專利名稱：哥倫比亞甙制劑及其制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及羌活類中藥植物制備哥倫比亞甙(又稱二氫歐山芹醇β-葡萄糖甙)的工藝方法，以及該制劑在治療心律失常疾病中的應用。
羌活為傘形科植物NotopterygiumincisumTinget.H.Tchang的根及根莖部分。中醫(yī)認為有散寒、祛風、除濕、止痛之功能，臨床用于風寒感冒頭痛、風濕痹痛、肩背酸痛等癥的治療，經(jīng)查閱中醫(yī)文獻證實，羌活除用于外感風邪治療外還有一些作用如“心血和”、“疏導心血”等，與現(xiàn)代醫(yī)學治療心臟病的作用似有相同之處。
化學研究表明應用硅膠、氧化鋁柱層析的方法分離單一成分，再通過紫外、紅外、核磁共振、質(zhì)譜和其它分析方法，從羌活的乙醇提取部分共分離鑒定了β-谷甾醇(β-sitosterol)5-羥基-8-1(1′，1′-二甲基丙烯基)補骨脂內(nèi)酯5-hydroxy-8-(1′1′-dimethylallyl)Psoralew異紫花前胡甙元(marmesin)歐芹屬素乙(imperatorin)，哥倫比亞甙元(Columbianetin)，哥倫比亞甙(columblananin)，六種化學成分(中藥通報1985年3期31頁)，藥理實驗表明羌活水溶部分對烏頭堿引起的小白鼠、大白鼠實驗性心律失常及氯仿-腎上腺素所致家兔實驗性心律失常均有明顯的對抗作用，(中藥通報1987年12期45頁)。但提取和分離抗心律失常的有效成份，因難度大，而至今未見有關(guān)報道。
祖國醫(yī)藥學是一個豐富的寶庫，羌活做為一種常用中藥已被應用了數(shù)千年，本發(fā)明的目的是使用現(xiàn)代的藥理學、化學的技術(shù)，對中藥去粗存精，去偽存真，以羌活的藥理研究為根據(jù)，從羌活所含有的大量化合物中尋找出有治療抗心律不齊等作用的活性化合物，將其提取、分離，制備成可供臨床使用的新藥，并且提供由其它中藥中提取這一成份的方法。為進一步闡述中藥理論，特別為了尋找出新穎，有效、服用量小，無毒付作用的藥物而努力。
本發(fā)明經(jīng)化學和藥理學密切配合研究，從尋找到有效部位開始，進而尋找到有抗心律失常的化合物-哥倫比亞甙。哥倫比亞甙又稱二氫歐山芹醇β-葡萄糖甙，該化合物結(jié)構(gòu)清楚，性質(zhì)穩(wěn)定，不但可以從中藥植物羌活中提取，而且可以從中藥植物獨活中提取，還可以進行人工合成。
本發(fā)明哥倫比亞甙制劑及其制備方法如下取含有哥倫比亞甙的中藥植物(如羌活，獨活)，粗粉碎后先用乙醚冷浸24小時，按照中國藥典載滲漉方法進行脫脂，然后再用乙醇或稀乙醇提取原料，得酒提取物，酒提取物用硅膠、氧化鋁層析方法進行化合物哥倫比亞甙的分離。硅膠層析的洗脫劑是苯-甲醇-丙酮(7∶2∶1);氯仿-甲醇、水(3∶5∶1)氧化鋁層析洗脫劑首先是甲醇-丙酮(1∶9)，繼用甲醇-丙酮-水(1∶1∶0.5)洗脫。
由上述工藝制得的化合物哥倫比亞甙為白色粉末狀(甲醇重結(jié)晶)，化合物純度為98%。
紅外吸收光譜 KBr max(cm-1)3610，1720，1410，1149，871。
質(zhì)譜C.I/NH3側(cè)出M+為426。
水解后甙元246(M+)，187(100)，188(87)，160(30)，59(29)，213(17)，31(16)，189(15)核磁共振氫譜H(CD3DD)(250兆)δ1.26，1.39，3.09，3.30，3.32，3.63，3.82，4.55，4.55，4.57，4.59，4.92，4.94，6.17，6.20，7.39，7.83，7.88。
化學結(jié)構(gòu)式為
藥理作用表明一、對烏頭堿誘發(fā)小鼠心律失常作用的影響哥倫比亞甙靜脈注射能明顯對抗小鼠恒速靜注烏頭堿所誘發(fā)的各類心律失常作用，與對照組比較，哥倫比亞甙3.2mg/kg能明顯提高VP(室性早博P＜0.05)、VT(室性心動過速P＜0.05)、VF(心室顫動P＜0.001)及CA(心臟停跳P＜0.05)所需烏頭堿的用量。與奎尼丁10mg/kg作用相似，哥倫比甙1.6mg/kg能明顯提高VT(P＜0.05)VF(P＜0.01)及CA(P＜0.05)所需烏頭堿用量。
