專利名稱：α-哌嗪酮及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有抑制動(dòng)物細(xì)胞粘著功能的新型α-哌嗪酮-1-乙酸化合物及其鹽，還涉及以所述化合物為有效成分的藥物。
本發(fā)明的目的在于通過控制或抑制細(xì)胞粘著而提供對(duì)各種疾病的治療藥物。
參與和動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)粘著的因子有(纖)粘連蛋白(fibronectin)、Vitronectin，osteopontin，膠原，凝血栓蛋白，血纖維蛋白原和Von Willebrand因子。這些蛋白質(zhì)包含作為細(xì)胞識(shí)別部位的-Arg-Gly-Asp-。該三肽可被屬于受體的至少一個(gè)蛋白質(zhì)，整合素所識(shí)別，而整合素為由與兩層膜結(jié)合的亞單位組成的雜二聚蛋白質(zhì)。(E.Ruoslahti and M.D.Pierschbacher，Science，238，491(1987))。
已知可識(shí)別氨基酸順序列-Arg-Gly-Asp-的結(jié)構(gòu)相關(guān)的受體和整合素，在血小板細(xì)胞外表面、內(nèi)皮細(xì)胞、白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞，單核細(xì)胞和粒細(xì)胞上表達(dá)。具有氨基酸順序列-Arg-Gly-Asp-的化合物競爭性結(jié)合到可被細(xì)胞間粘著分子結(jié)合的部位從而抑制細(xì)胞間粘著分子的結(jié)合。例如，這種抑制細(xì)胞間粘著的物質(zhì)可為H-Gly-Arg-Gly-Asp-Ser-Pro-OH。
當(dāng)血管受損傷時(shí)，血小板被內(nèi)皮膠原活化而形成血栓，其中，內(nèi)皮膠原子可引起血纖維蛋白原與血小板的結(jié)合，即血小板聚集。血小板與血纖維蛋白原的相互作用通過GPⅡb/Ⅲa發(fā)生，這是血小板聚集的重要特征。細(xì)胞粘著抑制物質(zhì)能抑制血小板聚集是由于能引起血小板聚集的物質(zhì)，如凝血酶、腎上腺素、ADP和膠原。
除此之外，細(xì)胞粘著抑制物質(zhì)可望成為抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的藥物(在腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的部位，對(duì)固定粘著的抑制)。
包含氨基酸序列-Arg-Gly-Asp(RGD)的線性或環(huán)狀肽已知為細(xì)胞粘著抑制物質(zhì)，如Jonrnal of Biological Chemistry(J.Biol.Chem.)，262，17294(1987)和JPAH2(1992)-174797所述。
上述這些已知肽衍生物的活性效力并不令人滿意，其口服吸收也不理想。除此之外，由于這些肽衍生物可被包括氨基肽酶、羧基肽酶或各種肽鏈內(nèi)切酶，(如，絲氨酸蛋白酶)等酶水解，其在含有這些酶的溶液中或在活體中的穩(wěn)定性不理想。所以，對(duì)于這些肽衍生物在臨床上應(yīng)用，還有一些問題需要解決。
在另一方面，具有抗血栓作用的非肽化合物已在European Patent Application(EPA) Publication No.483667[JPA H4(1992)-264068]和EPA Publlication No.505868上公開發(fā)表，并分別描述4-7員環(huán)狀烯基亞氨基(如吡咯烷環(huán))的化合物和具有哌啶環(huán)的化合物等。在EPA Publication No.529858中披露了帶有哌嗪二酮環(huán)且具有抑制細(xì)胞粘著的功能的化合物。與具有抗血栓作用的上述已知化合物相比，其效力更高且持續(xù)時(shí)間更長。
本發(fā)明的目的在于提供一種比已知細(xì)胞粘著抑制劑效力更優(yōu)、持續(xù)更長、劑量更少的具有細(xì)胞粘著抑制作用的化合物。換言之，本發(fā)明涉及解決了上述問題的新型α-哌嗪酮-1-乙酸化合物，涉及以這些化合物為有效成分的、具有細(xì)胞粘著抑制作用的藥物。
更具體地說，本發(fā)明涉及下式化合物及其鹽[下文中，有時(shí)將這些化合物及其鹽簡稱為化合物(Ⅰ)]和含這些化合物的細(xì)胞粘著抑制劑， 式中A為脒基或任意取代的氨乙基;R10為硝基、鹵素原子，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)烷氧羰基，羥甲基、甲酰基和式OR11所指基團(tuán)，其中R11為氫原子或低級(jí)烷基、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、低級(jí)鏈烷?；?，氨基甲?；蚣谆酋；?，其中每一基團(tuán)均可取代;R12和R13分別為氫原子、羧基、低級(jí)烷氧基或鹵素原子;X為羥基、對(duì)-羥基苯基或任意酯化或酰胺化羧基;Y為任意酯化或酰胺化羧基;n為1或2。
作為式(Ⅰ)的典型化合物，該化合物可是由下式化合物或其鹽代表的 其中R11為氫原子、任意取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烷?；腿我馊〈陌被柞；图谆酋；?R12和R13分別為氫原子，羥基，低級(jí)烷氧基或鹵素原子;X為羥基，對(duì)-羥基苯基或任意酯化或酰胺化羧基;Y為任意酯化或酰胺化羧基;n為1或2。
在式Ⅰ中，A為脒基或任意取代的氨乙基。
作為A所表示的取代氨乙基，優(yōu)選那些服用、作為前體藥物的含取代氨乙基的式Ⅰ化合物后，在體內(nèi)能移去其可移去基團(tuán)并形成生理活性的游離氨基乙基的基團(tuán)。在取代氨乙基中氨基的取代基的實(shí)例包括三甲基乙酰氧甲基、正-辛氧羰基、正-己氧羰基、正-辛氨基羰基、正-己氨基羰基、四氫呋喃-2-基、吡咯烷-1-基甲基、嗎啉代甲基和N，N-二甲基氨基羰基氧甲基。
如，R10所表示的基團(tuán)或原子為下列基團(tuán)硝基、鹵素原子、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、低級(jí)烷氧羰基和經(jīng)式OR11所表示的且經(jīng)氧原子成鍵的基團(tuán)。R11優(yōu)選實(shí)例為氫原子和任意取代的低級(jí)烷基、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、低級(jí)鏈烷?；?、氨基甲酰基和甲磺?；?br> R10優(yōu)選下列基團(tuán)之一硝基、鹵素原子、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、低級(jí)烷氧羰基、羥甲基、甲酰基和式OR11所表示的基團(tuán)(其中R11為氫原子或低級(jí)烷基、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、低級(jí)鏈烷?；?、氨基甲酰基和甲磺?；?，每一基團(tuán)均可被取代)。
更為具體地說，R10優(yōu)選的基團(tuán)或原子為下列基團(tuán)之一羥基、被C1-3烷氧基任意取代的C1-5烷氧基、C2-3烯氧基、C2-3炔氧基、硝基、鹵素原子、C1-3鏈烷酰氧基，被C1-3烷基任意取的氨基甲酰氧基、甲磺酰氧基、C2-3鏈烯基、C2-3炔基和C1-3烷氧羰基。
R11所表示的低級(jí)烷基的優(yōu)選實(shí)例為直鏈或支鏈的C1-5烷基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和異戊基，其中優(yōu)選C1-3烷基。
R11所表示的低級(jí)烷基、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、低級(jí)鏈烷酰基和甲磺?；?，任一基團(tuán)均可被取代，取代基實(shí)例為羥基、低級(jí)(C1-3)烷氧基、氨基、一低級(jí)(C1-3)烷氨基、二低級(jí)(C1-3)烷氨基、低級(jí)(C1-3)鏈烷?；⒌图?jí)(C1-3)鏈烷酰氧基、低級(jí)(C1-3)鏈烷酰氨基、低級(jí)(C1-3)烷氧羰基和被低級(jí)(C1-3)烷基任意取代的氨基甲?；?。其中，優(yōu)選低級(jí)(C1-3)烷氧基，如，甲氧基、乙氧基和丙氧基。R11所表示的氨基甲?；娜〈鶎?shí)例為低級(jí)(C1-3)烷基。
由R12和R13所表示的低級(jí)烷氧基和由上述R11所表示的作為分別任意取代的“低級(jí)烷基、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、低級(jí)鏈烷?；图谆酋；钡娜〈牡图?jí)烷氧基的優(yōu)選實(shí)例為C1-3烷氧基，如甲氧基、乙氧基和丙氧基。
由R11所表示的低級(jí)鏈烷酰基和由R11表示的作為分別任意取代的“低級(jí)烷基、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、低級(jí)鏈烷?；图谆酋；钡娜〈牡图?jí)鏈烷酰基的優(yōu)選實(shí)例為C1-3鏈烷?；?，如，甲酰基、乙?；捅；?。
由R10、R12和R13所示的鹵素原子由氟、氯、溴、碘構(gòu)成。其中優(yōu)選氟、氯。由R11所表示的作為任意取代的氨基甲?；娜〈牡图?jí)烷基、由R10所表示的低級(jí)烷氧羰其中的低級(jí)烷基、作為取代氨基的取代基的低級(jí)烷基和由R11所表示的作為分別任意取代的低級(jí)烷基、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、低級(jí)鏈烷?；图谆酋；娜〈牡图?jí)烷基優(yōu)選實(shí)例為C1-3低級(jí)烷基，如，甲基、乙基、正丙基和異丙基。
由R10和R11所表示的低級(jí)鏈烯基的優(yōu)選實(shí)例為C2-3鏈烯基，如，乙烯基、烯丙基、和1-丙烯基。
由R10和R11所表示的低級(jí)炔基的優(yōu)選實(shí)例為C2-3炔基，如，乙炔基和丙炔基。
在上述化合物中，特別優(yōu)選式Ⅰ化合物，其中R10為羥基或甲氧基。
同樣優(yōu)選式Ⅰ化合物，其中R10為乙氧基、甲氧乙氧基、丙氧基、炔丙氧基、烯丙氧基、氟原子和氯原子。其中，R10優(yōu)選乙氧基，炔丙氧基、烯丙氧基和氟原子。
對(duì)于R12和R13，優(yōu)選式Ⅰ化合物，其中R12和R13均為氫原子。
對(duì)于n，優(yōu)選式Ⅰ化合物，其中n為1。
其中，特別優(yōu)選式Ⅰ化合物其中A為脒基;R10為羥基或甲氧基;R12和R13均為氫原子n為1。
同樣優(yōu)選式Ⅰ化合物，其中A為脒基;R10為乙氧基、炔丙氧基、烯丙氧基或氟原子;R12和R13均為氫原子，n為1。
其他優(yōu)選化合物為式Ⅰ化合物，其中A為氨乙基;R10為羥基或甲氧基;R12和R13均為氫原子，n為1。
其他優(yōu)選化合物為式Ⅰ化合物，其中A為氨乙基;R10為乙氧基、炔丙氧基、烯丙氧基或氟原子;R12和R13均為氫原子，n為1。
作為由X和Y表示的任意酯化或酰胺化羧基，優(yōu)選那些作為前體藥物的式Ⅰ化合物服用后可在體內(nèi)轉(zhuǎn)化，并將式Ⅰ化合物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的生理活性形式的基團(tuán)。由X和Y表示的任意酯化或酰胺化羧基分別用下列分子式來表示
