專利名稱：一種新的復方藥物組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種由蟲草菌絲體或其提取物、苦參素制成的藥物組合物，或者由蟲草菌絲體或其提取物、苦參素和黃芪或其提取物制成的藥物組合物，及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
癌癥是一類嚴重威脅人類生命和健康的疾病。據(jù)統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，我國每年新發(fā)現(xiàn)的癌癥病人約100萬左右，在全球每年奪去大約600萬人生命，并把1000萬人置于死亡邊緣，隨著人類生存環(huán)境的日益惡化，癌癥的發(fā)生率呈逐年上升趨勢。世界衛(wèi)生組織預測21世紀癌癥將成為人類的“第一殺手”。目前現(xiàn)代醫(yī)學對癌癥的治療主要是手術(shù)治療配合放、化療，手術(shù)雖能去除原發(fā)病灶，但不能從根本上杜絕癌細胞的再生與繁殖；放、化療雖能殺滅癌細胞，但同時也使大量的正常組織細胞受到損害，誘發(fā)胃腸反應、骨髓抑制和肝腎、心臟功能損害，使病人的身體更加虛弱，難以進一步治療。而中醫(yī)治療癌癥有悠久的歷史，形成了自己獨特的理論體系和治療法則。近年來經(jīng)過廣大醫(yī)療工作者的工作已證實中醫(yī)藥治療癌癥具有突出的作用，特別是對癌癥手術(shù)后的康復以及對放化療的增效減毒方面發(fā)揮了重要的作用。
冬蟲夏草為麥角菌科真菌冬蟲夏草菌Cordyceps sinensis(BerK.)Sacc.寄生在蝙蝠娥科昆蟲上的子座及幼蟲尸體的復合體。性甘，平。歸肺、腎經(jīng)。具有補肺益腎，止血，化痰之功效。用于久咳虛喘，勞嗽呵血，陽痿遺精，腰膝酸痛。是一種名貴的中藥材，近年來報道其具有調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、保肝、護腎、降低血糖等多種藥理作用。含有18種氨基酸、甘露醇、多種維生素和其它多種人體必需的營養(yǎng)物質(zhì)，其主要活性成分為多糖，多糖是由甘露糖、蟲草素、腺苷、半乳糖、阿拉伯糖、木糖精、葡萄糖、巖藻糖組成的多聚糖。由于生長地理的特殊要求以及嚴格的寄生性，造成冬蟲夏草資源極其稀少，加之采收的不易使得野生冬蟲夏草資源本來就十分缺乏。再加上近幾年無序的濫采濫挖使蟲草資源面臨崩潰。近年來，國內(nèi)外專家在通過對野生蟲草菌絲體的分離，提取出蟲草真菌單體，并以它為基礎利用深層發(fā)酵等生物工程方法，提取出人工發(fā)酵的蟲草菌絲體。蟲草菌絲體是冬蟲夏草的有效替代品，據(jù)科學家分析檢驗，它具有與蟲草相同的功能入肺、肝、腎經(jīng)，具有補肺、益腎、強肝、益氣、滋補、保健的效果，無毒副作用，能提高人體的免疫功能還能抗疲勞，分解肌肉中的疲勞物質(zhì)，耐疲勞、提高運動能力的作用。
苦參素為氧化苦參堿與極少量氧化槐果堿的混合堿，是從豆科槐屬植物苦參(sophora flarescen Ait.)的干燥根中提取分離而得到的白色粉末，已收載入國家藥品監(jiān)督管理局國家藥品標準化學藥品地方標準上升國家標準第16冊363頁(國家藥典委員會編)，其中規(guī)定含氧化苦參堿(C15H24N2O2)不得少于98.0％?？鄥⑺貫槟[瘤及肝病輔助用藥，對多種腫瘤細胞有抑制或殺傷作用，且毒副作用小，并能提高免疫力，是理想的抗癌藥物?？鄥⑺氐慕Y(jié)構(gòu)式如下
苦參素黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)的干燥根。甘，溫，歸肺、脾經(jīng)，具有補氣固表、利尿脫毒、排膿、斂瘡生肌之功效，主要用于氣虛乏力，食少便溏，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，氣虛水腫，癰疽難潰，久潰不斂，血虛痿黃，內(nèi)熱消渴；慢性腎炎蛋白病，糖尿病。主要含有黃芪多糖、黃芪總皂苷、黃酮類、生物堿、葡萄糖醛酸及微量元素硒等成分?，F(xiàn)藥理試驗表明黃芪可促進免疫功能，主要有效成分為多糖和皂苷，能顯著增加血液中的白細胞總數(shù)，促進中性粒細胞及巨噬細胞的吞噬和殺菌能力，能明顯促進細胞免疫，促進PHA、ConA及商陸素(PWM)等引起的淋巴細胞轉(zhuǎn)化，提高惡性腫瘤病人淋巴細胞引起的大鼠局部移植物抗宿主反應。黃芪多糖能顯著增強小鼠巨噬細胞功能，促進IgM形成，提高PFC的溶血能力，黃芪多糖還能顯著延長氫化可的松耗竭的小鼠游泳時間，增加其腎上腺的重量，對小鼠數(shù)種缺氧模型均具顯著改善作用；能使正常及虛弱小鼠抗寒生存時間延長；對輻射后小鼠的體重、血細胞數(shù)及細胞結(jié)構(gòu)有明顯保護作用。
目前利用蟲草菌絲體、苦參素、黃芪的相互作用、配伍組方用于抗腫瘤的應用還未見報道。

發(fā)明內(nèi)容為了滿足臨床需要，本發(fā)明提供了一種新的主要用于抗腫瘤的藥物組合物，并提供了其制備方法。
本發(fā)明藥物組合物主要由蟲草菌絲體和苦參素制成，其重量份數(shù)為蟲草菌絲體50～2000份、苦參素10～500份；優(yōu)選份數(shù)為蟲草菌絲體200～1000份、苦參素20～150份；最佳份數(shù)為蟲草菌絲體400份、苦參素60份。
上述藥物組合物的制備方法為將蟲草菌絲體用適宜的溶劑和方法經(jīng)過提取加工得到其提取物。適宜的溶劑是指中藥提取常用的溶劑，優(yōu)選水或醇，尤其是水或乙醇。提取方法可以采用中藥提取的一般方法，如浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法或連續(xù)提取法。
各原料藥的具體提取方法如下蟲草菌絲體的提取加工工藝如下取蟲草菌絲體培養(yǎng)物，加水回流提取三次，每次2小時，合并提取液，濾過，濃縮至相對密度1.10～1.15，加乙醇使含醇量達60％，冷藏靜置24小時，濾過，收集濾餅，加適量水使溶解，濾過，加乙醇使含醇量達85％，冷藏靜置24小時，濾過，收集濾餅，80％乙醇洗滌，真空干燥，即得。
通過本工藝制備的蟲草菌絲體提取物中多糖的含量不低于50％，得率為0.5～2％。
除采用上述方法外，還可通過以下方法獲得，但不僅限于下述方法方法一取蟲草菌絲體，100℃提取三次，第一次加水10倍量，二、三次加水8倍量，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液加乙醇使含醇量達65％，冷藏靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加乙醇使含醇量達85％，冷藏靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味后，減壓濃縮至稠膏狀，噴霧干燥即得。
通過本工藝制備的蟲草菌絲體提取物中多糖的含量不低于35％，得率為4～9％。
