專(zhuān)利名稱(chēng)：雙(氰基苯基)甲基－三唑在預(yù)防乳腺癌中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及下式(I)的雙(氰基苯基)甲基-三唑(下文稱(chēng)“化合物I”)或其可藥用鹽的用途，用于制備藥物組合物，其中所述藥物組合物在哺乳動(dòng)物中用于預(yù)防對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病。
化合物I也已知為來(lái)曲唑(Letrozole)[國(guó)際非專(zhuān)利商標(biāo)名]。
化合物I，在1987年9月16日公開(kāi)的歐洲專(zhuān)利0236940號(hào)，1990年12月18日公開(kāi)的美國(guó)專(zhuān)利4,978,672號(hào)和日本專(zhuān)利2018112號(hào)中均以本申請(qǐng)人的名義，已經(jīng)進(jìn)行了明確描述。
化合物I最初鑒定為芳香化酶的抑制劑。
芳香化酶是負(fù)責(zé)雌激素合成最后一步的酶復(fù)合體，其將雄激素雄烯二酮和睪酮轉(zhuǎn)化為雌激素雌酮(E1)和雌二醇(E2)。有相當(dāng)多的數(shù)據(jù)顯示雌激素促進(jìn)乳腺癌。越來(lái)越多地認(rèn)為女性乳腺自身為雌激素產(chǎn)生的另一個(gè)重要部位。乳腺脂肪組織的基質(zhì)細(xì)胞以旁分泌和自分泌這兩種方式產(chǎn)生有生物學(xué)活性的雌激素。這可能是觀察到的在絕經(jīng)后婦女的健康乳房中雌激素濃度比血清中雌激素濃度出乎意料的高(4至6倍)并和絕經(jīng)前婦女健康乳房中雌激素濃度相似的原因。此外，達(dá)70％乳腺癌細(xì)胞顯示由于細(xì)胞內(nèi)芳香化酶表達(dá)而合成雌激素。這解釋了為什么芳香化酶的表達(dá)和活性在乳腺腫瘤中高于腫瘤周?chē)?，并解釋了為什么芳香化酶的表達(dá)和活性在乳房的荷瘤扇形區(qū)中較沒(méi)有腫瘤的乳房高。在合成源抑制雌激素因此是治療乳腺腫瘤合理的靶。
化合物I已經(jīng)已知是一種芳香化酶抑制劑并用于治療乳腺癌。
現(xiàn)在令人驚訝地發(fā)現(xiàn)化合物I具有治療性質(zhì)，使它在哺乳動(dòng)物中用于預(yù)防對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病特別有用。這個(gè)化合物顯示了消除雌激素介導(dǎo)的引發(fā)乳腺癌的出乎意料的高潛力。特別出乎意料的是這種化合物的較低劑量仍顯示了消除雌激素介導(dǎo)的引發(fā)乳腺癌的高潛力，而不會(huì)影響正常生理功能。的確，特別驚訝的是使用對(duì)哺乳動(dòng)物的雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響的化合物I的劑量，顯示了消除雌激素介導(dǎo)的引發(fā)乳腺癌的高潛力。
本發(fā)明因此涉及化合物I用于制備藥物組合物的用途，其中所述藥物組合物用于預(yù)防對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病。
本發(fā)明更特別地涉及化合物I用于制備藥物組合物的用途，其中所述藥物組合物用于抑制婦女，特別是絕經(jīng)后的婦女或易患乳腺癌的婦女乳腺癌的發(fā)展。
本發(fā)明更特別地涉及化合物I用于制備藥物組合物的用途，其中所述藥物組合物用于抑制婦女，特別是絕經(jīng)后的婦女或易患乳腺癌的婦女乳腺癌的發(fā)展，其特征在于化合物I的劑量或日劑量對(duì)哺乳動(dòng)物的雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響。
本發(fā)明更特別地涉及化合物I的用途，其用于制備單位劑型包含0.1至0.3mg，優(yōu)選地包含0.125至0.25mg化合物I的藥物組合物。
本發(fā)明更特別地涉及化合物I的用途，其用于制備單位劑型包含一定量化合物I的藥物組合物，其中所述化合物I的量對(duì)哺乳動(dòng)物的雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響。
在第二個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及化合物I的用途，其用于制備單位劑型包含0.001至0.11mg，優(yōu)選地包含0.001至0.099mg或0.001至0.09mg，最優(yōu)選地包含0.002至0.02mg化合物I的藥物組合物。
又在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于預(yù)防對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病的方法，該方法包括向需要此種治療的哺乳動(dòng)物施用治療有效量的化合物I或其可藥用鹽。
又在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于預(yù)防對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病的方法，該方法包括向需要此種治療的哺乳動(dòng)物施用治療有效量的化合物I或其可藥用鹽，其中化合物I的治療有效量對(duì)哺乳動(dòng)物的雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響。
優(yōu)選的哺乳動(dòng)物為人，特別是絕經(jīng)后的婦女或易患乳腺癌的婦女。
優(yōu)選地，在哺乳動(dòng)物中該方法使用的化合物I的日劑量較對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病進(jìn)行治療性治療需要的日劑量低8.3至25倍。用比這些疾病的治療性治療所需要的日劑量低10至20倍的劑量得到好的結(jié)果并用10至16.7倍的低劑量得到最好結(jié)果。
優(yōu)選地，該方法用于抑制乳腺癌的發(fā)展。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，抑制婦女乳腺癌發(fā)展的化合物I的日有效量為0.1至0.3mg，優(yōu)選地為0.125mg至0.25mg，最優(yōu)選地為0.15至0.25mg。
在第二個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，抑制婦女乳腺癌發(fā)展的化合物I的日有效量為0.001至0.11mg，優(yōu)選地為0.001至0.099mg或0.001至0.09mg，最優(yōu)選地為0.002至0.02mg。