R1和R2通常獨(dú)立的代表羥基，C1-8烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基)、低級(jí)鏈烯氧基，如，C3-12鏈烯氧基，如，烯丙氧基、丁烯氧基、芳烷氧基(其低級(jí)烷基部分有1-4碳原子的苯基低級(jí)烷氧基，如，苯甲氧基、苯乙氧基和3-苯丙氧基)，或分別由-NR3R4和-NR5R6表示的任意取代氨基。在NR3R4和NR5R6中，R3和R4，與R5和R6分別表示氫原子，低級(jí)烷基(C1-6低級(jí)烷基如，甲基、乙基、丙基、丁基、己基)，C3-8鏈烯基(如，烯丙基、2-丁烯基和3-戊烯基)或C6-12芳烷基(如，苯甲基、苯乙基、苯丙基和吡啶甲基)，且芳烷基中的芳基可未被取代或被1-2個(gè)取代基取代。取代基的實(shí)例為硝基、鹵素(氯、氟、溴)，低級(jí)烷基(甲基、乙基、丙基)、低級(jí)烷氧基(甲氧基、乙氧基、丙氧基)。
本發(fā)明的式Ⅰ化合物可用于配制前體藥物型口服給藥制劑，在這種情況下，如上述的R1和R2，其優(yōu)選引入羥基、任意取代氨基[如，氨基、N-低級(jí)(C1-4)烷氨基和N，N-二-低級(jí)(C1-4)烷基氨基]或任意取代烷氧基[如，低級(jí)(C1-6)烷氧基，其烷基部分被羥基或任意取代氨基(如，氨基、二甲氨基、二乙氨基、哌啶子基或嗎啡代)、鹵素、低級(jí)(C1-6)烷硫基、低級(jí)(C1-6)烷氧羰基(如，異丁氧羰基)、亞丙基、3-苯并[C]呋喃酮亞基、任意取代氨基羰基、或任意取代間二氧雜環(huán)戊烯基(如，5-甲基-2-氧代-1，3-間二氧戊烯-4-基)]任意取代，或由式-OCH(R7)OCOR8表示的基團(tuán)[其中R7為氫原子，C1-6直鏈或支鏈低級(jí)烷基(如，甲基、乙基、正-丙基、異丙基、正-丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、異戊基和新戊基)，或C5-7環(huán)烷基(如，環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基)，R8代表C1-6直鏈或支鏈低級(jí)烷基(如，甲基、乙基、正-丙基、異丙基、正-丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正-戊基、異戊基和新戊基)、C2-8低級(jí)鏈烯基(如，乙烯基、丙烯基、烯丙基和異丙烯基)、C5-7環(huán)烷基(如，環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基)，被C5-7環(huán)烷基(如，環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基)或芳基，如，苯基(如，苯甲基、對(duì)-氯苯甲基、苯乙基、環(huán)戊基甲基和環(huán)己基甲基)取代的C1-3低級(jí)烷基，被C5-7環(huán)烷基(如，環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基)或芳基如，苯基(如，那些含鏈烯基部分，如乙烯基、丙烯基、烯丙基或異丙烯基的基團(tuán)，如，肉桂基)取代的C2-3低級(jí)鏈烯基、芳基，如，任意取代苯基(如，苯基、對(duì)-甲苯基和萘基)，C1-6直鏈或支鏈低級(jí)烷氧基(如，甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異丙氧基、正-丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、異戊氧基和新戊氧基)、C2-8直鏈或支鏈低級(jí)鏈烯氧基(如，烯丙氧基和異丁烯氧基)，C5-7環(huán)烷氧基(如，環(huán)戊氧基、環(huán)己氧基和環(huán)庚氧基)，被C5-7環(huán)烷氧基(如，環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基)或芳基，如，任意取代苯基(如，含有烷氧基部分，如，甲氧基、乙氧基、正-丙氧基或異丙氧基、包括苯甲氧基、苯乙氧基、環(huán)戊甲氧基和環(huán)己甲氧基的基團(tuán))取代的C1-3低級(jí)烷氧基，被C5-7環(huán)烷基(如，環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基)或芳基，如，任意取代苯基(如，含有鏈烯氧基部分，如，乙烯氧基、丙烯氧基、烯丙氧基或異丙烯氧基，如，肉桂氧基的基團(tuán))取代的C2-3低級(jí)鏈烯氧基，或芳氧基，如，任意取代苯氧基(如，苯氧基、對(duì)-硝基苯氧基和萘氧基)]。
當(dāng)式Ⅰ化合物用作前體藥物時(shí)，用Y表示酯化羧基的特別優(yōu)選實(shí)例包括-COOMe，-COOEt，-COOtBu，-COOPr，三甲基乙酰氧基甲氧基羰基，三甲基乙酰氧基甲氧基羰基，1-(環(huán)己氧基羰基氧基)乙氧基羰基，5-甲基-2-氧代-1，3-間二烯戊烯-4-基甲氧基羰基，乙酰氧基甲基氧基羰基，丙?；趸籽趸驶?丁酰基氧基甲氧基羰基，異丁?；趸籽趸驶?，1-(乙氧基羰基氧)乙氧基羰基，1-(乙酰基氧)乙氧基羰基，1-(異丁?；?-乙氧基羰基，環(huán)己基羰基氧基甲氧基羰基，苯甲?；跫籽趸驶夤瘐；驶?，環(huán)戊基羰基氧甲氧基羰基，N，N-二甲基羰基甲氧基，2-(異丁基氧羰基)-2-亞丙基乙氧基羰基，(3-苯并[C]呋喃酮亞基)乙氧基羰基。
在式Ⅰ中，X特別優(yōu)選-COOH，-COOCH3和-CONH2。Y優(yōu)選-COOH或在活體中可轉(zhuǎn)化為-COOH的基團(tuán)，n優(yōu)選1。
式中化合物有很好的活性，其中X為-COOCH3，Y為-COOH或在活體中可轉(zhuǎn)化為-COOH的基團(tuán);A、R10、R12、R13和n分別為上述優(yōu)選基團(tuán)和原子之一。
本發(fā)明的式Ⅰ化合物在分子中有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱碳，本發(fā)明包括R構(gòu)型和S構(gòu)型。
式Ⅰ化合物有時(shí)水合，在下文中將式Ⅰ化合物和其水合物通稱為式Ⅰ化合物。
式Ⅰ化合物的鹽的實(shí)例包括無機(jī)酸鹽，如，鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽和磷酸鹽，有機(jī)酸鹽如，乙酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、甲苯磺酸鹽和甲磺酸鹽，金屬鹽，如，鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽和鉛鹽，和堿鹽如，三乙基胺鹽、胍鹽、銨鹽、肼鹽、奎寧鹽和辛可寧鹽，其可用于藥物。
優(yōu)選化合物的具體實(shí)例包括(S)-4-(4-脒基苯甲?；?L-酪氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸，(S)-4-(4-脒基苯甲?；?L-酪氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸鹽酸鹽和(S)-4-(4-脒基苯甲酰甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸甲磺酸鹽，(S)-4-(4-脒基苯甲?；?0-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰基甲-2-氧代哌嗪-1-乙酸，(S)-4-(4-脒基苯甲?；?O-乙基-L-酪氨酰基)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸和(S)-4-｛4-(2-脒基乙基)苯甲?；?O-甲基-L-酪氨?；?3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸。
本發(fā)明式Ⅰ化合物可用如下方法制備。在下列制備方法的描述中，在初始化合物和中間化合物中的R10、R12和R13可帶有在肽領(lǐng)域中常規(guī)使用的保護(hù)基團(tuán)，在下列描述中也包括這些被保護(hù)的基團(tuán)。忽容置疑，引入和除去這些功能團(tuán)仍按常規(guī)方法進(jìn)行。
化合物(Ⅰ)可通過下列步驟制備(a)將式Ⅱ或Ⅱ′表示的化合物
與式Ⅴ表示的化合物縮合， [其中每個(gè)符號(hào)定義如上所述]為制備本發(fā)明的化合物(Ⅰ)而在上述方法(a)和(b)中的縮合反應(yīng)可通過傳統(tǒng)肽合成中的酰胺鍵的形成而進(jìn)行，例如，用活性酯、混合酸酐或?；鹊姆椒ā＠?，化合物(Ⅱ)和化合物(Ⅲ)之間或化合物Ⅳ和化合物Ⅴ之間的縮合反應(yīng)可通過下列途徑進(jìn)行將化合物(Ⅱ)或化合物(Ⅳ)，在催化劑(如二環(huán)己基碳化二酰亞胺)存在下，與苯酚(如2，4，5-三氯苯酚、五氯代苯酚、2-硝基苯酚或4-硝基苯酚)或N-羥基化合物[如N-琥珀酰亞胺，N-羥基-5-降冰片烯基-內(nèi)-2，3-二羧酰亞胺(HONB)，1-羥基苯并三唑(HOBT)或N-羥基哌啶]縮合而形成其活性酯，再進(jìn)行縮合。同樣，化合物(Ⅱ)或化合物(Ⅳ)也可與異丁基甲酰氯而得到混和酸酐，該酸酐再用于縮合反應(yīng)。
化合物(Ⅱ)和化合物(Ⅲ)之間或化合物(Ⅳ)和化合物Ⅴ之間的縮合也可只用肽合成試劑(如二環(huán)己基碳化二酰亞胺，N，N′-羰基二咪唑，二苯基磷酰基疊氮化物或氰基磷酸二乙基酯)而進(jìn)行。
在所述縮合反應(yīng)中，在化合物(Ⅱ、Ⅲ′)或(Ⅳ)式中的脒基優(yōu)選以無機(jī)酸(如鹽酸、硫酸、硝酸或氫溴酸)鹽形式存在或用叔丁氧羰基或苯甲基氧羰基保護(hù)起來。
上述任一縮合反應(yīng)均可通過加入優(yōu)選的有機(jī)堿(如，三乙胺，N-甲基哌啶，4-N，N-二甲基氨基吡啶)或無機(jī)堿(碳酸氫鈉，碳酸鈉，碳酸鉀)來促進(jìn)。反應(yīng)溫度通常在-20°到50℃，優(yōu)選0°到室溫。通常使用的溶劑實(shí)例包括水、二噁烷、四氫呋喃、乙腈、吡啶、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、N-甲基吡咯烷酮、氯仿和二氯甲烷，這些溶劑可以單獨(dú)使用，也可以混和使用。
可用已知方法除去在上述方法得到產(chǎn)物中的羧基的保護(hù)基團(tuán)(苯甲基或叔丁基，其為通式(Ⅰ)中X或Y的羧基的保護(hù)基團(tuán))和/或酚式羥基或醇或羧基的保護(hù)基團(tuán)(苯甲基或叔丁基，其為通式(Ⅰ)中R10、R12、R13和X的羥基的保護(hù)基團(tuán))。例如，通過在貴金屬催化劑(如鈀或鉑)存在下使化合物氫化，可將含苯甲酯基或苯甲醚基的化合物轉(zhuǎn)變?yōu)轸人嵫苌?通過用酸(如三氟乙酸或鹽酸)可將含有叔丁基酯基或叔丁基醚基的化合物轉(zhuǎn)變?yōu)轸人嵫苌铩?br> 通過制備化合物(Ⅰ)本身的反應(yīng)便可得到化合物(Ⅰ)的鹽，也可通過必要時(shí)加入酸、堿金屬或堿而得到它們。
可通過常規(guī)分離和純化方法將獲得的本發(fā)明化合物(Ⅰ)從反應(yīng)混合物中分離出來，這些方法包括萃取、濃縮、中和、重結(jié)晶、柱層斷和薄層層析。
在化合物(Ⅰ)中，至少存在兩種立體異構(gòu)體。當(dāng)然，這些單一異構(gòu)體或其混合物包括于本發(fā)明的范圍之內(nèi)，必要時(shí)，這些異構(gòu)體可單一地制備。
通過分別用上述初始化合物(Ⅲ)、(Ⅳ)或(Ⅴ)的單一異構(gòu)體和下述初始化合物(Ⅸ)、(Ⅹ)、(Ⅻ)、(ⅩⅢ)、(ⅩⅣ)或(ⅩⅤ)的單一異構(gòu)體進(jìn)行下列反應(yīng)，可獲得化合物(Ⅰ)的單一旋光異構(gòu)體。當(dāng)產(chǎn)物為兩個(gè)或多個(gè)異構(gòu)體的混合物時(shí)，可用常規(guī)分離方法將其分離為獨(dú)立的異構(gòu)體，例如，用光學(xué)活性酸(如，樟腦磺酸、酒石酸和二苯甲?；剖?和光學(xué)活性堿(如，辛可寧、辛可尼定、奎寧、奎尼定、α-甲基苯甲基胺和脫氫樅胺)成鹽方法，或各種色譜方法或分級(jí)重結(jié)晶。