二、對哇巴因誘發(fā)豚鼠心律失常作用的影響哥倫比亞甙靜脈注射能明顯對抗哇巴因所致豚鼠心律失常作用。與對照組比較，哥倫比亞甙1.6mg/kg能明顯提高VP(P＜0.05)及VT(P＜0.01)所需哇巴因用量，與奎尼丁5mg/kg作用相似。
三、對大鼠心肌缺血再灌性心律失常的對抗作用，哥倫比亞甙靜脈注射能明顯對抗大鼠心肌缺血再灌性心律失常。1.6mg/kg哥倫比亞甙能明顯減少心肌缺血(冠脈結(jié)扎)再灌大鼠VT(P＜0.05)及VF(P＜0.01)的發(fā)生率。與奎尼丁5mg/kg作用相似。0.8mg/kg哥倫比亞甙能明顯減少VF(P＜0.05)的發(fā)生率。1.6和0.8mg/kg哥倫比亞甙均明顯縮短VT(P＜0.01)及VF(P＜0.01)的持續(xù)時間。
四、急性毒性實驗，小鼠靜脈注射哥倫亞甙生理鹽水溶液LD50)100mg/kg。
中藥是中華民族幾千年來防病治病的物質(zhì)基礎(chǔ)，其臨床是有效的，毒付作用較少，但其缺點是有效成份不明確，無法進行提取分離，進一步提高療效，不便于質(zhì)量控制，也不便于臨床使用。本發(fā)明的優(yōu)點在于經(jīng)過長期、反復的實驗研究找到了抗心律失常的有效成份-哥倫比亞甙，為進一步創(chuàng)制抗心律失常的中藥新藥打下了基礎(chǔ)。
本發(fā)明經(jīng)化學和藥理學密切配合研究，從尋找到有效部位開始，進而尋找到有抗心律失?；钚缘幕衔?哥倫比亞甙。哥倫比亞甙與原中藥羌活相比，該化合物化學結(jié)構(gòu)清楚，性質(zhì)穩(wěn)定，不但可從中藥羌活，獨活等植物中提取，也可進行人工全合成，易于質(zhì)量控制;抗心律失常作用療效肯定，毒性小，使用量小，經(jīng)與水及藥液混合可制成注射劑，用于搶救危重病人，也可制成片劑、口服液等。
權(quán)利要求
1.一種治療心律不齊病癥的哥倫比亞甙制劑，其特征在于它是由中藥材羌活或獨活提取的，外觀呈白色粉末狀(甲醇重結(jié)晶)紅外吸收光譜 KBr max(cm-1)3610 1720，1410，1149，871。質(zhì)譜C.I/NH3側(cè)出M+為426。水解后甙元246(M+)，187(100)，188(87)，160(30)，59(29)，213(17)，31(16)，189(15)核磁共振氫譜H(CD3DD)(250兆)δ1.26，1.39，3.09，3.30，3.32，3.63，3.82，4.55，4.55，4.57，4.59，4.92，4.94，6.17，6.20，7.39，7.83，7.88?；瘜W結(jié)構(gòu)式為
2.權(quán)利要求1所述哥倫比亞甙的制備方法，其特征在于，取含有哥倫比亞甙的中藥植物(如羌活，獨活)，粗粉碎后先用乙醚冷浸24小時，按照中國藥典載滲漉方法進行脫脂，然后再用乙醇或稀乙醇提取原料，得酒提取物，酒提取物用硅膠、氧化鋁層析方法進行化合物哥倫比亞甙的分離。硅膠層析的洗脫劑是苯-甲醇-丙酮(7∶2∶1);氯仿-甲醇-水(3∶5∶1)氧化鋁層析洗脫劑首先是甲醇-丙酮(1∶9)，繼用甲醇-丙酮-水(1∶1∶0.5)洗脫。
3.權(quán)利要求1所述哥倫比亞甙的制備方法，其特征在于，與水及藥液混合制成注射劑;亦可制成片劑及口服液。
全文摘要
本發(fā)明涉及羌活有效成分—哥倫比亞甙制劑及其制備工藝，以及它在治療抗心律失常疾病中的應用。哥倫比亞甙可從中藥羌活及獨活等植物中提取，將藥物粉碎、脫脂、乙醇提取，再用硅膠，氧化鋁層析進行分離，純化制成，藥理實驗表明，該制劑有明顯對抗烏頭鹼所致小鼠、哇巴因誘發(fā)豚鼠的心律失常作用，明顯對抗大鼠心肌缺血再灌注心律失常作用，該化合物化學結(jié)構(gòu)清楚，易于質(zhì)量控制。
文檔編號A61K31/70GK1104522SQ9410154
公開日1995年7月5日 申請日期1994年3月7日 優(yōu)先權(quán)日1994年3月7日
發(fā)明者秦彩玲, 孫有富, 劉君英, 程志銘, 孫玉茹 申請人:中國中醫(yī)研究院中藥研究所