專利名稱：一種溫敏性高分子微膠囊及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及溫敏性高分子微膠囊，以及作為藥物載體。
背景技術：
近年來，隨著納米技術的日趨成熟，將納米技術滲透于生物領域而形成的納米生物技術已受到越來越多的關注和應用，而納米藥物載體的研究是納米生物技術的重點和熱點。納米級藥物輸送系統(tǒng)在實現(xiàn)靶向性給藥、緩釋藥物、提高難溶性藥物與多肽藥物的生物利用度、降低藥物的毒副作用等方面表現(xiàn)出良好的應用前景，因而成為近年來藥劑學領域的研究熱點之一。納米藥物載體是指粒徑大小在KTlOOOnm的一類新型載體，通常由天然或合成高分子材料制成。它是以納米顆粒作為藥物載體，將藥物治療分子包裹在納米顆粒之中或吸附在其表面，通過靶向分子與細胞表面特異性受體結合，在細胞攝取作用下進入細胞內，實現(xiàn)安全有效的靶向藥物輸送和基因治療。納米藥物載體的研究方向是向智能化進行，研究制備納米級載體與具有特異性的藥物相結合以得到具有自動靶向和定量定時釋藥的納米智能藥物，以解決重大疾病的診斷和治療。納米微粒用作納米藥物載體的研究始于20世紀末期，而且發(fā)展非常迅速，給藥途徑也越來越多，有靜脈注射，皮下給藥與直接口服等。納米微粒為固態(tài)膠體顆粒，是粒徑小于Iym的聚合物膠體給藥系統(tǒng)，是由高分子物質組成的骨架實體，藥物可以溶解、包覆于其中或吸附在實體上。納米微膠囊作為納米微粒的一種，由于具有較低的材料密度及相對較大的載藥空間，且在一定程度上可減小生理毒性，因而在藥物輸送領域受到廣泛關注。具有溫度敏感性的智能高分子微膠囊在體系溫度發(fā)生變化時，其囊壁會做出相應響應，表現(xiàn)為通透性的改變，使藥物分子大量進入囊心，提高了微膠囊的囊心空間利用率，增加了微膠囊的載藥量。這種環(huán)境響應特性使我們有可能能夠有效控制囊心對客體分子的負載和釋放，其發(fā)展前景無疑是很誘人的。同時，由于高分子微膠囊表面通常具有豐富的功能化基團，可通過功能化處理在其表面引入功能基團，如靶向分子或者磁性納米粒子，這將對藥物的靶向治療具有重要的指導意義。通常采用模板法制備溫敏性高分子微膠囊，即通過沉淀聚合的方法將溫敏性材料聚集或沉積在模板表面并固定，然后將內部模板選擇性去除，即可獲得中空結構的具有溫度敏感性的智能高分子微膠囊。模板在微膠囊的制備過程中應保持穩(wěn)定，且容易去除，去核條件對微膠囊的結構和穩(wěn)定性無明顯影響。目前，常用的模板有三聚氰胺甲醛樹脂、聚苯乙烯、聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸等膠體微球；鹽的結晶，如立方體的CdCO3、近似球形的MnC03、 CaCO3微粒，它們通常需要在苛刻的條件下(如高溫下長時間酸或堿處理、或用高毒性的HF 溶液溶解)去除后才可得到中空的微膠囊，使其制備及應用受到極大的限制。天然高分子由于具有獨特的生物相容性和可降解性，因而可作為一種安全、有效且易去除的制備微膠囊的模板。綜上可知，納米藥物載體技術在醫(yī)藥領域具有廣闊的發(fā)展前景，而制備出性能優(yōu)異的智能高分子微膠囊并用作藥物載體，將在人類重大疾病的診斷、治療、預防等方面發(fā)揮重大的作用，并對生物醫(yī)藥的突破和發(fā)展具有里程碑式的意義。

發(fā)明內容
為了解決現(xiàn)有技術存在的模板去除復雜的問題，本發(fā)明提供了一種溫敏性高分子微膠囊及其制備方法和應用，制備工藝簡單，為中空結構，具有高載藥量及可控藥物釋放， 可以作為藥物載體，特別是載有水溶性抗腫瘤藥物的載體。本發(fā)明的技術方案如下一種溫敏性高分子微膠囊，為中空結構的微膠囊，是以聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺為壁材，平均尺寸為8(Γ2000納米；是以纖維素醚-聚丙烯酸復合物膠體微粒為模板與單體N-異丙基丙烯酰胺在模板表面聚合，然后再除去纖維素醚而得到的微膠囊。一種制備所述的溫敏性高分子微膠囊的方法，以纖維素醚-聚丙烯酸復合物膠體微粒為模板，在交聯(lián)劑N，N’ 一亞甲基雙丙烯酰胺(MBAAm)的作用下，單體N-異丙基丙烯酰胺(NIPAm)在模板表面聚合形成溫敏性聚合物聚N-異丙基丙烯酰胺(PNIPAm)，進而形成核-殼結構的纖維素醚-聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺復合物膠體微粒，然后通過調節(jié)體系的PH值去除其中的纖維素醚，最終獲得中空結構的以聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺(PAA-PNIPAm)為壁材的溫敏性高分子微膠囊。