本發(fā)明中初始化合物(Ⅱ)和(Ⅱ′)為已知化合物，可用與已知方法類似的方法制備式(Ⅲ)、(Ⅳ)、(Ⅴ)所表示的初始化合物，針對(duì)應(yīng)用條件，可用下列反應(yīng)路線所標(biāo)示的方法制備它們。在下面描述中，式Ⅲ化合物有時(shí)稱為Ⅲ，對(duì)于其他化合物有時(shí)也是如此。

在上述反應(yīng)式中，R為氨基酸中的氨基保護(hù)基，且代表，如，苯甲基氧基羰基或叔丁氧基羰基。R10、R12、R13和X可有一個(gè)酚式羥基或醇式羥基的保護(hù)基團(tuán)。保護(hù)基團(tuán)的實(shí)例包括叔丁基和任意取代苯甲基。X或Y的羧基可有一個(gè)保護(hù)基，如，苯甲基或叔丁基。
進(jìn)一步解釋上述反應(yīng)式所示的化合物(Ⅲ)的制備方法。通過將化合物(Ⅵ)與(Ⅶ)反應(yīng)而得到化合物(Ⅷ)的反應(yīng)為經(jīng)典的氨基烷基化。更為具體地講，通常在堿(如無機(jī)堿，如，碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀或氟化銫，或有機(jī)堿，如，三乙胺，吡啶或4-N，N-二甲基氨基吡啶)存在下，將化合物(Ⅵ)與化合物(Ⅶ)在0°-100℃反應(yīng)而得到化合物(Ⅷ)。反應(yīng)溶劑由有機(jī)溶劑組成，如，乙腈、N，N-二甲基甲酰胺基、四氫呋喃、甲苯和二氯甲烷。
通過將化合物(Ⅷ)與氨基酸的N-保護(hù)衍生物縮合而進(jìn)一步合成化合物(Ⅹ)的反應(yīng)是利用氨基酸肽鍵合成的經(jīng)典反應(yīng)。制備化合物(Ⅹ)的反應(yīng)實(shí)際上與化合物(Ⅱ)和(Ⅲ)縮合的反應(yīng)條件一樣。
將得到的化合物(Ⅹ)環(huán)化為環(huán)狀化合物(Ⅺ)的反應(yīng)是用酸催化的環(huán)化反應(yīng)。催化劑選用，如有機(jī)磺酸，如，對(duì)-甲苯磺酸、樟腦磺酸和甲磺酸。通常在溶劑(如，甲苯、苯、乙酸乙酯或1，2-二氯乙烷)中，在0°-100℃、優(yōu)選30°-80℃將化合物(Ⅹ)進(jìn)行反應(yīng)而得到化合物(Ⅺ)。
將化合物(Ⅺ)進(jìn)一步還原為化合物(Ⅻ)的反應(yīng)是一個(gè)雙鍵還原反應(yīng)，如，可通過催化還原容易地制備化合物(Ⅻ)，催化劑可選用金屬，如，鉑、銫、阮內(nèi)鎳或在任意載體上其混合物，或使用金屬氫化物，如，硼氫化鈉或氰基硼氫化鈉。上述反應(yīng)通常是在有機(jī)溶劑(如，甲醇、乙醇、二噁烷、乙酸乙酯)存在下進(jìn)行。當(dāng)反應(yīng)溫度隨還原方法而變化時(shí)，通常優(yōu)選-20℃到100℃。雖然此反應(yīng)在常壓可順利地進(jìn)行，但根據(jù)具體條件，其他可在升壓的條件下進(jìn)行。當(dāng)R為苯甲基氧基羰基且在催化條件下進(jìn)行還原，除R的保護(hù)基團(tuán)的反應(yīng)同時(shí)進(jìn)行并可一步獲得化合物(Ⅴ)。
除去化合物(Ⅻ)的保護(hù)基而得到化合物(Ⅴ)和除去化合物(ⅩⅣ)的保護(hù)基而得到化合物(Ⅲ)的反應(yīng)是除去肽中氨基酸的保護(hù)基的經(jīng)典反應(yīng)，當(dāng)R為苯甲基氧代羰基，可用催化還原反應(yīng)將保護(hù)基團(tuán)除去，催化劑選用金屬，如鉑、鈀、銠。當(dāng)R為叔丁氧基羰基，可在有機(jī)溶劑(如，甲醇、乙醇、乙酸乙酯或二噁烷)中，用酸(如，三氟乙酸或鹽酸)將保護(hù)基團(tuán)輕易除去。
化合物(Ⅴ)和氨基酸衍生物(ⅩⅢ)的縮合反應(yīng)與化合物(Ⅱ)與化合物(ⅩⅤ)的縮合反應(yīng)是酰氨鍵形成反應(yīng)。這些反應(yīng)實(shí)際上與化合物(Ⅱ)和化合物(Ⅲ)的縮合反應(yīng)以同樣的方法進(jìn)行。
如，可用與J.Am.Chem.Soc.，77·(1955)發(fā)表的相似方法制備式(Ⅷ)表示的初始化合物。具體地講，通常將酪氨酸或3，4-二羧基苯基丙氨酸(DOPA)(其中氨基被苯甲基氧羰基或叔丁氧羰基所取代)，和硫酸二烷基酯(如，硫酸二甲基酯或硫酸二乙酯)、或烷基鹵化物、酸酐、異氰酸烷基酯、烷基磺酰基鹵化物及其相似物反應(yīng)制備化合物(Ⅷ)，其中R10分別為取代的低級(jí)烷氧基、低級(jí)鏈烯氧基、低級(jí)炔氧基、低級(jí)鏈烷酰氧基、氨基甲酰氧基或烷基磺酰氧基。反應(yīng)在堿(如，無機(jī)堿，包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉和氟化銫，或有機(jī)堿，包括三乙胺、吡啶、4-N，N-二甲基氨基吡啶等)存在下，通常在30°到100℃間進(jìn)行此反應(yīng)。反應(yīng)溶劑選用，如，乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、四氫呋喃、甲苯、二氯甲烷等。
按已知方法制備化合物(ⅩⅢ)，其中R10為低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基或低級(jí)烷基氧羰基，該方法發(fā)表在｛J.Chem.Soc.，Chem.Commun.，904(1987)，J.Am.Chem.Soc.，109，547(1987)或J.Org.Chem.，48，3252(1983)｝。
在式(Ⅷ)表示的化合物中，其中R10為硝基或鹵素原子，R12和R13分別為氫原子;可選用已上市的已知化合物。
通常實(shí)際上可用與合成α-氨基酸的相同方法制備式(ⅩⅢ)所表示的化合物，如，J.Chem.Soc.，70，1451(1948)，Proc.Chem.Soc.，117(1962)t和J.Am.Chem.Soc.，65，2211(1943)。進(jìn)一步講，實(shí)際上可用在已知文獻(xiàn)中發(fā)表的相同方法如，U.S.P 3841966(19966)，制備式(ⅩⅢ)所表示的化合物的不同光學(xué)異構(gòu)體。
在式(ⅩⅣ)所表示的化合物中，可通過用四氧化釕將化合物(ⅩⅣ)(其中R10為乙烯基)氧化后制備R10為甲酰基的化合物。在式(ⅩⅣ)所表示的化合物中，可通過用硼氫化鈉還原化合物(ⅩⅣ)(其中R10為甲?；?而制備R10為羥甲基的化合物。
在式(ⅩⅣ)所表示的化合物中，可按文獻(xiàn)上已知方法制備用作前體藥物的Y為酯化羧基的化合物。文獻(xiàn)指Chem.Pharm Bull.，31，2698(1983)，Chem，Pharm，Bull.，32，2241(1984)，J.Antibiotics，40，81(1987)，J.Antibiotics，45，1358(1992)。具體地講，通常將化合物(ⅩⅣ)(其中Y為羧基)與已發(fā)表的已知鹵代有機(jī)化合物反應(yīng)制備所述化合物，如見｛Chem.Pharm.Bull.，31，2698(1983)，Chem.Pharm.Bull.，32，2241(1984)，J.Antibiotics，40，81(1987)，J.Antibiotics，45，1358(1992)｝，反應(yīng)條件為在堿(如，無機(jī)堿，如，氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉或氟化銫;或有機(jī)堿，如，三乙胺、吡啶、4-N，N-二甲基氨基吡啶)存在下，在-20°到100℃區(qū)間內(nèi)。反應(yīng)溶劑選用N，N-二甲基甲酰胺、乙腈、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氫呋喃等。
在上述制備化合物(Ⅰ)和其中間體的方法中，除非引起不必要效果，反應(yīng)所用化合物一般是其鹽形式，如，無機(jī)酸鹽，如，鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽或磷酸鹽;有機(jī)酸鹽，如，乙酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、甲苯磺酸鹽或甲磺酸鹽;金屬鹽，如鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽或鉛鹽和堿性鹽，如，三乙胺鹽、胍鹽、肼鹽、奎寧鹽或辛可寧鹽。
當(dāng)通過上述制備方法獲得游離的化合物(Ⅰ)時(shí)，可用常規(guī)方法將其轉(zhuǎn)為鹽形式，而當(dāng)?shù)玫交衔?Ⅰ)的鹽時(shí)，也可用常規(guī)方法將其轉(zhuǎn)化為化合物(Ⅰ)。
式(Ⅰ)化合物(包括其水合物)毒性低且可安全使用，其既可抑制血纖維蛋白原、粘連蛋白、Von Willebrand因子與血小板的血纖維蛋白原受體(糖蛋白Ⅱb/Ⅲa)的結(jié)合，也可抑制上述粘著蛋白質(zhì)及其他粘著蛋白質(zhì)(如，Vitronectin膠原和Laminin)與細(xì)胞表面相應(yīng)受體的各種結(jié)合。
因此，本發(fā)明化合物對(duì)細(xì)胞與細(xì)胞之間、和細(xì)胞與基質(zhì)之間的相互作用產(chǎn)生影響。特別是它們抑制血小板凝血酶的生長并可用治療和預(yù)防下列哺乳動(dòng)物(包括人類)疾病，如，周圍動(dòng)脈阻塞、急性心肌梗塞(AMI)、深部靜脈血栓形成、肺栓塞、壁間動(dòng)脈瘤-過性缺血發(fā)作(TIA)、大腦卒中和其他閉塞疾病;不穩(wěn)定絞痛、彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)、膿毒病、外科或傳染性休克、術(shù)后或產(chǎn)后創(chuàng)傷、心肺分流術(shù)、不相容輸血、胎盤脫落、血栓形成性血小板減少性紫癜(TTP)、由凝集過度引起的急性或慢性腎病，如，蛇毒和免疫疾病、炎癥、動(dòng)脈硬化、溶血尿毒癥綜合癥、對(duì)稱肺小葉周圍性壞死和褥瘡。
不僅如此，本發(fā)明化合物(Ⅰ)還可用于增強(qiáng)血栓溶解劑的作用、抑制再阻塞、抑制PTCA后的再阻塞，抑制血小板減少和抑制由人工血管和器官導(dǎo)致的血栓，另外還能阻止轉(zhuǎn)移和用作抗腫瘤劑。
含有式(Ⅰ)化合物(包括其水合物和鹽)的藥物組合物的給藥方式可采用，如，口服給藥，劑型有片劑、漆片、糖衣片、硬和軟明膠膠囊、溶液、乳化劑或混懸劑;或直腸給藥，如，栓劑或氣霧劑?？捎贸Ｒ?guī)方法分別制備上述各種制劑，必要時(shí)可使用賦形劑等。然而也可用非口服制劑給藥，如，注射劑。
為制備片劑、漆片、糖衣片和硬明膠膠囊，可將活性化合物與藥物允許的無機(jī)或有機(jī)賦形劑混和。這些可用于制備片劑、糖衣片、硬明膠膠囊的賦形劑的典型實(shí)例包括乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石和硬酯酸或其鹽。制備軟明膠膠囊的合適賦形劑的實(shí)例為植物油、石蠟、脂肪和半固體或液體多元醇。然而，只要活性化合物能有相應(yīng)的特性，軟明膠膠囊并不一定要加賦形劑。
制備溶液劑和糖漿劑的適宜賦形劑的實(shí)例為水、多元醇、蔗糖、轉(zhuǎn)化糖和葡萄糖。制備注射劑的適宜賦形劑的實(shí)例為水、乙醇、多元醇、甘油和植物油。
制備栓劑的適宜實(shí)例為天然或硬化油、石蠟、脂肪和半固體或流體多元醇。藥物組合物還可含防腐劑、助溶劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑、乳化劑、增甜劑、著色劑、調(diào)味劑、調(diào)節(jié)滲透壓的鹽、緩沖液、包衣劑或抗氧化劑。
用于控制或防止上述疾病的活性化合物的劑量可在一較大范圍內(nèi)變化并應(yīng)調(diào)整以適應(yīng)每一個(gè)體的個(gè)別情況。一般來說，成人每天適宜的口服劑量應(yīng)為約0.01-20mg/kg，優(yōu)選約0.1-4mg/kg。當(dāng)非口服給藥時(shí)，每個(gè)成人每天劑量應(yīng)約為0.005-1.0mg/kg，優(yōu)選約0.01-0.3mg/kg。
