專利名稱：吲唑化合物的制作方法
專利說明吲唑化合物
背景技術(shù)：
發(fā)生在特定氨基酸殘基上的蛋白磷酸化對于包括細(xì)胞周期進(jìn)行與分裂、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以及細(xì)胞凋亡在內(nèi)的多種細(xì)胞過程的調(diào)控是重要的。磷酸化通常是末端磷酸酯基團(tuán)從ATP轉(zhuǎn)移到蛋白底物上的反應(yīng)。磷酸酯基團(tuán)轉(zhuǎn)移到靶底物中的特定結(jié)構(gòu)是酪氨酸、絲氨酸和蘇氨酸殘基。由于這些氨基酸殘基是磷?；D(zhuǎn)移的靶結(jié)構(gòu)，并且由于大部分激酶靶向酪氨酸或絲氨酸與蘇氨酸，因而這些蛋白激酶通常被稱作酪氨酸激酶或絲氨酸/蘇氨酸(S/T)激酶。發(fā)生在酪氨酸、絲氨酸和蘇氨酸殘基上的磷酸化反應(yīng)以及反磷酸酶反應(yīng)與多種細(xì)胞過程有關(guān)，這些過程是多種胞內(nèi)信號的應(yīng)答、細(xì)胞功能的調(diào)控以及細(xì)胞過程的激活或失活的基礎(chǔ)。蛋白激酶的級聯(lián)反應(yīng)常常參與胞內(nèi)信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)。這些蛋白激酶可以整合到質(zhì)膜內(nèi)，以胞質(zhì)酶的形式或者位于核內(nèi)，他們通常作為酶復(fù)合體的組分。在很多情形下，這些蛋白激酶是確定細(xì)胞內(nèi)何時(shí)何地發(fā)生細(xì)胞過程的酶與結(jié)構(gòu)蛋白復(fù)合體的必需成分。在知道了蛋白激酶功能的重要性與多樣性的情形下，對于與多種疾病例如癌癥、糖尿病、炎癥以及高血壓有關(guān)的細(xì)胞中磷酸化事件是必需的也就不足為奇。
因此希望發(fā)現(xiàn)能特異性地抑制異常或不適當(dāng)?shù)募?xì)胞增殖、信號傳導(dǎo)、分化、蛋白生成或代謝過程中涉及的蛋白激酶的有效小分子。具體地講，是需要發(fā)現(xiàn)能特異性抑制激酶功能的方法與化合物，這些激酶與免疫調(diào)控或增殖性疾病有關(guān)。鑒定出能特異性地抑制免疫調(diào)節(jié)或增殖病癥中所涉及的激酶功能的方法和化合物是特別希望的。
本發(fā)明提供了抑制一種或多種受體或非受體酪氨酸或S/T激酶的新化合物。
發(fā)明概述 本發(fā)明提供了式(I)化合物
其中 R1選自H、被取代OCH3的芐基、任選取代的(C1-C3)烷基、被NH2取代的嘧啶和氨基(C1-C3)烷基； R3選自H、鹵素、NH2、OH、COOH、-C(O)-NH-CH2-C(O)-OCH3、-NH-CH2-苯基、-C(O)-吡啶基、-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基，其中苯基任選被N(CH3)2或OCH3取代；或者 R3選自任選取代的下列基團(tuán)(C1-C6)烷基、苯并[b]噻吩基、2，3-二氫苯并呋喃基、吲哚基、異喹啉基、嗎啉基、萘基、苯基、哌嗪基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹啉基和噻吩基； 其中所述取代基選自一個(gè)或多個(gè)CH3、NH2、Cl、F、二甲基氨基、OH、CH2OH、-C(O)NH2、COOH、CF3、異丙基、OCF3、OCH3、-O-CH2-苯基、CN、OCH2CH3、-NH-C(O)-環(huán)丁基、-NH-C(O)-苯基、NH-C(O)-CH3、NHC(O)CH3、N(CH3)2、S(O)2CH3和C(O)NH-苯基；或者 R3是-C(O)-NY100-(C(Y100)2)x-Ra，其中 x是0、1、2或3； Y100獨(dú)立地為H或(C1-C3)烷基；且 Ra是-C(O)-CH3或者選自任選取代的基團(tuán)(C1-C3)烷基、氨基、氨基烷基、苯并咪唑基、苯并[b]噻吩基、苯并三唑基、聯(lián)苯基、1，3-二氫苯并咪唑基、1，3-二氫苯并咪唑基-2-酮、咪唑基、吲哚基、萘基、苯基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、四氫吡喃基和噻唑基；或者 R3是A-B，其中A連接在吲唑上，且 A選自-C≡C、-C≡C-苯基、吲唑基、苯基、吡啶基和噻吩基； B選自芐氧基、嗎啉基、苯基、噻吩基、叔丁基、-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基； R4是H或NH2； R5選自H、NH2、NO2、鹵素；或者 R5選自任選取代的下列基團(tuán)苯并咪唑基、3，4-二氫苯并[1，4]噻嗪基、芐氧基苯基、呋喃并[3，2-c]吡啶、吲唑基、吲哚基、異喹啉基、苯基、吡唑并[3，4-d]嘧啶、吡嗪基、吡唑基、吡啶基、吡咯并[2，3-b]吡啶基、吡咯并[2，3-c]吡啶基、吡咯并[2，3-d]吡啶基、嘧啶基、吡咯并[3，2-d]吡啶、吡咯并[2，3-d]嘧啶基、吡啶基、吡咯基、喹啉基、喹唑啉基、噻吩基、噻吩并[2，3-c]吡啶基、噻吩并[2，3-d]嘧啶、噻吩并[3，2-c]吡啶、7-氮雜二氫吲哚基和7-氮雜吲哚基；或者 R5是-C(O)-Rb；其中 Rb選自O(shè)H、(C1-C3)烷氧基、苯基、任選取代的哌啶基、任選取代的吡啶基和任選取代的吡咯烷基；或者 Rb是D-E，其中D連接C(O)上，并且 D選自哌啶基和吡咯烷基； E選自吡啶基和嘧啶基胺甲基； R5是-C(O)-NH-(CH2)a-Rc； 其中 a是0、1、2或3； Rc是-CONH2或者 Rc選自任選取代的下列基團(tuán)苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并[b]噻吩基、二甲基氨基、芴、咪唑基、茚滿基、吲唑基、異噁唑基、噁唑基、苯基、哌啶基、吡唑基、吡啶基、喹唑啉基、噻二唑基和1，2，4-三唑基；或者 Rc是J100-J200，其中J100連接在(CH2)X上，并且 J100選自任選取代的下列基團(tuán)異噁唑基、哌嗪基、吡唑基、吡啶基和苯基；并且 J200選自苯并咪唑基、苯并噁唑基、環(huán)己基、呋喃基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、吲哚基、異噁唑基、-NH-C(O)-苯基、苯氧基和任選取代的苯基； R5是-NH-C(O)-(CH2)n-Rd；其中 n是0-3； Rd是-C(CH3)2-CH2-C(O)-CH3；或者 Rd選自任選取代的下列基團(tuán)(C1-C2)烷氧基、烷基氨基、苯并咪唑基、苯并[1，3]二噁唑基、苯并[1，2，5]噁二唑基、苯并三唑基、苯并[b]噻吩基、苯并呋喃基、芐氧基、環(huán)丙基、環(huán)己基、色烯基、二甲基氨基、呋喃基、六氫嘧啶基、咪唑基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、咪唑烷基、吲哚基、異噁唑基、嗎啉基、苯基、哌嗪基、哌啶基、吡嗪基、吡唑基、吡唑并[1，5-a]嘧啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯基、喹啉基、喹喔啉基、四氫苯并呋喃基、四氫呋喃基、噻唑基、噻吩并[2，3-d]嘧啶基、噻吩基、2，3-二氫噻唑并[3，2-a]嘧啶、-S-嘧啶基、-O-苯基、-O-Si(CH3)2-C(CH3)3、-NH-S(O)2-苯基、-NH-C(O)-NH2、1，2，3，4-四氫二氮雜萘基或N(CH3)2；或者 Rd是M-Q，其中M連接在(CH2)n上，并且 M選自任選取代的亞甲基、亞環(huán)丙基、任選取代的異噁唑基、苯基、吡唑基、-NH-C(O)和任選取代的1，3，5-三嗪基； Q選自呋喃基、嗎啉基、苯基、苯基胺和任選取代的1，3，4-噻二唑基； R5是-NH-CH2-C(Y200)2-Re，其中Y200獨(dú)立地為H或(C1-C3)烷基，并且Rc選自任選取代的下列基團(tuán)(C1-C6)烷氧基、咪唑基、苯基、哌啶基、吡咯烷基和1，2，3，4-四氫[1，8]二氮雜萘；或者 R5是-NH-C(O)-N(Rf)2，其中Rf獨(dú)立地為H或任選取代的(C1-C3)烷基；或者 R5是-NH-(C(O))m-NY300-(CH2)p-Rg；其中 m是0、1或2； Y300是H或任選取代的(C1-C3)烷基； p是1或2；且 Rg選自任選取代的下列基團(tuán)氨基、(C1-C2)烷氧基、苯并[1，3]二噁唑基、苯并噻唑基、苯并[1，4]噁嗪基、苯并[1，2，5]噻二唑基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑基、異噁唑基、嗎啉基、噁唑基、苯基、哌啶基、吡嗪基、吡唑基、吡啶基、吡咯基、四氫吡喃基、噻唑基和三唑基；或者 Rg是W-X，其中W連接在(CH2)P上，并且 W是噻唑基，且X是噻吩基； R5是-NH-S(O)2Rh，其中Rh選自任選取代的下列基團(tuán)苯并[1，2，5]噁二唑基、苯并[1，2，5]噻二唑基、咪唑基、異噁唑基、噁唑基、苯并[1，4]噁嗪基、吡唑基、苯基、喹啉基、噻唑基、噻吩基和噻吩基；或者 Rh是T-U，其中T連接在S(O)2上，并且 T是苯基或噻吩基； U選自吡啶基、任選取代的噻唑基和-NH-嘧啶基，其中嘧啶基可以任選被取代；或者 R5是-N(Y400)Ri，其中 Y400是H，或者Y400選自任選取代的下列基團(tuán)(C1-C3)烷基、氨基(C1-C3)烷基和吡啶基甲基；且 Ri選自任選取代的下列基團(tuán)(C1-C3)烷基、6-氮雜吲哚基、環(huán)丁烯基、苯基、嘌呤基、吡嗪基、吡唑并[1，5-a]嘧啶，噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯并[2，3-c]吡啶基、吡咯并[2，3-b]嘧啶基、吡咯并[3，2-d]嘧啶基、吡咯并[3，4-b]嘧啶基、吡咯并[2，3-d]嘧啶基、喹唑啉基、噻吩并[3，2-d]嘧啶基、噻吩并[3，2-b]吡啶基和三嗪基；或者 Ri是V-W，其中V連接在氮上，并且 V是一個(gè)鍵或者選自任選取代的下列基團(tuán)異喹啉基、吡啶基、嘧啶基和吡咯并[3，2-d]嘧啶基； W選自任選取代的下列基團(tuán)(C1-C3)烷基、烷氧基烷基、環(huán)戊烯基、嗎啉基、苯基、嘧啶基、吡咯烷基、噻吩并[3，2-b]吡啶基、-NH-苯基、-NH-CH2-CH2-N(CH3)2、-NH-NH2、NH-C(O)-CH3、CH2-苯基、NH-C(O)-呋喃基、S-異丙基、S-萘基、S-苯基和S-CH2-CH2-NH2；或者 R5是z100-Z200，其中Z100連接在吲唑上，并且 Z100選自丁基、乙基、吲唑基、任選取代的苯基、任選取代的吡啶基、任選取代的嘧啶基、吡咯并[3，2-d]嘧啶基和任選取代的噻吩基； Z200選自-C(O)-NH-CH2CH2-NH2、NH2、-NH-C(O)-噻吩基、-NH-C(O)-CH(CH3)2、-NH-C(O)-CH3、-NH-C(O)C(CH3)3、-NH-C(O)-NH-呋喃基、-NH-C(O)-NH-苯基、苯并[b]噻吩基、嗎啉基乙基、苯基、哌嗪基、哌啶基、吡唑基和四唑基；或者 R5是-NH-C(O)-Y500-C(O)-Rk；其中 Y500是任選取代的(C1-C3)烷基；且 Rk是H，或者Rk選自任選取代的下列基團(tuán)苯基、苯基氨基和噻吩基；或者 R5是-NH-C(O)-(CH2)y-NH-T-Rm；其中 y是1或2； T是C(O)或S(O)2；且 Rm選自呋喃基、苯基和噻吩基； R6是H，或者R6選自任選取代的下列基團(tuán)(C1)烷氧基、(C1-C3)烷基、苯并[b]噻吩基、-NH-嘧啶基、-NH-S(O)2-苯基-NH-嘧啶基、-NH-C(O)-苯并[b]噻吩基、吡咯并[2，3-b]嘧啶基和吡啶基；且 R7選自H、鹵素、NH2，或者R7選自任選取代的下列基團(tuán)(C2-C5)鏈烯基、(C2-C5)炔基、氨基炔基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并[b]噻吩基、呋喃基、吲哚基、異喹啉基、萘基、苯基、苯基烷基、苯基(C2-C5)鏈烯基、苯基(C2-C5)炔基、哌啶基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹啉基、喹喔啉基、噻吩并[2，3-b]吡啶基、噻吩基、-NH-S(O)2-CH3、-NH-C(O)-CH3、-NH-C(O)-苯基、-C(O)-NH-CH2-苯基和-C(O)-NH-苯基；或者 R7是Y-Z，其中Y連接在吲唑上；且 Y是苯并[b]噻吩基或噻吩基；且 Z選自苯基、噻吩基、CH2NHCH2CH2-嗎啉基和取代的哌嗪基；或者 R7是-C(O)-NH-(CH2)r-苯基，其中r是0或1，并且苯基是任選被取代的； 條件是所述化合物不是
其中 R3選自H、OH和COOH； R5是H或NO2； R7是H或NH2； R100是OCH3；且 R200是H或-C(O)-OCH3； 條件是所述化合物不是
其中 R3是NH2或苯基；且 R5是H或NO2； 條件是所述化合物不是
其中 R1是H、甲基或丙基； R7是H、F或甲基；且 R是H、甲基、OH、NH或OCH3； 條件是所述化合物不是
其中R3選自I、Br、COOH、NH2、噻吩基、吡啶基、吡咯基、-C(O)-NH-CH-(CH2OH)2、-C(O)-NH-CH2-X100、

和
其中X100是吡啶基或任選被甲基取代的苯基； 條件是所述化合物不是
其中 R3是嗎啉基或4-甲基哌嗪基； Rc是H、Cl或NO2； R6是H或Cl；且 R7是H、Cl或NO2； 條件是所述化合物不是
其中 R6是H、甲基或OCH3； R6是H或OCH3； L100是H或異丙基；且 X200是苯基或4-氯苯基； 條件是所述化合物不是
其中 R1是H或CH3，且X300是芐基、苯基、2-氨基苯基或2-羥基苯基；以及 條件是所述化合物不是
其中 R1是H、CH2OH、甲基、苯基或4-甲氧基芐基； R3是H、I、吡啶基或
且 R5是H、Br、F、C(OH)、-C(O)-OCH2CH3或-NH-C(O)-NH-芐基。
在第二個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了根據(jù)任何上述發(fā)明的化合物或其可藥用鹽，其中 R1是H或被NH2取代的嘧啶基； R3選自H、CH3、OH、Cl、苯并[b]噻吩基、2，3-二氫苯并呋喃基、吲哚基、萘基、苯基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹啉基、噻吩基、-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基；其中 所述吲哚基任選被CH3取代； 所述萘基任選被OCH3或OH取代；并且 所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自下列的取代基取代CH3、NH2、Cl、F、N(CH3)2、OH、CH2OH、C(O)NH2、COOH、CF3、OCF3、OCH3、CN、OCH2CH3、NHC(O)CH3、-S(O)2CH3和-C(O)-NH-苯基；或者 R3是-C(O)-NY100-(C(Y100)2)x-Ra，其中 x是0或1； Y100是H； Ra選自任選取代的下列基團(tuán)苯并[b]噻吩基、苯并咪唑基、1，3-二氫苯并咪唑基-2-酮、苯并三唑基、聯(lián)苯基、1，3-二氫苯并咪唑基、吲哚基、萘基和苯基；其中 所述萘基任選被OH或OCH3取代； 所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)Cl、F、OH、CH2OH、CH2CH2OH、COOH、C(O)NH2、N(CH3)2或甲基取代；或者 R3是A-B，其中 A選自-C≡C、-C≡C-苯基、苯基和噻吩基；并且 B選自芐氧基、苯基、噻吩基、-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基； R4是H； R5是被C(O)H、CH2OH、SCH2CH2NH2或NH2取代的吡啶基；或者 R5選自

和
其中 E選自H、OH、CH3、-CH2CH2NH2、CH2CH2CH2OH、CH2CH2OCH3、CH2CH2CH2NH2、CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)NH2、CH2CH2C(O)OCH3、CH2CH2CH2OCH3、NHCH2CH2CH3、CH2CH2C(O)NH(CH3)、CH2CH2C(O)N(CH3)2、C(O)NHCH2CH2NH(CH3)、NHCH2CH2OCH3、NHCH2CH2OH、NHCH2CH2N(CH3)2、異丙基、CH2C(O)NH2、CH2CH(CH3)C(O)OH、CH2CH2CH2C(O)OH、CH2CH(CH3)C(O)OCH3、CH2CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2C(O)NH2、N(CH3)2、嗎啉基乙基、哌啶基乙基、
和4-甲基哌嗪基環(huán)己基； E300是H或CH2CH2OCH3； G選自H、Cl、NH2、CH2CH2C(O)NHCH2CH2NH2、C(O)NH2、C(O)NHCH2CH2NH2、C(O)NHCH2CH2N(CH3)2、CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)NH2、NHCH2CH2N(CH3)2、NHCH2CH2-吡啶基和NHCH2CH2NH2；或者 R5是-C(O)-NH-(CH2)a-Rc，其中 a是0； Rc是苯并咪唑基或被氧代基取代的芴；或者 Rc是J100-J200，其中 J100選自吡唑基、吡啶基、哌嗪基和苯基；其中 所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、OH和OCH3的取代基取代； 所述哌嗪基被甲基取代；并且 J200選自苯并噁唑基、苯并咪唑基、呋喃基、咪唑并[1，2-a]吡啶基和1，8a-二氫咪唑并[1，2-a]吡啶基；或者 R5是-NH-C(O)-(CH2)n-Rd，其中 n是0、1或2；并且 Rd是苯并咪唑基、苯并[b]噻吩基、咪唑基、苯基或吡唑并[1，5-a]嘧啶基；其中 所述苯基任選被NO2取代； R5是-NH-(C(O))m-NY300-(CH2)p-Rg，其中 m是2； Y300是H； p是1；并且 Rg是苯并[1，3]二噁唑基；或者 R5是-N(Y400)-Ri，其中 Y400選自H、CH2CH2CH2OH、CH2CH2NH2或吡啶基甲基； Ri是V-W，其中V是一個(gè)鍵或嘧啶基；且 W是被NH2取代的嘧啶基或者被OH取代的吡咯烷基；或者 R5是Z100-Z200，其中 Z100是噻吩基或被CH3取代的吡啶基，且Z200是噻吩基或NH-C(O)-呋喃基； R6選自H、吡咯并[2，3-b]嘧啶基和
且 R7選自任選取代的下列基團(tuán)H、Br、Cl、I、苯并呋喃基、苯并[b]噻吩基、呋喃基、吲哚基、萘基、苯基、吡啶基、吡咯基、喹啉基、喹喔啉基、噻吩并[2，3-b]吡啶基、噻吩基、-CH＝CH-苯基、-C≡C-苯基、-C(O)-NH-CH2-苯基和-C(O)-NH-苯基，其中 所述萘基任選被OH或OCH3取代； 所述苯并[b]噻吩基任選被下列基團(tuán)取代OH、CH3、OCH3、N(CH3)2、OH、CH2＝CHNHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2或CH2NHCH2CH2N(CH3)2； 所述吲哚基任選被下列基團(tuán)取代C(O)N(CH(CH3)2)2、CH2OH、CH2C(O)NH2、COOH、C(O)NH2、N(CH3)2或S(O)2CH3；并且 并且所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自下列的取代基取代Cl、F、CH3、CH2OH、CN、-C(O)NH2、OH、OCH3、N(CH3)2、NH-C(O)CH3、-NH-S(O)2-CH3； 所述噻吩基被CH2OH取代；或者 R7是Y-Z，其中 Y是苯并[b]噻吩基或噻吩基；并且 Z選自任選取代的下列基團(tuán)CH＝CHNHCH3、NHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2、CH2NHCH3、CH2NHCH2CH2N(CH3)2、N(CH3)2、CH2NHCH2CH2-嗎啉基、苯并[b]噻吩基、嗎啉基甲基、哌嗪基甲基苯基和噻吩基；或者 R7是-C(O)-NH-(CH2)r苯基，其中 r是0或1； 所述苯基任選被NH2取代。
在第三個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了根據(jù)任何上述發(fā)明的化合物或其可藥用鹽，其中 R1是H或被NH2取代的嘧啶基； R3選自H、CH3、OH、Cl、苯并[b]噻吩基、2，3-二氫苯并呋喃基、吲哚基、萘基、苯基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹啉基、噻吩基、-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基；其中 所述吲哚基任選被CH3取代； 所述萘基任選被OH取代；并且 所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自下列的取代基取代OH、F、CH3、CF3、CN、-C(O)NH2、NH2、NHC(O)CH3、OCH3、OCF3、OCH2CH3、N(CH3)2、-C(O)-NH-苯基和-S(O)2CH3；或者 R3是-C(O)-NY100-(C(Y100)2)x-Ra，其中 Y100是H； x是0； Ra選自任選取代的下列基團(tuán)苯并咪唑基、1，3-二氫苯并咪唑基-2-酮、苯并三唑基、聯(lián)苯基、吲哚基、萘基和苯基； 其中所述萘基被OH或OCH3取代； 所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)Cl、F、OH、CH2OH、CH2CH2OH、C(O)NH2、N(CH3)2或甲基取代；或者 R3是A-B，其中 A選自苯基和噻吩基；并且 B選自芐氧基、苯基、噻吩基、-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基； R5是被NH2取代的吡啶基；或者 R5選自

和
其中 E選自H、CH3、CH2C(O)OH、CH2CH2CH2OH、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)NH2、CH2CH2C(O)OCH3、CH2CH2CH2OCH3、NHCH2CH2CH3、CH2CH2C(O)NH(CH3)、NHCH2CH2OCH3、NHCH2CH2OH、異丙基、CH2C(O)NH2、CH2CH(CH3)C(O)OH、嗎啉基乙基、哌啶基乙基、CH2CH2CH2C(O)OH、CH2CH(CH3)C(O)OCH3、CH2CH2NH2、CH2CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2C(O)NH2、CH2CH2C(O)N(CH3)2和N(CH3)2；并且 G選自H、NH2、Cl、CH2CH2C(O)NHCH2CH2NH2、C(O)NHCH2CH2NH2、C(O)NHCH2CH2N(CH3)2、NHCH2CH2N(CH3)2、NHCH2CH2NH2、CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)NH2和NHCH2CH2-吡啶基； R5是-C(O)-NH-(CH2)a-Rc，其中 a是0； Rc是J100-J200，其中 J100是吡唑基或苯基，其中所述苯基任選被OCH3取代；且 J200是苯并噁唑基、苯并咪唑基、呋喃基、咪唑并[1，2-a]吡啶基或1，8a-二氫咪唑并[1，2-a]吡啶基；或者 R5是-NH-C(O)-(CH2)n-Rd，其中 n是0、1或2；且 Rd選自苯并咪唑基、苯并[b]噻吩基、咪唑基和吡唑并[1，5-a]嘧啶基； R5是-N(Y400)-Ri，其中 Y400選自H、CH2CH2CH2OH、CH2CH2NH2或吡啶基甲基； Ri是V-W，其中 V是一個(gè)鍵或嘧啶基，且W是被NH2取代的嘧啶基或被OH取代的吡咯烷基； R5是Z100-Z200，其中 Z100是噻吩基； Z200是噻吩基； R6是H或

和 R7選自任選取代的下列基團(tuán)H、苯并呋喃基、苯并[b]噻吩基、呋喃基、吲哚基、萘基、喹啉基、苯基、吡咯基、喹喔啉基、噻吩基、噻吩并[2，3-b]吡啶基、-CH＝CH-苯基、-C≡C-苯基、-C(O)-NH-CH2-苯基和-C(O)-NH-苯基，其中 所述苯并[b]噻吩基任選被OH、CH3、OCH3、N(CH3)2、CH2＝CHNHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2或CH2NHCH2CH2N(CH3)2取代； 所述吲哚基被下列基團(tuán)取代甲基、CN、C(O)H、CH2CH2CH2NH2、CH2NHCH2CH＝CH2、C(O)CH3、C(O)OCH3、OCH3、C(O)N(CH(CH3)2)2、CH2OH、CH2C(O)NH2、C(O)NH2、CH2NHCH2CH2N(CH3)2或哌啶基甲基；并且 所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自下列的取代基取代Cl、F、CH3、CH2OH、CN、-C(O)NH2、OH、OCH3、N(CH3)2和-NH-S(O)2-CH3；或者 R7是Y-Z，其中 Y是苯并[b]噻吩基或噻吩基；并且 Z選自任選取代的下列基團(tuán)CH＝CHNHCH3、NHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2、CH2NHCH3、CH2NHCH2CH2N(CH3)2、N(CH3)2、CH2NHCH2CH2-嗎啉基、苯并[b]噻吩基、嗎啉基甲基和哌嗪基甲基；其中 所述哌嗪基任選被甲基取代。
在第四個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了根據(jù)任何上述發(fā)明的化合物或其可藥用鹽，其中 R1和R4是H； R3選自任選取代的下列基團(tuán)H、OH、2，3-二氫苯并呋喃基、萘基、吡唑基和吡咯基；其中 R3是-C(O)-NY100-(C(Y100)2)x-Ra，其中 Y100是H； x是0； Ra選自任選取代的下列基團(tuán)萘基和苯基；其中 所述萘基任選被OH取代； 所述苯基任選被OH取代；或者 R3選自-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基； R3是A-B，其中 A選自苯基和噻吩基；并且 B選自芐氧基、苯基和噻吩基； R5選自

和
E選自H、CH2C(O)NH2、CH2CH(CH3)C(O)OCH3、CH2CH2CH2OH、CH2CH2C(O)OCH3、CH2CH2CH2OCH3、CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)NH2、CH2CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2OCH3、CH2CH2CH2C(O)OH、CH2CH2CH2C(O)NH2、CH2CH(CH3)C(O)OH、CH2CH2C(O)NH(CH3)、CH2CH2C(O)N(CH3)2、N(CH3)2、異丙基、嗎啉基乙基和哌啶基乙基；并且 G是H、NH2或NHCH2CH2-吡啶基，或者 R5是-C(O)-NH-(CH2)a-Rc，其中 a是0， Rc是J100-J200，其中 J100是任選被OCH3取代的苯基， J200是咪唑并[1，2-a]吡啶基或1，8a-二氫咪唑并[1，2-a]吡啶基；或者 R5是-NH-C(O)-(CH2)n-Rd，其中 n是2，并且Rd是咪唑基；或者 R5是Z100-Z200，其中 Z100是噻吩基； Z200是噻吩基； R6是H或

和 R7選自任選取代的下列基團(tuán)H、苯并呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲哚基、萘基、喹啉基、CH＝CH-苯基、-C≡C-苯基、-C(O)-NH-CH2-苯基和-C(O)-NH-苯基，其中 所述苯并[b]噻吩基任選被下列基團(tuán)取代OH、CH3、OCH3、N(CH3)2、CH2＝CH2NHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2、CH2NHCH2CH2N(CH3)2、哌啶基甲基或CH2NHCH2N(CH3)2；并且 所述吲哚基任選被下列基團(tuán)取代甲基、CN、C(O)H、CH2CH2CH2NH2、CH2NHCH2CH＝CH2、C(O)CH3、C(O)OCH3、或OCH3；甲基、CN、C(O)H、CH2CH2CH2NH2、CH2NHCH2CH＝CH2、C(O)CH3、C(O)OCH3或OCH3， 所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)H和OCH3的取代基取代；或者 R7是Y-Z，其中 Y是苯并[b]噻吩基或噻吩基；并且 Z選自CH＝CHNHCH3、NHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2、CH2NHCH3、CH2NHCH2CH2N(CH3)2、N(CH3)2、CH2NHCH2CH2-嗎啉基、苯并[b]噻吩基、嗎啉基甲基和哌嗪基甲基； 其中所述哌嗪基任選被甲基取代。
在第五個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了根據(jù)任何上述發(fā)明的化合物或其可藥用鹽，其中 R1和R4是H； R3選自H、OH、2，3-二氫苯并呋喃基、吡咯基和任選取代的萘基；或者 R3是-C(O)-NY100-(C(Y100)2)x-Ra，其中 Y100是H； x是0； 且 Ra是被OH取代的苯基； R5是

或
其中 E選自H、CH2C(O)NH2、CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2OCH3、CH2CH2CH2OH、CH2CH2C(O)OH、CH2CH2CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)NH2、CH2CH2CH2C(O)NH2、CH2CH(CH3)C(O)OCH3、CH2CH(CH3)C(O)OH、CH2CH2C(O)OCH3、CH2CH2C(O)NH(CH3)、CH2CH2C(O)N(CH3)2、N(CH3)2、異丙基、嗎啉基乙基和哌啶基乙基；并且 G是H、NH2或NHCH2CH2-吡啶基，或者 R5是-C(O)-NH-(CH2)a-Rc，其中 a是0；并且 Rc是J100-J200，其中 J100是苯基，并且J200是1，8a-二氫咪唑并[1，2a]吡啶基；或者 R5是-NH-C(O)-(CH2)n-Rd，其中 n是2，并且 Rd是咪唑基；或者 R5是Z100-Z200，其中 Z100是噻吩基，并且Z200是噻吩基； R6是H或
并且 R7選自任選取代的下列基團(tuán)H、-CH＝CH-苯基、-C≡C-苯基、苯并呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲哚基、喹啉基、萘基、-C(O)-NH-CH2-苯基和-C(O)-NH-苯基； 其中所述萘基任選被OH、C(O)H或OCH3取代； 所述苯并[b]噻吩基任選被下列基團(tuán)取代OH、CH3、OCH3、CH2＝CH3-NHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2、CH2NHCH2CH2N(CH3)2、N(CH3)2或哌啶基甲基； 所述吲哚基任選被下列基團(tuán)取代甲基、CN、C(O)H、CH2CH2CH2NH2、CH2NHCH2CH＝CH2、C(O)CH3、C(O)OCH3或OCH3； 所述苯基任選被OH或OCH3取代；或者 R7是Y-Z，其中 Y是苯并[b]噻吩基；并且 Z選自CH2NHCH2CH2-嗎啉基、嗎啉基甲基和哌嗪基甲基，其中所述哌嗪基任選被甲基取代。
在第六個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了根據(jù)任何上述發(fā)明的化合物或其可藥用鹽，其中R1、R3、R4和R6是H； R5是

或
其中 E選自H、-CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2OH、CH2CH2C(O)OH和CH2CH2C(O)NH2；并且 R7選自苯并[b]噻吩基、吲哚基、-C(O)-NH-CH2-苯基和-C(O)-NH-苯基，其中 所述苯并[b]噻吩基任選被哌啶基甲基取代； 所述吲哚基任選被CN、甲基或C(O)H取代。
在第七個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了根據(jù)任何上述發(fā)明的化合物或其可藥用鹽，其中R1、R3、R4和R6是H； R5是
其中 E是H；并且 R7是-C(O)-NH-CH2-苯基或-C(O)-NH-苯基。
在第八個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了根據(jù)任何上述發(fā)明的化合物或其可藥用鹽，其中R1、R3、R4和R6是H； R5是

