專利名稱：脫氧紅豆杉醇的制作方法
本申請(qǐng)是1992年10月1日遞交的美國(guó)專利申請(qǐng)U.S.S.N07/955，008，1992年11月24日遞交的美國(guó)專利申請(qǐng)U.S.S.N.07/981，151以及1992年12月24日遞交的美國(guó)專利申請(qǐng)U.S.S.N.07/996，455的部分繼續(xù)申請(qǐng)。所有這三篇美國(guó)專利申請(qǐng)均加到本文中以作參考。
本發(fā)明涉及新的抗腫瘤劑以及制備它們的中間體。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及7-脫氧紅豆杉醇、7-脫氧-10-脫乙酸基紅豆杉醇及其衍生物。
紅豆杉醇最初是從Taxus brevifolia Nutt(Taxaceae)的樹(shù)皮中分離出來(lái)，它具有如下結(jié)構(gòu)((C)2′-、7-、10-和13-位已標(biāo)出)
在由國(guó)立癌癥研究所(NCI)主持的臨床試驗(yàn)中，紅豆杉醇已顯示出在對(duì)付晚期卵巢癌、乳腺癌及其它癌瘤方面具有良好前景。紅豆杉醇最近已被批準(zhǔn)用于治療轉(zhuǎn)移性卵巢癌。
在抗有絲分裂藥物中紅豆杉醇的特點(diǎn)在于它即使在其它方面不利的條件下也能夠促進(jìn)來(lái)自微管蛋白的穩(wěn)定微管的集合。該藥物與微管結(jié)合，使其穩(wěn)定而不解聚，從而破壞了微管蛋白-微管平衡，進(jìn)而抑制有絲分裂。有關(guān)紅豆杉的作用機(jī)制、毒理學(xué)以及臨床效力等，在大量文章中均有記載，如Rowinsky等人的TaxolA Novel Investigational Antimicrotubule Agent，J.Natl.Cancer Inst.，82pp1247-1259(1990)。
由于紅豆杉醇在治療癌癥方面的顯著效果的發(fā)現(xiàn)，許多實(shí)驗(yàn)室已著手實(shí)施設(shè)計(jì)紅豆杉醇類(lèi)似物的計(jì)劃，以便尋找到更好的藥理方案。這些計(jì)劃的結(jié)果之一是例如發(fā)現(xiàn)了下式的taxotere
見(jiàn) Biologically Active Taxol Analogues with Deleted A-Ring Side Chain Substitutents and Variable C-2′ Configurations，J.Med.Chem.，34，pp 1176-1184(1991);Relationships between the structure of Taxol Analogues and Their Antimitotic Activity，J.Med.Chem.，34，pp 992-998(1991).
而對(duì)于紅豆杉醇(C)7-位或(C)10-位的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系則相對(duì)地知道得較少。例如，Kingston等人在Journal of Natural ProductsThe Chemistry of Taxol，a Clinically Useful Anticancer Agent，53，No.1，pp 1-12(1990)中僅根據(jù)有限資料討論了某些(C)7-酯和表-衍生物的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系。為了對(duì)紅豆杉醇活性所必需的結(jié)構(gòu)要求進(jìn)行研究，本發(fā)明人完全除去了紅豆杉醇(C)7-或(C)7-/(C)10-取代基，并已發(fā)現(xiàn)這些脫氧紅豆杉醇仍保留了抗腫瘤活性。因此，本發(fā)明旨在提供7-脫氧紅豆杉醇、7-脫氧-10-脫乙酸基紅豆杉醇及其衍生物。
本發(fā)明涉及式Ⅰ紅豆杉醇衍生物
其中R1為-CORz，其中Rz為RO-或R;
Rg為C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6鏈炔基、C3-6環(huán)烷基或式-W-RX基團(tuán)，其中W為一鍵、C2-6鏈烯二基或-(CH2)t-，其中t為1-6;RX為萘基、苯基或雜芳基，且RX可被選自C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素或-CF3中的1-3個(gè)相同或不同基團(tuán)取代;
R2為-OCOR、H、OH、-OR、-OSO2R、-OCONR0R、-OCONHR、-OCOO(CH2)tR或-OCOOR;且R和R0獨(dú)自為C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基、C2-6鏈炔基或苯基，并可被選自C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素或-CF3的1-3個(gè)相同或不同基團(tuán)任意取代。
另外，本發(fā)明還提供了式Ⅰ脫氧紅豆杉醇的藥物配方以及用于制備它們的中間體。本發(fā)明也提供了一種利用式Ⅰ化合物治療哺乳動(dòng)物腫瘤的方法。
本發(fā)明涉及式Ⅰ紅豆杉醇衍生物
其中R1為-COR2，其中R2為RO-或R;
Rg為C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6鏈炔基、C3-6環(huán)烷基或式-W-RX基團(tuán)，其中W為一鍵、C2-6鏈烯二基或-(CH2)t-，其中t為1-6;RX為萘基、苯基或雜芳基，且RX可被選自C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素或-CF3中的1-3個(gè)相同或不同基團(tuán)取代;
R2為-OCOR、H、OH、-OH、-OSO2R、-OCONR0R、-OCONHR、-OCOO(CH2)tR或-OCOOR;且R和R0獨(dú)自為C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基、C2-6鏈炔基或苯基，并可被選自C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素或-CF3的1-3個(gè)相同或不同基團(tuán)任意取代。
在本申請(qǐng)中，每一被定義過(guò)的符號(hào)在直到被重新定義之前均保留同一含義。
本發(fā)明化合物可利用反應(yīng)流程Ⅰ中所示的一般方法制備。在其中的步驟(a)是將氮雜環(huán)丁酮Ⅳ與式Ⅱ化合物(漿果赤霉素Ⅲ衍生物)反應(yīng)。氮雜環(huán)丁酮Ⅳ類(lèi)化合物是熟知的。它們或它們的前體的合成方法在例如以下文獻(xiàn)中均有報(bào)道Application 0，400，971 A2 published on December 5，1990;by Holton in European Patent Applications 0，534，709 A1，0，534，708 A1，and 0，534，707 A1 all published on March 31，1993;also by Holton in PCT application WO 93/06079 published April 1，1993;by Ojima et al.in Tetrahedron，48，No.34，pp 6985-7012(1992);Journal of Organic Chemistry，56，pp 1681-1683(1991);and Tetrahedron Letters，33，No.39，pp 5737-5740(1992);by Brieva et al.in J.Org.Chem.，58，pp 1068-1075;and by Palomo et al.in Tetrahedron Letters，31，No.44，pp 6429-6432(1990);
所有這10篇文獻(xiàn)均加到本說(shuō)明書(shū)中以供參考。為了生產(chǎn)其它式Ⅳ氮雜環(huán)丁酮，可對(duì)上述方法作出適當(dāng)改動(dòng)，這些改動(dòng)在本文或上述10篇文獻(xiàn)中均未具體公開(kāi)，但它們對(duì)本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員來(lái)說(shuō)均是顯而易見(jiàn)的。
在歐洲專利申請(qǐng)0，400，971A2、0，534，739 A1、0，534，708A1和0，534，707A1及Tetrahedron，48，No.PP6985-7012(1992)所公開(kāi)的方法中，是將式Ⅳ氮雜環(huán)丁酮與漿果赤霉素Ⅲ衍生物或其金屬醇化物的(c)13-羥基反應(yīng)，得到具有各種(c)13-側(cè)鏈的紅豆杉醇類(lèi)似物。在反應(yīng)流程Ⅰ的步驟(a)中，最好是在偶聯(lián)之前將(c)13-碳原子上的羥基轉(zhuǎn)化為金屬醇鹽。該金屬醇鹽中的金屬陽(yáng)離子最好選自Ⅰa或Ⅱa族金屬。所需金屬醇鹽可通過(guò)將式Ⅱ化合物與強(qiáng)金屬堿反應(yīng)而形成，該強(qiáng)金屬堿的例子有二異丙基酰胺鋰、苯基鋰、氫化鈉、氫化鉀、氫化鋰等。例如，當(dāng)需要醇鋰時(shí)，是將式Ⅱ化合物與正丁鋰在惰性溶劑如四氫呋喃中反應(yīng)。
本申請(qǐng)中所使用的式Ⅱ漿果赤霉素Ⅲ衍生物的位置編號(hào)如下
其中R3為常規(guī)羥基保護(hù)基。常規(guī)羥基保護(hù)基指用于保護(hù)羥基官能團(tuán)的基團(tuán)，且它們是本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員熟知的。優(yōu)選的是能夠被不導(dǎo)致分子其余部分明顯破壞的方法除去的保護(hù)基。這類(lèi)易除去的羥基保護(hù)基的例子有氯代乙?；⒓籽跫谆?、2，2，2-三氯乙氧甲基、2，2，2-三氯乙氧羰基、四氫吡喃基、叔丁基、芐基、對(duì)-硝基芐基、對(duì)-甲氧芐基、二苯基甲基、三C1-6烷基甲硅烷基、三苯基甲硅烷基等。其它合適保護(hù)基可從Chapter 2 of“Prot-eecting Groups in Organic Synthesis”，Second Ed.，by Theodora W.Greene and Peter G.M.Wuts(1991，John Wiley & Sons)中找到，尤其適用于式Ⅳ化合物的保護(hù)基是三乙基甲硅烷基。在步驟(b)中，保護(hù)基R3被除去。如果R3為三C1-6烷基甲硅烷基如三乙基甲硅烷基，它可用氟離子或在乙醇或乙腈中用無(wú)機(jī)酸除去。用氟離子除去是在惰性溶劑，如四氫呋喃、二氯甲烷、1，4-二噁烷、DMF、氯仿等溶劑中進(jìn)行;且反應(yīng)介質(zhì)可用乙酸等弱酸緩沖。無(wú)機(jī)酸的例子有鹽酸。
通過(guò)下面反應(yīng)流程Ⅱ-Ⅳ所示的方法可生產(chǎn)式Ⅱ化合物。為了生產(chǎn)式Ⅱ范圍內(nèi)的其它化合物，可對(duì)該方法進(jìn)行適當(dāng)改動(dòng)，但這些改動(dòng)在本文中未具體公開(kāi)。以某種不同方式生產(chǎn)同樣化合物的其他變動(dòng)方法，對(duì)本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的。
制備其中R0等于OH、-OCOR、-OR、-OSO2R、-OCONR0R、-OCONHR、-OCOO(CH2)tR或-OCOOR的式Ⅱa化合物的主要方法可通過(guò)現(xiàn)有技術(shù)中所已知的Barton脫氧反應(yīng)(殘基脫氧)完成。本發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)，為了將該反應(yīng)成功地應(yīng)用于僅在(c)7-位羥基上脫氧的方法中，使用約80℃的較窄溫度范圍是關(guān)鍵。而且，正如Hartwig的綜述文章Modern Methods for the Radical Deoxyge-nation of AlcoholsTetrahedron，39，No.16，PP 2609-2645(1983)中所述的將(C)7-羥基衍生為離去基團(tuán)的許多可能性中，是乎并不是每一基團(tuán)均可應(yīng)用于(C)7-脫氧反應(yīng)。例如，我們已發(fā)現(xiàn)，即使在80℃延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間也不能使衍生致五氟苯基硫羰基碳酸酯并不能導(dǎo)致脫氧。如果脫氧在苯中進(jìn)行，優(yōu)選使化合物Ⅵ甲硅烷基化(步驟b)以改進(jìn)在苯中的溶解性。但如果脫氧是于75℃在二噁烷中進(jìn)行，更優(yōu)選的是直接將化合物Ⅵ轉(zhuǎn)化為式Ⅱa化合物。反應(yīng)流程Ⅱ的一般方法中優(yōu)選的Rc殘基是乙酸基。