方法二取蟲草菌絲體，100℃提取二次，第一次加水10倍量，第二次加水8倍量，每次3小時，合并提取液，濾過，濾液過大孔樹脂，收集流出液，加乙醇使含醇量達65％，冷藏靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加乙醇使含醇量達85％，冷藏靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味后，減壓濃縮至稠膏狀，噴霧干燥即得。
通過本工藝制備的蟲草菌絲體提取物中多糖的含量不低于40％，得率為2～6％。
上述藥物組合物也可由蟲草菌絲體提取物代替蟲草菌絲體藥材投料，按照提取物相對于藥材的得率計算，組合物原料藥的重量份數(shù)為蟲草菌絲體提取物0.2～40份、苦參素10～500份；優(yōu)選份數(shù)為蟲草菌絲體提取物1～20份、苦參素20～150份；最佳份數(shù)為蟲草菌絲體提取物2～10份、苦參素60份。其中蟲草菌絲體提取物的主要有效成分為多糖類，最好不低于30％。
為達到更好的抗腫瘤效果，本發(fā)明藥物組合物的原料藥中還可加入黃芪制成，如以藥材投料其重量份數(shù)為蟲草菌絲體50～2000份、苦參素10～500份、黃芪10～5000份；優(yōu)選份數(shù)為蟲草菌絲體200～1000份、苦參素20～150份、黃芪50～2000份；最佳份數(shù)為蟲草菌絲體400份、苦參素60份、黃芪100份。
上述藥物組合物中蟲草菌絲體、黃芪可以用適宜的溶劑和方法單提或混提制備得到其提取物，總提取物再與藥學上可接受的輔料混合制成任一臨床上或藥學上可接受的劑型。“單獨提取”是指，蟲草菌絲體、黃芪每一味藥材分別通過不同的工藝單獨提取得到提取物，再將各提取物混合得到總提取物?！盎旌咸崛　笔侵福x草菌絲體、黃芪兩味藥材一起提取得到總提取物。
上述組合物中，蟲草菌絲體的“單獨提取”方法可參照前述方法制備。
上述組合物中，因為黃芪多糖和黃芪總皂苷均有抗腫瘤活性，所以黃芪的“單獨提取”方法因其活性成分的不同可采用不同的提取方法，分別如下本發(fā)明組合物中以總皂苷為主要有效成分的黃芪提取物(簡稱黃芪總皂苷)的制備工藝如下取黃芪，加水煎煮三次，每次1.5小時，第一次加水10倍量，二、三次均為8倍量，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.25(60℃)，用乙醇沉淀處理2次，第一次溶液中含醇量為75％，第二次為85％，每次均冷藏放置，回收乙醇并濃縮至每1ml相當于原藥材10g，加于已處理好的大孔吸附樹脂柱上，先用2倍體積的水沖柱，再用4倍體積的70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、真空干燥，即得。通過本工藝制備的黃芪總皂苷提取物得率為0.5～2％，總皂苷含量不低于50％，黃芪甲苷含量不低于2.0％。
除采用上述方法外，也可通過以下方法獲得，但不僅限于下述方法方法一取黃芪，加水煎煮三次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.25(60℃)，用乙醇沉淀處理2次，第一次溶液中含乙醇量為60％，第二次為85％，每次均冷藏放置，回收乙醇并濃縮至每1ml相當于原藥材10g，減壓濃縮、真空干燥，即得。通過本工藝制備的黃芪提取物得率為3～5％，總皂苷含量不低于30％，黃芪甲苷含量不低于1％。
方法二取黃芪，加水煎煮三次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.25(60℃)，用乙醇沉淀處理1次使含乙醇量為60％，冷藏放置，回收乙醇并濃縮至每1ml相當于原藥材10g，并減壓濃縮、真空干燥，即得。通過本工藝制備的黃芪提取物得率為2～4％，總皂苷含量為不低于40％，黃芪甲苷含量不低于1％。
本發(fā)明組合物中以多糖為主要有效成分的黃芪提取物(簡稱黃芪多糖)的制備工藝如下取黃芪藥材，加7倍量70％乙醇提取二次，每次2小時，提取液棄去，取藥渣加水提取二次，提取液合并，濃縮至提取液體積與生藥材的比例為1.05∶1，加入乙醇沉淀使含醇量達到70％，過濾，得沉淀，沉淀用70％乙醇洗滌，再用適量水溶解，過濾，濾液過大孔樹脂，用水洗脫，收集水洗液，將水洗液濃縮至藥液體積與藥材比例為1∶2.5，加入乙醇使含醇量達到70％，得沉淀，將沉淀用95％乙醇和丙酮洗滌脫水，減壓干燥(60℃)，即得。通過本工藝制備的黃芪提取物中黃芪總多糖的含量不低于50％，提取物得率為0.5～2％。
除采用上述方法外，也可通過以下方法獲得，但不僅限于下述方法方法一取黃芪藥材，加水回流提取三次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.15～1.23，加乙醇使含醇量達80％，靜置24小時，濾過，沉淀加水溶解，濾過，再加乙醇使含醇量達85％，靜置24小時，濾過，收集沉淀，真空干燥即得。通過本工藝制備的黃芪提取物得率為2～4％，黃芪多糖含量不低于40％。
方法二取黃芪藥材，加10倍量80％乙醇提取4小時，提取液棄去，取藥渣加水提取二次，每次2小時，每次加水10倍量，提取液合并，過濾，濾液加乙醇使含醇量達85％，過濾，濾液減壓濃縮至稠膏狀，噴霧干燥即得。通過本工藝制備的黃芪提取物得率為3～4％，黃芪多糖含量不低于35％。
上述藥物組合物的原料藥中，可用蟲草菌絲體提取物、黃芪提取物分別代替蟲草菌絲體和黃芪投料制得，按照提取物相對于藥材的得率計算，可以有以下兩種不同配比，其重量份數(shù)分別為配比1蟲草菌絲體提取物0.2～40份、苦參素10～500份、黃芪多糖0.1～100份；優(yōu)選份數(shù)為蟲草菌絲體提取物1～20份、苦參素20～150份、黃芪多糖0.2～40份；最佳份數(shù)為蟲草菌絲體提取物2～10份、苦參素60份、黃芪多糖0.5～2份。
配比2蟲草菌絲體提取物0.2～40份、苦參素10～500份、黃芪總皂苷0.1～100份；優(yōu)選份數(shù)為蟲草菌絲體提取物1～20份、苦參素20～150份、黃芪總皂苷0.2～40份；最佳份數(shù)為蟲草菌絲體提取物2～10份、苦參素60份、黃芪總皂苷0.5～2份。
上述配比中，蟲草菌絲體提取物中含多糖最好不低于30％；黃芪多糖含量最好不低于50％，黃芪總皂苷含量最好不低于50％，其中的黃芪甲苷含量不低于2.0％。蟲草菌絲體提取物、黃芪總皂苷和黃芪多糖均可按照前述方法制得。
上述藥物組合物，可以制成任一臨床上或藥學上可接受的劑型，如注射劑、口服常釋劑型、緩釋控釋劑型、顆粒劑、丸劑、口服液體劑、滴眼劑、滴鼻劑、滴耳劑、吸入劑、栓劑、軟膏劑等。本發(fā)明藥物組合物優(yōu)選劑型為注射劑和口服制劑。
本發(fā)明的藥物組合物可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)，需要的時候可以添加各種藥學上可接受的載體。所述的載體包括藥學領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等。
本發(fā)明在制成注射劑時，為了增加其溶解度，可以加入吐溫-80等增溶劑。輸液中可以加入用于調(diào)節(jié)滲透壓的等滲調(diào)節(jié)劑，例如，氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、乳酸納、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖苷等，優(yōu)選氯化鈉或葡萄糖。粉針中可加入賦形劑，例如，甘露醇、葡萄糖等。
