專利名稱：增強(qiáng)化療療效及治療實(shí)體瘤的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑和一種化療劑的組合在化療增效及治療實(shí)體瘤方面的應(yīng)用。
用于實(shí)體瘤的癌癥化療經(jīng)典方法著重使用細(xì)胞毒性藥物，這種藥物是針對(duì)基本代謝過程(抗代謝物)或干擾多種代謝過程的一般毒素(烷化劑)?？股仡愃幬?阿霉素、米托蒽醌、絲裂霉素C等)針對(duì)于核酸的復(fù)制或整合，因此，一般來說，對(duì)細(xì)胞有毒性。類似地，微管活性化合物(taxanes、長(zhǎng)春堿類)針對(duì)細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)成分，也表現(xiàn)出對(duì)細(xì)胞的毒性。
近年來的趨勢(shì)是組合具有不同作用機(jī)理的藥物，這提高了一些實(shí)體瘤的生物反應(yīng)率和生存率，包括乳癌、前列腺癌和小細(xì)胞肺癌。然而，大多數(shù)實(shí)體瘤顯示了低的生物反應(yīng)率，對(duì)生存無明顯影。這類癌包括非小細(xì)胞肺癌、頭頸癌、胃癌、胰腺癌、子宮頸癌、黑色素瘤、腎上腺皮質(zhì)瘤及軟組織肉瘤等。特別是對(duì)于這些實(shí)體瘤及一般的實(shí)體瘤，需要有新的治療方法。
美國專利5,312,831(及EP 652228)公開了誘導(dǎo)細(xì)胞因子產(chǎn)生的氨基甲酸乙酯和尿素類藥物，用于癌的化療、放療、骨髓移植或感染后恢復(fù)嗜中性粒細(xì)胞，用治療癌癥、AIDS、再生障礙性貧血、骨髓發(fā)育不良綜合征、感染性疾病，以及用于增強(qiáng)免疫反應(yīng)。
美國專利4,666,890公開了一種合成的三肽，已報(bào)道有免疫調(diào)節(jié)劑的作用，用作抗腫瘤劑優(yōu)于作為化療佐劑。所報(bào)道的細(xì)胞壁成分及其合成類似物均為將經(jīng)q-連接于賴氨酸(Lys)或二氨基庚二酸(A2pm)的D-谷氨酸(D-Glu)部分與其它主肽鏈或側(cè)面相接兩端的脂?；喜橐惑w的肽。
治療的定義是對(duì)所治療的實(shí)體瘤提供緩解病情的治療或抑制其生長(zhǎng)，或根治。
為達(dá)到本發(fā)明所定義范圍的目的，生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑是可激活體內(nèi)天然免疫系統(tǒng)的物質(zhì)，典型地包括細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑和免疫佐劑。細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑是誘導(dǎo)細(xì)胞因子產(chǎn)生的物質(zhì)，包括細(xì)胞因子如IL-1，TNF；天然產(chǎn)物，如胞壁酰二肽、脂多糖類和β-葡聚糖；合成的細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑，如公開在美國專利5,312,831和4,666,890中的物質(zhì)，此公開報(bào)道已被文獻(xiàn)引用作為參考。細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑是本發(fā)明優(yōu)選的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑。
特別優(yōu)選的細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑是公開在美國專利5,312,831(EP652228)的式I，結(jié)構(gòu)為 其中，R1選自氫、取代或未取代(C1-C20)烷基、取代或未取代環(huán)烷基、取代或未取代環(huán)烷基烷基、乙烯基、乙炔基、取代或未取代氨基、取代或未取代酰氨基、取代或未取代芳基、取代或未取代芳烷基、取代或未取代芳氧基、取代或未取代烷氧基芳基、取代或未取代烷氧芳烷基及取代或未取代的含1-4個(gè)雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基，雜原子選自氮、硫和氧原子；Ra和R3分別選自氫、取代或未取代的(C1-C6)烷基、取代或未取代的烷氧基烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的環(huán)烷基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的烷氧芳烷基、乙烯基、乙炔基及取代或未取代的含1-4個(gè)雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基，雜原子選自氮、硫和氧原子，對(duì)于R3，在所述雜環(huán)中雜原子不直接與-CH-X-部分的-CH-基鍵合；R2，Rb和Rc分別選自羧基或被護(hù)羧基、羧基或被護(hù)羧基低級(jí)烷基和羧基酰胺；X是氧或氮；R4是H或氨基保護(hù)基；其中，上述取代的烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、氨基、酰氨基、芳基、芳烷基、芳氧基、烷氧芳基、烷氧芳烷基和雜環(huán)基的取代基選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、氨基、單-或二-低級(jí)烷氨基、芳氨基、芳烷氨基、羧基、甲?；?、低級(jí)烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、低級(jí)烷基硫代基、芳基硫代基、芳烷基硫代基、芳基亞硫?；?、芳基亞硫?；?、芳烷基亞硫?；⒌图?jí)烷基磺?；⒎蓟酋；⒎纪榛酋；昂?-4個(gè)雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基，雜原子選自氮、硫和氧；或其藥物可接受的鹽。