式Ⅱb化合物可用反應(yīng)流程Ⅲ的方法制備。
反應(yīng)流程Ⅲ
由于C-10和C-13上的兩個(gè)羥基具有極相似的反應(yīng)性，使得用已試驗(yàn)過(guò)的其它堿從化學(xué)上將其分化的許多企圖均已失敗，因此，將化合物Ⅸ形成醇鋰非常重要。這一“醇鋰”作用是未預(yù)料到的但似乎是普遍的，它能使C-10在C-13之上順利功能化。步驟(e)所使用的其它還原劑(包括三苯基氫化錫和三(三甲基甲硅烷基)硅烷)產(chǎn)生更多前產(chǎn)物。再次脫氫(步驟(e))優(yōu)選在約80℃進(jìn)行。
在一優(yōu)選方法中，通過(guò)將化合物Ⅶa在含有三丁基氫化錫/AIBN的甲苯溶液中于100℃加熱約6小時(shí)并除去三乙基甲硅烷基保護(hù)基可直接得到式Ⅱb化合物。見(jiàn)反應(yīng)流程Ⅲa。
利用反應(yīng)流程Ⅴ所示方法或其明顯的改進(jìn)方法可生產(chǎn)式Ⅴ化合物。為了生產(chǎn)其它式Ⅴ化合物范圍內(nèi)的化合物，可很容易地對(duì)該方法作出改動(dòng)，但這些改動(dòng)在本文中未具體指出。以某種不同方式生產(chǎn)同樣化合物的其它改進(jìn)方法，對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)也是顯而易見(jiàn)的。
反應(yīng)流程Ⅲa
反應(yīng)流程Ⅴ
在反應(yīng)流程Ⅴ中，當(dāng)式ⅩⅩⅥ化合物與RL、RC(＝O)L、R(CH2)tOC(＝O)L，ROC(＝O)L，LSO2R，LCONR0R，LCONHR，O＝C＝N-R或其酐衍生物(其中L為典型的離去基團(tuán)，如氯、溴、甲磺酰基、三氟甲磺?；蚣妆交酋；?反應(yīng)時(shí)，可得到式ⅩⅩⅦ化合物。其中的Rm為-OR、-OCOR、-OSO2R、-OCONR0R、-OCONHR、-OCOO(CH2)tR或-OCOOR。為了開(kāi)始從C-10羥基的質(zhì)子中脫質(zhì)子，步驟(a)中通常需要堿。尤其適用于步驟(a)的堿是強(qiáng)堿，如C1-6烷基鋰、雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰等按1.1當(dāng)量使用的堿。用堿脫質(zhì)子最好在非質(zhì)子傳遞溶劑，如四氫呋喃中于低溫下(通常為-40℃-0℃)進(jìn)行。從化合物ⅩⅩⅦ中除去R3后得到式Ⅴa化合物，它屬于式Ⅴ化合物范圍之內(nèi)。
當(dāng)反應(yīng)流程Ⅱ中式Ⅱa化合物的Rc殘基為芐氧基羰氧基時(shí)，芐氧羰基可通過(guò)催化氫解除去，且所產(chǎn)生的羥基可象反應(yīng)流程Ⅴ的步驟(a)中那樣轉(zhuǎn)化為除芐氧羰氧基之外的Rm殘基，以便提供屬于式Ⅱa范圍內(nèi)的其它化合物。
本申請(qǐng)中符號(hào)“C”后的下標(biāo)中的數(shù)字定義的是某一具體基團(tuán)可含有的碳原子數(shù)。例如C1-6烷基指含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，這類(lèi)基團(tuán)包括甲基、乙基、正丙基、正丁基、叔丁基、正戊基、正己基、3-甲基戊基或類(lèi)似的烷基;C2-6鏈烯基指直鏈或支鏈烯基，如乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、異丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、甲代烯丙基、1，1-二甲基烯丙基、1-己烯基、2-己烯基或類(lèi)似基團(tuán);C3-6環(huán)烷基指環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基;C2-6鏈炔基指直鏈或支鏈炔基，如乙炔基、2-丙炔基、1-丙炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-己炔基、4-甲基-2-戊炔基等基團(tuán);C2-6烯二基指乙烯-1，2-二基(亞乙烯基)、2-甲基-2-丁烯-1，4-二基，2-己烯-1，6-二基等基團(tuán);C1-6烷氧基指直鏈或支鏈烷氧基，如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、正己氧基或3-甲基戊氧基;雜芳基指含有至少一個(gè)選自硫、氧或氮的雜原子(但最多含1個(gè)硫原子、1個(gè)氧原子或4個(gè)氮原子)的五元芳環(huán);雜芳基也指含1-4個(gè)氮原子的六元芳環(huán);鹵素指氟、氯、溴或碘。雜芳基的例子包括噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基、四唑基、噻三唑基、噁三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、三嗪基、四嗪基等環(huán);氮雜環(huán)丁酮指氮雜環(huán)丁-2-酮(或2-氮雜環(huán)丁酮)。在本申請(qǐng)中，所有符號(hào)在直至重新定義前均保持同一含義。
以下具體實(shí)施例舉例說(shuō)明了本發(fā)明代表性化合物的合成方法，但它們并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限定。為了生產(chǎn)本發(fā)明化合物，可對(duì)其方法作出這里未具體公開(kāi)的改動(dòng)。而且，以某種不同方式生產(chǎn)同樣化合物的其它改進(jìn)方法，對(duì)本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員來(lái)說(shuō)也是顯而易見(jiàn)的。
在沒(méi)有指明的情況下，所有溫度均指攝氏溫度。核磁共振(NMR)光譜特征指以四甲基甲硅烷(TMS)作為參比標(biāo)準(zhǔn)以PPM表示的化學(xué)位移(δ)。質(zhì)子NMR光譜數(shù)據(jù)中所報(bào)道的相對(duì)面積對(duì)應(yīng)于分子中特定功官型的氫原子數(shù)。關(guān)于多重性的位移性質(zhì)以寬單峰(bs)、寬雙峰(bd)、寬三峰(bt)、寬多重峰(bm)、寬四重峰(bq)、單峰(s)、多重峰(m)、雙峰(d)、四重峰(q)、三重峰(t)、雙雙峰(dd)、雙三重峰(dt)及雙四重峰(dq)表示。用于吸收NMR光譜的溶劑是DMSO-d6(全氘二甲基亞砜)、D2O(重水)、CDCl3(含氘氯仿)及其它常規(guī)氘化溶劑?！癊xch”指可與CD3OD交換。(例如，“d plus exch.”指一雙峰加上一可交換信號(hào)。在另一質(zhì)子被交換后總信號(hào)收縮為一雙峰)。“Incl.”指包括。
紅外(IR)光譜指述僅包括具有官能團(tuán)鑒定值的吸收波數(shù)(cm-1)。
Celite是Johns-Manville Products公司為硅藻土注冊(cè)的商標(biāo)。
本發(fā)明所用的縮寫(xiě)符號(hào)是本領(lǐng)域廣泛使用的，部分例子如下Ac乙?；鵄r芳基Bz苯甲?；鵆bz芐氧羰基DCI解吸化學(xué)碘化DMF二甲基甲酰胺DMSO二甲基亞砜FAB快速原子轟擊h小時(shí)HRMS高分辨質(zhì)譜分析LiHMDS六甲基二硅氮烷鋰或雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰HMDS六甲基二硅氮烷i-PrOH異丙醇
min分鐘MS質(zhì)譜分析Ph苯基rt室溫tBu叔丁基TES三乙基甲硅烷基THF四氫呋喃TLC薄層色譜Y產(chǎn)率實(shí)施例17-〔(甲硫基)甲硫酰氧基〕漿果赤霉素Ⅲ(Ⅵa，其中Rc為乙酸基的式Ⅵ化合物)將漿果赤霉素Ⅲ(750mg，1.278mmol)溶于無(wú)水THF(20ml)，并一次性加入咪唑(8.7mg，0.128mmol)。于室溫下加入氫化鈉(50%于礦物油中，77mg，1.597mmol)，當(dāng)氣體停止產(chǎn)生(10分鐘)后，立即加入二硫化碳(4.6ml)。室溫3h后用甲基碘(0.238ml，3.835mmol)處理黃色溶液，并攪拌過(guò)夜，經(jīng)用乙酸乙酯和水處理后得到標(biāo)題黃原酸酯Ⅵa粗油。通過(guò)硅膠閃蒸色譜(用1∶1乙酸乙酯/己烷洗脫)純化部分粗油以用于鑒定(白色固體)，1H-NMR(CDCl3)δ8.08(d，J＝8.3Hz，2H)7.58(bt，1H)7.45(m，2H)6.35(m，1H)6.29(s，1H)5.63(d，J＝7.0Hz，1H)4.97(d，J＝8.7Hz，1H)4.69(bq，1H)，4.31(d，J＝8.3Hz，1H)4.15(d，J＝8.3Hz，1H)4.03(d，J＝7.0Hz，1H)2.91(m，1H)2.44(s，3H)2.29-1.50(m，16H，incl.singlets at 2.27，2.13，2.08，1.89，3H each)1.12(s，3H)1.05(s，3H);IR(film)3554(broad)，1734，1718，1708，1266，1244，1220，1204，1102，1070，1052cm-1;13C-NMR(d6-DMSO，75.5Hz)δ202.2，169.9，168.4，165.2，145.8，133.4，130.2，130.0，129.6，128.8，82.7，80.5，79.4，76.7，75.6，75.2，74.0，66.0，55.7，46.8，42.5，31.5，26.5，22.2，20.5，17.7，15.2，11.3;FABMS(NOBA)M+H calcd for C33H41S2O11677，F(xiàn)ound677.
替代方法1將漿果赤霉素Ⅲ(394mg，0.672mmol)溶于THF(5ml)和CS2(1ml)。向該溶液中加入NaH(40.3mg，60%，1.009mmol)，并加入催化量的咪唑。該反應(yīng)于室溫?cái)嚢?.5h后加入MeI(122.8μl，2.016mmol)。40分鐘后真空除去溶劑，殘余物在硅膠上色譜(用20%-50%-60%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)，得到260mg(57.2%)標(biāo)題化合物和98.5mg(25%)7-表漿果赤霉素。
替代方法2向漿果赤霉素Ⅲ(3.3g，5.62mmol)的100ml THF和25ml CS2溶液中加入NaH(350mg，60%，8.75mmol)，并將溶液攪拌10分鐘。然后加入咪唑(330mg)，攪拌90分鐘，再加入MeI(1.05ml，16.8mmol)，繼續(xù)攪拌4h。用乙酸乙酯稀釋溶液，用水和鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠色譜(用1∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)后得到2.2g(58%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例27-〔(甲硫基)甲硫酰氧基〕-13-三乙基甲硅烷氧基漿果赤霉素Ⅲ(Ⅶa)將實(shí)例1化合物Ⅵa粗油溶于無(wú)水DMF(5ml)，并于室溫下用咪唑(870mg，12.78mmol)和三乙基甲硅烷基氯(2.10ml，12.78mmol)處理15小時(shí)。加水后，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層經(jīng)水充分洗滌后干燥。再經(jīng)硅膠閃蒸色譜(用20%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)后，得到化合物Ⅶa，為透明固體(209mg，20%);
1H-NMR(CDCl3)δ8.08(d，J＝8.3Hz，2H)7.58(bt，1H)7.44(m，2H)6.34(m，1H)6.30(s，1H)5.62(d，J＝7.0Hz，1H)4.99-4.83(m，2H)4.30(d，J＝8.3Hz，1H)4.15(d，J＝8.3Hz，1H)4.00(d，J＝7.0Hz，1H)2.91(m，1H)2.44(s，3H)2.30-1.60(m，15H，incl.singlets at 2.27，2.10，2.05，1.90，3H each)1.15-1.00(m，15H)0.65(m，6H);MS，calcd for C31H55O11S2Si790，found790.