上述藥物組合物，具有抗腫瘤、抗肝損害、解毒、抗菌和增強機體免疫力等作用。
本發(fā)明的優(yōu)點在于1.提供了一種新的抗癌中藥復方，滿足了臨床急需。
2.對本發(fā)明藥物組合物進行了藥理學研究，結(jié)果表明本發(fā)明組合物對放療具有明顯的增效作用；對化療具有減毒和增效的作用，增效率可達56％；可明顯延長腹水癌U14小鼠的生存天數(shù)，且其作用與單用蟲草菌絲體、苦參素和黃芪相比效果極為顯著(p＜0.01)，表明蟲草菌絲體、苦參素以及蟲草菌絲體、苦參素和黃芪兩種組合物均有協(xié)同增效的作用，提高了病人的生存質(zhì)量。
3.通過本發(fā)明組合物不同配比對小鼠S180腫瘤生長抑制作用的藥效學研究，篩選出了本發(fā)明組合物的優(yōu)選配比。
4.對本發(fā)明組合物提取物主要有效成分的含量分別進行了限定，便于控制產(chǎn)品的質(zhì)量。
5.對本發(fā)明組合物進行了急性毒性試驗，結(jié)果表明本發(fā)明組合物毒性小，安全范圍大。
6.對本發(fā)明藥物組合物進行的穩(wěn)定性試驗結(jié)果表明各項指標均比較穩(wěn)定，保證了臨床用藥的安全。
7.蟲草菌絲體、苦參素和黃芪臨床用藥療效確切，合并用藥后用藥量減少，具有廣闊的應用前景。
以下試驗例來進一步闡述本發(fā)明所述藥物的有益效果，這些試驗例包括本發(fā)明藥物組合物的藥效學試驗。以下試驗例中蟲草菌絲體根據(jù)實施例1制得蟲草菌絲體提取物，黃芪根據(jù)實施例2制得黃芪總皂苷和黃芪多糖。蟲草菌絲體提取物、苦參素組合物簡稱CK組。蟲草菌絲體提取物、苦參素、黃芪多糖組合物簡稱CKH1組，蟲草菌絲體提取物、苦參素、黃芪總皂苷組合物簡稱CKH2組。
試驗例1 藥效學試驗-蟲草菌絲體、苦參素和黃芪合并用藥對小鼠S180腫瘤生長抑制作用供試品 對照組氯化鈉注射液(山東長富潔晶藥業(yè)有限公司)黃芪總皂苷組苦參素總皂苷注射液，自制，2ml相當于黃芪藥材1g。
黃芪多糖組苦參素多糖注射液，自制，2ml相當于黃芪藥材1g。
蟲草菌絲體組蟲草菌絲體注射液2ml相當于蟲草菌絲體藥材4g。
苦參素組自制，2ml∶0.2g組合物組CKH1組自制(處方和制備方法參見實施例4水針劑處方2的制備)；CKH2組自制(處方和制備方法參見實施例4水針劑處方3的制備)；受試動物 健康小鼠230只，體重16～20g，雌雄各半，每組10只。
瘤株 小鼠S180表1 組合物對小鼠S180腫瘤生長抑制作用(x±s，n＝10)
注與生理鹽水對照組相比*p＜0.05，**p＜0.01；與黃芪總皂苷組相比ap＜0.01；與黃芪多糖組相比bp＜0.01；與蟲草菌絲體組相比，cp＜0.01；與苦參素組相比，dp＜0.01。
試驗方法 取接種傳代小鼠S180，在勻漿器中加入生理鹽水，制成小鼠S180瘤勻漿液，再以生理鹽水1∶3稀釋，然后取0.2ml注入小鼠左腋下皮下，24小時稱重，小鼠每日灌胃給藥一次，給藥容積相同(0.5ml/只)，共7天。停藥次日處死小鼠，稱體重并細心剝離皮下瘤塊，于EM50電子天平稱取瘤重，并計算抑瘤率。
試驗結(jié)果及結(jié)論 由表1結(jié)果可以看出，各供試品組與生理鹽水對照組相比對小鼠S180瘤體均有顯著抑制作用(p＜0.05，p＜0.01)；CKH1(蟲草菌絲體提取物+苦參素+黃芪多糖)組、CKH2(蟲草菌絲體提取物+苦參素+黃芪總皂苷)組與黃芪總皂苷組、黃芪多糖組、蟲草菌絲體組和苦參素組相比，差別極顯著(p＜0.01)，提示三藥合用有協(xié)同增效的作用。結(jié)果表明，當組合物的原料重量配比為蟲草菌絲體(2g～10g)+苦參素(0.2g～1.5g)+黃芪(0.5g～20g)時均能起到較好的抑瘤效果，其中以蟲草菌絲體4g+苦參素0.6g+黃芪1g時效果最好。
試驗例 2蟲草菌絲體和苦參素合并用藥對腹水癌U14小鼠生命延長率的影響受試動物 健康小鼠，60只，體重20～25g，雌雄兼用，隨機分為6組，每組10只。
瘤株 小鼠腹水癌U14供試品 對照組氯化鈉注射液(山東長富潔晶藥業(yè)有限公司)蟲草菌絲體組蟲草菌絲體提取物注射液2ml相當于蟲草菌絲體藥材4g。
苦參素組自制，2ml∶0.2g。
組合物組CK組規(guī)格2ml，源自實施例4水針劑處方1，分為低、中、高三個劑量組。
試驗方法 小鼠腹腔接種腹水癌U14瘤株菌懸液(懸液濃度2×107/ml，接種量0.5ml/只)。接種次日，小鼠隨機分組，稱量體重，按表2腹腔注射給藥，每日1次，連續(xù)10天。此后觀察小鼠的死亡時間，結(jié)果用平均存活天數(shù)和生命延長率表示生命延長率＝(試驗組平均生存天數(shù)-對照組平均生存天數(shù))/對照組平均生存天數(shù)×100％。
表2 蟲草菌絲體和苦參素合并用藥對腹水癌U14小鼠生命延長率的影響(平均值±標準偏差，n＝10)
注與生理鹽水對照組相比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與蟲草菌絲體組相比較ap＜0.05，bp＜0.01；與苦參素組相比較cp＜0.05，dp＜0.01。
試驗結(jié)果及結(jié)論 試驗結(jié)果見表2。與生理鹽水注射液對照組相比較，CK注射液中、高劑量組可極顯著延長U14小鼠的生存天數(shù)(p＜0.01，p＜0.001)，CK注射液低劑量組、蟲草菌絲體注射液組、苦參素注射液組可明顯延長U14小鼠的生存天數(shù)(p＜0.05)。CK注射液低劑量組與蟲草菌絲體注射液組、苦參素注射液組相比較，腹水癌U14小鼠生命延長率顯著增加(p＜0.05)；CK注射液中、高劑量組與蟲草菌絲體注射液組、苦參素注射液組相比較，腹水癌U14小鼠生命延長率極顯著增加(p＜0.01)。提示，蟲草菌絲體和苦參素合并用藥具有協(xié)同增效作用，在抑制腫瘤、延長腫瘤患者存活時間方面有顯著作用。
試驗例3 蟲草菌絲體、苦參素合并用藥對放療的增效作用受試動物 健康小鼠，50只，體重20～25g，雌雄兼用，隨機分為5組，每組10只。
瘤株 小鼠S180肉瘤。
供試品 對照組氯化鈉注射液(山東長富潔晶藥業(yè)有限公司)組合物組CK組規(guī)格2ml，源自實施例4水針劑處方1，分為低、中、高三個劑量組。
試驗方法 每只小鼠左前肢腋下皮下接種S180瘤株細胞懸液(懸液濃度2×107/ml，接種量0.2ml/只)，24h時稱量體重。接種次日，隨機分組，除空白對照組外，其余各組均在接種后第3天、第6天用60Co全身照射，照射劑量為0.05Gy/min。接種次日，小鼠按表3腹腔注射給藥，每天1次，連續(xù)10天。每天稱量體重，觀察荷瘤鼠體重變化。末次給藥后24h，稱量體重，處死動物，剝離皮下瘤塊，稱取瘤體重量，計算腫瘤抑制率和增效率增效率＝(放療組平均瘤重-放療與CK注射液聯(lián)合治療組平均瘤重)/放療組平均瘤重×100％。
表3 蟲草菌絲體、苦參素合并用藥對放療的增效作用(平均值±標準偏差，n＝10)
