專利名稱：含有環(huán)孢菌素的軟膠囊制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種如含有環(huán)孢菌素作為活性組分的軟膠囊制劑。更具體地說，本發(fā)明涉及一種在含有特定增塑劑的明膠膠囊殼中含有穩(wěn)定的環(huán)孢菌素組合物的軟膠囊制劑及其制備方法。
環(huán)孢菌素是一種由11個氨基酸組成的特定的大分子(分子量為1202.64)環(huán)狀肽化合物，它具有廣泛有用的藥理活性，特別是免疫抑制活性和抗炎活性。所以，環(huán)孢菌素已經(jīng)用于抑制活體固有的免疫反應(yīng)，后者是由組織和器官移植引起的，如心臟、肺、肝、腎臟、胰、骨髓、皮膚和角膜的移植，特別是由外來組織和器官的移植引起的。另外，環(huán)孢菌素可用于抑制血液病如貧血、各種免疫疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、特發(fā)性吸收障礙綜合癥等和炎性疾病如關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕疾病等。環(huán)孢菌素可用于治療原生動物疾病如瘧疾、血吸蟲病等，而且目前還用于化療。
環(huán)孢菌素是高度親脂和疏水的。所以，環(huán)孢菌素難溶于水，而易溶于有機溶劑如甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、氯仿等。由于具有上述特性的環(huán)孢菌素的低水溶性，當(dāng)口服使用環(huán)孢菌素時，其生物利用度極低并且可受到各個具體患者條件的極大影響。因此，非常難以保持有效的治療濃度。而且，環(huán)孢菌素可顯示明顯的副作用如腎毒性。因此，環(huán)孢菌素由于其低的水溶性而很難配制成口服使用的制劑。為此，廣泛地進行了各種研究來發(fā)現(xiàn)適于環(huán)孢菌素有效口服使用的制劑，該制劑可提供適當(dāng)?shù)囊恢聞┝亢秃线m的生物利用度。
在現(xiàn)有技術(shù)中，適于口服給予難溶于水的環(huán)孢菌素的制劑通常被配制成乳劑預(yù)濃縮物的形式。
美國專利4388307中教導(dǎo)了使用這種組合物的一種典型的方法，該專利公開于1983年6月14日。該專利公開了使用乙醇的液體制劑。按照該美國專利說明書中公開的方法，是將環(huán)孢菌素與載體混合而形成液體制劑，所述載體是由作為輔助表面活性劑的乙醇；作為植物油的橄欖油和天然植物油甘油三酯的酯基轉(zhuǎn)移產(chǎn)物和聚亞烷基多元醇作為表面活性劑。
然而，作為水稀釋液給予所得液體制劑很難使受者樂于使用并且也難以提供口服給藥的均勻劑量。
為了減少口服給藥前用水稀釋環(huán)孢菌素液體組合物的不方便，已經(jīng)將乳劑預(yù)濃縮物形式的液體組合物配制成軟膠囊制劑，現(xiàn)在可商購Sandimmune(注冊商標)。在這種情況下，環(huán)孢菌素軟膠囊因環(huán)孢菌素溶解性的需要而含有乙醇。然而，乙醇因其揮發(fā)性而透過膠囊的明膠殼，甚至在常溫也是如此，為了防止在貯存和分發(fā)期間乙醇從軟膠囊制劑中揮發(fā)，可將軟膠囊制劑包裹在特殊的包裝材料中，如鋁-鋁泡包裝。
目前，已可能開發(fā)一種這樣的環(huán)孢菌素制劑該制劑在貯存期間具有穩(wěn)定性而且在生物利用度上基本上沒有變化并在個體之間沒有區(qū)別，這樣可均勻保持環(huán)孢菌素的生物效應(yīng)。為此目的而開發(fā)的一種制劑被公開在韓國專利公開93-113中。該制劑以Sandimmun Neoral為注冊商標而商業(yè)化。然而，由于該制劑也使用乙醇，在貯存穩(wěn)定性上可具有以前含乙醇制劑的某些缺點，并在乙醇含量上發(fā)生改變。