本發(fā)明提供可通過控制或阻止細(xì)胞粘著而有效地預(yù)防和治療多種疾病的化合物和藥物。特別是本發(fā)明化合物可通過口服給藥，可長時(shí)間控制由ADP引起的血小板聚集，因此，其可被用作抗血栓劑，而且比具有相似活性的已知物質(zhì)更有效更持久。
下面的試驗(yàn)實(shí)例、參考實(shí)例和工作實(shí)例將更詳細(xì)地描述本發(fā)明，但它們并不以任何方式限制本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例1體外結(jié)合實(shí)驗(yàn)[方法]從豚鼠的加有檸檬酸鈉的血中制備洗過的血小板，將其懸浮于Hepes Tyrode溶液(PH7.5)中并將血小板數(shù)調(diào)至500，000/μl。向70μl該懸浮液加入10μlADP溶液(最終濃度5×10-5M)，在室溫下將混合物放置15分鐘。向混合物加入含有實(shí)驗(yàn)藥物和80μl125Ⅰ-血纖維蛋白原溶液(最終濃度0.1μM)，在室溫將其放置2小時(shí)。向20%蔗糖緩沖液加入100μl反應(yīng)混合物，將其以3000rpm速度離心以將血小板粘著125Ⅰ-血纖維蛋白原從非粘著125Ⅰ-血纖維蛋白原分離出來。測定血小板粘著125Ⅰ-血纖維蛋白原的放射性。通過實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組(用緩沖液處理)的特性結(jié)合的數(shù)值之比，可得到粘著抑制比率。
工作實(shí)例1的化合物的作用為阻止125Ⅰ-血纖維蛋白原與豚鼠活化血小板的特性結(jié)合。
IC50值2.7×10-9M(n＝3;n指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的數(shù)量。在以下實(shí)驗(yàn)實(shí)例中，n也有同樣定義。)實(shí)驗(yàn)實(shí)例2測定體外血小板聚集[方法]對(duì)人而言，血從至少二星期以上未服任何藥物的健康男性志愿者的臂靜脈中采集。對(duì)豚鼠而言，用戊巴比妥(20mg/kg，i.p)麻醉、用檸檬酸鈉作抗凝劑從腹腔主動(dòng)脈采血(最終濃度0.38%，人;0.315%，豚鼠)，在室溫下分別以950rpm離心10分鐘和2000rpm離心10分鐘該加有檸檬酸鈉的血樣，以得到富含血小板血漿(PRP)和乏血小板血漿(PPP)。用PPP稀釋PRP并將血小板數(shù)調(diào)至500，000/μl。按Born′s方法(Nature 194∶927，1962)使用聚集度測定儀(HEMA TRACERVI Toa Iyo Denshi)分光光度計(jì)測定血小板聚集。在37℃培養(yǎng)PRP(250μl)2分鐘，然后加入25μl實(shí)驗(yàn)藥物溶液。2min后，加入25μl引起聚集的試劑。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的最大聚集速率之抑制比率可顯示出該實(shí)驗(yàn)藥物的功效。ADP采用能獲得最大聚集的最小濃度(0.6-1μM)。
工作實(shí)例化合物用ADP對(duì)血小板聚集的抑制效果

實(shí)驗(yàn)實(shí)例3體內(nèi)血小板聚集實(shí)驗(yàn)[方法]給禁食過夜后的豚鼠口服實(shí)驗(yàn)藥物溶液(2ml/kg)。分別在1，4和24小時(shí)從用戊巴比妥麻醉的動(dòng)物上采血。通過上述方法制備PRR并測定由ADP引起的血小板聚集。由實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組得到的聚集速率之比可得到聚集抑制比率。實(shí)驗(yàn)藥物制成蒸餾水溶液口服給藥。
工作實(shí)例1化合物在豚鼠內(nèi)對(duì)ADP聚集的抑制作用3mg/kg P.O. 1小時(shí)后抑制比率100%(n＝4)3mg/kg P.O. 4小時(shí)后抑制比率100%(n＝4)3mg/kg P.O. 24小時(shí)后抑制比率100%(n＝4)工作實(shí)例3的化合物在豚鼠內(nèi)對(duì)ADP聚集的抑制作用.
1mg/kg.P.O. 1小時(shí)后抑制比率95%(n＝6)1mg/kg.P.O. 4小時(shí)后抑制比率100%(n＝6)參考實(shí)例1N-(2，2-二甲氧基乙基)甘氨酸叔丁基酯向含有150g 2，2-二甲氧基乙基胺、200g無水碳酸鉀和1.4升N，N-二甲基甲酰胺的混合物中加入100ml氯代乙酸叔丁基酯。在20-25℃下攪拌。攪拌2小時(shí)后，將100ml氯代乙酸叔丁基酯加入混合物中，在20-25℃下攪拌7小時(shí)。向反應(yīng)混合物加入1.4升冰水并用乙酸乙酯萃取。用飽合含鹽水溶液沖洗有機(jī)相并用無水硫酸鈉干燥，在減壓下蒸出溶劑。在減壓下蒸餾底液并收集沸點(diǎn)在80-85℃(0.4mmHg)的餾分，即為所需產(chǎn)物。產(chǎn)量為163g。NMR譜(CDCl3)δ1.49(S，9H)，2.75(d，J＝5.4Hz，2H)，3.33(S，2H)，3.39(S，6H)，4.47(t，J＝5.4Hz，1H).
參考實(shí)例2(S-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯草酸鹽在冰冷卻攪拌下，向含44gN-(2，2-二甲氧基乙基)甘氨酸叔丁基酯和49.5gN-苯甲基氧羰基-L-天冬氨酸β甲基酯的400ml二氯甲烷溶液中加入44g1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二酰亞胺。在冰冷卻下，將混合物攪拌10分鐘，然后在室溫?cái)嚢?0分鐘。向該反應(yīng)混合物中加入300ml水和振搖過的100ml5%的KHSO4水溶液。分離出有機(jī)相，用200ml二氯甲烷萃取水相。合并有機(jī)相，用水洗凈并用無水硫酸鈉干燥，在減壓下蒸出溶劑。將底液(88g)溶于1升甲苯，向內(nèi)加入4.0g對(duì)-甲苯磺酸;在70-75℃攪拌4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，用碳酸氫鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥，在減壓下蒸餾去溶劑。將底液進(jìn)行硅膠(600ml)柱層析。合并用1升洗脫劑(乙酸乙酯-己烷＝1∶1)洗脫出的餾分并在減壓下濃縮。向底液(68g)的1.5升乙酸乙酯溶液中加入16g10%Pd-C。在氫氣流中劇烈攪拌混合物3小時(shí)。濾去催化劑。向?yàn)V液加入含20.2g草酸二水合物的200ml甲醇溶液，放置混合物。通過過濾收集得到的結(jié)晶沉淀，用乙酸乙酯洗滌，并干燥得到46.8g所需化合物，mP.146-147℃。
比旋度[α]23D-26.0°(c＝0.603，甲醇)C13H22N2O5.C2H2N2O4的元素分析理論值C，47.87;H，6.43;N，7.44實(shí)測值C，47.79;H，6.20;N，7.42參考實(shí)例3(S)-4-L-酪氨?；?3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯乙酸鹽。
在15ml二氯甲烷中溶解1.65g(S)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯和1.9gN-苯甲基氧羰基-L-酪氨酸。攪拌1小時(shí)時(shí)，向溶液加入1.44g1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基)碳化二酰亞胺鹽酸鹽，將混合物攪拌1小時(shí)。在減壓下濃縮反應(yīng)混合物得到油狀物，將其溶于乙酸乙酯。用碳酸氫鉀的5%水溶液洗滌有機(jī)相，并用無水硫酸鎂干燥，在減壓下蒸去溶劑。將底液在硅膠柱上層析(洗脫液乙酸乙酯∶己烷＝7∶3)而得到2.0g無色油狀產(chǎn)物(S)-4-(N-苯甲基氧羰基-L-酪氨?；?-3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯。
IR γmaxcm-13332，2952，1740，1646，1613，1514，1444，1367，1227，1153.
NMR(CDCl3)δ1.46(9H，s)，2.30-2.53(1H，m)，2.72-3.13(5H，m)，3.50-3.72(2H，m)，3.63(3H，s)，3.85(1H，d，J＝12Hz)，4.07(1H，d，J＝12Hz)，4.70-4.90(1H，m)，4.90-5.05(1H，m)，5.11(2H，s)，5.50-5.67(2H，m)，6.76(2H，d，J＝8.2Hz)，7.03(2H，d，J＝8.2Hz)，7.36(5H，s).
在氫氣流中將含1.3g得到的(S)-4-(N-苯甲基氧羰基-L-酪氨?；?-3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯、300mg10%的Pd-C，180mg乙酸、20ml甲醇的混合物攪拌30分鐘濾去催化劑，在減壓下濃縮濾液而得到1.0g無色油狀物(S)-4-L-酪氨?；?3-甲氧基羰基甲基-2-氧代-哌嗪-1-乙酸叔丁基酯乙酸鹽。該產(chǎn)品無需純化便可用于以后的反應(yīng)。
工作實(shí)例1(S)-4-(4-脒基苯甲?；?L-酪氨?；?-3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸鹽酸鹽。
在20ml水和10ml二噁烷的混合溶液中溶解1.0g(S)-4-L-酪氨?；?3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯和380mg碳酸氫鈉。在劇烈攪拌下，在10分鐘之內(nèi)，向此溶液加入505mg4-脒基苯甲酰基氯鹽酸鹽。攪拌混合物1小時(shí)，然后在減壓下濃縮反應(yīng)混合物。向濃縮液加入10ml三氟乙酸，攪拌混合物1小時(shí)。在減壓下將反應(yīng)混合物濃縮至干燥，將其溶于5ml1N的HCl。將溶液過Wakogel LP-C18柱(洗脫液乙腈的7.5%水溶液)。收集所需餾分并冷凍干燥而得到550mg無色粉狀的所需化合物。
比旋度[α]23D-91°(c＝0.2，H2O)C26H29N5O8.HCl(576.0)的元素分析
理論值C，54.22;H，5.25;N，12.16實(shí)測值C，53.94;H，5.31;N，11.93參考實(shí)例4(S)-4-O-叔丁基-L-酪氨酰基-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯乙酸鹽按實(shí)際上與參考實(shí)例3的相同方法，加入1.87g(3)-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯和2.43gN-苯甲基氧代羰基-O-叔丁基-L-酪氨酸而得到3.2g無色油狀產(chǎn)物(S)-4-(N-苯甲基氧代羰基-O-叔丁基-L-酪氨酰基)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯。
IR γmaxcm-13300.2980.1740，1655，1505，1440，1365，1237，1160.
NMR(CDCl3)δ1.31(9H，s)，1.46(9H，s)，2.35-2.51(1H，mu)，2.70-3.18(5H，m)，3.57-3.70(2H，m)，3.63(3H，s)，3.81(1H，d，J＝17Hz)，4.02(1H，d，J＝17Hz)，4.75-4.88(1H，mu)，5.00(2H，t，J＝5.2Hz)，5.10(2H，s)，5.65(1H，d，J＝8.8Hz)，6.91(2H，d，J＝8.4Hz)，7.10(2H，d，J＝8.4Hz)，7.35(5H，s).