與空白對照組相比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與60Co照射組相比較#p＜0.05，##p＜0.01。
試驗結(jié)果及結(jié)論 試驗結(jié)果見表3。與空白對照組相比較，60Co照射對小鼠S180肉瘤有顯著的抑制作用(p＜0.05)；60Co照射與低、中、高劑量CK注射液聯(lián)合治療對小鼠S180肉瘤有極顯著的抑制作用(p＜0.01，p＜0.001)。與60Co照射組相比較，60Co照射與低劑量CK注射液聯(lián)合治療對小鼠S180肉瘤的抑制作用顯著增強(p＜0.05)，60Co照射與中、高劑量CK注射液聯(lián)合治療對小鼠S180肉瘤的抑制作用極顯著增強(p＜0.01)。試驗結(jié)果表明，CK注射液可以顯著增強60Co照射的放療療效，提示，蟲草菌絲體、苦參素合并用藥具有增強放療療效的作用。
試驗例4 蟲草菌絲體、苦參素和黃芪合并用藥對化療(Cy)的增效和減毒作用受試動物 健康小鼠，80只，體重20～25g，雌雄兼用，隨機分為8組，每組10只。
瘤株 小鼠S180肉瘤。
供試品 對照組氯化鈉注射液(山東長富潔晶藥業(yè)有限公司)；注射用環(huán)磷酰胺(陽性對照)市購，100mg，上海華聯(lián)制藥有限公司；組合物組CKH1組規(guī)格2ml，源自實施例4水針劑處方2，分為低、中、高三個劑量組；CKH2組規(guī)格2ml，源自實施例4水針劑處方3，分為低、中、高三個劑量組。
試驗方法 每只小鼠左前肢腋下皮下接種S180瘤株細胞懸液(懸液濃度2×107/ml，接種量0.2ml/只)。接種次日，小鼠隨機分組，稱量體重，按表4腹腔注射給藥，隔日1次，連續(xù)10天。每天稱量體重，觀察荷瘤鼠體重變化。末次給藥后24h，稱量體重，處死動物，剝離皮下瘤塊，稱取瘤體重量，計算腫瘤抑制率和增效率增效率＝(化療組平均瘤重-化療與CKH1或CKH2注射液聯(lián)合用藥組平均瘤重)/化療組平均瘤重×100％。
表4 蟲草菌絲體、苦參素和黃芪合并用藥對化療的增效和減毒作用(平均值±標準偏差，n＝10)
注與空白對照組相比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；與注射用環(huán)磷酰胺組相比較#p＜0.05，##p＜0.01。
試驗結(jié)果及結(jié)論 試驗結(jié)果見表4。
(1)對化療的增效作用與空白對照組相比較，低劑量注射用環(huán)磷酰胺單獨用藥對小鼠S180肉瘤有顯著的抑制作用(p＜0.05)；注射用環(huán)磷酰胺與低、中、高劑量CKH1、CKH2注射液聯(lián)合用藥對小鼠S180肉瘤有極顯著的抑制作用(p＜0.01，p＜0.001)。與環(huán)磷酰胺組相比較，注射用環(huán)磷酰胺與低劑量CKH1、CKH2注射液聯(lián)合用藥對小鼠S180肉瘤的抑制作用顯著增強(p＜0.05)，注射用環(huán)磷酰胺與中、高劑量CKH1、CKH2注射液聯(lián)合用藥對小鼠S180肉瘤的抑制作用極顯著增強(p＜0.01)。試驗結(jié)果表明，CKH1、CKH2注射液可以顯著增強環(huán)磷酰胺的療效，提示，蟲草菌絲體、苦參素和黃芪三者合并用藥具有增強化療療效的作用。
(2)對化療的減毒作用與空白對照組相比較，注射用環(huán)磷酰胺單獨用藥時，小鼠的外周白細胞數(shù)、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)均極顯著降低(p＜0.01)。與注射用環(huán)磷酰胺組相比較，注射用環(huán)磷酰胺與CKH1、CKH2注射液聯(lián)合用藥時，CKH1、CKH2注射液低劑量可以顯著抑制小鼠外周白細胞數(shù)、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)的降低(p＜0.05)，CKH1、CKH2注射液中、高劑量可以極顯著抑制小鼠外周白細胞數(shù)、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)的降低(p＜0.01)。試驗結(jié)果表明，CKH1、CKH2注射液可以顯著降低環(huán)磷酰胺的毒性，提示，蟲草菌絲體、苦參素和黃芪三者合并用藥具有降低化療毒性的作用。
試驗例5 小鼠注射給藥急性毒性試驗(1)試驗方法供試品CK注射液，規(guī)格2ml，來源于實施例4處方1；CKH1注射液，規(guī)格2ml，來源于實施例4處方2；CKH2注射液，規(guī)格2ml，來源于實施例4處方3。
受試動物小鼠，每組雌雄各60只，雄性體重25～28g，雌性體重21～24g。
給藥途徑靜脈注射、腹腔注射。
觀察專案死亡數(shù)、一般狀態(tài)、體重、剖檢、半數(shù)致死劑量。
(2)試驗結(jié)果按照急性毒性試驗要求進行預試，腹腔注射及靜脈注射兩給藥途徑皆無法測出藥物的半數(shù)致死量，也未見明顯的毒性反應，故進行日最大給藥量試驗。給藥劑量尾靜脈注射0.1ml/10g，腹腔注射0.1ml/10g，一日1次。
死亡數(shù)未出現(xiàn)死亡。
一般狀態(tài)未見異常變化。
體重于給藥前1天，給藥日，給藥后2、4、6、8、10、12、14天測量；未見異常變化。
剖檢心、肝、肺、腎等組織未見異常變化。
(3)結(jié)論本實驗中未出現(xiàn)死亡，CK、CKH1和CKH2注射液對雌雄小鼠靜脈和腹腔注射給藥的最大耐受量為0.1ml/10g，相當于60kg體重人日最大用量6ml的100倍。表明本品低毒，安全性高。
試驗例6 組合物注射液穩(wěn)定性試驗供試品CK注射液，規(guī)格2ml，來源于實施例5處方1；CKH1注射液，規(guī)格2ml，來源于實施例4處方2；CKH2注射液，規(guī)格2ml，來源于實施例4處方3。
考察項目性狀、pH值、澄明度、有關(guān)物質(zhì)、標示含量；并在加速試驗6個月和長期試驗期末增加無菌和熱原檢查。
1、影響因素試驗強光照射試驗取供試品，置照度為4500Lx的光照箱內(nèi)放置10天。
高溫試驗取供試品，分別置于40℃、60℃條件下放置10天。
低溫試驗取供試品，在4℃冰箱中放置10天。
上述試驗，分別于第5、10天取樣測定。比較性狀后測試各項指標，并將結(jié)果與0天比較。
結(jié)果光照4500Lx條件下放置10天，除有關(guān)物質(zhì)略有升高外，其它各項指標均無明顯變化。高溫60℃條件下放置10天，各項指標無明顯變化。高溫40℃、低溫4℃條件下放置10天，各項指標無明顯變化。
2、加速試驗方法置溫度40℃±2℃、相對濕度75％±5％的條件下放置6個月。在試驗期間分別于第1個月、2個月、3個月、6個月末取樣，比較外觀后，測試各項指標，將結(jié)果與0個月比較；并在6個月末增加無菌和熱原檢查。
結(jié)果溫度40℃±2℃、相對濕度75％±5％的條件下放置6個月，除有關(guān)物質(zhì)略有增加，標示含量略有下降外，其它各項指標均無明顯變化，加速試驗6個月末，熱原、無菌檢查均符合規(guī)定。