因此，本發(fā)明人研究了各種表面活性劑、油成分、輔助表面活性劑等的各種組合物來尋找一種穩(wěn)定的環(huán)孢菌素組合物，就其藥代動力學(xué)特性而言，該組合物與現(xiàn)有的環(huán)孢菌素制劑相比具有較高的生物利用度和個體之間血液水平上較低的差異。結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)一種特定的由下文所述成分組成的環(huán)孢菌素組合物可滿足上述要求，并因而完成了本發(fā)明。
所以，本發(fā)明的一個方面是提供一種適于配制成軟膠囊的組合物，該組合物含有環(huán)孢菌素作為活性組分；親水物質(zhì)聚乙二醇或非親水物質(zhì)碳酸亞丙酯(propylene carbonate)或其混合物；下文定義的油成分和表面活性劑。
本發(fā)明的另一方面是提供一種含有組合物的軟膠囊制劑，所述組合物含有環(huán)孢菌素作為活性組分；親水物質(zhì)聚乙二醇或非親水物質(zhì)碳酸亞丙酯或其混合物；脂肪酸和伯醇的酯化物、中鏈脂肪酸甘油三酯(如果需要)和脂肪酸單酸甘油酯的混合物作為油成分；和HLB(親水親脂平衡值)值為8-17的表面活性劑。
本發(fā)明的另一方面是提供一種制備上述軟明膠膠囊制劑的方法。
盡管本文主要描述本發(fā)明的軟明膠膠囊，但應(yīng)認識到本發(fā)明也包括就如此使用的組合物本身如口服溶液，如Sandimmun Neora，或其它單位劑量形式。
一方面，本發(fā)明涉及一種具有高貯存穩(wěn)定性并因此在一段時間內(nèi)組合物很少發(fā)生改變且增加了生物利用度的含有環(huán)孢菌素的膠囊，該膠囊含有一種組合物，所述組合物包含環(huán)孢菌素作為活性成分、親水物質(zhì)聚乙二醇或非親水物質(zhì)碳酸亞丙酯或其混合物作為第二種成分、如下定義的油成分和表面活性劑。
為了將這種含有環(huán)孢菌素的組合物配制成軟膠囊制劑，必須使用明膠殼。然而，當(dāng)使用含有甘油作為增塑劑的普通明膠殼配制軟膠囊時，軟膠囊制劑有一些缺點，因為甘油滲入乳劑而改變?nèi)閯╊A(yù)濃縮物的乳化狀態(tài)并因此使環(huán)孢菌素的溶解性顯著降低而導(dǎo)致環(huán)孢菌素從乳劑中沉淀出來。
因此，在本發(fā)明軟膠囊殼中優(yōu)選選擇使用丙二醇和聚乙二醇混合物而不是甘油作為明膠殼的增塑劑，這樣可以解決與甘油滲入相關(guān)的問題。
然而，當(dāng)通過水冷卻法(通常使用冷卻鼓)制備本發(fā)明含有丙二醇和聚乙二醇的膠囊殼體時，殼體不易從鼓上移下。膠囊殼體從冷卻鼓上的可移性可通過加強冷卻冷卻鼓來提高，即繼續(xù)循環(huán)冷卻水來將殼體的溫度降低到約17℃。然而，冷卻到較低溫度的膠囊殼體在包囊過程中可導(dǎo)致低的密封度并且可引起低的生產(chǎn)率。
所以，制備本發(fā)明不含甘油增塑劑的膠囊殼的方法是采用空氣冷卻法，而不是采用以前的水冷卻法，其中膠囊殼體可通過來自鼓風(fēng)機的空氣流而冷卻到最佳溫度，并因此可從冷卻鼓上容易地移下殼體，而且保持約21℃的最佳溫度以增加包囊過程中的密封度和確保高的生產(chǎn)率。
如上所述，本產(chǎn)品可通過使用不含甘油的明膠膠囊并采用空氣冷卻法來生產(chǎn)，且其中的組合物不含低沸點揮發(fā)溶劑乙醇且具有高的貯存穩(wěn)定性即在一段時間內(nèi)組合物很少發(fā)生改變并提高生物利用度。