在一個(gè)最優(yōu)選的實(shí)施方案中，抑制婦女乳腺癌發(fā)展的化合物I的日有效量對(duì)受治療婦女的雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響。
優(yōu)選地，化合物I向人類(lèi)受試者施用至少3周以上，其中只在此時(shí)間期間的約14.2％天至約42.8％天施用。
優(yōu)選地，化合物I向人類(lèi)受試者施用3周或更長(zhǎng)時(shí)間，其間1周施用1次或2次或3次，隔日進(jìn)行。
優(yōu)選地，將周劑量方案進(jìn)行3、4、5、6、7或8周。每個(gè)治療期可接著1至3周不施用藥劑，例如2周不施用藥劑。這個(gè)循環(huán)重復(fù)進(jìn)行1至幾個(gè)循環(huán)，例如從3或4個(gè)循環(huán)至8個(gè)或更多個(gè)循環(huán)。優(yōu)選地，在治療期間，為了對(duì)患者的雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響，實(shí)施該周劑量方案。
在治療的備選方法中，化合物I向人類(lèi)受試者每周施用7至4次，或在時(shí)間期間的約100％天至約50％天隔日施用，即一天一次或兩天一次，施用1至3周，例如2周，接著1至3周不施用藥劑，例如2周不施用藥劑。這個(gè)循環(huán)重復(fù)進(jìn)行1至幾個(gè)循環(huán)，例如從3或4個(gè)循環(huán)至8或更多個(gè)循環(huán)。優(yōu)選地，在治療方法中，在治療期間，為了對(duì)患者的雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響，實(shí)施該周劑量方案。
一個(gè)優(yōu)選的實(shí)例為每?jī)商煲淮问┯?.01至0.04mg，優(yōu)選施用0.02mg。第二個(gè)優(yōu)選的實(shí)例為每天施用0.001至0.004mg，優(yōu)選施用0.002mg。
在本發(fā)明的第三個(gè)方面，提供了一種制品，其包括包裝材料和在所述包裝材料中包含的化合物I或其可藥用鹽，其中所述包裝材料包含標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)，其中所述標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)標(biāo)明了所述化合物I或所述化合物I的可藥用鹽對(duì)婦女特別是絕經(jīng)后的婦女遵循一個(gè)具體的劑量方案施用從約0.1mg至約0.3mg，優(yōu)選地從約0.125mg至約0.25mg的量，以抑制乳腺癌的發(fā)展。在第二個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，抑制婦女乳腺癌發(fā)展的化合物I的有效量為0.001至0.11mg，優(yōu)選0.001至0.099mg或0.001至0.09mg，最優(yōu)選0.002至0.02mg。
在一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了這樣的藥物組合物，其中包含的化合物I的量比用于預(yù)防性治療哺乳動(dòng)物中對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病需要的日劑量低8.3至25倍。觀察到的最好結(jié)果是比日劑量低10至20倍優(yōu)選低10至16.7倍。
在本發(fā)明的另一方面，提供了一種制品，其包括包裝材料和在所述包裝材料中包含的化合物I或其可藥用鹽，其中所述包裝材料包含標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)，其中所述標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)標(biāo)明了所述化合物I或所述化合物I的可藥用鹽對(duì)婦女特別是絕經(jīng)后的婦女遵循一個(gè)具體的劑量方案施用，施用量對(duì)雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響，以抑制乳腺癌的發(fā)展。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了單位劑型包含0.1至0.3mg，優(yōu)選0.125至0.25mg化合物I的藥物組合物，用于婦女中對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病的預(yù)防性治療。
在一個(gè)最優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了包含0.15至0.25mg化合物I的藥物組合物，用于人類(lèi)對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病的預(yù)防性治療。
在第二個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了包含0.001至0.11mg，優(yōu)選0.001至0.099mg或0.001至0.09mg，最優(yōu)選0.002至0.02mg化合物I的藥物組合物，用于人類(lèi)對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病的預(yù)防性治療。
優(yōu)選地，包含0.125至0.3mg或0.002至0.02mg化合物I的藥物組合物用于婦女中乳腺癌的預(yù)防性治療。
在一個(gè)最優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了這樣的藥物組合物，其單位劑型包含的化合物I的量對(duì)哺乳動(dòng)物中雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響，所述藥物組合物用于乳腺癌的預(yù)防性治療。