取代基的定義及式I化合物的制備方法見美國專利5,312,831和EP652228。式I細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑可能含一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱碳原子；在此情況下，式I化合物包括各種非對(duì)映體、外消旋體及其各種R和S異構(gòu)體(entantiomers)。
上述化合物各種具體定義及這些定義的實(shí)例如下所示(摘自EP652228B)a)(C1-C20)烷基可以是一種具有1-20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈低級(jí)烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基、異戊基、己基、異己基等。b)環(huán)烷基可以是一種具有3-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基，如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。c)環(huán)烷基烷基可以是一種具有4-12個(gè)碳原子的環(huán)烷基烷基，如環(huán)丙基甲基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基甲基、環(huán)己基甲基、1-環(huán)丙基乙基、2-環(huán)丙基乙基、2-環(huán)丙基乙基、1-環(huán)丁基乙基、2-環(huán)丁基乙基、1-環(huán)戊基乙基、2-環(huán)戊基乙基、1-環(huán)己基乙基、3-環(huán)己基丙基、3-環(huán)戊基丙基、4-環(huán)己基丁基、4-環(huán)戊基丁基、4-環(huán)戊基戊基或4-戊基環(huán)己基。d)酰氨基可以是?；糠謴囊环N酸，如有機(jī)羧酸或碳酸衍生的酰氨基。每個(gè)酰氨基分子中包括脂肪基、芳基和/或雜環(huán)基。這些具有?；闹；鶑闹舅嶂醒苌?，包括烷?；?如甲?；⒁阴；?、丙?；?、丁?；?、異丁?；?、戊酰基、異戊?；?、新戊?；⒓乎；ⅵ?乙基-己?；⒏；?、月桂?；?、硬脂?；?、二十二烷酰基)，一組化學(xué)式CH3(CH2)31CO，[CH3(CH2)21]2CHCO，[CH3(CH2)15]2CHCO，CH3(CH2)41CO等)；低級(jí)烷氧基羰基(如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、丁氧羰基、叔丁氧羰基、叔戊氧羰基等)等。酰基部分也可以是芳?；?，?；梢环N取代或未取代芳基的酸衍生而來，其中，芳基可以包括苯基、甲苯基、二甲苯基、萘基等。其適當(dāng)?shù)睦尤缦路减；?如苯?；⒓妆锦；?、二甲苯?；⑤刘；?、鄰苯二甲?；?；芳烷氧基羰基(如芐氧羰基、二苯基甲氧羰基、三苯基甲氧羰基、α-萘基-甲氧羰基等)等。?；糠忠部梢允请s環(huán)酰基，其中?；梢环N具有雜環(huán)的酸衍生而來，包括雜環(huán)羰基，其中雜環(huán)部分是至少含有一個(gè)雜原子的5-6員雜環(huán)，其含有至少一個(gè)至四個(gè)雜原子，雜原子選自氮、氧和硫(如噻吩酰基、呋喃甲?；?、吡咯羰基、5-氧-2-吡咯烷羰基、煙?；?等。e)芳基可以是一種具有6-15個(gè)碳原子的芳基，如苯基、聯(lián)苯基、1-萘基或2-萘基。f)芳烷基可以是一種具有7-15個(gè)碳原子的芳烷基，如芐基、1-萘基甲基、2-萘基甲基、5，6，7，8-四氫-1-萘基、5，6，7，8-四氫-2-萘基、苯乙基、3-苯基丙基或4-苯基丁基。g)芳氧基可以是一種具有6-15個(gè)碳原子的芳氧基，如苯氧基、聯(lián)苯氧基、1-萘氧基、或2-萘氧基。h)烷氧芳基或烷氧基芳烷基可以是一種具有6-21個(gè)碳原子的烷氧芳基或烷氧基芳烷基，如苯?；?，或烷氧基苯甲基。i)含1-4個(gè)雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基，雜原子選自氮、硫和氧原子，可以是一種具有4-15個(gè)碳原子的雜環(huán)基，如吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧唑基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、異噁唑基、噁唑基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、喹啉基、異喹啉基、2，3-二氮雜萘基、naphthidinyl基、喹喔啉基、喹唑啉基、1，4-苯并二噁烷基、1，3-苯并二噁烷基、1，2，3-三唑基、1，3，4-三唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，3-噻二唑基、四唑基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、2-咪唑基、嗎啉代基、piperizine N-氧化物基、哌嗪N-氧化物基、嗎啉N-氧化物基、低級(jí)烷基嗎啉代基如N-甲基嗎啉代基、N-乙基嗎啉代基或N-丙基嗎啉代基、哌嗪基、哌啶子基、哌啶基、硫代嗎啉代基或硫代嗎啉基。