所述的纖維素醚-聚丙烯酸復合物膠體微粒是以纖維素衍生物的水溶液與丙烯酸在引發(fā)劑存在下聚合得到，其中所述的纖維素衍生物為羥丙基纖維素(HPC)、羥乙基纖維素或乙基羥乙基纖維素中的任一。所述的引發(fā)劑為一定濃度的過氧化氫(H2O2)溶液和抗壞血酸(VC)溶液，所述的纖維素衍生物的水溶液的濃度為4飛mg/mL，纖維素衍生物與丙烯酸(AA)的質量比為0. 1 Γ1 :1。加入單體N-異丙基丙烯酰胺時還加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)，單體、 交聯(lián)劑和表面活性劑的質量比為4 3 :Γ1. 33 1 :1，所述的單體、交聯(lián)劑和表面活性劑的濃度分別為 13. 33 mg/mL>10 mg/mL>3. 33 mg/mL 10 mg/mL。所述的纖維素醚-聚丙烯酸與單體N-異丙基丙烯酰胺的質量比為4:2 4:7。所述的調節(jié)體系的pH值為8 10之間，然后將所得溶液離心處理，去除上清液， 下層沉淀洗滌、分散即得到去除了纖維素醚的中空結構的以聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺為壁材的溫敏性高分子微膠囊。所述的溫敏性高分子微膠囊作為藥物載體的應用。所述的溫敏性高分子微膠囊在作為蛋白類藥物載體的應用。所述的溫敏性高分子微膠囊在作為抗腫瘤藥物的載體中的應用。
有益效果
工藝簡單，去除模板很方便，通過調節(jié)PH值即可去除。作為藥物的載體只要將一定濃度藥物溶液與上述聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液混合，經(jīng)攪拌吸附，透析去除未吸附的藥物，即可得到負載藥物的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊。
本發(fā)明提供了一種中空結構的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊，它具有溫度敏感性，其囊壁能夠在體系溫度發(fā)生變化時做出相應響應，表現(xiàn)為通透性的改變，使藥物分子大量進入囊心，提高了微膠囊的囊心空間利用率，增加了微膠囊的載藥量。此外，微膠囊也能表現(xiàn)出很好的緩釋效果。上述特征表明該溫敏性微膠囊作為一種載體，在性能上符合生物醫(yī)學和生物化學工程領域的應用需要，具有潛在的利用價值。


圖1.聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺(PAA-POTPAm)納米微膠囊的電子顯微鏡照片； 圖2.負載抗腫瘤藥物(鹽酸阿霉素)的納米微膠囊和未負載藥物的納米微膠囊(光滑曲線)的紫外-可見吸收光譜圖3.負載抗腫瘤藥物(鹽酸阿霉素)的納米微膠囊在pH=7. 4的緩沖溶液中的釋放曲
線。
具體實施例方式下面結合實施例進一步闡明本發(fā)明的內容，但是這些實施例并不限制本發(fā)明的保護范圍。所有試劑皆為市售。一種溫敏性高分子微膠囊，它是中空結構的微膠囊，它是以纖維素醚-聚丙烯酸復合物膠體微粒為模板，在交聯(lián)劑N，N’ 一亞甲基雙丙烯酰胺的作用下，單體N-異丙基丙烯酰胺在模板表面聚合形成溫敏性聚合物聚N-異丙基丙烯酰胺，進而形成核-殼結構的纖維素醚-聚丙烯酸復合物膠體微粒。膠體微?？梢酝ㄟ^調節(jié)體系的PH值至堿性，即可將模板溶解于水溶液中，最終獲得中空結構的溫敏性高分子微膠囊。一種制備上述溫敏性高分子微膠囊的方法，它包括如下步驟
步驟1.室溫下，將羥丙基纖維素、羥乙基纖維素或乙基羥乙基纖維素溶于蒸餾水中， 濃度控制在Γ6 mg/ml范圍內；
步驟2.在上述溶液中加入丙烯酸和纖維素衍生物，所述的纖維素衍生物為羥丙基纖維素、羥乙基纖維素或乙基羥乙基纖維素中任一，數(shù)均分子量為10萬，纖維素衍生物與丙烯酸的質量比為0.1:廣1:1，加入引發(fā)劑引發(fā)丙烯酸聚合，加熱溶液，在35°C，攪拌反應 2、小時，反應完成后得到羥丙基纖維素-聚丙烯酸、羥乙基纖維素-聚丙烯酸或乙基羥乙基纖維素-聚丙烯酸水相納米微粒分散液；