3、長期試驗方法置溫度25℃±2℃、相對濕度60％±10％的條件下放置18個月。分別于第3個月、6個月、9個月、12個月、18個月，比較外觀后，測試各項指標，將結(jié)果與0個月比較；并在18個月末增加無菌和熱原檢查。
結(jié)果溫度25℃±2℃、相對濕度60％±10％的條件下放置18個月，各項指標均無明顯變化，長期試驗18個月末，熱原、無菌檢查均符合規(guī)定。
結(jié)論由上述考察結(jié)果得出結(jié)論，各項試驗中，CK注射液、CKH1注射液和CKH2注射液均比較穩(wěn)定。
綜上所述，本發(fā)明提供的蟲草菌絲體與苦參素或黃芪、蟲草菌絲體與苦參素組合物具有協(xié)同增效作用，明顯優(yōu)于黃芪、蟲草菌絲體或苦參素單獨給藥的藥效。對CK注射液、CKH1注射液和CKH2注射液進行的穩(wěn)定性試驗結(jié)果表明，本發(fā)明提供的組合物制成的注射劑的各項指標均比較穩(wěn)定，可以用于放大生產(chǎn)。
具體實施方式以下通過實施例來進一步闡述本發(fā)明藥物組合物的制備方法，但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。以下實施例中各劑型的輔料可以用藥學上可接受的輔料替換，或者減少、增加。
以下實施例3～11中的蟲草菌絲體提取物和黃芪多糖、黃芪總皂苷來源于實施例1、2中蟲草菌絲體提取物和黃芪多糖、黃芪總皂苷三批提取物中的第二批。
實施例1 蟲草菌絲體提取物的制備取蟲草菌絲體培養(yǎng)物40kg，加水回流提取三次，每次2小時，合并提取液，濾過，濃縮至相對密度1.10～1.15，加乙醇使含醇量達60％，冷藏靜置24小時，濾過，收集濾餅，加適量水使溶解，濾過，加乙醇使含醇量達85％，冷藏靜置24小時，濾過，收集濾餅，80％乙醇洗滌，真空干燥，即得。
按上述工藝再分別制備三批提取物，提取物得率和含量見下表5。
蟲草菌絲體提取物的含量測定對照品溶液的制備 精密稱取105℃干燥至恒重的D-無水葡萄糖5.0mg置于25ml容量瓶中加蒸餾水定容，搖勻，即得對照品溶液。
供試品溶液的制備 取本品10mg，置于50ml容量瓶中定容，搖勻，即得。
標準曲線的制備 精密吸取對照品溶液0.25、0.75、1.25、2.0、2.5ml各置于10ml具塞試管中，各加入蒽酮試劑(稱取2g蒽酮加入100ml乙酸乙酯在水浴中加入至溶)0.5ml和3.0ml濃硫酸立即在混勻器上混勻，放置冷卻至室溫。以蒸餾水同法作空白，在630nm處測吸收度。以對照品溶液濃度為橫坐標，以吸收度作縱坐標，計算回歸方程。
測定法 精密吸取供試品溶液2ml置10ml量瓶中用蒸餾水定容，搖勻，再精密吸取1ml按上述標準曲線條件下測定，即得。
蟲草菌絲體提取物的鑒別(1)取本品約50mg，加水5ml溶解后，加堿性酒石酸銅試液5滴，加熱即產(chǎn)生紅色沉淀，冷卻，濾過，取濾液加鹽酸1滴使成酸性，水浴加熱10分鐘，放冷，調(diào)節(jié)pH值至中性，加堿性酒石酸銅試液0.5ml，水浴加熱即產(chǎn)生紅色的氧化亞銅沉淀。
(2)取本品約50mg，加水2ml溶解后，加5％d-萘酚乙醇溶液0.5ml搖勻，緩緩加入硫酸3ml，兩液面交界處顯紫紅色環(huán)。
表5 三批蟲草菌絲體提取物得率和含量測定結(jié)果
實施例2 黃芪提取物的制備黃芪總皂苷的制備取黃芪40kg，加水煎煮三次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.25(60℃)，用乙醇沉淀處理2次，第一次溶液中含醇量為75％，第二次為85％，每次均冷藏放置，回收乙醇并濃縮至每1ml相當于原藥材10g，用注射用水稀釋至每1ml相當于原藥材1g，冷藏放置12小時，濾過，濾液減壓濃縮、真空干燥，即得。
分別制得三批黃芪總皂苷，提取物得率和含量結(jié)果見下表6。
黃芪總皂苷鑒別試驗鑒別試驗一 取本品0.01g，加甲醇20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液加于中性氧化鋁柱(100～120目，5g，內(nèi)徑10～15mm)上，用40％甲醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液；用水洗滌2次，每次20ml；棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，涼干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈(365nm)下顯相同的橙黃色熒光斑點。
鑒別試驗二 取本品0.01g，加乙醇30ml，加熱回流20分鐘，濾過，濾液加0.3％氫氧化鈉溶液15ml使溶解，濾過，濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5～6，用乙酸乙酯15ml振搖提取，分取乙酸乙酯液，用鋪有無水硫酸鈉的濾紙濾過，濾液蒸干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液。吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(10∶1)作為展開劑，展開，取出，涼干，置氨蒸氣中熏后置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。
黃芪總皂苷含量測定總皂苷的含量測定對照品溶液的制備 精密稱取于105℃干燥至恒重的黃芪甲苷對照品約10mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含黃芪甲苷干品0.1mg)。
供試品溶液的制備 取本品0.1g，精密稱定，加水25ml使溶解，移至分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌兩次，每次10ml，棄去水液，正丁醇至水浴上蒸干，殘渣加甲醇溶解，移至25ml量瓶中，并加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 精密量取對照品溶液、供試品溶液各1ml，置25ml納氏比色管，置水浴中蒸干，放冷，加新鮮配制的5％香草醛-冰醋酸溶液0.4ml，高氯酸1.6ml，搖勻，放置5分鐘，置沸水浴中顯色15分鐘，取出，立即置冰浴中冷卻至室溫，加入8ml冰醋酸，搖勻，在538nm波長處測定吸光度，計算，即得。
黃芪甲苷的含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(32∶68)為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器。理論板數(shù)以黃芪甲苷峰計算不低于4000。