替代方法將7-黃原酸漿果赤霉素Ⅵa(193.4mg，0.286mmol)溶于無(wú)水DMF(2.86ml)。向該溶液中加入咪唑(77.9mg，1.14mmol)及三乙基甲硅烷基氯(192μl，1.14mmol)。該反應(yīng)于室溫下攪拌過(guò)夜。12小時(shí)后，EtoAc(150ml)稀釋反應(yīng)混合物;有機(jī)層用水(3×10ml)和鹽水(1×10ml)洗滌，然后干燥并真空濃縮。硅膠色譜殘余物(用20% EtoAc的己烷洗脫)后得到163mg(72.0%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例37-脫氧-13-三乙基甲硅烷氧基漿果赤霉素Ⅲ(Ⅷa，其中Rc為乙酸基的式Ⅷ化合物)
在三丁基氫化錫(0.210ml，1.150mmol)和AIBN(2，2′-偶氮二異丁腈，10mg)存在下，將化合物Ⅶa(182mg，0.230mmol)的無(wú)水苯(5ml)溶液加熱至80℃。3小時(shí)后冷卻溶液并真空蒸發(fā)。經(jīng)硅膠色譜(用20%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)后得到油狀的化合物Ⅷa。
實(shí)施例47-脫氧漿果赤霉素Ⅲ(Ⅱaa，其中Rc為乙酸基的式Ⅱa化合物)將化合物Ⅷa溶于THF(5ml)并用四丁基氟化銨(1M于THF，0.50ml，0.50mmol)于室溫處理2小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋并用水和鹽水洗滌后進(jìn)行硅膠色譜(用1∶1乙酸乙酯/己烷洗脫)，得到化合物Ⅱaa，為白色透明固體(63mg，58%);
(Y63mg，58% over two steps);1H-NMR(CDCl3)δ8.10(d，J＝8.3Hz，2H)7.59(bt，1H)7.48(m，2H)6.46(s，1H)5.60(d，J＝7.4Hz，1H)4.95(bd，1H)4.84(m，1H)4.30(d，J＝8.3Hz，1H)4.16(d，J＝8.3Hz，1H)3.83(d，J＝7.4Hz，1H)2.45-1.00(m，26H，incl.singlets at 2.31，2.23，2.03，1.71，1.10，1.06，3H each);IR(film)3514(broad)，1734，1712，1374，1274，1242，1110，1070，1018，754cm-1;13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ206.6，170.6，169.7，167.2，144.6，133.6，130.1，129.7，129.5，128.6，84.5，81.7，79.0，75.7，74.8，72.4，67.8，52.9，45.7，42.5，38.8，35.1，27.0，26.4，22.6，20.9，20.6，14.6，14.2;HRMS，calcd for C31H39O10(MH+)571.2543，found571.2528.
替代方法于氮?dú)猸h(huán)境下向黃原酸酯Ⅵa(1.38g，2.03mmol)的50 ml脫氣二噁烷溶液中加入三丁基氫化錫(2.7ml，10.0mmol)和催化量的AIBN(107mg)。該溶液于70℃加熱30分鐘，冷卻并濃縮。對(duì)殘余物硅膠色譜(1∶1己烷/乙酸乙酯)后，得到1.015g標(biāo)題7-脫氧漿果赤霉素Ⅲ(87%)。
實(shí)施例57-三乙基甲硅烷氧基-10-脫乙酰基漿果赤霉素Ⅲ(Ⅸ)將10-脫乙?；鶟{果赤霉素Ⅲ(得自Taxus baccata，628.0mg，1.150mmol)溶于無(wú)水DMF(6ml)，冷卻至0℃，并用咪唑(312.8mg，4.595mmol)和氯代三乙基硅烷(0.772ml，4.60mmol)處理?；旌衔镉?℃攪拌4h，然后用乙酸乙酯(150ml)稀釋，并用水和鹽水充分洗滌。硅膠色譜(用50%乙酸乙酯的己烷洗脫)純化殘余物后，得到泡沫狀標(biāo)題產(chǎn)物(586mg，77%)。該化合物由Greene等人在J.Am.Chem.Soc.110，p5917(1988)中敘述。
實(shí)施例610-五氟苯基硫代羰基甲酸酯基-7-三乙基甲硅烷氧基漿果赤霉素Ⅲ(Ⅹ)將化合物Ⅸ(319mg，0.485mmol)溶于無(wú)水THF(5ml)。冷卻至-40℃，并用正丁基鋰(1.58M于己烷，0.384ml，0.606mmol)處理，維持該溫度40分鐘后，用注射器加入五氟苯基氯硫羰基甲酸酯(0.086ml，0.536mmol)。反應(yīng)混合物于-20℃攪拌90分鐘，然后用飽和氯化銨溶液終止反應(yīng)，并用乙酸乙酯萃取。干燥乙酸乙酯層并濃縮。硅膠色譜純化殘余物(用40%乙酸乙酯的己酯溶液洗脫)后，得到泡沫狀化合物Ⅹ(320mg，74%);
1H-NMR(CDCl3)δ8.09(d，2H)7.56(t，1H)7.44(m，2H)6.78(s，1H)5.64(d，J＝6.9Hz，1H)4.96-4.89(m，2H)4.49(dd，J＝10.2Hz，J′＝6.6Hz，1H)4.12(AB q，2H)3.80(d，J＝6.9Hz，1H)2.55-0.44(m，43H);MS，884(MH+).
實(shí)施例710-脫乙酸基-7-三乙基甲硅烷氧基漿果赤霉素Ⅲ(Ⅺ)將硫羰基甲酸酯Ⅹ(119mg，0.135mmol)溶于無(wú)水甲苯(3ml)并用AIBN(2mg)處理。用無(wú)水氮?dú)馐乖撊芤好摎夂蠹尤肴』鶜浠a(0.055ml，0.202mmol)。然后，于90℃加熱1h，蒸發(fā)掉溶劑后對(duì)殘余物進(jìn)行硅膠色譜(用40%乙酸乙酯的己烷洗脫)，得到化合物Ⅺ(87mg，99%)，為無(wú)色泡沫;
1H-NMR(CDCl3)δ8.07(d，J＝8.2Hz，2H)7.56(bt，1H)7.44(m，2H)5.57(d，J＝6.7Hz，1H)4.92(d，J＝9.3Hz，1H)4.78(bs，1H)4.48(dd，J＝10.4Hz，J′＝6.6Hz，1H)4.09(AB q，2H)4.06(d，J＝6.7Hz，1H)3.74(d，J＝14.8Hz，1H)3.35(bd，1H)2.44(m，1H)2.25(s，3H)2.22-0.45(m，42H);MS，642(MH+).
實(shí)施例810-脫乙酸基漿果赤霉素Ⅲ(Ⅻ)將化合物Ⅺ(120mg，0.187mmol)溶于乙腈(3.5ml)并將溶液冷卻至-10℃。加入濃鹽酸(36%，0.060ml)，攪拌30分鐘，混合物用乙酸乙酯(75ml)稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，然后干燥并濃縮。通過(guò)硅膠閃蒸快速色譜純化殘余物(用70%乙酸乙酯的己烷洗脫)后，得到脫甲硅烷基化的10-脫乙酸基漿果赤霉素Ⅲ(Ⅻ)，為泡沫狀物(75mg，76%);
1H-NMR(CDCl3)δ8.10(d，J＝7.3Hz，2H)7.60(m，1H)7.45(m，2H)5.64(d，J＝6.9Hz，1H)4.97(bd，J＝9.4Hz，1H)4.81(bt，1H)4.36-4.28(m，2H)4.17-4.07(m，3H)3.82(d，J＝15.6Hz，1H)3.43(bd，J＝15.6Hz，1H)2.60(m，1H)2.28-1.73(m，14H，incl.singlets at 2.27，1.93，1.62，3H each)1.11(s，3H)1.04(s，3H);HRMS，calcd for C29H37O9(MH+)529.2438，found529.2432.
實(shí)施例97-〔(甲硫基)硫代甲酰氧基〕-10-脫乙酸基漿果赤霉素Ⅲ(ⅩⅢ)將化合物Ⅻ(75mg，0.142mmol)溶于無(wú)水THF(2ml)和二硫化碳(0.5ml)，然后加入氫化鈉(60%于礦物油中，8.5mg，0.213mmol)，于室溫下攪拌2h。加入碘代甲烷(0.026ml，0.426mmol)，讓反應(yīng)過(guò)夜進(jìn)行。然后除去溶劑，殘余物通過(guò)硅膠色譜純化(用50-70%乙酸乙酯的己烷洗脫)后得到黃原酸酯ⅩⅢ，為泡沫狀物(46.4mg，53%);
1H-NMR(CDCl3)δ8.10(d，J＝7.3Hz，2H)7.59(m，1H)7.44(m，2H)6.44(dd，J＝10.4Hz，J′＝7.3Hz，1H)5.63(d，J＝6.8Hz，1H)4.97(bd，J＝9.4Hz，1H)4.78(bt，1H)4.31(d，J＝8.4Hz，1H)4.26(d，J＝6.8Hz，1H)4.13(d，J＝8.4Hz，1H)3.83(d，J＝15.4Hz，1H)3.35(bd，J＝15.4Hz，1H)2.55(m，1H)2.49(s，3H)2.28(m，14H，incl.singlets at 2.27，1.95，1.83，3H each)1.1(s，3H)1.07(s，3H);HRMS，calcd for C31H39O9S2(MH+)619.2036，found619.2017.
實(shí)施例107-脫氧-10-脫乙酸基漿果赤霉素Ⅲ(Ⅱb)于氬氣環(huán)境及AIBN(2mg)和三丁基氫化錫(0.079ml，0.290mmol)存在下，將黃原酸酯ⅩⅢ(36mg，0.058mmol)于苯(1ml)中回流3h。濃縮混合物，閃蒸色譜純化殘余物(用40%乙酸乙酯的己烷洗脫)，通過(guò)HPLC(高壓液體色譜)分離組分，得到泡沫狀化合物Ⅱb(16.8mg，56%);
1H-NMR(CDCl3)δ8.10(d，J＝7.3Hz，2H)7.56(m，1H)7.45(m，2H)5.62(d，J＝7.2Hz，1H)4.94(bd，1H)4.79(bs，1H)4.29(d，J＝8.0Hz，1H)4.18(d，J＝8.0Hz，1H)4.09(d，J＝7.2Hz，1H)3.83(d，J＝16.2Hz，1H)3.34(bd，J＝16.2Hz，1H)2.35-1.40(m，17H，incl.singlets at 2.27，1.90，1.67，3H each)1.06(s，3H)1.02(s，3H);HRMS，calcd for C29H37O8(MH+)513.2488，found513.2502.
