與臨床應(yīng)用進(jìn)展.大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，29 (2)197-199、唐福山，焦海勝，原凌燕等.紫杉醇制劑用進(jìn)展.蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，31 (2)97-99)。但是這種注射劑因含有較大量的聚氧乙烯蓖麻油，在體內(nèi)降解時(shí)釋放組胺會(huì)引起較嚴(yán)重的過敏反應(yīng)。過敏反應(yīng)根據(jù)臨床表現(xiàn)可分為輕度過敏反應(yīng)、嚴(yán)重過敏反應(yīng)、超敏反應(yīng)(即過敏性休克)以及其他癥狀。輕度過敏反應(yīng)一般表現(xiàn)為皮膚潮紅、蕁麻疹、皮疹，全身蟻?zhàn)吒?；?yán)重過敏反應(yīng)一般表現(xiàn)為低血壓、心動(dòng)過速、胸悶、哮喘、呼吸困難；過敏性休克一般表現(xiàn)為面色蒼白、口唇發(fā)紺、大汗淋漓、四肢濕冷、無法測(cè)得血壓及脈搏甚至心跳、呼吸停止等癥狀；此外，還有血管腫痛、胸部和四肢疼痛等其他癥狀(劉朝暉；曾聰彥；79例紫杉醇注射液致過敏反應(yīng)文獻(xiàn)分析.中國(guó)藥物應(yīng)用與監(jiān)測(cè)，2010，7 (2) :100-102)。紫杉醇注射液的過敏反應(yīng)阻礙其臨床應(yīng)用。紫杉醇的口服生物利用度低，是阻礙紫杉醇口服制劑的開發(fā)研究的重要原因。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)紫杉醇口服生物利用度低的原因除了其水溶性差之外，紫杉醇作為腸道一種運(yùn)轉(zhuǎn)外排蛋白P-glycoprotein (P_gp)的底物是降低其口服生物利用度的另一個(gè)重要原因。P-gp的外排泵作用使紫杉醇吸收入血減少。因此，運(yùn)用P-gp抑制劑提高紫杉醇的口服生物利用度已經(jīng)被廣泛運(yùn)用，但是目前所用的P-gp抑制劑均為藥效的化合物單體，對(duì)于癌癥病人的運(yùn)用具有局限性。例如，環(huán)孢素A (CsA)是一種免疫抑制劑，同時(shí)為P-gp的底物，能夠有效提高紫杉醇的口服生物利用度，但是由于CsA具有一定的不良反應(yīng)，限制其作為P-gp抑制劑的應(yīng)用。所以，篩選多種具有臨床用途的、可供選擇性的、低毒副作用的P-gp抑制劑是突破該技術(shù)瓶頸的重要科研工作。同時(shí)，細(xì)胞色素P450 (CYP)是紫杉醇的代謝酶，其中CYP2C，3A亞型為主要的代謝酶(Jennifer Spratlin, Michael B. Sawyer; Pharmacogenetics of paclitaxelmetabolism. Oncology/Hematology, 2007,(61)222-229)。在口服吸收過程中，被胃腸道和肝臟的CYP代謝成6α-羥基紫杉醇、3’ -P-羥基紫杉醇和6α，3’ _ρ_羥基紫杉醇，Rahman等[9]研究表明細(xì)胞色素Ρ450 2C8 (CYP2C8)主要將紫杉醇代謝成6 α -羥基紫杉醇，Cresteil 等(Cresteil Tj Monsarrat B，Alvinerie P，Treluyer JMj VieiraI， Wright M. Taxol metabolism by human liver microsomes: identificationof cytochrome P450 isozymes involved in its biotransformation. Cancer Res1994:54(2) :386 - 92)細(xì)胞色素P450 3A4 (CYP3A4)主要對(duì)應(yīng)3’ -p-羥基紫杉醇的代謝，Harris等(Harris JWj Rahman A，Kim BR，Guengerich FPj Collins JM. Metabolism oftaxol by human hepatic microsomes and liver slices: participation of cytochromeP450 3A4 and an unknown P450 enzyme. Cancer Res 1994; 54 (15) : 4026 - 35)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞色素P450 3A4 (CYP3A4)僅參與 3’-p-羥基紫杉醇的代謝，并沒有參與6α-羥基紫杉醇的代謝過程。雖然其代謝產(chǎn)物各異，但是均為羥基化代謝產(chǎn)物。3種主要代謝產(chǎn)物對(duì)于腫瘤細(xì)胞沒有細(xì)胞毒性，但是對(duì)于人類骨髓細(xì)胞具有細(xì)胞毒性(Henningsson A，Karlsson MO，Vigano Lj Gianni Lj Verweij Jj Sparreboom A. Mechanism-based pharmacokineticmodel for paclitaxel. J Clin Oncol 2001;19 (20):4065 - 73)。