步驟3.室溫下，將單體N-異丙基丙烯酰胺，交聯(lián)劑N，N’_亞甲基雙丙烯酰胺，表面活性劑十二烷基硫酸鈉共混并溶于蒸餾水中，三者的質量比為4 3 :Γ1. 33 1 :1，濃度分別為13. 33 mg/mlUO mg/ml,3. 33 mg/m廣10 mg/ml ；所述的纖維素醚-聚丙烯酸與單體N-異丙基丙烯酰胺的質量比為4:2 4:7。步驟4.將步驟3的溶液緩慢滴入步驟2所得的溶液中，在35°C，攪拌反應6、小時，反應完成后得到纖維素醚-聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺復合物膠體微粒溶液，對應的就是羥丙基纖維素-聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺、羥乙基纖維素-聚丙烯酸-聚 N-異丙基丙烯酰胺或乙基羥乙基纖維素-聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺；
步驟5.將步驟4制得的復合物膠體微粒溶液用堿溶液調節(jié)至體系pH= 8^10 ；步驟6.將步5所得的溶液進行離心處理，去除上層清液；
步驟7.步驟6離心處理后所得的下層沉淀用蒸餾水稀釋洗滌；Γ4次，洗滌后所得的沉淀加入蒸餾水，再分散，最終得聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺為囊壁的溫敏性微膠囊溶液。
實施例1 聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備
在500mL攪拌式反應器中，將數(shù)均分子量為10萬的羥丙基纖維素0. 20克溶于35mL 蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得到澄清透明溶液。然后在溶液中加入0.20克丙烯酸，在攪拌條件下，向反應器中加入濃度為0. lmol/L的抗壞血酸溶液和過氧化氫溶液各 0. 5mL作為引發(fā)劑。35°C條件下反應2小時，得到乳白色的羥丙基纖維素-聚丙烯酸納米微粒水相分散液。在IOOmL的燒杯中，將單體N-異丙基丙烯酰胺0.20克，交聯(lián)劑N，N’ -亞甲基雙丙烯酰胺0. 15克，表面活性劑十二烷基硫酸鈉0. 05克共混并溶于15mL蒸餾水中， 室溫下攪拌，使之完全溶解，得N-異丙基丙烯酰胺溶液，備用。保持反應器中溫度為35°C， 加入引發(fā)劑抗壞血酸溶液(0. lmol/L)和過氧化氫溶液(0. lmol/L)各0. 5mL，然后開始緩慢滴加N-異丙基丙烯酰胺溶液。在35°C，攪拌反應6、小時，反應完成后得到羥丙基纖維素-聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺復合物納米微粒水相分散液；停止反應，將體系溫度降至室溫。將制得的羥丙基纖維素-聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺納米微粒溶液用濃度為0.2 mol/L的氫氧化鈉(NaOH)溶液調節(jié)至體系溶液的pH值為纊10范圍內，充分攪拌1小時，使羥丙基纖維素充分脫離納米微粒。對上述溶液進行離心處理(10000轉/分鐘， 15分鐘)，去除上層清液。取下層沉淀，用蒸餾水反復洗滌3、次后，加入蒸餾水500mL，超聲分散。最終所得的分散溶液即為中空結構的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。電子顯微鏡觀察其結構如圖1所示。
實施例2 聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備
在500mL攪拌式反應器中，將數(shù)均分子量為10萬的羥丙基纖維素0. 20克溶于35mL 蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得到澄清透明溶液。然后在溶液中加入0.20克丙烯酸，在攪拌條件下，向反應器中加入濃度為0. lmol/L的抗壞血酸溶液和過氧化氫溶液各 0. 5mL作為引發(fā)劑。35°C條件下反應2小時，得到乳白色的羥丙基纖維素-聚丙烯酸納米微粒水相分散液。在IOOmL的燒杯中，將單體N-異丙基丙烯酰胺0. 20克，交聯(lián)劑N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺0. 20克，表面活性劑十二烷基硫酸鈉0. 05克共混并溶于15mL蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得N-異丙基丙烯酰胺溶液，備用。其余過程同實施例1。最終所得的分散溶液即為中空結構的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。