替代方法將化合物ⅩⅩⅢ(160mg，0.255mmol)溶于無(wú)水THF(2ml)。于室溫下向該溶液中加入四丁基氟化銨(766μl，1M，0.766mmol)。于室溫下攪拌1h。除去溶劑，通過(guò)硅膠色譜純化殘余物(用50-70%乙酸乙酯的己烷洗脫)后得到115mg(87.9%)所需標(biāo)題化合物。
實(shí)施例11
(3R，4S)-4-苯基-3-三乙基甲硅烷氧基-2-氮雜環(huán)丁酮(ⅩⅩⅡ)于室溫下將(L)-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽(1.26g，7.44mmol)的無(wú)水二氯甲烷(15ml)溶液與咪唑(1.01g，14.89mmol)和叔丁氧基二苯基甲硅烷基氯(2.274g，7.816mmol)一起攪拌16h。反應(yīng)混合物在水和二氯甲烷間分配。用5%碳酸氫鈉水溶液和水洗滌有機(jī)相，干燥并濃縮后得到2.88g粗油，將其直接用于下一步驟1H-NMR(CDCl3)δ7.70-7.25(m，10H)4.44(m，1H)3.62(s，3H)3.31(d，J＝3Hz，1H)2.12(bs，2H)1.3-1.15(m，12H)。
在4
分子篩存在下用苯甲醛(0.158ml，1.55mmol)于室溫過(guò)夜處理上述油(548mg，1.414mmol)的無(wú)水二氯甲烷(10ml)溶液，就地得到式ⅩⅤ化合物。將含有化合物ⅩⅤ的溶液冷卻至-40℃，加入三乙胺(0.20ml，1.698mmol)，并在10分鐘內(nèi)加入乙酸基乙酰氯(ⅩⅣ)(0.182ml，1.698mmol)?；旌衔镌?h內(nèi)達(dá)到室溫，并將產(chǎn)物在二氯甲烷和水之間分配。有機(jī)相用水和鹽水進(jìn)一步洗滌，干燥并濃縮。經(jīng)硅膠色譜(用1∶4 EtOAc/己烷洗脫)后得到411mg化合物ⅩⅥ，為10∶13R，4S∶3S，4R對(duì)映體混合物。
用乙酸(0.15μl)和四丁基氟化銨(TBAF，1M于THF，1.20ml)處理該對(duì)映體混合物(245.1mg，0.414mmol)的無(wú)水THF(2ml)溶液。于室溫下攪拌14h，然后在乙酸乙酯和5%碳酸氫鈉水溶液之間分配。干燥并濃縮有機(jī)相，利用1∶1乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑進(jìn)行硅膠閃蒸色譜，得到66mg(50%)泡沫狀化合物ⅩⅦ(一種對(duì)映體);
1H-NMR(CDCl3)δ7.42-7.25(m，5H)5.90(d，J＝4.8Hz，1H)5.09(d，J＝4.8Hz，1H)4.28(m，1H)4.01(d，J＝4.8Hz，1H)3.70(s，3H)1.73(s，3H)1.19(d，J＝6.6Hz，3H).
于-78℃，用三乙胺(9.40ml，0.0671mol)和甲磺酰氯(MsCl，3.50ml，0.0457mol)處理式ⅩⅦ化合物(9.8g，0.0305mol)的無(wú)水二氯甲烷(100ml)溶液。過(guò)夜放置至室溫后將反應(yīng)混合物在水和二氯甲烷間分配。有機(jī)層經(jīng)用5%碳酸氫鈉水溶液、稀鹽酸、水和鹽水洗滌及干燥后，得到化合物ⅩⅧ，為粗油狀殘余物。將粗殘余物(10.0g)溶于二氯甲烷(250ml)，并于-78℃將臭氧通過(guò)該溶液，直至溶液保留藍(lán)色。加入二甲硫(11ml)并濃縮反應(yīng)混合物后得到式ⅪⅩ化合物(粗品)。
將式ⅪⅩ化合物溶于THF(150ml)并于-78℃用水合肼(10ml)處理。2h后，將混合物倒入稀鹽酸和乙酸乙酯中，并分離兩相。用更多的酸、水和鹽水洗滌有機(jī)相并濃縮后，得到粗產(chǎn)物，再經(jīng)硅膠色譜純化(用1-5%甲醇的二氯甲烷洗脫)后得到4.40g(71%)式ⅩⅩ化合物;
1H-NMR(CDCl3)δ7.38-7.24(m，5H)6.31(bs，1H)5.87(bm，1H)5.04(d，J＝4.8Hz，1H)1.67(s，3H).
向1MKOH水溶液(140ml)和乙腈(100ml)的冷卻(-5℃)混合物中滴加化合物ⅩⅩ(2.39g，11.22mmol)的乙腈(130ml)溶液。于0℃攪拌1h，并用乙酸乙酯(300ml)、水(50ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)稀釋。分離有機(jī)相，水層進(jìn)一步用乙酸乙酯(3×200ml)萃取。合并有機(jī)相，干燥，過(guò)濾并濃縮后，得到式ⅩⅩⅠ化合物(粗品)，經(jīng)己烷/丙酮重結(jié)晶后得到1.53g(82%)產(chǎn)物(mp，184-186℃)。
向氮雜環(huán)丁酮ⅩⅩⅠ(580mg，3.55mmol)的無(wú)水THF(5.0ml)中加入咪唑(265.5mg，3.90mmol)，接著加入三乙基甲硅烷基氯(TESCl，0.654ml，3.90mmol)。將混合物攪拌1h，加入乙酸乙酯，有機(jī)層用鹽水和10%鹽酸洗滌并干燥。再經(jīng)硅膠色譜(用25%乙酸乙酯的己烷洗脫)后得到670mg(68%)化合物ⅩⅫ，為泡沫狀物。
反應(yīng)流程Ⅳ
實(shí)施例12(3R，4S)-1-叔丁氧羰基-4-苯基-3-三乙基甲硅烷氧基-2-氮雜環(huán)丁酮(Ⅳa)
于0℃氬氣環(huán)境下，向(3R，4S)-4-苯基-3-三乙基甲硅烷氧基-2-氮雜環(huán)丁酮(ⅩⅫ)(2.200g，7.92mmol)的無(wú)水SHF(25ml)攪拌溶液中加入N，N-二異丙基乙胺(1.65ml，9.510mmol，1.2當(dāng)量)。攪拌5分鐘后，加入碳酸二叔丁酯(2.08g，9.510mmol，1.2當(dāng)量)和4-二甲基氨基吡啶(193.6mg，1.581mmol，0.20當(dāng)量)。反應(yīng)混合物于0℃攪拌60分鐘，用乙酸乙酯(25ml)稀釋溶液。所得溶液經(jīng)鹽水、10%NaHCO3、10%鹽酸洗滌、干燥(MgSO4)和濃縮后得到粗化合物(油)。經(jīng)硅膠閃蒸色譜進(jìn)一步純化(用15%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)后，得到2.4g(83%)標(biāo)題β-內(nèi)酰胺白色固體;
1H-NMR(CDCl3)δ7.28(m，5H)5.03(m，2H)1.39(s，9H)0.76(t，J＝7.6Hz，9H)0.43(m，6H).
實(shí)施例13
(3R，4S)-1-苯甲?；?4-苯基-3-三乙基甲硅烷氧基-2-氮雜環(huán)丁酮(Ⅳb)
于0℃氬氣環(huán)境下，向(3R，4S)-4-苯基-3-三乙基甲硅烷氧基-2-氮雜環(huán)丁酮(ⅩⅫ)(1.000g，3.601mmol)的無(wú)水CH2Cl2(25ml)攪拌溶液中加入N，N-二異丙基乙胺(0.689ml，3.961mmol，1.1當(dāng)量)。攪拌5分鐘后加入苯甲酰氯(0.459ml，3.961mmol，1.1當(dāng)量)和4-二甲基氨基吡啶(96.5mg，0.790mmol，0.20當(dāng)量)。反應(yīng)混合物于室溫下攪拌1h，然后用乙酸乙酯(25ml)稀釋。所得溶液經(jīng)鹽水、10%NaHCO3和10%鹽酸洗滌、干燥(MgSO4)和蒸發(fā)后，得到油狀粗化合物。通過(guò)硅膠閃蒸色譜進(jìn)一步純化(用15%乙酸乙酯的己烷洗脫)后得到1.04g(80%)標(biāo)題β-內(nèi)酰胺油狀物;
1H-NMR(CDCl3)δ8.07-8.00(m，2H)7.59-7.45(m，3H)7.37-7.31(m，5H)5.41(d，J＝6.1Hz，1H)0.83-0.77(m，9H)0.54-0.42(m，6H).
實(shí)施例14N-脫苯甲?；?N-叔丁氧羰基-2′-O-三乙基甲硅烷基-7-脫氧紅豆杉醇(Ⅲa)
于氬氣環(huán)境下向兩頸燒瓶中加入7-脫氧漿果赤霉素Ⅲ(Ⅱaa)(24mg，0.042mmol)。將燒瓶抽空并用氬氣清洗三次。利用注射器加入THF(1.0ml)，將所產(chǎn)生的透明溶液冷卻至-40℃(乙腈/干冰浴)并攪拌。向攪拌溶液中加入正丁基鋰(1.6M于己烷中的溶液，32.5ml，0.052mmol)，并在2分鐘內(nèi)加入氮雜環(huán)丁酮Ⅳa(31.7mg，0.084mmol)的THF(0.5ml)溶液。立即將反應(yīng)混合物加熱至0℃，并攪拌40分鐘，然后用NH4Cl飽和溶液(3.0ml)終止反應(yīng)。水溶液用乙酸乙酯萃取;經(jīng)干燥并真空蒸發(fā)有機(jī)相后得到油狀物。經(jīng)硅膠閃蒸色譜(用25%乙酸乙酯的己烷洗脫)后得到標(biāo)題化合物Ⅲa(Y19.5mg，52%);
1H-NMR(CDCl3)δ8.11(d，J＝8.2Hz，2H)7.62-7.28(m，8H)6.45(s，1H)6.28(bt，J＝8.9Hz，1H)5.66(d，J＝8.4Hz，1H)5.45(bd，1H)5.25(bd，1H)4.95(dd，J＝8.2Hz，J′＝2.6Hz，1H)4.53(d，J＝2.0Hz，1H)4.34(d，J＝8.5Hz，1H)4.20(d，J＝8.5Hz，1H)3.78(d，J＝8.4Hz，1H)2.52(s，3H)2.47-2.25(m，2H)2.22(s，3H)2.19-1.40(m，11H)1.34-1.20(m，12H)1.14(s，3H)0.62(t，J＝8.4Hz，9H)0.22-0.48(m，6H).
實(shí)施例15N-脫苯甲酰基-N-叔丁氧羰基-7-脫氧紅豆杉醇(Ⅰa)
于-5℃，向化合物Ⅲa(13.5mg，0.0142mmol)的乙腈(1.0ml)攪拌溶液中加入鹽酸(2.6ml，36%溶液)。反應(yīng)混合物攪拌10min，薄層色譜證實(shí)在該處起始物被耗盡。終止反應(yīng)，并用乙酸乙酯(2ml)稀釋混合物。合并溶液用鹽水和10%碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥(無(wú)水硫酸鎂)并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物。再經(jīng)硅膠色譜純化(用30%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)后，得到10.2mg(86.4%)標(biāo)題化合物Ⅰa;
1H-NMR(CDCl3)δ8.11(d，J＝8.2Hz，2H)7.66-7.23(m，8H)6.47(s，1H)6.20(bt，J＝8.3Hz，1H)5.64(d，J＝8.4Hz，1H)5.39-5.17(m，2H)4.92(dd，J＝8.5Hz，J′＝2.5Hz，1H)4.60(m，1H)4.31(d，J＝8.4Hz，1H)4.18(d，J＝8.4Hz，1H)3.76(d，J＝8.4Hz，1H)3.27(d，J＝4.2Hz，1H)2.46-1.92(m，11H)1.87(s，3H)1.74(s，3H)1.64-1.39(m，2H)1.31(s，9H)1.24(s，3H)1.15(s，3H);HRMS calcd for C45H56NO14(MH+)834.3701，found834.3691.