更具體地講，本發(fā)明涉及一種環(huán)孢菌素制劑，其例如在含有聚乙二醇和丙二醇作為增塑劑的明膠殼中含有一種組合物，所述組合物包含1)環(huán)孢菌素作為活性組分；2)聚乙二醇或碳酸亞丙酯或其混合物；3)脂肪酸和伯醇的酯化物和脂肪酸單酸甘油酯和可有可無的中鏈脂肪酸甘油三酯的混合物作為油成分和
4)HLB(親水親脂平衡值)為8-17的表面活性劑。
另一方面，本發(fā)明提供一種含有一種組合物的環(huán)孢菌素制劑，所述組合物包含1)環(huán)孢菌素作為活性組分；和2)碳酸亞丙酯。
如果需要的話，此組合物(也是本發(fā)明組合物)可另外含有或不含有本文所述量的本文所述的任何其它成分。
用作本發(fā)明組合物中藥物活性組分的環(huán)孢菌素是一種環(huán)肽化合物，它具有上文所述的有用的免疫抑制活性和抗炎活性。盡管環(huán)孢菌素A、B、C、D、G等可用作本發(fā)明的環(huán)孢菌素成分，但環(huán)孢菌素A是最優(yōu)選的，這是因為它的臨床效果和藥理特性在現(xiàn)有技術(shù)中得到了很好的確立。
作為本發(fā)明組合物的第二種成分，它可起輔助表面活性劑的作用，具有高沸點、不揮發(fā)性、不滲透過軟膠囊明膠殼并對環(huán)孢菌素具有高溶解性的聚乙二醇可用作親水物質(zhì)。在本發(fā)明的組合物中，盡管可使用可液化的任何聚乙二醇，但優(yōu)選使用分子量為200到600的聚乙二醇(PEG)，特別是PEG200。
另外，碳酸亞丙酯(沸點約242℃)也可用作非親水成分。在本發(fā)明中，也可使用上文定義的非親水物質(zhì)和親水物質(zhì)的混合物。當(dāng)用聚乙二醇和碳酸亞丙酯的混合物作為本發(fā)明的成分時，通常可以1∶0.1-5，優(yōu)選1∶0.1-3，最優(yōu)選1∶0.2-2的重量比來組合它們。
在本發(fā)明中，使用聚乙二醇和碳酸亞丙酯產(chǎn)生一些優(yōu)點。那就是，提高了貯存期間含有環(huán)孢菌素組合物的穩(wěn)定性并因此基本上均勻保持包含在其中的成分的含量。而且，使用碳酸亞丙酯甚至可增加活性成分環(huán)孢菌素的穩(wěn)定性并抑制水從明膠膠囊殼滲入組合物中而產(chǎn)生更穩(wěn)定的組合物。
在本發(fā)明的組合物中，每1份重量的環(huán)孢菌素優(yōu)選使用0.1-10份重量，更優(yōu)選0.5-8份重量且最優(yōu)選1-5份的第二種成分。
在本發(fā)明乳劑預(yù)濃縮物中使用的第三種成分是油成分。作為本發(fā)明的油成分，可使用脂肪酸和伯醇的酯化化合物、中鏈脂肪酸甘油三酯(當(dāng)存在時)和脂肪酸單酸甘油酯的混合物。本發(fā)明可使用的脂肪酸和伯醇的酯化化合物可包括8-20個碳原子的脂肪酸和2-3個碳原子的伯醇的酯化化合物，例如肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、亞油酸乙酯、油酸乙酯等，亞油酸和乙醇的酯化化合物是特別優(yōu)選的。另外，作為中鏈脂肪酸甘油三酯(當(dāng)存在時)，可使用具有8-10個碳原子的飽和脂肪酸的甘油三酯，最優(yōu)選使用作為植物油的飽和脂肪酸甘油三酯的辛酸/癸酸甘油三酯。也可用作本發(fā)明油成分的脂肪酸單酸甘油酯包括具有18-20個碳原子的脂肪酸單酸甘油酯，特別是油酸單酸甘油酯。
在本發(fā)明的微乳預(yù)濃縮物中，每1重量份環(huán)孢菌素可使用1-10重量份，優(yōu)選2-6重量份的油成分。
優(yōu)選地，脂肪酸單酸甘油酯和脂肪酸酯如以1∶1到1∶2，如1∶1到1∶1.2的比例作為油成分存在。