在以前的研究中顯示通過(guò)用5μg化合物I/小鼠/天，這個(gè)劑量是基于以前動(dòng)物研究的劑量，我們可完全消除芳香化酶誘導(dǎo)的腫瘤發(fā)生前的變化/腫瘤性變化。然而，所選擇的劑量在這些動(dòng)物中不僅對(duì)消除芳香化酶誘導(dǎo)的惡變前變化非常有效，也影響一些正常的內(nèi)分泌功能?，F(xiàn)在的發(fā)現(xiàn)表明用低劑量的化合物I可消除轉(zhuǎn)基因小鼠中雌激素介導(dǎo)乳腺癌的引發(fā)而不影響正常生理功能。我們的數(shù)據(jù)清楚地表明了化合物I，甚至用如此處所述的較低劑量使用時(shí)，在消除芳香化酶誘導(dǎo)的乳腺增生中非常有效。我們的數(shù)據(jù)顯示我們可通過(guò)用對(duì)子宮和卵巢的組織形態(tài)學(xué)特征無(wú)影響的低劑量化合物I(每只動(dòng)物每天0.25、0.5μg或1μg，優(yōu)選0.25和0.5μg)完全消除芳香化酶誘導(dǎo)的腫瘤發(fā)生前的變化。
這些出乎意料的好結(jié)果是通過(guò)如此處所述的試驗(yàn)中研究化合物I的作用獲得的；
特別地，結(jié)果數(shù)據(jù)顯示我們可通過(guò)用低劑量的化合物I(每只動(dòng)物每天0.25或0.5μg)完全消除芳香化酶誘導(dǎo)的腫瘤發(fā)生前的變化。這些劑量對(duì)子宮和卵巢無(wú)影響。對(duì)照組(12.5pg/ml)和用低劑量化合物I(每只動(dòng)物每天0.25或0.5μg)處理的個(gè)體組間在循環(huán)雌激素水平上(分別為12.1和12.5pg/ml)沒(méi)有顯著差異。對(duì)照組和用0.5μg化合物I處理的動(dòng)物間在循環(huán)FSH水平上(200ng/ml)無(wú)顯著差異。我們也注意到受治療的動(dòng)物用低劑量化合物I(每只動(dòng)物每天0.25或0.5μg)在PCNA和細(xì)胞周期蛋白D1水平上無(wú)顯著變化，其中所述PCNA和細(xì)胞周期蛋白D1也是雌激素介導(dǎo)的增生的好標(biāo)志物。這與觀察到的低劑量化合物(每只動(dòng)物每天0.25或0.5μg)對(duì)子宮和卵巢的組織形態(tài)學(xué)特征沒(méi)有影響一致。子宮標(biāo)志物乳鐵蛋白的表達(dá)顯示對(duì)照與0.25和0.5μg處理的動(dòng)物間沒(méi)有差異。
這些研究表明用非常低濃度的芳香化酶抑制劑可消除轉(zhuǎn)基因小鼠中雌激素介導(dǎo)的乳腺癌的引發(fā)，而不影響子宮和卵巢的正常功能。
血中雌激素和其它激素水平通常用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法)或RIA(放射免疫測(cè)定法)進(jìn)行測(cè)定，其中所述兩種方法可從多個(gè)供應(yīng)商處獲得并為本領(lǐng)域熟知。更敏感和更復(fù)雜并因此不常用的方法為HPLC(高效液相色譜法)或質(zhì)譜法。
因此，顯示化合物I非常適用于預(yù)防哺乳動(dòng)物中對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病，特別是用比哺乳動(dòng)物中對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病的治療性治療需要的日劑量低8.3至25倍的日劑量。觀察到的最好結(jié)果是用低10至20倍優(yōu)選地用低10至16.7倍的日劑量。
因此，顯示化合物I非常適用于預(yù)防哺乳動(dòng)物中對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病，特別是用在哺乳動(dòng)物中對(duì)雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響的劑量或日劑量。
此處應(yīng)用的術(shù)語(yǔ)“對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病”包括但不限于乳腺癌。
此用應(yīng)用的術(shù)語(yǔ)“在哺乳動(dòng)物中對(duì)雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響”是指沒(méi)有用化合物I治療的患者和用化合物I治療的患者間的雌二醇和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著差異。
此處應(yīng)用的術(shù)語(yǔ)“無(wú)顯著影響”是指雌二醇和/或促卵泡激素循環(huán)水平的變化相對(duì)于治療前的對(duì)照水平不超過(guò)15％，優(yōu)選地不超過(guò)10％，最優(yōu)選不超過(guò)5％。
乳腺癌是婦女，特別是35歲以上婦女的主要醫(yī)學(xué)問(wèn)題?，F(xiàn)在，估計(jì)婦女在她們的一生中，9個(gè)人中有1個(gè)人有發(fā)展這種疾病的可能性。乳腺癌是引起婦女死亡的主要原因，也是引起勞動(dòng)能力喪失、心理創(chuàng)傷和經(jīng)濟(jì)損失的原因。很多患此病的婦女最終死于它的直接影響或來(lái)自其并發(fā)癥的間接影響。
此用應(yīng)用的術(shù)語(yǔ)“治愈性”是指治療哺乳動(dòng)物中對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的持久性疾病中有效。
在本說(shuō)明書(shū)中，術(shù)語(yǔ)“預(yù)防性”包括治療處于有患病危險(xiǎn)或疑似患病的患者，以避免對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病的發(fā)生或復(fù)發(fā)(即抑制乳腺癌的發(fā)展)。
此處應(yīng)用的術(shù)語(yǔ)“抑制乳腺癌的發(fā)展”主要是指抑制正常乳腺細(xì)胞向癌細(xì)胞或惡性細(xì)胞從頭轉(zhuǎn)化的狀況。然而，可能有婦女臨床上在她們的乳房中沒(méi)有檢測(cè)到癌細(xì)胞的情形，抑制這樣的、迄今臨床上不顯著的癌的發(fā)展也形成本發(fā)明的一部分。治療現(xiàn)存的、臨床上可檢測(cè)的乳腺癌不包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
術(shù)語(yǔ)“易患乳腺癌的婦女”涉及與內(nèi)科醫(yī)生公知的一些特定標(biāo)準(zhǔn)有關(guān)的婦女，其中所述標(biāo)準(zhǔn)如年齡(這時(shí)，年齡是主要的可鑒別的危險(xiǎn)度因子。超過(guò)80％的乳腺癌病例發(fā)生于50歲以上的婦女)、種族、遺傳因素和家族史(所有患乳腺癌的婦女估計(jì)10％有該病的強(qiáng)家族史，這常出現(xiàn)在年齡低于50歲的年輕婦女——現(xiàn)在認(rèn)為是基因中已知為BRCA1或BRCA2基因的遺傳突變引起了30％至50％的乳腺癌)、過(guò)度暴露于雌二醇(因?yàn)槿榉拷M織的生長(zhǎng)對(duì)雌二醇高度敏感，婦女一生中暴露于雌二醇越多，患乳腺癌的危險(xiǎn)性越高)、體格特征、某些乳房異常。