或
其中 E選自H、-CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2OH、CH2CH2C(O)OH和CH2CH2C(O)NH2；并且 R7是苯并[b]噻吩基或吲哚基，其中 所述苯并[b]噻吩基任選被哌啶基甲基取代； 所述吲哚基任選被CN、甲基或C(O)H取代。
在第九個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了根據(jù)任何上述發(fā)明的化合物或其可藥用鹽，其中R1、R3、R4和R6是H； R5是
其中 E選自-CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2OH、CH2CH2C(O)OH和CH2CH2C(O)NH2；并且 R7是苯并[b]噻吩基。
發(fā)明詳述 蛋白激酶 蛋白激酶是一大類超過500種的各種不同酶，包括生長因子受體、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中間物、細(xì)胞凋亡相關(guān)激酶和依賴細(xì)胞周期蛋白的蛋白激酶。很多蛋白激酶起致癌基因的功能。他們負(fù)責(zé)將磷酸酯基團(tuán)轉(zhuǎn)移到特定酪氨酸、絲氨酸或蘇氨酸氨基酸殘基上，并且依據(jù)他們的底物特異性而被廣義地分類為酪氨酸和S/T激酶。
絲氨酸/蘇氨酸激酶 S/T激酶是蛋白激酶中一個(gè)大的亞家族，其特異性地將磷酸酯基團(tuán)轉(zhuǎn)移到特定絲氨酸或蘇氨酸殘基的末端羥基部分上(Hanks等，(1988)Science，24142-52)。大量的S/T激酶家族成員參與炎癥的信號傳導(dǎo)、腫瘤生長或細(xì)胞轉(zhuǎn)化。例如，促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)是S/T激酶，其在Toll樣受體(TLR)如TLR4，生長/存活受體例如EGF，和死亡受體如TNF受體的信號級聯(lián)過程中作為中間物。已有人指出MAPK如胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK1-2)、p38α、c-Jun N-末端激酶(JNK)或MAPKAP-K2(MK2)的活化可以在細(xì)胞如單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞中傳導(dǎo)信號，結(jié)果導(dǎo)致在細(xì)胞外產(chǎn)生促炎性細(xì)胞因子如TNF。
TPL-2是S/T激酶，其與稱為MAP激酶激酶激酶(MAP3K)的激酶亞家族在其催化域內(nèi)是同源的(Salmeron等人，(1996)EMBO J.，15，817-826)，并且與人COT的原癌基因產(chǎn)物的同一性>90％(Aoki等人，(1993)J.Biol.Chem.，268，22723-22732)。TPL-2最初是作為大鼠中與Moloney鼠白血病病毒誘導(dǎo)的T細(xì)胞淋巴瘤有關(guān)的癌基因產(chǎn)物，以C-末端刪除的形式鑒定出來的(Patriotis等人，(1993)Proc.Natl.Acad.ScLUSA 90，2251-2255)。TPL-2也與激酶HIK高度同源，已經(jīng)表明激酶NIK調(diào)節(jié)IκB-α的誘導(dǎo)型降解(Malinin等人，(1997)Nature，385，540-544；WO 97/37016；May和Ghosh，(1998)Immunol.Today，19，80-88)。在通過TLR激動劑例如脂多糖(LPS)刺激的巨噬細(xì)胞中，TPL-2是MAP2K(MEK1-2)的激活所必需的，MAP2K又激活MAPK(細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)的激酶，ERK1-2)。在巨噬細(xì)胞中，TPL-2在LPS-誘導(dǎo)的TNF，IL-1β和COX-2誘導(dǎo)的前列腺素-E2生成中起決定性作用(Tsichlis等人，(2000)，CeH，103，1071；Tsichlis等人，(2002)，EMBO J，21，4831-4840)。COT/TPL-2在各種腫瘤中的表達(dá)(Tsanisi等人，(2000)，Int J Mol Med，5，583)以及在COT剔除的小鼠中觀察到TNF生成的缺陷(Tsichlis等人，(2000)，Cell，103，1071)表明COT可以是用于治療癌癥、炎癥或由促炎細(xì)胞因子介導(dǎo)的其他疾病的方法。
MK2(MAPKAP-K2)是參與炎性過程的關(guān)鍵S/T激酶。MK2是MAPK p38的底物(Stokoe等人，(1992)，EMBO J.，11，3985-3994；Ben-Levy等人，(1995)，EMBO J.，14，5920-5930)。在免疫細(xì)胞中，MK2的激活導(dǎo)致一定順序的細(xì)胞反應(yīng)，包括細(xì)胞因子生成、增殖和激活。MK2生成缺陷的剔除小鼠是健康和能生育的，但是不能作為對于炎性刺激的反應(yīng)而產(chǎn)生細(xì)胞因子例如腫瘤壞死因子(TNF)(Kotlyarov等人，(1999)，Nat.Cell Biol，1，94-97)。MK2可以改變基因表達(dá)，這是通過磷酸化mRNA-結(jié)合蛋白(Winzen等人，(1999)，EMBO J.，18，4969-4980；Lasa等人，(2000)，MoI Cell.Biol，20，4265-4274；Rousseau等人，(2002)，EMBO J.，21，6505-6514；Bollig等人，(2003)，Biochem.Biophys.Res.Commun，301，665-670；Tran等人，(2003)，MoI.Cell.Biol，23，7177-7188.)，Chrestensen，C.A.等人，J.Biol Chem.2004，279，10176-10184和Stoecklin，G.等人，EMBO J.2004，23，1313-1324)、轉(zhuǎn)錄因子(Heidenreich等人，(1999)，J.Biol.Chem.，274，14434-14443)或其他蛋白(Stokoe等人，(1992)，F(xiàn)EBS Lett.，313，307-313；Sutherland等人，(1993)，Eur.J.Biochem.，217，715-722；Werz等人，(2000)，Proc.Natl.Acad.ScLJJSA，91，5261-5266)而實(shí)現(xiàn)的。MK2剔除物中TNF生成的缺陷表明p38 MAPK抑制劑的抗炎作用可能在很大程度上是由于MK2的激活被阻斷所致。MK2的抑制劑可有效治療研制或者由促炎性細(xì)胞因子介導(dǎo)的其他疾病。
蛋白酪氨酸激酶 蛋白酪氨酸激酶(PTK)是催化細(xì)胞蛋白中特定酪氨酸殘基磷酸化的酶。這些底物蛋白(通常是酶自身)的這種翻譯后修飾充當(dāng)調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、激活或分化的分子開關(guān)(有關(guān)綜述參見Schlessinger和Ulrich，1992，Neuron 9383-391)。已經(jīng)在多種疾病，包括良性和惡性增殖性疾病以及由免疫系統(tǒng)的不當(dāng)激活引起的疾病(例如自身免疫病)、同種移植物排斥和移植物抗宿主病中，觀察到PTK活性異常或過高。另外，內(nèi)皮細(xì)胞特異性受體PTK例如KDR和Tie-2介導(dǎo)血管生成過程，，并因此參與支持癌癥和涉及不當(dāng)血管形成的其他疾病(例如糖尿病性視網(wǎng)膜病、老年黃斑變性所致的脈絡(luò)膜新血管形成、牛皮癬、關(guān)節(jié)炎、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病和嬰兒血管瘤)的發(fā)展。
酪氨酸激酶可以是受體型(具有胞外、跨膜和胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)域)或非受體型(全部在細(xì)胞內(nèi))。
受體酪氨酸激酶(PTK) PTK包括具有多樣生物活性的跨膜受體大家族。目前，已經(jīng)鑒定出至少19種不同的RTK亞家族。受體酪氨酸激酶(PTK)家族包括對于多種細(xì)胞類型的生長和分化呈關(guān)鍵性的受體(Yarden和Ullrich，Ann.Rev.Biochem.57433-478，1988；Ullrich和Schlessinger，Cell 61243-254，1990)。RTK的內(nèi)在功能在配體結(jié)合時(shí)被激活，導(dǎo)致受體和多種細(xì)胞底物的磷酸化，隨后產(chǎn)生多種細(xì)胞反應(yīng)(Ullrich & Schlessinger，1990，Cell61203-212)。因此，受體酪氨酸激酶介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)由與特定生長因子(配體)的胞外相互作用啟動，隨后通常是受體二聚化、刺激內(nèi)在蛋白酪氨酸激酶活性和受體的轉(zhuǎn)磷酸化。從而產(chǎn)生胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的結(jié)合部位，導(dǎo)致與多種能促進(jìn)適當(dāng)細(xì)胞反應(yīng)(例如細(xì)胞分裂、分化、代謝效應(yīng)和胞外微環(huán)境的變化，參見Schlessinger和Ullrich，1992，Neuron 91-20)的胞質(zhì)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子形成復(fù)合物。
非受體酪氨酸激酶 非受體酪氨酸激酶代表缺乏胞外和跨膜序列的細(xì)胞酶的集合。已經(jīng)鑒定出超過24種非受體酪氨酸激酶個(gè)體，包括11個(gè)亞家族(Src、Frk、Csk、Abl、Zap70、Fes/Fps、Fak、Jak、Ack和LIMK)。非受體酪氨酸激酶的Src亞家族由最多數(shù)量的PTK組成，并且包括Src、Yes、Fyn、Lyn、Lck、Blk、Hck、Fgr和Yrk。已經(jīng)表明Src亞家族酶與致癌及免疫反應(yīng)有關(guān)。有關(guān)非受體酪氨酸激酶的更詳細(xì)論述參見Bohlen 1993，Oncogene82025-2031，該文獻(xiàn)在此引入用作參考。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)多種激酶(無論是受體或非受體酪氨酸激酶還是S/T激酶)參與涉及多種疾病的細(xì)胞信號通路，包括免疫調(diào)控、炎癥或增殖性疾病如癌癥。
本發(fā)明的一個(gè)相關(guān)方面提供了在患有其中COT活性有害的病癥的人個(gè)體中抑制COT的方法，所述方法包括給人個(gè)體施用式(I)化合物，這樣人個(gè)體中的COT活性被抑制，并且實(shí)現(xiàn)治療。
本發(fā)明的另一個(gè)相關(guān)方面提供了在患有其中MK2活性有害的病癥的人個(gè)體中抑制MK2的方法，所述方法包括給人個(gè)體施用式(I)化合物，這樣人個(gè)體中的MK2活性被抑制，并且實(shí)現(xiàn)治療。
式(I)化合物或其鹽或者包含有效量式(I)化合物或其鹽的藥物組合物可用于治療人中選自下列的病癥類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、少年慢性關(guān)節(jié)炎、Lyme關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎和敗血性關(guān)節(jié)炎、脊椎關(guān)節(jié)病、全身紅斑狼瘡、局限性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、炎性腸病、胰島素依賴性糖尿病、甲狀腺炎、哮喘、變應(yīng)性疾病、牛皮癬、皮炎、硬皮病、移植物對宿主疾病、器官移植排斥(包括但不限于骨髓和實(shí)體器官排斥)、與器官移植有關(guān)的急性或慢性免疫疾病、肉樣瘤病、動脈粥樣硬化、播散性血管內(nèi)凝血、Kawasaki′s病、Grave′s病、腎病綜合征、慢性疲勞綜合征，韋格內(nèi)氏肉芽腫病、Henoch-Schoenlein紫斑癥、腎臟微血管炎、慢性活性肝炎、眼色素層炎、敗血性休克、中毒性休克綜合征、敗血病綜合征、惡病質(zhì)、傳染性疾病、寄生蟲病、獲得性免疫缺陷綜合征、急性橫貫性脊髓炎、亨廷頓舞蹈病、帕金森氏病、阿爾茨海默氏病、中風(fēng)、原發(fā)性膽汁性肝硬變、溶血性貧血、惡性腫瘤、心力衰竭、心肌梗塞、Addison病、散發(fā)性病，I型多腺缺乏癥與II型多腺缺乏癥，Schmidt綜合征、成人(急性)呼吸窘迫綜合征，脫發(fā)、局部性脫發(fā)，血清陰性關(guān)節(jié)病、關(guān)節(jié)病、Reiter病、牛皮癬性關(guān)節(jié)病、潰瘍性結(jié)腸炎關(guān)節(jié)病、腸病性滑膜炎，與衣原體、耶爾森氏菌和沙門氏菌有關(guān)的關(guān)節(jié)病，粥樣硬化病/動脈硬化、特應(yīng)性變態(tài)反應(yīng)、自身免疫性大皰病、尋常性天皰瘡、落葉狀天皰瘡，類天皰瘡、線性IgA病、自身免疫溶血性貧血、Coombs陽性溶血性貧血、獲得性惡性貧血、青少年惡性貧血、肌痛性腦炎/Royal Free病、慢性粘膜皮層念珠菌病、巨細(xì)胞動脈炎、原發(fā)性硬化肝炎、隱原性自身免疫肝炎、獲得性免疫缺陷病綜合征、獲得性免疫缺陷相關(guān)疾病、乙型肝炎、丙型肝炎、普通可變性免疫缺陷(普通可變性血中丙種球蛋白缺少癥)、擴(kuò)張性心肌病、女性不孕、卵巢衰竭、卵巢早期衰竭、纖維變性肺病、慢性創(chuàng)傷愈合、隱原性纖維化肺泡炎、炎癥后間質(zhì)性肺病、間質(zhì)性肺炎、與締結(jié)組織病相關(guān)的間質(zhì)性肺病、混合性締結(jié)組織病相關(guān)性肺病、與全身性硬化有關(guān)的間質(zhì)性肺病、與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有關(guān)的間質(zhì)性肺病、與全身性紅斑狼瘡相關(guān)的肺病、與皮膚肌炎/多肌炎有關(guān)的肺病、Sjogren病相關(guān)性肺病、與僵直性脊椎炎相關(guān)的肺病、脈管擴(kuò)散性肺病、與含鐵血黃素沉著病相關(guān)的肺病、藥物誘發(fā)的間質(zhì)性肺病、放射性纖維化、閉塞性毛細(xì)支氣管炎、慢性嗜酸性肺炎、淋巴細(xì)胞浸潤性肺病、感染后間質(zhì)性肺病、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、自身免疫肝炎、1型自身免疫性肝炎(傳統(tǒng)自身免疫或類狼瘡性肝炎)、2型自身免疫性肝炎(抗-LKM抗體肝炎)、自身免疫介導(dǎo)的低血糖癥、伴有黑棘皮癥的B型胰島素抗性、甲狀旁腺機(jī)能減退、與器官移植相關(guān)的急性免疫病、與器官移植相關(guān)的慢性免疫病、骨關(guān)節(jié)病、原發(fā)性硬化膽管炎、1型牛皮癬、2型牛皮癬、自發(fā)性白血球減少癥、自身免疫性中性白血球減少癥、NOS腎病、腎小球性腎炎、Lyme病、盤狀紅斑狼瘡、自發(fā)性或NOS男性不育癥、精子自身免疫癥、多發(fā)性硬化(所有亞型)、交感神經(jīng)性眼炎、繼發(fā)于締結(jié)組織病的肺高血壓、Goodpasture綜合征、肺部發(fā)病性結(jié)節(jié)性多動脈炎、急性風(fēng)濕熱、類風(fēng)濕脊椎炎、Still病、全身性硬化、Sjogren綜合征、Takayasu病/動脈炎、自身免疫性血小板減少癥、自發(fā)性血小板減少癥、自身免疫性甲狀腺疾病、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)、甲狀腺腫性自身免疫甲狀腺機(jī)能減退(Hashimoto病)、萎縮性自身免疫性甲狀腺機(jī)能減退、原發(fā)性粘液水腫、晶狀體源性葡萄膜炎、原發(fā)性脈管炎、白斑病、急性肝病、慢性肝病、酒精性肝硬變、酒精誘發(fā)的肝損傷、膽汁阻滯(choleosatatis)、特異性肝病、藥物誘發(fā)的肝炎、非酒精性脂肪肝炎、過敏與哮喘、B類鏈球菌(GBS)感染、精神病(例如抑郁癥和精神分裂癥)、Th2型和Th1型介導(dǎo)的疾病，和癌癥例如肺癌、乳腺癌、胃癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌和直腸癌與造血性惡性病(白血病和淋巴瘤)，與造血性惡性病(白血病和淋巴瘤)，以及涉及不當(dāng)血管化的疾病，例如糖尿病性視網(wǎng)膜病、早熟性視網(wǎng)膜病、老年黃斑變性所致的脈絡(luò)膜新血管增生化和幼兒血管瘤。此外，本發(fā)明化合物可用于治療病癥例如水腫、腹水、積液和滲出液，包括例如斑狀水腫、腦水腫、急性肺損傷、成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)，增生性疾病如再狹窄，纖維變性疾病如肝硬化和動脈粥樣硬化，腎小球膜細(xì)胞增生病變例如腎小球性腎炎、糖尿病性腎病、惡性腎硬化、血栓性微血管病綜合征和腎小球病變，心肌血管生成、冠狀動脈與大腦側(cè)突、局部缺血性四肢血管生成、局部缺血/再灌注損傷、與胃潰瘍螺旋桿菌相關(guān)的疾病、病毒誘發(fā)的血管生成病、Crow-Fukase綜合征(POEMS)、子癇前期、月經(jīng)過多、貓爪熱、潮紅、新血管性青光眼和視網(wǎng)膜病，如與糖尿病性視網(wǎng)膜病、早熟性視網(wǎng)膜病或老年黃斑變性有關(guān)的那些疾病。此外，本發(fā)明化合物還可以作為活性劑用于抗實(shí)體瘤、惡性腹水、von Hippel Lindau疾病、造血系統(tǒng)癌癥和過度增生性疾病如甲狀腺增生(尤其是Grave病)和囊腫(如以多囊性卵巢綜合征(Stein-Leventhal綜合征)為特征的卵巢基質(zhì)過度血管化和多囊性腎病，因?yàn)閷τ谏L和/或新陳代謝而言這些疾病需要血管細(xì)胞發(fā)生增生。
本發(fā)明式(I)化合物可以單獨(dú)使用或與其他治療劑聯(lián)合使用來治療這些疾病。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明化合物可以單獨(dú)使用或與其他物質(zhì)如治療劑聯(lián)合使用，這些其他物質(zhì)可由本領(lǐng)域技術(shù)人員依據(jù)預(yù)定目的加以選擇。例如，這些其他物質(zhì)也可以是本領(lǐng)域已知適于治療本發(fā)明化合物可治療的疾病或病癥的治療劑。這些其他物質(zhì)也可以是可賦予該治療組合物有利性質(zhì)的物質(zhì)，例如能影響組合物粘度的物質(zhì)。
進(jìn)一步應(yīng)當(dāng)理解的是，包括在本發(fā)明范圍內(nèi)的聯(lián)用藥物是那些適用于其預(yù)定目的的聯(lián)用藥物。下文給出的物質(zhì)僅供說明，而非用來加以限制。構(gòu)成本發(fā)明一部分的聯(lián)用藥物可以是本發(fā)明化合物與至少一種選自以下的其他藥劑的組合。如果這種組合能使所形成的組合物實(shí)現(xiàn)其預(yù)定功能，則這種聯(lián)用藥物也可以包括多于一種的其他藥劑，例如兩種或三種其他藥劑。
優(yōu)選的聯(lián)用藥物是也稱作NSAIDS的非甾體抗炎藥，其包括如布洛芬的藥物。其他優(yōu)選的聯(lián)用藥物是包括強(qiáng)的松龍?jiān)趦?nèi)的皮質(zhì)甾類；在與本發(fā)明的抗-IL-18抗體聯(lián)合使用來治療患者時(shí)，通過減少治療患者需要的甾類藥物劑量，能夠降低甚至消除眾所周知的甾類藥物的副作用。可以與本發(fā)明式(I)化合物聯(lián)合使用的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎治療劑的非限制性實(shí)例包括下列細(xì)胞因子抑制性消炎藥(CSAID)；其他人細(xì)胞因子或生長因子的抗體或拮抗劑，例如TNF、LT、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-12、IL-15、IL-16、IL-21、IL-23，干擾素，EMAP-II、GM-CSF、FGF和PDGF。本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合部分可以與細(xì)胞表面分子的抗體例如CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD80(B7.1)、CD86(B7.2)、CD90、CTLA或其配體，包括CD154(gp39或CD40L)聯(lián)合使用。
優(yōu)選的治療劑聯(lián)用藥物可在自身免疫和后續(xù)的炎癥級聯(lián)反應(yīng)中的不同時(shí)刻進(jìn)行干擾；優(yōu)選的實(shí)例包括TNF拮抗劑，如嵌合、人源化或人類TNF抗體，D2E7(HUMIRATN)，(PCT公開WO 97/29131)，CA2(REMICADETM)，CDP 571與可溶性p55或p75 TNF受體，其衍生物，(p75TNFR1G(ENBRELTM)或p55TNFR1gG(Lenercept)，以及TNFα轉(zhuǎn)化酶(TACE)抑制劑，同樣，IL-1抑制劑(白介素-1轉(zhuǎn)化酶抑制劑，IL-1RA等)基于同樣原因也是有效的。其他優(yōu)選的聯(lián)用藥物包括白介素11。其他優(yōu)選的聯(lián)用藥物是自身免疫反應(yīng)的其他重要成員，其作用與IL-18功能平行、相關(guān)或一致；尤為優(yōu)選IL-12拮抗劑，包括IL-12抗體或可溶性IL-12受體，或IL-12結(jié)合蛋白。已知IL-12和IL-18具有重疊但又不同的功能，因此這二者的拮抗劑聯(lián)合使用應(yīng)是最有效的。再一種優(yōu)選的聯(lián)用藥物是非耗盡性抗-CD4抑制劑。另一類的優(yōu)選組合包括共同刺激途徑CD80(B71)或CD86(B7.2)，包括抗體、可溶性受體或拮抗性配體。
式(I)化合物還可以與以下藥劑聯(lián)合使用，例如甲氨蝶呤，6-MP，硫唑嘌呤硫氮磺胺吡啶，美沙拉嗪，奧沙拉嗪氯喹/羥基氯喹，青霉胺，硫代蘋果酸金鈉(肌內(nèi)和口服)，硫唑嘌呤，秋水仙素，甾類藥物(口服、吸入與局部注射)，β-2腎上腺素受體激動劑(舒喘寧、叔丁喘寧、salmeteral)、黃嘌呤類(茶堿、胺茶堿)，色甘酸鹽，里多酸，酮替芬，異丙托品和氧托胺，環(huán)孢素，F(xiàn)K506、瑞泊霉素(rapamycin)，霉芬酸莫非替(mycophenolate mofetil)，利氟酰胺(leflunomide)，NSAID，例如布洛芬，甾類藥物例如泊尼松，磷酸二酯酶抑制劑，腺苷激動劑，抗血栓劑，補(bǔ)體抑制劑，腎上腺素能劑，干擾促炎性細(xì)胞因子如TNFα或IL-1信號的藥劑(例如IRAK家族、NIK、IKK家族、p38或MAP激酶抑制劑)，IL-1β轉(zhuǎn)化酶抑制劑，TNFα轉(zhuǎn)化酶(TACE)抑制劑，T-細(xì)胞信號抑制劑如激酶抑制劑、金屬蛋白酶抑制劑，柳氮磺胺吡啶，硫唑嘌呤，6-巰基嘌呤，血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶抑制劑，可溶性細(xì)胞因子受體及其衍生物(例如可溶性p55或p75 TNF受體與衍生物p75TNFRIgG(EnbrelTM和p55TNFRIgG(Lenercept))，sIL-1RI，sIL-1RH，sIL-6R)，抗炎性細(xì)胞因子(例如IL-4、IL-10、IL-11、IL-13和TGFβ)，賽克比(celecoxib)，葉酸，硫酸羥基氯喹，rofecoxib，抑制登普(etanercept)，抑氟麥(infliximab)，萘普生，瓦克比(valdecoxib)，柳氮磺胺吡啶，甲強(qiáng)龍，美洛昔康，醋酸甲強(qiáng)龍，硫代蘋果酸金鈉，阿司匹林，丙炎松，萘磺酸丙氧芬/apap，葉酸鹽，萘丁美酮，雙氯芬酸，吡羅昔康，依托度酸，雙氯芬酸鈉，噁丙嗪，鹽酸羥考酮，氫可酮二酒石酸鹽/apap，雙氯芬酸鈉/米索前列醇，芬太尼，安克拉(anakinra)，人重組體，鹽酸曲馬多，salsalate，舒林酸，氰鈷胺/fa/吡多酸，對乙酰氨基酚，亞忍

酸鈉(alendronate sodium)，潑尼松龍，硫酸嗎啡，鹽酸利多卡因，吲哚美辛，葡糖胺，硫酸/軟骨素(sulf/chondroitin)，鹽酸阿米替林，磺胺嘧啶，鹽酸羥氫可的酮/對乙酰氨基酚，鹽酸歐樂定(olopatadine)，米索前列醇，萘普生鈉，奧鎂拉唑，環(huán)磷酰胺，利物麥(rituximab)，IL-1TRAP，MRA，CTLA4-IG，IL-18 BP，抗-IL-12，抗-IL-15，BIRB-796，SCIO-469，VX-702，AMG-548，VX-740，Roflumilast，IC-485。CDC-801和美索普(Mesopram)。優(yōu)選的聯(lián)用藥物包括甲氨蝶呤或利氟酰胺(leflunomide)，對于中度或嚴(yán)重的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病例，則包括環(huán)孢菌素和上面所述的抗-TNF抗體。
可以與本發(fā)明式(I)化合物聯(lián)用的炎癥性腸病治療劑的非限制性實(shí)例包括以下丁地去炎松；表皮生長因子；甾類藥物；環(huán)孢菌素，柳氮磺胺吡啶；氨基水楊酸鹽，6-巰基嘌呤；硫唑嘌呤；甲硝噠唑，脂氧合酶抑制劑；美沙拉嗪；奧沙拉嗪；巴沙拉嗪(balsalazide)；抗氧化劑；血栓烷抑制劑；IL-1受體拮抗劑；抗-IL-1β單克隆抗體；抗-IL-6單克隆抗體；生長因子；彈性酶抑制劑；吡啶基-咪唑化合物；其他人細(xì)胞因子或生長因子的抗體或拮抗劑，這些因子例如TNF，LT，IL-1，IL-2，IL-6，IL-7，IL-8，IL-12，IL-15，IL-16，EMAP-II，GM-CSF，F(xiàn)GF，和PDGF；細(xì)胞表面分子如CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD90或其配體；甲氨蝶呤；環(huán)孢菌素；FK506，瑞泊霉素(rapamycin)；霉芬酸莫非替(mycophenolate mofetil)；利氟酰胺(leflunomide)；NSAID，例如布洛芬；甾類藥物例如泊尼松，磷酸二酯酶抑制劑；腺苷激動劑；抗血栓劑；補(bǔ)體抑制劑；腎上腺素能劑；干擾促炎性細(xì)胞因子如TNFα或IL-1信號的藥劑(例如IRAK、NIK、IKK、p38或MAP激酶抑制劑)；IL-1β轉(zhuǎn)化酶抑制劑；TNFα轉(zhuǎn)化酶抑制劑；T-細(xì)胞信號抑制劑如激酶抑制劑；金屬蛋白酶抑制劑；柳氮磺胺吡啶；6-巰基嘌呤；血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶抑制劑；可溶性細(xì)胞因子受體及其衍生物(例如可溶性p55或p75 TNF受體，sIL-1RI，sIL-1RH，sIL-6R)和抗炎性細(xì)胞因子(例如IL-4，IL-10，IL-11，IL-13和TGFβ)?？梢耘c式(I)化合物聯(lián)用的局限性回腸炎治療劑的優(yōu)選實(shí)例包括下列TNF拮抗劑例如抗-TNF抗體，D2E7(PCT公開WO97/29131； HUMIRATM)，CA2(REMICADETM)，CDP 571，TNFR-Ig構(gòu)建物，(p75TNFRIgG(ENBRELTM)和p55TNFRIgG(LENERCEPTTM))抑制劑和PDE4抑制劑。式(I)化合物可以以下藥劑聯(lián)用甾類藥物，例如丁地去炎松和地塞米松；柳氮磺胺吡啶；5-氨基水楊酸；奧沙拉嗪；和能干擾促炎性細(xì)胞因子如IL-1的合成或作用的藥劑，例如IL-1β轉(zhuǎn)化酶抑制劑和IL-1ra；T細(xì)胞信號抑制劑，例如酪氨酸激酶抑制劑6-巰基嘌呤；IL-11；美沙拉嗪(mesalamine)；潑尼松；硫唑嘌呤；巰嘌呤；抑氟麥(infliximab)；琥鈉甲強(qiáng)龍；二苯氧酸(diphenoxylate)atrop硫酸鹽；鹽酸樂普酰胺；甲氨蝶呤；奧美拉唑；葉酸鹽；環(huán)丙沙星/葡萄糖-水；氫可酮二酒石酸鹽/apap；鹽酸四環(huán)素；醋酸膚輕松；甲硝噠唑；硫柳汞/硼酸；消膽胺/蔗糖；鹽酸環(huán)丙沙星；硫酸莨菪堿；鹽酸哌替啶；鹽酸咪達(dá)唑??；鹽酸羥氫可待酮/乙酰胺酚；鹽酸異丙嗪；磷酸鈉；磺胺甲基異噁唑/甲氧芐胺嘧啶；賽克比；聚卡波非(polycarbophil)；萘磺酸丙氧芬；氫化可的松；多種維生素；布沙拉賽(balsalazide)二鈉鹽；磷酸可待因/apap；鹽酸克菲林(colesverlam HCl)；氰鈷胺；葉酸；左氟沙星；甲強(qiáng)龍；納利速(natalizumab)和γ-干擾素。
可以與本發(fā)明式(I)化合物聯(lián)用的多發(fā)性硬化治療劑的非限制性實(shí)例包括以下甾類藥物；強(qiáng)的松龍，甲強(qiáng)龍；硫唑嘌呤；環(huán)磷酰胺；環(huán)孢菌素；甲氨蝶呤；4-氨基吡啶；替才尼定；干擾素-β1a(AVONEX

；Biogen)；干擾素-β1b

Chiron/Berlex)；干擾素α-n3)(Interferon Sciences/Fujimoto)，干擾素-α(Alfa Wassermann/J&J)，干擾素β1A-IF(Serono/Inhale Therapeutics)，聚乙二醇化干擾素α 2b(Enzon/Schering-Plough)，共聚物1(Cop-1；COPAXONE；TevaPharmaceutical Industries，Inc.)；高壓氧；靜脈內(nèi)免疫球蛋白；鈣結(jié)合蛋白；其他人類細(xì)胞因子或生長因子及它們的受體的抗體或拮抗劑，這些因子例如TNF，LT，IL-1，IL-2，IL-6，IL-7，IL-8，IL-12，IL-23，IL-15，IL-16，EMAP-II，GM-CSF，F(xiàn)GF，和PDGF。式(I)化合物可與細(xì)胞表面分子如CD2、CD3、CD4、CD8、CD19、CD20、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD80、CD86、CD90或他們的配體聯(lián)合使用。式(I)化合物也可以與下列藥劑聯(lián)用，例如甲氨蝶呤，環(huán)孢菌素，F(xiàn)K506，瑞泊霉素(rapamycin)，霉芬酸莫非替(mycophenolate mofetil)，利氟酰胺(leflunomide)，NSAID，例如布洛芬，甾類藥物例如泊尼松，磷酸二酯酶抑制劑，腺苷激動劑，抗血栓劑，補(bǔ)體抑制劑，腎上腺素劑，干擾促炎性細(xì)胞因子如TNFα或IL-1信號的藥劑(例如IRAK、NIK、IKK、p38或MAP激酶抑制劑)，IL-1β轉(zhuǎn)化酶抑制劑，TACE抑制劑，T-細(xì)胞信號抑制劑如激酶抑制劑，金屬蛋白酶抑制劑，柳氮磺胺吡啶，6-巰基嘌呤，血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶抑制劑，可溶性細(xì)胞因子受體及其衍生物(例如可溶性p55或p75 TNF受體，sIL-1RI，sIL-1RH，sIL-6R)和抗炎性細(xì)胞因子(例如IL-4，IL-10，IL-13和TGFβ)。
可以與式(I)化合物聯(lián)用的多發(fā)性硬化治療劑的優(yōu)選實(shí)例包括下列干擾素，例如IFNβ和IFNβ1b；克樸松(copaxone)，甾類藥物，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)抑制劑，例如半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1的抑制劑，IL-1抑制劑，TNF抑制劑，和CD40配體和CD80的抗體。
式(I)化合物還可以與以下藥劑聯(lián)用，例如安速美(alemtuzumab)，道本諾(dronabinol)，Unimed，得克美(daclizumab)，米托蒽醌，賽利丹(xaliproden)鹽酸鹽，發(fā)普啶(fampridine)，格地馬(glatiramer)乙酸鹽，納利速(natalizumab)，辛必德(sinnabidol)，α-免疫因子NNSO3，ABR-215062，AnergiX.MS，趨化因子受體拮抗劑，BBR-2778，卡貴靈(calagualine)，CPI-1189，LEM(脂質(zhì)體封裝的米托蒽醌)，THC.CBD(類大麻醇激動劑)，MBP-8298，mesopram(PDE4抑制劑)，MNA-715，抗-IL-6受體抗體，尼洛非(neurovax)，普吩酮(pirfenidone allotrap)1258(RDP-1258)，sTNF-R1，塔拉本(talampanel)，teriflunomide，TGF-β2，地莫太(tiplimotide)，VLA-4拮抗劑(例如，TR-14035，VLA4 Ultrahaler，Antegran-ELAN/Biogen)，干擾素γ拮抗劑和IL-4激動劑。
可以與本發(fā)明式(I)化合物聯(lián)用的心絞痛治療劑的非限制性實(shí)例包括以下阿司匹林，硝酸甘油，單硝酸異山梨醇酯，美托洛爾琥珀酸鹽，阿替洛爾，美托洛爾酒石酸鹽，氨氯地平苯磺酸鹽，地爾硫

鹽酸鹽，二硝酸異山梨醇酯，氯吡格雷硫酸氫鹽，硝苯地平，阿伐他汀鈣，氯化鉀，利尿磺胺，辛伐他汀，維拉帕米鹽酸鹽，地高辛，心得安鹽酸鹽，卡維地洛，賴諾普利，螺甾內(nèi)酯，雙氫氯噻嗪，依那普利馬來酸鹽，納多洛爾，雷米普利，依諾肝素鈉，肝素鈉，纈沙坦，梭達(dá)羅鹽酸鹽，非諾貝特，抑心安(ezetimibe)，布美他尼，洛沙坦鉀，賴諾普利/雙氫氯噻嗪，非洛地平，卡托普利，比索洛爾富馬酸鹽。
可以與式(I)化合物聯(lián)用的強(qiáng)直性脊柱炎治療劑的非限制性實(shí)例包括以下布洛芬，雙氯芬酸，迷索前列醇，萘普生，美洛昔康，吲哚美辛，雙氯芬酸，西利考昔，羅非考昔，柳氮磺胺嘧啶，甲氨蝶呤，咪唑硫嘌呤，米諾環(huán)素(minocyclin)，潑尼松，依那西普，英夫利昔單抗。
可以與式(I)化合物聯(lián)用的哮喘治療劑的非限制性實(shí)例包括以下舒喘寧，沙美特羅/氟替卡松，蒙克斯特(montelukast)鈉，丙酸氟替卡松，布地縮松，潑尼松，沙美特羅-辛弗松，左旋舒喘寧鹽酸鹽，舒喘寧硫酸鹽/異丙托品，強(qiáng)的松龍磷酸鈉酯，曲安西龍丙酮化合物，二丙酸氯地米松，異丙托品溴化物，阿奇霉素，乙酸吡布特羅，潑尼松龍，無水茶堿，甲基潑尼松龍琥珀酸酯鈉，克拉霉素，扎魯司特，佛摩特羅富馬酸鹽，流感病毒疫苗，甲潑尼龍，阿莫西林三水合物，氟尼縮松，過敏癥注射液，色甘酸鈉，非索非那定鹽酸鹽，氟尼縮松/薄荷醇，阿莫西林/克拉維酸鹽，左氟沙星，吸入器促進(jìn)設(shè)備，愈創(chuàng)木酚甘油醚，地塞米松磷酸鈉，莫西沙星鹽酸鹽，強(qiáng)力霉素hyclate，愈創(chuàng)木酚甘油醚/右旋甲氧吩，p-麻黃素/cod/克吩尼(chlorphenir)，格氟辛(gatifloxacin)，西替利嗪鹽酸鹽，莫大美松(莫米他松)糠酸鹽，沙美特羅辛弗松，苯佐那酯，頭孢菌素，pe/氫可酮/克吩尼，西替利嗪鹽酸鹽/速非得(pseudoephed)，苯腎上腺素/cod/普魯米近，可待因/普魯米近，頭孢丙烯，地塞米松，愈創(chuàng)木酚甘油醚/偽假麻黃堿，撲爾敏/氫可酮，尼可米(nedocromil)鈉，叔丁喘寧硫酸鹽，腎上腺素，甲基強(qiáng)的松龍，間羥異丙腎上腺硫酸鹽。
可以與式(I)化合物聯(lián)用的COPD治療劑的非限制性實(shí)例包括以下舒喘寧硫酸鹽/異丙托品，異丙托品溴，沙美特羅/氟替卡松，舒喘寧，沙美特羅-辛弗松，氟替卡松丙酸鹽，潑尼松，無水茶堿，甲基潑尼松龍琥珀酸酯鈉，蒙克斯特(montelukast)鈉，布地縮松，佛摩特羅富馬酸鹽，曲安西龍丙酮化合物，左氟沙星，愈創(chuàng)木酚甘油醚，阿奇霉素，二丙酸氯地米松，左旋舒喘寧(levalbuterol)鹽酸鹽，氟尼縮松，頭孢三嗪鈉，阿莫西林三水合物，格氟辛(gatifloxacin)，扎魯司特，阿莫西林/克拉維酸鹽，氟尼縮松/薄荷醇，撲爾敏/氫可酮，間羥異丙腎上腺硫酸鹽，甲基強(qiáng)的松龍，莫米他松糠酸鹽，p-麻黃素/cod/氯芬(chlorphenir)，吡布特羅乙酸酯，對-麻黃素/氯雷他定，叔丁喘寧硫酸鹽，奇特平(tiotropium)溴化物，(R，R)-佛摩特羅，TgAAT，西洛米拉斯特(cilomilast)和羅氟米拉斯特(roflumilast)。
可以與式(I)化合物聯(lián)用的HCV治療劑的非限制性實(shí)例包括以下干擾素-α-2a，干擾素-α-2b，干擾素-α con1，干擾素-α-n1，聚乙二醇化干擾素-α-2a，聚乙二醇化干擾素-α-2b，利巴韋林，聚乙二醇化α-2b+利巴韋林，烏索脫氧膽酸，甘草酸，塞莫辛(thymalfasin)，莫塞胺(Maxamine)，VX-497以及通過干涉以下靶體用于治療HCV的任何化合物HCV聚合酶，HCV蛋白酶，HCV解螺旋酶和HCV IRES(內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn))。
可以與式(I)化合物聯(lián)用的特發(fā)性肺纖維化治療劑的非限制性實(shí)例包括以下潑尼松，咪唑硫嘌呤，舒喘寧，秋水仙堿，舒喘寧硫酸鹽，地高辛，γ干擾素，甲基強(qiáng)的松龍草地汁，氯羥去甲安定，利尿磺胺，賴諾普利，硝酸甘油，螺甾內(nèi)酯，環(huán)磷酰胺，異丙托品溴化物，放線菌素D，阿替普酶，氟替卡松丙酸酯，左氟沙星，間羥異丙腎上腺硫酸鹽，硫酸嗎啡，氧可酮鹽酸鹽，氯化鉀，曲安西龍丙酮化合物，無水塔克羅姆(tacrolimus)，鈣，干擾素-α，甲氨蝶呤，霉芬酸莫非替(mycophenolatemofetil)和干擾素-γ-1β。
可以與式(I)化合物聯(lián)用的心肌梗塞治療劑的非限制性實(shí)例包括以下阿司匹林，硝酸甘油，美托洛爾酒石酸鹽，依諾肝素鈉，肝素鈉，氯吡格雷硫酸氫鹽，卡維地洛，阿替洛爾，硫酸嗎啡，美托洛爾琥珀酸鹽，華法林鈉，賴諾普利，單硝酸異山梨醇，地高辛，利尿磺胺，辛伐他汀，雷米普利，地利普(tenecteplase)，依那普利馬來酸鹽，特斯邁(torsemide)，利菲斯(retavase)，洛沙坦鉀，喹那普利鹽酸鹽/mag carb，布美他尼，阿替普酶，恩普烈(enalaprilat)，胺碘達(dá)隆鹽酸鹽，替羅非班鹽酸鹽-水合物，地爾硫