可有可無的辛酸/癸酸甘油三酯也可以存在，如與亞油酸乙酯的比例為1∶0.1-0.2。
在用作本發(fā)明油成分的油混合物中，脂肪酸單酸甘油酯脂肪酸和伯醇的酯化物中鏈脂肪酸甘油三酯(當(dāng)存在時)的混合重量比通常在1∶0.1-5∶0.1-10的范圍內(nèi)，優(yōu)選在1∶0.1-3.0∶0.1-3.0的范圍內(nèi)。
本發(fā)明組合物中使用的第四種成分是表面活性劑。適用于本發(fā)明的表面活性劑包括HLB(親水親脂平衡值)值為8-17的任何可藥用的表面活性劑，它能夠穩(wěn)定地乳化包含含有環(huán)孢菌素的油成分的組合物的親脂部分和包含在水中的輔助表面活性劑的親水部分以形成穩(wěn)定的微乳。本發(fā)明優(yōu)選的表面活性劑的例子包括氫化植物油的聚氧乙烯產(chǎn)物，聚氧乙烯脫水山梨糖醇脂肪酸酯等，例如，NIKKOL HCO-50，NIKKOL HCO-40，NIKKOL HCO-60，吐溫20，吐溫21，吐溫40，吐溫60，吐溫80，吐溫81等。特別是優(yōu)選使用酸值低于1、皂化值約為48-56、羥基值約為45-55和pH值(5％)為4.5-7.0的聚氧乙烯(50)氫化蓖麻油(商標為NIKKOL HCO-50的商品化產(chǎn)品(NIKKOL化學(xué)有限公司))和聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單月桂酸酯(商標為吐溫20的商品化產(chǎn)品(ICI化學(xué)公司))。
表面活性劑可包括任何一種單一的上述表面活性劑或優(yōu)選地選自上述表面活性劑的兩種或多種表面活性劑的組合。在本發(fā)明的組合物中，每1份重量的環(huán)孢菌素按1到10重量份，優(yōu)選按2到8重量份使用表面活性劑。另外，在本發(fā)明組合物中使用兩種表面活性劑的混合物(即聚氧乙烯(50)氫化蓖麻油和聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單月桂酸酯)時，聚氧乙烯(50)氫化蓖麻油和聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單月桂酸酯的組成重量比例優(yōu)選在1∶0.1-5范圍內(nèi)，更優(yōu)選在1∶0.5-4的范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的組合物中，存在的四種成分優(yōu)選的重量比為環(huán)孢菌素∶第二種成分∶油成分∶表面活性劑＝1∶0.1-10∶1-10∶1-10，更優(yōu)選環(huán)孢菌素∶第二種成分∶油成分∶表面活性劑＝1∶0.5-8∶2-6∶2-8。
除了這種組合物外，下文實施例中描述的組合物可作為本發(fā)明更優(yōu)選的組合物。
為了口服使用，含有上述成分的本發(fā)明組合物可配制成軟膠囊制劑。因為本發(fā)明的軟膠囊制劑不使用作為低沸點揮發(fā)性溶劑的乙醇，該制劑是藥物穩(wěn)定的并可確立所需的改進，包括生物利用度的改進。然而，通過常規(guī)制備軟膠囊的方法按常規(guī)的軟膠囊來可重復(fù)地制備可能是困難的。當(dāng)用含有甘油作為增塑劑的常規(guī)膠囊殼配制軟膠囊時，所制得的軟膠囊具有某些缺陷，因為甘油滲入乳劑而改變?nèi)閯╊A(yù)濃縮物的乳化狀態(tài)并因此使環(huán)孢菌素的溶解性顯著降低而導(dǎo)致環(huán)孢菌素從乳劑中沉淀出來。
因此，本發(fā)明的另一方面是發(fā)現(xiàn)使用聚乙二醇和丙二醇而不是甘油作為增塑劑來配制膠囊殼時，可獲得長期穩(wěn)定的軟膠囊制劑。盡管可使用任何可液化的聚乙二醇作為增塑劑，但優(yōu)選使用分子量為200到600的聚乙二醇。