前述的取代基(a)-(i)可以是鹵原子，如氯原子、氟原子或溴原子、羥基；低級(jí)烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基；低級(jí)烷氧基，如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基；芳氧基，如苯氧基、1-萘氧基或2-萘氧基；芳烷氧基，如芐氧基、苯乙氧基、1-萘基甲氧基或2-萘基甲氧基；氨基；單-或二-低級(jí)烷氨基，如甲氨基、乙氨基、丙氨基、異丙氨基、丁氨基、仲丁氨基、異丁氨基、叔丁氨基、二甲氨基或二乙氨基；芳氨基，如苯氨基、1-萘氨基或2-萘氨基；芳烷氨基，如芐氨基、苯乙氨基、1-萘基甲氨基或2-萘基甲氨基；羧基；甲?；?；低級(jí)烷氧基羰基，如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基，異丙氧羰基、丁氧羰基、仲丁氧羰基，異丁氧羰基或叔丁氧羰基；芳氧基羰基，如苯氧羰基、1-萘氧羰基或2-萘氧羰基；芳烷氧基羰基，如芐氧羰基、苯乙氧羰基、1-萘基甲氧羰基或2-萘基甲氧羰基；巰基；低級(jí)烷基硫基如甲硫基、乙硫基、丙硫基、異丙硫基、丁硫基、仲丁硫基，異丁硫基或叔丁硫基；芳硫基如苯硫基、1-萘硫基或2-萘硫基；芳烷硫基如芐硫基、苯乙硫基、1-萘基甲硫基或2-萘基甲硫基；芳基亞硫酰基，如苯基亞硫酰基、1-萘基亞硫?；?-萘基甲硫?；?；芳烷基亞硫?；缙S基亞硫?；?、苯乙基亞硫酰基、1-萘基甲基亞硫酰基或2-萘基甲基亞硫?；?；低級(jí)烷基磺酰基，如甲磺?；?、乙基磺酰基、丙基磺酰基，異丙基磺?；?、丁基磺?；?，異丁基磺?；?、仲丁基磺?；蚴宥』酋；?；芳基磺酰基，如苯基磺?；?、1-萘磺酰基或2-萘磺?；?；芳烷基磺酰基，如芐基磺?；?、苯乙基磺?；?-萘基甲基磺?；?-萘基甲基磺?；?；或有4-15個(gè)碳原子和1-4雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，雜原子選自氧、氮和硫，如吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、異噁唑基、噁唑基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、喹啉基、異喹啉基、2，3-二氮雜萘基、naphthidinyl基、喹喔啉基、喹唑啉基、1，4-苯并二噁烷基、1，3-苯并二噁烷基、1，2，3-三唑基、1，3，4-三唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，3-噻二唑基、四唑基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、2-咪唑基、嗎啉基、嗎啉代基、嗎啉N-氧化物基、低級(jí)烷基嗎啉基如N-甲基嗎啉代基，及N-乙基嗎啉代基或N-丙基嗎啉代基、哌嗪基、哌啶子基、哌啶基、硫代嗎啉代基或硫代嗎啉基。
此處所用環(huán)低級(jí)烷基”指C1-C6烷基。
被護(hù)羧基或被護(hù)羧基低級(jí)烷基的保護(hù)基包括本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)用于肽和氨基酸化學(xué)中的常用羧基保護(hù)基，如T.Green“Protecting Groups in Organic Synthesis”，J Wiley和Sons，1981.中提到的保護(hù)基。它們包括甲硅烷酯、脂烴酯和芳酯如三甲基甲硅烷基酯、叔丁基二甲基甲硅烷基酯、乙酰酯、苯酰酯等。
被護(hù)氨基的保護(hù)基包括本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)用于肽和氨基酸化學(xué)中的常用氨基保護(hù)基，如T.Green，supra 218-287頁中提到的保護(hù)基。適宜保護(hù)基的選擇是去除保護(hù)基的條件，要與該化合物的其它結(jié)構(gòu)特點(diǎn)協(xié)調(diào)一致。合適的保護(hù)基包括酰基，如叔丁氧羰基或芐氧羰基等。
相對(duì)于上述一般性描述，優(yōu)選的式I化合物是其中R1選自取代或未取代(C1-C20)烷基、取代或未取代環(huán)烷基、取代或未取代環(huán)烷基烷基、取代或未取代芳基，取代或未取代芳烷基、取代或未取代芳氧基，取代或未取代烷氧基芳基，及取代或未取代的烷氧基芳烷基。其中，前述芳基選自取代或未取代的苯基；Ra和R3分別選自氫、取代或未取代的(C1-C6)烷基；R2，Rb和Rc分別選自羧基或被護(hù)羧基、羧基或被護(hù)羧基低級(jí)烷基和羧氨基化物；X是氧或氮；R4是H或氨基保護(hù)基。
此外，本發(fā)明中最優(yōu)選的式I化合物是其中有以下基團(tuán)的那些式I化合物R1選自(C4-C14)烷基、環(huán)烷基、(C2-C8)烷基取代的環(huán)烷基、苯基、芐基、(C4-C8)烷基苯基和(C1-C6)烷基或烷氧基-苯甲基；Ra和R3獨(dú)立地選自氫和(C1-C6)烷基；R2，Rb和Rc獨(dú)立地選自羧基或被護(hù)羧基、羧基或被護(hù)羧基低級(jí)烷基和羧氨基化物；X是氧或氮；R4是H或氨基保護(hù)基。
特別優(yōu)選的式I化合物是其中有以下基團(tuán)的那些式I化合物R1選自正己基、4-正戊基環(huán)己基；
R1和R3獨(dú)立地選自氫或甲基；R2，Rb和Rc是羧基；X是氧或氮；R4是H。
特別優(yōu)選那些具有如下D-異蘇氨酸構(gòu)型的式I化合物 其中，R3是甲基，R1和R2定義如前。
還特別優(yōu)選在分子的二氨基庚二基丙胺酸部分具有如下立體化學(xué)結(jié)構(gòu)的那些化合物 其中，R1是甲基，Rb，Rc和R4如前述定義。
在立體化學(xué)結(jié)構(gòu)方面，下列式I化合物是最優(yōu)選的 其中，R3和R1是甲基，X是氧，Rb，Rc，R1，R2，R4定義如前。