實施例3 聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備
在500mL攪拌式反應器中，將數(shù)均分子量為10萬的羥丙基纖維素0. 20克溶于35mL 蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得到澄清透明溶液。然后在溶液中加入0.20克丙烯酸，在攪拌條件下，向反應器中加入濃度為0. lmol/L的抗壞血酸溶液和過氧化氫溶液各 0. 5mL作為引發(fā)劑。35°C條件下反應2小時，得到乳白色的羥丙基纖維素-聚丙烯酸納米微粒水相分散液。在IOOmL的燒杯中，將單體N-異丙基丙烯酰胺0. 20克，交聯(lián)劑N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺0. 15克，表面活性劑十二烷基硫酸鈉0. 10克共混并溶于15mL蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得N-異丙基丙烯酰胺溶液，備用。其余過程同實施例1。最終所得的分散溶液即為中空結構的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。
實施例4 聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備
在500mL攪拌式反應器中，將數(shù)均分子量為10萬的羥丙基纖維素0. 20克溶于35mL 蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得到澄清透明溶液。然后在溶液中加入0.20克丙烯酸，在攪拌條件下，向反應器中加入濃度為0. lmol/L的抗壞血酸溶液和過氧化氫溶液各 0. 5mL作為引發(fā)劑。35°C條件下反應2小時，得到乳白色的羥丙基纖維素-聚丙烯酸納米微粒水相分散液。在IOOmL的燒杯中，將單體N-異丙基丙烯酰胺0. 20克，交聯(lián)劑N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺0. 20克，表面活性劑十二烷基硫酸鈉0. 10克共混并溶于15mL蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得N-異丙基丙烯酰胺溶液，備用。其余過程同實施例1。最終所得的分散溶液即為中空結構的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。
實施例5 聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備
在500mL攪拌式反應器中，將數(shù)均分子量為10萬的羥丙基纖維素0. 20克溶于35mL 蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得到澄清透明溶液。然后在溶液中加入0.20克丙烯酸，在攪拌條件下，向反應器中加入濃度為0. lmol/L的抗壞血酸溶液和過氧化氫溶液各 0. 5mL作為引發(fā)劑。35°C條件下反應2小時，得到乳白色的羥丙基纖維素-聚丙烯酸納米微粒水相分散液。在IOOmL的燒杯中，將單體N-異丙基丙烯酰胺0. 20克，交聯(lián)劑N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺0. 15克，表面活性劑十二烷基硫酸鈉0. 15克共混并溶于15mL蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得N-異丙基丙烯酰胺溶液，備用。其余過程同實施例1。最終所得的分散溶液即為中空結構的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。
實施例6 聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備
