專利名稱：一種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中醫(yī)藥制劑領(lǐng)域，具體的說，是ー種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物。
背景技術(shù)：
系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus eythematosus, SLE)為世界公認(rèn)的重大難治性疾病，也是自身免疫性疾病中致死率最高、發(fā)病率較高并主要危害青年女性的嚴(yán)重疾病。由于SLE病因和發(fā)病機(jī)制不明，發(fā)病初期往往缺乏一定的判斷標(biāo)準(zhǔn)，臨床上常以廣泛組織和多器官損傷、癥狀多祥且多變，以及病情進(jìn)行性加重等為主要特點，因而，迄今治療乏木，且預(yù)后較差，有約10%的患者在發(fā)病5年內(nèi)死亡，10-20%在發(fā)病10年內(nèi)死亡。
目前，SLE的治療原則為消除炎癥的抗炎治療和糾正病理過程，涉及的藥物包括非甾體抗炎藥(non-steroid antiinflammatory drugs, NSAIDS)、類固醇激素、免疫抑制劑、抗瘧藥、性激素干預(yù)、生物制劑等。經(jīng)大量臨床研究證實，以激素為代表的化學(xué)藥物雖確能有效控制或延緩SLE造成的多臟器損害，降低致死率，但長期或大劑量使用都可造成較大的毒副作用，例如=NSAIDS可造成急性腎功能不全或藥物性肝損害；類固醇激素長期使用可導(dǎo)致感染、糖尿病、骨質(zhì)疏松、股骨頭壞死等多種副作用；免疫抑制劑則可導(dǎo)致機(jī)體免疫功能低下，易感其他疾病。近年來，藥物副作用及其所致免疫抑制狀態(tài)誘發(fā)的感染甚至已躍居成為SLE的第一死因。隨著生物學(xué)的長足發(fā)展，SLE的細(xì)胞和分子機(jī)制正被逐漸掲示，針對免疫反應(yīng)某些關(guān)鍵環(huán)節(jié)的生物制劑正顯示越來越廣闊的應(yīng)用前景，但均尚處于臨床前研究或臨床試驗階段，且某些研究結(jié)果存在較大爭議；不僅如此，生物制劑已被觀察到某些毒副作用，如已有研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)用抗CD40L單克隆抗體可導(dǎo)致原因不明的血栓形成。因此，現(xiàn)有藥物藥效和安全性之間的矛盾也成為了目前SLE治療的主要矛盾之一。最新的研究顯示血小板活化在紅斑狼瘡的發(fā)作過程中有重要作用，激活的血小板可通過SCD154 (免疫分子)増加干擾素分泌進(jìn)而加重自身免疫反應(yīng)，阻斷該過程可能成為SLE治療新途徑。但目前常用的抗凝血劑因副作用較多、治療窗窄而易發(fā)生出血事件等原因，很難直接用于上述目的。而本發(fā)明則采用中藥來抑制血小板活化且無明顯毒副作用，還可與現(xiàn)有藥物合并應(yīng)用，其前景可期。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物，其藥理機(jī)制為抑制血小板活化及雌激素拮抗，適用于各種類型的紅斑狼瘡，與現(xiàn)有治療藥物聯(lián)合應(yīng)用可明顯減少后者使用量，降低其毒副作用。本發(fā)明通過下述方案實現(xiàn)一種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物，該中藥組合物配方主要由丹參、赤芍組成，其作用機(jī)制為抑制血小板活化及雌激素拮抗，適用于各種類型的紅斑狼瘡，質(zhì)量可控度高、臨床前研究顯示藥效良好。
