專利名稱：黑果枸杞果總黃酮提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于黑果枸杞果總黃酮及提取物的提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及ー種以黑果枸杞果為原料提取的黑果枸杞果總黃酮及提取物及其制備方法。ニ、技術(shù)背景
黑果枸杞(“パ ruthenicum Murr.)是爺科枸杞屬的多年生耐鹽、抗旱植物,分布于我國(guó)西北地區(qū)，是民族醫(yī)藥中的常用藥材。在傳統(tǒng)中(藏)藥中的主要作用為治療心熱病、心臟病、月經(jīng)不調(diào)、停經(jīng)，高血壓，在民間還被用作滋補(bǔ)強(qiáng)壯和明目藥。黑果枸杞的果實(shí)簡(jiǎn)稱為黑果構(gòu)祀果。黑果枸杞果總黃酮提取物的藥理性質(zhì)的報(bào)道較少。白紅進(jìn)等測(cè)定黑果枸杞葉片甲醇提取物對(duì)DPPH自由基、羥自由基(· 0H)和超氧陰離子自由基(02- ·)的清除能力，黑果枸杞葉片甲醇提取物對(duì)DPPH ·，·0Η和02_·自由基均具有較好的清除作用(時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó) 藥，2008，19(2) : 326-327)。陶大勇等發(fā)現(xiàn)如果將黑果枸杞果實(shí)花色苷類物質(zhì)添加到植物油中，可以增強(qiáng)這些植物油的抗氧化能力(中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2007，26 (4) : 15-17)。目前黑果枸杞果僅用于作為藥材使用，尚未發(fā)現(xiàn)采用黑果枸杞果為原料提取黑果枸杞果總黃酮及提取物技術(shù)的有關(guān)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種以黑果枸杞果為原料提取黑果枸杞果總黃酮提取物和制備方法，把黑果枸杞果中的最有經(jīng)濟(jì)和藥用價(jià)值的黑果枸杞果總黃酮提取物提取出來(lái)，大大地發(fā)揮黑果枸杞果的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。本發(fā)明的提取エ藝簡(jiǎn)單，成本低，提取率高，可充分利用黑果枸杞果原料。技術(shù)方案為本發(fā)明的黑果枸杞果總黃酮提取物是采用如下制備方法制備而來(lái)的，其制備方法是以黑果枸杞果作原料，采用水、含水或者不含水的甲醇、こ醇、丙酮、こ酸こ酷、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物的溶劑作提取溶劑進(jìn)行提取。提取制備過(guò)程包括用水、含水或者不含水的甲醇、こ醇、丙酮、こ酸こ酷、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之一種或幾種的混合物作提取溶剤，以黑果枸杞果提取溶劑為1:5-30的重量比進(jìn)行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、煎熬或回流提取、過(guò)濾去渣、濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對(duì)浸膏進(jìn)行分離純化得黑果枸杞果總黃酮提取物。分離純化方法有三種，它們分別為①采用丙酮、こ酸こ酷、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之ー種或幾種的混合物作溶劑對(duì)浸膏進(jìn)行萃取，回收有機(jī)溶劑后，經(jīng)過(guò)真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥再去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物；②采用吸附樹(shù)脂對(duì)浸膏進(jìn)行柱層析，上柱過(guò)程中任意選擇黃酮類顯色劑檢測(cè)流出液以確定樹(shù)脂是否吸附飽和，前后兩次各用1-5倍柱體積的水、O. 5-5倍柱體積的こ醇體積濃度為1-99%的こ醇水溶液洗滌，再用3-10倍樹(shù)脂柱體積的こ醇體積濃度為1-99%的こ醇水溶液洗脫，濃縮，并將濃縮液進(jìn)行真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物；③用無(wú)機(jī)酸將浸膏的PH值調(diào)至O. 1-3，在O— 42°C下靜置，分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物。上述分離純化的方法可單獨(dú)應(yīng)用得黑果枸杞果總黃酮提取物，也可任意組合應(yīng)用制得黑果枸杞果總黃酮提取物。所述的黃酮類化合物是指化學(xué)結(jié)構(gòu)屬于黃酮類、黃酮醇類、ニ氫黃酮類、花色素類、黃烷醇類、雙苯吡酮類、異黃酮類、查爾酮類、ニ氫查爾酮類、橙酮類、高異黃酮類的化合物以及它們與單糖或寡糖形成的衍生物。