實(shí)施例162′-O-三乙基甲硅烷基-7-脫氧紅豆杉醇(Ⅲb)
于氬氣環(huán)境下，將7-脫氧漿果赤霉素Ⅲ(Ⅱaa)(62mg，0.108mmol)裝入兩頸燒瓶，抽空后用氬氣清洗三次。用注射器注入THF(1.0ml)，將所得透明溶液冷卻至-40℃(乙腈/干冰浴)。向該攪拌溶液中加入正丁基鋰(1.43M于己烷中的溶液，91ml，0.173mmol)和氮雜環(huán)丁酮Ⅳb(66.3mg，0.174mmol)的THF(0.5ml)溶液。立即將該溶液加熱至0℃，并攪拌45分鐘，然后用NH4Cl飽和溶液(3.0ml)終止反應(yīng)。用乙酸乙酯萃取水溶液;干燥有機(jī)相(無(wú)水硫酸鎂)并真空濃縮，得到油狀物。再經(jīng)硅膠閃蒸色譜(用25%乙酸乙酯和己烷洗脫)后得到泡沫狀標(biāo)題化合物(Ⅲb)(63mg，61%);
1H-NMR(CDCl3)δ8.14(d，J＝7.6Hz，2H)7.73(d，J＝7.6Hz，2H)7.64-7.29(m，11H)7.12(d，J＝8.8Hz，1H)6.46(s，1H)6.25(t，J＝8.8Hz，1H)5.73-5.67(m，2H)4.95(dd，J＝8.2Hz，J′＝2.6Hz，1H)4.68(d，J＝2.0Hz，1H)4.33(d，J＝8.4Hz，1H)4.26(d，J＝8.4Hz，1H)3.78(d，J＝7.3Hz，1H)2.56(s，3H)2.50-2.25(m，1H)2.22(s，3H)2.18-2.06(m，2H)1.91(s，3H)1.86-1.71(m，6H)1.58(dd，J＝13.2Hz，J＝13.2Hz，J′＝7.5Hz，1H)1.23(s，3H)1.14(s，3H)0.87-0.76(m 9H)0.58-0.35(m，6H).
實(shí)施例177-脫氧紅豆杉醇(Ⅰb)
于-5℃，向化合物Ⅲb(60mg，0.063mmol)的乙腈(1.0ml)攪拌溶液中加入鹽酸(15.8ml，36%溶液)。反應(yīng)混合物攪拌15分鐘。薄層色譜證實(shí)此時(shí)起始物耗盡。終止反應(yīng)，用乙酸乙酯(2ml)稀釋混合物。合并溶液用鹽水和10%碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥(無(wú)水MgSO4)，并真空干燥，得到粗產(chǎn)物。經(jīng)硅膠閃蒸色譜純化(用30%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)后得到泡沫狀標(biāo)題化合物Ⅰb1H-NMR(CDCl3)δ8.15(d，J＝7.6Hz，2H)7.70(d，J＝7.6Hz，2H)7.63-7.30(m，11H)7.02(d，J＝8.9Hz，1H)6.42(s，1H)6.21(bt，J＝8.8Hz，1H)5.79(dd，J＝8.9Hz，J′＝2.7Hz，1H)5.66(d，J＝7.3Hz，1H)4.91(dd，J＝9.0Hz，J′＝2.2Hz，1H)4.77(dd，J＝5.2Hz，J′＝2.7Hz，1H)4.31(d，J＝8.3Hz，1H)4.23(d，J＝8.3Hz，1H)3.76(d，J＝7.3Hz，1H)3.59(d，J＝5.2Hz，1H)2.35-2.05(m，10H)2.00-1.83(m，2H)1.80(s，3H)1.77-1.70(m，3H)1.55(dd，J＝13.0Hz，J′＝7.5Hz，1H)1.20(s，3H)1.15(s，3H);HRMS，calcd for C47H52NO13(MH+)838.3439，found838.3436.
實(shí)施例18
N-脫苯甲?；?N-叔丁氧羰基-2′-O-三乙基甲硅烷基-7-脫氧-10-脫乙酸基紅豆杉醇(Ⅲc)
于氬氣環(huán)境下將7-脫氧-10-脫乙酸基漿果赤霉素Ⅲ(Ⅱb)(39.0mg，0.076mmol)裝入兩頸燒瓶中。抽空燒瓶后用氬氣清洗三次。用注射器注入THF(1.0ml)并將所得透明溶液冷卻至-40℃(乙腈/干冰浴)。向該攪拌溶液中加入正丁基鋰(0.061ml，0.083mmol，1.35M于己烷中的溶液)，并在2分鐘內(nèi)加入氮雜環(huán)丁酮Ⅳa(43.0mg，0.114mmol)的THF(0.5ml)溶液。立即加熱反應(yīng)混合物至0℃，并攪拌45分鐘，然后用NH4Cl飽和溶液(3.0ml)終止反應(yīng)。用乙酸乙酯萃取水溶液，干燥(無(wú)水MgSO4)并真空濃縮有機(jī)相后得到油狀物。再經(jīng)硅膠閃蒸色譜(用25%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)后得到標(biāo)題化合物(Ⅲc)(Y37mg，55.3%);
1H-NMR(CDCl3)δ8.19-8.08(m，2H)7.62-7.19(m，8H)6.17(bt，1H)5.70(d，J＝7.1Hz，1H)5.49(d，J＝9.5Hz，1H)5.27(d，J＝9.0Hz，1H)4.94(dd，J＝9.0，J′＝2.1Hz，1H)4.51(d，J＝1.6Hz，1H)4.32(d，J＝8.4Hz，1H)4.23(d，J＝8.4Hz，1H)3.98(d，J＝7.1Hz，1H)3.84(d，J＝16.5Hz，1H)3.35(d，J＝16.5Hz，1H)，2.54-1.08(m，31H，incl.singlets at 2.53，3H;1.75，3H;1.71，3H;1.62，3H;1.35，9H;1.19，3H;1.12，3H)0.86-0.65(m，9H)0.48-0.26(m，6H)，
實(shí)施例19N-脫苯甲酰基-N-叔丁氧羰基-7-脫氧-10-脫乙酸基紅豆杉醇(Ⅰc)
于-5℃向化合物Ⅲc(30.0mg，0.033mmol)的乙腈(1.0ml)攪拌溶液中加入鹽酸(0.0063ml，36%)，混合物攪拌10min，TLC證實(shí)此時(shí)起始物耗盡。終止反應(yīng)，用乙酸乙酯(2ml)稀釋混合物。合并溶液用鹽水和10%碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥(無(wú)水MgSO4)并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物。再經(jīng)硅膠閃蒸色譜純化(用30%乙酸乙酯的己烷洗脫)后得到20mg(77%)標(biāo)題化合物;
1H-NMR(CDCl3)δ8.14-8.11(m，2H)7.63-7.30(m，8H)6.13(bt，1H)5.67(d，J＝7.1Hz，1H)5.42(d，J＝9.5Hz，1H)5.26(d，J＝8.9Hz，1H)4.94(dd，J＝8.9，J′＝2.1Hz，1H)4.60(bd，J＝1.6Hz，1H)4.31(d，J＝8.3Hz，1H)4.21(d，J＝8.3Hz，1H)3.96(d，J＝7.1Hz，1H)3.83(d，J＝16.5Hz，1H)3.38-3.32(m，2H)，2.37-1.08(m，31H，incl.singlets at 2.37，3H;1.72，3H;1.71，3H;1.67，3H;1.33，9H;1.19，3H;1.12，3H).
實(shí)施例20
2′-O-三乙基甲硅烷基-7-脫氧-10-脫乙酸基紅豆杉醇(Ⅲd)
氬氣環(huán)境下將7-脫氧-10-脫乙?；鶟{果赤霉素Ⅲ(Ⅱb)(45mg，0.087mmol)裝入兩頸燒瓶。抽空燒瓶并用氬氣清洗三次。用注射器注入THF(1.0ml)并將所得透明溶液冷卻至-40℃(乙腈/干冰浴)。向該攪拌溶液中加入正丁基鋰(0.066ml，0.10mmol，1.52M于己烷中的溶液)及氮雜環(huán)丁酮Ⅳb(59.6mg，0.16mmol)的THF(0.5ml)溶液。立即加熱溶液至0℃，并攪拌45分鐘。此時(shí)經(jīng)TLC測(cè)得僅有少量產(chǎn)物。再加入正丁基鋰(0.066ml，0.10mmol，1.52M于己烷中的溶液)，攪拌反應(yīng)混合物60分鐘，然后用NH4Cl飽和溶液(3.0ml)終止反應(yīng)。用乙酸乙酯萃取水溶液;干燥有機(jī)相并真空濃縮后，得到油狀物。再經(jīng)硅膠閃蒸色譜(用30%乙酸乙酯的己烷洗脫)后得到標(biāo)題化合物(Ⅲd)(18mg，23%)以及起始物(Ⅱb)(回收率25mg)。基于回收的起始物的產(chǎn)率為51%;
1H-NMR(CDCl3)δ8.15-8.12(m，2H)7.73(d，J＝7.2Hz，2H)7.72-7.24(m，6H)7.13(d，J＝8.7Hz，1H)6.16(bt，J＝8.0Hz，1H)5.69-5.65(m，2H)4.95(dd，J＝7.0Hz，J′＝2.0Hz，1H)4.66(bd，J＝2.0Hz，1H)4.34(d，J＝8.6Hz，1H)4.26(d，J＝8.6Hz，1H)3.97(d，J＝7.1Hz，1H)3.83(d，J＝16.5Hz，1H)3.34(d，J＝16.5Hz，1H)，2.53-1.04(m，27H，incl.singlets at 2.52，3H;1.76，3H;1.71，6H;1.14，3H;1.00，3H)0.85-0.78(m，9H)0.52-0.37(m，6H).
實(shí)施例217-脫氧-10-脫乙酸基紅豆杉醇(Ⅰd)
于-5℃，向化合物Ⅲd(18.5mg，0.02mmol)的乙腈(1.0ml)攪拌溶液中加入鹽酸(0.004ml，36%)攪拌反應(yīng)混合物10分鐘，此時(shí)經(jīng)TLC測(cè)得起始物已消耗。終止反應(yīng)，用乙酸乙酯(2ml)稀釋混合物。合并溶液用鹽水和10%碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥(無(wú)水MgSO4)并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物。再經(jīng)硅膠閃蒸色譜純化(用50%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)后得到7.5mg(47%)化合物Ⅰd;
1H-NMR(CDCl3)δ8.16-8.13(m，2H)7.75-7.72(m，2H)7.61-7.26(m，6H)7.05(d，J＝8.9Hz，1H)6.11(bt，J＝8.0Hz，1H)5.78(dd，J＝8.9，J′＝2.5Hz，1H)5.67(d，J＝7.2Hz，1H)4.92(dd，J＝9.0，J′＝2.5Hz，1H)4.76(bs，1H)4.30(d，J＝8.3Hz，1H)4.24(d，J＝8.3Hz，1H)3.94(d，J＝7.0Hz，1H)3.80(d，J＝16.5Hz，1H)3.58(d，J＝4.7Hz，1H)3.35(d，J＝16.5Hz，1H)2.43-1.07(m，27H，incl.singlets at 2.37，3H;1.71，3H;1.68，3H;1.65，3H;1.15，3H;1.11，3H).