特別是，優(yōu)選使用聚乙二醇200。在本發(fā)明的軟膠囊殼中，相對于1重量份的制備膠囊殼所用明膠來說，優(yōu)選使用0.1-0.5重量份，更優(yōu)選0.1-0.4重量份，最優(yōu)選0.2-0.3重量份的聚乙二醇和丙二醇混合物。在作為增塑劑的聚乙二醇和丙二醇混合物中，相對于1重量份的聚乙二醇來說，優(yōu)選混合1-10重量份，更優(yōu)選3-8重量份，最優(yōu)選3-6重量份的丙二醇。
為了增加軟膠囊殼體從冷卻上的鼓移動性，本發(fā)明制備明膠膠囊殼體的方法采用空氣冷卻方法，代替了水冷卻方法。采用這種空氣冷卻方法，膠囊殼體不會過熱并且可易于從冷卻鼓上移下，同時維持約21℃的最佳溫度，包囊過程中高的密封程度確保了高的生產(chǎn)效率并因此而有效地進行該過程。
在制備本發(fā)明軟膠囊時，冷卻鼓中冷卻膠囊殼的合適的空氣體積流量優(yōu)選為5-15立方米/分鐘，最優(yōu)選約10立方米/分鐘。
將本發(fā)明組合物配制成軟膠囊時，如果需要，膠囊制劑可進一步含有可藥用添加劑，這些添加劑是軟膠囊制劑中常用的。這些添加劑包括例如卵磷脂、粘度調(diào)節(jié)劑、香料(如薄荷油等)、抗氧劑(如生育酚、維生素E等)、防腐劑(如對羥基苯甲酸酯)、著色劑、氨基酸等。
本發(fā)明的軟膠囊制劑可按下列步驟來制備均勻混合輔助表面活性劑、油成分和表面活性劑；將環(huán)孢菌素溶解在其中；同時攪拌并慢慢溫?zé)岬酱蠹s60℃的溫度；然后用明膠殼在有或沒有常用于制備軟膠囊的上述可藥用添加劑的情況下將所得濃縮物制成所需的合適的環(huán)孢菌素軟膠囊，所述明膠殼含有聚乙二醇和丙二醇作為增塑劑并在空氣冷卻方法制備軟膠囊的機器中。
本發(fā)明的組合物和制劑用于與已知環(huán)孢菌素相同的適應(yīng)癥并可按相同的方法和劑量范圍使用，如果需要可根據(jù)如下文所描述的動物(如狗)或人的標準生物利用度試驗調(diào)節(jié)劑量。
本文沒有具體描述的組合物中的任何賦形劑或成分都在文獻中有所描述，如H.P.Fiedler，Lexikon der Hilfsstoffe，Edito Cantor Verlag，Aulendorf，德國，第4版(1996)，藥物賦形劑手冊(Handbook ofPharmaceutical Excipients)，美國藥學(xué)會(華盛頓)和英國藥學(xué)會(倫敦)第二版，(1994)和韓國專利申請94-29208，申請日94年11月9日。
本發(fā)明將通過下列實施例更詳細地描述本發(fā)明。然而，應(yīng)當(dāng)知道這些實施例不以任何方式限制本發(fā)明。
實施例1成分含量(毫克/膠囊)環(huán)孢菌素25聚乙二醇200 45碳酸亞丙酯 25聚氧乙烯(50)氫化蓖麻油 35聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單月桂酸酯 85亞油酸乙酯 40辛酸/癸酸甘油三酯 5油酸單酸甘油酯 35總量295毫克實施例2成分含量(毫克/膠囊)環(huán)孢菌素25聚乙二醇200 70聚氧乙烯(50)氫化蓖麻油 35聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單月桂酸酯 85亞油酸乙酯 40辛酸/癸酸甘油三酯 5油酸單酸甘油酯 35總量295毫克實施例3成分含量(毫克/膠囊)環(huán)孢菌素25聚乙二醇200 100碳酸亞丙酯 50聚氧乙烯(50)氫化蓖麻油 35聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單月桂酸酯 85亞油酸乙酯 40辛酸/癸酸甘油三酯 5油酸單酸甘油酯 35總量375毫克實施例4成分含量(毫克/膠囊)環(huán)孢菌素25聚乙二醇200 45碳酸亞丙酯 25聚氧乙烯(50)氫化蓖麻油 50聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單月桂酸酯 100亞油酸乙酯 40辛酸/癸酸甘油三酯 5油酸單酸甘油酯 35總量325毫克實施例5成分含量(毫克/膠囊)環(huán)孢菌素25聚乙二醇200 45碳酸亞丙酯 25聚氧乙烯(50)氫化蓖麻油 35聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單月桂酸酯 85亞油酸乙酯 80辛酸/癸酸甘油三酯 10油酸單酸甘油酯 70總量375毫克實施例6
使用下列成分的膠囊殼從實施例1的組合物制備軟膠囊制劑，然后肉眼觀察因甘油的滲入所導(dǎo)致的特性和含量上的變化。
6.1(對照組)成分重量比明膠20純水16甘油96.2(試驗組)成分重量比明膠20純水16丙二醇 4聚乙二醇200 1下表1描述了觀察的結(jié)果。
表1膠囊殼中膠囊制劑含量的穩(wěn)定性膠囊組合物 剛制得后 1天后 2天后 5天后 10天后 30天后對照組 0 + + ++ +++ +++試驗組 0 0 0 0 0 0注0＝含量是穩(wěn)定的+＝乳化不良++＝略有沉淀+++＝沉淀從表1所述結(jié)果可以看出，使用含有甘油作為增塑劑的6.1對照組組合物制備的膠囊制劑引起某些問題，包括因甘油的滲入而導(dǎo)致形成沉淀，使用含有聚乙二醇和丙二醇作為增塑劑的6.2試驗組組合物制備的膠囊制劑卻保持穩(wěn)定的狀態(tài)。
實施例7使用實施例6中所述的6.2試驗組膠囊殼組合物并分別通過水冷卻法(水溫約為12℃)和空氣冷卻法(空氣體積流量約為10立方米/分鐘)制備實施例1組合物的軟膠囊制劑。
觀察并比較每種情況下膠囊殼體從冷卻鼓上移下的難易程度。下表2描述了觀察的結(jié)果。
表2膠囊殼體從冷卻鼓上移下的難易程度取決于冷卻方法(單位角度)殼組合物水冷卻法空氣冷卻法實施例6.2 大于100度(不容易移下) 小于50度(容易移下)由上表2結(jié)果可見，通過本發(fā)明空氣冷卻法制備的軟膠囊制劑從冷卻鼓上移下要比通過水冷卻法制備的制劑容易的多。具體來說，通常認為從冷卻鼓上移下明膠殼的角度約為或大于70時，移動性是差的，而從冷卻鼓上移下明膠殼的角度低于約70時，移動性是好的。通過水冷卻法制備的軟膠囊制劑從冷卻鼓上的移動性是不滿意的，制備時移動角甚至為100度或大于100度。
相反地，通過本發(fā)明的空氣冷卻法制備的軟膠囊制劑可容易地從冷卻鼓上移下，移動角為50度或更小，所以可提供好的密封度和生產(chǎn)效率。
實施例8比較用實施例6.2組合物的膠囊殼包囊實施例1組合物制備的制劑作為試驗制劑的生物利用度和含有乙醇的商業(yè)產(chǎn)品(SANDIMMUN膠囊)作為對照制劑的生物利用度來評估本發(fā)明環(huán)孢菌素制劑對環(huán)孢菌素生物利用度及其個體之間的差異的影響。