鹽酸鹽，卡托普利，伊貝沙坦，纈沙坦，心得安鹽酸鹽，福辛普利鈉，鹽酸利多卡因，依非巴特，頭孢唑啉鈉，硫酸阿托品，氨基己酸，螺甾內(nèi)酯，干擾素，梭達(dá)羅鹽酸鹽，氯化鉀，多庫酯鈉，多巴酚丁胺鹽酸鹽，阿普唑侖，普伐他汀鈉，阿伐他汀鈣，咪達(dá)唑侖鹽酸鹽，利多爾，二硝酸異山梨醇酯，腎上腺素，多巴胺鹽酸鹽，必瓦路啶(bivalirudin)，羅蘇伐他汀，抑心安/辛伐他汀，艾瓦美(avasimibe)和卡布利(cariporide)。
可以與式(I)化合物聯(lián)用的牛皮癬治療劑的非限制性實(shí)例包括以下卡泊群(calcipotriene)，丙酸氯氟美松，曲安西龍丙酮化合物，丙酸赫貝索(halobetasol)，他扎諾天(tazarotene)，甲氨蝶呤，氟輕松醋酸酯，倍他米松二丙酸增強(qiáng)劑，膚輕松，阿維A，焦油洗發(fā)香波，倍他米松戊酸鹽，莫米他松糠酸鹽，酮康唑，帕莫辛(prarnoxine)/膚輕松，氫化可的松戊酸鹽，氟氫縮松，脲，倍他米松，丙酸氯氟美松/emoll，氟替卡松丙酸酯，阿奇霉素，氫化可的松，保濕劑，葉酸，地奈德，皮克姆斯(pimecrolimus)，煤焦油，二氟拉松雙乙酸鹽，葉酸依那西普，乳酸，甲氧呋豆素，hc/bismuth subgal/znox/resor，醋酸甲基強(qiáng)的松龍，潑尼松，遮光劑，哈西縮松，水楊酸，蒽三醇，特戊酸氯氟他隆(clocortolone)，煤餾出物，煤焦油/水楊酸，煤焦油/水楊酸/硫，去羥米松，地西泮，潤膚劑，醋酸氟輕松/潤膚劑，礦物油/蓖麻油/na乳酸，礦物油/花生油，石油/十四烷酸異丙酯，補(bǔ)骨脂素，水楊酸，肥皂/三溴水楊酰苯胺，硫柳汞/硼酸，西利考昔，英夫利昔單抗，環(huán)孢菌素，阿菲色(alefacept)，抑利麻(efalizumab)，他克莫司，必美克利斯(pimecrolimus)，PUVA，UVB，和柳氮磺吡啶。
可以與式(I)化合物聯(lián)用的牛皮癬關(guān)節(jié)炎治療劑的非限制性實(shí)例包括以下甲氨蝶呤，依那西普，羅非考昔，西利考昔，葉酸，柳氮磺吡啶，萘普生，來氟米特，醋酸甲基強(qiáng)的松龍，吲哚美辛，羥氯奎硫酸鹽，潑尼松，舒林酸，倍他米松二丙酸增強(qiáng)劑，英夫利昔單抗，甲氨蝶呤，葉酸，曲安西龍丙酮化合物，雙氯芬酸，二甲亞砜，吡羅昔康，雙氯滅痛，酮洛芬，美洛昔康，甲基強(qiáng)的松龍，萘丁美酮，甲苯酰吡啶乙酸鈉，卡泊群，環(huán)孢菌素，雙氯滅痛/迷索前列醇，氟輕松醋酸酯，葡糖胺硫酸鹽，硫代蘋果酸金鈉，重酒石酸二氫可待因酮/apap，布洛芬，利

忍酸(risedronate)鈉，磺胺嘧啶，硫鳥嘌呤，伐地考昔，alefacept和efalizumab。
可以與式(I)化合物聯(lián)用的再狹窄治療劑的非限制性實(shí)例包括以下希樂利姆斯(sirolimus)，紫杉醇，艾弗利斯(everolimus)，塔克羅姆(tacrolimus)，ABT-578和對乙酰氨基酚。
可以與式(I)化合物聯(lián)用的坐骨神經(jīng)痛治療劑的非限制性實(shí)例包括以下重酒石酸二氫可待因酮/apap，羅非考昔，環(huán)苯扎林鹽酸鹽，甲強(qiáng)龍，萘普生，布洛芬，氧可酮鹽酸鹽/對乙酰氨基酚，西利考昔，伐地考昔，醋酸甲基強(qiáng)的松龍，潑尼松，磷酸可待因/apap，反胺苯環(huán)醇鹽酸鹽/對乙酰氨基酚，美他沙酮，美洛昔康，美索巴莫，鹽酸利多卡因，雙氯滅痛，加巴噴丁，地塞米松，肌安寧，酮洛酸，吲哚美辛，對乙酰氨基酚，地西泮，萘丁美酮，氧可酮鹽酸鹽，鹽酸咪塞二唑，雙氯滅痛/迷索前列醇，達(dá)爾豐萘磺酸鹽/apap，asa/oxycod/氧可酮ter，布洛芬/氫可酮bit，反胺苯環(huán)醇鹽酸鹽，衣托度酸，達(dá)爾豐鹽酸鹽，阿米替林鹽酸鹽，肌安寧/可待因磷酸酶/asa，硫酸嗎啡，多維生素，萘普生鈉，鄰甲基苯海拉明檸檬酸鹽和羥基安定。
可以與式(I)化合物聯(lián)用的SLE(狼瘡)治療劑的優(yōu)選實(shí)例包括以下NSAID，例如，雙氯芬酸，萘普生，布洛芬，吡羅昔康，吲哚美辛；COX2抑制劑，例如，西利考昔，羅非考昔，伐地考昔；抗瘧疾劑，例如，羥氯奎；甾族化合物，例如，潑尼松，潑尼松龍，布地縮松，地塞米松；細(xì)胞毒素，例如，咪唑硫嘌呤，環(huán)磷酰胺，霉酚酸莫非替克，甲氨蝶呤；PDE4抑制劑或者嘌呤合成抑制劑，例如Cellcept。式(I)化合物還可以與以下藥劑聯(lián)用，比如柳氮磺吡啶，5-氨基水楊酸，奧沙拉嗪，Imuran和干涉促炎細(xì)胞因子比如IL-1的合成、產(chǎn)生或者作用的藥劑，例如，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶抑制劑，比如IL-1β轉(zhuǎn)化酶抑制劑和IL-1ra。式(I)化合物還可以與T細(xì)胞信號抑制劑一起使用，例如酪氨酸激酶抑制劑；或者靶向T細(xì)胞活化分子的分子，例如CTLA-4-IgG或者抗-B7家族抗體、抗-PD-1家族抗體。式(I)化合物可以與IL-11或者抗-細(xì)胞因子抗體聯(lián)用，例如fonotolizumab(抗-IFNg抗體)，或者抗-受體受體抗體，例如，抗-IL-6受體抗體和B細(xì)胞表面分子的抗體。式(I)化合物還可以與消耗或者滅活B細(xì)胞的試劑LJP 394(abetimus)一起使用，例如Rituximab(抗-CD20抗體，lymphostat-B(抗-BlyS抗體)，TNF拮抗劑，例如，抗-TNF抗體，D2E7(PCT公開WO 97/29131；HUMIRATM)，CA2(REMICADETM)，CDP 571，TNFR-Ig構(gòu)建體(p75TNFRIgG(ENBRELTM)和p55TNFRIgG(LENERCEPTTM))。
在本發(fā)明中，以下定義是適用的 “治療有效量”是指式(I)化合物或兩種或更多種這類化合物的組合可完全或部分抑制疾病發(fā)展或至少部分緩解疾病的一種或多種癥狀的量。治療有效量也可以是預(yù)防有效的量。治療有效量取決于患者的體型與性別、所治療的病癥、病癥的嚴(yán)重程度以及所需的結(jié)果。對于特定患者，治療有效量可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法確定。
“生理上可接受的鹽”是指能保留游離堿的生物效力與性質(zhì)的鹽，它們是通過與無機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸和磷酸或有機(jī)酸反應(yīng)得到，有機(jī)酸是例如有磺酸、羧酸、有機(jī)磷酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、檸檬酸、富馬酸、馬來酸、琥珀酸、苯甲酸、水楊酸、乳酸、酒石酸(例如(+)或(-)酒石酸或其混合物)、氨基酸(例如(+)或(-)氨基酸或其混合物)等。這些鹽可以采用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備。
某些式I化合物具有酸性取代基，因此可以與藥學(xué)上可接受的堿形成鹽的形式。本發(fā)明包括這類鹽。這類鹽的實(shí)例包括鈉鹽、鉀鹽、賴氨酸鹽和精氨酸鹽。這些鹽可以采用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備。
某些式I化合物及其鹽可能存在一種以上的晶型，本發(fā)明包括各種晶型及其混合物。
某些式I化合物及其鹽也可以溶劑化物的形式存在，例如水合物，本發(fā)明包括每種溶劑化物及其混合物。
某些式I化合物可能包含一個(gè)或多個(gè)手性中心，并且以不同的光活性形式存在。當(dāng)式I化合物包含一個(gè)手性中心時(shí)，這類化合物存在兩種對映體形式，本發(fā)明包括這兩種對映體以及這些對映體的混合物，譬如外消旋混合物。這些對映體可以采用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法拆分，例如形成可使用結(jié)晶法分離的非對映異構(gòu)性鹽；形成可使用結(jié)晶法、氣-液或液相色譜法分離的非對映體衍生物或配合物；使一種對映體與對映體專一性試劑進(jìn)行選擇性反應(yīng)，例如酶促酯化反應(yīng)；或手性環(huán)境中的氣-液或液相色譜法，例如在手性載體例如具有結(jié)合的手性配體的硅膠上或在手性溶劑存在下進(jìn)行。應(yīng)當(dāng)理解的是，當(dāng)需要的對映體通過上述分離方法之一被轉(zhuǎn)化成另一種化學(xué)實(shí)體時(shí)，需要另一個(gè)步驟來釋放所需的對映體。或者，專一性對映體可采用使用光活性試劑、底物、催化劑或溶劑的不對稱合成法合成，或通過不對稱轉(zhuǎn)化法將一種對映體轉(zhuǎn)化為另一種對映體。
當(dāng)式I化合物包含多于一個(gè)的手性中心時(shí)，其可以非對映體的形式存在。非對映體化合物可以采用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法分離，例如色譜法或結(jié)晶法，并且單一的對映體可按照上文所述方法分離。本發(fā)明包括式I化合物的每種非對映體及其混合物。
某些式I化合物可以不同的互變異構(gòu)體形式或以不同的幾何異構(gòu)體形式存在，本發(fā)明包括式I化合物的每種互變異構(gòu)體和/或幾何異構(gòu)體。
某些式I化合物可存在不同的可被分離的穩(wěn)定構(gòu)象形式。由圍繞不對稱單鍵的限制性旋轉(zhuǎn)(例如因空間位阻或環(huán)張力)所造成的扭轉(zhuǎn)不對稱性使得不同的構(gòu)象異構(gòu)體的分離成為可能。本發(fā)明包括式I化合物的每種構(gòu)象異構(gòu)體及其混合物。
某些式I化合物可以兩性離子形式存在，本發(fā)明包括式I化合物的每一種兩性離子形式及其混合物。
本文使用的術(shù)語“前藥”是指在體內(nèi)通過一些生理化學(xué)過程轉(zhuǎn)化為母體藥物的化合物(例如當(dāng)前藥遇到生理pH時(shí)，即轉(zhuǎn)化成所需藥物形式)。前藥通常是有用的，這是因?yàn)樵谝恍┣樾蜗滤鼈儽饶杆幐子诮o藥。例如，他們可以具有口服給藥的生物利用度，而母藥卻沒有這種性質(zhì)。前藥也可能在藥物組合物中具有比母藥更好的溶解性。前藥的非限制性實(shí)例是以酯(“前藥”)形式給藥的本發(fā)明化合物，這種形式可促進(jìn)透過細(xì)胞膜的傳輸(此時(shí)水溶性是不利的)，但一旦進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)即可代謝性水解成羧酸，此時(shí)水溶性是有利的。
前藥具有許多有用的性質(zhì)。例如，前藥的水溶性可能高于最終藥物，從而有利于藥物的靜脈內(nèi)給藥。與最終藥物相比，前藥也可能具有更高水平的口服生物利用度。給藥后，前藥經(jīng)酶促或化學(xué)裂解在血液或組織中釋放出最終藥物。
典型的前藥在裂解時(shí)釋放出相應(yīng)的游離酸，并且本發(fā)明化合物的這類形成可水解酯的殘基包括但不限于羧酸取代基(例如-(CH2)C(O)H或包含羧酸的部分)，其中游離氫被下列基團(tuán)置換(C1-C4)烷基、(C2-C12)烷酰氧基甲基、(C4-C9)-(烷酰氧基)乙基、具有5-10個(gè)碳原子的1-甲基-1-(烷酰氧基)-乙基、具有3-6個(gè)碳原子的烷氧基羰氧基甲基、具有4-7個(gè)碳原子的1-(烷氧基羰氧基)乙基、具有5-8個(gè)碳原子的1-甲基-1-(烷氧基羰氧基)乙基、具有3-9個(gè)碳原子的N-(烷氧基羰基)氨基甲基、具有4-10個(gè)碳原子的1-(N-(烷氧基羰基)氨基)乙基、3-酞基、4-巴豆酰內(nèi)酯基、γ-丁內(nèi)酯-4-基、二-N，N-(C1-C2)烷基氨基(C2-C3)烷基(例如β-二甲氨基乙基)、氨基甲?；?(C1-C2)烷基、N，N-二(C1-C2)-烷基氨基甲?；?(C1-C2)烷基和哌啶子基、吡咯烷子基或嗎啉代(C2-C3)烷基。
其他典型前藥釋放出式I醇，其中羥基取代基的游離氫(例如R1包含羥基)被以下基團(tuán)置換(C1-C6)烷酰氧基甲基、1-((C1-C6)烷酰氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷酰氧基)乙基、(C1-C6)烷氧基羰氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧基羰基氨基-甲基、琥珀?；?、(C1-C6)烷?；ⅵ?氨基(C1-C4)烷?；⒎蓟；挺?氨基酰基或α-氨基?；?α-氨基?；?，其中所述α-氨基?；糠知?dú)立地是蛋白質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的任何天然L-氨基酸、P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-C6)烷基)2或糖基(通過解離糖類半縮醛的羥基產(chǎn)生)。
本文所用的雜芳基包括雜芳基環(huán)系(例如為了舉例說明，但是不應(yīng)當(dāng)理解為限制本發(fā)明的范圍噻吩基、吡啶基、吡唑、異噁唑基、噻二唑基、噁二唑基、吲唑基、呋喃、吡咯、咪唑、吡唑、三唑、嘧啶、吡嗪、噻唑、異噻唑、噁唑基或四唑)以及其中碳環(huán)芳環(huán)、碳環(huán)非芳環(huán)或雜芳基環(huán)與一個(gè)或多個(gè)其他雜芳基環(huán)稠合的雜芳基環(huán)系(例如為了舉例說明，但是不應(yīng)當(dāng)理解為限制本發(fā)明的范圍苯并(b)噻吩基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并噁二唑基、吲哚、四氫吲哚、氮雜吲哚、吲唑、喹啉、咪唑并吡啶、喹唑啉、嘌呤、吡咯并[2，3-d]嘧啶，吡唑并[3，4-d]嘧啶)及其N-氧化物。取代的雜芳基優(yōu)選被一個(gè)或多個(gè)分別獨(dú)立地選自下列的取代基取代；鹵素、羥基、烷基、烷氧基、烷基-O-C(O)-、烷氧基烷基、雜環(huán)烷基、任選取代的苯基、硝基、氨基、單取代的氨基或二取代的氨基。
本文中使用的術(shù)語“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”包括芳族和非芳族環(huán)系，包括但不限于單環(huán)、雙環(huán)和三環(huán)，其可以是完全飽和的或者可包含一個(gè)或多個(gè)不飽和單元，且具有3-12個(gè)原子，這些原子中包含至少一個(gè)雜原子如氮、氧或硫。作為舉例(其不得解釋為對本發(fā)明范圍的限制)，下面給出了雜環(huán)實(shí)例氮雜吲哚、氮雜環(huán)丁烷基、呋喃、咪唑、咪唑并吡啶、吲哚、異噁唑、異噻唑、噁二唑、噁唑、哌嗪、哌啶、吡喃、吡嗪、吡唑、吡啶、嘧啶、吡咯、吡咯烷、喹啉、喹唑啉、三唑、噻唑、四氫吲哚、四唑、噻二唑、噻吩基、硫代嗎啉或三唑(triazle)。
當(dāng)使用術(shù)語“取代的雜環(huán)”(或雜環(huán)基)或時(shí)，意指這種雜環(huán)基被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，這些取代基可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定并且結(jié)果生成能作為激酶抑制劑的分子。作為舉例(其不得解釋為對本發(fā)明范圍的限制)，用于本發(fā)明雜環(huán)的優(yōu)選取代基各自獨(dú)立地選自任選取代的以下基團(tuán)鏈烯基、烷氧基、烷氧基烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷氧基羰基雜環(huán)烷氧基、烷基、烷基羰基、烷基酯、烷基-O-C(O)-、烷基-雜環(huán)基、烷基-環(huán)烷基、烷基-腈、炔基、酰氨基、氨基、氨基烷基、氨基羰基、甲腈、羰基烷氧基、甲酰氨基、CF3、CN、-C(O)OH、-C(O)H、-C(O)-C(CH3)3、-OH、-C(O)O-烷基、-C(O)O-環(huán)烷基、-C(O)O-雜環(huán)基、-C(O)-烷基、-C(O)-環(huán)烷基、-C(O)-雜環(huán)基、環(huán)烷基、二烷基氨基烷氧基、二烷基氨基羰基烷氧基、二烷基氨基羰基、鹵素、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)氧基、羥基、羥基烷基、硝基、NO2、OCF3、氧代基、苯基、-SO2CH3、-SO2CR3、四唑基、噻吩基烷氧基、三氟甲基羰基氨基、三氟甲基磺?；被?、雜環(huán)烷氧基、雜環(huán)基-S(O)p，環(huán)烷基-S(O)p、烷基-S-、雜環(huán)基-S-、雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)硫基、環(huán)烷硫基、-Z105-C(O)N(R)2、-Z105-N(R)-C(O)-Z200、-Z105-N(R)-S(O)2-Z200、-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200、-N(R)-C(O)R、-N(R)-C(O)OR、OR-C(O)-雜環(huán)基-OR、Rc和-CH2ORc； 其中Rc每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫、任選取代的烷基、任選取代的芳基、-(C1-C6)-NRdRe、-E-(CH2)t-NRdRe、-E-(CH2)t-O-烷基、-E-(CH2)t-S-烷基或-E-(CH2)t-OH； 其中t為大約1至大約6的整數(shù)； Z105每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為共價(jià)鍵、烷基、鏈烯基或炔基；和 Z200每次出現(xiàn)使獨(dú)立地選自任選取代的以下基團(tuán)烷基、鏈烯基、炔基、苯基、烷基-苯基、鏈烯基-苯基或炔基-苯基； E為直接鍵、O、S、S(O)、S(O)2或NRf，其中Rf為H或烷基，且Rd和Re獨(dú)立地為H、烷基、烷?；騍O2-烷基；或者Rd、Re與他們所連接的氮原子一起形成五元或六元雜環(huán)。
本文中使用的術(shù)語“雜環(huán)烷基”是指經(jīng)具有1至約8個(gè)碳原子的脂族基與化合物連接的雜環(huán)基。例如，優(yōu)選的雜環(huán)烷基是咪唑基乙基。
本文中使用的“脂族”或“脂族基”或符號如“(C0-C8)”包括直鏈或支鏈烴，他們是完全飽和的或者包含一個(gè)或多個(gè)不飽和單位，因此包括烷基、鏈烯基、炔基和包含單鍵、雙鍵和三鍵混合的烴類。當(dāng)基團(tuán)是C0時(shí)，意指該部分基團(tuán)不存在，換句話講就成為價(jià)鍵。本文使用的術(shù)語“烷基”是指C1-C8且包括完全飽和的直鏈或支鏈烴。優(yōu)選的烷基是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基及他們的異構(gòu)體。本文使用的“鏈烯基”和“炔基”是指C2-C8且包括含有一個(gè)或多個(gè)不飽和單位(對于鏈烯基為一個(gè)或多個(gè)雙鍵，而對于炔基則為一個(gè)或多個(gè)三鍵)的直鏈或支鏈烴。
本文中使用的芳族基團(tuán)(或芳基)包括芳族碳環(huán)環(huán)系(例如苯基和環(huán)戊二烯基)和稠合的多環(huán)芳族環(huán)系(例如萘基、聯(lián)苯基和1，2，3，4-四氫萘基)。
本文中使用的環(huán)烷基是指完全飽和的或含有一個(gè)或多個(gè)不飽和鍵但總數(shù)不會形成芳族基的C3-C12單環(huán)或多環(huán)(例如雙環(huán)、三環(huán)等)烴。環(huán)烷基的優(yōu)選實(shí)例有環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基和環(huán)己烯基。
本文中使用的酰氨基是指-NHC(＝O)-。
本文中使用的酰氧基是指-OC(O)R。
本文中使用的許多基團(tuán)部分或取代基都以“取代的”或“任選取代的”表示。當(dāng)這些基團(tuán)部分被這些術(shù)語之一修飾時(shí)，除另有說明外，它表示該基團(tuán)部分的任何可取代部分(這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是已知的)可被取代，其包括一個(gè)或多個(gè)取代基，若存在一個(gè)以上的取代基，則各取代基獨(dú)立選擇。這些取代方式是本領(lǐng)域公知的和/或在本說明書中有教導(dǎo)。舉例來講(其不得解釋為對本發(fā)明范圍的限制)，一些取代基基團(tuán)的實(shí)例為鏈烯基，烷氧基(其本身可被取代，如-O-C1-C6烷基-OR，-O-C1-C6烷基-N(R)2和OCF3)，烷氧基烷氧基，烷氧基羰基，烷氧基羰基哌啶基-烷氧基，烷基(其本身也可以被取代，例如-C1-C6烷基-OR，-C1-C6烷基-N(R)2和-CF3)，烷基氨基，烷基羰基，烷基酯，烷基腈，烷基磺?；?，氨基，氨基烷氧基，CF3，COH，COOH，CN，環(huán)烷基，二烷基氨基，二烷基氨基烷氧基，二烷基氨基羰基，二烷基氨基羰基烷氧基，二烷基氨基磺酰基，酯(-C(O)-OR，其中R是諸如烷基、雜環(huán)烷基(其可被取代)、雜環(huán)基等類的基團(tuán)，并且可被取代)，鹵素或鹵代基(F、Cl、Br、I)，羥基，嗎啉代烷氧基、嗎啉代烷基，硝基，氧代基，OCF3，任選取代的苯基，S(O)2CH3，S(O)2CF3，和磺?；?，N-烷基氨基或N，N-二烷基氨基(其中烷基也可以被取代)。
有效劑量 適合本發(fā)明使用的藥物組合物包括這些組合物，其中含有能實(shí)現(xiàn)其預(yù)定目的的有效量的活性成分。更準(zhǔn)確地講，治療有效量是指能有效地預(yù)防所治療個(gè)體現(xiàn)有癥狀的發(fā)展或緩解現(xiàn)有癥狀的量。有效量的確定在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)。
對于本發(fā)明方法中使用的任何化合物，治療有效劑量可以根據(jù)細(xì)胞測定初步估算。例如，可以在細(xì)胞模型或動物模型中配制一種劑量，以達(dá)到包括在細(xì)胞測定中測定的IC50(即達(dá)到對給定蛋白激酶活性最大抑制的一半時(shí)的受試化合物的濃度)的循環(huán)濃度范圍。在某些情況下，在3-5％血清白蛋白存在下測定IC50是適當(dāng)?shù)模虼诉@種測定接近血漿蛋白對化合物的結(jié)合作用。這種信息可以用來更準(zhǔn)確測定在人體中有用的劑量。此外，全身給藥最優(yōu)選的化合物可在達(dá)到安全的血漿濃度水平下有效抑制完整細(xì)胞中的蛋白激酶信號。
治療有效劑量是指能完全或部分抑制病癥的進(jìn)展或者至少部分減輕病癥的一種或多種癥狀的式I化合物或者兩種或多種式I化合物的組合的量。治療有效量還可以是預(yù)防有效的量。這些化合物的毒性和治療效力可以采用標(biāo)準(zhǔn)藥物學(xué)方法在細(xì)胞培養(yǎng)基或?qū)嶒?yàn)動物中測定，例如測定最高耐受劑量(MTD)和ED50(50％最大反應(yīng)的有效劑量)。毒性與治療效果的劑量比是治療指數(shù)，它可以表示為MTD與ED50之比。優(yōu)選顯示高治療指數(shù)的化合物。得自這些細(xì)胞培養(yǎng)基測定和動物研究的數(shù)據(jù)可以用于確定人類用的劑量范圍。這類化合物的劑量優(yōu)選在包括ED50的循環(huán)濃度范圍內(nèi)，且毒性低或無毒。根據(jù)所使用的劑型和應(yīng)用的給藥途徑，所述劑量可以在該范圍內(nèi)變化。治療有效量還可以是預(yù)防有效的量。治療有效量將依賴于患者尺寸和性別、所治療的病癥、病癥的嚴(yán)重程度以及欲達(dá)到的結(jié)果。對于給定患者，治療有效量可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法來確定。確切的制劑、給藥途徑和劑量可以由各醫(yī)師根據(jù)患者的病癥加以選擇(參見Fingl等，1975，“The Pharmacological Basis ofTherapeutics”，Ch.1 p1)。在危象的治療中，可能需要急性推注或輸注接近MTD的給藥，以獲得快速反應(yīng)。
劑量和給藥間隔可以分別進(jìn)行調(diào)整，以獲得足以維持激酶調(diào)節(jié)效應(yīng)的活性實(shí)體的血漿水平或最低有效濃度(MEC)。MEC對于每種化合物而言將是不同的，但可以根據(jù)體外數(shù)據(jù)估算；例如使用本文所述的測定方法達(dá)到抑制50-90％蛋白酶激酶所必需的濃度。達(dá)到MEC所需的劑量將取決于個(gè)體特征和給藥途徑。然而，可使用HPLC測定法或生物測定法確定血漿濃度。
劑量間隔也可以利用MEC值確定。化合物應(yīng)當(dāng)采用這樣的給藥方案給藥，即在所述時(shí)間的10-90％，優(yōu)選30-90％，最優(yōu)選50-90％范圍內(nèi)維持血漿水平高于MEC，直至癥狀達(dá)到期望的緩解。在局部給藥或選擇性吸收的情況下，藥物的有效局部濃度可以與血漿濃度無關(guān)。
當(dāng)然，所給予的組合物的量取決于受治療者、受治療者的體重、疾患的嚴(yán)重程度、給藥方式和主治醫(yī)師的判斷。
包裝 如果需要，本發(fā)明的組合物可以存在于包裝或分配裝置中，所述包裝或裝置可以包含一個(gè)或多個(gè)含有活性成分的單位劑型。例如，這種包裝可包括金屬或塑料箔，如泡罩。所述包裝或分配裝置可以配有給藥說明。也可以制備包含配制再相容藥物載體中的本發(fā)明化合物的組合物，置于適當(dāng)容器內(nèi)，然后貼上有關(guān)治療適應(yīng)癥的標(biāo)簽。
在一些配方中，使用極小顆粒形式的本發(fā)明化合物(例如通過流能磨獲得的)可能是有利的。
下面的描述舉例說明本發(fā)明化合物在制備藥物組合物中的應(yīng)用。在這種描述中，術(shù)語“活性化合物”是指任何本發(fā)明化合物，但特別是指前述實(shí)施例之一的終產(chǎn)物。
a)膠囊劑 在膠囊劑的制備中，可以將10重量份的活性化合物與240重量份的乳糖打散并摻混。然后將混合物填充到硬明膠膠囊內(nèi)，每粒膠囊含有單位劑量或部分單位劑量的活性化合物。
b)片劑 片劑可以由例如下列組分制備。
重量份 將活性化合物、乳糖和部分淀粉打散、摻混，用聚乙烯基吡咯烷酮的乙醇溶液制粒所得混合物。將得到的干燥顆粒與硬脂酸鎂和剩余的淀粉混合。然后將混合物在壓片機(jī)中壓片，得到每片含有單位劑量或部分單位劑量活性化合物的片劑。
c)腸溶片劑 片劑可以按照上面(b)中描述的方法制備。隨后使用20％鄰苯二甲酸乙酸纖維素和3％鄰苯二甲酸二乙酯在乙醇:二氯甲烷(1:1)中的溶液按照常規(guī)方法對片劑進(jìn)行腸溶包衣。
d)栓劑 在栓劑的制備中，例如可以將100重量份的活性化合物摻入到1300重量份的甘油三酯栓劑基質(zhì)中，使混合物形成栓劑，每粒含有治療有效量的活性化合物。
在本發(fā)明的組合物中，如果需要，可以將活性化合物與其他相容的藥理活性成分聯(lián)用。例如，可以聯(lián)合給藥本發(fā)明化合物與治療本文所述疾病或病癥已知的另一種治療劑。例如，與一種或多種其他藥劑聯(lián)用，這些藥劑是能抑制或預(yù)防VEGF的產(chǎn)生或血管生成、減弱對VEGF或血管生成蛋白細(xì)胞內(nèi)應(yīng)答、阻滯胞內(nèi)信號傳導(dǎo)、抑制血管通透性過高、減輕炎癥或抑制或預(yù)防水腫形成或新血管生成作用的藥劑。本發(fā)明化合物可以在給予所述藥物之前、之后或同時(shí)給藥，任何一種給藥過程都是合適的。其他的藥劑包括但不限于例如第20-28頁中描述的任何藥劑。本發(fā)明化合物與其他藥劑之間的作用不是加合作用便是增效作用。因此，給藥抑制血管生成、血管通透性過高和/或抑制水腫形成的物質(zhì)的這種組合，與給藥任一單獨(dú)的藥物相比，可以較大程度地緩解過度增生疾病、血管生成、血管通透性過高或水腫的有害作用。在惡性疾病的治療方面，與抗增生或細(xì)胞毒性化療法或放射療法聯(lián)用也包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
本發(fā)明也包括式I化合物作為藥物的應(yīng)用。
本發(fā)明的再一方面提供了式I化合物或其鹽在制備用于治療哺乳動物尤其是人的以下病癥的藥物中的應(yīng)用血管通透性過高、血管生成依賴性疾病、增生性疾病和/或免疫系統(tǒng)疾病。
本發(fā)明還提供了治療血管通透性過高、不當(dāng)新血管生成、增生性疾病和/或免疫系統(tǒng)疾病的方法，該方法包括對需要的哺乳動物尤其是人類給藥治療有效量的式I化合物。
所有參考文獻(xiàn)、專利和出版的專利申請的內(nèi)容都全文引入本申請以供參考。
篩選式(I)化合物的測定法 酶測定法 化合物抑制一種或多種本文所述或現(xiàn)有技術(shù)中描述的蛋白激酶的體外效力，可以采用下文詳細(xì)描述的方法測定。
化合物的效力可以根據(jù)試驗(yàn)化合物相對于對照抑制外源性底物(例如合成肽(Z.Songyang等人，Nature，373536-539))的磷酸化的量來測定。
均相時(shí)間分辨熒光(HTRF)體外激酶測定(參見Mathis，G.，HTRF(R)Technology.J Biomol Screen，1999.4(6)p.309-314，其全文引入本文以供參考) 將純化的酶(得自商業(yè)來源)與不同量的N-生物素化底物或GST-標(biāo)記的底物(參見表格)以不同抑制劑濃度在不同反應(yīng)緩沖液(40μL最終體積，參見表格)中混合。通過在黑色96-半-孔平板(Perkin Elmer)中加入ATP(0.01-0.1mM最終濃度)來啟動激酶反應(yīng)。在室溫培養(yǎng)50-60分鐘后，通過加入EDTA(最終濃度100mM)來中止反應(yīng)，并且通過加入相關(guān)試劑(最終大約濃度30mM HEPES，pH7.0，0.06％ BSA，0.006％ Tween-20，0.24M KF)、不同量的供體銪標(biāo)記的抗體和接受體鏈霉抗生物素標(biāo)記的別藻藍(lán)蛋白(SAXL)或?qū)γ阜磻?yīng)有特異性的抗-GST-XL(參見表格)來顯影。將顯影的反應(yīng)在黑暗中于室溫培養(yǎng)10分鐘或者在4℃培養(yǎng)過夜(參見表格)，然后在時(shí)間分辨熒光檢測器(Discovery，Perkin Elmer或Rubystar，BMG)中同時(shí)于620nm和665nm讀取。使用337nm氮激光器用于激發(fā)。使用620nm和665nm的信號比例來計(jì)算IC50。
有關(guān)各種酶的具體詳細(xì)反應(yīng)條件包括以下 反應(yīng)緩沖液 COT緩沖液 50mM Tris-HCl，pH7.5；10mM MgCl2；1mM EGTA；2mM DTT；0.01％ Brij；5mM β-磷酸甘油 MK2緩沖液 20mM MOPS，pH7.2；10mM MgCl2；5mM EGTA；5mM β-磷酸甘油；1mM Na3VO4；0.01％ Triton-X-100；1mM DTT Akt緩沖液 20mM HEPES，pH7.5；10mM MgCl2；0.01％ Triton X-100；1mMDTT CKII緩沖液 20mM Tris，pH7.5；10mM MgCl2；10mM KCl；0.01％ Triton-X-100；1mM DTT；0.5mMNa3VO4 PKA緩沖液 25mM HEPES，pH7.4；10mM MgCl2；0.01％ Triton-X-100；0.5mMDTT；0.1mM Na3VO4 PKC緩沖液 20rnM MOPS，pH7.2；10mM MgCl2；5mM EGTA；1.2mM DTT；0.01％ Triton-X-100；10mM β-磷酸甘油；1.2mM Na3VO4；0.1mg/mL磷脂酰絲氨酸；0.01mg/mL二?；视停?.5mM CaCl2 底物 生物素-IκBα-肽生物素-Ahx-LDDRHDSGLDSMKDC-酰胺 生物素-Bad-肽生物素-EELSPFRGRSRSAPPNLWAAQR-酰胺 生物素-CKH-底物-肽生物素-Ahx-RRADDSDDDDD-酰胺 生物素-cdc25-肽生物素-Ahx-AKVSRSGLYRSPSMPENLNRPR 生物素-MEK-肽生物素-AGAGSGQLIDSMANSFVGTR 生物素-MBP蛋白GST-無活性MEK1，無活性Erk2都購自UBI 檢測試劑 抗-P-MBP購自UBI，貼有Cis-Bio International標(biāo)簽 抗-P-MEK、抗-P-BAD、抗-P-IκBα、抗-P-Erk都購自Cell-Signaling，并貼有Cis-Bio International標(biāo)簽 抗-P-14-3-3 Binding Motif購自Cell-Signaling，貼有Perkin Elmer標(biāo)簽 SAXL購自Prozyme CR130-100購自Perkin Elmer 抗-GST-XL購自Cis-Bio International 細(xì)胞測定 在THP-1細(xì)胞中的HSP27細(xì)胞測定 將THP-1細(xì)胞進(jìn)行血清饑餓(0.5％ FBS)約24小時(shí)，并且以2×105個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種在100μL低血清培養(yǎng)基中。將試驗(yàn)化合物溶解在DMSO中，并且以25uM-8nM(最終的DMSO濃度為0.5％)的濃度加到細(xì)胞中。將化合物預(yù)培養(yǎng)約30分鐘，然后加入1ug/ml LPS。將細(xì)胞刺激約45分鐘，洗滌并且在100ul Biorad細(xì)胞裂解緩沖液中裂解。使用得自Upstate的pHSP27 Beadmates，經(jīng)由磷蛋白測定法來測定HSP27磷酸化的水平。
在THP-1中LPS誘導(dǎo)的TNF 將THP-1細(xì)胞進(jìn)行血清饑餓(0.5％ FBS)約24小時(shí)，并且以2×105個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種在100μL低血清培養(yǎng)基中。將試驗(yàn)化合物溶解在DMSO中，并且以25uM-8nM(最終的DMSO濃度為0.5％)的濃度加到細(xì)胞中。將化合物預(yù)培養(yǎng)約30分鐘，然后加入1ug/ml LPS。將細(xì)胞刺激約3小時(shí)。取出上清液，并且通過ELISA定量測定TNF釋放。通過向剩余細(xì)胞中加入MTT來測定細(xì)胞毒性。
在周圍血液單核細(xì)胞(PBMC)測定方案中LPS誘導(dǎo)的 通過Ficoll分離由leukopak′s制備PBMC。在培養(yǎng)基中將細(xì)胞密度調(diào)節(jié)至1×107個(gè)細(xì)胞/ml。
使用的培養(yǎng)基是RPMI Medium 1640(Gibco BRL，Grand Island，NY，Catalog Number 31800)+2％人AB血清(Sigma Chemical Company，St.Louis，MO，Catalog Number S7148，熱滅活的)，含有100U/ml盤尼西林(Gibco BRL，Catalog Number 15140)、2mM L-谷氨酰胺(Gibco BRL，Catalog Number 25030)1×MEM Non-Essential Amino Acids(Gibco BRL，Catalog Number 11140)和10mM pH 7.3 Hepes。將培養(yǎng)基經(jīng)由0.2-微米濾器裝置過濾。
向96孔平板中加入在1％二甲亞砜，99％培養(yǎng)基中的100uL/孔抑制劑(以2×濃度)+100uL/孔PBMCs(1E6個(gè)細(xì)胞/孔)。
將細(xì)胞和抑制劑(試驗(yàn)化合物)在37℃ CO2培養(yǎng)器中預(yù)培養(yǎng)約30分鐘。
加入10ng/ml脂多糖(得自大腸桿菌)(Calbiochem，La JoIIa，CA，Catalog Number 437625)，并且將平板在37℃ CO2培養(yǎng)器中培養(yǎng)過夜(約16小時(shí))以刺激細(xì)胞因子生成。
收獲用于細(xì)胞因子分析的上清液將平板在沒有制動器的離心機(jī)中以180g離心約10分鐘，以讓細(xì)胞成團(tuán)(我們使用Beckman GPKR離心機(jī)，并且以1,000rpm自旋)。取100uL/孔上清液用于細(xì)胞因子分析。
對于hTNF ELISA，使用R&D Systems Catalog Number DTA50試劑盒，并且稀釋樣本約1/20。
收獲上清液后，使用細(xì)胞來進(jìn)行MTT測定以評估化合物毒性。
評估細(xì)胞毒性的PBMC MTT測定 當(dāng)被存在于代謝活性細(xì)胞中的線粒體還原酶系統(tǒng)裂解時(shí)，MTT被轉(zhuǎn)換成有色產(chǎn)物。該MTT測定可用作細(xì)胞存活力的測定。
進(jìn)行LPS誘導(dǎo)的TNF周圍血液單核細(xì)胞(PBMC)測定方案以及收獲上清液用于細(xì)胞因子測定。使用96-孔平板中剩余PBMC來進(jìn)行MTT測定。
向細(xì)胞(在約1×106個(gè)細(xì)胞/100μL/孔)中加入50μL/孔MTT(2.5mg/ml，在D-PBS中，溴化3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基-四唑鎓，Sigma Chemical Company，Catalog Number M-2128)，并且在37℃ CO2培養(yǎng)器中培養(yǎng)4小時(shí)。
加入50μL/孔20％十二烷基硫酸鈉(Natriumlauryl-sulfat，BioRad，Hercules，CA，Catalog Number 161-0301)，并且在37℃ CO2培養(yǎng)器中培養(yǎng)過夜。在ELISA平板讀書器中于570nM-630nM讀取吸收度。然后計(jì)算細(xì)胞的存活力百分比。通過與沒有抑制劑的對照進(jìn)行比較來確定推定的抑制劑的毒性。這是100％存活對照(1％DMSO/培養(yǎng)基+細(xì)胞+MTT+SDS)。
樣本的OD570/630/100％存活對照的OD570/630×100＝樣本的％存活力。
在PEC中LPS誘導(dǎo)的TNF 通過洗滌4天前注射2ml 3％巰基乙酸鹽的B6小鼠的腹膜腔來收集PEC(腹膜滲出細(xì)胞)。
將細(xì)胞用D-PBS洗滌，并且以2.5×105個(gè)細(xì)胞/0.25ml/孔的濃度，在補(bǔ)充有盤尼西林-鏈霉素和2mM L-谷氨酰胺的10％ FBS RPMI培養(yǎng)基中鋪在96-孔平板內(nèi)。讓細(xì)胞在37℃ CO2培養(yǎng)器中生長過夜。將細(xì)胞和抑制劑在1DMSO/培養(yǎng)基0.5％FBS中預(yù)培養(yǎng)約30分鐘。加入脂多糖(得自大腸桿菌)(1μg/ml，Calbiochem，La Jolla，CA，Catalog Number 437625)，并且將細(xì)胞在37℃ CO2培養(yǎng)器中刺激2小時(shí)。
收獲上清液用于細(xì)胞分析 -將細(xì)胞在沒有制動器的離心機(jī)中以180g離心約10分鐘，以讓細(xì)胞成團(tuán)。
-取出50uL/孔上清液用于細(xì)胞因子分析。
為了測定mTNF細(xì)胞因子水平，使用R & D Systems Catalog NumberMTA00 ELISA試劑盒。計(jì)算TNF IC50。
在分化的人周圍血液單核細(xì)胞(PBMC)中LPS誘導(dǎo)的TNF和IL-1β 由leukopaks制備PBMCs，并且在小瓶中在液氮冰箱內(nèi)冷凍。融化PBMCs，并且在400μl培養(yǎng)基(RPMI+2％Hu ab血清+青霉素/鏈霉素+L-谷氨酰胺+非必需氨基酸+Hepes+50ng/ml重組人MCSF)中以1×106個(gè)細(xì)胞/孔鋪在48-孔平板內(nèi)。在37℃ 5％ CO2中培養(yǎng)24小時(shí)。將細(xì)胞用培養(yǎng)基Wash cells 3x with media(不含MCSF)洗滌3次。在單獨(dú)的48-孔平板中，將化合物在培養(yǎng)基+2％ Hu ab血清中稀釋。對于10mM化合物，將10ul化合物加到990μl培養(yǎng)基中，然后在培養(yǎng)基+1％ DMSO200μl+800μl培養(yǎng)基中進(jìn)行1:5系列稀釋。
從細(xì)胞中取出培養(yǎng)基，并且將250μl化合物稀釋液加到細(xì)胞的48-孔平板的一式兩份孔中。向陰性和陽性對照孔中加入250μl培養(yǎng)基+1％DMSO。在37℃ 5％ CO2培養(yǎng)約30分鐘。在37℃ 5％ CO2，用10ng/ml LPS將細(xì)胞刺激3小時(shí)30分鐘。LPS貯備液500μg/ml將貯備液在培養(yǎng)基中進(jìn)行1:5000稀釋，然后向每個(gè)孔中加入25μl，但是陰性對照孔中僅加入培養(yǎng)基。在在37℃ 5％ CO2培養(yǎng)約3小時(shí)30分鐘。
加入Nigericin(Sigma Cat.# N-7143 FW＝747)(Nigericin終濃度＝20μM將2.7mg溶解在805μl乙醇中。將其在250μl培養(yǎng)基中進(jìn)行1:8稀釋至1.75ml。向48-孔平板中加入10μl/孔)。在在37℃ 5％ CO2培養(yǎng)30分鐘。30分鐘后，取出上清液加到96-孔平板中，并且使用R & DSystems ELISA Kit測定人IL-1β和人TNFα。
式I化合物可以在涉及所鑒定的激酶，包括能被式I化合物抑制的本文沒有提及的以及尚未鑒定出的蛋白酪氨酸激酶的疾病的治療中具有治療用途。在50μM或更低濃度，本文例舉的所有化合物都顯著抑制COT或MK2。
體內(nèi)模型 LPS-誘導(dǎo)的細(xì)胞因子的體內(nèi)抑制 給小鼠靜脈內(nèi)注射溶解在鹽水中的LPS(得自大腸桿菌，血清型0111:B4，Sigma#L-4130)。為了監(jiān)測TNF-α生成，給予0.1mpk LPS，并且為了測定IFN-γ、EL-1β、IL-18、IL-6和IL-12，給予5mpk LPS。然后在下面列出的合適的時(shí)間點(diǎn)對小鼠進(jìn)行心臟取血以用于血清。對于TNF-α，將小鼠在90分鐘取血，或者對于IFN-γ、EL-1β、IL-18、IL-6和IL-12，在小時(shí)取血，然后通過ELISA測定血清細(xì)胞因子水平。在化合物效力試驗(yàn)中，將化合物在注射LPS之前進(jìn)行p.o.或i.p.給藥，并且測定目標(biāo)細(xì)胞因子水平，與獲得的對照組的目標(biāo)細(xì)胞因子水平進(jìn)行比較以計(jì)算ED50水平。
還在人疾病的動物模型中測定化合物。通過實(shí)驗(yàn)自身免疫性腦脊髓炎(EAE)和膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(CIA)來舉例說明這些疾病。已經(jīng)描述了在大鼠和小鼠中模擬人多發(fā)性硬化的方面的EAE模型(綜述于FASEB J.52560-2566，1991；鼠模型Lab.Invest.4(3)278，1981；嚙齒動物模型J.Immunol 146(4)1163-8，1991)。簡言之，給小鼠或大鼠免疫接種髓磷脂基質(zhì)蛋白(MBP)或其神經(jīng)原性衍生物和CFA?？赏ㄟ^加入細(xì)菌毒素例如百日咳桿菌來誘導(dǎo)急性疾病。通過將T-細(xì)胞從MBP/肽免疫接種動物中進(jìn)行收取轉(zhuǎn)移來誘導(dǎo)復(fù)發(fā)/緩解疾病。
通過用II型膠原免疫接種可以在DBA/l小鼠中誘導(dǎo)CIA(J.Immunol142(7)2237-2243)。在早至膠原攻擊10天，小鼠表現(xiàn)出關(guān)節(jié)炎征狀，并且可以在長至免疫接種后90天進(jìn)行評分。在EAE和CIA模型中，可以預(yù)防性地給藥化合物或者在疾病開始時(shí)給藥化合物。有效的藥物應(yīng)當(dāng)減輕嚴(yán)重程度和/或發(fā)生率。
抑制一種或多種血管生成性受體PTK和/或涉及介導(dǎo)炎性反應(yīng)的蛋白激酶例如lck的一些本發(fā)明化合物可以減小這些模型中的關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度和發(fā)生率。
所有參考文獻(xiàn)，包括期刊文章、專利和公開的專利申請的教導(dǎo)內(nèi)容在此都完整地引入作為參考。
下列實(shí)施例是為了舉例說明，而不應(yīng)該理解為對本發(fā)明范圍的限制。
縮寫 合成詳述 分析數(shù)據(jù)包括在一般方法說明或?qū)嵤├斜碇?。除另有說明外，所有1H NMR數(shù)據(jù)都是在Varian Mercury Plus 400MHz儀器上收集；化學(xué)位移以百萬分之一(ppm)表示。高壓液相色譜(HPLC)分析數(shù)據(jù)在實(shí)驗(yàn)內(nèi)詳細(xì)描述或者使用表1括號中小寫字母所示方法參比HPLC條件列表。
表1.HPLC方法的列表