為了證明化合物I特別適用于預(yù)防對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病、化合物I具有好的治療安全系數(shù)和其它優(yōu)點(diǎn)，可用技術(shù)人員公知的方法進(jìn)行臨床試驗(yàn)。
現(xiàn)在應(yīng)用于婦女對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)疾病的治療性治療的化合物I的劑量為每日口服量2.5mg。
用于預(yù)防對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)抑制雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病的化合物I的精確劑量取決于幾個(gè)因素，包括宿主、正在被治療的疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重性及施用方式。然而，當(dāng)化合物I在人中腸胃外施用(檢查優(yōu)選的施用途徑)，如腹膜內(nèi)注射、靜脈內(nèi)注射、肌內(nèi)注射、皮下注射、瘤內(nèi)注射或直腸施用、或腸內(nèi)施用如口服時(shí)，日劑量0.1至0.3mg，優(yōu)選0.125至0.25mg可達(dá)到滿意的預(yù)防。最優(yōu)選在哺乳動(dòng)物中對(duì)雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響的劑量或日劑量。
最優(yōu)選地，化合物I通過(guò)劑型如微乳劑、軟凝膠劑或固體分散劑口服施用，劑量為0.1至0.25mg/天，每天最多施用3次。最優(yōu)選在哺乳動(dòng)物中對(duì)雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響的劑量或日劑量。
劑量上限是由副作用所決定并可通過(guò)試驗(yàn)確定正在進(jìn)行治療宿主的劑量上限。
預(yù)防性治療常常是長(zhǎng)期治療，因此治療方案應(yīng)適應(yīng)減少體內(nèi)化合物I累積的危險(xiǎn)和減少治療起始后幾周可能發(fā)生的隨后肝臟酶升高的危險(xiǎn)。所采用的治療方案也應(yīng)避免針對(duì)化合物I藥理作用抗性的發(fā)展，或應(yīng)避免對(duì)正在治療的宿主藥理作用的降低。
在進(jìn)一步的方面，為了降低上述危險(xiǎn)，本發(fā)明涉及這樣的治療方案，其中對(duì)至少3周的治療方案，化合物I只在約14.2％天至約42.8％天施用。
備選地，化合物I向人類(lèi)受試者每周施用7至4次或在時(shí)間期間的約100％天至約50％天隔日施用，即一天一次或兩天一次，施用1至3周，例如2周，接著1至3周不施用藥劑，例如2周不施用藥劑。這個(gè)循環(huán)重復(fù)1至幾個(gè)循環(huán)，例如3或4個(gè)循環(huán)至8個(gè)循環(huán)。
在所述治療方案或制品中，雙(氰基苯基)甲基-三唑的有效量可以為如于此描述的藥物組合物形式。
化合物I以單位劑型包含0.1至0.3mg，優(yōu)選0.125至0.25mg，最優(yōu)選0.15至0.25mg施用。最優(yōu)選地單位劑型對(duì)哺乳動(dòng)物中雌二醇循環(huán)水平和/或促卵泡激素循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響。
如此處應(yīng)用的，表達(dá)“周”是指連續(xù)7天。因此3周為從日歷周任何一天開(kāi)始的連續(xù)21天。施用第一個(gè)劑量的那天認(rèn)為是周的第一天。任何用日歷周的討論只用于闡述的目的。
化合物I可與一種或多種可藥用載體組合，并任選地與一種或多種其它常規(guī)的藥用輔劑組合，以片劑、膠囊劑、囊形片劑等的形式腸內(nèi)施用，例如口服，或以無(wú)菌可注射溶液或無(wú)菌可注射懸液的形式腸胃外施用，例如腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)施用。腸內(nèi)和腸胃外組合物可通過(guò)常規(guī)方法制備。
本發(fā)明的輸注液更優(yōu)選為無(wú)菌的。這例如通過(guò)無(wú)菌濾膜過(guò)濾易于實(shí)現(xiàn)。液體形式的任何組合物的無(wú)菌形式、無(wú)菌填充小藥瓶和/或本發(fā)明的藥物組合物在無(wú)菌條件下與合適的稀釋劑的組合是本領(lǐng)域人員公知的。
化合物I在這些病理中可單獨(dú)應(yīng)用或與至少一種其它的藥學(xué)活性化合物組合應(yīng)用。這些活性化合物可組合入同一藥物制劑，或這些活性化合物可為組合制劑“組分包(kit ofb part)”的形式，因?yàn)榻M合的各組分可獨(dú)立施用或可通過(guò)使用不同的固定組合施用，其中所述不同的固定組合為具有不同量的各組合組分，其中所述的施用即同時(shí)施用或在不同的時(shí)間點(diǎn)施用。然后組分包的各組分可例如同時(shí)施用或時(shí)間上錯(cuò)后地施用，其中所述時(shí)間上錯(cuò)后地施用即對(duì)組分包的任一組分在不同時(shí)間點(diǎn)并且以相同或不同的時(shí)間間隔施用。
此后描述的為有用組合物的兩個(gè)非限制性實(shí)例。
組合物A制備10000片100mg片劑，每片包含0.2mg活性成分式(I)的雙(氰基苯基)甲基-三唑 2.00g
膠態(tài)二氧化硅 2.00g微晶纖維素 100.00g噴霧干燥的乳糖 836.00g硬脂酸鎂 10.00g羥甲基纖維素鈉 50.00g1000.00g所有片芯的組分混合在一起。一旦獲得均質(zhì)的混合物，就壓成片芯。
組合物B制備10000片100mg片劑，每片包含0.15mg活性成分式(I)的雙(氰基苯基)甲基-三唑 1.5g結(jié)晶乳糖 741.50g微晶纖維素 237.00g膠態(tài)二氧化硅 10.00g硬脂酸鎂 10.00g1000g所有片芯的組分混合在一起。一旦獲得均質(zhì)的混合物，就壓成片芯。
組合物C制備10000片100mg片劑，每片包含0.015mg活性成分式(I)的雙(氰基苯基)甲基-三唑 0.15g結(jié)晶乳糖 742.85g微晶纖維素 237.00g膠態(tài)二氧化硅 10.00g硬脂酸鎂 10.00g1000g所有片芯的組分混合在一起。一旦獲得均質(zhì)的混合物，就壓成片芯。