對照品溶液的制備精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 精密稱取本品0.04g，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸過夜，再加甲醇適量，加熱回流4小時，提取液回收溶劑并濃縮至干，殘渣加水10ml，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次40ml，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘渣加水5ml使溶解，放冷，通過D101型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑1.5cm，長12cm)，以水50ml洗脫，棄去水液，再用40％乙醇30ml洗脫，棄去洗脫液，繼用70％乙醇80ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液10μl、20μl與供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定，以外標兩點對數(shù)方程計算，即得。
表6 三批黃芪總皂苷含量、黃芪甲苷含量和得率
黃芪多糖的制備取黃芪藥材30kg，加7倍量70％乙醇提取二次，每次2小時，提取液棄去，取藥渣加水提取二次，提取液合并，濃縮至提取液體積與生藥材的比例為1.05∶1，加入乙醇沉淀使含醇量達到70％，過濾，得沉淀，沉淀用70％乙醇洗滌，再用適量水溶解，過濾，濾液過大孔樹脂，用水洗脫，收集水洗液，將水洗液濃縮至藥液體積與藥材比例為1∶2.5，加入乙醇使含醇量達到70％，得沉淀，將沉淀用95％乙醇和丙酮洗滌脫水，減壓干燥(60℃)，即得。
分別制得三批黃芪多糖，提取物得率和含量結(jié)果見下表7。
黃芪多糖含量測定標準溶液的制備 稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的葡萄糖100mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加水溶解，并稀釋至刻度，搖勻。精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，備用。
標準曲線繪制 精密量取標準溶液0.1ml～0.6ml共6份，分別置25ml量瓶中，加水至2.0ml，并加苯酚溶液(取苯酚300g，鋁片0.3g，碳酸氫鈉0.15g，混合蒸餾，收集182℃餾分，配制成5％水溶液)1.0ml，搖勻，迅速滴加濃硫酸5.0ml，搖勻，放置5min，置水浴中加熱15min，取出，迅速冷卻至室溫，另以2.0ml水同上平行操作作為空白對照，在490nm波長處測定吸收值，計算回歸方程。
測定方法 取黃芪提取物0.5g置25ml量瓶中，照標準曲線繪制項下的方法自“加水至2.0ml”起，依法測定吸收值，依回歸方程計算多糖的含量。
黃芪多糖的鑒別(1)取本品約0.2g，加水5ml溶解后，加堿性酒石酸銅試液5滴，加熱即產(chǎn)生紅色沉淀，冷卻，濾過，取濾液加鹽酸1滴使成酸性，水浴加熱10分鐘，放冷，調(diào)節(jié)pH值至中性，加堿性酒石酸銅試液0.5ml，水浴加熱即產(chǎn)生紅色的氧化亞銅沉淀。
(2)取本品約0.2g，加水2ml溶解后，加5％α-萘酚乙醇溶液0.5ml搖勻，緩緩加入硫酸3ml，兩液面交界處顯紫紅色環(huán)。
表7 三批黃芪多糖含量和得率
實施例3 本發(fā)明組合物粉針劑的制備處方處方1蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體藥材4kg)苦參素 600g聚山梨酯80 50g甘露醇 200g無菌注射用水加至2000ml共制備 1000支處方2蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體藥材4kg)苦參素 600g黃芪多糖15.6g(相當于黃芪藥材1kg)聚山梨酯80 50g甘露醇 200g無菌注射用水加至2000ml共制備 1000支處方3蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體藥材4kg)苦參素 600g黃芪總皂苷 9.8g(相當于黃芪藥材1kg)聚山梨酯80 50g甘露醇 200g無菌注射用水加至2000ml共制備 1000支制備工藝1)首先將配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，膠塞等進行無菌處理。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)取配液量40％的注射用水，先加入聚山梨酯80溶解完全，再加入處方量的中藥提取物，加熱攪拌溶解完全。苦參素加配液量30％注射用水攪拌溶解。合并上述溶液，再加入甘露醇加熱攪拌溶解完全，補加無菌注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
6)經(jīng)0.22um的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)分裝于抗生素玻璃瓶中，半壓塞。將樣品放入凍干機中冷凍干燥。預凍-45℃5小時，低溫真空干燥-45℃～0℃20小時，然后升溫至25℃真空干燥4小時。
9)凍干結(jié)束，壓塞，軋蓋。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例4 本發(fā)明組合物水針劑的制備處方處方1蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g聚山梨酯80 50g注射用水加至4000ml共制備 2000支處方2蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪多糖15.6g(相當于黃芪1kg)聚山梨酯80 50g注射用水加至4000ml共制備 2000支處方3蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪總皂苷 9.8g(相當于黃芪1kg)聚山梨酯80 50g注射用水加至4000ml共制備 2000支制備工藝1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)取配液量40％的注射用水，先加入聚山梨酯80溶解完全，再加入處方量的中藥提取物，加熱攪拌溶解完全?？鄥⑺丶优湟毫?0％注射用水攪拌溶解。
3)合并上述溶液，補加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
6)經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)將溶液熔封于玻璃安瓿中。
9)100℃流通蒸汽滅菌30分鐘。
10)趁熱將樣品放入0.01％的亞甲藍溶液中檢漏。