一般方法和實(shí)施例 下面描述用于構(gòu)建大部分在本申請中公開的化合物的一般合成方案(合成方案1-25)。
合成方案1.7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑的一般合成轉(zhuǎn)化(一般方法A、B、C、N、O、S和W)
合成方案2.另一種由羧酸和胺形成酰胺(一般方法B)
合成方案3.用三甲基-甲硅烷基乙氧基甲基保護(hù)吲唑(一般方法D)
合成方案4.溴化物轉(zhuǎn)化成硼酸(一般方法E)
合成方案5.硼酸酯或硼酸與芳基鹵底物的Suzuki偶聯(lián)的一般實(shí)例(一般方法F)
合成方案6.SEM-保護(hù)的吲唑的脫保護(hù)(一般方法G)

和/或
合成方案7.芐基醚的脫保護(hù)(一般方法I)
合成方案8.醛還原成醇(一般方法J)
合成方案9.芳基砜的親核取代(一般方法K)
合成方案10.苯胺的還原(一般方法L)
合成方案11.由酯形成酰胺(一般方法M)
合成方案12.另一種用胺親核取代芳族鹵化物(一般方法N)
合成方案13.用醛或酮將胺還原烷基化的一般實(shí)例(一般方法O)
合成方案14.使用三溴化硼將甲基保護(hù)的醇脫保護(hù)(一般方法P)
合成方案15.氨基甲酸酯的酸催化裂解的一般實(shí)例(一般方法Q)
合成方案16.堿促進(jìn)的胺烷基化(一般方法R)
合成方案17.醇的Mitsunobu偶聯(lián)(一般方法T)
合成方案18.鹵化物與乙炔化合物的Sonogashira偶聯(lián)的一般實(shí)例(一般方法U)
合成方案19.酯水解成羧酸的一般實(shí)例(一般方法V)
合成方案20.酰氯與胺的酰胺偶聯(lián)的一般實(shí)例(一般方法W)
合成方案21.使用肼的吲唑形成(一般方法X)
合成方案22.Pd介導(dǎo)的芳基鹵與胺的偶聯(lián)，然后酸脫保護(hù)的一般實(shí)例(一般方法Y)
合成方案23.THP-保護(hù)基的酸裂解(一般方法Z)
合成方案24.Cbz-保護(hù)的氨基的脫保護(hù)(一般方法AA)
合成方案25.BDMS-保護(hù)基的酸裂解(一般方法H)
一般方法的列表 一般方法A由胺形成脲 一般方法B由羧酸和胺形成酰胺 一般方法C使用Si-DCT由羧酸和胺形成酰胺 一般方法D用三甲基-甲硅烷基乙氧基甲基保護(hù)吲唑 一般方法E溴化物轉(zhuǎn)化成硼酸或硼酸酯 一般方法F硼酸酯或硼酸與芳基鹵底物的Suzuki偶聯(lián) 一般方法G三甲基甲硅烷基乙氧基甲基(SEM)保護(hù)的吲唑的脫保護(hù) 一般方法HTBDMS-保護(hù)基的酸裂解 一般方法1芐基醚的脫保護(hù) 一般方法J醛還原成醇 一般方法K芳基砜的親核取代 一般方法L將硝基芳族化合物還原成苯胺 一般方法M由酯形成酰胺 一般方法N用胺將芳族鹵化物親核取代 一般方法O用醛或酮將胺還原烷基化 一般方法P使用三溴化硼將甲基保護(hù)的醇脫保護(hù) 一般方法Q酯、脒和氨基甲酸酯的酸催化裂解 一般方法R堿促進(jìn)的胺烷基化 一般方法S由胺形成磺酰胺 一般方法TMitsunobu偶聯(lián) 一般方法U芳基鹵與乙炔的Sonogashira偶聯(lián) 一般方法V酯水解成羧酸 一般方法W由酰氯和胺形成酰胺 一般方法X使用肼的吲唑形成 一般方法YPd介導(dǎo)的芳基鹵與胺的偶聯(lián)，然后酸脫保護(hù) 一般方法ZTHP保護(hù)基的酸裂解 一般方法AACbz-保護(hù)的氨基的脫保護(hù) 一般方法字母代碼構(gòu)成終產(chǎn)物的合成途徑。下面使用實(shí)施例#G.19作為非限制性舉例說明來給出途徑是如何確定的工作實(shí)施例。實(shí)施例#G.19是由2-(3-{2-(二甲基氨基-亞甲基氨基)-7-[7-苯并[b]噻吩-2-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-5-基]-吡咯并[3，2-d]嘧啶-5-基}-丙-1-氧基)四氫吡喃，使用如下面合成方案中所示的一般方法G制得的
實(shí)施例#G.19的前體 實(shí)施例#G.19 實(shí)施例#G.19的前體，2-(3-{2-(二甲基氨基-亞甲基氨基)-7-[7-苯并[b]噻吩-2-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-5-基]-吡咯并[3，2-d]嘧啶-5-基}-丙-1-氧基)四氫吡喃是經(jīng)由所示反應(yīng)順序制得的制備例#23、E、F(使用制備例#4)、R(使用2-(3-溴-丙-1-氧基)四氫吡喃，其通過以下合成方案來表示
各一般方法中使用的一般合成方法遵守且包括使用指定一般方法合成的化合物說明。下文中指出的任何具體條件和試劑都不得認(rèn)作是對本發(fā)明范圍的限制，而只是用于舉例說明目的。
一般方法A由胺形成脲
向硫代氨基甲酸甲酯在有機(jī)溶劑(例如二氯甲烷或乙醇，優(yōu)選乙醇)內(nèi)的混合物中加入胺(2-4當(dāng)量，優(yōu)選3當(dāng)量)。將該反應(yīng)混合物在約40-70℃(優(yōu)選約50℃)攪拌約3-24小時(shí)(優(yōu)選約5-10小時(shí))。減壓除去溶劑，獲得了粗產(chǎn)物?？梢酝ㄟ^結(jié)晶或色譜法進(jìn)一步純化粗產(chǎn)物。
一般方法A的舉例說明 實(shí)施例#111-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-3-(2-吡啶-2-基-乙基)-脲
將7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基-硫代氨基甲酸甲酯(制備例#14，25.0mg，0.074mmol)和2-吡啶-2-基-乙基胺(23mg，0.185mmol)在乙醇(2mL)中的混合物于約50℃攪拌約8小時(shí)。減壓除去溶劑，并且通過在乙醇中結(jié)晶來純化產(chǎn)物，獲得了1-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-3-(2-吡啶-2-基-乙基)-脲(12mg，39％產(chǎn)率)；RP HPLC(表1，方法e)Rt＝1.82min；MS m/z(M-H)-412。
表A.使用一般方法A由制備例#14進(jìn)行合成的實(shí)施例








一般方法B由羧酸和胺形成酰胺
向羧酸(1-2.5當(dāng)量，優(yōu)選1-1.5當(dāng)量)和胺(1-2.5當(dāng)量，優(yōu)選1-1.5當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如THF、EtOAc、Et2O或DMF，優(yōu)選DMF)內(nèi)的混合物中加入偶聯(lián)試劑(例如DCC、DIC、EDC、HBTU、HATU或TFFH，優(yōu)選HBTU)(1-5當(dāng)量，優(yōu)選1.2當(dāng)量)，加入或不加入偶聯(lián)添加劑(例如HOBT或HOAT，優(yōu)選HOBT)(0.1-5當(dāng)量，優(yōu)選0.2當(dāng)量)和任選DBEA(0.1-25當(dāng)量，優(yōu)選3當(dāng)量)。將該反應(yīng)混合物在約20-70℃(優(yōu)選約50℃)攪拌約5-40小時(shí)(優(yōu)選約35小時(shí))，然后冷卻至室溫?？赏ㄟ^三種不同途徑來純化該反應(yīng)混合物1)將該反應(yīng)混合物用MP-碳酸鹽(3-10當(dāng)量，優(yōu)選5當(dāng)量)處理，使用或不使用甲醇。約4-48小時(shí)(優(yōu)選約14小時(shí))后，通過過濾將該反應(yīng)溶液與樹脂分離開，并且減壓濃縮，獲得了粗產(chǎn)物，可通過結(jié)晶或色譜法進(jìn)一步純化粗產(chǎn)物。如果在過濾樹脂之前產(chǎn)物沉淀，則經(jīng)由吸移管將含有產(chǎn)物的懸浮液與樹脂分離，并且過濾，獲得粗產(chǎn)物，可通過結(jié)晶或色譜法進(jìn)一步純化粗產(chǎn)物。2)將該反應(yīng)混合物在水與有機(jī)溶劑(例如CH2Cl2、EtOAc或Et2O，優(yōu)選CH2Cl2)之間分配。分離出有機(jī)層，并且將水層進(jìn)一步用有機(jī)溶劑萃取。用干燥劑將合并的有機(jī)萃取液干燥，并且減壓蒸發(fā)，獲得了產(chǎn)物，可通過結(jié)晶或色譜法進(jìn)一步純化該產(chǎn)物。3)將該反應(yīng)混合物直接減壓濃縮，并且通過結(jié)晶或色譜法純化殘余物。
一般方法B的舉例說明 實(shí)施例#12N-芐基5-(5-氨基-1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-7-甲酰胺乙酸鹽
將5-(5-氨基-1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-7-甲酸鹽酸鹽(制備例#13，32.9mg，0.10mmol)和芐基胺(24.0μL，0.22mmol)在DMF(1.0mL)中的溶液于室溫用o-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(38.0mg，0.10mmol)處理，并將反應(yīng)攪拌約1小時(shí)。將反應(yīng)減壓濃縮，并且殘余物通過制備HPLC純化(Waters Symmetry C8柱(25×100mm，7μm粒度)，用10％-100％ CH3CN/0.1％ TFA水溶液經(jīng)由8分鐘(10分鐘運(yùn)行時(shí)間)以40mL/min的流速梯度洗脫。合并產(chǎn)物級分并濃縮以除去有機(jī)溶劑，然后凍干，獲得N-芐基5-(5-氨基-1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-7-甲酰胺乙酸鹽(10mg，23％)，為灰白色粉末；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 1.94min；m/z(M-H)-381. 表B.1.實(shí)施例是用一般方法B制備的

表B.2.實(shí)施例是用一般方法B由實(shí)施例#F.8.1制備的







表B.3.實(shí)施例是用一般方法C由制備例#7制得的














表B.4.使用一般方法C由實(shí)施例#N.2.8制備的實(shí)施例





一般方法C使用Si-DCT由羧酸和胺形成酰胺
在20mL小瓶中，把N-甲基嗎啉(2-5當(dāng)量，優(yōu)選4當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如THF、CH2Cl2、CH3CN或CH3CN/CH2Cl2 1:1)中的溶液加到Si-二氯三嗪(Si-DCT)(2-4當(dāng)量，優(yōu)選3當(dāng)量)中。加入羧酸(1.1-2.5當(dāng)量，優(yōu)選1.25當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如THF、CH2Cl2、CH3CN或1:1CH3CN/CH2Cl2，優(yōu)選1:1 CH3CN/CH2Cl2)中的溶液，并混合約1分鐘。然后加入胺(1當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如THF、CH2Cl2、CH3CN或1:1CH3CN/CH2Cl2，優(yōu)選1:1 CH3CN/CH2Cl2)中的溶液。將反應(yīng)在約10-60℃、優(yōu)選約室溫?fù)u動約10-24小時(shí)、優(yōu)選約16小時(shí)。將粗反應(yīng)溶液與DMF混合，通過Si-碳酸鹽(1g，6mL)筒用另外的有機(jī)溶劑(例如MeOH)洗脫，并真空濃縮。然后將粗產(chǎn)物通過結(jié)晶或色譜法進(jìn)一步純化。
一般方法C的舉例說明. 實(shí)施例#13呋喃-2-甲酸(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-酰胺
在20mL小瓶中，把N-甲基嗎啉(0.060g，0.60mmol)在MeCN/CH2Cl2(1:1，0.688mL)中的溶液加到Si-二氯三嗪(SiliCycle，Inc；0.60mmol/g，0.74g，0.44mmol)中。然后，加入2-糠酸(0.021g，0.19mmol)在MeCN(0.925mL)中的溶液，并混合約1分鐘，然后加入7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基胺(實(shí)施例#F.8.1，0.039g，0.15mmol)在MeCN/CH2Cl2(1:1，0.688mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢钃u動約16小時(shí)。將該粗反應(yīng)溶液與DMF(5mL)混合以幫助溶解，通過Si-碳酸鹽(SiliCycle，Inc；1g，6mL)筒用MeOH(約3mL)洗脫，并真空濃縮。該粗產(chǎn)物通過制備HPLC(Waters Symmetry C8柱(25×100mm，7μm粒度)用10％-100％ CH3CN/0.1％ TFA水溶液經(jīng)由8分鐘(10分鐘運(yùn)行時(shí)間)以40mL/min的流速梯度洗脫，獲得呋喃-2-甲酸(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-酰胺(0.0025g，4.7％)；RP-HPLC(表1，方法I)Rt 2.51min；m/z(M+H)+360. 表C.1.使用一般方法C用實(shí)施例#F.8.1制備的實(shí)施例

















一般方法D用三甲基-甲硅烷基乙氧基甲基保護(hù)吲唑
將吲唑(1當(dāng)量)和堿(例如Na2CO3、NaOH、Cs2CO3或t-BuOK，優(yōu)選Na2CO3)(1-10當(dāng)量，優(yōu)選1-2當(dāng)量)和SEMCI(1-2當(dāng)量，優(yōu)選1.2當(dāng)量)在與水或無水溶劑(例如DMF或DMA，優(yōu)選DMF)混合的溶劑(例如DME或CH2Cl2，優(yōu)選CH2Cl2)中的混合物，在惰性氣氛下在約10-40℃(優(yōu)選約20-25℃)攪拌約0.5-24小時(shí)(優(yōu)選約1-2小時(shí))。加入飽和NH4Cl水溶液，并減壓除去溶劑。把殘余物溶解在有機(jī)溶劑(CH2Cl2或EtOAc，優(yōu)選EtOAc)中，并用水洗滌。將有機(jī)層用干燥劑(例如硫酸鎂或硫酸鈉，優(yōu)選硫酸鎂)干燥，并通過結(jié)晶或色譜法進(jìn)一步純化。
一般方法D的舉例說明 制備例#23. 7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑，和 制備例#24. 7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-2-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-2H-吲唑
向7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-1H-吲唑(制備例#26，38.0g，0.116mol)在DMF(570mL)中的混合物內(nèi)于約5℃加入t-BuOK(15.5g，0.139mmol)。將混合物攪拌約30分鐘，然后用約5分鐘加入SEM-Cl(23.2g，0.139mmol)，同時(shí)將溫度保持在約0-5℃。加熱至室溫并將溶液攪拌約30分鐘后，將溶液用飽和NH4Cl水溶液(約5mL)處理。減壓除去溶劑，并將殘余物用EtOAc:水(1:1，700mL)分配。將有機(jī)層進(jìn)一步用水(150mL)和鹽水(150mL)洗滌，用無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，獲得油狀物，其在放置后固化。加入庚烷(500mL)，并將混合物加熱至約100℃以溶解全部固體。將混合物冷卻至室溫，并經(jīng)由過濾收集所得固體，獲得7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-2-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-2H-吲唑(33g，62％)；(DMSO-d6，400MHz)δ 8.73(s，1H)，8.61(s，1H)，8.11(d，1H)，8.04(m，1H)，7.95(m，1H)，7.79(d，1H)，7.45(m，2H)，5.89(s，2H)，3.79(m，2H)，0.96(m，2H)，0.00(s，9H)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt3.63min；m/z(M+H)+.461。將濾液濃縮，并通過硅膠柱快速色譜法純化，用己烷/EtOAc(9:1)作為洗脫劑，獲得7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑7.8g(15％)，為油狀物，將在放置后固化；(DMSO-d6，400MHz)δ 8.50(s，1H)，8.40(s，1H)，8.26(m，1H)，8.12(m，1H)，7.89(s，1H)，7.80(d，1H)，7.67(m，2H)，5.64(s，2H)，3.34(m，2H)，0.81(m，2H)，0.00(s，9H)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt3.63min；m/Z(M+H)+.461. 一般方法E將芳基鹵轉(zhuǎn)化為硼酸或硼酸酯
向硼酸化試劑(boronating reagent)(二(頻哪醇合)二硼(bis(pinacolato)diboron)或頻哪醇合硼烷(pinacolatoborane)，優(yōu)選二(頻哪醇合)二硼)(1-1.5當(dāng)量，優(yōu)選1.3當(dāng)量)、芳基鹵(例如芳基溴或芳基碘，優(yōu)選芳基碘)(0.5-3當(dāng)量，優(yōu)選1當(dāng)量)、鈀催化劑(例如三(亞芐基丙酮)二鈀(0)、四(三苯基膦)鈀(0)、二(乙酸根合)三苯基膦鈀(II)(～5％Pd)聚合物結(jié)合的FibreCatTM或[1，1′-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)與二氯甲烷的絡(luò)合物)(優(yōu)選二氯化[1，1′-二(二苯基膦基)二茂鐵]-鈀(II)二氯甲烷加合物)(0.03-0.15當(dāng)量，優(yōu)選0.10當(dāng)量)和堿(例如NaOAc或KOAc，優(yōu)選KOAc)(1.5-3.0當(dāng)量，優(yōu)選2.5當(dāng)量)的混合物內(nèi)加入有機(jī)溶劑(例如DMF、二噁烷或THF，優(yōu)選DMF)。將混合物在惰性氣氛下于約50-100℃(優(yōu)選約80℃)加熱約1-24小時(shí)(優(yōu)選約15小時(shí))。將混合物冷卻至室溫，并減壓除去溶劑。然后可以將殘余物通過結(jié)晶或色譜法進(jìn)一步純化。
一般方法E的舉例說明. 制備例#257-苯并[b]噻吩-2-基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吲唑
將7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-1H-吲唑(制備例#26，5.0g，15.2mrnol)、二(頻哪醇合)二硼(5.78，22.8mmol)、KOAc(3.72g，38mmol)和[1，1′-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)與二氯甲烷的絡(luò)合物(1:1)(0.99g，1.22mmol)在DMF(125mL)中的混合物在氮?dú)夥障掠诩s100℃加熱約18小時(shí)。將該黑色反應(yīng)溶液冷卻至室溫，用CH2Cl2(25mL)稀釋，然后用水(2×20mL)洗滌。將反應(yīng)混合物冷卻，減壓濃縮，用CH2Cl2(175mL)研制，過濾并將濾液減壓濃縮。所得材料通過硅膠柱快速色譜法純化，用CH2Cl2/EtOAc(97:3)作為洗脫劑，并將該材料用庚烷(25mL)研制，獲得7-苯并[b]噻吩-2-基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吲唑，為白色固體(2.23g，39％)；(DMSO-d6，400MHz)δ13.5(s，1H)，8.31(s，1H)，8.22(s，1H)，8.06(s，1H)，8.02(d，1H)，7.89(d，1H)，7.83(s，1H)，7.43(m，2H)，1.35(s，12H)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 2.77min；m/z(M-H)-374.5. 一般方法F硼酸酯或硼酸與芳基鹵底物的Suzuki偶聯(lián)
向硼酸酯或硼酸(1-5當(dāng)量，優(yōu)選2當(dāng)量)、芳基鹵(例如芳基溴、芳基氯或芳基碘，優(yōu)選芳基碘)(0.7-3當(dāng)量，優(yōu)選1當(dāng)量)、無機(jī)堿(例如KF、Na2CO3或Cs2CO3，優(yōu)選Cs2CO3)(2-16當(dāng)量，優(yōu)選2.5當(dāng)量)在脫氣了的有機(jī)溶劑(例如THF、DME、DMF、1，4-二噁烷、DME/水或甲苯，優(yōu)選DMF或DME/水)中的混合物內(nèi)加入鈀催化劑(例如三(亞芐基丙酮)二鈀(0)、四(三苯基膦)鈀(0)、二(乙酸根合)三苯基膦鈀(H)(～5％Pd)聚合物結(jié)合的FibreCatTM或[1，1′-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)與二氯甲烷的絡(luò)合物，優(yōu)選四(三苯基膦)鈀(0))(0.01-0.10當(dāng)量，優(yōu)選0.05當(dāng)量)。如果需要，也可以加入三丁基膦四氟硼酸酯(0.01 to 0.20當(dāng)量，優(yōu)選0.05當(dāng)量)。在微波爐中于惰性氣氛下將該反應(yīng)混合物在約40-150℃(優(yōu)選約80℃)加熱約2-24小時(shí)(優(yōu)選約18小時(shí))或者在約100-200℃(優(yōu)選150℃)加熱約5-60分鐘(優(yōu)選約15分鐘)。讓該反應(yīng)混合物冷卻至室溫。然后將溶劑減壓蒸發(fā)，并且把殘余物懸浮在EtOAc與水的混合物中；將該混合物攪拌30分鐘，并且通過過濾收集所得固體；可通過色譜法或結(jié)晶將產(chǎn)物進(jìn)一步純化?；蛘撸瑢⒗鋮s的反應(yīng)混合物用水或堿性水溶液(例如飽和NaHCO3水溶液)稀釋，并且用合適的溶劑(例如EtOAc或CH2Cl2)萃取(1-5次，優(yōu)選3次)，然后將合并的萃取液干燥(例如用Na2SO4或MgSO4干燥)，傾析或過濾，并減壓濃縮，獲得產(chǎn)物，可通過色譜法或結(jié)晶將產(chǎn)物進(jìn)一步純化。如果使用叔丁氧基羰基(Boc)保護(hù)的胺，則之后將產(chǎn)物懸浮在甲醇/6N HCl混合物中，并且在約65℃加熱至約1小時(shí)，然后冷卻，濃縮，并且通過色譜法或結(jié)晶純化。
一般方法F的舉例說明 實(shí)施例#13a7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-1H-吲唑
將5-溴-7-碘-1H-吲唑(制備例#22a，30.0g，92.9mmol)和硫茚-2-硼酸(21.5g，120.7mmol)、DME(480mL)、水(48mL)、Na2CO3(29.5g，279mmol)和四-三苯基膦鈀(0)(8.6g，7.43mmol)的混合物在油浴中于氮?dú)夥障略诩s90℃加熱約15小時(shí)。減壓除去溶劑，并且把殘余物懸浮著乙酸乙酯(600mL)與水(300mL)的混合物中。將該混合物攪拌約30分鐘，并且通過過濾收集所得固體，干燥，獲得了7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-1H-吲唑(21.4g，70％)； (DMSO-d6，400MHz)δ 13.63(s，1H)，8.24(s，1H)，8.05-8.09(m，3H)，7.92(d，1H)，7.65(s，1H)，7.16(m，2H)； RP-HPLC(表1，方法e)Rt＝2.69min；m/v.(M-H)-328.4 實(shí)施例#13cN-苯基-5-吡啶-3-基-1H-吲唑-7-甲酰胺
將N-苯基-5-溴-1H-吲唑-7-甲酰胺(實(shí)施例#B.1.2，0.05g，0.16mmol)和吡啶-3-基-硼酸(0.11g，0.8mmol)、1，2-二甲氧基乙烷(1.3mL)、水(0.7mL)、Cs2CO3(0.16g，0.48mmol)和[1，1′-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)與二氯甲烷的絡(luò)合物(0.013g，0.016mmol)的混合物在微波爐中于氮?dú)夥障略诩s150℃加熱約15分鐘。將粗產(chǎn)物過濾，并減壓除去溶劑。將殘余物溶解在DMSO中，然后通過反相HPLC(Waters Symmetry C8柱(25×100mm，7μm粒徑)純化，使用10％-100％ CH3CN/0.1％水溶液TFA經(jīng)由8分鐘(10分鐘運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)間)以40mL/分鐘的速度梯度洗脫，獲得了N-苯基-5-吡啶-3-基-1H-吲唑-7-甲酰胺(O.014g，6％)； (DMSO-d6，400MHz)δ 13.4(bs，1H)，10.5(bs，1H)，9.12(d，1H)，8.62(d，1H)，8.48(s，1H)，8.34(s，1H)，8.28(m，2H)，7.84(d，2H)，7.56(m，1H)，7.42(m，2H)，7.16(m，2H)； RP-HPLC(表1，方法e)R，＝1.81min；m/z(M+H)+315.3. 表F.1.用一般方法F由制備例#25制備的實(shí)施例