在500mL攪拌式反應器中，將數(shù)均分子量為10萬的羥丙基纖維素0. 20克溶于35mL 蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得到澄清透明溶液。然后在溶液中加入0.20克丙烯酸，在攪拌條件下，向反應器中加入濃度為0. lmol/L的抗壞血酸溶液和過氧化氫溶液各 0. 5mL作為引發(fā)劑。35°C條件下反應2小時，得到乳白色的羥丙基纖維素-聚丙烯酸納米微粒水相分散液。在IOOmL的燒杯中，將單體N-異丙基丙烯酰胺0. 30克，交聯(lián)劑N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺0. 15克，表面活性劑十二烷基硫酸鈉0. 05克共混并溶于15mL蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得N-異丙基丙烯酰胺溶液，備用。其余過程同實施例1。最終所得的分散溶液即為中空結構的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。
實施例7 聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備
在500mL攪拌式反應器中，將數(shù)均分子量為10萬的羥丙基纖維素0. 20克溶于35mL 蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得到澄清透明溶液。然后在溶液中加入0.20克丙烯酸，在攪拌條件下，向反應器中加入濃度為0. lmol/L的抗壞血酸溶液和過氧化氫溶液各 0. 5mL作為引發(fā)劑。35°C條件下反應2小時，得到乳白色的羥丙基纖維素-聚丙烯酸納米微粒水相分散液。在IOOmL的燒杯中，將單體N-異丙基丙烯酰胺0. 40克，交聯(lián)劑N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺0. 15克，表面活性劑十二烷基硫酸鈉0. 05克共混并溶于15mL蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得N-異丙基丙烯酰胺溶液，備用。其余過程同實施例1。最終所得的分散溶液即為中空結構的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。
實施例8 聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備
在500mL攪拌式反應器中，將數(shù)均分子量為10萬的羥丙基纖維素0. 20克溶于35mL 蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得到澄清透明溶液。然后在溶液中加入0.20克丙烯酸，在攪拌條件下，向反應器中加入濃度為0. lmol/L的抗壞血酸溶液和過氧化氫溶液各 0. 5mL作為引發(fā)劑。35°C條件下反應2小時，得到乳白色的羥丙基纖維素-聚丙烯酸納米微粒水相分散液。在IOOmL的燒杯中，將單體N-異丙基丙烯酰胺0. 50克，交聯(lián)劑N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺0. 15克，表面活性劑十二烷基硫酸鈉0. 05克共混并溶于15mL蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得N-異丙基丙烯酰胺溶液，備用。其余過程同實施例1。最終所得的分散溶液即為中空結構的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。
實施例9 聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備
在500mL攪拌式反應器中，將數(shù)均分子量為10萬的羥丙基纖維素0. 20克溶于35mL 蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得到澄清透明溶液。然后在溶液中加入0.20克丙烯酸，在攪拌條件下，向反應器中加入濃度為0. lmol/L的抗壞血酸溶液和過氧化氫溶液各 0. 5mL作為引發(fā)劑。35°C條件下反應2小時，得到乳白色的羥丙基纖維素-聚丙烯酸納米微粒水相分散液。在IOOmL的燒杯中，將單體N-異丙基丙烯酰胺0. 60克，交聯(lián)劑N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺0. 15克，表面活性劑十二烷基硫酸鈉0. 05克共混并溶于15mL蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得N-異丙基丙烯酰胺溶液，備用。其余過程同實施例1。最終所得的分散溶液即為中空結構的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。