特別優(yōu)選的細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑是[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠丙氨酸或其藥物可接受的鹽(式I化合物)，該化合物已公開在美國專利5,312,831實(shí)施例28中。
美國專利5,312,831公開了幾項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)藥理學(xué)試驗(yàn)程序，該試驗(yàn)程序可使本領(lǐng)域的技術(shù)人員評(píng)價(jià)出化合物是否為生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑。如16-17欄的試驗(yàn)程序評(píng)價(jià)了IL-6，CSF和G-CSF產(chǎn)生的誘導(dǎo)作用。
優(yōu)選的化療劑是微管劑或巨噬細(xì)胞活化劑。微管活性化合物是使微管不穩(wěn)定的化合物，或通過防止微管蛋白的聚合(如長(zhǎng)春新堿)或通過防止微管蛋白的解聚(如taxanes)使微管不穩(wěn)定。微管的裝配與解配是一個(gè)動(dòng)態(tài)過程，受到微管蛋白結(jié)合蛋白和蛋白磷酸化的影響(激酶)。微管活性化合物包括taxanes類，如紫杉醇或docetaxel、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、維諾利賓等。巨噬細(xì)胞活化劑是可激活巨噬細(xì)胞活性的化合物，如阿霉素、doxirubicin和類似的蒽二酮類及蒽環(huán)類藥、順鉑，卡鉑、絲裂霉素C、博來霉素等。優(yōu)選的化療劑是紫杉醇或卡鉑，或兩者的組合物。本發(fā)明的微管劑或巨噬細(xì)胞活化劑或者可從商業(yè)途徑得到，或者可用已出版的文獻(xiàn)中的標(biāo)準(zhǔn)制備方法制備。
生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑對(duì)化療劑的增效作用已在體內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)藥理學(xué)試驗(yàn)程序中進(jìn)行了評(píng)價(jià)，在該程序中將人非小細(xì)胞型肺癌(NSCLC)細(xì)胞系移入有免疫缺陷的裸鼠脅腹部。以下簡(jiǎn)要介紹所用試驗(yàn)程序及所獲結(jié)果。[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠-丙氨酸用作有代表性的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑和紫杉醇用作有代表性的化療劑。
從Charles Rive實(shí)驗(yàn)室得到6-8周齡Balb-c nu/nu雌性小鼠，實(shí)驗(yàn)用8-10周齡小鼠。人非小細(xì)胞型肺癌(NSCLC)細(xì)胞系H-157來自美國組織培養(yǎng)物保藏所(ATCC)(Bethesda，MD)。細(xì)胞用有10％胎牛血清的RPMI培養(yǎng)基培養(yǎng)。
小鼠經(jīng)皮下注射7.5×106H-157 NSCLC瘤細(xì)胞。瘤生長(zhǎng)到80-150mg大時(shí)，用游標(biāo)卡尺測(cè)定瘤的長(zhǎng)度(l)與寬度(w)。用公式l×w2/2計(jì)算瘤的體積。以mm3計(jì)的體積可直接轉(zhuǎn)為假定的單位密度毫克。注射7日后，將小鼠隨機(jī)(注射日為第0日)分為10組，平均瘤重量為100mg。治療組在第0日注射紫杉醇(30mg/kg)以及在第1日和第8日注射藥物溶劑(vehicle)或[R(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠-丙氨酸(100μg/kg)。
在第7和14日，接受紫杉醇加[R(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠-丙氨酸組的動(dòng)物，其瘤生長(zhǎng)速度比起未經(jīng)用藥的對(duì)照組或僅接受紫杉醇治療的組有明顯抑制作用。在第7日測(cè)得單獨(dú)用紫杉醇組抑制瘤生長(zhǎng)情況(經(jīng)student’s t檢驗(yàn)，p≤0.05)，在用紫杉醇一天后加用[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨酰基]-丙氨酸，抑制程度明顯增強(qiáng)。在第14日，單獨(dú)用紫杉醇組抑制程度與對(duì)照組無顯著差異；而在第0日接受紫杉醇和在第1和第8日注射[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨酰基]-丙氨酸的組，比起未作治療的對(duì)照組或僅用紫杉醇的組，仍有明顯抑制作用。所得結(jié)果見表1。在下表中，[R(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨酰基]-丙氨酸的代號(hào)是CI。
表1 CI加紫杉醇對(duì)裸鼠異種移植的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用
a數(shù)據(jù)來自5次單獨(dú)的評(píng)價(jià)(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)，每次評(píng)價(jià)時(shí)，每組10只小鼠。治療組在第0日接受紫杉醇(30mg/kg)，在第1和第8日注射溶劑或CI(100μg/kg)。bP≤0.05與空白對(duì)照組或僅用紫杉醇組相比(Student’s t檢驗(yàn))。cP≤0.05與空白對(duì)照組相比。