表F.2.用一般方法F由實(shí)施例#N.2.2制備的實(shí)施例




表F.3.用一般方法F使用6-溴-1H-吲唑制備的實(shí)施例

表F.4.用一般方法F使用5-(2-氨基嘧啶-4-基)氨基-3-氯-7-碘-1H-吲唑制備的實(shí)施例
5-(2-氨基嘧啶-4-基)氨基-3-氯-7-碘-1H-吲唑是由3-氯-5-硝基-1H-吲唑(J.Med.Chem.，46(26)；2003；5663-5673，經(jīng)由在合成制備例#22a中使用的鹵素條件和一般方法N(使用2-氨基-4-氯-嘧啶))制備的。

表F.5.用一般方法F由實(shí)施例#N.2.7制備的實(shí)施例








表F.6.用一般方法F使用3-碘-5-(2-氨基嘧啶-4-基)氨基-1H-吲唑制備的實(shí)施例
3-碘-5-(2-氨基嘧啶-4-基)氨基-1H-吲唑是由制備例#28通過一般方法N使用2-氨基-4-氯嘧啶制備的。




表F.7.用一般方法F由3-碘-5-(6-氨基吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基-1H-吲唑(由制備例#28用一般方法N從6-氨基-4-氯吡咯并[2，3-d]嘧啶開始制備的)

表F.8.用一般方法F由制備例#6制備的實(shí)施例

表F.9.用一般方法F由實(shí)施例#2制備的實(shí)施例

表F.10.用一般方法F由7-(1H-茚-2-基)-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑(制備例#23然后E)制備的實(shí)施例

表F.11.用一般方法F由實(shí)施例#N.2.2制備的實(shí)施例




表F.12.用一般方法F由實(shí)施例X.1.2制備的實(shí)施例



*與3-氨基-4-溴-吲唑反應(yīng) **與3-氨基-6-溴-吲唑反應(yīng) 表F.13.用一般方法F由實(shí)施例#B.1.2制備的實(shí)施例

表F.14.用一般方法F由制備例#56制備的實(shí)施例

表F.15.用一般方法F使用5-(二甲基氨基-亞甲基氨基)-3-碘-吡咯并[2，3-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯然后脫保護(hù)(方法#5步驟1中概述)的實(shí)施例 步驟1，方法#5
5-(二甲基氨基-亞甲基氨基)-3-碘-吡咯并[2，3-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯是按照制備例#4通過制備10a和10b使用4-甲基-5-硝基-吡啶-2-基胺制備的。



一般方法G將SEM-保護(hù)的吲唑脫保護(hù)
將SEM保護(hù)的吲唑在溶劑(例如MeOH、EtOH、i-PrOH、CH2Cl2或二噁烷，優(yōu)選MeOH)中的混合物用過量的無機(jī)酸(例如HCl、HF或TFA，優(yōu)選HCl)處理，然后在約25-85℃(優(yōu)選約65℃)攪拌約1-24小時(shí)(優(yōu)選約1小時(shí))。將溶劑蒸發(fā)，分離出產(chǎn)物并通過結(jié)晶或色譜法進(jìn)一步純化。
一般方法G的舉例說明 實(shí)施例#145-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-嘧啶-2-基胺
將6N HCl(1mL)和5-[7-苯并[b]噻吩-2-基-2-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-2H-吲唑-5-基]-嘧啶-2-基胺(0.063g，0.133mmol)(由7-苯并[b]噻吩-2-基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-2-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-2H-吲唑(制備例#23，E)和5-碘-嘧啶-2-基胺按照一般方法F制備的)在MeOH(2mL)中的混合物加熱至約65℃約1小時(shí)。減壓除去溶劑，并將殘余物用NaHCO3(4mL)和EtOAc(2mL)處理。過濾收集不溶解的產(chǎn)物然后干燥，獲得5-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-嘧啶-2-基胺(27mg，60％)，為灰白色固體；(DMSO-d6，400MHz)δ13.56(bs，1H)，8.66(s，2H)，8.29(s，1H)，8.15(s，1H)，8.04(m，2H)，7.93(m，1H)，7.79(d，1H)，7.43(m，2H)，7.76(bs，2H)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt＝2.03MS m/z(M-H)-341.7. 表G.用一般方法G制備的實(shí)施例








一般方法HTBDMS保護(hù)基的酸裂解
向TBDMS保護(hù)的底物在有機(jī)溶劑(例如甲醇、乙醇、異丙醇、CH2Cl2或二噁烷，優(yōu)選甲醇)中的混合物內(nèi)加入過量的酸(5-50當(dāng)量，優(yōu)選20當(dāng)量)(例如HCl或TFA，優(yōu)選HCl)。然后將反應(yīng)混合物在約25-85℃(優(yōu)選約65℃)攪拌約0.5-24小時(shí)(優(yōu)選約1小時(shí))。將溶劑蒸發(fā)，并將產(chǎn)物通過結(jié)晶或通過色譜法分離。
一般方法H的舉例說明 實(shí)施例#30.(3-[(2-氨基-嘧啶-4-基)-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-氨基]-丙-1-醇
把6N鹽酸(1mL)加到N4-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-N4-[3-(叔丁基-二甲基-甲硅烷基氧基)-丙基]-嘧啶-2，4-二胺(通過一般方法O然后N，由實(shí)施例#F.8.1制得，0.179g，0.339mmol)在乙醇(2mL)中的混合物內(nèi)。將反應(yīng)混合物加熱至65℃約1小時(shí)，然后冷卻至約室溫。將溶劑蒸發(fā)，并且殘余物通過反相色譜法純化(ThermoHypersil-Keystone 250×21.2mm 8μ

HS C18柱；5％乙腈/0.1M乙酸銨水溶液-100％乙腈經(jīng)由20min，100％乙腈保持5分鐘，21mL/min)，獲得(3-[(2-氨基-嘧啶-4-基)-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-氨基]-丙-1-醇(0.022g，0.053mmol)，為灰白色固體；RP-HPLC(表1，方法e)R，1.77min.；m/z(M+H)+417.1. 表H.I.用一般方法H制備的實(shí)施例

一般方法I將芐基醚脫保護(hù)
將芐基保護(hù)的醚(1當(dāng)量)和Pd催化劑(例如10wt.％披鈀碳或氧化鈀(II)，優(yōu)選10wt.％披鈀碳)(5-10mol％，優(yōu)選7mol％)在脫氣了的有機(jī)溶劑(例如MeOH或EtOH，優(yōu)選MeOH)中的混合物在約30-50psi(優(yōu)選40psi)的氫氣氛下于約10-50℃(優(yōu)選約25℃)搖動2-24小時(shí)(優(yōu)選約18小時(shí))。將反應(yīng)抽空，用惰性氣體(例如氮?dú)饣驓鍤猓瑑?yōu)選氮?dú)?沖洗并過濾。減壓除去溶劑，獲得了產(chǎn)物，可以通過色譜法或結(jié)晶將其進(jìn)一步純化。
一般方法I的舉例說明 實(shí)施例#155-[3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑-5-基]-吡啶-3-醇
將5-(5-芐氧基-吡啶-3-基)-3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑(制備例#16c，E和F(用5-芐氧基-3-溴吡啶)，0.015g，0.4mmol)在MeOH(5mL)和10wt.％Pd/C(3mg)中的混合物在氫氣氛(約40psi)下?lián)u動約24小時(shí)。將粗產(chǎn)物過濾，并減壓除去溶劑，獲得5-[3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑-5-基]-吡啶-3-醇(0.088g，80％)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt＝1.78min；m/z(M+H)+277，(M-H)-275. 一般方法J將醛還原為醇
將醛(1-1.2當(dāng)量，優(yōu)選1當(dāng)量)和還原劑(例如硼烷、硼烷-吡啶、硼烷-二甲硫、LiBH4或NaBH4，優(yōu)選NaBH4)(1.0-3.0當(dāng)量，優(yōu)選2.0當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如DMF、二噁烷、THF、MeOH或EtOH，優(yōu)選MeOH)中的混合物在惰性氣氛下于約5-65℃(優(yōu)選約25℃)攪拌約0.5-24小時(shí)(優(yōu)選約1小時(shí))。如果加熱，將混合物冷卻至室溫，并減壓除去溶劑。然后可以通過色譜法或結(jié)晶將固體殘余物純化。
一般方法J的舉例說明 實(shí)施例#16[3-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-苯基]-甲醇
將3-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-苯甲醛(制備例#25，F(xiàn)(用3-溴苯甲醛)，50mg，0.14mmol)和NaBH4(0.01g，0.26mmol)在MeOH(2mL)中的混合物于室溫?cái)嚢杓s1小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮，然后將殘余物通過反相制備HPLC純化(Thermo Hypersil-Keystone 250×21.2mm 8μ

HS Cl 8柱；5％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液保持5min；5-50％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液經(jīng)由20min；50-100％CH3CN/50mM水溶液經(jīng)由1min；在100％ CH3CN保持5分鐘，21mL/min)，獲得[3-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-苯基]-甲醇(6mg，12％)； (DMSO-d6，400MHz)8.8(d，1H)，8.55(d，1H)，8.37(s，1H)，8.19(d，1H)，8.18(s，1H)，8.10(t，1H)，8.04(dd，1H)，7.93(dd，1H)，7.89(d，1H，7.45(m，2H)，5.40(t，1H)，4.6(d，2H)； RP-HPLC(表1，方法e)Rt＝1.85min；m/z(M-H)-355.8 一般方法K芳基砜的親核取代
將芳基砜用大量過量的親核試劑(例如胺或醇，優(yōu)選胺)(100-500當(dāng)量，優(yōu)選250當(dāng)量)在不存在有機(jī)溶劑的情況下處理。將混合物于約0-100℃(優(yōu)選約20℃)攪拌5-60小時(shí)(優(yōu)選約16小時(shí))。如果加熱，將混合物冷卻至室溫，過濾，如果需要?jiǎng)t將固體通過結(jié)晶或色譜法進(jìn)一步純化。
一般方法K的舉例說明 實(shí)施例#17(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-(2-肼基-嘧啶-4-基)-胺
將(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-(2-甲磺?；?嘧啶-4-基)-胺(制備例#8，20mg，0.048mmol)用肼(0.4mL，12.2mmol)于室溫處理約5小時(shí)。將固體過濾，并通過在二氯甲烷中研制進(jìn)一步純化，然后過濾，獲得(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-(2-肼基-嘧啶-4-基)-胺(4mg，23％產(chǎn)率)；LC/MS(方法f)Rt 6.0min；m/z(ESI-)(M-H)+371.7. 表K.用一般方法K由(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-(2-甲磺?；?嘧啶-4-基)-胺(制備例#8)制備的實(shí)施例


一般方法L將硝基芳族化合物還原為苯胺 向硝基芳族化合物(優(yōu)選1當(dāng)量)在溶劑(例如EtOAc、EtOH、HOAc、9M NH4OH，優(yōu)選EtOAc)中的溶液內(nèi)加入還原劑(例如氫碘酸、鐵粉、水合硫酸鐵、二水合氯化亞錫或披鈀碳)(0.2-10當(dāng)量，優(yōu)選3當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物于約20-100℃(優(yōu)選約90℃)攪拌約1-20小時(shí)(優(yōu)選約2小時(shí))。當(dāng)采用鈀催化劑時(shí)，是氫氣氛(約15-60psi，優(yōu)選約40psi)。如果使用水合硫酸鐵作為還原劑，將該混合物趁熱過濾，然后用HOAc酸化至約pH＝4，然后將產(chǎn)物過濾并用水洗滌。如果使用氯化亞錫或鐵粉，那么將混合物冷卻至室溫，然后用有機(jī)溶劑(例如EtOAc或CH2Cl2，優(yōu)選CH2Cl2)稀釋。如果用鈀作為還原劑，那么將反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾并用有機(jī)溶劑洗滌。如果使用氫碘酸，則將有機(jī)層用硫代硫酸鈉飽和水溶液洗滌。然后將有機(jī)層用堿水溶液(例如Na2CO3或NaOH，優(yōu)選NaOH)洗滌。將有機(jī)層分離，用干燥劑干燥，并濃縮，獲得苯胺化合物。
一般方法L的舉例說明 制備例#283-碘-1H-吲唑-5-基胺
將3-碘-5-硝基-1H-吲唑(2.0g，6.92mmol)在穩(wěn)定的氫碘酸(57％ wt水溶液，21mL)中的懸浮液于90℃加熱2小時(shí)。隨著反應(yīng)進(jìn)行反應(yīng)混合物趨于均勻。冷卻至室溫后，將該黑紫色混合物用EtOAc(500mL)稀釋，并依次用硫代硫酸鈉飽和水溶液(200mL)、NaHCO3飽和水溶液(200mL)和鹽水(200mL)洗滌。將無色有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥，并濃縮至干，獲得3-碘-1H-吲唑-5-基胺1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 13.03(s，1H)，7.26(d，1H)，6.85(m，1H)，6.44(d，1H)，5.03(s，2H)；LC/MS(30％-95％乙腈/0.01M乙酸銨水溶液，經(jīng)由4.5分鐘，以0.8mL/分鐘；λ＝190-700nm；Genesis Cl 8，3μm，30×4.6mm柱；電噴霧電離方法觀測到+ve和-ve離子)R，1.25min.；m/z260(M+H)+。
一般方法M由酯形成酰胺
于室溫，將任選用醇類溶劑(MeOH、EtOH或i-PrOH，優(yōu)選i-PrOH)稀釋的酯(1.0當(dāng)量)和胺(例如氨、伯胺或仲胺)(10-500當(dāng)量，優(yōu)選20當(dāng)量)的混合物在攪拌下于約60-140℃(優(yōu)選約100℃)在密封的容器中加熱0.5-7天(優(yōu)選約1天)。將混合物冷卻至室溫，濃縮，并通過色譜法或結(jié)晶進(jìn)一步純化，或者不進(jìn)一步純化用于隨后步驟。
一般方法M的舉例說明 參見實(shí)施例#1. 一般方法N用氨基化合物將芳族鹵化物親核取代
向有或沒有堿(Et3N或DIEA，優(yōu)選Et3N)的胺(1.0當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如EtOH、MeOH或二噁烷，優(yōu)選EtOH)的溶液內(nèi)加入芳族鹵化物(1.0-10當(dāng)量，優(yōu)選1.0當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物在攪拌下于約25-160℃(優(yōu)選約80℃)加熱約20分鐘-4小時(shí)(優(yōu)選約30分鐘)，或者在微波反應(yīng)器中于約120-180℃(優(yōu)選約150℃)加熱約5-30分鐘(優(yōu)選約10分鐘)。將混合物冷卻至室溫。然后減壓除去溶劑，或者將混合物過濾，獲得粗產(chǎn)物，然后將其通過色譜法或結(jié)晶純化，或者進(jìn)行以下水后處理。將該粗材料懸浮在堿性溶液(例如NH4OH MeOH中的溶液、NaHCO3飽和水溶液或2MNa2CO3水溶液，優(yōu)選NaHCO3飽和水溶液)中，然后過濾，并用有機(jī)溶劑(例如MeOH、EtOAc或CH2Cl2)洗滌。如果需要，那么可以將所得固體酮色譜法或結(jié)晶進(jìn)行純化。如果使用叔丁氧基羰基(Boc)保護(hù)的二胺，那么將該材料懸浮在甲醇/6N鹽酸的混合物中，并加熱至約65℃約1小時(shí)，然后冷卻，濃縮，通過色譜法或結(jié)晶純化。
一般方法N的舉例說明 制備例#46.(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-胺
向4-氯-2-甲磺?；?嘧啶(2.54g，13.2mmol)在DME(20mL)中的混合物內(nèi)加入7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基胺(實(shí)施例#F.8.1，1.95g，7.35mmol)和Et3N(1.43mL，10.3mmol)在DME(160mL)中的混合物。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢杓s16小時(shí)，然后過濾，然后鈀濾液吸收到二氧化鋁中。將混合物通過快速二氧化鋁柱色譜法純化，用CH2Cl2ZMeOH(99:1)作為洗脫劑，獲得首批產(chǎn)物。通過將礬土在CH2Cl2/MeOH(8:2)中研制，獲得第二批產(chǎn)物，并與首批產(chǎn)物合并，獲得7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-(2-甲磺?；?嘧啶-4-基)-胺(1.09g，36％產(chǎn)率)LC/MS(方法e)Rt 1.8min；m/z(ESI-)(M-H)+419.9. 表N.1用一般方法N由實(shí)施例#F.8.1制備的實(shí)施例



表N.2用一般方法N由4-氯-2-氨基嘧啶制備的實(shí)施例





實(shí)施例#N.2.8的代表性NMR數(shù)據(jù) 1H NMR(DMSO-d6，400MHz)；8.28(br，1H)，8.10(m，1H)，8.03(d，1H)，7.92(d，1H)，7.78(s，1H)，7.61(d，1H)，7.43(m，3H)，6.07(m，2H)，5.42(d，1H)，3.92(d，2H)，3.82(m，2H)，3.21(t，2H)，2.33(m，1H)，1.91(s，3H)，1.60(m，2H)，1.29(m，2H). 表N.3.用一般方法N由制備例#3制備的實(shí)施例

表N.4.用一般方法N由實(shí)施例#F.8.1制備的實(shí)施例

表N.5.用一般方法N由實(shí)施例#N.4.3制備的實(shí)施例

表N.6.用一般方法N由實(shí)施例#N.4.1制備的實(shí)施例

表N.7.用一般方法N由制備例#22d制備的實(shí)施例

表N.8.用一般方法N由制備例#3制備的實(shí)施例

表N.9.用一般方法N由實(shí)施例N.4.3制備的實(shí)施例制備的實(shí)施例


一般方法O用醛或酮還原烷基化胺.
向胺和醛或酮(1-10當(dāng)量，優(yōu)選1-2當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如1，2-二氯乙烷、THF、CH2CI2、DMF或EtOAc，優(yōu)選1，2-二氯乙烷)中的有或沒有乙酸(1-10當(dāng)量，優(yōu)選1當(dāng)量)的混合物內(nèi)加入還原劑(例如三乙酰氧基硼氫化鈉或氰基硼氫化鈉，優(yōu)選三乙酰氧基硼氫化鈉)(1-10當(dāng)量，優(yōu)選約2當(dāng)量)。需要時(shí)可再加入乙酸(1-10當(dāng)量，優(yōu)選3當(dāng)量)以促進(jìn)反應(yīng)。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?-112小時(shí)(優(yōu)選24小時(shí))。將反應(yīng)混合物采用兩種方式之一進(jìn)行純化1).將反應(yīng)溶液用適宜的堿(例如NaOH、NaHCO3，或Na2CO3，優(yōu)選NaHCO3)的水溶液和有機(jī)溶劑(例如CH2Cl2或EtOAc，優(yōu)選CH2Cl2)處理。將兩個(gè)層攪拌約15分鐘，然后分離。將有機(jī)相減壓濃縮。所得粗產(chǎn)物可以通過用適宜的溶劑(水、EtOH、甲苯或EtOAc，優(yōu)選EtOH)研制或者通過色譜法進(jìn)行純化，或者2).將反應(yīng)混合物直接減壓濃縮，并通過色譜法、研制或結(jié)晶進(jìn)行純化。
一般方法O舉例說明 實(shí)施例#19aN-芐基-(5-硝基-1H-吲唑-3-基)-胺
向5-硝基-1H-吲唑-3-基胺(0.025g，0.140mmol)和苯甲醛(0.067g，0.60mmol)在CH2Cl2(3.0mL)中的懸浮液內(nèi)加入乙酸(0-024mL，0.42mmol)，然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(0.059g，0.28mmol)。將所得溶液于室溫?cái)嚢杓s19小時(shí)。將反應(yīng)溶液用CH2Cl2(5mL)稀釋，并用NaOH水溶液(1N，5mL)處理。將兩個(gè)相分離，并減壓除去有機(jī)溶劑。將殘余物通過制備HPLC進(jìn)一步純化(Thermo Hypersil-Keystone 250×21.2mm 8

HS Cl 8柱；5％乙腈/0.1M乙酸銨水溶液-100％乙腈，經(jīng)由20分鐘，100％乙腈保持5分鐘，21mL/分鐘)，獲得芐基-(5-硝基-1H-吲唑-3-基)-胺(0.012g，0.046mmol)，為橙色固體。RP-HPLC(表1，方法e)Rt2.15min.；m/z(M+H)+269. 表O.1.用一般方法O由實(shí)施例#F.1.9制備的實(shí)施例

表O.2.用一般方法O由實(shí)施例#F.8.1制備的實(shí)施例

表O.3.用一般方法O由實(shí)施例#F.5.4制備的實(shí)施例



表O.4.用一般方法O由實(shí)施例#5制備的實(shí)施例

一般方法P.用三溴化硼將甲基-保護(hù)的醇脫保護(hù) 向甲基-保護(hù)的醇在有機(jī)溶劑(1，2-二氯乙烷或CH2CI2，優(yōu)選1，2-二氯乙烷)中的懸浮液內(nèi)加入BBr3(8-20當(dāng)量，優(yōu)選10當(dāng)量)在CH2Cl2中的溶液。將反應(yīng)混合物于-10至5℃(優(yōu)選約0℃)攪拌約0.5-3小時(shí)(優(yōu)選約2小時(shí))，然后在約30-100℃(優(yōu)選約80℃)加熱約2-8小時(shí)(優(yōu)選約3小時(shí))?？梢詫⒎磻?yīng)混合物采用兩種不同的方式進(jìn)行研制1).將反應(yīng)混合物冷卻至約-10至10℃(優(yōu)選約0℃)，并用水溶液(例如NaHCO3或Na2CO3、優(yōu)選NaHCO3水溶液)中止反應(yīng)，用有機(jī)溶劑(EtOAc、Et2O或H2Cl2，優(yōu)選CH2Cl2)萃取。將殘余物在水和有機(jī)溶劑之間分配。將有機(jī)層分離，并將水層進(jìn)一步用有機(jī)溶劑萃取。將合并的有機(jī)萃取物用干燥劑干燥，并減壓除去溶劑。2).將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用MeOH稀釋，然后減壓除去溶劑。可以將化合物進(jìn)一步通過色譜法或結(jié)晶進(jìn)行純化。
一般方法P的舉例說明. 實(shí)施例#19b7-[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-3-基]-萘-2-醇二乙酸鹽
向4-[3-(7-甲氧基-萘-2-基)-1H-吲唑-5-基氨基]-嘧啶-2-胺(制備例#28然后一般方法N和F，20mg，0.05mmol)在CH2Cl2(1mL)中的懸浮液內(nèi)加入在THF(1mL)中的1M BBr3。將混合物于室溫?cái)嚢杓s2小時(shí)，然后加入甲醇(1mL)，并將混合物減壓濃縮。將殘余物通過制備反相HPLC純化，獲得7-[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-3-基]-萘-2-醇二乙酸鹽(12mg，60％)； (DMSO-d6，400MHz)δ 9.08(s，1H)，8.35(s，1H)，8.30(s，1H)，8.03(d，1H)，7.89(d，1H)，7.80(m，2H)，7.72(d，1H)，7.53(d，1H)，7.16(s，1H)，7.11(d，1H)，6.06(bs，2H)，5.99(d，1H)，1.87(s，6H)； 表P.1.用一般方法P合成的實(shí)施例
一般方法Q酯、脒和氨基甲酸酯的酸催化裂解 于約0-100℃、優(yōu)選40℃，把酸(HCl或TFA，優(yōu)選HCl)加到任選溶解在有機(jī)溶劑(MeOH、CH2Ch或二噁烷，優(yōu)選MeOH)中的用氨基甲酸酯或脒部分保護(hù)的胺中。將反應(yīng)混合物攪拌約5分鐘-24小時(shí)(優(yōu)選16h)，直到TLC或HPLC分析判斷反應(yīng)完成為止。如果需要，再加入酸以實(shí)現(xiàn)完成轉(zhuǎn)化。然后減壓除去溶劑。可以將粗產(chǎn)物用兩種不同的方式進(jìn)行處理1)將材料酮色譜法、研制或結(jié)晶進(jìn)行純化。2)將材料用適宜的堿(例如NaOH、NaHCO3或Na2CO3，優(yōu)選NaHCO3)的水溶液處理，并且通過過濾收集或者萃取到有機(jī)溶劑(例如CH2Cl2、CH2Cl2AMeOH(9:1)或EtOAc，優(yōu)選CH2Cl2)中?？梢詫⑺么之a(chǎn)物通過色譜法、研制或結(jié)晶進(jìn)行純化。
一般方法Q的舉例說明 實(shí)施例19c#48.7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-甲酸[4-(1H-吲哚-2-基)-苯基]-酰胺
于0℃把TFA(0.078g，0.68mmol)加到2-4-[(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-羰基)-氨基]-苯基-吲哚-1-甲酸叔丁酯(制備例#7然后B，0.100g，0.137mmol)在CH2Cl2(2.5mL，0.039mol)中的溶液內(nèi)。將反應(yīng)混合物于0℃攪拌約30分鐘，然后再加入TFA(80uL)。30分鐘后，將反應(yīng)加熱至室溫并攪拌16小時(shí)，然后再加入TFA(150uL)。2小時(shí)后，將混合物減壓濃縮，并將粗產(chǎn)物通過RP-HPLC純化，獲得7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-甲酸[4-(1H-吲哚-2-基)-苯基]-酰胺(13mg，20％產(chǎn)率)RP-HPLC(表1，方法e)Rt＝2.4min MS m/z(M-H)-483.2. 表Q.I.用一般方法Q制備的實(shí)施例

一般方法R由堿促進(jìn)的胺烷基化
將胺底物和堿(例如NaH、K2CO3、Cs2CO3、t-BuOK或Na2CO3，優(yōu)選Na2CO3)(2-6當(dāng)量，優(yōu)選2當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如THF、DME或DMF，優(yōu)選DMF)中的混合物于-10-25℃(優(yōu)選約0℃)在惰性氣氛下攪拌約0-60分鐘(優(yōu)選40分鐘)。加入有機(jī)鹵化物(例如有機(jī)溴化物或有機(jī)氯化物，優(yōu)選有機(jī)鹵化物)(2-6當(dāng)量，優(yōu)選3當(dāng)量)，并將反應(yīng)于約20-100℃(優(yōu)選約60℃)攪拌4-96小時(shí)(優(yōu)選約24小時(shí))。減壓除去溶劑，并將粗產(chǎn)物通過色譜法、結(jié)晶進(jìn)行純化，或者不進(jìn)一步純化用于下一步驟。
一般方法R的一般舉例說明 實(shí)施例#20.3-[7-[7-苯并[b]噻吩-2-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-5-基]-2-(二甲基氨基-亞甲基氨基)-吡咯并[3，2-d]嘧啶-5-基]-丙酸甲酯
向{7-[7-苯并[b]噻吩-2-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-5-基]-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-基-2-基}-N，N-二甲基-甲脒(制備例#5，240mg，0.42mmol)在DMF(3mL)中的混合物內(nèi)于約0℃在惰性氣氛下加入K2CO3(140mg，1.02mmol)。將反應(yīng)混合物于約0℃攪拌約40分鐘，然后加入3-溴-丙酸甲酯(0.12mL，1.02mmol)。將反應(yīng)混合物于約60℃攪拌約24小時(shí)，然后減壓除去溶劑，并將殘余材料不用進(jìn)一步純化用于下一步驟。LC/MS(表1，方法h)Rt 3.29min；ESI-MS[M+H]+＝654.4. 一般方法S由胺形成磺酰胺
在胺和堿(例如吡啶、Et3N或乙基-二異丙基-胺，優(yōu)選乙基-二異丙基-胺)(1-5當(dāng)量，優(yōu)選1.5當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如CH2Cl2、DME或DMF，優(yōu)選DMF)中的混合物內(nèi)于約0-50℃(優(yōu)選約20℃)在惰性氣氛下加入磺?；?1-5當(dāng)量，優(yōu)選1.05當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物攪拌約1-6小時(shí)(優(yōu)選2小時(shí))，然后減壓濃縮，并通過色譜法、結(jié)晶進(jìn)行純化，或者可以將其不用進(jìn)一步純化用于下一步驟。
一般方法S的舉例說明 實(shí)施例#21.3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-磺酸(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-酰胺
向7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基胺(實(shí)施例#F.8.1，32mg，0.12)和乙基-二異丙基胺(0.032mL，0.18mmol)在DMF(ImL)中的混合物內(nèi)于室溫在惰性氣氛下加入3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-磺酰基氯(33mg，0.13mmol)。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后減壓濃縮。將粗材料通過制備HPLC進(jìn)行純化(20％至80％乙腈/0.05M乙酸銨水溶液，緩沖至pH4.5，經(jīng)由30分鐘，以20mL/min；Hyperprep C18，300

，8μm，250×21.1mm柱)，獲得了3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-磺酸(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-酰胺，為白色固體(34mg，58％).LC/MS(表1，方法e)Rt 1.75min；ESI-MS[M+H]+＝475.3. 表S.I.用一般方法S由實(shí)施例#F.8.1合成的實(shí)施例




一般方法TMitsunobu偶聯(lián)
向醇(1-5當(dāng)量，優(yōu)選3當(dāng)量)和PPh3(1-5當(dāng)量，優(yōu)選2當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如THF、DME或CH2Cl2，優(yōu)選THF)的混合物內(nèi)于約-10至20℃(優(yōu)選約0℃)在惰性氣氛下加入吡咯并[3，2-d]嘧啶(優(yōu)選1當(dāng)量)，然后緩慢加入Mitsunobu偶聯(lián)劑(例如偶氮二甲酸二異丙酯、1，1′-偶氮二(N，N-二甲基甲酰胺)或偶氮二甲酸二乙酯，優(yōu)選偶氮二甲酸二異丙酯)(2-4當(dāng)量，優(yōu)選2當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物于0至60℃(優(yōu)選在20℃)攪拌約1-6小時(shí)(優(yōu)選2小時(shí))。將反應(yīng)混合物減壓濃縮，并將殘余粗產(chǎn)物通過色譜法、結(jié)晶進(jìn)行純化，或者可以不用進(jìn)一步純化用于下一步驟。
一般方法T的舉例說明 實(shí)施例#23.N′-{7-[7-苯并[b]噻吩-2-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-5-基]-5-異丙基-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基}-N，N-二甲基甲脒
向i-PrOH(0.023uL，0.3mmol)和PPh3(52.4mg，0.2mmol)在THF中的混合物內(nèi)于約0℃在惰性氣氛下加入{7-[7-苯并[b]噻吩-2-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-5-基]-5H-吡咯并[5，2-d]嘧啶-2-基}-N，N-二甲基甲酰胺甲脒(制備5a，50mg，0.1mmol)，然后緩慢加入偶氮二甲酸二異丙酯(0.04mL，0.2mmol)。將反應(yīng)混合物于約20℃攪拌約4小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮，并不進(jìn)一步純化用于下一步驟。LC/MS(表1′，方法e)Rt 2.80min；ESI-MS[M+H]+＝555.4. 一般方法U鹵化物與乙炔化合物的Sonogashira偶聯(lián)
向鹵化物(優(yōu)選1.0當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如，DMF或哌啶，優(yōu)選DMF)中的溶液內(nèi)加入末端乙炔(1.0-12.0當(dāng)量，優(yōu)選1.2當(dāng)量)、鈀催化劑(例如二氯(三苯基膦)鈀(II)、四(三苯基膦)鈀(O)，優(yōu)選二氯(三苯基膦)鈀(II))(0.02-0.05當(dāng)量，優(yōu)選0.05當(dāng)量)、堿(例如哌啶、三乙基胺，優(yōu)選三乙基胺)(0.03-0.06當(dāng)量，優(yōu)選0.05當(dāng)量)和銅鹽(例如溴化銅(I)、碘化銅(I)，優(yōu)選碘化銅(I)iodide)(0.03-0.15當(dāng)量，優(yōu)選0.10當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物在微波反應(yīng)器中于約80-130℃(優(yōu)選約120℃)加熱約2-40分鐘(優(yōu)選約5分鐘)。將混合物冷卻至室溫。過濾除去不溶殘余物，并將濾液減壓濃縮。將殘余粗產(chǎn)物通過色譜法或結(jié)晶進(jìn)行純化。
一般方法U的舉例說明 實(shí)施例#24.4-(7-苯基乙炔基-1H-吲唑-5-基氨基)-嘧啶-2-胺
向在微波管中的N′4′-(7-溴-1H-吲唑-5-基)-嘧啶-2，4-二胺(實(shí)施例#N.2.7，0.060g，0.197mmol)在DMF(1mL)中的溶液內(nèi)加入苯基乙炔(0.028ml，0.256mmol)、碘化銅(I)(0.004g，0.020mmol)和四(三苯基膦)鈀(0)(0.011g，0.009mmol)。將管密封，并將反應(yīng)混合物用微波在約120℃加熱約5分鐘。將混合物冷卻至室溫。過濾除去不溶殘余物，并用DMF(2mL)洗滌。將濾液通過制備RP-HPLC進(jìn)行純化(Rainin C18，8mm，300A，35cm；5-100％乙腈/0.1M乙酸銨，經(jīng)由20分鐘，100％乙腈保持10分鐘，21mL/min)獲得4-(7-苯基乙炔基-1H-吲唑-5-基氨基)-嘧啶-2-胺，為白色固體(0.015g，0.046mmol)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 1.70min；m/z(M+H)+327.2. 表U.I用一般方法U使用3-碘-5-(2-氨基嘧啶-4-基)氨基-1H-吲唑制備的實(shí)施例
3-碘-5-(2-氨基嘧啶-4-基)氨基-2H-吲唑是由制備例#28通過一般方法N使用2-氨基-4-氯嘧啶制備的.
表U.2.用一般方法U由實(shí)施例#N.2.7制備的實(shí)施例