Baker SD 等(Baker SDj Verweij J，Rowinsky EKj et al. Role of bodysurface area in dosing of investigational anticancer agents in adults, 1991 -2001. J Natl Cancer Inst 2002;94(24) : 1883 - 8)報(bào)道，紫杉醇代謝主要由氧化代謝和膽汁排泄，只有5-10%的紫杉醇是通過腎臟消除的。綜上所述，口服吸收紫杉醇的主要問題集中在P-gp介導(dǎo)的外排和細(xì)胞色素P450的氧化代謝，換言之，首關(guān)效應(yīng)中的胃腸道、肝臟和膽是紫杉醇口服生物利用度低的相關(guān)器官。所以有效提高紫杉醇生物利用度，關(guān)鍵在于有效抑制腸道、肝臟和膽中相關(guān)的P-gp亞型和CYP亞型。所以運(yùn)用細(xì)胞吸收模型和整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究有效低毒的抑制劑才能從根本上解決紫杉醇口服吸收的問題。隨著中藥在臨床方面研究的深入，中藥單體作為P-gp、CYP抑制劑或者誘導(dǎo)劑的運(yùn)用，具有其低毒副作用的特點(diǎn)，有利于與紫杉醇配伍組合成單體復(fù)方口服制劑。但是未見中藥單體與紫杉醇配伍制成機(jī)理明確的復(fù)方制劑(藥物組合物)的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于根據(jù)現(xiàn)有的口服吸收紫杉醇中存在的生物利用度低等問題，提供一種可以提高紫杉醇口服生物利用度、減少首關(guān)效應(yīng)時(shí)對(duì)紫杉醇代謝的、具有低毒副作用的、可提高血藥濃度的復(fù)方藥物組合物。本發(fā)明還有一個(gè)目的在于提供含有上述可以復(fù)方藥物組合物的紫杉醇藥物。本發(fā)明另一目的在于提供上述復(fù)方藥物組合物的應(yīng)用。本發(fā)明上述目的通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)
一種提高紫杉醇口服生物利用度的復(fù)方藥物組合物，包括中藥提取單體化合物，所述中藥提取單體化合物為五味子甲素、五味子醇乙和胡椒堿、柚皮素、芹菜素、染料木素、鷹嘴豆素、黃芩素、山奈酚、兒茶素、姜黃素、水飛薊素、大黃素、綠原酸、甘草酸、補(bǔ)骨脂素、淫羊藿苷元中的兩種以上的混合物。一種含有上述復(fù)方藥物組合物和紫杉醇單體化合物的藥物組合物，所述紫杉醇單體化合物和中藥提取單體化合物的質(zhì)量比為I: f 100，加工成為口服制劑。紫杉醇的分子式C47H51N014化學(xué)名5 β , 20-環(huán)氧-1, 2 α , 4, 7 β , 10 β , 13 α - TK輕基紫杉燒 _11-稀 _9~ 麗-4，10-二乙酸酯-2-苯甲酸酯_13[ (2’ R，3’ S)-N-苯甲酰-3-苯基異絲氨酸酯]
理化性質(zhì)白色結(jié)晶體粉末。無臭，無味。不溶于水，易溶于氯仿、丙酮等有機(jī)溶劑。本發(fā)明通過MDR1-MDCK II細(xì)胞模型篩選具有P_gp抑制作用的中藥單體，并通過ATPase的表達(dá)初步闡明其作用機(jī)理，通過大鼠在體實(shí)驗(yàn)研究其藥物兩兩組合后的血藥濃度，最后進(jìn)行裸鼠實(shí)驗(yàn)研究藥物組合的抗腫瘤藥效篩選；最終，經(jīng)過多次篩選確定以下具有提高紫杉醇口服生物利用度和抗腫瘤活性的藥物五味子醇乙、五味子甲素、胡椒堿、柚皮素、芹菜素、染料木素、鷹嘴豆素、黃芩素、山奈酚、兒茶素、姜黃素、水飛薊素、大黃素、綠原酸、甘草酸、補(bǔ)骨脂素、淫羊藿苷元等。本發(fā)明提高紫杉醇口服生物利用度的復(fù)方藥物組合物可以用于提高紫杉醇口服生物利用度，還可以用于提高紫杉醇的抗癌效果。本發(fā)明通過將上述復(fù)方藥物組合物與紫杉醇單體化合物結(jié)合，制備成為抗癌藥，可以用于預(yù)防或治療癌癥疾病。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果
本發(fā)明不但通過中藥單體組合有效提高紫杉醇的口服生物利用度，而且提高其抗腫瘤活性。首先，經(jīng)過雙向轉(zhuǎn)運(yùn)方法研究中藥單體在P-gp高表達(dá)的MDR1-MDCK II細(xì)胞模型的活性，并通過western blot技術(shù)測(cè)定P_gp ATPase的表達(dá),根據(jù)其對(duì)ATPase活性將中藥單體分類為P-gP抑制或者調(diào)控劑；再通過其在體大鼠實(shí)驗(yàn)研究其抑制首關(guān)效應(yīng)，在研究中發(fā)現(xiàn)，與口服紫杉醇對(duì)照組相比，中藥單體配伍后，紫杉醇的Cmax、AUC等藥動(dòng)學(xué)指標(biāo)均顯著提高，說明其具有抑制首關(guān)效應(yīng)的作用，增加紫杉醇的口服吸收。