專(zhuān)利名稱(chēng)：17β－二氫馬萘雌酮作為抗氧化劑的用途的制作方法
生物學(xué)上生成的自由基與許多疾病均有連帶關(guān)系，需氧生物在有氧環(huán)境中的存活涉及這些極具活性的化學(xué)基團(tuán)的生物生成與生物控制它們的能力之間復(fù)雜的相互作用(Del Maestro RF，Acta Phy ScanSuppl.492153-68(1980))，宿主生物與生物學(xué)上生成的自由基之間的這種相互作用導(dǎo)致了以生物細(xì)胞的損傷和死亡為終結(jié)的深?yuàn)W的生物化學(xué)變化。自由基反應(yīng)積累的產(chǎn)物導(dǎo)致了許多疾病，這些疾病已被認(rèn)為部分地起因于增長(zhǎng)的細(xì)胞內(nèi)自由基通量誘發(fā)的細(xì)胞損傷，這些疾病包括(但不局限于)癌癥、心血管疾病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)紊亂、骨疾、衰老、阿爾茨海默氏癡呆、炎癥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、自身免疫疾病、呼吸窘迫和肺氣腫。
自由基損害與許多疾病的聯(lián)系被廣為報(bào)道，包括酶、離子通道、結(jié)構(gòu)蛋白和膜脂質(zhì)的許多細(xì)胞成分均是活性自由基的潛在目標(biāo)(Rice-Evans C，Mol Aspects of Med 13(1)1-111(1992))，處于合適位點(diǎn)的抗氧化劑會(huì)限制該損害，與這些潛在目標(biāo)的自由基反應(yīng)可以影響一系列的細(xì)胞功能而導(dǎo)致病變和最終的細(xì)胞死亡，處于潛在反應(yīng)位點(diǎn)的抗氧化劑會(huì)限制該損害，抗氧化劑在保護(hù)DNA、蛋白質(zhì)(包括脂蛋白)和膜脂質(zhì)免于氧化性損害中起著重要的作用。
有強(qiáng)有力的證據(jù)證明自由基損害造成許多慢性健康問(wèn)題，對(duì)于大多數(shù)人類(lèi)疾病而言，由內(nèi)源產(chǎn)生的氧化劑對(duì)初期疾病過(guò)程是次要的，但氧化性損害加重了初期的損傷，例如，再灌注損傷可以被定義為發(fā)生于局部缺血發(fā)作之后恢復(fù)血流時(shí)器官的損害。盡管是必需的，但是氧恢復(fù)增加了在損傷的組織中氧化劑的形成并暫時(shí)惡化了該損傷(UraizeeA，Circulaton 75(6)1237-1248(1987))。Guanieri描述了在缺氧心肌中抗氧化劑防御的減少然后隨著重新充氧作用而脂質(zhì)過(guò)氧化的增加(Biochim-Biophys-ACTA718(2)157-164(1982))。在再灌注損傷中，局部缺血后由于粘連和激活中性白細(xì)胞，在內(nèi)皮損傷位點(diǎn)處的炎癥反應(yīng)導(dǎo)致產(chǎn)生超氧化物。在許多不同的臨床情況中，也增加了肝臟中氧自由基的產(chǎn)生。在病毒性肝炎和慢性活動(dòng)性肝炎中，肝臟中累積了大量被刺激的巨噬細(xì)胞，它們產(chǎn)生自由基，由于肝臟中增加了常由細(xì)胞色素P-450介導(dǎo)的自由基的生成，大量有毒的化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致肝中毒性損傷?？梢詳喽◤蔫F蛋白釋放出的鐵催化羥基的生成是許多肝臟病易發(fā)的機(jī)理(Lee WM，N Eng J of Med；Review P.1118(1995))。
氧化和抗氧化劑的使用對(duì)于許多炎癥疾病的治療也是很重要的，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是最常見(jiàn)的慢性炎性疾病，流行病學(xué)研究表明標(biāo)準(zhǔn)和明確的RA流行率在0.3％和1.5％之間。慢性持續(xù)性炎性關(guān)節(jié)疾病伴隨有在發(fā)炎的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)里H2O2的生成，在發(fā)炎期間，多形核白細(xì)胞(PMN)和巨噬細(xì)胞也尤其產(chǎn)生氧自由基。在任何慢性或急性炎癥疾病中，PMN和巨噬細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生O2-和H2O2。結(jié)核病、牛皮癬、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、其它自身免疫疾病和成人呼吸窘迫綜合癥也可以被稱(chēng)為伴隨氧化作為主要因素的炎性疾病，許多其它疾病也可以列入該行列中。