一般方法V將酯水解為羧酸
向酯在有機(jī)溶劑(例如THF、MeOH或1，4-二噁烷，優(yōu)選1，4-二噁烷)中的溶液于約10-50℃(優(yōu)選約25℃)內(nèi)加入堿水溶液(例如Na2CO3、NaOH或KOH，優(yōu)選Na2CO3)(3-20當(dāng)量，優(yōu)選5當(dāng)量)。將混合物于10-80℃(優(yōu)選約25℃)攪拌約0.5-2小時(shí)(優(yōu)選約1小時(shí))。將混合物用酸(優(yōu)選1M HCl溶液)酸化至約pH3如果形成沉淀，則將其過濾并用水洗滌。如果沒有形成沉淀，則將溶劑減壓濃縮，并將殘余物在酸水溶液(例如HCl)和有機(jī)溶劑(例如EtOAc或CH2Cl2，優(yōu)選CH2Cl2)之間分配。將有機(jī)層分離，并將水層進(jìn)一步用有機(jī)溶劑萃取。將合并的有機(jī)萃取物用干燥劑干燥。減壓除去溶劑，獲得產(chǎn)物，可以將其進(jìn)一步通過結(jié)晶或色譜法進(jìn)行純化。
一般方法V的舉例說明 實(shí)施例#25.{[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-3-羰基]-氨基}-乙酸
將{[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-3-羰基]-氨基}乙酸乙酯(由實(shí)施例N.2.8，B制備的，0.014g，0.043mmol)和2M NaOH水溶液(1.0mL，2.0mmol)在1，4-二噁烷(2mL)中的溶液于室溫?cái)嚢杓s30分鐘。將反應(yīng)混合物用1M HCl水溶液酸化至pH3為止。將白色沉淀物過濾，用水(3mL)洗滌，并減壓干燥，獲得{[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-3-羰基]-氨基}-乙酸(0.001g，0.003mmol)；RP HPLC(表1，方法a)Rt＝0.42min；m/z(M+H)+328.2. 表V.I.用一般方法V制備的實(shí)施例

一般方法W由酰基氯和胺形成酰胺
向?；群桶?優(yōu)選1當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如吡啶、CH2Cl2或1，2-二氯乙烷，優(yōu)選CH2CI2)中的溶液內(nèi)加入堿(例如Et3N或吡啶，優(yōu)選吡啶)。將反應(yīng)混合物于約0-50℃(優(yōu)選約25℃)攪拌約0.5-20小時(shí)(優(yōu)選約1小時(shí))。將混合物用有機(jī)溶劑(例如EtOAc或CH2Cl2，優(yōu)選CH2Cl2)稀釋，并用水洗滌，然后減壓干燥。可以將產(chǎn)物通過結(jié)晶或色譜法進(jìn)一步純化。
一般方法W的舉例說明 實(shí)施例#26.3-二甲基氨基-N-(5-硝基-1H-吲唑-3-基)-苯甲酰胺
向在冰浴中冷卻至約0℃的5-硝基-1H-吲唑-3-基胺在吡啶(RyanScientific，0.150g，0.838mmol)中的溶液內(nèi)加入3-二甲基氨基-苯甲酰氯(0.154g，0.838mmol)。將反應(yīng)混合物在加熱至室溫的同時(shí)進(jìn)行攪拌。1小時(shí)后，把混合物倒在碎冰中，然后用EtOAc(10mL)萃取。將有機(jī)溶劑部分用1M HCl水溶液洗滌，然后濃縮，并減壓干燥。將殘余物通過制備RP-HPLC進(jìn)行純化(Rainin C 18，8mm，300

，35cm；5-100％乙腈/0.1M乙酸銨，經(jīng)由20min，100％乙腈保持10分鐘，21mL/min)，獲得3-二甲基氨基-N-(5-硝基-1H-吲唑-3-基)-苯甲酰胺，為白色固體(0.002g，0.006mmol)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 1.95min；m/z(M+H)+326.4. 表W.1由5-硝基-1H-吲唑-3-基胺使用一般方法W制備的實(shí)施例

表W.2.由實(shí)施例#F.2.16用一般方法W制備的實(shí)施例

表W.3由制備例#15用一般方法W制備草酸酯






一般方法X用肼形成吲唑
將鄰鹵代芐腈(1當(dāng)量)在30％肼水溶液(1-10當(dāng)量，優(yōu)選約3當(dāng)量)中的混合物在密封的管中加熱至約50-200℃(優(yōu)選約120℃)約30-120分鐘(優(yōu)選約45分鐘)。將混合物冷卻至室溫，并將沉淀物過濾，用水洗滌，并減壓干燥，獲得了所需吲唑。
一般方法X的舉例說明 制備例#49.7-硝基-1H-吲唑-3-基胺
將5-硝基-2-氟-芐腈(Aldrich，1.00g，6.02mmol)在30％肼水溶液(5.00mL，18.1mmol)中的混合物在密封管中加熱至約120℃約40分鐘。將混合物冷卻至室溫，并將沉淀物過濾，用水(10mL)洗滌，并減壓干燥，獲得7-硝基-1H-吲唑-3-基胺(0.470g，26.4mmol)；(DMSO-d6，400MHz)δ 12.16(br，1H)，8.90(m，1H)，8.05(dd 1H)，7.35(d，1H)，5.98(br，2H)；RP-HPLC(表1，方法j)Rt 8.07min. 表X.1.用一般方法X制備的實(shí)施例

一般方法Y芳基鹵與胺的Pd介導(dǎo)的偶聯(lián)，然后是酸脫保護(hù) 向胺(1-5當(dāng)量，優(yōu)選1.25當(dāng)量)、芳基鹵(例如芳基溴、芳基氯或芳基碘，優(yōu)選芳基碘)(0.7-3當(dāng)量，優(yōu)選1當(dāng)量)和有機(jī)堿(例如KF、Na2CO3或Cs2CO3，優(yōu)選CSiCO3)(2-16當(dāng)量，優(yōu)選2.5當(dāng)量)在脫氣了的有機(jī)溶劑(例如THF、DME、DMF、1，4-二噁烷、甲苯，優(yōu)選1，4-二噁烷)中的混合物內(nèi)加入鈀催化劑(例如三(亞芐基丙酮)二鈀(0)和XANTPHOS、四(三苯基膦)鈀(0)、二(乙酸根合)三苯基膦鈀(II)(～5％Pd)聚合物結(jié)合的FibreCatTM或[1，1′-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)與二氯甲烷的絡(luò)合物，優(yōu)選三(亞芐基丙酮)二鈀(0)和XANTPHOS)(0.01-0.10當(dāng)量，優(yōu)選0.05當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物用微波在惰性氣氛下在約40-150℃(優(yōu)選約95℃)加熱約0.5-24小時(shí)(優(yōu)選約2小時(shí))或在約100-200℃(優(yōu)選150℃)加熱5-60分鐘(優(yōu)選約15分鐘)。將反應(yīng)混合物冷卻，并于約70-150℃(優(yōu)選約100℃)在密封管中通過常規(guī)加熱或通過微波加熱將粗產(chǎn)物用任選含有陽離子分裂劑(優(yōu)選三異丙基甲硅烷)(0.7-2.5當(dāng)量，優(yōu)選1.2當(dāng)量)的酸(優(yōu)選三氟乙酸)(5-80M溶液，優(yōu)選20M溶液)處理約10-150分鐘(優(yōu)選約15分鐘)。減壓除去溶劑，獲得產(chǎn)物，可以將其通過結(jié)晶或色譜法進(jìn)一步純化。
一般方法Y的舉例說明 實(shí)施例#27.N-苯基-5-(吡啶-4-基氨基)-1H-吲唑-7-甲酰胺
將5-溴-2-(4-甲氧基-芐基)-2H-吲唑-7-甲酸、苯基酰胺(由制備例#12a使用一般方法V和B制備的，75.0mg，0.20mmol)、4-氨基吡啶(24.0mg，0.25mmol)、碳酸銫(195mg，0.60mmol)和XANTPHOS(11.6mg，0.02mmol)的混合物于室溫在惰性氣氛下懸浮在1，4-二噁烷(2.5mL)中。加入三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(9.2mg，0.01mmol)，并將氮?dú)馔ㄈ胨脩腋∫杭s5分鐘。將反應(yīng)混合物在約95℃加熱約2小時(shí)。將所得混合物冷卻至室溫，并通過硅藻土墊過濾，并減壓除去溶劑。把殘余物溶解在含有三異丙基甲硅烷(51.0uL，0.25mmol)的三氟乙酸(4.0mL)中，并將混合物在微波反應(yīng)器中于100℃加熱約15分鐘。減壓除去溶劑，并將殘余物通過制備RP-HPLC進(jìn)行純化(Rainin C18，8mm，300

，35cm；5-100％乙腈/0.1M乙酸銨，經(jīng)由20min，100％乙腈保持10分鐘，21mL/min)，獲得N-苯基-5-(吡啶-4-基氨基)-1H-吲唑-7-甲酰胺(30mg，46％)，為灰白色固體，RP HPLC(表1，方法e)Rt＝1.32；MS m/z(MH)+330. 表Y.I.用一般方法Y合成的實(shí)施例
表Y.2.用一般方法Y由制備例#F.8.1(使用制備制備例11d和12a所用的條件來4-甲氧基芐基化)制備的實(shí)施例

一般方法ZTHP-保護(hù)基的酸裂解
向THP保護(hù)的醇在有機(jī)溶劑(例如MeOH、EtOH、i-PrOH或二噁烷，優(yōu)選MeOH)中的混合物內(nèi)加入酸(例如HCl水溶液或PPTS，優(yōu)選PPTS)(0.1-1.0當(dāng)量，優(yōu)選0.5當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物于10-85℃(優(yōu)選約25℃)攪拌1-24小時(shí)(優(yōu)選約6小時(shí))。將反應(yīng)混合物用有機(jī)溶劑(例如EtOAc、Et2O或CH2CU，優(yōu)選EtOAc)稀釋，并用堿水溶液(例如Na2CO3或NaOH水溶液，優(yōu)選Na2CO3水溶液)洗滌。將溶劑蒸發(fā)，并可以將產(chǎn)物通過結(jié)晶或色譜法進(jìn)一步純化。
一般方法Z的舉例說明 實(shí)施例#28.(E)-4-[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-7-基]-丁-3-烯-1-醇
把PPTS(0.019g，0.075mmol)加到4-{7-[(E)-4-(四氫-吡喃-2-基氧基)-丁-1-烯基]-1H-吲唑-5-基氨基}-嘧啶-2-胺(由實(shí)施例#N.2.7與順-2-[3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)烯丙氧基]-四氫吡喃用一般方法F制備的，0.037g，0.100mmol)在MeOH(3.0mL)中的混合物內(nèi)。將反應(yīng)混合物于約25℃攪拌約5小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc(5mL)稀釋，并用Na2CO3水溶液(5mL)洗滌。將有機(jī)部分減壓蒸發(fā)，獲得(E)-4-[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-7-基]-丁-3-烯-1-醇(0.015g，0.051mmol)，為灰白色固體；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 0.62min；m/z(M+H)+297.0. 一般方法AA將Cbz-保護(hù)的氨基脫保護(hù)
將Cbz保護(hù)的胺底物和甲酸(5-20當(dāng)量，優(yōu)選10當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如甲醇或乙醇，優(yōu)選甲醇)中的溶液滴加到鈀黑(1-10當(dāng)量，優(yōu)選2當(dāng)量)在有機(jī)溶劑(例如甲醇或乙醇，優(yōu)選甲醇)中的懸浮液內(nèi)。將所得混合物于室溫?cái)嚢杓s2-20小時(shí)(優(yōu)選16小時(shí))。將該懸浮液通過硅藻土塞過濾，并減壓除去溶劑?？梢詫⑺么之a(chǎn)物通過用使用的溶劑(水、乙醇、甲苯或乙酸乙酯，優(yōu)選乙醇)研制或通過色譜法進(jìn)行純化。
一般方法AA的舉例說明 實(shí)施例# 29.N4-(3-氨基-丙基)-N4-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-嘧啶-2，4-二胺
把{3-[(2-氨基-嘧啶-4-基)-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-氨基]-丙基}-氨基甲酸芐酯(由實(shí)施例#F.8.1用一般方法O和N制備的，0.169g，0.308mmol)和甲酸(0.116mL，3.08mmol)在甲醇(2mL)中的溶液滴加到鈀黑(0.080g，0.752mmol)在甲醇(1.5mL)中的懸浮液內(nèi)內(nèi)。將所得混合物于室溫?cái)嚢杓s19小時(shí)。將所得懸浮液通過硅藻土過濾，并減壓除去溶劑。將所得粗產(chǎn)物通過反相色譜法純化(Thermo Hypersil-Keystone250×21.2mm 8μ

HS C18柱；5％乙腈/0.1M乙酸銨水溶液-100％乙腈，經(jīng)由20min，100％乙腈保持5分鐘，21mL/min)，獲得N4-(3-氨基-丙基)-N4-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-嘧啶-2，4-二胺(0.021g，17％產(chǎn)率)，為綠色固體。RP-HPLC(表1，方法e)Rt 1.62min.；m/z(M+H)+416.1. 具體實(shí)例和中間體制備 實(shí)施例#12-氨基-4-(1H-吲唑-5-基氨基)-噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸酰胺
將2-氨基-4-(7H-吲唑-5-基氨基)-噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(實(shí)施例#N.7.1，0.050g，0.15mmol)和氨(ca.7N在甲醇中的溶液，1.0mL)的混合物于60℃在密封容器中加熱約1.5小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，并再加入氨(ca.7N在甲醇中的溶液，5.0mL)。然后將反應(yīng)混合物于約75℃加熱約18小時(shí)，冷卻至室溫，再加入氨(ca.7N在甲醇中的溶液，2.0mL)，并于約75℃再繼續(xù)加熱約3天。將混合物減壓濃縮，并將殘余物通過制備純化(Thermo Hypersil-Keystone 250×21.2mm 8μ

HS C18柱；5％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液保持5min，5-100％CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由30min，在100％ CH3CN保持5分鐘，21mL/min)，獲得2-氨基-4-(1H-吲唑-5-基氨基)-噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸酰胺(0.015g，31％)，為米黃色固體；RP-HPLC(表1，方法a)Rt0.68min，m/z(ESI+)325.9(M+H)+. 實(shí)施例#21-芐基-3-(3-碘-2H-吲唑-5-基)-脲
把異氰酸芐酯(0.25mL，2.0mmol)加到3-碘-1H-吲唑-5-基胺(制備例#28，0.50g，1.9mmol)在THF(10mL)中的混合物內(nèi)。于室溫?cái)嚢杓s2.5小時(shí)后，將混合物過濾，并用Et2O洗滌，獲得1-芐基-3-(3-碘-1H-吲唑-5-基)-脲(0.41g，55％)，為乳白色固體；RP-HPLC(表1，方法e)Rt0.98min，m/z(ESI+)393.0(M+H)+. 實(shí)施例#32-氨基-4-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲酰胺
于室溫把過碳酸鈉(0.040g，0.25mmol)加到2-氨基-4-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(經(jīng)由一般方法N，通過將實(shí)施例#F.8.1與6-氨基-4-氯-3-氰基-吡咯并[2，3-d]嘧啶[通過將4-氧代衍生物氯化而制得的(J.Med.Chem.，2001，44(12)，1993-2003)使用POCl3反應(yīng)而制得的(Jet.，2004，60，943-959)，0.10g，0.24mmol)在1N KOH(2.4mL)中的混合物內(nèi)。約21小時(shí)以后，將反應(yīng)混合物用5NHCl酸化并過濾。將所得固體通過制備HPLC進(jìn)行純化(ThermoHypersil-Keystone 250×21.2mm 8μ

HS C18柱；5％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液保持5min，5-100％ CH3CN/5OmM乙酸銨水溶液，經(jīng)由30min，在100％ CH3CN保持5分鐘，21mL/min)，獲得含有雜質(zhì)的固體，將其用庚烷研制并過濾，獲得2-氨基-4-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲酰胺(6.9mg，7％)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 1.64min；m/z(ESI+)441.0(M+H)+. 實(shí)施例#43-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基氨基)-4-甲氧基-環(huán)丁-3-烯-1，2-二酮
將含有7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基胺(實(shí)施例#F.8.1，0.020g，0.075mmol)、3，4-二甲氧基-3-環(huán)丁烯-1，2-酮(0.01Ig，0.077mmol)、N，N-二異丙基乙基胺(14μL，0.080mmol)和MeOH(1.5mL)的溶液的小瓶于室溫?fù)u動約16小時(shí)然后過濾，獲得3-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基氨基)-4-甲氧基-環(huán)丁-3-烯-1，2-二酮(0.022g，78％)，為茶色固體；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 1.80min，m/z(ESI+)375.9(M+H)+. 實(shí)施例#55-[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-7-基]-1H-吲哚-3-甲醛二乙酸鹽
于約0℃把磷酰氯(43μL，0.46mmol)滴加到DMF(0.17mL)中。20分鐘后，滴加5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吲哚(Aldrich，0.10g，0.42mmol)在DMF(0.70mL)中的溶液。將反應(yīng)緩慢加熱至室溫。約7.5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物減壓濃縮，獲得含有5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吲哚-3-甲醛。把混合物溶解在DME(3.0mL)中，并轉(zhuǎn)移到微波管中。加入N4-(7-溴-1H-吲唑-5-基)-嘧啶-2，4-二胺(實(shí)施例#N.2.7，0.10g，0.34mmol)、Pd(PPh3)4(0.039g，0.034mmol)和Na2CO3(2.0M在水中的溶液，2.1mL，4.2mmol)，并管用CEM微波于約150℃加熱約10分鐘。將反應(yīng)用水稀釋，然后用(3×15mL)萃取。將存在于層界面之間的沉淀用有機(jī)層保持。將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，傾析，并濃縮。將粗產(chǎn)物用CHiCl2研制并過濾，獲得固體，將其溶解在DMSO中，并通過制備HPLC進(jìn)行純化(Thermo Hypersil-Keystone 250×21.2mm 8μ

HS C18柱； 5％CH3CN/50mM乙酸銨水溶液保持5min；5-50％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由15min；50-100％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由1min；在100％ CH3CN保持5分鐘，21mL/min)。將含雜質(zhì)產(chǎn)物的合并級分減壓濃縮，凍干，溶解在DMSO中，并通過制備HPLC進(jìn)一步進(jìn)行純化(Thermo Hypersil-Keystone 250×21.2mm 8μ

HS C18柱；5％CH3CN/50mM乙酸銨水溶液保持5min；5-50％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由20min；50-100％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由1min；在100％ CH3CN保持5分鐘，21mL/min)，獲得5-[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-7-基]-1H-吲哚-3-甲醛二乙酸鹽(12.3mg，6％)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 1.18min，m/z(ESI+)370.3(M+H)+. 實(shí)施例#6N4-(7-哌啶-3-基-1H-吲唑-5-基)嘧啶-2，4-二胺二乙酸鹽
向含有N4-7-吡啶-3-基-1H-吲唑-5-基)-嘧啶-2，4-二胺二乙酸鹽(實(shí)施例#F.5.5，0.040g，0.090mmol)的小瓶內(nèi)加入L-Selectride

(1.0M在THF中的溶液，0.45mL，0.45mmol)。于約130℃加熱約16小時(shí)。冷卻至室溫，并加入L-Setectride

(1.0M在THF中的溶液，1.0mL，1.0mmol)。于約130℃再加熱約24小時(shí)。冷卻至室溫，并加入L-Selectride

(1.0M在THF中的溶液，0.5mL，0.5mmol)。于約130℃再加熱約24小時(shí)。然后將反應(yīng)冷卻至室溫，用MeOH中止，并濃縮。把粗產(chǎn)物溶解在DMSO中，并通過制備HPLC純化(Thermo Hypersil-Keystone 250×21.2mm 8μ

HS C 18柱；5％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液保持5min；5-50％CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由20min；50-100％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由1min；在100％ CH3CN保持5分鐘，21mL/min)，獲得N4-(7-哌啶-3-基-1H-吲唑-5-基)嘧啶-2，4-二胺二乙酸鹽(9.1mg，23％)，為白色固體；RP-HPLC(表1，方法g)Rt 0.94min，m/z(ESI+)310.3(M+H)+。
實(shí)施例#7N4-{7-[5-(氨基甲基)-1-苯并噻吩-2-基]-1H-吲唑-5-基}嘧啶-2，4-二胺乙酸鹽
將含有N4-(7-5-[(烯丙基氨基)甲基]-1-苯并噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)嘧啶-2，4-二胺三乙酸鹽(實(shí)施例#O.3.8，0.022g，0.036mmol)、氯三(三苯基膦)-銠(I)(8.4mg，0.0090mmol)、CH3CN(0.84rnL)和H2O(0.16mL)的微波管用CEM微波于約120℃加熱30分鐘。將反應(yīng)用CH3CN(5mL)稀釋、過濾，并用CH3CN和EtOAc洗滌，獲得N4-7-[5-(氨基甲基)-1-苯并噻吩-2-基]-1H-吲唑-5-基}嘧啶-2，4-二胺乙酸鹽(12.8mg，76％)，為茶色固體；RP-HPLC(表1，方法g)Rt 1.05min，m/z(BSt)388.3(M+H)+。
制備例#14-氯-2-甲磺?；?嘧啶
將4-氯-2-甲基硫基-嘧啶(Aldrich，41.37g，0.252mol)在DCM(800mL)中的溶液于約0℃用少量3-氯過苯甲酸(75％重量，127.76g，0.555mol)處理。將反應(yīng)混合物加熱至室溫，并攪拌約2.5小時(shí)。過濾收集不溶殘余物，并用二氯甲烷洗滌(100mL)。將濾液和洗滌液用飽和碳酸氫鈉水溶液(3×150mL)和飽和氯化鈉水溶液(200mL)洗滌，用無水硫酸鎂干燥，并濃縮至干，獲得4-氯-2-甲磺?；?嘧啶(41.83g，86％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.08(d，1H)，8.10(d，1H)，3.44(s，3H)；LC/MS(表1，方法a)Rt 0.70min.；m/z(M+H)+193。
制備例#24-氯-嘧啶-2-基胺
將4-氯-2-甲磺?；?嘧啶(制備例#1，41.83g，0.217mol)在乙醇(30mL)中的懸浮液用飽和的氨氣在乙醇(300mL)中的溶液處理。將其于室溫?cái)嚢杓s2小時(shí)，并收集白色沉淀物，用甲醇(100mL)洗滌，并減壓干燥，獲得4-氯-嘧啶-2-基胺(15.99g，57％)1H NMR(DMSOd6，400MHz)δ8.18(d，1H)，7.13(br，2H)，6.65(d，1H)；LC/MS(表1，方法a)Rt 1.18min. 制備例#34-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基胺
將2-氨基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-醇(Sigma，150mg，1.0rnmol)在三氯氧化磷(1.5mL)中的混合物于約110℃加熱約30分鐘。謹(jǐn)慎地減壓除去三氯氧化磷，并通過緩慢加入冰水(10mL)將反應(yīng)混合物中止。將所得混合物用飽和碳酸鈉水溶液(約5mL)中和至pH7。把粗產(chǎn)物萃取到二氯甲烷(20mL)中，并用水(15mL)洗滌。將有機(jī)層分離，并將水相進(jìn)一步用二氯甲烷(3×30mL)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用無水硫酸鈉干燥并濃縮，獲得4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基胺(0.036g，0.21mmol)，為淺黃色固體；LC/MS(表1，方法a)Rt 1.17min；MS m/z(M+H)+169。
制備例#41，2-(二甲基氨基亞甲基氨基)-7-碘-吡咯并[3，2-d]嘧啶-5-甲酸叔丁酯
步驟1.制備例#4a.N′-(7-碘-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基)-N，N-二甲基-甲脒 把N-碘琥珀酰亞胺(3.2g，14.2mmol)分批加到冰冷的攪拌著的N，N-二甲基-N′-(5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基)-甲脒(Journal of MedicinalChemistry，2003，46(14)，3060-3071，2.68g，14.2mmol)在DMF(50mL)中的懸浮液內(nèi)。于室溫?cái)嚢柽^夜后，將反應(yīng)濃縮，溶解在DCM(4OmL)中，并用EtOAc(25OmL)沉淀出將產(chǎn)物。過濾后，將淺黃色粉末收集，用EtOAc(2×20mL)洗滌，并真空干燥過夜，獲得N′-(7-碘-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基)-N，N-二甲基-甲脒(3.8g，85％)，為黃色粉末；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 12.38(s，1H)，8.74(s，1H)，8.04(s，1H)，7.93(s，1H)，3.29(s，3H)，3.19(s，3H)；ESI-MS[M+H]+＝316.1. 步驟2. 制備例#41，2-(二甲基氨基亞甲基氨基)-7-碘-吡咯并[3，2-d]嘧啶-5-甲酸叔丁酯 把Na2CO3(1.27g，12mmol)加到攪拌著的N′-(7-碘-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基)-N，N-二甲基-甲脒(制備例#4a，1g，3.17mmol)在無水THF(20mL)中的懸浮液內(nèi)。于室溫分配加入二碳酸二叔丁酯(2.76g，12mmol)，并將混合物于室溫?cái)嚢杓s16小時(shí)，然后用DCM(150mL)稀釋，過濾并將濾液濃縮至干。用EtOAc/庚烷(50:50，100mL)從殘余物中沉淀出產(chǎn)物。將沉淀物過濾并干燥，獲得1，2-(二甲基氨基-亞甲基氨基)-7-碘-吡咯并[3，2-d]嘧啶-5-甲酸叔丁酯(0.95g，72％)，為淺黃色固體；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 9.10(s，1H)，8.74(s，1H)，7.96(s，1H)，3.23(s，3H)，3.18(s，3H)，1.68(s，9H)；ESI-MS[M+H]+＝416.2. 制備例#5N′-{7-[7-苯并[b]噻吩-2-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-5-基]-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基}-N，N-二甲基-甲脒
步驟1. 制備例#5a. 7-[7-苯并[b]噻吩-2-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-5-基]-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基胺 于室溫把2-(二甲基氨基-亞甲基氨基)-7-碘-吡咯并[3，2-J]嘧啶-5-甲酸叔丁酯(制備例#4，0.415g，1.0mmol)加到碳酸銫(977mg，3.0mmol)、Pd(PPh3)4(0.12g，0.1mmol)和7-(1H-茚-2-基)-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑(制備例#23然后E，0.7g，1.1mmol)在DME(10mL)和水(0.9mL)中的混合物內(nèi)。
將反應(yīng)于約65℃加熱約16小時(shí)，然后將溶劑減壓蒸發(fā)。加入EtOH(4mL)和30％NaOH水溶液(4mL)，并將混合物加熱至約85℃約1小時(shí)，然后減壓除去EtOH。將混合物用EtOAc(150mL)稀釋，并用水(50mL)和鹽水(50mL)，用硫酸鈉干燥，過濾，并減壓濃縮。粗產(chǎn)物通過快速柱色譜法純化(0-5％ MeOH在CH2Cl2中的溶液)，獲得7-[7-苯并[b]噻吩-2-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-5-基]-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基胺(0.3g，60％)，為淺褐色固體；LC/MS(表1，方法e)Rt 2.66min；ESI-MS[M+H]+＝511.3. 步驟2. 制備例#5N′-{7-[7-苯并[b]噻吩-2-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-5-基]-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基}-N，N-二甲基-甲脒 把7-[7-苯并[b]噻吩-2-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-5-基]-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基胺(制備例#5a，490mg，0.96mmol)于室溫加到N，N-二甲基甲酰胺縮二甲醇(1.27mL，9.6mmol)在CH2Cl2/CHCl3(3:2，5mL)中的溶液內(nèi)。將混合物加熱至約45℃約16小時(shí)。濃縮后，粗產(chǎn)物通過快速柱色譜法純化(5-10％ MeOH在CH2Cl2在中的溶液)，獲得7′-{7-[7-苯并[b]噻吩-2-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-5-基]-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基}-N，N-二甲基-甲脒(0.4g，73％)，為淺褐色固體；LC/MS(表1，方法h)Rt 2.97min；ESI-MS[M+H]+＝568.4. 制備例#67-溴-1H-吲唑-5-基胺
步驟1.制備例#6a. 2-溴-4-硝基-6-甲基-苯胺 于室溫用約40分鐘把溴(34.0mL，662mmol)從加料漏斗中滴加到2-甲基-4-硝基苯胺(100g，657mmol)在冰HOAc(1L)中的懸浮液內(nèi)。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢杓s另外30分鐘，然后用H2O(1L)稀釋。將所得固體過濾，用另外的水H2O(1L)洗滌，然后在真空箱中干燥過夜(在約50-60℃)，獲得首批材料(138.5g，91％)。收集濾液中形成的另外的沉淀物，用H2O(300mL)洗滌，然后在真空箱中干燥過夜(在約50-60℃)，獲得另一批2-溴-6-甲基-4-硝基苯胺(11.4g，7％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.14(d，J＝2.4Hz，1H)，7.92(d，J＝2.4Hz，1H)，6.49(brs，2H)，2.23(s，3H)；LC/MS(表1，方法e)Rt2.02min；m/z(ESI-)230.7。
步驟2.制備例#6b.7-溴-5-硝基-1H-吲唑 把在H2O(140mL)中的NaNO2(65.00g，942.0mmol)經(jīng)由加料漏斗加到配備機(jī)械攪拌器和溫度計(jì)、含有粗2-溴-6-甲基-4-硝基苯胺(145.0g，627.6mmol)和冰HOAc(2.5L)的混合物的5L 3-頸圓底燒瓶中。在加入過程中，將反應(yīng)混合物用冰浴冷卻以將內(nèi)部反應(yīng)溫度保持在25℃以下。加入完成約1小時(shí)后，在把在H2O(50mL)中的NaNO2(21.65g，313.8mmol)相對快速地(<5min)加到反應(yīng)混合物中，并且沒有明顯放熱。再過1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物減壓濃縮。將所得固體用MeOH/H2O(1:1，IL)研制，然后過濾，用另外的MeOH/H2O(1:1，500mL)洗滌，并在真空箱中于約50-60℃干燥約16小時(shí)，獲得7-溴-5-硝基-1H-吲唑(109.4g，72％，HPLC測定純度90％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ14.28(brs，1H)，8.87(d，J＝1.9Hz，1H)，8.57(s，1H)，8.40(d，J＝1.9Hz，1H)；LC/MS(表1，方法e)Rt 1.75min；m/z(ESI-)241.7. 步驟3. 制備例#67-溴-1H-吲唑-5-基胺 將鐵(Aldrich 99.99+％，13.85g，248.0mmol)和7-溴-5-硝基-1H-吲唑粗品(20.00g，82.63mmol)在冰醋酸(100mL)中的混合物在裝配有機(jī)械攪拌器和具有鼓泡器的氮?dú)夤芫€的二頸圓底燒瓶中于約80℃加熱。約2.5小時(shí)后，加入MeOH(100mL)，溫?zé)?，并且?jīng)由

趁熱過濾。將The

墊用另外的MeOH(4×100mL)洗滌，并將合并的有機(jī)層減壓濃縮。將殘余物用Na2CO3水溶液(2M)堿化至pH～7，并將水相和產(chǎn)物用約16小時(shí)萃取到EtOAc(1L)中。將層分離，并將水層進(jìn)一步用另外的EtOAc(3×500mL)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，用無水Na2SO4干燥，潷析，并濃縮。將所得固體預(yù)先吸收到二氧化硅上，并通過硅膠色譜法純化，用庚烷/EtOAc(1:1)作為洗脫劑，獲得7-溴-1H-吲唑-5-基胺(6.92g，40％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.92(br s，1H)，7.87(s，1H)，7.03(d，J＝1.6Hz，1H)，6.77(d，J＝1.2Hz，1H)4.96(br s，2H)；LC-MS(表1，方法e)Rt 0.83。
制備例#7.7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-甲酸
步驟1. 制備例#7a.7-苯并[6]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基甲酸甲酯 將7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-1H-吲唑(制備例#26，4.5g，13.7mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(100mL)中的溶液脫氣該用一氧化碳吹掃。加入三乙胺(4.1g，41mmol)、甲醇(13.1g，410mmol)和二氯[二(三苯基膦)]鈀(II)(1.45g，2.05mmol)，并將混合物加熱至約90℃約15小時(shí)。將混合物冷卻，并減壓除去溶劑。將殘余物用乙酸乙酯(75mL)和水(35mL)研制，然后通過快速硅膠柱色譜法純化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(95:5)作為洗脫劑，獲得7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-甲酸甲酯(3.37g，80％)。
步驟2. 制備例#7b. 7-苯并[6]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-甲酸 把一水合氫氧化鋰(2.25g，53.5mmol)加到7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-甲酸甲酯(3.37g，10.71mmol)在1，4-二噁烷(65mL)和水(9mL)的混合物中的懸浮液內(nèi)。將化物加熱至約65℃約18小時(shí)，然后冷卻至約40℃并過濾。將濾液用鹽酸(1N，54mL)酸化，并將所得沉淀物過濾收集，并減壓干燥，獲得7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-甲酸(3.16g，100％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 13.56(bs，1H)，8.51(d，1H)，8.47(s，1H)，8.14(d，1H)，8.04(d，1H)，7.94(d，1H)，7.45(d，2H)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt＝1.06，mJz(M-H)-292.8。
制備例#8.(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-(2-甲磺?；?嘧啶-4-基)-胺 制備例#9. 4-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基氨基)-嘧啶-2-醇
向4-氯-2-甲磺?；?嘧啶(制備例#1，2.54g，13.2mmol)在DMB(20mL)中的混合物內(nèi)加入7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基胺(實(shí)施例#F.8.1，1.95g，7.35mmol)和三乙基胺(1.43mL，10.3mmol)在DME(160mL)中的混合物。約16小時(shí)以后，將混合物過濾，并將濾液蒸發(fā)，并通過快速氧化鋁柱色譜法純化，用二氯甲烷/甲醇(99:1)作為洗脫劑，獲得產(chǎn)物(190mg，6％產(chǎn)率)。通過將氧化鋁用二氯甲烷/甲醇(8:2)洗滌并濃縮，獲得另外的產(chǎn)物，獲得(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-(2-甲磺?；?嘧啶-4-基)-胺(900mg，30％產(chǎn)率)；LC/MS(方法e)Rt 1.8min；m/z(ESI-)(M-H)+419.9。
在另外的后處理中，將粗反應(yīng)混合物過濾，并將固體通過RP-HPLC純化，獲得4-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基氨基)-嘧啶-2-醇(2mg，0.006mmol，0.1％產(chǎn)率)LC/MS R，(表1，方法e)Rt 1.3min；m/z(ESI-)(M-H)+358.3. 制備例#10.N′-(1-苯磺酰基-3-溴-1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-5-基)-N，N-二甲基-甲脒
步驟1. 制備例#10a.N′-[4-((E)-2-二甲基氨基-乙烯基)-5-硝基-吡啶-2-基]-N，N-二甲基甲脒
將4-甲基-5-硝基-吡啶-2-基胺(Aldrich，4.80g，31.4mmol)懸浮在二甲氧基甲基-二甲基胺(50mL)中，并將混合物在攪拌下于約120℃在密封管中加熱約4天。將反應(yīng)冷卻并濃縮，獲得N′-[4-((E)-2-二甲基氨基-乙烯基)-5-硝基-吡啶-2-基]-N，N-二甲基-甲脒(8.36g，101％)，為黑色固體，RP HPLC(表1，方法e)Rt＝1.62，m/z(MH)+264。將該粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化的情況下用于下一步驟。
步驟2. 制備例#10b. N，N-二甲基-N′-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-5-基)-甲脒
將N′-[4-((E)-2-二甲基氨基-乙烯基)-5-硝基-吡啶-2-基]-N，N-二甲基-甲脒(制備例#10a，8.36g，31.4mmol)和10％ Pd/C(800mg)乙醇(120mL)中的懸浮液在氫化容器中在10-55psi H2的氣氛下?lián)u動約24小時(shí)。將反應(yīng)通過