在該實驗中，均按每千克兔子300毫克環(huán)孢菌素的量給予試驗制劑和對照制劑。相同條件下在金屬籠中用常規(guī)兔固體飼料組合物統(tǒng)一飼養(yǎng)兔子4天或更長時間。給予口服制劑時，將兔子在受限制的鋼制籠中禁食48小時，其間允許兔子自由飲水。用凡士林包裹列文管以便減小摩擦后，將直徑為5毫米的列文管經(jīng)食管插入30厘米深度處。用50毫升水分別乳化試驗制劑和對照制劑，然后引入與列文管連接的注射器中。用二甲苯使兔子的耳靜脈膨脹，然后在試驗前和0.5、1、1.5、2、3、4、6、10和24小時后用肝素處理的一次性注射器抽取每只兔子的耳靜脈血。向所得血中加入0.5毫升飽和氯化鈉水溶液和2毫升乙醚，然后將混合物振搖5分鐘并以5000rpm的轉(zhuǎn)速離心10分鐘來分離上清液(乙醚層)。收集1毫升上清液，然后在活化硅膠sep-pakR(Waters)中展開。用5毫升正己烷洗滌展開的sep-pak并用2毫升甲醇洗脫。將洗脫液在氮氣中減壓蒸發(fā)至干。通過HPLC(高效液相色譜法)分析所得殘渣(HPLC的條件柱μ-BondapakRC18(Waters)，流動相CH3CN∶MeOH∶H2O-55∶∶15∶30，檢測波長210nm，流速1.0ml/分鐘，柱溫70℃，靈敏度0.01Aufs，注射體積100微升)。
下表3描述了由試驗制劑和對照制劑所獲得的結(jié)果表3本發(fā)明試驗制劑和商業(yè)產(chǎn)品(SANDIMMUNR)的生物利用度參數(shù) 對照制劑(A) 試驗制劑(B)P(B/A)M±S.D.(n＝6) CV％(S.D./M) M±S.D.(n＝6) CV％(S.D./M)AUC(μg.hr/ml) 13.5±10.074.0％57.0±17.029.8％ 4.1Cmax(μg.hr/ml) 0.8±0.3 37.5％6.0±1.5 25.0％ 7.5注AUC＝血液濃度曲線下的面積Cmax＝環(huán)孢菌素的最大血液濃度M±S.D.＝平均值±標準誤差CV＝標準誤差與平均值的比P(B/A)＝試驗制劑的平均值與對照制劑的平均值的比由上表可見，試驗制劑顯示增加的AUC和Cmax值，分別約為對照制劑的4倍或更高和7倍或更高。因此，可以斷定，與對照制劑相比，試驗制劑的生物利用度顯著增加。另外，本發(fā)明的試驗制劑顯示降低各試驗個體之間差異(CV％)的作用，與對照制劑相比，AUC值約低2倍或更高而Cmax約低1.5倍或更高。
因此，可以確定當(dāng)口服給予本發(fā)明的軟膠囊制劑時，顯示比含有乙醇的現(xiàn)有商品(SANDMMUNR膠囊)的環(huán)孢菌素制劑生物利用度高約4倍并且減小了環(huán)孢菌素生物利用度個體之間的差異，同時在長的貯存期中保持穩(wěn)定沒有任何變化。因此，本發(fā)明的軟膠囊制劑顯然在制備環(huán)孢菌素軟膠囊領(lǐng)域中有明顯改進。
實施例9制備含有下列成分的軟凝膠I II環(huán)孢菌素25mg 100mg聚乙二醇200 45mg 180mg碳酸亞丙酯 25mg 100mg聚氧乙烯50-氫化蓖麻油 40mg 160mg多乙氧基醚2085mg 340mg亞油酸乙酯 40mg 160mg單油酸甘油酯40mg 160mg維生素E 1mg4mg總量301mg 1204mg
權(quán)利要求
1.一種含有環(huán)孢菌素的制劑，它包含一種組合物，該組合物含有(1)環(huán)孢菌素作為活性組分；(2)聚乙二醇或碳酸亞丙酯或其混合物；(3)脂肪酸和伯醇的酯化物和脂肪酸單酸甘油酯的混合物作為油成分，和(4)HLB(親水親脂平衡值)為8-17的表面活性劑。
2.權(quán)利要求1的含有環(huán)孢菌素的制劑，其中所述環(huán)孢菌素為環(huán)孢菌素A并且在含有聚乙二醇和丙二醇作為增塑劑的明膠殼中。
3.權(quán)利要求1或2的含有環(huán)孢菌素的制劑，其中所述聚乙二醇為分子量為200到600的聚乙二醇。
4.權(quán)利要求1、2或3的含有環(huán)孢菌素的制劑，其中所述聚乙二醇是分子量為200的聚乙二醇。