在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)創(chuàng)傷和中風(fēng)(例如局部缺血)領(lǐng)域中，氧自由基的生成和脂質(zhì)過(guò)氧化過(guò)程也已成為研究人員關(guān)注的焦點(diǎn)。許多研究提供了大量的證據(jù)證明了在損傷或局部缺血的CNS中存在著自由基和脂質(zhì)過(guò)氧化的反應(yīng)((Hall ED，J-Neurotrauma 9(Suppl.l)S165-S172(1992))。
已建議抗氧化劑可保護(hù)性抗乳癌和抗其它癌(包括腦癌和肝癌)，以及保護(hù)性抗心血管疾病和骨質(zhì)疏松((Wiseman H，F(xiàn)ree Radical Res2l(3)187-94(1994))。已經(jīng)證明這些抗氧化劑保護(hù)模型和細(xì)胞膜(包括核膜)以對(duì)抗可能致癌的自由基中間體和脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物。人們已將對(duì)于與動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)的嚴(yán)重綜合癥和其通常發(fā)病率的注意力集中在能夠通過(guò)抗氧化劑保護(hù)低密度脂蛋白(LDL)免受氧化損傷的能力來(lái)預(yù)防和治療該血管疾病上(Steinberg D，N Engl J of Med 14915-924(1989))。
發(fā)明描述本發(fā)明提供了將抗氧化劑量的17β-二氫馬萘雌酮或其3-硫酸酯藥用鹽給入需要的哺乳類(lèi)動(dòng)物治療或抑制自由基誘導(dǎo)的疾病的方法。依此推論，本發(fā)明提供了處理哺乳類(lèi)動(dòng)物中自由基與酶、離子通道、結(jié)構(gòu)蛋白和膜脂質(zhì)反應(yīng)的方法，該方法包括給入作為犧牲底物的17β-二氫馬萘雌酮或其藥用硫酸酯鹽，其量足以選擇性地與同患者的酶、離子通道、結(jié)構(gòu)蛋白和膜脂質(zhì)反應(yīng)的自由基反應(yīng)并抑制自由基與患者的酶、離子通道、結(jié)構(gòu)蛋白和膜脂質(zhì)的反應(yīng)，其中確定用抗氧化劑治療有保證的具體病癥是癌癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)紊亂、骨疾、衰老、炎癥、末梢血管疾病、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、自身免疫疾病、呼吸窘迫、肺氣腫、預(yù)防重新灌注損傷、病毒性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎、結(jié)核病、牛皮癬、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、成人呼吸窘迫綜合癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)創(chuàng)傷和中風(fēng)。
作為本發(fā)明的用途，處理包括現(xiàn)有疾病的治療、改善疾病或減輕疾病，抑制包括抑制或預(yù)防疾病的發(fā)展或擴(kuò)散。
17β-二氫馬萘雌酮3-硫酸酯藥用鹽包括(但不局限于此)堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銨鹽、含有1-6個(gè)碳原子的烷基胺鹽或在各自的烷基基團(tuán)中含有1-6個(gè)碳原子的二烷基胺鹽。