在第1和第8日僅用[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠-丙氨酸(100μg/kg)的荷瘤小鼠的評(píng)價(jià)試驗(yàn)進(jìn)行了幾次(數(shù)據(jù)未出示)，無一次顯示出僅用[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠-丙氨酸本身對(duì)裸鼠的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)有抑制作用。[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠-丙氨酸不能直接抑制體外腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，也不能增強(qiáng)紫杉醇在細(xì)胞培養(yǎng)中對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。
對(duì)生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑和化療劑的作用也進(jìn)行了臨床研究評(píng)價(jià)。[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨酰基]-丙氨酸作為代表性的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，紫杉醇和卡鉑作為代表性的化療劑。在此研究中，對(duì)晚期癌癥患者在第一輪化療(卡鉑和紫杉醇)前約7日給予[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠-丙氨酸(0輪)。患者在之后約21日進(jìn)行第二輪化療，并在第二輪化療后第1日和第8日給予[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠丙氨酸，劑量如下表所示。69％的患者臨床有效，腫瘤或者完全消失，或者部分減小，或使病情穩(wěn)定。在16位受治患者中，6位被擬診斷為NSCLC。在該組中，有3人完全應(yīng)答，1人部分應(yīng)答，1人病情穩(wěn)定，只有1人病情發(fā)展。用標(biāo)準(zhǔn)化療方案(紫杉醇和卡鉑)進(jìn)行化療的預(yù)期完全應(yīng)答率僅有約5％，6個(gè)受治患者中有3人顯示出完全應(yīng)答是完全出乎意料的。在此治療方案中，紫杉醇劑量是175-200mg/m2，卡鉑的曲線下面積(AUC)劑量為6mg/ml×min。臨床試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)于下表。在下表中，[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨酰基]丙氨酸用CI表示。
表2 用紫杉醇、卡鉑和CI組合對(duì)晚期癌癥患者的治療結(jié)果
a完全無明顯病癥部分腫瘤減少≥50％穩(wěn)定病情未進(jìn)一步發(fā)展發(fā)展病情有發(fā)展bCI的劑量用有代表性的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑和化療劑進(jìn)行體內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)藥理學(xué)試驗(yàn)和臨床試驗(yàn)的結(jié)果表明，生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑與化療劑的組合可用來增強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)化療的療效，用于對(duì)實(shí)體瘤的治療。尤其是，本發(fā)明的組合物可用于治療非小細(xì)胞型肺癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、卵巢癌、乳癌、前列腺癌、頭頸癌、腎癌、胰腺癌、肝癌、結(jié)腸癌及軟組織肉瘤等。
本發(fā)明中所用的組合療法可以同時(shí)進(jìn)行，或交錯(cuò)進(jìn)行。在進(jìn)行化療期間，生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑可在不同時(shí)間給藥。因此，術(shù)語組合并不意味著必須同時(shí)給藥，或作為一個(gè)整體的藥劑。例如在臨床研究中的一種典型的有用的治療方案是患者在接受第一個(gè)療程化療前，先接受生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑治療。典型的化療方法是之后化療重復(fù)幾周，這種情況下，生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑可在第二療程化療給藥一日或多日后給藥。這種交錯(cuò)給藥可持續(xù)在整個(gè)治療期。
對(duì)于同時(shí)給藥，組合的成分可配制成單一劑型，但組合的成分都預(yù)先配制成為分次給藥劑型。
專門的化療劑的配方是本領(lǐng)域技術(shù)上眾所周知的(并且大部分所用的是市售的或已在臨床試驗(yàn)中應(yīng)用的已經(jīng)配制的)，這些化療劑可用典型的靜脈或口服給藥；但隨每種藥劑和患者的不同，化療劑也可用非腸道注射、直腸、陰道、經(jīng)皮、皮下、局部、經(jīng)鼻給藥或癌變部位直接輸注。