實(shí)施例227-脫氧-10-脫乙酸基-13-三乙基甲硅烷氧基漿果赤霉素Ⅲ(ⅩⅩⅢ)
將化合物Ⅶa(416.3mg，0.527mmol)溶于無(wú)水甲苯(10.5ml)。向該溶液中加入催化量的AIBN，所得溶液用無(wú)水N2脫氣5分鐘。加入三丁基氫化錫(708.7μl，2.63mmol)，反應(yīng)混合物于100℃加熱2h，再加入另一部分三丁基氫化錫(425.3μl，1.581mmol)。于100℃加熱反應(yīng)5.5h，至此反應(yīng)完畢。冷卻反應(yīng)混合物至室溫并進(jìn)行硅膠色譜(用20%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)，得到320mg(97%)標(biāo)題化合物。
實(shí)施例23制備三苯甲醛縮二氨，PhCH(-N＝CHPh)2向裝有機(jī)械攪拌器和溫度計(jì)的3l三頸燒瓶中加入1l濃NH4OH(30%)(14.8mol)。一次性加入苯甲醛(265g，2.50mol)的500ml 2-丙醇溶液。于約22℃劇烈攪拌混合物43小時(shí)。過(guò)濾所得淤漿，并用水(1l)洗滌濾餅。真空干燥后得到242.4g三苯甲醛縮二氨白色固體(mp100-102℃，97.4%)。
繼續(xù)上述步驟可制備通式RgCH(-N＝CHRg)2的雙亞胺如糖醛胺(Rg＝2-呋喃基)氫化噻吩酰胺(Rg＝2-噻吩基)實(shí)施例24(±)-順-3-乙酸基-1-〔(苯基)(亞芐基亞氨基)甲基〕-4-苯基氮雜環(huán)丁-2-酮(ⅩⅩⅨa)
向裝有溫度計(jì)、磁力攪拌器和滴液漏斗的1l三頸圓底燒瓶中加入三苯甲醛縮二氨(30.00g，100.5mmol)和乙酸乙酯(150ml)。在攪拌和氬氣環(huán)境下將反應(yīng)混合物冷卻至5℃，并加入三乙胺(16.8ml，121mmol)。然后在90分鐘內(nèi)滴加乙酸基乙酰氯(12.4ml，116mmol)的乙酸乙酯(300ml)溶液。保持該溫度16h后，將反應(yīng)混合物加熱至20℃(1.5h)，并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中。有機(jī)層依次用NH4Cl飽和溶液(150ml，100ml)、飽和NaHCO3水溶液(120ml)和鹽水(120ml)洗滌。為了進(jìn)行鑒定，可在此時(shí)通過(guò)MgSO4干燥有機(jī)相、過(guò)濾并真空除去溶劑分離標(biāo)題化合物。它產(chǎn)生的是定量的紅色玻璃狀所需產(chǎn)物。
HPLC purity(area)87.9%(1∶1 mixture of diastereomers);1H-NMR(CDCl3，200MHz)δ8.45(s，1H，N＝CH)，7.80-7.85(m，1H，Ph)，7.60-7.65(m，1H，Ph)，7.26-7.50(m，9H，Ph)，7.00-7.10(m，4H，Ph)，6.28(s，0.5H，NCHN)，6.23(s，0.5H，NCHN)，5.81(d，J＝4.8Hz，0.5H，H-3)，5.76(d，J＝4.8Hz，0.5H，H-3)，5.30(d，J＝4.8Hz，0.5H，H-4)，4.75(d，J＝4.8Hz，0.5H，H-4)，1.63(s，3H，CH3CO);IR(KBr)ν(cm-1)＝1763(C＝O)，1641(C＝N);UV(methanol)λmax(nm)＝216，252.
實(shí)施例25(±)-順-3-乙酸基-4-苯基氮雜環(huán)丁-2-酮(ⅩⅩⅩa)
于氬氣環(huán)境下將得自上面的實(shí)例24化合物的乙酸乙酯(500ml)溶液小心轉(zhuǎn)移至含有10%鈀-活性炭(6.00g)的2.0L Parr燒瓶中，用氫氣(4atm)處理該混合物20h，然后通過(guò)Celite過(guò)濾除去催化劑。濾餅在乙酸乙酯(200ml)中漿化，攪拌(10分鐘)并過(guò)濾。濾餅用乙酸乙酯(100ml)浸泡，并合并濾液。有機(jī)層用10%鹽酸(300ml)洗滌，然后將兩層均通過(guò)燒結(jié)玻板漏斗過(guò)濾以除去白色沉淀(二芐基胺.HCl)，用乙酸乙酯(100ml)漂洗、相分離后用另一份10%鹽酸(200ml)洗滌有機(jī)層。合并的10%鹽酸洗液用乙酸乙酯(200ml)再萃取，合并的有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液(300ml)和鹽水(250ml)洗滌，有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥、過(guò)濾后真空濃縮至終體積75ml。該混合物冷卻至4℃，并過(guò)濾分離沉淀產(chǎn)物。濾餅經(jīng)己烷(200ml)洗滌后產(chǎn)生16.12g(78.1%)標(biāo)題化合物，為白色針狀物。
mp＝150-151℃;HPLC purity(area)99.8%;1H-NMR(CDCl3，200MHz)δ＝7.30-7.38(m，5H，Ph)，6.54(bs，exchangeable，1H，NH)，5.87(dd，J＝2.7，4.7Hz，1H，H-3)，5.04(d，J＝4.7Hz，1H，H-4)，1.67(s，3H，CH3CO);IR(KBr)ν(cm-1)＝3210(N-H)，1755，1720(C＝O);KF0.17%;
Anal.Calcd.for C11H1NO3C，64.38;H，5.40;N，6.83.
FoundC，64.07;H，5.34;N，6.77.
實(shí)施例26(±)-順-3-乙酸基-1-〔(2-呋喃基)(2-呋喃亞甲基亞氨基)甲基〕-4-(2-呋喃基)氮雜環(huán)丁-2-酮(ⅩⅩⅨb)
按實(shí)例24所述方法制備標(biāo)題化合物，所不同的是用糠醛胺代替了三苯甲醛縮二氨，并反應(yīng)物的用量為18.6mmol(而不是100mmol)。即，將糠醛胺(5.00g，18.6mmol)、三乙胺(3.11ml，22.3mmol)和乙酸基乙酰氯(2.30ml，21.4mmol)反應(yīng)，得到6.192g(90.4%)標(biāo)題化合物，為灰紅色漿液。
得到的是1∶1的非對(duì)映體混合物1H-NMR(CDCl3;200MHz)δ8.211(s，0.5H，N＝CH)，8.208(s，0.5H，N＝CH)，7.14-7.59(m，3H，furyl)，6.90(d，J＝3.5Hz，0.5H，furyl)，6.83(d，J＝3.5Hz，0.5H，furyl)，6.10-6.53(m，6H，furyl，NCHN)，5.90(d，J＝4.9Hz，0.5H，H-3)，5.86(d，J＝4.8Hz，0.5H，H-3)，5.35(d，J＝4.8Hz，0.5H，H-4)，4.90(d，J＝4.9Hz，0.5H，H-4)，1.91(s，1.5H，CH3CO)，1.88(s，1.5H，CH3CO);IR(film)ν(cm-1)＝1778，1753(C＝O)，1642(C＝N);UV(methanol)λmax(nm)＝220，278.
實(shí)施例27(Ⅰ)-順-3-(乙酸基)-4-(2-呋喃基)氮雜環(huán)丁-2-酮(ⅩⅩⅩb)
按實(shí)例25所述方法制備標(biāo)題化合物，所不同的是利用制備性TLC分離產(chǎn)物，且按糠醛胺的起始量計(jì)算反應(yīng)是在2.7mmol的規(guī)模上進(jìn)行。即，將實(shí)例26的粗產(chǎn)物(1.00g)重溶于乙酸乙酯(50ml)，并加入10%pd-C(150mg)。通過(guò)制備性TLC(2mm硅膠，用1∶1乙酸乙酯/己烷洗脫)純化粗固體后，得到386mg(65.8%)標(biāo)題化合物，為黃色固體，將其用乙酸乙酯/己烷重結(jié)晶。
mp＝118-119℃;HPLC purity(area)99.4%;1H-NMR(CDCl3，200MHz)δ7.44(t，J＝1.3Hz，2H，furyl)，6.39(d，J＝1.3Hz，1H，furyl)，6.21(bs，exchangeable，1H，NH)，5.88(dd，J＝2.2，4.6Hz，1H，H-3)，5.05(d，J＝4.6Hz，1H，H-4)，1.92(s，3H，CH3CO);IR(KBr)ν(cm-1)＝3203(N-H)，1756，1726(C＝O);UV(methanol)λmax(nm)＝222.
實(shí)施例28(±)-順-3-乙酸基-1-〔(2-噻吩基)(2-噻吩基亞甲基亞氨基)甲基〕-4-(2-噻吩基)氮雜環(huán)丁-2-酮(ⅩⅩⅠⅩC)
按實(shí)例24所述方法制備標(biāo)題化合物，所不同的是用氫化噻吩酰胺代替糠醛胺。即將氫化噻吩酰胺(30g，94.7mmol)、三乙胺(15.84ml，114mmol)和乙酸基乙酰氯(11.6ml，108mmol)反應(yīng)，得到粘性油狀標(biāo)題化合物。所獲得的該混合物是非對(duì)映體混合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.52(s，1H)，8.502(s，1H)，7.51(d，J＝4.9Hz，1H)，7.45(d，J＝4.4Hz，1H)，7.41(d，J＝3.1Hz，1H)，7.37(d，1H)，7.30(m，3H)，7.16(m，1H)，7.16(m，3H)，7.09(m，2H)，6.94(m，1H)，6.89(m，1H)，6.81-6.74(m，4H)，6.48(s，1H)，6.43(s，1H)，5.85(m，2H)，5.59(d，J＝4.8Hz，1H)，5.17(d，J＝4.8Hz，1H)，1.87(s，3H)，1.86(s，3H).
實(shí)施例29(±)-順-3-(乙酸基)-4-(2-噻吩基)氮雜環(huán)丁-2-酮(ⅩⅩⅩC)
于25℃將70%乙酸水溶液(0.35ml冰醋酸和0.15ml水)一次性加到化合物ⅩⅩⅠⅩC(0.431g，1.03mmol)的二氯甲烷(2.93ml)攪拌溶液中?；亓鞣磻?yīng)化合物并攪拌2.5h。用50ml二氯甲烷稀釋混合物，然后用2份75ml飽和碳酸氫鈉水溶液和1份50ml飽和鹽水洗滌。真空濃縮有機(jī)萃取物后得到棕色油狀物，將其溶于極少量二氯甲烷中，并置于4″×0.5″硅膠柱上。用10-60%EtoAc于己烷中的梯度溶液洗脫，得到少量極性副產(chǎn)物和為白色固體的標(biāo)題化合物(0.154g，75%)。
1H-NMR(CDCl3)δ7.32(dd，J＝4.7，1.5Hz，1H)，7.03(m，2H)，6.75(bs，1H)，5.86(dd，J＝4.6，2.7Hz，1H)，5.27(d，J＝5.3Hz，1H)，1.83(s，3H);13C-NMR(CDCl3)δ169.3，165.5，138.4，127.1，127.07，126.2，78.3，54.0，20.0.
實(shí)施例30(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)-氮雜環(huán)丁-2-酮(ⅩⅩⅩⅠa)
將乙酸內(nèi)酰胺ⅩⅩⅩb(3.78g，19.4mmol)的60ml甲醇溶液與K2CO3(20mg，0.14mmol)一起攪拌90分鐘，用Dowex50W-X8中和溶液并過(guò)濾。濃縮濾液，殘余物溶于80ml無(wú)水THF，并于0℃與咪唑(1.44g，21.2mmol)和TESCl(3.4ml，20.2mmol)一起攪拌30分鐘。用乙酸乙酯稀釋溶液，并用鹽水洗滌，MgSO4干燥，濃縮。殘余物經(jīng)硅膠色譜(用3∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)后，得到4.47g(86%)無(wú)色油狀標(biāo)題化合物;
3276(broad)，1768，1184，732cm-1;1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ7.38(s，1H)，6.39(bs，1H)，6.35(s，2H)，5.05(dd，J＝4.6，2.3Hz，1H)4.78(d，J＝4.6Hz，1H)，0.82(t，J＝8.5Hz，6H)，0.50(dq，J＝8.5，1.8Hz，9H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ169.6，150.4，142.6，110.5，109.1，79.6，53.2，6.4，4.4;FABMS(DCI)M+H calcd for C13H21NO3Si268，F(xiàn)ound268.