過濾并濃縮，獲得了N，N-二甲基-N′-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-5-基)-甲脒(6.19g，105％)，為黑色固體。RP HPLC(表1，方法e)Rt＝0.84，m/z(MH)+189。將該粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化的情況下用于下一步驟。
步驟3. 制備例#10. N′-(1-苯磺酰基-3-溴-1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-5-基)-N，N-二甲基-甲脒
在約0℃把1-溴-吡咯烷-2，5-二酮(5.34g，30mmol)加到攪拌著的N，N-二甲基-1H-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-5-基)-甲脒(制備例#10b，6.00g，31.9mmol)在DMF(200mL)中的溶液內(nèi)。將反應(yīng)加熱至室溫，然后攪拌約1小時(shí)。加入苯磺?；?3.83mL，30.0mmol)和Na2CO3(6.36g，60.0mmol)，并將混合物于約60℃加熱約1小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮，并將黑色固體用EtOAc(2×100mL)研制并過濾。將合并的EtOAc層通過6時(shí)硅膠柱，并用EtOAc洗脫。合并產(chǎn)物級分并濃縮，獲得N′-(1-苯磺酰基-3-溴-1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-5-基)-N，N-二甲基甲脒(4.29g，35％)，為茶色固體。RP HPLC(表1，方法e)Rt＝2.18，m/z(MH)+407/409. 制備例#11. 1-(4-甲氧基-芐基)-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吲唑-7-甲酸甲酯 制備例#12. 2-(4-甲氧基-芐基)-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-2H-吲唑-7-甲酸甲酯
步驟1. 制備例#11a. 2-氨基-5-溴-3-碘-苯甲酸甲酯
于室溫把1-碘-吡咯烷-2，5-二酮(10.35g，46.0mmol)一次性加到2-氨基-5-溴-苯甲酸甲酯(10.35g，45.0mmol)在三氟乙酸(90mL)中的溶液內(nèi)。將反應(yīng)于室溫?cái)嚢杓s1小時(shí)，然后減壓濃縮。把殘余物溶劑在CH2Cl2(150mL)中，用飽和Na2CO3溶液(2×150mL)和10％Na2S2O4水溶液步驟2． 制備例#11b. 2-氨基-5-溴-3-甲基苯甲酸甲酯
在氮?dú)庀掳?，4，6-三甲基-環(huán)三硼氧烷(cyclotriboroxane)(6.99ml，50.0mmol)加到攪拌著的2-氨基-5-溴-3-碘-苯甲酸甲酯(制備例#11a，15.5g，43.6mmol)、[1，1′-二(二苯基膦基)-二茂鐵)二氯化鈀(II)1:1與二氯甲烷的絡(luò)合物(1.67g，2.05mmol)和碳酸銫(42.9g，132mmol)在1，4-二噁烷(200mL)中的懸浮液內(nèi)。約4小時(shí)后于約90℃再加入2，4，6-三甲基-環(huán)三硼氧烷(cyclotriboroxane)(1.00ml，7.15mmol)，并將反應(yīng)在攪拌下繼續(xù)進(jìn)行約2小時(shí)以上。將反應(yīng)冷卻，通過硅膠短墊過濾并濃縮，獲得油狀物。將粗產(chǎn)物通過快速硅膠柱色譜法純化，用庚烷:EtOAc(92:8)作為洗脫劑，獲得2-氨基-5-溴-3-甲基-苯甲酸甲酯(5.9g，55％)，為淺黃色固體；RP HPLC(表1，方法e)Rt＝2.72，m/z.(MH)+244/246. 步驟3. 制備例#11c. 5-溴-1H-吲唑-7-甲酸甲酯
把3-甲基-1-亞硝基氧基-丁烷(3.39ml，25.2mmol)加到冷卻至約17℃的2-甲基氨基-5-溴-3-甲基-苯甲酸酯(5.38g，22.0mmol)在冰醋酸(300mL)中的溶液內(nèi)。將反應(yīng)于17℃攪拌約10分鐘，然后在攪拌下用約1小時(shí)轉(zhuǎn)移到保持在60℃的乙酸(60mL)和乙酸鉀(20.0g，0.20mol)的混合物內(nèi)。然后將混合物冷卻至室溫并減壓濃縮。把殘余物溶解在EtOAc(約350mL)中，并用水(3×150mL)和飽和NaCl溶液(100mL)洗滌，然后用無水MgSO4干燥。將殘余物用乙醚(50mL)研制，過濾，用另外的乙醚(2×10mL)洗滌，并干燥，獲得5-溴-1H-吲唑-7-甲酸甲酯(4.42g，79％)，為茶色固體，RP HPLC(表1，方法e)Rt＝2.43，m/z(MH)+255/257。
步驟4. 制備例#11d. 1-(4-甲氧基-芐基)-5-溴-1H-吲唑-7-甲酸甲酯，和， 制備例#12a. 2-(4-甲氧基-芐基)-5-溴-2H-吲唑-7-甲酸甲酯
將5-溴-1H-吲唑-7-甲酸甲酯(制備例#11c，2.60g，10.2mmol)、碳酸鉀(3.31g，24.0mmol)和4-甲氧基-芐基氯(1.62ml，12.0mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(40mL)中的混合物于約60℃加熱約4小時(shí)。將反應(yīng)過濾，減壓濃縮，并將殘余物在EtOAc(100mL)和水(50mL)之間分配。將層分離，并將有機(jī)層用水(2×50mL)洗滌，用無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，獲得1-(4-甲氧基-芐基)-5-溴-1H-吲唑-7-甲酸甲酯和2-(4-甲氧基-芐基)-5-2H-吲唑-7-甲酸甲酯的混合物，為油狀物(4.07g，106％).RP HPLC(表1，方法e)Rt＝2.17，m/z(MH)+244/246，和R，＝2.46，m/z(MH)+244/246。將該粗產(chǎn)物在不進(jìn)一步純化的情況下使用。
步驟5. 制備例#11. 1-(4-甲氧基-芐基)-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吲唑-7-甲酸甲酯 制備例#12. 2-(4-甲氧基-芐基)-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-2H-吲唑-7-甲酸甲酯
在氮?dú)庀掳裑1，1′-二(二苯基膦基)-二茂鐵)二氯化鈀(II)與二氯甲烷的1:1絡(luò)合物(408mg，0.50mmol)加到1-(4-甲氧基-芐基)-5-溴-1H-吲唑-7-甲酸甲酯和2-(4-甲氧基-芐基)-5-2H-吲唑-7-甲酸甲酯(制備例#11d和12a，3.70g，9.87mmol)、4，4，5，5，4′，4′，5′，5′-八甲基-[2，2′]聯(lián)[[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷](7.62g，30.0mmol)和乙酸鉀(5.88g，60.0mmol)在二甲基甲酰胺(50mL)的混合物內(nèi)。將混合物密封并于約80℃加熱約1小時(shí)，然后冷卻至室溫，過濾，并濃縮。將化物在硅膠柱上純化，用CH2Cl2作為洗脫劑，以洗脫出含有第一個(gè)異構(gòu)體的級分。將這些合并的級分用庚烷(約15mL)研制，過濾并干燥，獲得異構(gòu)體A(2.06g，94％純度，46％產(chǎn)率)，RP HPLC(表1，方法e)Rt＝2.50，m/z(MH)+423。用EtOAc洗脫出第二個(gè)異構(gòu)體，并再次將級分合并，濃縮，并干燥，獲得異構(gòu)體B(2.31g，55％)，RP HPLC(表1，方法e)Rt＝2.24，m/z(MH)+423。
制備例#13. 5-(5-氨基-1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-3-基)-2H-吲唑-7-甲酸一鹽酸鹽
在氮?dú)夥障掳裑1，1′-二(二苯基膦基)-二茂鐵)二氯化鈀(II)與二氯甲烷的1:1絡(luò)合物(408mg，0.50mmol)加到5-溴-1-(4-甲氧基-芐基)-1H-吲唑-7-甲酸甲酯和5-溴-2-(4-甲氧基-芐基)-2H-吲唑-7-甲酸甲酯(制備例#11和12，1:1，3.99g，9.45mmol)、碳酸銫(9.75g，30.0mmol)和N′-(1-苯磺酰基-3-溴-1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-5-基)-N，N-二甲基-甲脒(制備例#10，3.85g，9.45mmol)在1，2-二甲氧基乙烷(100mL)和水(25mL)中的混合物內(nèi)。將反應(yīng)混合物于約90℃加熱約4小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，并將層分離。將有機(jī)層通過硅膠墊過濾，用5％MeOH/EtOAc洗脫，并將濾液減壓濃縮。把殘余物溶解在含有三異丙基甲硅烷(2.05ml，10.0mmol)的三氟乙酸(50mL)中，并將混合物在密封管中于約100℃加熱約30分鐘，然后冷卻至室溫，并減壓濃縮。將殘余物用乙醚(100mL)研制，過濾收集所得固體。然后把固體溶解在甲醇(75mL)中，用氫氧化鈉水溶液(2N，50ml，100mmol)處理，并在回流下加熱約6小時(shí)。將反應(yīng)趁熱過濾，然后冷卻，并用乙酸酸化至約pH5.5。將產(chǎn)物過濾，用水(2×10mL)洗滌并干燥，獲得5-(5-氨基-1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-7-甲酸(2.60g，78％)，為乙酸鹽。將該乙酸鹽溶解在甲醇(300mL)中，并加入HCl水溶液(2N，25mL)。將混合物濃縮并干燥，獲得5-(5-氨基-1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-7-甲酸一鹽酸鹽(2.35g，75％)，為淺黃色固體。RP HPLC(表1，方法e)Rt＝1.31，m/z.(MH)+294. 制備例#14(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-硫代氨基甲酸S-甲基酯
向7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基胺(實(shí)施例#F.8.1，530mg，2.0mmol)和氯甲酸甲酯(0.25mL，2.8mmol)在乙醇(10mL)中的溶液內(nèi)加入三乙基胺(0.56mL，4.0mmol)。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢杓s16小時(shí)，并過濾收集所得固體，用水(3×50mL)洗滌并干燥，獲得(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-硫酸氨基甲酸S-甲基酯(448mg，66％)；LC/MS(表1，方法e)Rt 2.14min；m/z[M-H]-338。
制備例#152-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基氨基)-2-草酰氯
步驟1. 制備例#15a.N-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-草氨酸乙酯 向7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基胺(實(shí)施例#F.8.1，151mg，0.57mmol)在二氯甲烷(6mL)中的懸浮液內(nèi)加入三乙基胺(0.088mL，0.63mmol)。將反應(yīng)混合物于約-5℃攪拌約10分鐘，并滴加乙基草酰氯(0.064mL，0.57mmol)。將反應(yīng)混合物于約-5℃攪拌約90分鐘，然后用水(約10mL)中止反應(yīng)。將懸浮液用EtOAc(3×50mL)萃取，用鹽水溶液(100mL)洗滌，并用無水硫酸鎂干燥。真空除去溶劑，并將粗產(chǎn)物通過快速硅膠柱色譜法純化，用庚烷:EtOAc(30:70)作為洗脫劑，獲得N-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-草氨酸乙酯(169mg，81％)為淺黃色固體，RPHPLC(表1，方法e)Rt＝2.03，m/z(M-H)-364。
步驟2. 制備例#15b. N-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-草氨酸酯 將氫氧化鈉溶液(2％水溶液，2mL)加到N-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-草氨酸乙酯(制備例#15a，83mg，0.23mmol)在甲醇(3mL)中的懸浮液內(nèi)，并將反應(yīng)混合物于100℃回流約1小時(shí)。真空中除去溶劑，并把水加到殘余物中。將水層用鹽酸水溶液(1N)酸化，并將所得固體通過過濾收集，用水(3×5mL)洗滌并干燥，獲得N-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-草氨酸酯(76mg，99％)；LC/MS(表1，方法e)Rt0.89min；m/z[M-H]-336。
步驟3. 制備例#152-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基氨基)-2-草酰氯 將N-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-草氨酸酯(制備例#15b，30mg，0.089mmol)和亞硫酰氯(0.5mL，6.7mmol)的混合物于約80℃攪拌約1小時(shí)。真空中除去過量草酰氯，并將2-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基氨基)-2-草酰氯(31mg，98％)不加進(jìn)一步純化用于下一步驟。
制備例#16. 5-吡啶-3-基-3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑
步驟1. 制備例#16a. 5-溴-2-氟-N，N-二甲基苯甲酰胺
把亞硫酰氯(19.8mL，228mmol)加到5-溴-2-氟-苯甲酸(Aldrich，5.0g，22.8mmol)在甲苯(45mL)中的混合物內(nèi)。將所得混合物在回流下加熱約3小時(shí)，冷卻至室溫，并減壓除去溶劑。將殘余物在THF(40mL)中于約0℃攪拌，然后將反應(yīng)用氣態(tài)二甲基胺處理。將混合物攪拌約15min，濃縮，溶解在EtOAc(100mL)中，依次用2N HCl溶液(2×50mL)、2N NaOH溶液(2×50mL)和飽和NaCl溶液(50mL)洗滌。將有機(jī)層用無水MgSO4洗滌，過濾，濃縮干燥，獲得5-溴-2-氟-N，N-二甲基-苯甲酰胺(4.82g，86％)，為油狀物，RP HPLC(表1，方法e)Rt＝2.33，m/z(MH)+246/248。
步驟2. 制備例#16b.(5-溴-2-氟-苯基)-(1H-吡咯-2-基)-甲酮
把5-溴-2-氟-N，N-二甲基-苯甲酰胺(制備例#16a，4.75g，19.3mmol)和三氯氧化磷(5.46ml，40.5mmol)合并，并于約35℃加熱約28小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，并加入吡咯(1.38mL，20.0mmol)在CH2Cl2(40mL)中的混合物，并將反應(yīng)于室溫?cái)嚢杓s3小時(shí)。將反應(yīng)通過謹(jǐn)慎加入Na2CO3水溶液(10％w/v，～150mL)中止，并將所得混合物在回流下加熱約2小時(shí)。將產(chǎn)物用CH2Cl2(3×50mL)萃取，用無水MgSO4干燥，過濾并濃縮。將粗產(chǎn)物進(jìn)一步在硅膠上純化，用EtOAc:庚烷(1:1)作為洗脫劑，獲得5-溴-2-氟-N，N-二甲基-苯甲酰胺(2.57g，50％)，為油狀物，其在放置時(shí)固化。RP HPLC(表1，方法e)Rt＝2.57；m/z(M-H)-266/268。
步驟3. 制備例#16c. 5-溴-3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑
將含有(5-溴-2-氟-苯基)-(1H-吡咯-2-基)-甲酮(制備例#16b，2.40g，8.96mmol)和水合肼(35mL)的漿液密封，并用微波爐于約150℃加熱約1小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，并用水(150mL)稀釋。將產(chǎn)物用EtOAc(150mL)萃取，依次用2N HCl溶液(50mL)、飽和NaHCO溶液(50mL)和飽和NaCl溶液洗滌。將EtOAc層用無水MgSO4干燥，過濾并減壓濃縮，獲得5-溴-3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑(2.38g，99％)，為油狀物。RP HPLC(表1，方法e)Rt＝2.95；m/z(MH)+262/264 步驟4. 制備例#16.5-吡啶-3-基-3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑
在氮?dú)夥障掳裑1，1-二(二苯基膦基)-二茂鐵)二氯化鈀(II)與二氯甲烷的1:1絡(luò)合物(40.8mg，0.05mmol)加到5-溴-3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑(制備例#16c，105mg，0.40mmol)、吡啶-3-硼酸水溶液(1M，1.0mL)和Cs2CO3(391mg，1.20mmol)在DMF(2.0mL)的混合物內(nèi)，并將混合物再次用氮?dú)獯祾?，然后在回流下加熱約3天。將反應(yīng)冷卻至室溫，并將有機(jī)層通過硅膠過濾，并減壓濃縮。將殘余物通過制備HPLC進(jìn)一步純化(Thermo Hypersil-Keystone 250×21.2mm 8μ

HS C18柱；5％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液保持5min；5-50％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由20min；50-100％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由1min；在100％ CH3CN保持5分鐘，21mL/min)。合并產(chǎn)物級分，濃縮以除去有機(jī)溶劑，并凍干，獲得5-吡啶-3-基-3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑(44mg，42％)，為灰白色粉末。RP HPLC(表1，方法e)Rt＝2.23；m/z(MH)+261。
制備例#17. 5-吡啶-3-基-1H-吲唑
步驟1. 制備例#17a. 5-碘-1H-吲唑
把NaNO2(6.24g，90.0mmol)在水(36mL)中的溶液滴加到預(yù)冷卻至約-10℃的1H-吲唑-5-基胺(Aldrich，12.0g，90.1mmol)、水(36mL)、乙腈(12mL)和濃HCl(14.4mL)的混合物內(nèi)，同時(shí)在加入過程中將反應(yīng)溫度保持在-5℃以下。加入完成后將混合物于約-5℃攪拌約10分鐘，然后加入KI(15.0g，90.0mmol)在冷水(30mL)中的溶液，然后加入冷的乙腈(50mL)。移去冷卻浴，并在攪拌下將反應(yīng)加熱至室溫過夜。減壓除去有機(jī)溶劑，并將固體產(chǎn)物過濾，然后再溶解在乙腈(125mL)中，并在木炭(約5g)存在下攪拌約30min。將混合物過濾并濃縮，獲得5-碘-1H-吲唑(13.1g，60％)，為淺褐色固體。RP HPLC(表1，方法e)Rt＝2.38；m/z(MH)+245. 步驟2. 制備例#17b. 5-碘-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑
把1H-吲唑-5-基胺(制備例#17a，12.9g，52.9mmol)溶解在CHCl3(66mL)中，冷卻至約0℃，并用KOH(66.0g，1.18mol)在水(66mL)和四丁基溴化銨(175mg，0.54mmol)中的溶液處理。在劇烈攪拌下用約5分鐘于約0℃加入(2-氯甲氧基-乙基)-三甲基-甲硅烷(10.5ml，59.3mmol)。然后將反應(yīng)在約0℃攪拌約30分鐘，用水(100mL)洗滌，并用CHCl3(3×100mL)萃取。將CHCl3層用無水MgSO4干燥，過濾，并濃縮，獲得油狀物。將粗產(chǎn)物用硅膠進(jìn)一步純化，用EtOAc:庚烷(95:5)作為洗脫劑，獲得5-碘-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑(11.2g，56％)，為油狀物。RP HPLC(表1，方法e)Rt＝3.04；NMR(d6-DMSO，400MHz)δ-0.12(s，9H)，0.77-0.80(t，2H)，3.47-3.51(t，2H)，5.74(s，2H)，7.60-7.63(d，1H)，7.67-7.70(d，d1H)，8.09-8.10(d，1H)，8.21-8.22(m，1H). 步驟3. 制備例#17c. 5-吡啶-3-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-2H-吲唑
在氮?dú)夥障掳裑1，1′-二(二苯基膦基)-二茂鐵)二氯化鈀(II)與二氯甲烷的1:1絡(luò)合物(204mg，0.25mmol)加到5-碘-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑(制備例#17a，1.87g，5.00mmol)、吡啶-3-硼酸(737mg，6.00mmol)和Cs2CO3(4.89g，15.0mmol)在1，2-二甲氧基-乙烷(16mL)和水(3.2mL)中的混合物內(nèi)。將反應(yīng)于約100℃加熱過夜，冷卻，濃縮，并用CH2Cl2(約30mL)萃取。把萃取物吸收到二氧化硅上，并用硅膠柱純化，用首先用庚烷:EtOAc(85:15)洗脫，然后用庚烷:EtOAc(3:2)洗脫，獲得5-吡啶-3-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑(857mg，53％)，為油狀物。RP HPLC(表1，方法e)Rt＝3.04，m/z(MH)+326. 步驟4. 制備例#17. 5-吡啶-3-基-1H-吲唑
把5-吡啶-3-基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑(制備例#17c，100mg，0.31mmol)和乙二胺(133μL，2.00mmol)溶解在1M四丁基氟化銨在THF(4.0mL)中的混合物內(nèi)，并將混合物在回流下加熱約2小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，并減壓濃縮。把殘余物溶解在EtOAc(25mL)中，用水(2×10mL)洗滌，并減壓濃縮。把粗產(chǎn)物通過反相制備HPLC進(jìn)一步純化(Thermo Hypersil-Keystone 250×21.2mm 8μ

HS Cl8柱；5％ CH3CN/5O mM乙酸銨水溶液保持5min；5-50％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由20min；50-100％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由1min；在100％ CH3CN保持5分鐘，21mL/min)，獲得5-吡啶-3-基-1H-吲唑(61mg，64％)，為灰白色固體。RP HPLC(表1，方法e)Rt＝1.65，m/z(MH)+196。
制備例#18.吲哚-1，4-二甲酸1-叔丁基酯4-甲基酯
把二碳酸二叔丁酯(0.068g，0.31mmol)加到1H-吲哚-4-甲酸甲酯(Aldrich，0.050g，28mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.7mg，0.006mmol)在二氯甲烷(1.0mL，0.016mol)中的溶液內(nèi)。45分鐘后，將混合物中止反應(yīng)，并用1N HCl酸化至約pH4。加入二氯甲烷，并將層分離。將水層進(jìn)一步用二氯甲烷萃取，并將合并的有機(jī)物用無水MgSO4干燥并濃縮，獲得吲哚-1，4-二甲酸1-叔丁基酯4-甲基酯(0.072g，92％產(chǎn)率)；(DMSO-d6，400MHz)δ 8.37(d，1H)，7.91(d，1H)，7.86(d，1H)，7.46(t，1H)，7.21(d，1H)，3.92(s，3H)，1.65(s，10H)；RP-HPLC(表I，方法e)Rt＝2.7，m/z.(M+H)+276.3. 制備例#19.吲哚-1，7-二甲酸1-叔丁基酯7-甲酯
把二碳酸二叔丁酯(16g，0.071mol)加到1H-吲哚-7-甲酸甲酯(Acroschemicals，5.0g，0.028mol)和4-二甲基氨基吡啶(0.3g，0.003mol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液內(nèi)。將混合物于約45℃加熱約16小時(shí)。將混合物中止，并用1N HCl酸化至約pH4。加入二氯甲烷，并將層分離。將水層進(jìn)一步用二氯甲烷萃取，并將合并的有機(jī)物用無水MgSO4干燥并濃縮，獲得吲哚-1，7-甲酸1-叔丁基酯7-甲基酯(9.5g，97％產(chǎn)率)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt＝2.5，m/z(M+H)+276.2. 制備例#20.吲哚-2-硼酸-1，7-二甲酸1-叔丁基酯7-甲基酯
向吲哚-1，7-二甲酸1-叔丁基酯7-甲基酯(制備例#19，9.5g，0.028mol)在四氫呋喃(39mL，0.48mol)中的混合物內(nèi)加入硼酸三異丙酯(9.5mL，0.041mol)。將非均勻混合物冷卻至約0-5℃，并緩慢加入在四氫呋喃(2.0M，25mL)中的二異丙基氨基化鋰。約2小時(shí)后，將混合物用1N HCl中止，并將層分離。將水層用DCM洗滌，并將合并的有機(jī)物用無水MgSO4干燥并濃縮。在乙醚/庚烷中研制，獲得3批吲哚-2-硼酸-1，7-二甲酸1-叔丁基酯7-甲基酯(分別4.10g，1.6g和3.0g)，為黃色固體；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 1.7min；m/z(M+H)+378.4。
制備例#21.吲哚-2-硼酸-1，4-二甲酸1-叔丁基酯4-甲基酯
向吲哚-1，4-二甲酸1-叔丁基酯4-甲基酯(制備例#18，0.207g，0.752mmol)在THF(1.1mL)中的溶液內(nèi)加入硼酸三異丙酯(260μL，0.0011mol)。將溶液冷卻至約0-5℃，并用約1小時(shí)緩慢加入在四氫呋喃(2.0M，600μL)中的二異丙基氨基化鋰。約30分鐘后，將混合物用1N HCl中止，并將層分離。將水層用DCM洗滌，并將合并的有機(jī)物用無水MgSO4干燥并濃縮。將混合物在庚烷(50mL)和乙醚(5mL)研制并過濾，獲得吲哚-2-硼酸-1，4-二甲酸1-叔丁基酯4-甲基酯(175mg，51％產(chǎn)率)RP-HPLC(表1，方法e)Rt1.84min；m/z 377.9(M-H)-。
制備例#22.4-二異丙基氨基甲?；?吲哚-2-硼酸-1-甲酸1-叔丁酯
把硼酸三異丙酯(870μL，0.0038mol)加到吲哚-1，4-二甲酸1-叔丁基酯4-甲基酯(制備例#18，0.70g，0.0025mol)在THF(36mL)中的溶液內(nèi)。將溶液冷卻至約0-5℃，并用約1小時(shí)緩慢加入在四氫呋喃(2M，2.8mL)中的二異丙基氨基化鋰。另外1.5小時(shí)后，將混合物用1N HCl中止，并將層分離。將水層用DCM萃取，并將合并的有機(jī)物干燥并濃縮，在庚烷(50mL)和乙醚(5mL)研制并過濾。該材料進(jìn)一步通過快速柱色譜法純化，用DCM/MeOH(98:2)作為洗脫劑，獲得4-二異丙基氨基甲?；?吲哚-2-硼酸-1-甲酸1-叔丁酯(20mg，2％產(chǎn)率)RP-HPLC(表1，方法e)Rt，2.0min；m/z 389.4(M+H)+。
實(shí)施例#8.4-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基氨基)-嘧啶-2-醇
向4-氯-2-甲磺?；?嘧啶(制備例#1，1.35g，7.0mmol)在DME(10mL)中的混合物內(nèi)加入7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基胺(實(shí)施例#F.8.1，1.03g，3.9mmol)和三乙胺(0.76mL，5.4mmol)在DME(70mL)中的混合物。于室溫約16小時(shí)后，將混合物過濾，并將固體通過反相制備HPLC進(jìn)行純化(Thermo Hypersil-Keystone 250×21.2mm 8μ

HS C18柱；5％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液保持5min；5-50％CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由20min；50-100％ CH3CN/5OmM乙酸銨水溶液，經(jīng)由1min；在100％ CH3CN保持5分鐘，21mL/min)，獲得4-(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基氨基)-嘧啶-2-醇(2mg，0.006mmol，0.1％產(chǎn)率)LC/MS Rt(方法e)1.3min；m/z(M-H)-358.3。
實(shí)施例#9.{2-[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-7-基]-1H-吲哚-7-基}-甲醇
于約0℃分3批把2-[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-7-基]-1H-吲哚-7-甲酸甲酯(制備例#F.8.1，0.100g，0.000250mol)加到氫化鋁鋰在四氫呋喃(1.0M，1.0mL)中的溶液。約10分鐘后再加入THF(1.0mL)，并且約40分鐘后，將混合物加熱至室溫。另外約60分鐘后，加入氫化鋁鋰在THF(1.0M，1mL)中的溶液。約16小時(shí)后，將混合物用水中止，并用飽和氯化銨水溶液中和。將混合物用EtOAc稀釋，并將層分離。將水層進(jìn)一步EtOAc萃取，并將合并的有機(jī)物用無水MgSO4干燥并濃縮，獲得{2-[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-7-基]-1H-吲哚-7-基}-甲醇(28mg，30％產(chǎn)率)；LC/MS Rt(方法e)0.8min；m/z(M-H)-370.5。
實(shí)施例#10. 2-[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-7-基]-1H-吲哚-7-甲酸酰胺
將2-[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-7-基]-1H-吲哚-7-甲酸(實(shí)施例#F.5.11，0.100g，0.000259mol)和N，N-羰基二咪唑(0.0842g，0.000519mol)在N，N-二甲基甲酰胺(2.5mL，0.032mol)中的溶液于約55℃加熱約45分鐘。將混合物用冰浴冷卻，并于0℃用氨氣處理約15分鐘。將混合物密封，并加熱至室溫。約1小時(shí)后，將混合物打開，并將1.2mL部分的混合物用反相制備HPLC進(jìn)行純化(Thermo Hypersil-Keystone250×21.2mm 8μ

HS C18柱；5％ CH3CN/50mM乙酸銨水溶液保持5min；5-50％ CH3CN/5OmM乙酸銨水溶液，經(jīng)由20min；50-100％CH3CN/50mM乙酸銨水溶液，經(jīng)由1min；在100％ CH3CN保持5分鐘，21rnLΛnin)，然后過濾以除去剩余的酸。然后將濾液凍干，獲得2-[5-(2-氨基-嘧啶-4-基氨基)-1H-吲唑-7-基]-1H-吲哚-7-甲酸酰胺(2mg，2％產(chǎn)率)LC/MS Rt(方法e)0.7min；m/z(M+H)+385.4。
制備例#22a. 5-溴-7-碘-1H-吲唑
將配備攪拌棒的1L圓底燒瓶裝上4-溴-2-甲基苯胺(Aldrich，24.3g，0.130mmol)和二氯甲烷(250mL)。用約10分鐘分4批加入二(吡啶)碘鎓(I)四氟硼酸鹽(50.0g，0.13mmol)。將混合物于室溫?cái)嚢杓s30min，然后加入另外兩部分二(吡啶)碘鎓(I)四氟硼酸鹽(各自2.5g)，并將反應(yīng)繼續(xù)進(jìn)行約1h。加入水(150mL)，并在攪拌約10分鐘后，把混合物轉(zhuǎn)移至分液漏斗，并將層分離。然后將如今日元用飽和Na2S2O3水溶液(100mL)洗滌，然后用水(50mL)洗滌。將有機(jī)溶液用無水硫酸鎂干燥，然后過濾并蒸發(fā)，獲得油狀物(51.4g)，將其施加到硅膠柱(400g)上，并用庚烷/二氯甲烷/乙酸乙酯(12:7:1)洗脫，獲得4-溴-2-碘-6-甲基-苯基胺(31.08g，76.6％)，為黑色固體。
把4-溴-2-碘-6-甲基-苯基胺(31.08g，99.6mmol)溶解在配備攪拌棒的1L圓底燒瓶中的冰醋酸(400mL)中內(nèi)。然后將燒瓶一次性裝載溶解在水(18.7mL)中的亞硝酸鈉(7.56g，109.6mmol)。將混合物攪拌約15分鐘，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于約35℃的浴溫度通過蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物與水(200mL)一起攪拌15分鐘，并過濾收集所得殘余物并干燥，獲得5-溴-7-碘-1H-吲唑(30.6g，95％)，為茶褐色固體；(DMSO-d6，400MHz)δ13.6(bs，1H)，8.24(s，1H)，8.04(d，J＝1.54Hz，1H)，和7.88(d，J＝1.54Hz，1H)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt＝3.63min；m/z(M-H)-322.8。
制備例#22bN，N-二甲基-1-[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吲哚-3-基]甲胺
向Eschenmoser′s鹽(0.91g，4.9mmol)在CH3CN(3mL)和HOAc(1.5mL)中的懸浮液內(nèi)于室溫用約10分鐘滴加5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吲哚(1.0g，4.1mmol)在CH3CN(3mL)中的溶液。約2小時(shí)后，將反應(yīng)用飽和NaHCO3水溶液中止，并用CH2Cl2(3×15mL)萃取。將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，潷析，并濃縮，獲得粗制N，N-二甲基-1-[5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-吲哚-3-基]甲胺(0.60g，50％)；RP-HPLC(表1，方法g)Rt 1.39min；1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ11.26(br s，1H)，8.07(s，1H)，7.44(d，J＝8.2Hz，1H)，7.37(m，2H)，3.92(s，2H)，2.40(s，6H)，1.31(s，12H)。
制備例#22c噻吩并[2，3-b]吡啶-2-基硼酸
向噻吩并[2，3-b]吡啶(0.50g，3.7mmol)在THF(25mL)中的溶液內(nèi)于約-78℃用約10分鐘滴加n-BuLi(1.6M在己烷中的溶液，2.5mL，4.1mmol)。約45min后，加入硼酸三異丙酯(0.93mL，4.1mol)。于約-78℃攪拌約1小時(shí)，然后于約0℃攪拌約30min。加入10％ HCl水溶液(10mL)，并移去冰浴。約30min后，加入EtOAc(30mL)。將反應(yīng)混合物過濾以除去沉淀物，將其用另外的水和EtOAc洗滌。將合并的層分離，并將水層用另外的EtOAc(2×30mL)萃取。將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，用無水Na2SO4干燥，潷析，并濃縮，獲得固體，將其用EtOAc和庚烷研制，然后過濾，獲得噻吩并[2，3-b]吡啶-2-基硼酸(0.043g，6％)；RP-HPLC(表1，方法g)Rt1.67min，m/z(ESI+)180.1(M+H)+。
制備例#22d2-氨基-4-氯-噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸甲酯
步驟1. 制備例#22e.(2-氨基-6-氯-5-甲酰基-嘧啶-4-基硫基)-乙酸甲酯 向2-氨基-4，6-二氯-5-嘧啶甲醛(Apin，2.00g，10.4mmol)在二噁烷(20mL)中的混合物內(nèi)加入三乙基胺(1.60mL，11.5mmol)和硫代乙醇酸甲酯(1.90mL，21.2mmol)。約3小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用水(30mL)稀釋，然后過濾，用另外的水洗滌，獲得(2-氨基-6-氯-5-甲?；?嘧啶-4-基硫基)-乙酸甲酯(1.801g，66％)，為黃色固體；RP-HPLC(表1，方法a)Rt1.85min，m/z(ES1+)262.0(M+H)+。
步驟2.制備例#22d2-氨基-4-氯-噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸甲酯 向(2-氨基-6-氯-5-甲?；?嘧啶-4-基硫基)-乙酸甲酯(制備例#22e，0.20g，0.76mmol)在二噁烷(7.6mL)中的混合物內(nèi)加入K2CO3(0.21g，1.5mmol)。將所得混合物于約100℃加熱過夜，冷卻至室溫，并加入水(1mL)以溶解堿。將剩余的固體過濾，并用MeOH洗滌，獲得2-氨基-4-氯-噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(0.16g，84％)，為淺黃色固體；RP-HPLC(表1，方法a)Rt 2.38min；1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ7.82(s，1H)，7.72(br s，2H)，3.86(s，3H)。
制備例#50. 7-苯并[b]噻吩-2-基-5-硝基-1H-吲唑-3-醇
將3-苯并[b]噻吩-2-基-2-氯-5-硝基-苯甲酸(0.11g，0.33mmol)、肼(0.35mL)和異丙醇(3mL)在約90℃加熱約1小時(shí)。將混合物冷卻，然后將溶劑減壓蒸發(fā)。將殘余物用6N鹽酸水溶液(5mL)處理，并將混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。將有機(jī)萃取物合并，然后濃縮，獲得7-苯并[b]噻吩-2-基-5-硝基-1H-吲唑-3-醇。RP-HPLC(表1，方法e)Rt1.41min；m/z(M-H)-310.24。
實(shí)施例#51. 2-(7-溴-1H-吲唑-5-基氨基)-2-甲基-丙-1-醇
向2，2-二甲基-環(huán)氧乙烷(0.100mL，1.13mmol)在THF(5.0mL)中的溶液內(nèi)加入7-溴-1H-吲唑-5-基胺(制備例#6，0.100g，0.472mmol)和氯化釤(0.012g，0.047mmol)。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢杓s20小時(shí)，然后真空中除去THF。將粗反應(yīng)混合物通過反相色譜法純化(RP-HPLC(Rainin C 18，8mm，300