采用標(biāo)準(zhǔn)的藥理測(cè)試方法確定17β-二氫馬萘雌酮抗氧化劑性能，該方法通過(guò)TBARS(硫代巴比妥酸活性物質(zhì))方法分析游離醛(YagiK.，Biochem Med 15212-216(1976))以測(cè)定其對(duì)由暴露在Cu++離子或培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞中誘導(dǎo)的氧化變性的低密度脂蛋白(LDL)的形成的抑制能力(Parthasarathy S，Proc Natl Acad Sci USA 861046-1050(1989))。
用該標(biāo)準(zhǔn)藥理測(cè)試方法得到的結(jié)果表明17β-二氫馬萘雌酮是有效的LDL氧化反應(yīng)抑制劑，即抑制可達(dá)至多100％，在豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞介導(dǎo)的氧化試驗(yàn)中得到的IC50值為0.315μM。由比較，在該測(cè)試方法中，得到雌酮的IC50值為0.56μM。
基于這些測(cè)試方法得到的結(jié)果，17β-二氫馬萘雌酮和其硫酸酯的藥用鹽作為抗氧化劑可用于治療或抑制自由基誘導(dǎo)的疾病，所述藥用鹽如堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銨鹽、含有1-6個(gè)碳原子的烷基胺鹽或在各自的烷基基團(tuán)中含有1-6個(gè)碳原子的二烷基胺鹽。
本發(fā)明抗氧化劑可配制成純品給藥或與藥用載體一起配制給藥，通過(guò)化合物的溶解度和化學(xué)性質(zhì)、選擇的給藥途徑和標(biāo)準(zhǔn)藥理學(xué)實(shí)踐來(lái)確定載體的比例。藥用載體可以是固體或液體。
固體載體可以包括一種或多種物質(zhì)，該物質(zhì)也可以起矯味劑、潤(rùn)滑劑、增溶劑、懸浮劑、填充劑、助流劑、壓縮助劑、粘合劑或片劑崩解劑的作用；固體載體也可以是包膠物質(zhì)。在粉劑中，載體是細(xì)分的固體，該固體與細(xì)分的活性成分混合。在片劑中，活性成分與具有所需壓縮性質(zhì)的載體以合適的比例混合并被壓成所需的形狀和大小。優(yōu)選粉劑和片劑含有至多達(dá)99％的活性成分。合適的固體載體包括磷酸鈣、硬脂酸鎂、滑石、蔗糖、乳糖、糊精、淀粉、明膠、纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮、低熔點(diǎn)蠟和離子交換樹(shù)脂。
液體載體用于制備溶液、懸浮液、乳劑、糖漿、酏劑和加壓組合物?；钚猿煞帜鼙蝗芙庥诨驊腋∮谒幱靡后w載體，如水、有機(jī)溶劑、兩者的混合物或藥用油或脂肪中，液體載體能夠含有其它合適的藥用添加劑，如增溶劑、乳化劑、緩沖液、防腐劑、甜味劑、矯味劑、懸浮劑、增稠劑、色素、黏度調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑或滲透調(diào)節(jié)劑?？诜湍c胃外給藥的液體載體合適的實(shí)例包括水(部分地含有如上的添加劑，如纖維素衍生物，優(yōu)選羧甲基纖維素鈉溶液)、醇(包括一羥基醇和多羥基醇，如乙二醇)和它們的衍生物、lethicins和油(如精餾的椰子油和花生油)。對(duì)于腸胃外給藥，載體也可以是油脂，如油酸乙酯和肉豆蔻異丙酸酯。無(wú)菌液載體用于腸胃外給藥的無(wú)菌液形式的組合物中，對(duì)于加壓組合物的液體載體能夠是鹵化的烴或其它藥用推進(jìn)劑。
無(wú)菌溶液或懸浮液的液體藥物組合物可以通過(guò)例如肌內(nèi)、腹膜內(nèi)或皮下注射使用。無(wú)菌溶液也能夠靜脈給藥，本發(fā)明的化合物也能夠以液體或固體組合物的形式口服給藥。
本發(fā)明抗氧化劑可以常規(guī)栓劑的形式經(jīng)直腸給入，為了由鼻內(nèi)或支氣管內(nèi)吸入或吹入給藥，可以將本發(fā)明抗氧化劑配制成水溶液或部分水溶液，然后使其能夠以氣霧劑的形式使用，本發(fā)明化合物也可以通過(guò)含有活性化合物和載體的透皮片經(jīng)皮給入，所述載體對(duì)于活性化合物是惰性的、對(duì)于皮膚是無(wú)毒的、并可通過(guò)皮膚使傳輸?shù)乃巹┤硇晕降窖髦小］d體可采取多種形式，如霜?jiǎng)┖蛙浉鄤?、糊劑、凝膠和閉合裝置。霜?jiǎng)┖蛙浉鄤┛梢允撬托突蛴桶偷恼吵硪后w或半固態(tài)乳劑，在含有活性成分的石油或親水石油中分散的吸附性粉末組成的糊劑也是適用的。也可以利用多種閉合裝置將活性成分釋放到血流中，如覆蓋含有活性成分、有或無(wú)載體的儲(chǔ)層的半透膜或含有活性成分的基質(zhì)，其它閉合裝置見(jiàn)于文獻(xiàn)中。