5.權(quán)利要求1、2、3或4的含有環(huán)孢菌素的制劑，其中成分(2)是以1∶0.1-5比例混合的聚乙二醇和碳酸亞丙酯的混合物。
6.權(quán)利要求5的含有環(huán)孢菌素的制劑，其中成分(2)是以1∶0.2-2比例混合的聚乙二醇和碳酸亞丙酯的混合物。
7.上述任一權(quán)利要求的含有環(huán)孢菌素的制劑，其中油混合物中的所述脂肪酸和伯醇的酯化物為亞油酸乙酯。
8.上述任一權(quán)利要求的含有環(huán)孢菌素的制劑，在油混合物中還含有中鏈脂肪酸甘油三酯，它是可有可無的辛酸/癸酸甘油三酯。
9.上述任一權(quán)利要求的含有環(huán)孢菌素的制劑，其中所述脂肪酸單酸甘油酯是油酸單酸甘油酯。
10.上述任一權(quán)利要求的含有環(huán)孢菌素的制劑，其中油混合物中脂肪酸單酸甘油酯和脂肪酸和伯醇的酯化物的混合重量比是1∶0.1-5。
11.上述任一權(quán)利要求的含有環(huán)孢菌素的制劑，其中所述表面活性劑是氫化植物油的聚氧乙烯產(chǎn)物或聚氧乙烯-脫水山梨醇脂肪酸酯。
12.權(quán)利要求11的含有環(huán)孢菌素的軟膠囊制劑，其中所述表面活性劑是由1∶0.1-5比例的聚氧乙烯(50)氫化蓖麻油聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單月桂酸酯組成的混合表面活性劑。
13.上述任一權(quán)利要求的含有環(huán)孢菌素的軟膠囊制劑，其中所述環(huán)孢菌素、所述成分(2)、所述油成分和所述表面活性劑的重量比為1∶0.1-10∶1-10∶1-10。
14.權(quán)利要求13的含有環(huán)孢菌素的制劑，其中所述環(huán)孢菌素、所述成分(2)、所述油成分和所述表面活性劑的重量比為1∶0.5-8∶2-6∶2-8。
15.上述任一權(quán)利要求的含有環(huán)孢菌素的制劑，其中相對于1重量份的明膠來說，使用0.1-0.5重量份的聚乙二醇和丙二醇的混合物。
16.上述任一權(quán)利要求的含有環(huán)孢菌素的制劑，其中在增塑劑中，相對于1重量份的聚乙二醇來說，以1-10重量份的比例混合丙二醇。
17.一種制備權(quán)利要求1-16任一含有環(huán)孢菌素制劑的方法，它包括均勻混合成分(2)、油成分和表面活性劑；將環(huán)孢菌素溶解在其中；同時攪拌并慢慢溫?zé)岬酱蠹s60℃的溫度；如果需要，用明膠殼在軟膠囊制備機中將所得濃縮物包囊，然后在冷卻鼓中通過空氣冷卻法冷卻所得軟膠囊，所述明膠殼含有聚乙二醇和丙二醇作為增塑劑。
18.權(quán)利要求17的方法，其中以空氣體積流速5到15立方米/分鐘進行空氣冷卻法的冷卻。
19.一種環(huán)孢菌素制劑，它含有一種組合物，所述組合物包含(1)作為活性組分的環(huán)孢菌素；和(2)碳酸亞丙酯。
20.權(quán)利要求19的組合物，還含有一種或多種權(quán)利要求1到16任一項中所定義的成分。
全文摘要
本發(fā)明涉及含有環(huán)孢菌素的軟膠囊制劑,它在含有聚乙二醇和丙二醇作為增塑劑的明膠殼中含有一種組合物,所述組合物包含環(huán)孢菌素作為活性組分;親水物質(zhì)聚乙二醇或非親水物質(zhì)碳酸亞丙酯或其混合物;脂肪酸和伯醇的酯化物、中鏈脂肪酸甘油三酯(如果需要)和脂肪酸單酸甘油酯的混合物作為油成分;和HLB(親水親脂平衡值)值為8—17的表面活性劑。
文檔編號A61KGK1207044SQ97191060
公開日1999年2月3日 申請日期1997年6月19日 優(yōu)先權(quán)日1996年6月19日
發(fā)明者禹鐘守 申請人:諾瓦提斯公司