實(shí)施例31(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)-N-叔丁氧羰基氮雜環(huán)丁-2-酮(ⅩⅩⅩⅡa)
于0℃將氮雜環(huán)丁酮ⅩⅩⅩⅠa(2.05g，7.7mmol)的30ml二氯甲烷溶液與二異丙基乙胺(1.5ml，8.6mmol)。碳酸二叔丁酯(2.0g，9.2mmol)及催化量二甲基氨基吡啶(DMAP)一起攪拌。用二氯甲烷稀釋溶液，用鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠色譜(用8∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)后得到2.0g(70%)標(biāo)題化合物，為蠟質(zhì)固體;IR(KBr)1822，1806，1712，1370，1348，1016cm-1;1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ7.38(m，1H)，6.34(m，2H)，5.04(ABq，J＝12.4，5.5Hz，2H)，1.39(s，9H)，0.82(t，9H)，0.50(m，6H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ165.7，148.0，147.7，142.8，110.5，109.7，83.4，77.4，56.0，27.8，6.3，4.4;DCIMS M+H calcd for C18H29NO5Si368，F(xiàn)ound368.
實(shí)施例32(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-噻吩基)氮雜環(huán)丁-2-酮(ⅩⅩⅩⅠb)
將3-乙酸基內(nèi)酰胺ⅩⅩⅩc(2.5g，11.8mmol)溶于甲醇(10ml)并用碳酸氫鈉飽和水溶液(10ml)處理，所得淤漿于室溫下攪拌3h。然后用乙酸乙酯(20ml)稀釋反應(yīng)，并用水(15ml)洗滌。水相用乙酸乙酯反復(fù)萃取數(shù)次，合并有機(jī)相，干燥(MgSO4)并濃縮，得到黃色固體(1.7g)。將該粗產(chǎn)物溶于無(wú)水四氫呋喃(20ml)，并將溶液在冰/水浴中冷卻至5℃。加入咪唑(752mg，1.1當(dāng)量)，攪拌5分鐘后滴加三乙基氯硅烷(1.85ml，1.1當(dāng)量)，所在懸浮液在該溫度下攪拌3h;然后過(guò)濾除去固體。有機(jī)相經(jīng)水洗(2×20ml)后干燥(MgSO4)并濃縮。再經(jīng)硅膠柱色譜純化殘余物(用己烷/乙酸乙酯7∶3洗脫)后得到無(wú)色固體狀所需產(chǎn)物(1.5g，45%)。m.p.70-71℃;1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.32-7.30(m，1H);7.05-6.98(m，2H)，5.06-5.05(m，2H)，0.82(t，9H，J＝8Hz)，0.55-0.46(m，6H);13C-NMR(75.6MHz，CDCl3)δ169.1，139.7，126.5，126.4，125.8，79.4，55.1，6.3，4.4.
替代方法將乙酸內(nèi)酰胺ⅩⅩⅩc(2.0g，9.37mmol)的40ml甲醇溶液與K2CO3(60mg，0.43mmol)一起攪拌30min，并用Dowex 50W-X8中和溶液及過(guò)濾。濃縮濾液，殘余物溶于50ml無(wú)水THF，并于0℃與咪唑(0.85g，11.3mmol)和TESCl(1.9ml，12.5mmol)一起攪拌30分鐘。用乙酸乙酯稀釋溶液并用鹽水洗滌，MgSO4干燥，濃縮。殘余物經(jīng)硅膠色譜(用3∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)后得到2.13g(86%)無(wú)色油狀標(biāo)題化合物。
實(shí)施例33(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-噻吩基)-N-叔丁氧羰基氮雜環(huán)丁-2-酮(ⅩⅩⅩⅡb)
將甲硅烷基氮雜環(huán)丁酮ⅩⅩⅩⅠb(425.7mg，1.48mmol)的溶液溶于二氯甲烷(10ml)，并在冰/水浴中冷卻至5℃。用催化量的DMAP處理溶液，然后依次用二異丙基乙胺(TESCl，0.25ml，1.0當(dāng)量)和碳酸二異丙酯(388.4mg，1.2當(dāng)量)處理。于該溫度攪拌2h后用NaHCO3飽和水溶液(5ml)終止反應(yīng)。水洗并干燥(MgSO4)有機(jī)層，并通過(guò)一短硅膠塞及濃縮得到無(wú)色油狀所需產(chǎn)物(525.3mg，93%);
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.31-7.29(m，1H)，7.08-7.07(m 1H)，7.00-6.58(m，1H)，5.31(d，1H，J＝6Hz)，5.03(d，1H，J＝6Hz)，1.40(s，9H)，0.83(t，9H，J＝8Hz)，0.56-0.47(m，6H);13C-NMR(75.6MHz，CDCl3)δ165.5，147.5，136.4，127.6，126.2，126.1，83.3，77.3，57.9，27.7，6.2，4.3.
實(shí)施例34依照本申請(qǐng)所述方法和實(shí)施例，可合成以下具體的式Ⅰ紅豆杉醇衍生物
實(shí)施例35-選擇性衍生10-脫乙酰基漿果赤霉素的C-10位的典型實(shí)例。10-苯甲?；?10-脫乙?；?7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素(ⅩⅩⅦa)
于氬氣環(huán)境下，將化合物Ⅸ(43.5mg，0.066mmol)溶于無(wú)水四氫呋喃(1.0ml)。冷卻溶液至-40℃，并緩慢加入n-BuLi(0.050ml，0.82mmol，1.6M)攪拌5分鐘后，加入苯甲酰氯(0.030ml，0.26mmol)并將反應(yīng)混合物加熱至0℃。攪拌反應(yīng)混合物1.5h，然后淬火至飽和NH4Cl溶液(2ml)。用乙酸乙酯(2×5ml)萃取水溶性介質(zhì)，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到油狀物。再經(jīng)硅膠閃蒸色譜(用50%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)后得到泡沫狀標(biāo)題化合物(30mg，60%);
1H-NMR(CDCl3)δ8.17-8.05(m，4H)，7.64-7.42(m，6H)，6.67(s，1H)，5.67(d，1H)，4.95(d，1H)，4.81(m，1H)，4.56(dd，1H)，4.30(d，1H)，4.14(d，1H)，3.92(d，1H)，2.50(m，1H)，2.30-2.0(m，18H)，1.92-1.80(m，1H)，1.72-1.62(bs，4H)，1.30(s，3H)，1.00(s，3H)，0.89(t，3H)，0.56(q，6H);HRMS(FAB/NOBA)Calculated for C42H54O11Si(MH+)762.3435.Found 762.3427.
利用這一方法可制備C-10碳酸酯、磺酸酯、氨基甲酸酯、醚等本發(fā)明范圍內(nèi)的產(chǎn)物。當(dāng)使用六甲基二硅氮烷基鋰時(shí)所得產(chǎn)率更佳。
實(shí)施例36N-脫苯甲酰基-N-叔丁氧羰基-3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-7-脫氧紅豆杉醇(Ⅰe)
于-55℃向六甲基二硅氮烷(95μl，0.45mmol)的7ml THF溶液中加入nBuLi(168μl，0.42mmol)并攪拌10分鐘。然后加入7-脫氧漿果赤霉素Ⅲ(Ⅱaa，200mg，0.35mmol)的3.5ml THF溶液，10分鐘后于-55℃滴加內(nèi)酰胺ⅩⅩⅩⅡa(562mg，1.53mmol)的3.5ml THF溶液。15分鐘后用0℃浴更換冷浴，并繼續(xù)攪拌30分鐘，用飽和NH4Cl終止反應(yīng)，用乙酸乙酯稀釋并用鹽水洗滌。有機(jī)相用MgSO4干燥，并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠色譜(用3∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)后得到397mg回收的內(nèi)酰胺和194mg粗偶聯(lián)產(chǎn)物。
于0℃將偶聯(lián)產(chǎn)物的10ml THF溶液與Bu4NF-3H2O(75mg，0.23mmol)一起攪拌10分鐘。用乙酸乙酯稀釋溶液，并用鹽水洗滌。MgSO4干燥有機(jī)層并濃縮，殘余物經(jīng)硅膠色譜純化(用1∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)后得到147mg(51%)標(biāo)題化合物，為白色透明狀固體;
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.13(d，J＝7.6Hz，2H)，7.60(t，J＝7.5Hz，1H)，7.50(t，J＝7.6Hz，2H)，7.42(s，1H)，6.47(s，1H)，6.34(dd，J＝17.9Hz，3.2Hz，2H)，6.22(bt，J＝8.7Hz，1H)，5.67(d，J＝7.3Hz，1H)，5.35(bd，J＝9.9Hz，1H)，5.25(d，J＝9.8Hz，1H)，4.94(bd，J＝7.1Hz，1H)，4.72(bs，1H)，4.26(ABq，J＝33.6，8.4Hz，2H)，3.78(d，J＝7.2Hz，1H)，3.33(bd，J＝5.4Hz，1H)，2.40-1.40(m，6H)，2.40(s，3H)，2.22(s，3H)，1.89(s，3H)，1.74(s，3H)，1.33(s，9H)，1.23(s，3H)，1.16(s，3H);IR(film)3442(broad)，1734，1714，1370，1270，1244，1176，1108，1068，756cm-1;13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ206.2，172.6，170.2，169.6，167.2，155.2，151.4，142.5，140.5，133.6，133.5，130.2，129.2，128.7，110.7，107.4，84.5，82.0，80.5，79.0，75.7，74.2，72.4，71.8，52.8，51.6，45.1，43.0，35.6，35.1，28.1，27.0，26.1，22.6，21.4，20.8，14.7，14.5;FABMS(NOBA，NaI，KI)M+Na calcd for C43H53NO15Na846，F(xiàn)ound846.
實(shí)施例37N-脫苯甲酰基-N-叔丁氧羰基-3′-脫苯基-3′-(2-噻吩基)-7-脫氧紅豆杉醇(Ⅰf)
于-55℃向7-脫氧漿果赤霉素Ⅲ(Ⅱaa，180mg，0.315mmol)的6ml THF溶液中加入LiHMDS(1.0ml，0.38M，0.38mmol)，并攪拌10分鐘。于-55℃滴加內(nèi)酰胺ⅩⅩⅩⅡb(679mg，1.77mmol)的5ml THF溶液并攪拌15分鐘，然后用0℃浴代替冷浴并攪拌30分鐘。用飽和NH4Cl使溶液淬火，用乙酸乙酯稀釋并用鹽水洗滌。MgSO4干燥有機(jī)層并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠色譜(用5∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)后得到411mg回收的內(nèi)酰胺(60%)和212mg粗偶聯(lián)產(chǎn)物(65%)。
于0℃將偶聯(lián)產(chǎn)物的20ml THF溶液與0.01ml 1.0M Bu4NF(0.10mmol)一起攪拌15分鐘。用乙酸乙酯稀釋溶液，并用鹽水洗滌。于MgSO4上干燥有機(jī)相，并濃縮，經(jīng)硅膠純化(用15%乙腈的二氯甲烷溶液洗脫)后得到113mg(43%)標(biāo)題化合物，為白色透明狀固體;1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ8.14(d，J＝7.3Hz，2H)，7.61(t，J＝7.3Hz，1H)，7.51(t，J＝7.8Hz，2H)，7.27(m，1H)，7.08(d，J＝3.3Hz，1H)，7.01(m，1H)，6.46(s，1H)，6.22(bt，J＝8.8Hz，1H)，5.68(d，J＝7.3Hz，1H)，5.52(bd，J＝9.1Hz，1H)，5.33(d，J＝9.6Hz，1H)，4.94(bd，J＝6.9Hz，1H)，4.64(d，J＝2.8Hz，1H)，4.26(ABq，J＝33.9，8.4Hz，2H)，3.78(d，J＝7.2Hz，1H)，3.45(bd，J＝5.3Hz，1H)，2.39-1.54(m，6H)，2.39(s，3H)，2.22(s，3H)，1.86(s，3H)，1.74(s，3H)，1.32(s，9H)，1.18(s，3H)，1.16(s，3H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ206.2，170.1，169.6，167.2，155.0，141.6，140.5，133.6，133.5，130.2，129.2，128.7，127.1，125.4，84.5，82.1，80.4，79.0，75.7，74.1，73.5，72.5，52.8，45.1，43.0，35.7，35.1，28.1，27.0，26.2，22.7，21.4，20.8，14.7，14.5;IR(film)3440(broad)，1734，1712，1370，1270，1244，1168，1108，1068，756cm-1;FABMS(NOBA，NaI，KI)M+Na calcd for C43H53NSO14Na862.Found862.