該組合物配方按生藥的重量百分比計由丹參20 80%和赤芍20 80%組成。為了達(dá)到更好的治療效果，該中藥組合物配方中還包括黃芪或玄參中的至少ー種。該組合物配方按生藥的重量百分比計由黃芪O 50%、玄參O 60%、丹參20 80%和赤芍20 80%組成。所述的黃芪采用黃芪生藥、黃芪飲片或黃芪炮制品；所述的玄參采用玄參生藥、玄參飲片或玄參炮制品；所述的丹參采用丹參生藥、丹參飲片或丹參炮制品；所述的赤芍采用赤芍生藥、赤芍飲片或赤芍炮制品。 該組合物配方按提取物的重量百分比計由黃芪0-20%、玄參0-50%、丹參20-80%和赤芍20 80%組成。所述的黃芪采用黃芪總多糖；所述的玄參采用玄參總苷；所述的丹參采用丹參總酚酸；所述的赤芍采用赤芍總苷。為了便于患者的攜帯和服用，所述臨床ロ服劑型為片劑、膠囊劑或顆粒劑。 由于本發(fā)明所述的中藥化合物的有效組分明確，因此制備方法也較簡單，包括如下步驟
(a)取黃苗、玄參、丹參、赤巧，制成粉末狀，
(b)按比例混合步驟(a)所制取的黃苗、玄參、丹參、赤茍粉末。步驟(a)分為兩種情況ー種方式為黃芪選用黃芪生藥、黃芪飲片或黃芪炮制品；玄參選用玄參生藥、玄參飲片或玄參炮制品；丹參選用丹參生藥、丹參飲片或丹參炮制品；赤芍選用赤芍生藥、赤芍飲片或赤芍炮制品；將上述藥品直接制成粉末狀；另ー種方式黃芪選用黃芪總多糖；玄參選用玄參總苷；丹參選用丹參總酚酸；赤芍選用赤芍總苷；將上述提取物制成粉末狀。當(dāng)黃芪、玄參、丹參、赤芍選用提取物時，所述的黃芪藥材粉依次經(jīng)過粗堤、層析、蒸發(fā)、干燥后制得黃芪總多糖；所述的玄參藥材依次經(jīng)過粗提、洗脫、濃縮、干燥后制得玄參總苷；所述的丹參藥材依次經(jīng)過粗提、洗脫、濃縮、凍干后制得丹參總酚酸；所述的赤芍依次經(jīng)過粗提、洗脫、濃縮、干燥后制得赤芍總苷。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點及有益效果
(I)本發(fā)明所述的中藥組合物來源于臨床驗方，并經(jīng)藥理學(xué)方法進(jìn)行組方合理性篩選和驗證，適用于各階段SLE的治療。(2)本發(fā)明所述的中藥組合物的藥效經(jīng)大量藥理學(xué)實驗證實，単獨應(yīng)用可延緩SLE發(fā)病進(jìn)程。(3)本發(fā)明所述的中藥組合物的藥效經(jīng)大量藥理學(xué)實驗證實，與現(xiàn)有SLE治療有效藥物聯(lián)合應(yīng)用可在提高或保持現(xiàn)有藥物療效的前提下，減少其使用量，進(jìn)而降低其毒副作用。(4)本發(fā)明所述的中藥組合物的作用機(jī)理明確，主要為抑制血小板活化，減少s⑶154分泌，進(jìn)而抑制干擾素分泌導(dǎo)致的自身免疫反應(yīng)加重。(5)本發(fā)明所述的中藥組合物具有良好的安全性，臨床應(yīng)用未出現(xiàn)任何不良反應(yīng)，臨床前的大鼠及小鼠急性毒性研究表明其在最大給藥量情況下，未見任何不良反應(yīng)。(6)本發(fā)明所述的中藥組合物有效組分明確，經(jīng)提取后可制成各種ロ服劑型，質(zhì)量可控，體積較小，攜帯方便。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)ー步地詳細(xì)說明，但本發(fā)明的實施方式不限于此。實施例I :