實施例10 聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備
在500mL攪拌式反應器中，將數(shù)均分子量為10萬的羥丙基纖維素0. 20克溶于35mL 蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得到澄清透明溶液。然后在溶液中加入0.20克丙烯酸，在攪拌條件下，向反應器中加入濃度為0. lmol/L的抗壞血酸溶液和過氧化氫溶液各 0. 5mL作為引發(fā)劑。35°C條件下反應2小時，得到乳白色的羥丙基纖維素-聚丙烯酸納米微粒水相分散液。在IOOmL的燒杯中，將單體N-異丙基丙烯酰胺0. 70克，交聯(lián)劑N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺0. 15克，表面活性劑十二烷基硫酸鈉0. 05克共混并溶于15mL蒸餾水中，室溫下攪拌，使之完全溶解，得N-異丙基丙烯酰胺溶液，備用。其余過程同實施例1。最終所得的分散溶液即為中空結構的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。
實施例11 負載牛血清蛋白(BSA)的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備將上述聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液稀釋至溶液濃度約為5 mg/mL。取 10 mL該濃度的溶液加入50 mg牛血清蛋白，反應M小時后，用100000分子量的透析袋透析去除未反應的牛血清蛋白。最終即得負載牛血清蛋白(BSA)的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。
實施例12 負載硫精蛋白(!Protamine)的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制
備
將上述聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液稀釋至溶液濃度約為5 mg/mL。取 10 mL該濃度的溶液加入50 mg的硫精蛋白，反應M小時后，用100000分子量的透析袋透析去除未反應的硫精蛋白。最終即得負載硫精蛋白的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。
實施例13 負載胰島素的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備將上述聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液稀釋至溶液濃度約為5 mg/mL。取 10 mL該濃度的溶液加入50 mg的胰島素，反應M小時后，用100000分子量的透析袋透析去除未反應的胰島素。最終即得負載胰島素的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。
實施例14 負載鹽酸阿霉素(Dox)的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的制備將上述實施例制備的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液混合后調節(jié)濃度約為5 mg/mL。取10 mL該濃度的溶液加入10 mg的鹽酸阿霉素，反應M小時后，用10000 分子量的透析袋透析去除未反應的鹽酸阿霉素。最終即得負載鹽酸阿霉素的聚丙烯酸-聚 N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液。用紫外-可見分光光度計掃描聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺納米微膠囊與鹽酸阿霉素結合前后的紫外光譜圖，結果見圖2。由圖中可知，聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺納米微膠囊與鹽酸阿霉素發(fā)生有效結合。