上述方法所得的黑果枸杞果總黃酮提取物中黃酮類化合物的質(zhì)量之和可為提取物總質(zhì)量的1-100%，其它物質(zhì)為非黃酮類化合物，這些總黃酮化合物，可以通過(guò)進(jìn)ー步純化技術(shù)進(jìn)行分離得到，這些純化方法對(duì)本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是不言自明的。本發(fā)明的原料黑果枸杞果是干凈的干燥黑果枸杞果。因黑果枸杞果總黃酮提取物它易溶于水、含水或者不含水的甲醇、こ醇、丙酮、こ酸こ酷、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物的有機(jī)溶劑中，故采用上述這些溶劑作提取溶劑進(jìn)行提取。無(wú)機(jī)酸如鹽酸、硝酸、硫酸、碳酸、硅酸……，以及它們ニ至多種的混合物均可。本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)黑果枸杞果中含有黑果枸杞果總黃酮類化合物，它采用科學(xué)合理的提取方法獲得了具有十分顯著經(jīng)濟(jì)效益的具有降血糖、降血脂和降血壓活性的黑果枸杞果總黃酮提取物，一方面可以給有以上病癥的病人新的治療選擇，一方面對(duì)深入開(kāi)發(fā)黑果枸杞果資源具有重要意義；2、本發(fā)明提供的制備方法具有エ序 少，操作簡(jiǎn)便，生產(chǎn)周期短而且可以除去原料中的殘留重金屬；3、本發(fā)明提供的黑果枸杞果總黃酮提取物具有治療和/或預(yù)防糖尿病、高血脂和高血壓的功能，資源得到高效充分利用，經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益十分顯著。四、具體實(shí)施方案
實(shí)施例I:本發(fā)明的黑果枸杞果總黃酮提取物是采用如下制備方法制得的，其制備方法是用水作提取溶剤，以黑果枸杞果提取溶劑水為1:5的重量比進(jìn)行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶劑水進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、煎熬至黑果枸杞果中的黑果枸杞果總黃酮提取物全部提取后，過(guò)濾去渣、濃縮提取液得浸膏，然后對(duì)浸膏采用丙酮作溶劑對(duì)浸膏進(jìn)行萃取，對(duì)萃取液回收有機(jī)溶劑后，經(jīng)過(guò)真空干燥去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物產(chǎn)品。實(shí)施例2 :本發(fā)明的黑果枸杞果總黃酮提取物是采用如下制備方法制得的，其制備方法是用含水35%的甲醇作提取溶剤，以黑果枸杞果提取溶劑為1:10的重量比進(jìn)行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至黑果枸杞果中的黑果枸杞果總黃酮提取物全部提取后、過(guò)濾去渣，把提取液進(jìn)行濃縮回收溶劑得浸膏，然后對(duì)浸膏采用こ酸こ酯作溶劑對(duì)浸膏進(jìn)行萃取，對(duì)萃取液回收溶劑后，經(jīng)過(guò)噴霧干燥再去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物產(chǎn)品。實(shí)施例3 :本發(fā)明的黑果枸杞果總黃酮提取物是采用如下制備方法制得的，其制備方法是用含水率為75%的こ酸こ酯作提取溶剤，以黑果枸杞果提取溶劑為I: 30的重量比進(jìn)行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至黑果枸杞果中的黑果枸杞果總黃酮提取物全部提取后、過(guò)濾去渣、把提取液進(jìn)行濃縮回收溶劑得浸膏，然后對(duì)浸膏采用丙酮、こ酸こ酷、正丁醇各為三分之一的混合物作溶劑對(duì)浸膏進(jìn)行萃取，對(duì)萃取液回收溶劑后，經(jīng)過(guò)冷凍干燥再去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物產(chǎn)品。實(shí)施例4:本發(fā)明的黑果枸杞果總黃酮提取物是以黑果枸杞果作原料，采用含水率45%的こ醇、含水率15%的正丁醇以8 2的體積比配比混合作提取溶剤，以黑果枸杞果提取溶劑為1:20的重量比進(jìn)行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶劑混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至黑果枸杞果中的黑果枸杞果總黃酮提取物提取干凈后、過(guò)濾去渣、把提取液進(jìn)行濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對(duì)浸膏采用吸附樹(shù)脂進(jìn)行柱層析，上柱過(guò)程中任意選擇黃酮類顯色劑檢測(cè)流出液以確定樹(shù)脂是否吸附飽和，前后兩次各用I倍柱體積的水、5倍柱體積的こ醇體積濃度為1%的こ醇水溶液洗滌，再用3倍樹(shù)脂柱體積的こ醇體積濃度為99%的こ醇水溶液洗脫，濃縮，并將濃縮液進(jìn)行真空干燥去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物。