該用于治療紅斑狼瘡的中藥組合物，來源于臨床驗方，其組成的有效組分經(jīng)過多種紅斑狼瘡藥理學(xué)模型證明有效后而提出，其配方主要由丹參、赤芍組成，主要作用機(jī)制可抑制血小板活化及雌激素拮抗，適用于各種類型的紅斑狼瘡，與現(xiàn)有治療藥物聯(lián)合應(yīng)用還可明顯減少后者使用量，降低其毒副作用。為了達(dá)到更好的治療效果，在該配方中還可以加入黃芪或玄參中的至少ー種。臨床試驗證明，加入了黃芪、玄參的藥物配方比未加入黃芪、玄參的藥物治療效果要好。進(jìn)ー步，黃芪選用黃芪(生藥、飲片或其炮制品)或黃芪總多糖； 玄參選用玄參(生藥、飲片或其炮制品)或玄參總苷；丹參選用丹參(生藥、飲片或其炮制品)或丹參總酚酸；赤芍選用赤芍(生藥、飲片或其炮制品)或赤芍總苷。黃芪總多糖、玄參總苷、丹參總酚酸、赤芍總苷均屬于提取物。由于本發(fā)明所述的中藥組合物的有效組分明確，因此它的制備方法也較簡單，制備方法如下第一歩，選取黃芪、玄參、丹參、赤芍，并制成粉末狀，第二歩，將步驟一中所制得的黃芪、玄參、丹參、赤芍粉末按比例混合。由于上述的四種中藥材的生藥、飲片及其炮制品均可直接用于中藥的配方，并且在選用生藥或提取物時，其配比有所變換，因此當(dāng)黃芪選用黃芪(生藥、飲片或其炮制品)、玄參選用玄參(生藥、飲片或其炮制品)、丹參選用丹參(生藥、飲片或其炮制品)、赤芍選用赤芍(生藥、飲片或其炮制品)吋，按生藥的重量百分比計其配比為黃芪0% 50%、玄參0% 60%、丹參20% 80%、赤芍20% 80% ;當(dāng)黃芪選用黃芪總多糖、玄參選用玄參總苷、丹參選用丹參總酚酸、赤芍選用赤芍總苷時，按提取物的重量百分比計其配比為黃芪0-20%、玄參0-50%、丹參20-80%和赤芍20 80%。而其混合后的組合物還可直接裝膠囊制成膠囊劑或直接采用顆粒劑、片劑，更便于患者的攜帯和服用。黃芪、玄參、丹參、赤芍采用提取物時，首先應(yīng)制備提取物，黃芪藥材粉依次經(jīng)過粗提、層析、蒸發(fā)、干燥后制得黃芪總多糖；玄參藥材依次經(jīng)過粗提、洗脫、濃縮、干燥后制得玄參總苷；丹參藥材依次經(jīng)過粗提、洗脫、濃縮、凍干后制得丹參總酚酸；赤芍依次經(jīng)過粗堤、洗脫、濃縮、干燥后制得赤芍總苷。以制得黃芪總多糖20%、玄參總苷20%、丹參總酚酸30%、赤芍總苷30% (按重量百分比計)為例，它們的制取方法如下
(I)取黃芪藥材粉500g，加水2. 5L在90°C恒溫浸提4小吋。將浸提液過濾，靜置后取上清液，減壓濃縮至粘稠糊狀后，加95%こ醇至含醇量達(dá)到75%，密閉冷藏沉淀12小時，取沉淀加水溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)至多糖粘附于皿壁后，置真空干燥箱中干燥，得黃芪總多糖粗提物。以Bio-Gel P4凝膠過濾柱進(jìn)行層析，收集糖峰，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)至多糖粘附于皿壁后，置真空干燥箱中干燥，得黃芪總多糖。(2)取玄參藥材500g，用10倍量的水煎煮兩次，每次3小吋。將煎煮液過濾濃縮；濃縮液加こ醇至含醇量達(dá)到75%，密閉冷藏沉淀12小時，上清液過濾濃縮；濃縮液按Ig固體量/ml的上樣量上大孔吸附樹脂柱HPD100，洗脫速率為3ml/min，吸附平衡后，用水洗脫至流出液無還原糖反應(yīng)后，再用5倍柱體積的50%的こ醇洗脫，收集こ醇洗脫液；洗脫液濃縮，干燥，即得玄參總苷。(3)丹參藥材500g，粉碎成最粗粉，加O. Imol / L鹽酸溶液至液面浸泡過夜后，將藥材連同浸泡液一起裝柱，以14倍量pH=2的酸水滲漉；合并滲漉液按25mg丹參酚酸B /Iml樹脂的上樣量上AB-8型大孔樹脂柱，洗脫速率為3ml/min，吸附平衡后，先用水淋洗5倍柱體積，再用20 %こ醇洗6倍柱體積，最后用40 %的こ醇洗脫4倍柱體積，。合并這部分洗脫液，70°C減壓脫醇濃縮至適當(dāng)體積，凍干，即得丹參總酚酸。(4)取赤芍藥材500g，用8倍量的70%的こ醇8回流提取3次，每次I. 5小吋，濾過，合并提取液，濃縮至無醇味，加適量水溶解，離心，取上清液，調(diào)節(jié)其濃度為O. lg/ml (每Iml藥液中含生藥赤芍量為O. lg)，藥液通過已處理好的DlOl型大孔吸附樹脂柱，上樣量為芍藥苷約48. 67mg/g,吸附速率為3ml/min，吸附平衡后，以蒸餾水6個柱體積、30%こ醇5個柱體積依次洗脫，洗脫速率為3ml/min，回收こ醇，濃縮至相對密度為I. 15的藥液(50°C熱測)，噴霧干燥，得赤芍總苷。 (5)取黃芪總多糖粉末20g、玄參總苷粉末20g、丹參總酚酸粉末30g、赤芍總苷粉末30g充分混合后可直接采用片劑、顆粒劑或裝膠囊制成膠囊劑等臨床常見劑型，便于患者的攜帯和服用。實施例2:
本實施例與實施例I的區(qū)別僅在于中藥組合物按提取物的重量百分比計由丹參總酚酸粉末50g、赤芍總苷粉末50g組成，同樣可制成片劑、顆粒劑或膠囊劑等臨床常見劑型。實施例3
本實施例與實施例2的區(qū)別僅在于中藥組合物按提取物的重量百分比計由黃芪總多糖粉末5g、玄參總苷粉末20g、丹參總酹酸粉末30g、赤茍總苷粉末45g組成，同樣可制成片齊U、顆粒劑或膠囊劑等臨床常見劑型。實施例4
本實施例與實施例3的區(qū)別僅在于中藥組合物按提取物的重量百分比計由黃芪總多糖粉末10g、玄參總苷粉末30g、丹參總酹酸粉末40g、赤茍總苷粉末20g組成，同樣可制成片齊U、顆粒劑或膠囊劑等臨床常見劑型。實施例5
本實施例與實施例4的區(qū)別僅在于中藥組合物按生藥的重量百分比計由玄參飲片粉末50g、丹參炮制品粉末20g、赤芍生藥粉末30g組成，同樣可制成片劑、顆粒劑或膠囊劑等臨床常見劑型。當(dāng)然，黃芪、玄參、丹參、赤芍也可以生藥粉末與提取物粉末混合，由于生藥相對于提取物來說含量較低，采用上述方式時，較少的提取物即相當(dāng)于較多的生藥，故配比也會相應(yīng)的產(chǎn)生變化，但由于一般情況下不會采用這種方法，故申請人未對其配比進(jìn)行試驗。實施例6
為進(jìn)ー步說明本發(fā)明的安全性和藥效，以制得黃芪總多糖20%、玄參總苷20%、丹參總酚酸30%、赤芍總苷30% (按重量百分比計)為例，通過以下的兩組實驗分別列舉了其部分安全性和藥效學(xué)的研究結(jié)果
實驗I :小鼠急性毒性試驗 A、受試物的配置方法
臨用時稱取適當(dāng)組合物粉末，以O(shè). 5%羧甲基纖維素鈉(CMC)配制成500mg/ml濃度的
混懸液。
B、實驗動物及條件
屏障系統(tǒng)KM小鼠，體重20± lg，雌雄各半。試驗環(huán)境符合小鼠屏障系統(tǒng)使用設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)，室溫18 - 22°C，日溫差不超過3°C，相対濕度60-70%，日光燈照明，12小時明暗相間，自動定時過濾通風(fēng)換氣，換氣頻度10-15次/小吋。分性別飼養(yǎng)于小鼠籠中，每籠5只，全價顆粒飼料及自由飲水、采食，墊料每3天
換一次。C、試驗方法
小鼠40只，按體重隨機(jī)分為藥物組、對照組，每組20只，雌雄各半。經(jīng)預(yù)試驗發(fā)現(xiàn)藥物在最大濃度和最大劑量下無明顯毒性反應(yīng)，故進(jìn)行最大給藥量試驗。禁食不禁水12小吋，藥物組以動物能夠接受的最大容積40ml/kg,—次性灌胃給予500mg/ml混懸液。對照組按40ml/kg給予O. 5%CMC。試驗設(shè)計如表I。 表I最大耐受量試驗設(shè)計
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給藥結(jié)束后連續(xù)觀察4小時，記錄動物異常反應(yīng)。此后每日觀察、記錄動物外觀、行為、分泌物、排泄物、死亡情況及中毒反應(yīng)等，連續(xù)14日。動物藥后1、2、3、7、14天分別稱量體重，分別計算雌性、雄性小鼠體重周增長率(％)=(后I周體重一前I周體重)X 100/前I周