在氫氣流中，將包括有3.2g獲得的(S)-4-(N-苯甲基氧代羰基-O-叔丁基-L-酪氨?；?-3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯、1.0g10%的Pd、300mg乙酸、50ml甲醇的混合物攪拌30分鐘。濾掉催化劑。減壓濃縮濾液而得到2.80g無色油狀的所需化合物。
該產(chǎn)物就此可用于后面的反應(yīng)。
工作實(shí)例2(S)-4-(4-脒基苯甲?；?L-酪氨?；?3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸。
在40ml水和20ml二噁烷的混合液中，溶入2.80g在參考實(shí)例4中得到的(S)-4-O-叔丁基-L-酪氨酰基-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸乙酸鹽和840mg碳酸氫鈉。在劇烈攪拌下，在20分鐘內(nèi)，向溶液加入1.1g4-脒基苯甲酰氯鹽酸鹽。在減壓下濃縮此反應(yīng)混合物而得到粗產(chǎn)物，將其溶于30ml三氟乙酸。放置溶液1小時(shí)，在減壓下濃縮。用MCIGEL CHP 2OP柱(乙腈10%水溶液)純化濃縮液。濃縮含有所需化合物的餾分，在水-甲醇中重結(jié)晶而得到1.9g無色晶體的所需化合物，m.p.229-235℃。
比旋度[α]20D+82°(c＝1.0，H2O)C26H29N5O8.3/2H2O的元素分析理論值C，55.12;H，5.69;N，12.36實(shí)測值C，55.38;H，5.66;N，12.40參考實(shí)例5(S)-4-O-甲基-L-酪氨?；?3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯乙酸鹽。
按實(shí)際與參考實(shí)例3所述的相同方法，將參考實(shí)例2得到的(S)-3-甲氧羰基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯和N-苯甲基氧羰基-O-甲基-L-酪氨酸縮合。將此縮合物催化還原而得到無色油狀的(S)-4-O-甲基-L-酪氨?；?3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯乙酸鹽。產(chǎn)率為85%。
通過實(shí)際上與前述相同的方法，得到下列無色油狀的參考實(shí)例6-9的化合物

參考實(shí)例10(S)-4-L-3，4-二甲氧基苯丙氨酰-3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸三氟乙酸鹽。
將(S)-3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯和N-叔丁氧羰基-L-3，4-二甲氧苯基丙氨酸縮合，在二氯甲烷中，將其與三氟乙酸反應(yīng)。減壓蒸去溶劑得到無色油狀的所需化合物。此產(chǎn)物無需純化，可直接用于后面的反應(yīng)中。
參考實(shí)例11(S)-4-L-3，4-二乙氧基苯丙氨酰基-3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸三氟乙酸鹽。
按實(shí)際與參考實(shí)例10的相同方法，可從(S)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯和N-叔丁氧羰基-L-3，4-二乙氧苯基丙氨酸制備標(biāo)題化合物。
參考實(shí)例12(S)-3-叔丁氧基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯草酸鹽按實(shí)際與參考實(shí)例2的相同方法，從N-(2，2-二甲氧乙基)甘氨酸叔丁基酯和N-苯甲基氧代羰基-O-叔丁基-L-絲氨酸合成標(biāo)題化合物，M.p.178-180℃。
比旋度[α]20D-30.4°(c＝1.0，DMSO)C15H28N2O4·0.5H2O的元素分析
理論值C，51.12;H，7.82;N，7.01實(shí)測值C，51.40;H，7.71;N，6.94參考實(shí)例13(S)-3-(4-叔丁氧苯甲基)-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯按實(shí)際與參考實(shí)例2中的相同方法，從N-2，2-二甲氧乙基甘氨酸和N-苯甲基氧代羰基-O-叔丁基-L-酪氨酸合成標(biāo)題化合物，M.p.124-126℃。
比旋度[α]20D-81.7°(c＝0.97，CHCl3)C21H32N2O4的元素分析理論值C，66.99;H，8.57;N，7.44實(shí)測值C，66.92;H，8.54;N，7.38按實(shí)際與參考實(shí)例3相同的方法將從參考實(shí)例12和參考實(shí)例13得到的化合物分別與N-苯甲基氧代羰基-O-叔丁基-L-酪氨酸縮合，催化還原后分別得到參考實(shí)例14和15的化合物。
參考實(shí)例14(S)-4-O-叔丁基-L-酪氨?；?3-叔丁氧甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯乙酸鹽參考實(shí)例15(S)-4-O-叔丁基-L-酪氨酰基-3-(4-叔丁氧基苯甲基)-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯乙酸鹽工作實(shí)例3(S)-4-(4-脒基苯甲?；?O-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸按實(shí)際與工作實(shí)例2相同的方法，將參考實(shí)例5得到的(S)-4-O-甲基-L-酪氨?；?3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯與4-脒基苯甲?；瓤s合，用三氟乙酸除去保護(hù)基。用MCl GEL CHP2OP柱(Mistsubishi Chemical Industries，Ltd.)(洗脫液H2O→5%CH3CN→10%CH3CN)方法純化所得的化合物，在水-乙醇中重結(jié)晶而得到無色結(jié)晶的所需化合物，產(chǎn)率為66%，M.p.208-212℃。
比旋度[α]20D-76.7°(c＝1.035，DMSO)C27H31N5O8.3H2O的元素分析理論值C，53.37;H，6.14;N，11.53實(shí)測值C，53.15;H，6.14;N，11.36按實(shí)際與上述同樣的方法，按實(shí)際與工作實(shí)例3相同的方法由分別從參考實(shí)例5，6，7，8，9，10，11，14，15得到的化合物和4-脒基苯甲酰氯可得到工作實(shí)例4-11的化合物。


按與參考實(shí)例5相同的方法可得到無色油狀的參考實(shí)例15-20的化合物。

按與參考實(shí)例10相同方法可得到無色油狀的參考實(shí)例21-26的化合物。
<p>按與實(shí)例2相同方法，分別用4-脒基苯甲酰基氯和參考實(shí)例15-20的化合物制備實(shí)例12-17的化合物。

按與實(shí)例2相同方法，分別用4-脒基苯甲?；群蛥⒖紝?shí)例21-26的化合物制備實(shí)例18-23的化合物。

實(shí)例24(S)-4-｛4-脒基苯甲?；?(3，4-二羥基)-DL-苯基丙氨?；?3-甲氧羰基-2-氧代哌嗪-1-乙酸按實(shí)際與參考實(shí)例5和實(shí)例3相同方法，用由參考實(shí)例2得到的(S)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-乙酸叔丁基酯草酸鹽、N-苯甲基氧羰基-3，4-二(甲氧甲基氧)-DL-苯基丙氨酸和4-脒基苯甲?；戎苽錈o色非晶型粉狀的標(biāo)題化合物。
比旋度[α]20D 64.2°(c＝0.5，H2O)元素分析C26H29N5O9·2H2O理論值C，52.79;H，5.62;N，11.84實(shí)測值C，52.83;H，5.75;N，11.66實(shí)例25(S)-4-｛4-脒基苯甲酰基-(4-氯)-DL-苯基丙氨?；?3-甲氧羰基-2-氧代哌嗪-1-乙酸按實(shí)際與參考實(shí)例10和實(shí)例2相同的方法，用實(shí)例2得到的(S)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁基酯草酸鹽、N-苯甲基羰基-4-氯-DL-苯基丙氨酸和4-脒基苯甲?；戎苽錈o色非晶型粉狀的標(biāo)題化合物。
比旋度[α]20D 56.8°(c＝0.45，H2O)元素分析C26H28ClN5O7·H2O理論值C，54.22;H，5.25;N，12.16
實(shí)測值C，53.98;H，5.31;N，12.33參考實(shí)例27N-叔丁氧基羰基-L-酪氨酸乙酯在125.0ml水和125.0ml1，4-二噁烷的混合物中溶入25.0g-L-酪氨酸乙酯鹽酸鹽和9.41g碳酸氫鈉。在室溫?cái)嚢柘?，向此液中加?5.7ml二碳酸二叔丁酯。攪拌此混合物1小時(shí)，與二氯甲烷一起振搖以進(jìn)行萃取。在減壓下濃縮有機(jī)相。將底物溶于少量乙酸乙酯，加入石油醚結(jié)晶。
m.p.83-86°比旋度[α]20D 41.7°(c＝1.0，CHCl3)元素分析C16H22NO5·0.1H2O理論值C，61.96;H，7.21;N，4.52實(shí)測值C，61.81;H，7.41;N，4.51參考實(shí)例28N-叔丁氧基羰基-4-三氟甲磺酰氧-L-苯丙氨酸乙酯在97.3ml二氯甲烷中溶入6.0gN-叔丁氧羰基-L-酪氨酸乙酯、3.40ml 2，6-二甲基吡啶和0.48g 4-二甲基氨基吡啶。在-30℃攪拌下，向此溶液逐滴加入4.91ml三氟甲磺酸酐并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。向反應(yīng)溶液加水并與二氯甲烷一起振搖以進(jìn)行萃取。在減壓下濃縮有機(jī)相。用硅膠柱層析(己烷/乙酸乙酯＝4/1)，初步純化濃縮液并在(乙酸乙酯/戊烷)中結(jié)晶而得到4.9g(57.2%)淺紅色結(jié)晶狀的標(biāo)題化合物。
m.p.49-50℃比旋度[α]20D+32.37°(c＝1.0，CHCl3)元素分析C17H21F3NO7S理論值C，46.36;H，4.81;N，3.18實(shí)測值C，46.52;H，5.07;N，3.13參考實(shí)例29N-叔丁氧羰基-4-乙烯基-L-苯基丙氨酸乙酯在49.1mlN，N-二甲基甲酰胺中溶入2.89g乙基N-t丁氧羰基-4-三氟甲磺酰氧基-L-苯基丙氨酸乙酯、834mg氯化鋰，92.1mg雙(三苯基膦)氯化鈀(Ⅱ)、145mg 2，6-二-叔丁基-4-甲基苯酚和1.99ml乙烯基三丁基錫。在通氮90℃下攪拌溶液2小時(shí)。向反應(yīng)溶液加入3.31ml吡啶和6.61ml氟化吡啶鎓(1.4M四氫呋喃溶液)。在室溫繼續(xù)攪拌混合物18小時(shí)。向反應(yīng)溶液中加水并濾去不溶物。將濾液與乙酸乙酯一起振搖以進(jìn)行萃取。減壓下濃縮有機(jī)相。用硅膠層析(己烷/乙酸乙酯＝4/1)純化濃縮液而得1.65g(78.5%)淺黃色油狀的標(biāo)題化合物。
IRvmax cm-12978，2932，1738，1713，1510，1444，1390，1366，1346，1249，1168，1095，1056，989，906，850，828，777NMR(CDCl3)δ1.24(t，J＝7.2Hz，3H)，1.42(s，9H)，2.90-3.21(m，2H)，4.17(q，J＝7.2Hz，2H)，4.47-4.63(m，1H)，4.90-5.08(m，1H)，5.23(d，J＝10.8Hz，1H)，5.72(d，J＝17.6Hz，1H)，6.69(dd，J＝17.6Hz，J＝11.0Hz，1H)，7.10(d，J＝8.0Hz，2H)，7.34(d，J＝8.2Hz，2H)參考實(shí)例30N-叔丁氧羰基-4-乙烯基-L-苯基丙氨酸在5.17ml溶劑混合物(甲醇∶水＝10∶1)中溶入1.65g N-叔丁氧羰基-4-乙烯基-L-苯基丙氨酸乙酯和0.24g氫氧化鋰一水合物。在室溫?cái)嚢枞芤?0分鐘。用1NHCl將反應(yīng)液調(diào)至PH2-3，與乙酸乙酯一起振搖以進(jìn)行萃取。減壓下濃縮有機(jī)層而得到7.40g(92.7%)無色油狀的標(biāo)題化合物。
IRvmax cm-13428，2978，1714，1511，1442，1393，1366，1249，1164，1055NMR(CDCl3)δ1.42(s，9H)，2.99-3.28(m，2H)，4.53-4.70(m，1H)，4.83-5.04(m，1H)，5.23(d，J＝10.8Hz，1H)，5.73(d，J＝17.6Hz，1H)，6.69(dd，J＝11.0Hz，J＝17.6Hz，1H)，6.40-7.00(br，1H)，7.14(d，J＝8.2Hz，2H)，7.35(d，J＝8.2Hz，2H)