在證實(shí)其具有首關(guān)效應(yīng)抑制作用后，運(yùn)用負(fù)瘤裸鼠實(shí)驗(yàn)研究組合物的藥效，結(jié)果表明，紫杉醇配伍中藥單體后，比單獨(dú)口服紫杉醇具有更顯著的抑制腫瘤作用。毒性研究表明，與紫杉醇注射劑對(duì)比，組合物(紫杉醇配伍中藥單體)的死亡率、體重等指標(biāo)具有顯著優(yōu)勢(shì)，說明藥物組合的毒副作用低。本發(fā)明的藥物組合，可以通過2個(gè)或以上的中藥單體配伍紫杉醇或者其提取物增強(qiáng)其口服生物利用度。本發(fā)明的口服制劑可以是口服液、片劑、膠囊劑、顆粒，本發(fā)明的藥物的原料藥(紫杉醇及上述各種活性物質(zhì))可以加入制備不同劑型時(shí)所需的各種常規(guī)輔料，如崩解劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、助流劑等制備成口服制劑。本發(fā)明篩選不同的藥物組合，由于其作用機(jī)理相對(duì)明確和組合的多樣性，能夠靈活根據(jù)不同癌癥和相關(guān)癥候選擇適合的藥物組合，有利于本發(fā)明在臨床運(yùn)用的推廣。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例來進(jìn)一步解釋本發(fā)明，但實(shí)施例并不對(duì)本發(fā)明做任何形式的限定。
實(shí)施例I藥效實(shí)驗(yàn) MDR1-MDCK II細(xì)胞模型實(shí)驗(yàn)結(jié)果
用UPLC-MS/MS測(cè)定在不同濃度中藥單體的作用下，濃度為I μ M的紫杉醇經(jīng)MDRI-MDCKII單層細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)至AP面的濃度。BL-AP轉(zhuǎn)運(yùn)表觀滲透系數(shù)Papp值見表I。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，各種中藥單體具有一定的抑制紫杉醇外排。表I各種中藥單體的滲透系數(shù)
權(quán)利要求
1.一種提高紫杉醇口服生物利用度的藥物，其特征在于為水飛薊素的提取單體化合物。
2.一種包含紫杉醇的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物包括紫杉醇單體化合物和權(quán)利要求I所述的提高紫杉醇口服生物利用度的藥物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的包含紫杉醇的藥物組合物，其特征在于所述紫杉醇單體化合物和中藥提取單體化合物的質(zhì)量比為1:廣100。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的包含紫杉醇的藥物組合物，其特征在于所述組合物通過常規(guī)方法，加上輔料，制備成為口服劑型。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的包含紫杉醇的藥物組合物，其特征在于所述口服劑型為片齊 、(軟)膠囊劑、丸劑、口服液體制劑、糖漿劑、顆粒劑、散劑、膏劑、滴丸劑、緩釋制劑或控釋制劑。
6.權(quán)利要求I所述的藥物在提高紫杉醇口服生物利用度中的應(yīng)用。
7.權(quán)利要求I所述的藥物在提高紫杉醇的抗癌率中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求2所述的包含紫杉醇的藥物組合物在制備預(yù)防或治療癌癥疾病中的應(yīng)用。
全文摘要
本申請(qǐng)是針對(duì)申請(qǐng)?zhí)枮?01110004638.9，申請(qǐng)日為2011年1月11日，名稱為“一種提高紫杉醇口服生物利用度的復(fù)方藥物組合物及其應(yīng)用”的發(fā)明專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。本發(fā)明公開了一種提高紫杉醇口服生物利用度的復(fù)方藥物組合物及其應(yīng)用。本發(fā)明還公開了含有上述復(fù)方藥物組合物和紫杉醇單體化合物的藥物組合物。本發(fā)明復(fù)方藥物組合物可以用于提高紫杉醇的口服生物利用度，用于制備抗癌藥物時(shí)，可以提高紫杉醇的抗癌效果。本發(fā)明復(fù)方藥物組合物中，紫杉醇為抗癌的主要成分，中藥提取單體化合物通過抑制紫杉醇的首關(guān)效應(yīng)，從而提高紫杉醇的口服生物利用度和抗癌效果。實(shí)驗(yàn)研究表明，本發(fā)明復(fù)方藥物組合物制備成口服藥，可以提高口服后的紫杉醇血藥濃度和抗腫瘤效果。
文檔編號(hào)A61K31/337GK102614169SQ20121000024
公開日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2011年1月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月11日
發(fā)明者古練權(quán), 畢惠嫦, 蔡大可, 金晶, 黃民 申請(qǐng)人:中山大學(xué)