優(yōu)選的較低劑量片劑可例如包含0.05mg、0.02mg、0.015mg、0.01mg、0.009mg、0.008mg、0.007mg、0.006mg、0.005mg、0.004mg、0.003mg、0.002mg或0.001mg活性成分。
然而，應(yīng)清楚理解它只用作闡述的目的。
本發(fā)明也可與較低劑量的其它芳香化酶抑制劑如，阿那曲唑、醋酸甲地孕酮、伏羅唑、法倔唑、依西美坦(exemestane)、氨魯米特實(shí)施。通過(guò)代號(hào)、屬名或商品名確定的活性劑結(jié)構(gòu)可從標(biāo)準(zhǔn)提綱“Merck索引”的目前版本中或從數(shù)據(jù)庫(kù)，例如國(guó)際專(zhuān)利(例如IMS國(guó)際公開(kāi))得到。其相應(yīng)的內(nèi)容在此引用作為參考。
化合物I用于預(yù)防對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病的功效已通過(guò)此處提到的藥理試驗(yàn)進(jìn)行了證明。在較低劑量下該出乎意料的藥理活性也可用臨床研究如通過(guò)Harper-Wynne C和col.描述的方法(Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2002 Jul；11(7)614-21)進(jìn)行證實(shí)。其相應(yīng)的內(nèi)容在此引用作為參考。
藥理試驗(yàn)通過(guò)以下藥理方法進(jìn)行實(shí)施。
這些試驗(yàn)用來(lái)說(shuō)明本發(fā)明而不以任何方式限制其范圍。
1.過(guò)表達(dá)芳香化酶的轉(zhuǎn)基因小鼠和動(dòng)物的治療雌性芳香化酶轉(zhuǎn)基因小鼠在標(biāo)準(zhǔn)群中進(jìn)行維持。小鼠在AAALAC和USDA認(rèn)證的集中動(dòng)物設(shè)施中飼養(yǎng)并根據(jù)NIH用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的照料和應(yīng)用指南制定的方法進(jìn)行維持。乳腺中過(guò)表達(dá)芳香化酶的轉(zhuǎn)基因小鼠(以前稱(chēng)為int-5/芳香化酶轉(zhuǎn)基因小鼠)的產(chǎn)生以前進(jìn)行了描述(R.R.Tekmal等人，轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺中int-5/芳香化酶的過(guò)表達(dá)誘導(dǎo)增生和核異常，Cancer Res.56(1996)3180-3185)。用Southern印跡分析對(duì)所有動(dòng)物進(jìn)行基因分型并在所有實(shí)驗(yàn)中用年齡一致的非轉(zhuǎn)基因同窩出生小鼠作為對(duì)照。
2.乳腺和其它組織的形態(tài)學(xué)和組織學(xué)評(píng)估包含乳房脂肪墊的皮膚在10％中性緩沖福爾馬林中固定至少24小時(shí)。然后將乳腺與皮膚分離開(kāi)并進(jìn)行組織學(xué)檢查(D.Medina，小鼠乳房腫瘤發(fā)生中的瘤前病變，Methods Cancer Res.7(1973)3-53.514)。通過(guò)石蠟包埋固定后制備乳房組織、子宮和卵巢的常規(guī)切片，切成5μM，并用H&E染色。為免疫定位芳香化酶的表達(dá)，用芳香化酶轉(zhuǎn)基因小鼠和非轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺組織的5μM厚的切片。脫蠟和在二甲苯和乙醇中再水化后，非特異位點(diǎn)通過(guò)用含1％正常山羊血清的0.05M Tris-HCl緩沖液中孵育進(jìn)行封閉。倒出試劑后，切片用1∶100稀釋的針對(duì)大鼠芳香化酶合成肽的兔多克隆抗體覆蓋(芳香化酶抗體獲自得克薩斯大學(xué)西南醫(yī)學(xué)中心，Dallas，TX；現(xiàn)在在澳大利亞Prince Henry′s Institute，Clayon，Vic.的Dr.EvanSimpson)。樣本在濕盒中4℃孵育過(guò)夜。用0.05M Tris-HCl緩沖液洗3次后，載玻片于室溫與堿性磷酸酶連接的二級(jí)抗體孵育30分鐘并反復(fù)洗滌，切片與1％堅(jiān)牢紅/萘酚AS磷酸溶液孵育5分鐘。切片再進(jìn)行洗滌并蓋上蓋玻片，用光學(xué)顯微鏡觀察染色模式。
3.細(xì)胞的制備和特性來(lái)自我們芳香化酶群體的芳香化酶轉(zhuǎn)基因雌性小鼠和非轉(zhuǎn)基因雌性同窩出生小鼠為乳腺組織源。乳房上皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞按以前描述[B.K.Levay-Young等人，用于乳房生物學(xué)研究的原代培養(yǎng)系統(tǒng)，在D.Medina(編輯)的癌的細(xì)胞與分子生物學(xué)，Plenum Press，New York一書(shū)中的第181-204頁(yè)(1987)-F.S.Kittrel，C.J.Oborn，D.Medina，來(lái)自體內(nèi)小鼠上皮細(xì)胞系的體內(nèi)乳房的副瘤形成的發(fā)展，Cancer Res.52(1992)1924-1932.]進(jìn)行分離。對(duì)來(lái)自16周齡的處女雌性小鼠的乳腺進(jìn)行解剖，在含有抗生素的無(wú)菌磷酸緩沖鹽水中洗滌，用剃刀刀片仔細(xì)切碎，在存在0.15％膠原酶(A型；Boehirnger-Mannhem，Indianapolis，IN)的旋轉(zhuǎn)水浴中37℃分離4小時(shí)。
如前述對(duì)細(xì)胞懸液進(jìn)行差速離心以獲得上皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞。為確定上皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞的純度，用上皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞特異抗體對(duì)細(xì)胞類(lèi)型進(jìn)行免疫組織化學(xué)鑒別。上皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞鋪到有孔玻片上并用Bouin’s溶液固定。進(jìn)行細(xì)胞角蛋白和波形纖維蛋白免疫染色?；|(zhì)細(xì)胞被波形纖維蛋白抗體(Zymed)免疫染色但不被細(xì)胞角蛋白抗體免疫染色，這證實(shí)了它們的基質(zhì)細(xì)胞表型。上皮細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞角蛋白抗體(Dako)免疫染色證實(shí)了它們的上皮細(xì)胞來(lái)源。