參考實(shí)例31(S)-4-(N-叔丁氧羰基-4-乙烯基-L-苯基丙氨酰基)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯在21.7ml的二氯甲烷溶入2.17g(S)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯草酸鹽和1.40g N-叔丁氧基羰基-4-乙烯基-L-苯基丙氨酸。在水冷卻下，在5分鐘內(nèi)，逐漸向溶液加入1.38g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二酰亞胺鹽酸鹽。在室溫?cái)嚢柙摶旌衔?小時(shí)，然后在減壓下蒸去二氯甲烷。用乙酸乙酯溶解底液，用5%硫酸氫鉀的水溶液和飽合碳酸氫鈉水溶液洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機(jī)相。用(乙酸乙酯/石油醚)使底液結(jié)晶而得到2.04g(75.8%)白色結(jié)晶的標(biāo)題化合物。
m.p.148-152℃比旋度[α]20D+94.3°(c＝0.5%，CHCl3)元素分析C29H41N3O8理論值C，62.24;H，7.38;N，7.51實(shí)測值C，62.01;H，7.51;N，7.47實(shí)例26(S)-4-(4-脒基苯甲?；?L-4-乙烯基苯基丙氨酰基)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸用3.0ml二氯甲烷和3.0ml四氟乙酸的混合液溶解0.60g(S)-4-(N-叔丁氧羰基-4-乙烯基-L-苯基丙氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯。在室溫?cái)嚢璐巳芤?小時(shí)。在減壓下濃縮反應(yīng)液。將甲苯與底液共沸數(shù)次。產(chǎn)物溶于11.1mlH2O和5.6ml 1，4-二噁烷的混合物。在室溫向溶液加入0.45g碳酸氫鈉，室溫下，在5分鐘內(nèi)加入0.35g 4-脒基苯甲?；?。攪拌混合物1小時(shí)并用1NHCl將PH調(diào)至2-3。減壓濃縮反應(yīng)混合物。用CHP-20柱(H2O→5%CH3CN/H2O→10%CH3CN/H2O→15%CH3CN/H2O→20%CH3CN/H2O)純化底液，用1NHCl將其變?yōu)橄鄳?yīng)的鹽酸鹽，冷凍干燥后得到0.39g(58.4%)無色非晶型粉狀的標(biāo)題化合物。
比旋度[α]20D+84.9°(c＝1.0%，H2O)元素分析C28H32N5O7Cl·2.0H2O理論值C，54.06;H，5.83;N，11.26實(shí)測值C，53.82;H，5.52;N，11.11實(shí)例27(S)-4-(4-脒基苯甲?；?L-4-乙炔基苯基丙氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸用50.5ml二甲基甲酰胺溶解2.97g乙基N-叔丁氧羰基-4-三氟甲磺酰氧基-L-苯基丙氨酸酯、857mg氯化鉀、94.6mg雙(三苯基膦)氯化鈀(Ⅱ)、149mg 2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚和2.03ml 乙炔基三丁基錫。90℃下，通氮攪拌溶液2小時(shí)。向反應(yīng)體系加入4.8ml吡啶和9.6ml氟化吡啶鎓(1.4M四氫呋喃溶液)。在室溫繼續(xù)攪拌混合物18小時(shí)。向反應(yīng)溶液加水并濾掉不溶物。濾液與乙酸乙酯一起振搖以進(jìn)行萃取，減壓濃縮有機(jī)相。用硅膠柱層析(己烷/乙酸乙酯＝4/1)純化濃縮液。將此產(chǎn)物和34.3mg氫氧化鋰-水合物溶于0.74ml混合溶劑(甲醇∶水＝10∶1)，在室溫?cái)嚢?5分鐘。用1N HCl將反應(yīng)體系調(diào)至PH2-3并與乙酸乙酯一起振遙以進(jìn)行萃取。減壓濃縮有機(jī)相而得到無色油狀的N-叔丁氧羰基-4-乙炔基-L-苯基丙氨酸。將此產(chǎn)物與0.42g(S)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯草酸鹽溶于4.2ml二氯甲烷。在水冷卻下在5分鐘內(nèi)，逐步向溶液中加入0.24g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二酰亞胺鹽酸鹽。室溫下攪拌混合物1小時(shí)。減壓蒸去二氯甲烷。用乙酸乙酯溶解底液，用5%硫酸氫鉀水溶液和飽合碳酸氫鈉洗滌該溶液。用無水硫酸鎂干燥有機(jī)相然后減壓濃縮。用硅膠層析(己烷/乙酸乙酯＝2/3)純化底液而得到370mg油狀的(S)-4-(N-叔丁氧羰基-4-乙炔基-L-苯基丙氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯。將此產(chǎn)物溶于1.9ml二氯甲烷和1.7ml三氟乙酸混合液。在室溫?cái)嚢?小時(shí)，減壓濃縮反應(yīng)液，與甲苯共沸數(shù)次。底液溶于6.8mlH2O和3.4ml 1，4-二噁烷的混合液。向溶液中加入0.28g碳酸氫鈉，然后，室溫下在5分鐘內(nèi)加入0.22g4-脒基苯甲?；?。攪拌混合物1小時(shí)，用1NHCl調(diào)至PH2-3。減壓濃縮反應(yīng)混合物。用CHP20柱(H2O→5%CH3CN/H2O→10%CH3CN/H2O→15%CH3CN/H2O→20%CH3CN/H2O)純化底液，用1NHCl將其變?yōu)橄鄳?yīng)的鹽酸鹽，冷凍干燥后得到0.13g(3.0%)無色非晶型粉狀的標(biāo)題化合物。
比旋度[α]20D+57.2°(c＝1.0，H2O)元素分析C28H30N5O7Cl·3.0H2O理論值C，52.71;H，5.69;N，10.98實(shí)測值C，52.61;H，5.51;N，11.06參考實(shí)例32N-苯甲基氧代羰基-L-酪氨酸叔丁酯用25.0mlH2O和25.0ml 1，4-二噁烷的混合液溶解5.0gL-酪氨酸叔丁酯和2.65g碳酸氫鈉。在室溫?cái)嚢柘?，向此溶液中加?.51ml苯甲基氧代羰基氯。攪拌混合物15分鐘，與乙酸乙酯一起振搖以進(jìn)行萃取。減壓濃縮有機(jī)相。用硅膠層析(己烷/乙酸乙酯＝2/1)純化濃縮液而得到7.79g淺黃色油狀標(biāo)題化合物。
IRvmax cm-13346，2978，1700，1613，1594，1514，1452，1366，1227，1153，1103，1057，842，751，696NMR(CDCl3)δ1.41(s，9H)，2.83-3.10(m，2H)，4.48(dd，J＝6.2Hz，J＝14.4Hz，1H)，5.08(s，2H)，5.31(d，J＝8.2Hz，1H)，6.22(s，1H)，6.69(d，J＝8.4Hz，2H)，6.97(d，J＝8.4Hz，2H)，7.32(s，5H)參考實(shí)例33
N-苯甲基氧代羰基-4-三氟甲磺酰氧基-L-苯基丙氨酸叔丁酯在210ml二氯甲烷中溶解15.6gN-苯甲基氧代羰基-L-酪氨酸叔丁酯、7.36ml 2，6-二甲吡啶和1.03g 4-二甲基氨基吡啶。在-30℃攪拌下，向溶液逐滴加入10.6ml三氟甲磺酸酐，在室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)。向反應(yīng)混合物加水并與二氯甲烷一起振搖以進(jìn)行萃取。減壓濃縮有機(jī)相。用硅膠層析(己烷/乙酸乙酯＝4/1)純化濃縮物而得到11.39g(53.7%)標(biāo)題化合物。
IRvmax cm-13380，1741，1697，1530，1501，1419，1369，1348，1249，1226，1143，1058，1016，892，712，696，608，498NMR(CDCl3)δ1.37(s，9H)，3.10(d，J＝6.2Hz，2H)，4.52(dd，J＝6.4Hz，J＝14.0Hz，1H)，5.09(dd，J＝12.2Hz，J＝14.0Hz，2H)，5.31(d，J＝7.8Hz，1H)，7.10-7.28(m，4H)，7.35(s，5H)參考實(shí)例34N-苯甲基氧代羰基-4-甲氧基羰基-L-苯基丙氨酸叔丁酯。
在15.0ml甲醇和20.0ml二甲亞砜的混合液中溶入2.0gN-苯甲基氧代羰基-4-三氟甲磺酰氧基-L-苯基丙氨酸叔丁酯、164mg1.3-雙(二苯基膦基)丙烷、89.1mg乙酸鈀(Ⅱ)和1.11ml三乙醇。向混合物中通入一氧化碳至冒泡5分鐘。在80℃一氧化碳中繼續(xù)攪拌混合物2小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加水并與乙酸乙酯一起振搖以進(jìn)行萃取，減壓濃縮有機(jī)相，用硅膠層析(己烷/乙酸乙酯＝3/1)純化底液可得到1.52g(92.7%)無色油狀標(biāo)題化合物。
IRvmax cm-13346，2978，2950，1720，1610，1515，1452，1434，1367，1351，1279，1220，1178，1154，1107，1056，1020，844，751，697NMR(CDCl3)δ1.39(s，9H)，3.00-3.25(m，2H)，3.90(s，3H)，4.56(dd，J＝7.0Hz，J＝13.0Hz，1H)，5.09(dd，J＝15.2Hz，J＝17.0Hz，2H)，5.32(d，J＝8.0Hz，1H)，7.23(d，J＝9.0Hz，2H)，7.34(s，5H)，7.94(d，J＝8.0Hz，2H)參考實(shí)例35N-苯甲基氧代羰基-4-甲氧羰基-L-苯基丙氨酸在2.75ml三氟乙酸和2.75ml二氯甲烷的混合液中溶解0.55gN-苯甲基氧代羰基-4-甲氧羰基-L-苯基丙氨酸叔丁酯。在室溫?cái)嚢柙撊芤?.5小時(shí)，減壓濃縮反應(yīng)混合物并使其與甲苯共沸數(shù)次，用少量乙酸乙酯溶解底液，在石油醚中重結(jié)晶而得到469mg(98.7%)是白色結(jié)晶的標(biāo)題化合物。
比旋度[α]20D+58.6°(c＝0.1，CHCl3)m.p.102-106℃元素分析C19H19NO6理論值C，63.89;H，5.36;N，3.92實(shí)測值C，63.70;H，5.47;N，3.95
參考實(shí)例36(S)-4-(N-苯甲基氧代羰基-4-甲氧羰基-L-苯基丙氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪1-乙酸叔丁酯在7.6ml二氯甲烷中溶解0.76g(S)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯草酸鹽和0.47gN-苯甲基氧代羰基-4-甲氧羰基-L-苯基丙氨酸。在水冷卻下，在5分鐘內(nèi)逐漸向此溶液加入0.44g 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二酰亞胺。在室溫下攪拌混合物1小時(shí)，減壓蒸去二氯甲烷，將底液溶于乙酸乙酯。用5%硫酸氫鉀水溶液和飽合碳酸氫鈉水溶液洗滌此溶液。用無水硫酸鎂干燥有機(jī)相，減壓濃縮。用硅膠層析(己烷/乙酸乙酯＝1/2)純化底液而得到0.46g(51.1%)無色油狀的標(biāo)題化合物。
IRvmax cm-13322，2980，2952，1719，1649，1525，1489，1435，1367，1281，1152，1104，1020，978，846，748，699NMR(CDCl3)δ1.45(s，9H)，2.61-2.72(m，1H)，2.72-3.25(m，5H)，3.63(s，3H)，3.40-4.05(m，4H)，3.90(s，3H)，4.78-5.20(m，4H)，5.61(d，J＝8.0Hz，1H)，7.16-7.46(m，7H)，7.95(d，J＝8.0Hz，2H)實(shí)例28(S)-4-(4-脒基苯甲酰基-L-4-甲氧基羰基苯基丙氨?；?-3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸在4.6ml乙酸乙酯中溶解0.46g(S)-4-(N-苯甲基氧代羰基-4-甲氧基羰基-L-苯基丙氨?；?-3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯，向溶液中加入0.19g10%的Pd-C，在氫氣中攪拌3小時(shí)。濾掉催化劑，濃縮濾液后得到無色油狀產(chǎn)物。將該產(chǎn)物溶于3.0ml二氯甲烷和3.0ml三氟乙酸，在室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)，減壓濃縮反應(yīng)混合物。濃縮液與甲苯共沸數(shù)次。將產(chǎn)物溶于8.1ml水和4.0ml 1，4-二噁烷的混合液中。在室溫，向溶液中加入0.31g碳酸氫鈉，室溫下，在5分鐘內(nèi)再加入0.24g 4-脒基苯甲酰氯。攪拌混合物1小時(shí)，用1N HCl將其調(diào)至PH2-3。減壓濃縮反應(yīng)混合物。用CHP-20柱(H2O→5%CH3CN/H2O→10%CH3CN/H2O→15%CH3CN/H2O→20%CH3CN/H2O)純化濃縮液。用1NHCl將產(chǎn)物轉(zhuǎn)變?yōu)槠潲}酸鹽，冷凍干燥后得到0.26g(53.0%)無色非晶型粉狀的標(biāo)題化合物。