11)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例5 本發(fā)明組合物輸液的制備氯化鈉輸液處方處方1蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g聚山梨酯80 50g氯化鈉 900g注射用水 加至100000ml共制備 1000瓶處方2蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪多糖15.6g(相當于黃芪1kg)聚山梨酯80 50g氯化鈉 900g注射用水 加至100000ml共制備 1000瓶處方3蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪總皂苷 9.8g(相當于黃芪1kg)聚山梨酯80 50g氯化鈉 900g注射用水 加至100000ml共制備 1000瓶制備工藝1)前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)取配液量40％的注射用水，先加入聚山梨酯80溶解完全，再加入處方量的中藥提取物，加熱攪拌溶解完全。苦參素、氯化鈉加配液量30％注射用水攪拌溶解。合并上述溶液，補加注射用水至全量。
3)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
4)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
5)經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾。
6)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
7)灌裝于100ml的輸液瓶中。
8)115℃熱壓滅菌30分鐘。
9)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
葡萄糖輸液處方處方1蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g聚山梨酯80 50g葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶處方2蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪多糖15.6g(相當于黃芪1kg)聚山梨酯80 50g葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶處方3蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪總皂苷 9.8g(相當于黃芪1kg)聚山梨酯80 50g葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶制備工藝1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)取配液量40％的注射用水，先加入聚山梨酯80溶解完全，再加入處方量的中藥提取物，加熱攪拌溶解完全。苦參素、葡萄糖加配液量30％注射用水攪拌溶解。合并上述溶液，補加注射用水至全量。
3)合并上述溶液，補加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值。
6)經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)灌裝于100ml的輸液瓶中。
9)115℃熱壓滅菌30分鐘。
10)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例6 本發(fā)明組合物片劑的制備處方處方1蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g淀粉120.0g微晶纖維素 40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂3.5g羧甲淀粉鈉 7.0g共制備 2000片處方2蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪多糖15.6g(相當于黃芪1kg)淀粉120.0g微晶纖維素 40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂3.5g羧甲淀粉鈉 7.0g共制備 2000片處方3蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪總皂苷 9.8g(相當于黃芪1kg)淀粉120.0g微晶纖維素 40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂3.5g羧甲淀粉鈉 7.0g共制備 2000片制備工藝1)將中藥提取物、苦參素粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將中藥提取物、苦參素、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗。
9)按化驗結(jié)果確定片重壓片。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例7 本發(fā)明組合物膠囊劑的制備處方處方1蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g淀粉80.0g微晶纖維素 40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂3.0g共制備 2000粒處方2蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪多糖15.6g(相當于黃芪1kg)淀粉80.0g微晶纖維素 40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂3.0g共制備 2000粒處方3蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪總皂苷 9.8g(相當于黃芪1kg)淀粉80.0g微晶纖維素 40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂3.0g共制備 2000粒制備工藝1)將中藥提取物、苦參素粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將中藥提取物、苦參素、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗。
9)按照化驗確定的裝量裝入膠囊。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例8 本發(fā)明組合物顆粒劑的制備處方處方1蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g糖粉1000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備 1000包處方2蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪多糖15.6g(相當于黃芪1kg)糖粉1000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備 1000包處方3蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪總皂苷 9.8g(相當于黃芪1kg)糖粉1000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備 1000包制備工藝1)將蔗糖粉碎過100目篩備用。將中藥提取物、苦參素粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將中藥提取物、苦參素與糖粉以等量遞加的方法混合均勻，加入2％HPMC50％乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