4.用芳香化酶抑制劑的治療用年齡(約16-20周齡)的芳香化酶轉(zhuǎn)基因雌性處女小鼠研究芳香化酶抑制劑化合物I的效果，化合物I作為這些小鼠乳腺中誘導(dǎo)腫瘤前和瘤形成變化的化學(xué)預(yù)防性藥劑。在本研究中，年齡一致的轉(zhuǎn)基因雌性小鼠分為四組。一組(n＝10)作為對(duì)照組，其它組每天皮下注射化合物I，并為3種不同劑量；每只動(dòng)物施用在100μl的0.3％羥丙基纖維素(溶于磷酸緩沖鹽水)中的0.25、0.5、1.0μg化合物I。對(duì)照動(dòng)物皮下注射賦形劑?；衔颕為Novartis Pharma(Basel，瑞士)的Drs.Ajay Bhatnagar和Dean Evans的贈(zèng)送。在6周的治療后，去除乳腺并將每組中一個(gè)乳腺用于組織學(xué)分析。所有其它乳腺混合然后用于如下描述的生物化學(xué)分析。同乳腺一起，收集子宮和卵巢用于生物化學(xué)和組織學(xué)分析。
5.RNA分析對(duì)來(lái)自小鼠乳房組織和子宮組織的總RNA進(jìn)行分離，在對(duì)組織進(jìn)行勻漿化后，根據(jù)制造商的方法，用Tri試劑(Sigma，St.Louis，MO)進(jìn)行。ER、PR、PCNA、細(xì)胞周期蛋白D1和其它基因的特異表達(dá)通過(guò)RT-PCR進(jìn)行驗(yàn)證，用GeneAmp RNA PCR試劑盒(Perkin-Elmer，F(xiàn)oster City，CA)進(jìn)行。應(yīng)用的特異引物和RT-PCR條件如前述(N.Kirma，K.Gill，U.Mandava，R.R.Tekmal，芳香化酶的過(guò)表達(dá)導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺的增生和參與編程性細(xì)胞死亡、細(xì)胞周期、生長(zhǎng)和腫瘤抑制功能基因表達(dá)的變化，Cancer Res.，2001，待發(fā)表)。根據(jù)特異mRNA種類(lèi)的豐度，將70ng-1.0mg總RNA用作反轉(zhuǎn)錄(RT)反應(yīng)混合物的起始模板。RT-PCR產(chǎn)物在溴化乙錠染色的1％瓊脂糖凝膠上進(jìn)行觀察。為證明每個(gè)樣本用等量的總RNA用于估計(jì)各種基因的表達(dá)，管家基因甘油醛-3磷酸脫氫酶(GAPDH)用作不變的對(duì)照。來(lái)自瓊脂糖凝膠上溴化乙錠染色的RT-PCR產(chǎn)物用Bio-Rad(Hercules，CA)GS-700圖象光密度儀測(cè)得的光密度數(shù)據(jù)用于計(jì)算不同組織樣本中多種mRNA表達(dá)水平的相對(duì)差異。
6.Western印跡分析為了從對(duì)照和化合物I治療的芳香化酶轉(zhuǎn)基因小鼠的乳腺和子宮組織分離蛋白質(zhì)，組織在裂解緩沖液中進(jìn)行勻漿化。來(lái)自每個(gè)樣本的等量蛋白質(zhì)(60μg)于變性聚丙烯酰胺凝膠上分離并轉(zhuǎn)移到尼龍膜上。抗體的非特異結(jié)合通過(guò)用包含0.05％Triton X-100(TBST)和5％脫脂奶粉的Tris-緩沖鹽水(TBS)室溫孵育至少4小時(shí)進(jìn)行封閉。然后將膜與各自的一級(jí)抗體(肌動(dòng)蛋白、ER、PR、乳鐵蛋白、PCNA和細(xì)胞周期蛋白D1)于TBST-奶中4℃孵育過(guò)夜，通過(guò)用種特異(二級(jí)抗體)IgG并隨后通過(guò)增強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)(ECL試劑盒；Amersham Pharmacia Biotech，NJ)和ECL X-射線膠片曝光觀察特異結(jié)合。Western印跡的光密度數(shù)據(jù)(化學(xué)發(fā)光檢測(cè)抗體結(jié)合蛋白的X射線顯象)用于計(jì)算各個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)的差異。如果需要，管家蛋白肌動(dòng)蛋白的表達(dá)作為不變的對(duì)照用于校正。
7.血清中雌二醇和FSH水平收獲組織前，對(duì)來(lái)自對(duì)照組和化合物I治療組的血液通過(guò)直接心臟穿刺進(jìn)行收集。雌二醇的血清濃度用商業(yè)上可獲得的試劑(Diagnostic ProductsCorp.，洛杉磯，CA)通過(guò)雙抗體放射免疫分析進(jìn)行測(cè)量。用等量的雙份200μl血清，本測(cè)定法有較低靈敏度為2.5pg/ml，上限為500pg/ml。從50至200μl增加血清體積的測(cè)定產(chǎn)生與標(biāo)準(zhǔn)曲線平行的替代線。測(cè)定內(nèi)和測(cè)定間的變異系數(shù)分別平均＜10.0和6.7％，用標(biāo)準(zhǔn)雙抗體放射免疫分析測(cè)量FSH水平。獲自NIH激素源獲得的純化FSH用作標(biāo)準(zhǔn)品。比較了平均雌二醇或FSH水平的差異，并用成對(duì)學(xué)生t檢驗(yàn)確定了顯著性。
結(jié)果芳香化酶抑制劑(化合物I)對(duì)哺乳動(dòng)物乳腺、卵巢和子宮中雌激素誘導(dǎo)的增生的影響。
為檢驗(yàn)芳香化酶抑制劑對(duì)轉(zhuǎn)基因小鼠中芳香化酶誘導(dǎo)的腫瘤前/腫瘤性變化是否可完全消除或降低，我們用不同劑量的芳香化酶抑制劑(化合物I)(每只動(dòng)物每天0.25，0.5，1.0和5g)治療芳香化酶轉(zhuǎn)基因雌性小鼠可完全消除或降低乳房組織中芳香化酶誘導(dǎo)的增生和其它變化。以前研究顯示每只動(dòng)物每天用5g化合物I(基于腫瘤減小)可完全消除或降低乳房組織中芳香化酶誘導(dǎo)的增生和其它變化?；衔颕治療6周后，對(duì)對(duì)照組和多種濃度化合物I治療的芳香化酶轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺進(jìn)行了檢查。我們的發(fā)現(xiàn)表明與沒(méi)有治療的芳香化酶轉(zhuǎn)基因雌性小鼠相反，用化合物I治療6周的芳香化酶轉(zhuǎn)基因雌性小鼠顯示了在這些動(dòng)物中芳香化酶過(guò)表達(dá)誘導(dǎo)的增生和其它腫瘤前和腫瘤性變化完全降低/消失。這些結(jié)果清楚證實(shí)通過(guò)芳香化酶過(guò)表達(dá)誘導(dǎo)的乳腺增生和其它腫瘤前/腫瘤性變化可通過(guò)強(qiáng)效芳香化酶抑制劑如化合物I消除。我們的數(shù)據(jù)顯示我們可通過(guò)用低劑量的化合物I(每只動(dòng)物每天0.25或0.5μg)消除芳香化酶誘導(dǎo)的腫瘤前變化。
