專利名稱：小檗胺用作預防及治療白內障病的藥物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及小檗胺的一種新的藥物用途。更具體地說，本發(fā)明涉及到從植物中藥三棵針中提取的單體化合物用于預防及治療白內障病。
小檗胺(Berbamine)是存在于小檗屬植物中的一種雙芐基異喹啉類生物堿。小檗屬植物產于我國，約200余種，土名三棵針。其根、根皮和莖皮中含有多種生物堿，其中最主要的為小檗堿(Berberine)，即商品“黃連素”。其他較主要的生物堿即為小檗胺(Berbamine)、還有巴馬亭等。
已知小檗胺的醫(yī)療作用主要有升高白細胞。用于各種原因引起的白細胞減少癥，在癌癥患者進行放療、化療中，同時還能防止白細胞減少。
上述作用見(88)陜衛(wèi)藥準字010號《關于同意生產“鹽酸小檗胺”等一批藥品的批復》。另外該藥具有抗快速心率失常、抗心肌缺血、減低心肌耗氧量適合于高血壓伴冠心病心絞痛患者。
廣義地講，任何因素造成晶體部分或完全失去透明性，即稱之為白內障。白內障的形成是多種因素，綜合作用所致，而遠非單因素，線性發(fā)展結果。在眾多的白內障中，糖性白內障研究的最多，對其機理也了解最深入的一種。其中滲透應力學說是目前流行最廣的學說，另一種為脂類的氧化學說。
1985年衛(wèi)生部組織全國盲及低視力的流行病學調查雙眼盲的患病率為0.43％，致盲的首位病因為白內障(41.06％)。臨床治療以手術摘除及人工晶體植入為主。1987年，我國年手術10萬例左右，而因白內障致盲患者約400-500萬人。在我國隨著工業(yè)的迅速發(fā)展，中毒性白內障時有發(fā)生，另外，隨人均壽命的增長，老年性白內障的發(fā)生也日趨突出。目前，臨床上使用的抗白內障藥物很少。國產只有白內停為衛(wèi)生部指定使用藥物且療效不肯定。其余數種均為進口藥，價格昂貴，療效不確定。目前，國內抗白內障藥物的研究中，以醛糖還原酶抑制劑一類抗糖性白內障的為主，其中以胡天圣等研究的sorbinil為代表Tian-sheng Hu，etal(1983)Reversal of galactose cataract with sorbinilin rats.Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.24640-644.國外目前大部分為化學合成藥，毒付作用大，療效久佳。如美國使用的BHA、BHT，現已淘汰。
篩選一種原料藥價格便宜，加工簡便，預防及治療白內障病有效的中草藥提取物是本發(fā)明的目的。
我們在眾多藥物的篩選中，首選了小檗胺，它是強的抗氧化劑及自由基清除劑，具有較強的抗DNA損傷功能。
本發(fā)明的目的涉及提供了一種新的預防及治療白內障病的藥物用途，該藥物是從植物中藥三棵針中提取的單體化合物小檗胺，其分子式為C17H40N2O6，結構式為
本發(fā)明再一目的涉及的是含有小檗胺的藥物組合物，該藥物組合物對白內障病的預防及治療作用。根據本發(fā)明，該藥物組合物中可以加有各種藥用賦形劑，添加劑及載體。
根據本發(fā)明，將小檗胺藥用本領域專業(yè)技術人員熟知的方法制備成滴眼劑型，口服片劑、膠囊及沖劑，針劑劑型等。
根據本發(fā)明，其滴眼劑劑型的滲透壓最好等于生理鹽水，PH在7.2-7.4，劑型中小檗胺的濃度在0.4-1.4％(重量/體積)之間。
本發(fā)明利用中草藥提純的單體化合物小檗胺制成制劑，在兩種動物模型即鏈脲佐菌素(STZ)型和半乳糖型，經兩種給藥途徑(局部點眼、腹脛注射)進行白內障的預防和治療實驗。
結果顯示1.對早中期糖性白內障的發(fā)生，發(fā)展具有顯著的預防作用，能推遲晶體出現周邊空泡的時間。2.對早中期白內障有顯著的治療作用。3.首次發(fā)現DNA損傷在糖性白內障中的存在，此損傷可被小檗胺明顯抑制并修復?？赏脵z測晶體上皮細胞DNA SSB的受抑程度，做抗障藥物藥效評估的檢測指標。
實施例一、白內障動物模型的誘發(fā)1.鏈脲佐菌素(streptozotocin STZ)型2％STZ溶液腹腔注射，劑量70mg/kg b.wt。挑選體重120-130g之間雄性Wistar大鼠，禁食過夜，注射STZ后三天采血，測血糖，血糖濃度500-900mg/dL間的動物，用于實驗。
2.半乳糖型雄性Wistar大鼠，體重80-100mg，飼以含50％半乳糖的飼料，飲普通水。
二、小檗胺制劑的形成將藥物制成液體制劑，滲透壓與生理鹽水相同，PH在7.2-7.4之間。
三、給藥1.腹腔注射法①STZ組給藥組I劑量小檗胺3.4mg.kg/b.wt(1/17.75mg LD50)II劑量小檗胺1.74mg/kg b.wt每日腹腔注射一次對照組生理鹽水代替小檗胺每日腹腔注射一次②半乳糖組給藥組小檗胺劑量同STZ組，每日腹腔注射一次，自飼料喂50％半乳糖時開始注射。