4)過20目篩制顆粒。
5)顆粒在60℃的條件下烘干。
6)干顆粒過18目篩整粒。
7)取樣，半成品化驗顆粒中主藥的含量，確定裝量。
8)包裝，成品全檢，包裝入庫。
實施例9 本發(fā)明組金物軟膠囊劑的制備處方處方1蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g大豆油 500.0g大豆磷脂50g蜂蠟50g共制備 2000粒處方2蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪多糖15.6g(相當于黃芪1kg)大豆油 500.0g大豆磷脂50g蜂蠟50g共制備 2000粒處方3蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪總皂苷 9.8g(相當于黃芪1kg)大豆油 500.0g大豆磷脂50g蜂蠟50g共制備 2000粒制備工藝將中藥提取物、苦參素分別粉碎過100目篩，將處方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蠟加熱熔融，混勻，放冷，加入中藥提取物、苦參素研勻，壓制成軟膠囊即可。
實施例10 本發(fā)明組合物滴丸劑的制備處方
處方1蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g聚乙二醇6000600g處方2蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪多糖15.6g(相當于黃芪1kg)聚乙二醇6000600g處方3蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪總皂苷 9.8g(相當于黃芪1kg)聚乙二醇6000600g制備工藝將聚乙二醇6000在水浴中加熱熔融，待全部熔融后加入中藥提取物、苦參素，攪拌溶解，60目篩過濾，保持60℃滴入冷至10℃以下的液體石蠟中制成丸。
實施例11 本發(fā)明組合物口服液的制備處方處方1蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g聚山梨酯80 50g苯甲酸鈉15g甜菊甙 10g水 加至10000ml共制備 1000支處方2蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪多糖15.6g(相當于黃芪1kg)聚山梨酯80 50g苯甲酸鈉15g甜菊甙 10g水 加至10000ml共制備 1000支處方3蟲草菌絲體提取物34.8g(相當于蟲草菌絲體4kg)苦參素 600g黃芪總皂苷 9.8g(相當于黃芪1kg)聚山梨酯80 50g苯甲酸鈉15g甜菊甙 10g水 加至10000ml共制備 1000支制備工藝1)先將聚山梨酯80用配液量40％的水溶解完全，再將中藥提取物加入加熱攪拌溶解完全?？鄥⑺丶优湟毫?0％水加熱后溶解完全。
2)將苯甲酸鈉和甜菊甙用配液量10％的水溶解完全。
3)合并上述溶液，補加水至全量。
4)過0.8um的微孔濾膜過濾。
5)半成品化驗。
6)灌裝。成品全檢，包裝入庫。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于，該組合物主要由下列重量份的原料藥制成蟲草菌絲體50～2000份或其提取物0.2～40份、苦參素10～500份。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該組合物主要由下列重量份的原料藥制成蟲草菌絲體200～1000份或其提取物1～20份、苦參素20～150份。
3.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該組合物的原料藥還有黃芪10～5000份或黃芪多糖0.1～100份或黃芪總皂苷0.1～100份。
4.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于，該組合物是由下列重量份的原料藥制成蟲草菌絲體200～1000份或其提取物1～20份、苦參素20～150份、黃芪50～2000份或黃芪多糖0.2～40份；或者為蟲草菌絲體200～1000份或其提取物1～20份、苦參素20～150份、黃芪50～2000份或黃芪總皂苷0.2～40份。
5.如權(quán)利要求3、4所述的任一藥物組合物，其特征在于，所述的黃芪多糖含量不低于50％；所述的黃芪總皂苷的含量不低于50％、黃芪總皂苷中黃芪甲苷含量不低于2.0％。
6.如權(quán)利要求1～4所述的任一藥物組合物，其特征在于，所述的蟲草菌絲體提取物含多糖不低于30％。
7.如權(quán)利要求1～4所述的任一藥物組合物的制備方法，其特征在于，其中的藥材可以用適宜的溶劑和方法單提或混提制備得到提取物，提取物再與苦參素和藥學上可接受的輔料混合制成任一制劑。
8.如權(quán)利要求7所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于，所述的提取物中所含的主要有效成分為蟲草菌絲體多糖；或者為蟲草菌絲體多糖和黃芪多糖；或者為蟲草菌絲體多糖和黃芪總皂苷。
9.如權(quán)利要求1～4所述的任一藥物組合物，其特征在于該組合物可以制成任何一種臨床上或藥學上可接受的劑型。
10.如權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于該組合物可以制成注射劑或口服制劑。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種新的復方藥物組合物及其制備方法和用途，主要由蟲草菌絲體50～2000份或其提取物0.2～40份、苦參素10～500份制成，還可以加入黃芪10～5000份或以多糖為主要有效成分的提取物黃芪多糖0.1～100份或以皂苷為主要有效成分的提取物黃芪總皂苷0.1～100份；該藥物組合物可以以原藥材或提取物投料制成各種藥學上可接受的劑型，優(yōu)選注射劑和口服制劑；具有抗腫瘤、抗肝損害、解毒、抗菌和增強機體免疫力等作用。
文檔編號A61K31/715GK1961894SQ20051004506
公開日2007年5月16日 申請日期2005年11月10日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月10日
發(fā)明者黃振華 申請人:黃振華