本發(fā)明生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑也可以口服、靜脈、非腸道、直腸、陰道、經(jīng)皮、皮下、局部、經(jīng)鼻給藥或癌變部位直接輸注。生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)方法學(xué)進(jìn)行配制。例如式I化合物與[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨酰基]丙氨酸的配方參見美國專利5,312,831。
不是市售的或不能在臨床試驗(yàn)中得到的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑與化療劑(或所得到的不適合使用)可以單獨(dú)配制，或與一種或幾種藥物可接受的用于給藥的載體例如，溶劑、稀釋劑等一同配制。可以片劑、膠囊、分散粉劑、顆粒劑、懸浮劑形式等口服用藥，如含量為0.05％-5％的懸浮劑，如含10％-50％糖的糖漿劑，如含20％-50％乙醇的酏劑等，或非腸道的無菌注射溶液或含0.05％-5％在等張介質(zhì)中的懸浮液。這種藥物制劑可以含有0.05％至90％的活性成分與載體組合。通常含量多為5％至60％(重量)。
用于片劑和膠囊給藥的配方中可有固體載體，包括淀粉、乳糖、磷酸二鈣、微晶纖維素、蔗糖和高嶺土，液體載體可以包括無菌水、聚乙二醇、非離子表面活性劑及食用油，如玉米油、花生油和芝麻油，只要適合于活性成分的性質(zhì)和所需給藥的特定劑型即可。通常用制備于藥物組合物中的佐劑可以是調(diào)味劑、著色劑、防腐劑及抗氧化劑，如維生素E、維生素C、BHT和BHA。
組合中的這些成分可以注射給藥或腹腔內(nèi)給藥。這些活性成分可以游離堿或藥物可接受的鹽的形式在水中與適當(dāng)?shù)谋砻婊钚詣?，如羥丙基纖維素混合，制備成溶液或懸浮液?？捎酶视?、液狀聚乙二醇或二者在油中的混合物制備分散劑。在通常的貯存和使用條件下，這些制劑含一種防腐劑，以防微生物的生長(zhǎng)。
適于注射用的藥物劑型包括無菌水溶液或分散劑及用于臨時(shí)配制無菌溶液或分散劑的無菌粉末。各種注射劑型都必須是無菌的，且須有一定的流動(dòng)性，使其易于放置于注射器中。在制造和貯存條件下，制劑必須穩(wěn)定，而且必須能夠抗微生物，如細(xì)菌、霉菌的污染。載體必須是一種溶劑或分散介質(zhì)，如含水、醇、多元醇(如甘油、丙二醇及液體聚乙二醇)及其適宜的混合物和植物油。
預(yù)計(jì)在治療過程中，應(yīng)根據(jù)患者對(duì)治療和對(duì)標(biāo)準(zhǔn)化療方法固有的毒性反應(yīng)，對(duì)所用化療劑和生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑的劑量進(jìn)行調(diào)整。比如根據(jù)骨髓抑制或肝功降低的情況，減少化療劑的用量。預(yù)計(jì)化療劑的起始劑量是沒有生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑存在的起始量。比如對(duì)于用紫杉醇，卡鉑和[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N’-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠-丙氨酸組合的療法，預(yù)計(jì)紫杉醇的量是135-225mg/m2，優(yōu)選劑量是175-200mg/m2，卡鉑的曲線下面積(AUC)劑量為5-7mg/ml×min，優(yōu)選量是6mg/ml×min。設(shè)計(jì)的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑劑量隨其誘導(dǎo)免疫系統(tǒng)的強(qiáng)度而改變。對(duì)于細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑，則根據(jù)誘導(dǎo)細(xì)胞因子產(chǎn)生的能力而改變。對(duì)于[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠-丙氨酸，預(yù)計(jì)初始劑量范圍在0.005-2μg/kg，優(yōu)選劑量是0.01-1μg/kg。
權(quán)利要求
1.一種治療哺乳動(dòng)物實(shí)體瘤的方法，該方法包括對(duì)所述哺乳動(dòng)物以有效量的一種生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑及一種化學(xué)治療劑的組合進(jìn)行給藥。
2.一種生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑和一種化療劑在制備治療哺乳動(dòng)物實(shí)體瘤藥劑中的用途。
3.權(quán)利要求1或2所述的方法或用途，其中生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑是細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑。
