專利名稱：一種白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物的制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于中藥化學領域，涉及ー種白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物的制備方法。
背景技術：
白花地膽草tomentosus L.為菊科地膽草屬植物，主要分布于美洲?？捎糜谥委熈〖玻瑢俚啬懖菘捎脕碇委熤夤苎?、肝炎、腎炎、痢疾和胃病等。目前對白花地膽草的研究主要針對抗腫瘤成分，林燕文通過研究發(fā)現(xiàn)，白花地膽草的水煎液和こ醇提取液在一定濃度范圍內(nèi)對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌3種細菌都有不同程度的抑制作用，并呈濃度依賴性，對金黃色葡萄球菌的MIC均小于其對大腸桿菌和枯草芽孢桿菌的MIC，經(jīng)121°C高壓蒸汽滅菌處理后對金黃色葡萄球菌的抑制作用有所增強。楊昕昕等采用大孔吸附樹脂、0DS、葡聚糖凝膠和硅膠柱層析等技術對白花地膽草95%こ醇提取物進行分離，得到8個酚類化合物。Kuo-Hsiung Lee等采用こ醇提取、氯仿萃取、娃膠柱反復層析等方法分離得到三種抗腫瘤活性成分，即molephantin、molephantin_in、phantomolin?，F(xiàn)有技術中，尚沒有白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物的制備方法披露。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物的制備方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案
一種白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟
將白花地膽草粉碎，采用超臨界CO2萃取得到萃取物，加硅藻土脫色，脫色液經(jīng)聚酰胺樹脂柱層析法富集，濃縮后再用こ醚萃取，干燥得到白花地膽草倍半萜內(nèi)酯提取物。所述超臨界CO2萃取條件為萃取壓力15_40MPa，萃取溫度25_60°C，萃取時間為60-200min ;分離條件為一級分離壓カ為8_15MPa，溫度為40-55°C ;ニ級分離壓カ為4-1OMPa，溫度為 30-45 °C。所述硅藻土脫色步驟中，硅藻土加入量為藥材量的2_5%。所述聚酰胺樹脂柱層析步驟中，采用こ醇水溶液梯度洗脫，依次采用體積百分比濃度為20-30%こ醇和55-75%こ醇水溶液進行梯度洗脫。本發(fā)明的有益效果是首次從白花地膽草中提取富集具有細胞毒活性的有效部位——總倍半萜內(nèi)酯，該制備エ藝簡單、投資少、運行成本低、收率高，適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施例方式 下面將結合具體實施方式
進ー步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。實施例I :
將2kg白花地膽草全草粉碎，過60目篩，置于超臨界0)2萃取器中，萃取壓カ為18. 3MPa、萃取溫度為26 °C、提取時間為150min下進行萃取,萃取后采用兩級減壓分離,其中一級分離壓カ為8MPa、溫度為55°C ;ニ級分離壓カ為4MPa、溫度為40°C ;系統(tǒng)CO2流速為15L/h。收集得到白花地膽草萃取物。將白花地膽草萃取物加入3%硅藻土攪拌脫色，過濾，濾液加水分散，加入聚酰胺樹脂柱中，先用體積百分比20%的こ醇洗脫至流出液無色，再用體積百分比為60%的こ醇溶液洗脫，收集60%こ醇洗脫液，減壓濃縮，濃縮液用こ醚萃取，合并こ醚萃取液，減壓濃縮、干燥得到白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物I. 4g。實施例2:
將2kg白花地膽草全草粉碎，過6 0目篩，置于超臨界C02萃取器中，萃取壓カ為27. 6MPa、萃取溫度為35°C、提取時間為IOOmin下進行萃取,萃取后采用兩級減壓分離,其中一級分離壓カ為12MPa、溫度為50°C ;ニ級分離壓カ為7MPa、溫度為45°C ;系統(tǒng)C02流速為19L/h。收集得到白花地膽草萃取物。將白花地膽草萃取物加入3%硅藻土攪拌脫色，過濾，濾液加水分散，加入聚酰胺樹脂柱中，先用體積百分比25%的こ醇洗脫至流出液無色，再用體積百分比為55%的こ醇溶液洗脫，收集55%こ醇洗脫液，減壓濃縮，濃縮液用こ醚萃取，合并こ醚萃取液，減壓濃縮、干燥得到白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物O. 9g。實施例3:
將2kg白花地膽草全草粉碎，過60目篩，置于超臨界0)2萃取器中，萃取壓カ為33. 4MPa、萃取溫度為40°C、提取時間為60min下進行萃取,萃取后采用兩級減壓分離,其中一級分離壓カ為15MPa、溫度為40°C ;ニ級分離壓カ為9MPa、溫度為30°C ;系統(tǒng)CO2流速為20L/h。收集得到白花地膽草萃取物。將白花地膽草萃取物加入5%硅藻土攪拌脫色，過濾，濾液加水分散，加入聚酰胺樹脂柱中，先用體積百分比30%的こ醇洗脫至流出液無色，再用體積百分比為65%的こ醇溶液洗脫，收集65%こ醇洗脫液，減壓濃縮，濃縮液用こ醚萃取，合并こ醚萃取液，減壓濃縮、干燥得到白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物I. 2g。實施例4:
將2kg白花地膽草全草粉碎，過60目篩，置于超臨界0)2萃取器中，萃取壓カ為38. 7MPa、萃取溫度為55°C、提取時間為200min下進行萃取,萃取后采用兩級減壓分離,其中一級分離壓カ為14MPa、溫度為45°C ;ニ級分離壓カ為lOMPa、溫度為35°C ;系統(tǒng)CO2流速為18L/h。收集得到白花地膽草萃取物。將白花地膽草萃取物加入4%硅藻土攪拌脫色，過濾，濾液加水分散，加入聚酰胺樹脂柱中，先用體積百分比25%的こ醇洗脫至流出液無色，再用體積百分比為75%的こ醇溶液洗脫，收集75%こ醇洗脫液，減壓濃縮，濃縮液用こ醚萃取，合并こ醚萃取液，減壓濃縮、干燥得到白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物I. lg。
權利要求
1.一種白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟將白花地膽草粉碎，采用超臨界CO2萃取得到萃取物，加硅藻土脫色，脫色液經(jīng)聚酰胺樹脂柱層析法富集，濃縮后再用乙醚萃取，干燥得到白花地膽草倍半萜內(nèi)酯提取物。
2.根據(jù)權利要求I所述的一種白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物的制備方法，其特征在于所述超臨界CO2萃取條件為萃取壓力15-40MPa，萃取溫度25_60°C，萃取時間為60-200min ;分離條件為一級分離壓力為8_15MPa，溫度為40-55 °C ;二級分離壓力為4-10MPa，溫度為 30-45°C。
3.根據(jù)權利要求I所述的一種白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物的制備方法，其特征在于所述硅藻土脫色步驟中，硅藻土加入量為藥材量的2-5%。
4.根據(jù)權利要求I所述的一種白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物的制備方法，其特征在于所述聚酰胺樹脂柱層析步驟中，采用乙醇水溶液梯度洗脫，依次采用體積百分比濃度為20-30%乙醇和55-75%乙醇水溶液進行梯度洗脫。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種白花地膽草總倍半萜內(nèi)酯提取物的制備方法，制備方法包括將白花地膽草粉碎，采用超臨界CO2萃取得到萃取物，加硅藻土脫色，脫色液經(jīng)聚酰胺樹脂柱層析法富集，濃縮后再用乙醚萃取，干燥得到白花地膽草倍半萜內(nèi)酯提取物。該制備方法得率高、適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61K36/28GK102846692SQ20121035670
公開日2013年1月2日 申請日期2012年9月24日 優(yōu)先權日2012年9月24日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司