比旋度[α]20D+57.1°(C＝1.0，H2O)元素分析C28H32N5O9·2.5H2O理論值C，50.72;H，5.62;N，10.56實(shí)測值C，50.68;H，5.50;N，10.48參考實(shí)例37(S)-4-(N-叔丁氧羰基-4-甲?；?L-苯基丙氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯在22.1m四氯化碳、22.1ml乙腈和33.2ml水的混合物中溶入2.21g(S)-4-(N-叔丁氧羰基-4-乙烯基-L-苯基丙氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯和3.46g偏高碘酸鈉。在室溫，向溶液加入16.4mg氯化釕(Ⅲ)n水合物。攪拌混合物1小時(shí)。將反應(yīng)混合物和乙酸乙酯一起振搖以進(jìn)行萃取。減壓濃縮有機(jī)相。用硅膠層析(己烷/乙酸乙酯＝1/2)純化底液而得到1.14g(51.4%)無色油狀的標(biāo)題化合物。
IRvmax cm-12978，2934，1740，1702，1654，1605，1489，1436，1366，1247，1228，1157，1047，1016，979，848NMR(CDCl3)δ1.40(s，9H)，1.45(s，9H)，2.66-3.27(m，6H)，3.42-3.93(m，6H)，4.05-4.36(m，1H)，4.72-4.90(m，1H)，4.98(t，J＝5.0Hz，1H)，5.35(d，J＝9.0Hz，1H)，7.34-7.60(m，2H)，7.83(d，J＝8.0Hz，2H)，9.98(s，1H)實(shí)例29(S)-4-(4-脒基苯甲酰基-L-4-甲?；交滨；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸在1.1ml二氯甲烷和1.1ml三氟乙酸的混合物中溶入0.22g(S)-4-(N-叔丁氧基烷羰基-4-甲?；?L-苯基丙氨?；?-3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯。在室溫?cái)嚢枞芤?小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)液并將底液與甲苯一起共沸數(shù)次。將產(chǎn)物溶于4.1ml水和2.0ml 1，4-二噁烷的混合液中。在室溫，向溶液加入0.16g碳酸氫鈉。室溫下，在5分鐘內(nèi)，向混合物中加入0.13g 4-脒基苯甲?；取嚢杌旌衔?小時(shí)并用1NHCl將其調(diào)至PH2-3。減壓濃縮反應(yīng)混合液。用CHP-20柱(H2O→5%CH3CN/H2O→10%CH3CN/H2O→15%CH3CN/H2O)純化底液而得到0.15g(64.9%)白色冷凍干燥后的標(biāo)題化合物。
比旋度[α]20D+28.6°(C＝1.0，H2O)元素分析C27H29N5O8·3.0H2O理論值C，53.55;H，5.83;N，11.56實(shí)測值C，53.61;H，5.74;N，11.68參考實(shí)例38(S)-4-(N-叔丁氧羰基-4-羥基甲基-L-苯基丙氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯在13.0ml甲醇中溶入0.65g(-4-(N-叔丁氧羰基-4-甲?；?L-苯基丙氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯。在0℃攪拌下，向溶液加入21.9mg的硼氫化鈉。在室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)，向反應(yīng)混合物中加水并與二氯甲烷一起振搖以進(jìn)行萃取。減壓濃縮有機(jī)相。用硅膠層析(二氯甲烷/乙酸乙酯＝2/3)純化底液以得到0.56g(85.6%)無色油狀標(biāo)題化合物。
IRvmax cm-13428，2978，2932，1740，1708，1647，1489，1437，1366，1248，1156，1048，1015NMR(CDCl3)δ1.44(s，9H)，1.45(s，9H)，2.18-2.40(m，1H)，2.52-3.25(m，6H)，3.63(s，3H)，3.40-4.02(m，3H)，4.30(d，J＝16.0Hz，1H)，4.63(s，2H)，4.68-4.94(m，2H)，5.23-5.50(m，1H)，7.10-7.40(m，4H)實(shí)例30(S)-4-(4-脒基苯甲?；?L-4-羥基甲基苯基丙氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸。
在2.0ml二氯甲烷和2.0ml三氟乙酸的混合物中溶入0.26g(S)-4-(N-叔丁氧羰基-4-羥甲基-L-苯基丙氨酰基)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯。在室溫?cái)嚢枞芤?小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)混合物并使其與甲苯共沸數(shù)次。將產(chǎn)物溶于4.8ml水和2.4ml 1，4-二噁烷的混合溶劑中。在室溫，向溶液中加入0.19g碳酸氫鈉，室溫下在5分鐘內(nèi)加入0.15g 4-脒基苯甲?；取嚢杌旌衔?小時(shí)，用1N HCl將其PH調(diào)至2-3，減壓濃縮。用CHP-20柱(H2O→5%CH3CN/H2O→10%CH3CN/H2O)純化濃縮液以得到0.17g(60.7%)無色冷凍干燥后的標(biāo)題化合物。
比旋度[α]20D+62.5°(C＝1.0，H2O)元素分析C27H21N5O8·3.0H2O理論值C，53.37;H，6.14;N，11.53實(shí)測值C，53.50;H，5.94;N，11.46
實(shí)例31(S)-4-｛4-(2-脒基乙基)苯甲?；?O-甲基-L-酪氨?；?3-甲氧羰基-2-氧代哌嗪-1-乙酸在5ml二氯甲烷中溶解400mg 4-(2-叔丁氧羰基氨基乙基)苯甲酸和203mg 1-羥基苯并三唑-水合物。在室溫，向溶液中加入402mg 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二酰亞胺。攪拌混合1小時(shí)。向溶液中再加300mg三乙胺。在混合物中加入2ml含有785mg參考實(shí)例5所得的(S)-4-O-甲基-L-酪氨?；?3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯乙酸鹽的二氯甲烷溶液。在室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)，用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物，用飽合碳酸氫鈉水溶液和5%硫酸氫鉀水溶液洗滌，用硫酸鎂干燥;減壓濃縮得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物溶于3ml二氯甲烷和3ml三氟乙酸的混合液中。在室溫將溶液放置1小時(shí)，減壓濃縮。用MCI GEL CHP2OP(Mitsubishi Chemical Industries，Ltd.)(洗脫液H2O→15%CH3CN)純化底液，冷凍干燥后得到490mg無色粉狀的標(biāo)題化合物。
比旋度[α]20D+68.4°(C＝0.45，H2O)元素分析C28H34N4O8·2H2O理論值C，56.95;H，6.48;N，9.49實(shí)測值C，56.80;H，6.61;N，9.20參考實(shí)例39
(S)-4-(N-苯甲基氧代羰基-O-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸向含28.8g(S)-3-甲氧羰基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯、29.0g N-苯甲基氧基羰基-O-甲基-L-酪氨酸和202ml二氯甲烷的混合物中加入15.3g 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二酰亞胺。攪拌混合物2小時(shí)并減壓濃縮。將底液溶于乙酸乙酯。用5%硫酸氫鉀水溶液和飽合碳酸氫鈉洗滌該溶液，減壓濃縮有機(jī)相而得到37.5g粗品(S)-4-(N-苯甲氧基羰基-O-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸叔丁酯。將該產(chǎn)物溶于74.0ml二氯甲烷并加入74.0ml三氟乙酸。在室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)液。將底液與甲苯共沸數(shù)次而得到39.12g無色油狀的標(biāo)題化合物。
IRvmax cm-13422，1720，1643，1512，1438，1299，1246，1177，1027，980，823，740，696NMR(CDCl3)δ2.30-2.90(m，6H)，2.90-3.83(m，7H)，3.71(s，3H)，3.90-4.15(m，1H)，4.50-4.75(m，1H)，4.80-4.95(m，1H)，4.96(s，2H)，6.81(d，J＝8.6Hz，2H)，7.10-7.40(m，7H)參考實(shí)例40(S)-4-(N-苯甲基氧代羰基-O-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸二甲基氨基羰基甲基酯。
在7.39mlN，N-二甲基甲酰胺中溶入2.0g(S)-4-(N-苯甲基氧代羰基-O-甲基-L-酪氨酰基)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸、83.0mg碘化鈉和563μlN，N-二甲基氨基羰基甲基氯。在室溫?cái)嚢柘拢蛉芤杭尤?72μl三乙胺。攪拌混合物6小時(shí)，然后加水。將混合物與乙酸乙酯一起振搖以進(jìn)行萃取。減壓濃縮有機(jī)相。用硅膠層析(二氯甲烷/甲醇＝13/1)純化底液以得到1.57g(68.0%)無色油狀標(biāo)題化合物。
IRvmax cm-12944，1738，1651，1511，1437，1343，1246，1202，1028，821，748，697NMR(CDCl3)δ2.47-2.68(m，1H)，2.76-3.23(m，5H)，2.95(s，3H)，2.96(s，3H)，3.58-3.84(m，2H)，3.63(s，3H)，3.77(s，3H)，4.04(d，J＝17.0Hz，1H)，4.34(d，J＝17.0Hz，1H)，4.72-4.89(m，3H)，4.92-5.06(m，1H)，5.09(s，2H)，5.54(d，J＝10Hz，1H)，6.80(d，J＝8.4Hz，2H)，7.08(d，J＝8.4Hz，2H);7.36(s，5H)按實(shí)際與參考實(shí)例40相同的方法，可得到無色油狀的參考實(shí)例41-43的化合物。

實(shí)例32(S)-4-(4-脒基苯甲?；?O-甲基-L-酪氨酰基)-3-甲氧羰甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸二甲基氨基羰基甲基酯鹽酸鹽在15.0ml甲醇中溶解1.80g(S)-4-(N-苯甲基氧代羰基-O-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸二甲基氨基羰基甲基酯。向溶液中加入6.0g10%的Pd-C。通氫氣在室溫下，攪拌混合物1.5小時(shí)。濾掉催化劑，減壓濃縮濾液。將產(chǎn)物溶于11.4ml水和5.7ml 1，4-二噁烷的混合溶劑。室溫下，在5分鐘內(nèi)向溶液中加入0.29g碳酸氫鈉和0.38g 4-脒基苯甲?；塞}酸鹽。攪拌混合物1小時(shí)，將PH調(diào)至2-3，減壓濃縮。用CHP-20柱(H2O→5%CH3CN/H2O→10%CH3CN/H2O→15%CH3CN/H2O)和LH-20柱(H2O)純化底液而得到冷凍干燥后的0.43g(50.8%)白色標(biāo)題化合物。
比旋度[α]20D+73.10°(C＝0.71，H2O)元素分析C31H39N6O9Cl·3.0H2O(729，183)理論值C，51.06;H，6.22;N，11.53實(shí)測值C，51.15;H，5.94;N，11.54由參考實(shí)例41，42和43的化合物可通過實(shí)際與實(shí)例32相同的方法得到實(shí)例33-35化合物。