實(shí)施例5 :本發(fā)明的黑果枸杞果總黃酮提取物是采用如下制備方法制備而來(lái)的，其制備方法是以黑果枸杞果為原料，用不含水的甲醇、丙酮以4 6體積比配比的混合物作提取溶剤，以黑果枸杞果提取溶劑為1:10的重量比進(jìn)行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶劑混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至黑果枸杞果的黑果枸杞果總黃酮提取物提取干凈后、過(guò)濾去渣、把提取液進(jìn)行濃縮回收有機(jī)溶劑得浸膏，然后對(duì)浸膏采用吸附樹(shù)脂進(jìn)行柱層析，上柱過(guò)程中任意選擇黃酮類顯色劑檢測(cè)流出液以確定樹(shù)脂是否吸附飽和，前后兩次各用5倍柱體積的水、O. 5倍柱體積的こ醇體積濃度為99%的こ醇水溶液洗滌，再用10倍樹(shù)脂柱體積的こ醇體積濃度為1%的こ醇水溶液洗脫，濃縮，并將濃縮液進(jìn)行噴霧干燥去除殘余的水 和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物。實(shí)施例6 :本發(fā)明的黑果枸杞果總黃酮提取物是采用如下制備方法制得的，其制備方法是用含水35%的甲醇作提取溶剤，以黑果枸杞果提取溶劑為1:10的重量比進(jìn)行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至黑果枸杞果中的黑果枸杞果總黃酮提取物全部提取后、過(guò)濾去渣，把提取液進(jìn)行濃縮回收溶劑得浸膏，然后用鹽酸的無(wú)機(jī)酸將浸膏的PH值調(diào)至O. 1，在(TC下靜置，再分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物。實(shí)施例7 :本發(fā)明的黑果枸杞果總黃酮提取物是以黑果枸杞果作原料，采用含水率45%的こ醇、含水率15%的正丁醇以8 2的體積比配比混合作提取溶剤，以黑果枸杞果提取溶劑為1:20的重量比進(jìn)行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶劑混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至黑果枸杞果中的黑果枸杞果總黃酮提取物提取干凈后、過(guò)濾去渣、把提取液進(jìn)行濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對(duì)浸膏用硝酸和硫酸以I :1體積比配比的混合無(wú)機(jī)酸將浸膏的PH值調(diào)至3，在42°C下靜置，分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物。實(shí)施例8 :本發(fā)明的黑果枸杞果總黃酮提取物是采用如下制備方法制備而來(lái)的，其制備方法是以黑果枸杞果為原料，用不含水的甲醇、丙酮以4 6體積比配比的混合物作提取溶剤，以黑果枸杞果提取溶劑為1:10的重量比進(jìn)行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶劑混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至黑果枸杞果中的黑果枸杞果總黃酮提取物提取干凈后、過(guò)濾去渣、把提取液進(jìn)行濃縮回收有機(jī)溶劑得浸膏，然后用碳酸的無(wú)機(jī)酸將浸膏的PH值調(diào)至I. 3，在25°C下靜置，分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物。
權(quán)利要求
1.一種黑果枸杞果總黃酮提取物的制備方法，其特征是以黑果枸杞果作原料，用水、含水或者不含水的甲醇、こ醇、丙酮、こ酸こ酷、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之一種或幾種的混合物作提取溶剤，以黑果枸杞果提取溶劑為1:5-30的重量比進(jìn)行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、煎熬或回流提取、過(guò)濾去渣、濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對(duì)浸膏進(jìn)行分離純化得黑果枸杞果總黃酮提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的黑果枸杞果總黃酮提取物的制備方法，其特征是對(duì)浸膏進(jìn)行分離純化的方法是采用丙酮、こ酸こ酷、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之ー種或幾種的混合物作溶劑對(duì)浸膏進(jìn)行萃取，回收有機(jī)溶劑后，經(jīng)過(guò)真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥再去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的黑果枸杞果總黃酮提取物的制備方法，其特征是對(duì)浸膏進(jìn)行分離純化的方法是采用吸附樹(shù)脂對(duì)浸膏進(jìn)行柱層析，上柱過(guò)程中任意選擇黃酮類顯色劑檢測(cè)流出液以確定樹(shù)脂是否吸附飽和，前后兩次各用1-5倍柱體積的水、O. 