體重。計算數(shù)據(jù)均用(文土S)(均值土標(biāo)準(zhǔn)差)表示，用t檢驗比較組間差異的顯著性。觀察結(jié)束后，全部動物處死，解剖，對心、肝、脾、肺、腎等進(jìn)行肉眼觀察，如有肉眼可見顏色、體積、紋理異常的臟器，進(jìn)行記錄并固定待檢。D、試驗結(jié)果
小鼠藥后4小時內(nèi)活動、外觀、精神狀態(tài)、小便及其顔色、被毛、膚色、呼吸、鼻、眼、口腔分泌物均未見異常。24小時后，小鼠大便、外觀、行為活動、精神狀態(tài)、被毛、膚色、呼吸、鼻、目艮、口腔分泌物等均未見異常。實驗結(jié)束解剖動物，肉眼未見臟器異常。試驗期間，無小鼠死亡。藥后小鼠體重呈正常增長狀態(tài)，與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異，見表2、3。表2 灌胃給予對雄鼠體重的影響(f 土S)
權(quán)利要求
1.一種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物，其特征在于該中藥組合物配方主要由丹參、赤茍組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物，其特征在于該組合物配方按生藥的重量百分比計由丹參20 80%和赤芍20 80%組成。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物，其特征在于該中藥組合物配方中還包括黃芪或玄參中的至少一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物，其特征在于該組合物配方按生藥的重量百分比計由黃芪0 50%、玄參0 60%、丹參20 80%和赤芍20 80%組成。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物，其特征在于所述的黃芪采用黃芪生藥、黃芪飲片或黃芪炮制品；所述的玄參采用玄參生藥、玄參飲片或玄參炮制品；所述的丹參采用丹參生藥、丹參飲片或丹參炮制品；所述的赤芍采用赤芍生藥、赤芍飲片或赤芍炮制品。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物，其特征在于該組合物配方按提取物的重量百分比計由黃芪0-20%、玄參0-50%、丹參20-80%和赤芍20 80%組成。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物，其特征在于所述的黃芪采用黃芪總多糖；所述的玄參采用玄參總苷；所述的丹參采用丹參總酚酸；所述的赤芍采用赤芍總苷。
8.根據(jù)權(quán)利要求f7任一項所述的一種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物，其特征在于所述臨床口服劑型為片劑、膠囊劑或顆粒劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于治療紅斑狼瘡的抗血小板活化中藥組合物，該中藥組合物的配方主要由丹參、赤芍組成，其制備方法包括將各有效成分的中藥材制作成粉末，并將其混合，可制作成顆粒劑或膠囊劑等便于患者服用和攜帶的形式。本發(fā)明主要應(yīng)用于SLE治療，不僅可單獨應(yīng)用于早期、輕度SLE治療，且可與多種NSAIDS、免疫抑制劑或類固醇激素合用，提高現(xiàn)有SLE治療藥物的安全性和療效。
文檔編號A61P37/02GK102670746SQ20121014775
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月14日
發(fā)明者余悅, 吳瑕, 張世慧, 張春梅, 張磊, 李東曉, 楊薇, 田興軍, 白筱璐, 羅恒, 鄧文龍 申請人:四川省中醫(yī)藥科學(xué)院