不同濃度的化合物I對(duì)乳腺、卵巢和子宮組織形態(tài)學(xué)特性的影響。對(duì)來(lái)自對(duì)照和不同濃度化合物I處理的芳香化酶轉(zhuǎn)基因小鼠的乳腺進(jìn)行了組織學(xué)分析。所得數(shù)據(jù)顯示了我們可通過(guò)用低劑量的化合物I(每只動(dòng)物每天0.25或0.5μg)完全消除芳香化酶誘導(dǎo)的腫瘤前變化。這些劑量對(duì)子宮和卵巢沒(méi)有影響。這些低劑量的化合物I(每只動(dòng)物每天0.25或0.5μg)對(duì)子宮和卵巢的組織形態(tài)學(xué)沒(méi)有影響。
化合物I對(duì)芳香化酶轉(zhuǎn)基因小鼠中雌二醇循環(huán)水平的影響。對(duì)照的循環(huán)雌激素水平(12.5pg/ml)和低劑量化合物I(每只動(dòng)物每天0.25或0.5μg)治療的各組間循環(huán)雌激素水平(分別為12.1和12.5pg/ml)沒(méi)有顯著差異。每只動(dòng)物每天0.5μg劑量的化合物I導(dǎo)致雌二醇循環(huán)水平為2pg/ml。
化合物I對(duì)芳香化酶轉(zhuǎn)基因小鼠中促卵泡激素的循環(huán)水平的影響。對(duì)照和用0.5μg化合物I治療的動(dòng)物間循環(huán)FSH水平(200ng/ml)沒(méi)有顯著差異。對(duì)照和用5.0μg化合物I治療組間循環(huán)FSH水平(480ng/ml)的差異非常顯著(成對(duì)學(xué)生t檢驗(yàn))化合物I對(duì)芳香化酶轉(zhuǎn)基因小鼠的乳房組織中雌激素受體(ER)、孕酮受體(PR)、細(xì)胞周期蛋白D1和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的蛋白質(zhì)水平的影響?；诩?dòng)蛋白水平校正任何差異后用來(lái)自Western印跡的光密度數(shù)據(jù)進(jìn)行圖解表示。與對(duì)乳腺增生的降低一致，我們也看到化合物I治療動(dòng)物的乳房組織中ER、PR的蛋白質(zhì)水平降低。我們也注意到用低劑量的化合物I(每只動(dòng)物每天0.25或0.5μg)治療動(dòng)物對(duì)PCNA和細(xì)胞周期蛋白D1的水平?jīng)]有顯著變化，其中所述PCNA和細(xì)胞周期蛋白D1也為雌激素介導(dǎo)增生的好標(biāo)志物。用5μg劑量的化合物I，PCNA水平降低了50％。這與觀察到的低劑量化合物I(每只動(dòng)物每天0.25或0.5μg)對(duì)子宮和卵巢的組織形態(tài)學(xué)特性沒(méi)有影響一致。
化合物I對(duì)芳香化酶轉(zhuǎn)基因小鼠的子宮組織中乳鐵蛋白、ER和PR的蛋白質(zhì)水平的影響。根據(jù)肌動(dòng)蛋白水平校正任何差異后用來(lái)自Western印跡的光密度數(shù)據(jù)進(jìn)行圖解表示。為檢查化合物I治療是否影響這些動(dòng)物的內(nèi)分泌功能，我們通過(guò)Western印跡分析檢驗(yàn)了子宮中雌激素調(diào)節(jié)下的基因表達(dá)。對(duì)照和0.25和0.5μg藥物治療的動(dòng)物間的子宮標(biāo)志物乳鐵蛋白的表達(dá)顯示沒(méi)有差異；然而，觀察到每只動(dòng)物每天用1.0μg藥物治療的動(dòng)物乳鐵蛋白表達(dá)比對(duì)照降低了1.8倍。發(fā)現(xiàn)治療動(dòng)物子宮中ER和PR的表達(dá)沒(méi)有差異。
權(quán)利要求
1.雙(氰基苯基)甲基-三唑或其可藥用鹽用于制備藥物組合物的用途，其中所述藥物組合物在哺乳動(dòng)物中用于預(yù)防對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，用于抑制婦女乳腺癌的發(fā)展，特別是用于抑制絕經(jīng)后婦女或易患乳腺癌的婦女乳腺癌的發(fā)展。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途，其特征在于雙(氰基苯基)甲基-三唑或其可藥用鹽的劑量對(duì)哺乳動(dòng)物中雌二醇的循環(huán)水平和/或促卵泡激素的循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響。
4.在哺乳動(dòng)物中預(yù)防對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病的方法，其包括向需要此種治療的哺乳動(dòng)物施用治療有效量的雙(氰基苯基)甲基-三唑或其可藥用鹽。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其中哺乳動(dòng)物為人，特別是絕經(jīng)后的婦女或易患乳腺癌的婦女。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5的方法，用于抑制乳腺癌的發(fā)展。
7.根據(jù)權(quán)利要求4或6的方法，其中在哺乳動(dòng)物中雙(氰基苯基)甲基-三唑的日劑量比預(yù)防性治療對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病所需要的日劑量低8.3至25倍。
8.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中雙(氰基苯基)甲基-三唑的日劑量比預(yù)防性治療此類(lèi)疾病所需要的日劑量低10至20倍，優(yōu)選地低10至16.7倍。
9.根據(jù)權(quán)利要求4至6中任意一項(xiàng)所述的方法，其中用于抑制婦女乳腺癌發(fā)展的雙(氰基苯基)甲基-三唑的日有效量為0.1至0.3mg，優(yōu)選地為0.125mg至0.25mg，最優(yōu)選地為0.15mg至0.25mg的雙(氰基苯基)甲基-三唑。
10.根據(jù)權(quán)利要求4至6中任意一項(xiàng)所述的方法，其中用于抑制婦女乳腺癌發(fā)展的雙(氰基苯基)甲基-三唑的日有效量為0.001至0.099mg，優(yōu)選地為0.002mg至0.02mg的雙(氰基苯基)甲基-三唑。
11.根據(jù)權(quán)利要求4至6中任意一項(xiàng)所述的方法，其中雙(氰基苯基)甲基-三唑的日劑量對(duì)哺乳動(dòng)物中雌二醇的循環(huán)水平和/或促卵泡激素的循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響。