，35cm；5-100％乙腈/0.1M乙酸銨，經(jīng)由20min，100％乙腈保持10分鐘，21mL/min)，獲得2-(7-溴-1H-吲唑-5-基氨基)-2-甲基-丙-1-醇(0.033g，0.116mmol)。RP-HPLC(表1，方法e)Rt1.18min；m/z(M+H)+286.1。
制備例#52.(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-苯基-甲酮
將7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-1H-吲唑(制備例#26，0.25g，0.76mol)、三丁基苯基錫(0.56g，1.52mmol)、三乙基胺(0.23g，2.28mmol)和反式-二氯[二(三苯基膦)鈀(II)(0.08g，0.114mmol)在N.N-二甲基甲酰胺(4mL)中的混合物用一氧化碳吹掃，然后在一氧化碳?xì)夥障略谟驮≈杏诩s90℃攪拌約2小時(shí)。真空中除去溶劑，并將殘余物施加到硅膠柱上，然后用二氯甲烷/甲醇(95:5)洗脫。將含有產(chǎn)物的級分合并，并用庚烷研制，然后過濾收集固體，并通過制備反相HPLC純化，獲得(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-苯基-甲酮(23mg，8.5％)；(DMSO-d6，400MHz)δ 13.85(bs，1H)，8.49(bs，1H)，8.27(s，1H)，8.18(bs，1H)，8.06(m，2H)，7.93(m，1H)，7.81(m，2H)，7.71(m，1H)，7.61(m，2H)，7.45(m，2H)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 2.50min；m/z(M+H)+353.0。
制備例#53.(7-苯并[6]噻吩-2-基-1H-吲唑-3-基)-吡啶-2-基-甲酮
將7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-2-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-2H-吲唑(制備例#23，0.15g，0.326mmol)在四氫呋喃(2mL)中的混合物冷卻至約-65℃，然后滴加正丁基鋰(1.6M，0.36mL，0.36mmol)。約30分鐘后，加入2-吡啶甲醛(0.042g，0.39mmol)。將混合物用甲醇(1mL)中止，然后加熱至室溫。真空中除去溶劑，并將殘余物通過制備反應(yīng)HPLC色譜法純化(RP-HPLC(Rainin C18，8mm，300

，35cm；5-100％乙腈/0.1M乙酸銨，經(jīng)由20min，100％乙腈保持10分鐘，21mL/min)，獲得中間體[7-苯并[b]噻吩-2-基-2-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-2H-吲唑-3-基]-吡啶-2-基-甲醇(50mg)，將其懸浮在1，4-二噁烷(2mL)和二氧化鎂(90mg，31％)中的混合物內(nèi)。將混合物加熱至約90℃15分鐘，然后過濾并蒸發(fā)。將殘余物通過反相HPLC純化(RP-HPLC(Rainin C1 8，8mm，300

，35cm；5-100％乙腈/0.1M乙酸銨，經(jīng)由20min，100％乙腈保持10分鐘，21mL/min)，獲得(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-3-基)-吡啶-2-基-甲酮(22mg，44％)；(DMSO-d6，400MHz)δ8.8(bs，1H)，8.31(d，1H)，8.09(m，4H)，7.93(d，1H)，7.78(bs，1H)，6.96(bs，1H)，7.51(t，1H)，7.43(m，2H)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 2.60min；m/z(M-H)-353.8。
制備例#54.(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-吡啶-2-基-甲酮
從7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑(制備例#23，0.2g，0.435mmol)開始，并用制備(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-3-基)-吡啶-2-基-甲酮(上面制備例#52)的方法，獲得(7-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-吡啶-2-基-甲酮(17mg，11％)；(DMSO-d6，400MHz)δ 8.79(d，1H)，8.65(s，1H)，8.54(s，1H)，8.27(s，1H)，8.24(s，1H)，8.11(m，1H)，8.05(m，2H)，7.95(m，1H)，7.72(m，1H)，7.45(m，2H)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 2.28min；m/z(M-H)-354.1。

制備例#55. 7-(7-苯并[6]噻吩-2-基-3-甲基-1H-吲唑-5-基)-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基胺
將7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-2-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-2H-吲唑(制備例#24，1.0g，2.18mmol)在四氫呋喃(15mL)中的混合物冷卻至約-65℃，然后滴加正丁基鋰(1.6M，1.5mL，2.4mmol)。約5分鐘后，加入甲基碘(0.37g，2.6mmol)，然后將溶液加熱至約-20℃。加入飽和氯化銨(1mL)，然后將混合物用乙酸乙酯(25mL)和水(10mL)稀釋。將層分離，然后將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)，獲得粗7-苯并[b]噻吩-2-基-5-溴-3-甲基-2-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-2H-吲唑，將其用一般方法E轉(zhuǎn)化為7-苯并[b]噻吩-2-基-3-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-2-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-2H-吲唑(0.29g，25％經(jīng)由2步)。用一般方法F將硼酸酯(200mg，0.385mmol)與2-(二甲基氨基-亞甲基氨基)-7-碘-吡咯并[3，2-d]嘧啶-5-甲酸叔丁酯(0.135g，0.32mmol)偶聯(lián)，并將所得產(chǎn)物用用一般方法G脫保護(hù)，獲得7-(7-苯并[b]噻吩-2-基-3-甲基-1H-吲唑-5-基)-5H-吡咯并[3，2-d]嘧啶-2-基胺(24mg，19％)；(DMSO-d6，400MHz)δ 12.48(bs，1H)，11.44(s，1H)，8.50(m，3H)，8.18(d，1H)，8.07(bs，1H)，8.02(d，1H)，7.90(d，1H)，7.43(m，2H)，5.94(bs，2H)，2.61(s，3H)；RP-HPLC(表1，方法e)Rt 1.76min；m/z(M-H)-394.9。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物
其中
R1選自H、被OCH3取代的芐基、任選取代的(C1-C3)烷基、被NH2取代的嘧啶和氨基(C1-C3)烷基；
R3選自H、鹵素、NH2、OH、COOH、-C(O)-NH-CH2-C(O)-OCH3、-NH-CH2-苯基、-C(O)-吡啶基、-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基，其中苯基任選被N(CH3)2或OCH3取代；或者
R3選自任選取代的下列基團(tuán)(C1-C6)烷基、苯并[b]噻吩基、2，3-二氫苯并呋喃基、吲哚基、異喹啉基、嗎啉基、萘基、苯基、哌嗪基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹啉基和噻吩基；
其中所述取代基選自一個(gè)或多個(gè)CH3、NH2、Cl、F、二甲基氨基、OH、CH2OH、-C(O)NH2、COOH、CF3、異丙基、OCF3、OCH3、-O-CH2-苯基、CN、OCH2CH3、-NH-C(O)-環(huán)丁基、-NH-C(O)-苯基、NH-C(O)-CH3、NHC(O)CH3、N(CH3)2、S(O)2CH3和C(O)NH-苯基；或者
R3是-C(O)-NY100-(C(Y100)2)x-Ra，其中
x是0、1、2或3；
Y100獨(dú)立地為H或(C1-C3)烷基；且
Ra是-C(O)-CH3或者選自任選取代的基團(tuán)(C1-C3)烷基、氨基、氨基烷基、苯并咪唑基、苯并[b]噻吩基、苯并三唑基、聯(lián)苯基、1，3-二氫苯并咪唑基、1，3-二氫苯并咪唑基-2-酮、咪唑基、吲哚基、萘基、苯基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、四氫吡喃基和噻唑基；或者
R3是A-B，其中A連接在吲唑上，且
A選自-C≡C、-C≡C-苯基、吲唑基、苯基、吡啶基和噻吩基；
B選自芐氧基、嗎啉基、苯基、噻吩基、叔丁基、-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基；
R4是H或NH2；
R5選自H、NH2、NO2、鹵素；或者
R5選自任選取代的下列基團(tuán)苯并咪唑基、3，4-二氫苯并[1，4]噻嗪基、芐氧基苯基、呋喃并[3，2-c]吡啶、吲唑基、吲哚基、異喹啉基、苯基、哌啶基、吡唑并[3，4-d]嘧啶、吡嗪基、吡唑基、吡啶基、吡咯并[2，3-b]吡啶基、吡咯并[2，3-c]吡啶基、吡咯并[2，3-d]吡啶基、嘧啶基、吡咯并[3，2-d]吡啶、吡咯并[2，3-d]嘧啶基、吡啶基、吡咯基、喹啉基、喹唑啉基、噻吩基、噻吩并[2，3-c]吡啶基、噻吩并[2，3-d]嘧啶、噻吩并[3，2-c]吡啶、7-氮雜二氫吲哚基和7-氮雜吲哚基；或者
R5是-C(O)-Rb；其中
Rb選自O(shè)H、(C1-C3)烷氧基、苯基、任選取代的哌啶基、任選取代的吡啶基和任選取代的吡咯烷基；或者
Rb是D-E，其中D連接C(O)上，并且
D選自哌啶基和吡咯烷基；
E選自吡啶基和嘧啶基胺甲基；
R5是-C(O)-NH-(CH2)a-Rc；其中
a是0、1、2或3；
Rc是-CONH2或者
Rc選自任選取代的下列基團(tuán)苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并[b]噻吩基、二甲基氨基、芴、咪唑基、茚滿基、吲唑基、異噁唑基、噁唑基、苯基、哌啶基、吡唑基、吡啶基、喹唑啉基、噻二唑基和1，2，4-三唑基；或者
Rc是J100-J200，其中J100連接在(CH2)X上，并且
J100選自任選取代的下列基團(tuán)異噁唑基、哌嗪基、吡唑基、吡啶基和苯基；并且
J200選自苯并咪唑基、苯并噁唑基、環(huán)己基、呋喃基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、吲哚基、異噁唑基、-NH-C(O)-苯基、苯氧基和任選取代的苯基；
R5是-NH-C(O)-(CH2)n-Rd；其中
n是0-3；
Rd是-C(CH3)2-CH2-C(O)-CH3；或者
Rd選自任選取代的下列基團(tuán)(C1-C2)烷氧基、烷基氨基、苯并咪唑基、苯并[1，3]二噁唑基、苯并[1，2，5]噁二唑基、苯并三唑基、苯并[b]噻吩基、苯并呋喃基、芐氧基、環(huán)丙基、環(huán)己基、色烯基、二甲基氨基、呋喃基、六氫嘧啶基、咪唑基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、咪唑烷基、吲哚基、異噁唑基、嗎啉基、苯基、哌嗪基、哌啶基、吡嗪基、吡唑基、吡唑并[1，5-a]嘧啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯基、喹啉基、喹喔啉基、四氫苯并呋喃基、四氫呋喃基、噻唑基、噻吩并[2，3-d]嘧啶基、噻吩基、2，3-二氫噻唑并[3，2-a]嘧啶、-S-嘧啶基、-O-苯基、-O-Si(CH3)2-C(CH3)3、-NH-S(O)2-苯基、-NH-C(O)-NH2、1，2，3，4-四氫二氮雜萘基或N(CH3)2；或者
Rd是M-Q，其中M連接在(CH2)n上，并且
M選自任選取代的亞甲基、亞環(huán)丙基、任選取代的異噁唑基、苯基、吡唑基、-NH-C(O)和任選取代的1，3，5-三嗪基；
Q選自呋喃基、嗎啉基、苯基、苯基胺和任選取代的1，3，4-噻二唑基；
R5是-NH-CH2-C(Y200)2-Rc，其中Y200獨(dú)立地為H或(C1-C3)烷基，并且Rc選自任選取代的下列基團(tuán)(C1-C6)烷氧基、咪唑基、苯基、哌啶基、吡咯烷基和1，2，3，4-四氫[1，8]二氮雜萘；或者
R5是-NH-C(O)-N(Rf)2，其中Rf獨(dú)立地為H或任選取代的(C1-C3)烷基；或者
R5是-NH-(C(O))m-NY300-(CH2)p-Rg；其中
m是0、1或2；
Y300是H或任選取代的(C1-C3)烷基；
p是1或2；且
Rg選自任選取代的下列基團(tuán)氨基、(C1-C2)烷氧基、苯并[1，3]二噁唑基、苯并噻唑基、苯并[1，4]噁嗪基、苯并[1，2，5]噻二唑基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑基、異噁唑基、嗎啉基、噁唑基、苯基、哌啶基、吡嗪基、吡唑基、吡啶基、吡咯基、四氫吡喃基、噻唑基和三唑基；或者
Rg是W-X，其中W連接在(CH2)P上，并且
W是噻唑基，且X是噻吩基；
R5是-NH-S(O)2Rh，其中Rh選自任選取代的下列基團(tuán)苯并[1，2，5]噁二唑基、苯并[1，2，5]噻二唑基、咪唑基、異噁唑基、噁唑基、苯并[1，4]噁嗪基、吡唑基、苯基、喹啉基、噻唑基、噻吩基和噻吩基；或者
Rh是T-U，其中T連接在S(O)2上，并且
T是苯基或噻吩基；
U選自吡啶基、任選取代的噻唑基和-NH-嘧啶基，其中嘧啶基可以任選被取代；或者
R5是-N(Y400)Ri，其中
Y400是H，或者Y400選自任選取代的下列基團(tuán)(C1-C3)烷基、氨基(C1-C3)烷基和吡啶基甲基；且
Ri選自任選取代的下列基團(tuán)(C1-C3)烷基、6-氮雜吲哚基、環(huán)丁烯基、苯基、嘌呤基、吡嗪基、吡唑并[1，5-a]嘧啶，噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯并[2，3-c]吡啶基、吡咯并[2，3-b]嘧啶基、吡咯并[3，2-d]嘧啶基、吡咯并[3，4-b]嘧啶基、吡咯并[2，3-d]嘧啶基、喹唑啉基、噻吩并[3，2-d]嘧啶基、噻吩并[3，2-b]吡啶基和三嗪基；或者
Ri是V-W，其中V連接在氮上，并且
V是一個(gè)鍵或者選自任選取代的下列基團(tuán)異喹啉基、吡啶基、嘧啶基和吡咯并[3，2-d]嘧啶基；
W選自任選取代的下列基團(tuán)(C1-C3)烷基、烷氧基烷基、環(huán)戊烯基、嗎啉基、苯基、嘧啶基、吡咯烷基、噻吩并[3，2-b]吡啶基、-NH-苯基、-NH-CH2-CH2-N(CH3)2、-NH-NH2、NH-C(O)-CH3、CH2-苯基、NH-C(O)-呋喃基、S-異丙基、S-萘基、S-苯基和S-CH2-CH2-NH2；或者
R5是z100-Z200，其中Z100連接在吲唑上，并且
Z100選自丁基、乙基、吲唑基、任選取代的苯基、任選取代的吡啶基、任選取代的嘧啶基、吡咯并[3，2-d]嘧啶基和任選取代的噻吩基；
Z200選自-C(O)-NH-CH2CH2-NH2、NH2、-NH-C(O)-噻吩基、-NH-C(O)-CH(CH3)2、-NH-C(O)-CH3、-NH-C(O)C(CH3)3、-NH-C(O)-NH-呋喃基、-NH-C(O)-NH-苯基、苯并[b]噻吩基、嗎啉基乙基、苯基、哌嗪基、哌啶基、吡唑基和四唑基；或者
R5是-NH-C(O)-Y500-C(O)-Rk；其中
Y500是任選取代的(C1-C3)烷基；且
Rk是H，或者Rk選自任選取代的下列基團(tuán)苯基、苯基氨基和噻吩基；或者
R5是-NH-C(O)-(CH2)y-NH-T-Rm；其中
y是1或2；
T是C(O)或S(O)2；且
Rm選自呋喃基、苯基和噻吩基；
R6是H，或者R6選自任選取代的下列基團(tuán)(C1)烷氧基、(C1-C3)烷基、苯并[b]噻吩基、-NH-嘧啶基、-NH-S(O)2-苯基-NH-嘧啶基、-NH-C(O)-苯并[b]噻吩基、吡咯并[2，3-b]嘧啶基和吡啶基；且
R7選自H、鹵素、NH2，或者R7選自任選取代的下列基團(tuán)(C2-C5)鏈烯基、(C2-C5)炔基、氨基炔基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并[b]噻吩基、呋喃基、吲哚基、異喹啉基、萘基、苯基、苯基烷基、苯基(C2-C5)鏈烯基、苯基(C2-C5)炔基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹啉基、喹喔啉基、噻吩并[2，3-b]吡啶基、噻吩基、-NH-S(O)2-CH3、-NH-C(O)-CH3、-NH-C(O)-苯基、-C(O)-NH-CH2-苯基和-C(O)-NH-苯基；或者
R7是Y-Z，其中Y連接在吲唑上；且
Y是苯并[b]噻吩基或噻吩基；且
Z選自苯基、噻吩基、CH2NHCH2CH2-嗎啉基和取代的哌嗪基；或者
R7是-C(O)-NH-(CH2)r-苯基，其中r是0或1，并且苯基是任選被取代的；
條件是所述化合物不是
其中
R3選自H、OH和COOH；
R5是H或NO2；
R7是H或NH2；
R100是OCH3；且
R200是H或-C(O)-OCH3；
條件是所述化合物不是
其中
R3是NH2或苯基；且
R5是H或NO2；
條件是所述化合物不是
其中
R1是H、甲基或丙基；
R7是H、F或甲基；且
R是H、甲基、OH、NH或OCH3；
條件是所述化合物不是
其中R3選自I、Br、COOH、NH2、噻吩基、吡啶基、吡咯基、-C(O)-NH-CH-(CH2OH)2、-C(O)-NH-CH2-X100、
其中X100是吡啶基或任選被甲基取代的苯基；
條件是所述化合物不是
其中
R3是嗎啉基或4-甲基哌嗪基；
Rc是H、Cl或NO2；
R6是H或Cl；且
R7是H、Cl或NO2；
條件是所述化合物不是
其中
R6是H、甲基或OCH3；
R6是H或OCH3；
L100是H或異丙基；且
X200是苯基或4-氯苯基；
條件是所述化合物不是
其中
R1是H或CH3，且X300是芐基、苯基、2-氨基苯基或2-羥基苯基；以及
條件是所述化合物不是
其中
R1是H、CH2OH、甲基、苯基或4-甲氧基芐基；
R3是H、I、吡啶基或
且
R5是H、Br、F、C(OH)、-C(O)-OCH2CH3或-NH-C(O)-NH-芐基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中
R1是H或被NH2取代的嘧啶基；
R3選自H、CH3、OH、Cl、苯并[b]噻吩基、2，3-二氫苯并呋喃基、吲哚基、萘基、苯基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹啉基、噻吩基、-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基；其中
所述吲哚基任選被CH3取代；
所述萘基任選被OCH3或OH取代；并且
所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自下列的取代基取代CH3、NH2、Cl、F、N(CH3)2、OH、CH2OH、C(O)NH2、COOH、CF3、OCF3、OCH3、CN、OCH2CH3、NHC(O)CH3、-S(O)2CH3和-C(O)-NH-苯基；或者
R3是-C(O)-NY100-(C(Y100)2)x-Ra，其中
x是0或1；
Y100是H；
Ra選自任選取代的下列基團(tuán)苯并[b]噻吩基、苯并咪唑基、1，3-二氫苯并咪唑基-2-酮、苯并三唑基、聯(lián)苯基、1，3-二氫苯并咪唑基、吲哚基、萘基和苯基；其中
所述萘基任選被OH或OCH3取代；
所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)Cl、F、OH、CH2OH、CH2CH2OH、COOH、C(O)NH2、N(CH3)2或甲基取代；或者
R3是A-B，其中
A選自-C≡C、-C≡C-苯基、苯基和噻吩基；并且
B選自芐氧基、苯基、噻吩基、-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基；
R4是H；
R5是被C(O)H、CH2OH、SCH2CH2NH2或NH2取代的吡啶基；或者R5選自
和
其中
E選自H、OH、CH3、-CH2CH2NH2、CH2CH2CH2OH、CH2CH2OCH3、CH2CH2CH2NH2、CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)NH2、CH2CH2C(O)OCH3、CH2CH2CH2OCH3、NHCH2CH2CH3、CH2CH2C(O)NH(CH3)、CH2CH2C(O)N(CH3)2、C(O)NHCH2CH2NH(CH3)、NHCH2CH2OCH3、NHCH2CH2OH、NHCH2CH2N(CH3)2、異丙基、CH2C(O)NH2、CH2CH(CH3)C(O)OH、CH2CH2CH2C(O)OH、CH2CH(CH3)C(O)OCH3、CH2CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2C(O)NH2、N(CH3)2、嗎啉基乙基、哌啶基乙基、
和4-甲基哌嗪基環(huán)己基；
E300是H或CH2CH2OCH3；
G選自H、Cl、NH2、CH2CH2C(O)NHCH2CH2NH2、C(O)NH2、C(O)NHCH2CH2NH2、C(O)NHCH2CH2N(CH3)2、CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)NH2、NHCH2CH2N(CH3)2、NHCH2CH2-吡啶基和NHCH2CH2NH2；或者
R5是-C(O)-NH-(CH2)a-Rc，其中
a是0；
Rc是苯并咪唑基或被氧代基取代的芴；或者
Rc是J100-J200，其中
J100選自吡唑基、吡啶基、哌嗪基和苯基；其中
所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、OH和OCH3的取代基取代；
所述哌嗪基被甲基取代；并且
J200選自苯并噁唑基、苯并咪唑基、呋喃基、咪唑并[1，2-a]吡啶基和1，8a-二氫咪唑并[1，2-a]吡啶基；或者
R5是-NH-C(O)-(CH2)n-Rd，其中
n是0、1或2；并且
Rd是苯并咪唑基、苯并[b]噻吩基、咪唑基、苯基或吡唑并[1，5-a]嘧啶基；其中
所述苯基任選被NO2取代；
R5是-NH-(C(O))m-NY300-(CH2)p-Rg，其中
m是2；
Y300是H；
p是1；并且
Rg是苯并[1，3]二噁唑基；或者
R5是-N(Y400)-Ri，其中
Y400選自H、CH2CH2CH2OH、CH2CH2NH2或吡啶基甲基；
Ri是V-W，其中
V是一個(gè)鍵或嘧啶基；且
W是被NH2取代的嘧啶基或者被OH取代的吡咯烷基；或者
R5是Z100-Z200，其中
Z100是噻吩基或被CH3取代的吡啶基，且Z200是噻吩基或NH-C(O)-呋喃基；
R6選自H、吡咯并[2，3-b]嘧啶基和
且
R7選自任選取代的下列基團(tuán)H、Br、Cl、I、苯并呋喃基、苯并[b]噻吩基、呋喃基、吲哚基、萘基、苯基、吡啶基、吡咯基、喹啉基、喹喔啉基、噻吩并[2，3-b]吡啶基、噻吩基、-CH＝CH-苯基、-C≡C-苯基、-C(O)-NH-CH2-苯基和-C(O)-NH-苯基，其中
所述萘基任選被OH或OCH3取代；
所述苯并[b]噻吩基任選被下列基團(tuán)取代OH、CH3、OCH3、N(CH3)2、OH、CH2＝CHNHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2或CH2NHCH2CH2N(CH3)2；
所述吲哚基任選被下列基團(tuán)取代C(O)N(CH(CH3)2)2、CH2OH、CH2C(O)NH2、COOH、C(O)NH2、N(CH3)2或S(O)2CH3；并且
并且所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自下列的取代基取代Cl、F、CH3、CH2OH、CN、-C(O)NH2、OH、OCH3、N(CH3)2、NH-C(O)CH3、-NH-S(O)2-CH3；
所述噻吩基被CH2OH取代；或者
R7是Y-Z，其中
Y是苯并[b]噻吩基或噻吩基；并且
Z選自任選取代的下列基團(tuán)CH＝CHNHCH3、NHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2、CH2NHCH3、CH2NHCH2CH2N(CH3)2、N(CH3)2、CH2NHCH2CH2-嗎啉基、苯并[b]噻吩基、嗎啉基甲基、哌嗪基甲基苯基和噻吩基；或者
R7是-C(O)-NH-(CH2)r苯基，其中
r是0或1；
所述苯基任選被NH2取代。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中
R1是H或被NH2取代的嘧啶基；
R3選自H、CH3、OH、Cl、苯并[b]噻吩基、2，3-二氫苯并呋喃基、吲哚基、萘基、苯基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹啉基、噻吩基、-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基；其中
所述吲哚基任選被CH3取代；
所述萘基任選被OH取代；并且
所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自下列的取代基取代OH、F、CH3、CF3、CN、-C(O)NH2、NH2、NHC(O)CH3、OCH3、OCF3、OCH2CH3、N(CH3)2、-C(O)-NH-苯基和-S(O)2CH3；或者
R3是-C(O)-NY100-(C(Y100)2)x-Ra，其中
Y100是H；
x是0；
Ra選自任選取代的下列基團(tuán)苯并咪唑基、1，3-二氫苯并咪唑基-2-酮、苯并三唑基、聯(lián)苯基、吲哚基、萘基和苯基；
其中所述萘基被OH或OCH3取代；
所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)Cl、F、OH、CH2OH、CH2CH2OH、C(O)NH2、N(CH3)2或甲基取代；或者
R3是A-B，其中
A選自苯基和噻吩基；并且
B選自芐氧基、苯基、噻吩基、-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基；
R5是被NH2取代的吡啶基；或者
R5選自
和
其中
E選自H、CH3、CH2C(O)OH、CH2CH2CH2OH、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)NH2、CH2CH2C(O)OCH3、CH2CH2CH2OCH3、NHCH2CH2CH3、CH2CH2C(O)NH(CH3)、NHCH2CH2OCH3、NHCH2CH2OH、異丙基、CH2C(O)NH2、CH2CH(CH3)C(O)OH、嗎啉基乙基、哌啶基乙基、CH2CH2CH2C(O)OH、CH2CH(CH3)C(O)OCH3、CH2CH2NH2、CH2CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2C(O)NH2、CH2CH2C(O)N(CH3)2和N(CH3)2；并且
G選自H、NH2、Cl、CH2CH2C(O)NHCH2CH2NH2、C(O)NHCH2CH2NH2、C(O)NHCH2CH2N(CH3)2、NHCH2CH2N(CH3)2、NHCH2CH2NH2、CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)NH2和NHCH2CH2-吡啶基；
R5是-C(O)-NH-(CH2)a-Rc，其中
a是0；
Rc是J100-J200，其中
J100是吡唑基或苯基，其中所述苯基任選被OCH3取代；且
J200是苯并噁唑基、苯并咪唑基、呋喃基、咪唑并[1，2-a]吡啶基或1，8a-二氫咪唑并[1，2-a]吡啶基；或者
R5是-NH-C(O)-(CH2)n-Rd，其中
n是0、1或2；且
Rd選自苯并咪唑基、苯并[b]噻吩基、咪唑基和吡唑并[1，5-a]嘧啶基；
R5是-N(Y400)-Ri，其中
Y400選自H、CH2CH2CH2OH、CH2CH2NH2或吡啶基甲基；
Ri是V-W，其中
V是一個(gè)鍵或嘧啶基，且W是被NH2取代的嘧啶基或被OH取代的吡咯烷基；
R5是Z100-Z200，其中
Z100是噻吩基；
Z200是噻吩基；
R6是H或
且
R7選自任選取代的下列基團(tuán)H、苯并呋喃基、苯并[b]噻吩基、呋喃基、吲哚基、萘基、喹啉基、苯基、吡咯基、喹喔啉基、噻吩基、噻吩并[2，3-b]吡啶基、-CH＝CH-苯基、-C≡C-苯基、-C(O)-NH-CH2-苯基和-C(O)-NH-苯基，其中
所述苯并[b]噻吩基任選被OH、CH3、OCH3、N(CH3)2、CH2＝CHNHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2或CH2NHCH2CH2N(CH3)2取代；
所述吲哚基被下列基團(tuán)取代甲基、CN、C(O)H、CH2CH2CH2NH2、CH2NHCH2CH＝CH2、C(O)CH3、C(O)OCH3、OCH3、C(O)N(CH(CH3)2)2、CH2OH、CH2C(O)NH2、C(O)NH2、CH2NHCH2CH2N(CH3)2或哌啶基甲基；并且
所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自下列的取代基取代Cl、F、CH3、CH2OH、CN、-C(O)NH2、OH、OCH3、N(CH3)2和-NH-S(O)2-CH3；或者
R7是Y-Z，其中
Y是苯并[b]噻吩基或噻吩基；并且
Z選自任選取代的下列基團(tuán)CH＝CHNHCH3、NHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2、CH2NHCH3、CH2NHCH2CH2N(CH3)2、N(CH3)2、CH2NHCH2CH2-嗎啉基、苯并[b]噻吩基、嗎啉基甲基和哌嗪基甲基；其中
所述哌嗪基任選被甲基取代。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中
R1和R4是H；
R3選自任選取代的下列基團(tuán)H、OH、2，3-二氫苯并呋喃基、萘基、吡唑基和吡咯基；其中
R3是-C(O)-NY100-(C(Y100)2)x-Ra，其中
Y100是H；
x是0；
Ra選自任選取代的下列基團(tuán)萘基和苯基；其中
所述萘基任選被OH取代；
所述苯基任選被OH取代；或者
R3選自-NH-C(O)-環(huán)丁基和-NH-C(O)-苯基；
R3是A-B，其中
A選自苯基和噻吩基；并且
B選自芐氧基、苯基和噻吩基；
R5選自
和
E選自H、CH2C(O)NH2、CH2CH(CH3)C(O)OCH3、CH2CH2CH2OH、CH2CH2C(O)OCH3、CH2CH2CH2OCH3、CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)NH2、CH2CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2OCH3、CH2CH2CH2C(O)OH、CH2CH2CH2C(O)NH2、CH2CH(CH3)C(O)OH、CH2CH2C(O)NH(CH3)、CH2CH2C(O)N(CH3)2、N(CH3)2、異丙基、嗎啉基乙基和哌啶基乙基；并且
G是H、NH2或NHCH2CH2-吡啶基，或者
R5是-C(O)-NH-(CH2)a-Rc，其中
a是0，
Rc是J100-J200，其中
J100是任選被OCH3取代的苯基，
J200是咪唑并[1，2-a]吡啶基或1，8a-二氫咪唑并[1，2-a]吡啶基；或者
R5是-NH-C(O)-(CH2)n-Rd，其中
n是2，并且Rd是咪唑基；或者
R5是Z100-Z200，其中
Z100是噻吩基；
Z200是噻吩基；
R6是H或
并且
R7選自任選取代的下列基團(tuán)H、苯并呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲哚基、萘基、喹啉基、CH＝CH-苯基、-C三C-苯基、-C(O)-NH-CH2-苯基和-C(O)-NH-苯基，其中
所述苯并[b]噻吩基任選被下列基團(tuán)取代OH、CH3、OCH3、N(CH3)2、CH2＝CH2NHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2、CH2NHCH2CH2N(CH3)2、哌啶基甲基或CH2NHCH2N(CH3)2；并且
所述吲哚基任選被下列基團(tuán)取代甲基、CN、C(O)H、CH2CH2CH2NH2、CH2NHCH2CH＝CH2、C(O)CH3、C(O)OCH3、或OCH3；甲基、CN、C(O)H、CH2CH2CH2NH2、CH2NHCH2CH＝CH2、C(O)CH3、C(O)OCH3或OCH3，
所述苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)H和OCH3的取代基取代；或者
R7是Y-Z，其中
Y是苯并[b]噻吩基或噻吩基；并且
Z選自CH＝CHNHCH3、NHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2、CH2NHCH3、CH2NHCH2CH2N(CH3)2、N(CH3)2、CH2NHCH2CH2-嗎啉基、苯并[b]噻吩基、嗎啉基甲基和哌嗪基甲基；
其中所述哌嗪基任選被甲基取代。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中
R1和R4是H；
R3選自H、OH、2，3-二氫苯并呋喃基、吡咯基和任選取代的萘基；
或者
R3是-C(O)-NY100-(C(Y100)2)x-Ra，其中
Y100是H；
x是0；
且
Ra是被OH取代的苯基；
R5是
或
其中
E選自H、CH2C(O)NH2、CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2OCH3、CH2CH2CH2OH、CH2CH2C(O)OH、CH2CH2CH2C(O)OH、CH2CH2C(O)NH2、CH2CH2CH2C(O)NH2、CH2CH(CH3)C(O)OCH3、CH2CH(CH3)C(O)OH、CH2CH2C(O)OCH3、CH2CH2C(O)NH(CH3)、CH2CH2C(O)N(CH3)2、N(CH3)2、異丙基、嗎啉基乙基和哌啶基乙基；并且
G是H、NH2或NHCH2CH2-吡啶基，或者
R5是-C(O)-NH-(CH2)a-Rc，其中
a是0；并且
Rc是J100-J200，其中
J100是苯基，并且J200是1，8a-二氫咪唑并[1，2a]吡啶基；或者
R5是-NH-C(O)-(CH2)n-Rd，其中
n是2，并且
Rd是咪唑基；或者
R5是Z100-Z200，其中
Z100是噻吩基，并且Z200是噻吩基；
R6是H或
并且
R7選自任選取代的下列基團(tuán)H、-CH＝CH-苯基、-C≡C-苯基、苯并呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲哚基、喹啉基、萘基、-C(O)-NH-CH2-苯基和-C(O)-NH-苯基；
其中所述萘基任選被OH、C(O)H或OCH3取代；
所述苯并[b]噻吩基任選被下列基團(tuán)取代OH、CH3、OCH3、CH2＝CH3-NHCH3、CH2NH2、CH2CH2NH2、CH2NHCH2CH2N(CH3)2、N(CH3)2或哌啶基甲基；
所述吲哚基任選被下列基團(tuán)取代甲基、CN、C(O)H、CH2CH2CH2NH2、CH2NHCH2CH＝CH2、C(O)CH3、C(O)OCH3或OCH3；
所述苯基任選被OH或OCH3取代；或者
R7是Y-Z，其中
Y是苯并[b]噻吩基；并且
Z選自CH2NHCH2CH2-嗎啉基、嗎啉基甲基和哌嗪基甲基，其中所述哌嗪基任選被甲基取代。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中
R1、R3、R4和R6是H；
R5是
或
其中
E選自H、-CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2OH、CH2CH2C(O)OH和CH2CH2C(O)NH2；并且
R7選自苯并[b]噻吩基、吲哚基、-C(O)-NH-CH2-苯基和-C(O)-NH-苯基，其中
所述苯并[b]噻吩基任選被哌啶基甲基取代；
所述吲哚基任選被CN、甲基或C(O)H取代。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中
R1、R3、R4和R6是H；
R5是
其中
E是H；并且
R7是-C(O)-NH-CH2-苯基或-C(O)-NH-苯基。
8.權(quán)利要求6的化合物，其中
R1、R3、R4和R6是H；
R5是
或
其中
E選自H、-CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2OH、CH2CH2C(O)OH和CH2CH2C(O)NH2；并且
R7是苯并[b]噻吩基或吲哚基，其中
所述苯并[b]噻吩基任選被哌啶基甲基取代；
所述吲哚基任選被CN、甲基或C(O)H取代。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中
R1、R3、R4和R6是H；
R5是
其中
E選自-CH2CH2NH2、CH2CH2CH2NH2、CH2CH2CH2OH、CH2CH2C(O)OH和CH2CH2C(O)NH2；并且
R7是苯并[b]噻吩基。
全文摘要
新的式(I)化合物或式(I)化合物的可藥用鹽、前藥和生物活性代謝物，其中取代基如說明書中所定義，所述化合物可用作治療劑。
文檔編號A61K31/5377GK101437519SQ200780012071
公開日2009年5月20日 申請日期2007年4月2日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月31日
發(fā)明者A·M·埃里克松, A·布爾查特, K·E·弗蘭克, D·J·考德伍德, L·K·阿博特, M·A·阿吉里亞迪, D·W·博爾哈尼, K·P·庫薩克, R·W·迪克松, T·D·戈頓, K·D·穆倫, R·V·塔拉尼安, X·吳, X·張, L·X·王, B·李, C·E·巴貝里斯, N·維沙特 申請人:艾博特公司