通過實(shí)際與實(shí)例36相同的方法，可從參考實(shí)例41，42和43的化合物得到實(shí)例37-39化合物。

參考實(shí)例44(S)-4-(N-叔丁氧羰基-O-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸在300ml甲醇中溶解19g(S)-4-(N-苯甲基氧基羰基-O-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸。向溶液中加入2.5g10%Pd-C，在通氫下攪拌混合物1.5小時(shí)。濾去催化劑并減壓濃縮濾液。將底液溶于200ml水和50ml 1，4-二噁烷混合物中并加入7.36ml三乙胺。在冰冷卻下，向混合物加入8.4g二叔丁基二碳酸鹽用5%硫酸氫鉀將反應(yīng)混合物調(diào)至PH2，用乙酸乙酯萃取并用無水硫酸鈉干燥。減壓濃縮萃取液而得到16.5g無色粉狀的粗品標(biāo)題化合物。
IRvmax cm-13400，2975，1735，1710，1665，1510，1440，1365，1300，1245，1210，1170，1030NMR(CDCl3)δ1.42(s，9H)，2.30-4.20(m，10H)，3.64(s，3H)，3.76(s，3H)，4.76(m，1H)，4.99(t，J＝5.2Hz，1H)，5.12(d，J＝8.4Hz，1H)，6.82(d，J＝8.4Hz，2H)，7.09(d，J＝8.4Hz，2H)參考實(shí)例45(S)-4-(N-叔丁氧羰基-O-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸(3-苯并[c]呋喃酮亞基)乙酯在8.66ml N-二甲基甲酰胺中溶解2.2g(S)-4-(N-叔丁氧羰基-O-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸和1.52g碳酸氫鉀。在0℃攪拌下，向溶液中加1.55g(z)-3-(2-溴代亞乙基)-2-苯并[c]呋喃酮。室溫下攪拌混合物2小時(shí)，加水并與乙酸乙酯一起振搖以進(jìn)行萃取，減壓濃縮有機(jī)相。用硅膠層析(二氯甲烷/乙酸乙酯＝6/3.5)純化底液而得到1.82g無色油狀的標(biāo)題化合物(63.2%)。
IRvmax cm-12976，2948，1786，1740，1705，1650，1512，1438，1363，1246，1177，978，819，764，690，635NMR(CDCl3)δ1.43(s，9H)，2.37-2.58(m，1H)，2.76-3.30(m，5H)，3.50-3.90(m，2H)，3.65(s，3H)，3.78(s，3H)，4.09(dd，J＝17.0Hz，J＝24.6Hz，2H)，4.64-4.82(m，1H)，4.92-5.11(m，3H)，5.36(d，J＝8.0Hz，1H)，5.75(t，J＝7.4Hz，1H)，6.83(d，J＝8.4Hz，2H)，7.03-7.26(m，2H)，7.53-7.83(m，3H)，7.92(d，J＝8.2Hz，1H)通過實(shí)際與參考實(shí)例45相同的方法，可得到無色油狀的參考實(shí)例46和47的化合物。

實(shí)例40(S)-4-(4-脒基苯甲?；?O-甲基-L-酪氨酰基)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸(3-苯并[c]呋喃酮亞基)乙酯鹽酸鹽在5.1ml二氯甲烷和5.1ml三氟乙酸的混合液中溶解1.71g(S)-4-(N-叔丁氧羰基-O-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸(3-苯并[c]呋喃酮亞基)乙酯。在室溫?cái)嚢柙撊芤?.0小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)溶液。將底液與甲苯共沸數(shù)次。在17.0ml水和8.5ml 1，4-二烷的混合溶劑中溶解850mg產(chǎn)物。在室溫，向溶液中加入0.53g硫酸氫鈉，室溫下，在分鐘內(nèi)加入0.41g 4-脒基苯甲?；塞}酸鹽。攪拌混合物1小時(shí)，用1N HCl將其PH調(diào)至2-3，減壓濃縮反應(yīng)混合物。用CHP-20柱(H2O→5%CH3CN/H2O→10%CH3CN/H2O→15%CH3CN/H2O→20%CH3CN/H2O→25%CH3CN/H2O→30%CH3CN/H2O)、LH-20柱(MeOH)和硅膠層析(CH3CN/H2O＝5/1)純化濃縮液而得到冷凍干燥后的0.27g(26.0%)標(biāo)題化合物。
比旋度[α]20D+51.5°(C＝0.77，H2O)元素分析C37H37N5O10·0.7HCl·0.3CF3CO2H·3.5H2O(834，510)理論值C，84.12;H，5.43;N，8.39實(shí)測值C，54.11;H，5.21;N，8.64通過實(shí)際與實(shí)例40相同的方法，可由參考實(shí)例46和47化合物得到實(shí)例41和42的化合物。

實(shí)例43(S)-4-｛4-(2-氨乙基)苯甲?；?O-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸(3-苯并[c]呋喃亞基)乙酯鹽酸鹽在5.1ml二氯甲烷和5.1ml三氟乙酸的混合物中溶解1.71g(S)-4-(N-叔丁氧羰基-O-甲基-L-酪氨酰基)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸(3-苯并[c]呋喃酮亞基)乙酯。在室溫，攪拌溶液1小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)混合并與甲苯共沸數(shù)次。將產(chǎn)物(860mg)溶解于4.3ml二氯甲烷和531μl三乙胺的混合物加入0.2g 1-羥基苯并三唑、0.37g 4-(2-叔丁氧羰基氨基乙基)苯甲酸和0.28g 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二酰亞胺。攪拌混合物1小時(shí)，減壓濃縮反應(yīng)溶液。將底液溶于乙酸乙酯，用5%硫酸氫鉀和飽合碳酸氫鈉水溶液洗滌。減壓濃縮有機(jī)相。用硅膠層析(二氯甲烷/乙酸乙酯＝1/4)粗純化濃縮液。將產(chǎn)物溶于2.46ml二氯甲烷和2.64ml三氟乙酸的混合物。減壓濃縮反應(yīng)溶液并與甲苯共沸數(shù)次，用1N HCl將其轉(zhuǎn)變?yōu)辂}酸鹽。用CHP-20柱(H2O→5%CH3CN/H2O→10%CH3CN/H2O→15%CH3CN/H2O→20%CH3CN/H2O→25%CH3CN/H2O→30%CH3CN/H2O)、LH-20柱(MeOH)純化底液而得到冷凍干燥后的0.22g(24.7%)白色白標(biāo)題化合物。
比旋度[α]20D+49.3°(C＝0.31，H2O)元素分析C38H40N4O10·0.7HCl·0.3CF3CO2H·2.0H2O(808，515)理論值C，57.34;H，5.61;N，6.93
實(shí)測值C，57.02;H，5.35;N，6.81通過實(shí)際與實(shí)例43相同的方法，由參考實(shí)例46和47的化合物得到實(shí)例44和45化合物。
當(dāng)本發(fā)明的化合物(Ⅰ)用作治療，如，血栓癥的藥劑時(shí)，可用，如，下列處方。
1.片劑(1)(S)-4-(4-脒基苯甲?；?L-酪氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸 10g(2)乳糖 90g(3)玉米淀粉 29g(4)硬脂酸鎂 1g130g將全量的(1)和(2)與17g的(3)混和，用由7g(3)制成的湖膏將混和物制粒。將顆粒與5g(3)和全量的(4)混合。在壓片機(jī)上將混合物擠壓成型得到1000片，直徑為7mm，每片含10mg(1)的藥片。
2.注射劑(1)(S)-4-(4-脒基苯甲酰基-L-酪氨?；?-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸 10g(2)氯化鈉 9g將全量的(1)和(2)溶于1000ml蒸餾水。在1000個(gè)棕色安瓿瓶中，每個(gè)加入1ml此溶液。用氮?dú)庵脫Q安瓿瓶中的空氣并將安瓿瓶封口。全部過程在無菌條件下進(jìn)行。
3.片劑(1)(S)-4-(4-脒基苯甲?；?O-甲基-L-酪氨?；?-3-甲氧基羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸 10g(2)乳糖 90g(3)玉米淀粉 29g(4)硬脂酸鎂 1g將全量的(1)和(2)與17g(3)混和并用由7g(3)制備的湖膏將混合物制粒。將顆粒與5g(3)和全量(4)混合。在壓片機(jī)上將全部混和物擠壓成型得到1000片，直徑為7mm，每片含10mg(1)的藥片。
4.注射劑(1)(S)-4-(4-脒基苯甲?；?O-甲基-L-酪氨酰基)-3-甲氧羰基甲基-2-氧代哌嗪-1-乙酸 10g(2)氯化鈉 9g將全量(1)和(2)溶于1000ml蒸餾水中，在1000個(gè)棕色安瓿瓶中，每個(gè)放入1ml此溶液。用氮?dú)庵脫Q安瓿瓶裝中的空氣并將安瓿瓶封口。全部過程在無菌條件下進(jìn)行。
權(quán)利要求
1.如下分子式的化合物或其鹽 其中A為脒基或任意取代的氨乙基；R12為下列基團(tuán)組之一鹵素原子、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、低級(jí)烷氧羰基、羥甲基、甲?；褪絆R11所示基團(tuán)，其中R11為氫原子或低級(jí)烷基、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、低級(jí)鏈烷?；?、氨基甲?；蚣谆腔?，其中任一基團(tuán)均可被取代；R12和R13分別為氫原子、羥基、低級(jí)烷氧基或鹵素原子；X為羥基、對(duì)-羥基苯基或任意酯化或酰胺化的羧基；Y為任意酯化或酰胺化的羧基；n為1或2。
2.權(quán)利要求1所述化合物中R10為下列基團(tuán)組之一羥基、被C1-3烷氧基任意取代的C1-5烷氧基、C2-3鏈烯氧基、C2-3炔氧基、硝基、鹵素原子、C1-3鏈烷酰氧基、被C1-3烷基任意取代的氨基甲酰氧基、甲磺酰氧基、C2-3鏈烯基、C2-3炔基、C1-3烷氧羰基、羥甲基和甲?；?。
3.權(quán)利要求1所述化合物中R10為羥基或甲氧基。
4.權(quán)利要求1所述化合物中R10為乙氧基、甲氧乙氧基、丙氧基、炔丙氧基、烯丙氧基、氟原子或氯原子。
5.權(quán)利要求1所述化合物中R12和R13均為氫原子。
6.權(quán)利要求1所述化合物中n為1
7.權(quán)利要求1所述化合物中A為脒基;R10為羥基或甲氧基;R12和R13均為氫原子;n為1。
8.權(quán)利要求1所述化合物中A為脒基;R10為乙氧基、炔丙氧基、烯丙氧基或氟原子;R12和R13均為氫原子;n為1。
9.權(quán)利要求1所述化合物中A為氨乙基;R10為羥基或甲氧基;R12和R13均為氫原子;n為1。
10.權(quán)利要求1所述化合物中A為氨乙基;R10為乙氧基、炔丙氧基、烯丙氧基或氟原子;R12和R13均為氫原子;n為1。
11.權(quán)利要求7所述化合物中X為-COOCH3和Y為-COOH或可在活體轉(zhuǎn)為羧基的基團(tuán)。
12.含有權(quán)利要求1所述化合物的細(xì)胞粘著抑制劑。
13.下列分子式的化合物及其鹽 其中R11為氫原子、任意取代低級(jí)烷基、低級(jí)鏈烷?；腿我馊〈陌被柞；旒谆酋；?R12和R13分別為氫原子、羥基、低級(jí)烷氧基或鹵素原子;X為羥基、對(duì)-羥基苯基或任意酯化或酰胺化羧基;Y為任意酯化或酰胺化羧基;n為1或2。
14.制備權(quán)利要求1所要求的化合物的方法包括a.將下式化合物 [其中W為氫原子]與下式化合物 [其中每個(gè)符號(hào)與前述定義相同]縮合，b.將下式化合物 [其中每個(gè)符號(hào)與前述定義相同]與下式化合物。 [其中每個(gè)符號(hào)與前述定義相同]縮合。
15.權(quán)利要求1所述化合物用作細(xì)胞粘著抑制劑
16.權(quán)利要求1所述化合物用作抗血栓劑。
17.預(yù)防和治療由細(xì)胞粘著引起的疾病的方法，包括給哺乳動(dòng)物服用有效劑量的權(quán)利要求1所述化合物和藥物允許的賦形劑。
18.預(yù)防和治療血栓的方法，包括給哺乳動(dòng)物服用有效劑量的權(quán)利要求1所述化合物和藥物允許的賦形劑。
全文摘要
下式化合物及其鹽其中A為脒基或任意取代氨乙基；R
文檔編號(hào)A61K38/00GK1098409SQ94106799
公開日1995年2月8日 申請(qǐng)日期1994年6月17日 優(yōu)先權(quán)日1993年6月17日
發(fā)明者杉原弘貞, 寺下善一, 福士英人 申請(qǐng)人:武田藥品工業(yè)株式會(huì)社