實施例15 負載藥物的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊的體外釋放將制得的負載藥物的聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺微膠囊溶液精密吸取2 mL，放在透析袋(Cut-off分子量100000)中，然后將透析袋完全浸入在pH=7. 4的5 mL 0. 1 mol/L PBS中，釋放實驗在緩慢攪拌下于37 ！下進行。每隔一定時間將介質全部取出，計算溶液中的藥物的含量，并根據(jù)含量計算釋放百分率。結果如圖3所示，可以看出負載于其中的藥物表現(xiàn)出持續(xù)穩(wěn)定的釋放特性。
權利要求
1.一種溫敏性高分子微膠囊，其特征是為中空結構的微膠囊，是以聚丙烯酸-聚 N-異丙基丙烯酰胺為壁材，平均尺寸為8(Γ2000納米；是以纖維素醚-聚丙烯酸復合物膠體微粒為模板與單體N-異丙基丙烯酰胺在模板表面聚合，然后再除去纖維素醚而得到的微膠囊。
2.一種制備權利要求1所述的溫敏性高分子微膠囊的方法，其特征是以纖維素醚-聚丙烯酸復合物膠體微粒為模板，在交聯(lián)劑N，N’ 一亞甲基雙丙烯酰胺的作用下，單體 N-異丙基丙烯酰胺在模板表面聚合形成溫敏性聚合物聚N-異丙基丙烯酰胺，形成核-殼結構的纖維素醚-聚丙烯酸復合物的膠體微粒，然后通過調節(jié)體系的PH值去除其中的纖維素醚，最終獲得中空結構的以聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺為壁材的溫敏性高分子微膠^ ο
3.如權利要求2所述的制備溫敏性高分子微膠囊的方法，其特征是所述的纖維素醚-聚丙烯酸復合物膠體微粒是以纖維素衍生物的水溶液與丙烯酸在引發(fā)劑存在下聚合得到，其中所述的纖維素衍生物為羥丙基纖維素、羥乙基纖維素或乙基羥乙基纖維素中的任一。
4.如權利要求3所述的制備溫敏性高分子微膠囊的方法，其特征是所述的引發(fā)劑為一定濃度的過氧化氫溶液和抗壞血酸溶液，所述的纖維素衍生物的水溶液的濃度為4飛 mg/mL，纖維素衍生物與丙烯酸的質量比為0. 1 :Γ :1。
5.如權利要求2所述的制備溫敏性高分子微膠囊的方法，其特征是加入單體N-異丙基丙烯酰胺時還加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉，單體、交聯(lián)劑和表面活性劑的質量比為4 :3 :Γ1. 33 1 :1，所述的單體、交聯(lián)劑和表面活性劑的濃度分別為13. 33 mg/mLUO mg/ mL、3. 33 mg/mL 10 mg/mL0
6.如權利要求2所述的制備溫敏性高分子微膠囊的方法，其特征是所述的纖維素醚-聚丙烯酸與單體N-異丙基丙烯酰胺的質量比為4:2 4:7。
7.如權利要求2所述的制備溫敏性高分子微膠囊的方法，其特征是所述的降溫處理為降溫到室溫再調節(jié)pH值為8 10之間，然后將所得溶液離心處理，去除上清液，下層沉淀洗滌、分散即得到去除了纖維素醚的中空結構的以聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺為壁材的溫敏性高分子微膠囊。
8.權利要求1所述的溫敏性高分子微膠囊在作為藥物載體的應用。
9.權利要求1所述的溫敏性高分子微膠囊在作為蛋白類藥物載體的應用。
10.權利要求1所述的溫敏性高分子微膠囊在作為抗腫瘤藥物的載體中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種溫敏性高分子微膠囊及其制備方法和應用，是中空結構的微膠囊，以聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺為壁材，平均尺寸為80~2000納米；是以纖維素醚-聚丙烯酸復合物膠體微粒為模板與單體N-異丙基丙烯酰胺在模板表面聚合，然后再除去纖維素醚而得到的微膠囊?？梢宰鳛樗幬锏妮d體，特別是用作為蛋白類藥物和抗腫瘤藥物的載體。以纖維素醚-聚丙烯酸復合物膠體微粒為模板，在交聯(lián)劑N,N’－亞甲基雙丙烯酰胺的作用下，N-異丙基丙烯酰胺在模板表面聚合形成溫敏性聚合物，進而形成核-殼結構的纖維素醚-聚丙烯酸-聚N-異丙基丙烯酰胺復合物膠體微粒，然后去除其中的纖維素醚，獲得溫敏性高分子微膠囊。
文檔編號A61P35/00GK102198117SQ20111016256
公開日2011年9月28日 申請日期2011年6月17日 優(yōu)先權日2011年6月17日
發(fā)明者儲富祥, 南靜婭, 王春鵬, 陳瑩 申請人:中國林業(yè)科學研究院林產化學工業(yè)研究所