對照組以50％半乳糖條件飼養(yǎng)，不做任何處理2.滴眼劑滴眼法預防實驗組糖尿病大鼠隨機分為三組，分別用0.04％，0.2％及1％濃度的小檗胺滴眼劑處理雙眼，每日滴三次。滴眼處理從注射SIZ后24/小時開始。
治療實驗組大鼠注射STZ后每周用裂隙燈鏡檢，待白內障發(fā)展至III期時，隨機分為二組。一組白內障對照組。另一組1％滴眼劑處理雙眼，每日三次糖尿病對照組用生理鹽水替代小檗胺滴眼劑處理動物雙眼正常對照組正常大鼠，不做任何處理四、晶體混濁的檢查與分級動物注射STZ后，每周用裂隙燈檢查一次。50％半乳糖飼料組每隔一天裂隙燈檢查一次，記錄晶體出現混濁的時間和發(fā)展情況。
晶體混濁程度參照Mlitsuyoshi Azuma等人的標準分級I、無混濁晶體透明清亮II、輕度混濁晶體周邊出現空泡III、中度混濁晶體周邊空泡向中心擴展，出現霧狀混濁IV、高度混濁空泡擴展到核區(qū)，核區(qū)霧狀混濁加重V、核混濁成熟白內障晶體核及周邊部均出現混濁。
五、單細胞電泳法(Single cell Gel Assay SCG)檢測晶體上皮細胞DNA單鏈斷裂(SSB)，參照Singh等人的方法修改后進行。
六、有關小檗胺預防治療白內障的結果1.小檗胺滴眼劑預防和治療糖性白內障的結果預防實驗組小檗胺對糖性白內障的發(fā)生、發(fā)展速度具有非常顯著的延緩作用，延緩作用隨藥物濃度增加而加強?；?％小檗胺劑量組效果最好，第12周裂隙燈鏡檢IV及V期(核混濁)出現。
治療實驗組注射STZ后第12周晶狀體混濁度在IV期、V期的大鼠，糖尿病對照組占總數的90％，而同一時間內1％小檗胺治療組中僅占60％，表明小檗胺滴眼劑治療早期糖性白內障具有顯著效果。
2.腹腔注射小檗胺對STZ型糖生白內障的預防作用各組60％以上出現II期及II期以上白內障的時間，糖尿病組第四周達81.25％；腹腔注射小檗胺3.48mg/kg.bwl(1/17.75mg LD50)組第六周達到70％，另一組1.74mg/kg.bwt(1/31.51LD50)組第六周達到80％。即給藥使空泡出現推遲兩周時間。
3.腹腔注射小檗胺對半乳糖型糖性白內障的預防作用飼喂50％半乳糖飼料的Wistar大鼠在第三天晶體均出現周邊空泡，到第15天出現核混濁，20天晶體全部混濁。給藥組的變化最大特點是，兩種濃度小檗胺(3.48mg/kg.b.wt和1.74mg/kg.b.wt)腹腔注射后，均能抑制早期晶體空泡的出現，比半乳糖組推遲4天，即第7天晶體出現周邊空泡。
4.DNA損傷與糖性白內障發(fā)生、發(fā)展的關系本實驗首次發(fā)現在糖性白內障中DNA損傷的存在。Wistar大鼠在腹腔注射STZ后3-4天開始出現有顯著意義的DNA單鏈斷裂(SSB)，至第12周SSB始終存在于混濁晶體中。
5.小檗胺對糖性白內障晶體上皮細胞DNA損傷的抑制作用Wistar大鼠在腹腔注射STZ后12小時，再腹腔注射1/20，1/40半數致死量(LD50)的小檗胺，七天后才出現有顯著意義的SSB，其中1/20LD50組第5周白內障形成率明顯低于STZ組，同時SSB也恢復到對照水平；而1/40LD50組抑制SSB程度略遜于1/20LD)50組，但較之STZ組的SSB要輕得多。提示用檢測晶體上皮細胞DNASSB受抑程度作抗白內障藥物藥效篩選的評估的短期實驗。
權利要求
1.一種從植物中藥三棵針中提取的單體化合物小檗胺，其分子式為C17H40N2O6，結構式
其特征是用于制備成預防及治療白內障病的藥物中的用途。
2.一種用于預防及治療白內障病的藥物組合物，其特征包括作為活性成份的權利要求1的小檗胺，及藥用賦形劑或載體。
3.根據權利要求2所述的預防、治療白內障病的藥物組合物，其特征是制成的藥物組合物劑型可以是滴眼劑，口服片劑，膠囊，沖劑劑型。
4.根據權利要求3所述的藥物制成的滴眼劑型，其特征是滲透壓最好等于生理鹽水。
5.根據權利要求3所述的藥物制成的滴眼劑型，其特征是pH值在7.2-7.4之間。
6.根據權利要求3所述的藥物制成的滴眼劑型，其特征是小檗胺的濃度在0.4-1.4％(重量/體積)之間。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種藥物預防及治療白內障病的藥物新用途,及制成用于預防及治療白內障病的藥物組合物,該藥物是從植物中藥三棵針中提取的單體化合物小檗胺。用小檗胺做成的滴眼劑型其滲透壓最好等于生理鹽水,pH值為7.2—7.4,小檗胺的濃度在0.4—1.4%(重量/體積)之間。
文檔編號A61K31/47GK1181932SQ9612060
公開日1998年5月20日 申請日期1996年11月7日 優(yōu)先權日1996年11月7日
發(fā)明者何浩, 張昌穎 申請人:何浩