12.根據(jù)權(quán)利要求4至6中任意一項(xiàng)所述的方法，其中將治療有效量的雙(氰基苯基)甲基-三唑向人類(lèi)受試者施用至少3周，其中只在此時(shí)間期間的約14.2％天至約42.8％天施用。
13.根據(jù)權(quán)利要求4至6中任意一項(xiàng)所述的方法，其中將治療有效量的雙(氰基苯基)甲基-三唑向人類(lèi)受試者施用3周或更長(zhǎng)期間，其間每周施用1至3次，隔日進(jìn)行。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中將周劑量方案實(shí)施3、4、5、6、7或8周。
15.根據(jù)權(quán)利要求12至14中任意一項(xiàng)所述的方法，其中治療期之后接著1至3周不施用藥劑的期間，并將此循環(huán)重復(fù)進(jìn)行1至幾個(gè)循環(huán)。
16.根據(jù)權(quán)利要求4至6中任意一項(xiàng)所述的方法，其中將治療有效量的雙(氰基苯基)甲基-三唑向人類(lèi)受試者每周施用7至4次，或在此時(shí)間期間的約100％天至約50％天施用，施用1至3周，接著1至3周不施用藥劑，并將此循環(huán)重復(fù)進(jìn)行1至幾個(gè)循環(huán)。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中將治療有效量的雙(氰基苯基)甲基-三唑向人類(lèi)受試者每天施用一次或每?jī)商焓┯靡淮巍?br> 18.根據(jù)權(quán)利要求12至16中任意一項(xiàng)所述的方法，其中治療有效量的雙(氰基苯基)甲基-三唑?qū)Σ溉閯?dòng)物中雌二醇的循環(huán)水平和/或促卵泡激素的循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響。
19.根據(jù)權(quán)利要求12至16中任意一項(xiàng)所述的方法，其中用于抑制婦女乳腺癌發(fā)展的雙(氰基苯基)甲基-三唑的有效量為0.1至0.3mg，優(yōu)選地為0.125mg至0.25mg，最優(yōu)選地為0.15mg至0.25mg的雙(氰基苯基)甲基-三唑。
20.在單位劑型中包含一定量雙(氰基苯基)甲基-三唑或其可藥用鹽的藥物組合物，其中所述雙(氰基苯基)甲基-三唑或其可藥用鹽的量比在哺乳動(dòng)物中預(yù)防性治療對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病所需要的日劑量低5至20倍。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的藥物組合物，其中雙(氰基苯基)甲基-三唑的量比在哺乳動(dòng)物中預(yù)防性治療對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病所需要的日劑量低8.3至25倍，優(yōu)選地低10至20倍，且最優(yōu)選地低10至16.7倍。
22.藥物組合物，其在根據(jù)權(quán)利要求20的單位劑型中包含0.1mg至0.3mg，優(yōu)選地包含0.125mg至0.25mg，最優(yōu)選地包含0.15mg至0.25mg的雙(氰基苯基)甲基-三唑。
23.在單位劑型中包含一定量雙(氰基苯基)甲基-三唑或其可藥用鹽的藥物組合物，其特征在于雙(氰基苯基)甲基-三唑的量對(duì)哺乳動(dòng)物中雌二醇的循環(huán)水平和/或促卵泡激素的循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響。
24.在單位劑型中包含一定量雙(氰基苯基)甲基-三唑或其可藥用鹽的藥物組合物，其特征在于該活性成分的量為0.001至0.099mg，優(yōu)選地為0.002至0.02mg的雙(氰基苯基)甲基-三唑，用于在哺乳動(dòng)物中預(yù)防性治療對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病。
25.根據(jù)權(quán)利要求20至24中任意一項(xiàng)所述的藥物組合物，用于婦女乳腺癌的預(yù)防性治療。
26.包含包裝材料和在所述包裝材料中含有雙(氰基苯基)甲基-三唑或其可藥用鹽的制品，其中所述包裝材料包含標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)，所述標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)標(biāo)明了所述雙(氰基苯基)甲基-三唑或雙(氰基苯基)甲基-三唑的可藥用鹽將遵循一個(gè)特定的劑量方案施用于婦女，優(yōu)選地施用于絕經(jīng)后的婦女或易患乳腺癌的婦女，其施用量為從約0.1mg至約0.3mg，優(yōu)選地施用量為從約0.125mg至約0.25mg，以抑制乳腺癌的發(fā)展。
27.包含包裝材料和在所述包裝材料中含有雙(氰基苯基)甲基-三唑或其可藥用鹽的制品，其中所述包裝材料包含標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)，所述標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)標(biāo)明了所述雙(氰基苯基)甲基-三唑或雙(氰基苯基)甲基-三唑的可藥用鹽將遵循一個(gè)特定的劑量方案施用于婦女，優(yōu)選地施用于絕經(jīng)后的婦女或易患乳腺癌的婦女，其施用量為對(duì)哺乳動(dòng)物中雌二醇的循環(huán)水平和/或促卵泡激素的循環(huán)水平?jīng)]有顯著影響，以抑制乳腺癌的發(fā)展。
28.根據(jù)權(quán)利要求27的制品，其中雙(氰基苯基)甲基-三唑的有效量為如權(quán)利要求20至24中所述的藥物組合物形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及較低劑量下式(I)的雙(氰基苯基)甲基－三唑或其可藥用鹽的用途，用于制備藥物組合物，其中所述藥物組合物在哺乳動(dòng)物中用于預(yù)防對(duì)芳香化酶抑制和對(duì)雌激素生物合成的抑制起反應(yīng)的疾病，特別是乳腺癌。
文檔編號(hào)A61K31/4196GK1602302SQ02824842
公開(kāi)日2005年3月30日 申請(qǐng)日期2002年12月10日 優(yōu)先權(quán)日2001年12月11日
發(fā)明者R·R·泰克默 申請(qǐng)人:埃默里大學(xué)