4.權(quán)利要求3所述的方法或用途，其中細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑是式I化合物，其結(jié)構(gòu)是 其中，R1選自氫、取代或未取代(C1-C20)烷基、取代或未取代環(huán)烷基、取代或未取代環(huán)烷基烷基、乙烯基、乙炔基、取代或未取代氨基、取代或未取代酰氨基、取代或未取代芳基、取代或未取代芳烷基、取代或未取代芳氧基、取代或未取代烷氧基芳基、取代或未取代烷氧芳烷基及取代或未取代的含1-4個(gè)雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基，雜原子選自氮、硫和氧原子；Ra和R3獨(dú)立地選自氫、取代或未取代的(C1-C6)烷基、取代或未取代的烷氧基烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的環(huán)烷基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的烷氧芳烷基、乙烯基、乙炔基及取代或未取代的含1-4個(gè)雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基，雜原子選自氮、硫和氧原子，對(duì)于R3，在所述雜環(huán)中雜原子不直接與-CH-X-部分的-CH-基鍵合；R2，Rb和Rc獨(dú)立地選自羧基或被護(hù)羧基、羧基或被護(hù)羧基低級(jí)烷基和羧基酰胺；X是氧或氮；R4是H或氨基保護(hù)基；其中，上述取代的烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、氨基、酰氨基、芳基、芳烷基、芳氧基、烷氧芳基、烷氧芳烷基和雜環(huán)基的取代基選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、氨基、單-或二-低級(jí)烷氨基、芳氨基、芳烷氨基、羧基、甲?；⒌图?jí)烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、低級(jí)烷基硫代基、芳基硫代基、芳烷基硫代基、芳基亞硫?；⒎蓟鶃喠蝓；?、芳烷基亞硫?；?、低級(jí)烷基磺?；?、芳基磺?；⒎纪榛酋；昂?-4個(gè)選自氮、硫和氧的雜原子單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基；或其藥物可接受的鹽。
5.權(quán)利要求4所述的方法或用途，其中式I化合物是[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨酰基]-丙氨酸或其藥物可接受的鹽。
6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的方法或用途，其中所述化療劑是微管劑或巨噬細(xì)胞活化劑。
7.權(quán)利要求6所述的方法或用途，其中，微管劑或巨噬細(xì)胞活化劑選自紫杉醇、docetaxel、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、維諾利賓、阿霉素、doxirubicin、順鉑、卡鉑、絲裂霉素C和博來霉素。
8.權(quán)利要求7所述的方法或用途，其中微管劑或巨噬細(xì)胞活化劑是紫杉醇和卡鉑。
9.一種對(duì)需要進(jìn)行化療的哺乳動(dòng)物的化療增效的方法，該方法除了化療方法外還包括用一種生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)行給藥。
10.權(quán)利要求9所述的方法，其中的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑是細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑。
11.權(quán)利要求10所述的方法，其中細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑是式I化合物，結(jié)構(gòu)為 其中，R1選自氫、取代或未取代(C1-C20)烷基、取代或未取代環(huán)烷基、取代或未取代環(huán)烷基烷基、乙烯基、乙炔基、取代或未取代氨基、取代或未取代酰氨基、取代或未取代芳基、取代或未取代芳烷基、取代或未取代芳氧基、取代或未取代烷氧基芳基、取代或未取代烷氧芳烷基及取代或未取代的含1-4個(gè)雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基，雜原子選自氮、硫和氧原子；Ra和R3獨(dú)立地選自氫、取代或未取代的(C1-C6)烷基、取代或未取代的烷氧基烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的環(huán)烷基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的烷氧芳烷基、乙烯基、乙炔基及取代或未取代的含1-4個(gè)雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基，雜原子選自氮、硫和氧原子，對(duì)于R3，在所述雜環(huán)中雜原子不直接與-CH-X-部分的-CH-基鍵合；R2，Rb和Rc獨(dú)立地選自羧基或被護(hù)羧基、羧基或被護(hù)羧基低級(jí)烷基和羧基酰胺；X是氧或氮；R4是H或氨基保護(hù)基；其中，上述取代的烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、氨基、酰氨基、芳基、芳烷基、芳氧基、烷氧芳基、烷氧芳烷基和雜環(huán)基的取代基選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、氨基、單-或二-低級(jí)烷氨基、芳氨基、芳烷氨基、羧基、甲?；⒌图?jí)烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、低級(jí)烷基硫代基、芳基硫代基、芳烷基硫代基、芳基亞硫?；⒎蓟鶃喠蝓；?、芳烷基亞硫?；?、低級(jí)烷基磺?；⒎蓟酋；⒎纪榛酋；昂?-4個(gè)選自氮、硫和氧的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基；或其藥物可接受的鹽。