5-5倍柱體積的こ醇體積濃度為1-99%的こ醇水溶液洗滌，再用3-10倍樹(shù)脂柱體積的こ醇體積濃度為1-99%的こ醇水溶液洗脫，濃縮，并將濃縮液進(jìn)行真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的黑果枸杞果總黃酮提取物的制備方法，其特征是對(duì)浸膏進(jìn)行分離純化的方法是用無(wú)機(jī)酸將浸膏的PH值調(diào)至O. 1-3，在O—42°C下靜置，分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物。
5.一種黑果枸杞果總黃酮提取物，其特征是它由如下制備方法制備而來(lái)，其制備方法是以黑果枸杞果作原料，用水、含水或者不含水的甲醇、こ醇、丙酮、こ酸こ酷、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之ー種或幾種的混合物作提取溶剤，以黑果枸杞果提取溶劑為1:5-30的重量比進(jìn)行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、煎熬或回流提取、過(guò)濾去渣、濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對(duì)浸膏進(jìn)行分離純化得黑果枸杞果總黃酮提取物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的黑果枸杞果總黃酮提取物，其特征是對(duì)浸膏進(jìn)行分離純化的方法是采用丙酮、こ酸こ酯、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之ー種或幾種的混合物作溶劑對(duì)浸膏進(jìn)行萃取，回收有機(jī)溶劑后，經(jīng)過(guò)真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥再去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的黑果枸杞果總黃酮提取物，其特征是對(duì)浸膏進(jìn)行分離純化的方法是采用吸附樹(shù)脂對(duì)浸膏進(jìn)行柱層析，上柱過(guò)程中任意選擇黃酮類顯色劑檢測(cè)流出液以確定樹(shù)脂是否吸附飽和，前后兩次各用1-5倍柱體積的水、O. 5-5倍柱體積的こ醇體積濃度為1-99%的こ醇水溶液洗滌，再用3-10倍樹(shù)脂柱體積的こ醇體積濃度為1-99%的こ醇水溶液洗脫，濃縮，并將濃縮液進(jìn)行真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的黑果枸杞果總黃酮提取物的，其特征是對(duì)浸膏進(jìn)行分離純化的方法是用無(wú)機(jī)酸將浸膏的PH值調(diào)至O. 1-3，在O—42°C下靜置，分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得黑果枸杞果總黃酮提取物。
全文摘要
本發(fā)明屬于黑果枸杞果總黃酮提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種提取黑果枸杞果總黃酮提取物及制備方法。黑果枸杞果總黃酮提取物是用如下方法制得，用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之一種或幾種的混合物作提取溶劑，以黑果枸杞果提取溶劑為1:5-30的重量比進(jìn)行配比，把配比后的黑果枸杞果和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、煎熬或回流提取、過(guò)濾去渣、濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對(duì)浸膏進(jìn)行分離純化得黑果枸杞果總黃酮提取物。優(yōu)點(diǎn)是首次發(fā)現(xiàn)黑果枸杞果中含有總黃酮類化合物，它采用科學(xué)合理的提取方法獲得了具有十分顯著經(jīng)濟(jì)效益的黑果枸杞果總黃酮提取物。
文檔編號(hào)A61P9/12GK102824473SQ20121034195
公開(kāi)日2012年12月19日 申請(qǐng)日期2012年9月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月17日
發(fā)明者江磊, 陶艷鐸, 邵赟, 陶德喜 申請(qǐng)人:青海紅鼎生物工程有限公司