此外，通過(guò)與藥用賦形劑配制成含有0.1-5％(優(yōu)選2％)活性化合物的制劑，本發(fā)明抗氧化劑可以作為溶液、霜?jiǎng)┗蛳匆菏褂檬┯谡婢饔玫膮^(qū)域。
所需劑量隨所用具體組合物、給藥途徑、呈現(xiàn)癥狀的嚴(yán)重性和被治療的具體客體而變化，基于標(biāo)準(zhǔn)藥理測(cè)試方法得到的結(jié)果，設(shè)計(jì)的活性化合物的日劑量應(yīng)為0.02μg/kg-500μg/kg，通過(guò)用少于化合物的最佳劑量的小劑量開(kāi)始治療。然后，增加劑量至達(dá)到治療環(huán)境下的最佳效果；藥劑師會(huì)根據(jù)治療各客體的經(jīng)驗(yàn)確定口服、腸胃外、鼻內(nèi)或腹膜內(nèi)給藥的精確劑量，優(yōu)選藥物組合物是單位劑量形式，例如，片劑或膠囊，在該形式中，組合物被再分為含有合適量活性成分的單位劑量；單位劑量形式可以是被包裝的組合物，例如，是被包裝的粉劑，可以是藥瓶、安瓿、預(yù)填充注射器或含液體的sachets。單位劑量形式可以是例如膠囊或片劑本身，或可以是包裝形式下合適數(shù)量的任何所述組合物。
權(quán)利要求
1.抑制或治療自由基誘導(dǎo)的疾病的方法，該方法為將抗氧化劑量的17β-二氫馬萘雌酮或17β-二氫馬萘雌酮-3-硫酸酯的藥用鹽用于需要的哺乳類(lèi)動(dòng)物。
2.權(quán)利要求1的方法，其中3-硫酸酯的藥用鹽是堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銨鹽、含有1-6個(gè)碳原子的烷基胺鹽或在各烷基基團(tuán)中含有1-6個(gè)碳原子的二烷基胺鹽。
3.抑制需要相應(yīng)治療的哺乳類(lèi)動(dòng)物中自由基與酶、離子通道、結(jié)構(gòu)蛋白和膜脂質(zhì)反應(yīng)的方法，該方法包括使用作為犧牲底物的17β-二氫馬萘雌酮或17β-二氫馬萘雌酮-3-硫酸酯的藥用鹽，其量足以選擇性地與同所述哺乳類(lèi)動(dòng)物的酶、離子通道、結(jié)構(gòu)蛋白和膜脂質(zhì)反應(yīng)的自由基反應(yīng)并抑制自由基與所述哺乳類(lèi)動(dòng)物的酶、離子通道、結(jié)構(gòu)蛋白和膜脂質(zhì)的反應(yīng)。
4.抑制與下列疾病的的發(fā)展有關(guān)的內(nèi)源性自由基的方法，所述疾病為癌癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)紊亂、阿爾茨海默氏病、骨疾、衰老、炎癥、末梢血管疾病、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、自身免疫疾病、呼吸窘迫、肺氣腫、預(yù)防重新灌注損傷、病毒性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎、結(jié)核病、牛皮癬、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、成人呼吸窘迫綜合癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)創(chuàng)傷和中風(fēng)，或在重新灌注過(guò)程中的損傷，該方法包括使用17β-二氫馬萘雌酮或17β-二氫馬萘雌酮-3-硫酸酯的藥用鹽。
全文摘要
本發(fā)明提供了用17β－二氫馬萘雌酮或17β－二氫馬萘雌酮－3－硫酸酯的藥用鹽作為抗氧化劑的方法。
文檔編號(hào)A61P25/28GK1239891SQ97180447
公開(kāi)日1999年12月29日 申請(qǐng)日期1997年12月5日 優(yōu)先權(quán)日1996年12月10日
發(fā)明者S·J·阿德曼, D·H·普羅茲勒克 申請(qǐng)人:美國(guó)家用產(chǎn)品公司