12.權(quán)利要求11所述的方法，其中式I化合物是[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧-庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠-丙氨酸或其藥物可接受的鹽。
13.權(quán)利要求9-12中任一項(xiàng)的方法，其中化療劑是微管劑或巨噬細(xì)胞活化劑。
14.權(quán)利要求13所述的方法，其中微管劑或巨噬細(xì)胞活化劑選自紫杉醇、docetaxel、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、維諾利賓、阿霉素、doxirubicin、順鉑、卡鉑、絲裂霉素C和博來霉素。
15.權(quán)利要求14所述的方法，其中微管劑或巨噬細(xì)胞活化劑是紫杉醇和卡鉑。
16.一種用于同時(shí)、分別或順序給藥的含生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑和化療劑作為復(fù)合制劑的產(chǎn)品在治療實(shí)體瘤中的應(yīng)用。
17.權(quán)利要求16所述的產(chǎn)品，其中生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑是細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑。
18.權(quán)利要求17所述的產(chǎn)品，其中細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑是式I化合物，結(jié)構(gòu)為 其中，R1選自氫、取代或未取代(C1-C20)烷基、取代或未取代環(huán)烷基、取代或未取代環(huán)烷基烷基、乙烯基、乙炔基、取代或未取代氨基、取代或未取代酰氨基、取代或未取代芳基、取代或未取代芳烷基、取代或未取代芳氧基、取代或未取代烷氧基芳基、取代或未取代烷氧芳烷基及取代或未取代的含1-4個(gè)雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基，雜原子選自氮、硫和氧原子；Ra和R3獨(dú)立地選自氫、取代或未取代的(C1-C6)烷基、取代或未取代的烷氧基烷基、取代或未取代的環(huán)烷基、取代或未取代的環(huán)烷基烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的烷氧芳烷基、乙烯基、乙炔基及取代或未取代的含1-4個(gè)雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基，雜原子選自氮、硫和氧原子，對(duì)于R3，在所述雜環(huán)中雜原子不直接與-CH-X-部分的-CH-基鍵合；R2，Rb和Rc獨(dú)立選自羧基或被護(hù)羧基、羧基或被護(hù)羧基低級(jí)烷基和羧基酰胺；X是氧或氮；R4是H或氨基保護(hù)基；其中，上述取代的烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、氨基、酰氨基、芳基、芳烷基、芳氧基、烷氧芳基、烷氧芳烷基和雜環(huán)基的取代基選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、氨基、單-或二-低級(jí)烷氨基、芳氨基、芳烷氨基、羧基、甲?；?、低級(jí)烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、低級(jí)烷基硫代基、芳基硫代基、芳烷基硫代基、芳基亞硫?；?、芳基亞硫?；⒎纪榛鶃喠蝓；⒌图?jí)烷基磺?；⒎蓟酋；?、芳烷基磺酰基及含1-4個(gè)雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)基，雜原子選自氮、硫和氧；或其藥物可接受的鹽。
19.權(quán)利要求18所述的產(chǎn)品，其中式I化合物是[R-(R*，R*)]-N-[(R)-6-羧基-N2-[[2-羧基-1-甲基-2-[(1-氧庚基)氨基]乙氧基]羰基]-L-賴氨?；鵠-丙氨酸或其藥物可接受的鹽。
20.權(quán)利要求16-19所述的產(chǎn)品，其中化療劑是微管劑或巨噬細(xì)胞活化劑。
21.權(quán)利要求20所述的產(chǎn)品，其中微管劑或巨噬細(xì)胞活化劑選自紫杉醇、docetaxel、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、維諾利賓、阿霉素、doxirubicin、順鉑、卡鉑、絲裂霉素C和博來霉素。
22.權(quán)利要求20所述的產(chǎn)品，其中微管劑或巨噬細(xì)胞活化劑是紫杉醇和卡鉑。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種治療實(shí)體瘤的方法，該方法包括用有效量的(1)一種生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑及(2)一種化學(xué)治療劑進(jìn)行組合。本發(fā)明還提供了對(duì)需進(jìn)行這種治療的哺乳動(dòng)物的化療方法的增效方法，該方法除了化療方法外還包括用一種生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)行給藥。
文檔編號(hào)A61K31/407GK1391484SQ00812921
公開日2003年1月15日 申請(qǐng)日期2000年9月12日 優(yōu)先權(quán)日1999年9月15日
發(fā)明者J·J·小吉邦斯, G·杜卡特, J·盧卡斯, L·A·斯派克 申請(qǐng)人:惠氏公司