實(shí)施例38(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)-N-正丁氧羰基氮雜環(huán)丁-2-酮(ⅩⅩⅩⅡc)
將化合物ⅩⅩⅩⅠa(0.58g，2.17mmol)的30ml二氯甲烷溶液與二異丙基乙胺(0.4ml，2.30mmol)和氯代甲酸丁酯(0.3ml，2.36mmol)及催化量的DMAP一起攪拌。溶液攪拌1小時(shí)后，用二氯甲烷稀釋，用鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮。經(jīng)硅膠色譜殘余物(用3∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)后得到523mg產(chǎn)物(65%);
IR(KBr)1820，1734，1318，1018，734cm-1;1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ7.38(m，1H)，6.35(m，2H)，5.09(ABq，J＝15.5，5.6Hz，2H)，4.14(m，2H)，1.56(m，2H)，1.28(s，9H)，0.87(t，J＝8.7Hz，3H)，0.82(t，J＝7.9，9H)，0.50(m，6H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ165.4，149.1，147.6，142.9，110.5，109.9，77.7，66.6，55.9，30.5，18.8，13.6，6.3，4.3;DCIMS M+H calcd for C18H29NO5Si368，F(xiàn)ound368.
實(shí)施例39N-脫苯甲?；?N-異丙氧羰基-3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-2′-O-三乙基甲硅烷基-7-脫氧紅豆杉醇(Ⅲe)
向HMDS(160μl，0.75mmol)的5ml THF溶液中加入正丁基鋰(280μl，2.5M的己烷溶液，0.70mmol)，并于-55℃攪拌10分鐘。向該溶液中加入7-脫氧漿果赤霉素Ⅲ(323mg，0.566mmol)的5ml THF溶液，并攪拌10分鐘，然后加入內(nèi)酰胺ⅩⅩⅫd(308mg，0.87mmol)的5ml THF溶液。加完之后將溶液于0℃加熱30分鐘，然后用飽和NH4Cl溶液淬火。用乙酸乙酯稀釋溶液，用飽和NH4Cl洗滌并用MgSO4干燥。濃縮溶液，殘余物在硅膠上色譜(用3∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)，得到402mg標(biāo)題產(chǎn)物(76%)IR(film)1716，1270，1242，1144，1110cm-1;1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ8.10(d，J＝7.1Hz，2H)，7.56(t，J＝7.3Hz，1H)，7.47(t，J＝7.7Hz，2H)，7.37(d，J＝1.0Hz，1H)，6.45(s，1H)，6.33(m，1H)，6.22(m，2H)，5.65(d，J＝7.4Hz，1H)，5.35(bs，2H)，4.92(bd，J＝9.5Hz，1H)，4.74(bs，2H)，4.25(ABq，J＝28.6，8.3Hz，2H)，3.77(d，J＝7.3Hz，1H)，2.44(s，3H)，2.41-1.51(m，6H)，2.19(s，3H)，1.88(s，3H)，1.72(s，3H)，1.21(s，3H)，1.14(m，6H)，1.06(d，J＝6.2Hz，3H)，0.83(t，J＝7.8Hz，9H)，0.45(m，6H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ206.4，170.9，170.3，169.7，167.2，155.7，151.9，142.0，141.0，133.5，133.2，130.2，129.3，128.7，110.7，107.4，84.6，82.0，79.1，75.8，74.1，72.4，70.9，68.9，53.0，52.8，45.0，43.0，35.7，35.2，27.1，26.1，22.8，22.0，21.8，21.6，20.8，14.8，14.5，6.5，4.3;FABMS(NOBA)M+H calcd for C48H66NO15924，F(xiàn)ound924.
實(shí)施例40N-脫苯甲?；?N-異丙氧羰基-3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-7-脫氧紅豆杉醇(Ⅰg)
向甲硅烷基醚Ⅲe(114mg，0.123mmol)的12ml THF溶液中加入Bu4NF(0.13ml，1.0M的THF溶液、0.13mmol)，并攪拌10分鐘。用乙酸乙酯稀釋溶液，用鹽水洗滌，用MgSO4干燥。濃縮溶液并硅膠色譜純化殘余物(用2∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)后得到80mg標(biāo)題產(chǎn)物(98%);
IR(film)3442(broad)，1734，1714，1372，1270，1242，1180，1110，1068，1042，1020，756cm-1;1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ8.11(d，J＝7.2Hz，2H)，7.57(m，1H)，7.47(t，J＝7.2Hz，2H)，7.39(m，1H)，6.43(s，1H)，6.35(m，1H)，6.30(m，1H)，6.21(t，J＝8.9Hz，1H)，5.64(d，J＝7.4Hz，1H)，5.35(s，2H)，4.90(d，J＝9.4Hz，1H)，4.63(m，2H)，4.23(ABq，J＝30.1，8.4Hz，2H)，3.75(d，J＝7.3Hz，1H)，3.36(d，J＝5.5Hz，1H)，2.37(s，3H)，2.25-1.51(m，6H)，2.19(s，3H)，1.85(s，3H)，1.72(s，3H)，1.20(s，3H)，1.13(d，J＝6.3Hz，3H)，1.12(s，3H)，1.06(d，J＝6.3Hz，3H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ206.2，172.4，170.3，169.6，167.2，155.7，151.2，142.5，140.4，133.6，133.5，130.3，129.2，128.7，110.7，107.5，84.6，82.0，79.0，77.5，75.8，74.1，72.2，71.8，69.1，52.8，51.9，45.1，43.0，35.7，35.2，27.0，26.2，22.6，22.0，21.8，21.5，20.8，14.7，14.4;FABMS(NOBA)M+H calcd for C42H53NO15810，F(xiàn)ound810.
實(shí)施例41(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)-N-異丙氧羰基氮雜環(huán)丁-2-酮(ⅩⅩⅫd)
將化合物ⅩⅩⅪa(0.51g，1.91mmol)的25ml二氯甲烷溶液與二異丙基乙胺(0.78ml，4.4mmol)和氯代甲酸異丙酯(4.0ml，1.0M于甲苯，4.0mmol)及催化量DMAP一起攪拌1h，用二氯甲烷稀釋，用鹽水洗滌，于MgSO4上干燥，并濃縮。硅膠色譜殘余物(用5∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)后得到649mg標(biāo)題產(chǎn)物(96%);IR(KBr)1822，1812，1716，1374，1314，1186，1018，1004，746cm-1;1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ7.39(m，1H)，6.35(m，2H)，5.08(ABq，J＝15.6，5.6Hz，2H)，4.96(d，J＝10.0Hz，1H)，1.25(d，J＝6.3Hz，3H)，1.17(d，J＝6.3Hz，3H))，0.83(t，J＝7.8，9H)，0.50(m，6H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ165.5，148.6，147.8，142.9，110.5，109.9，77.6，71.1，55.9，21.7，21.6，6.3，4.4;DCIMS M+H calcd for C17H28NO5Si354，F(xiàn)ound354.
實(shí)施例42N-脫苯甲?；?N-正丁氧羰基-3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-7-脫氧紅豆杉醇(Ⅰh)
向HMDS(140μl，0.66mmol)的5ml THF溶液中加入正丁基鋰(250μl，2.5M于己烷，0.625mmol)，并于-55℃攪拌10分鐘。向該溶液中加入7-脫氧漿果赤霉素Ⅲ(303mg，0.53mmol)的5ml THF溶液，并攪拌10分鐘，然后加入內(nèi)酰胺ⅩⅩⅫc(diǎn)(294mg，0.80mmol)的5ml THF。加完之后將溶液加熱至0℃30分鐘，然后用飽和NH4Cl溶液終止反應(yīng)。用乙酸乙酯稀釋溶液，用飽和NH4Cl洗滌并于MgSO4上干燥。濃縮溶液并硅膠色譜純化殘余物(1∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)后得到342mg N-脫苯甲?；?N-正丁氧羰基-2′-O-三乙基甲硅烷基-3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-7-脫氧紅豆杉醇(69%);
IR(film)3446，1718，1272，1242，1144，1112，1068，1018，752cm-1;1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ8.10(d，J＝7.0Hz，2H)，7.56(t，J＝7.3Hz，1H)，7.47(t，J＝7.6Hz，2H)，7.37(d，J＝1.4Hz，1H)，6.45(s，1H)，6.33(dd，J＝5.1，1.9Hz，1H)，6.22(m，2H)，5.65(d，J＝7.3Hz，1H)，5.42(bd，J＝9.8Hz，1H)，5.33(bd，J＝9.5Hz，1H)，4.92(d，J＝9.5Hz，1H)，4.74(d，J＝1.7Hz，1H)，4.24(ABq，J＝26.7，8.3Hz，2H)，3.93(t，J＝6.7Hz，2H)，3.77(d，J＝7.3Hz，1H)，2.43(s，3H)，2.4-1.2(m，10H)，2.19(s，3H)，1.87(s，3H)，1.72(s，3H)，1.21(s，3H)，1.12(s，3H)，0.83(m，12H)，0.46(m，6H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ206.4，170.9，170.3，169.7，167.2，156.1，151.8，142.0，141.0，133.6，133.2，130.2，129.3，128.7，110.7，107.4，84.6，82.0，79.1，75.8，74.1，72.4，70.9，65.4，53.0，52.8，45.0，43.0，35.7，35.2，30.9，27.1，26.1，22.8，21.6，20.8，18.9，14.8，14.5，13.7，6.5，4.3;FABMS(NOBA)M+H calcd for C49H68NO15Si938，F(xiàn)ound938.
向N-脫苯甲?；?N-正丁氧羰基-2′-O-三乙基甲硅烷氧基-3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-7-脫氧紅豆杉醇(268mg，0.28mmol)的10ml THF溶液中加入Bu4NF(0.28ml，1.0M于THF，0.28mmol)，并攪拌10分鐘。用乙酸乙酯稀釋溶液，鹽水洗滌，MgSO4干燥。濃縮溶液并硅膠色譜殘余物(1∶1己烷/乙酸乙酯)后得到222mg標(biāo)題產(chǎn)物(96%);
IR(film)3442(broad)，1716，1270，1242，1108，1068，1018cm-1;1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ8.11(d，J＝7.3Hz，2H)，7.57(t，J＝7.3Hz，1H)，7.47(t，J＝7.7Hz，2H)，7.39(m，1H)，6.43(s，1H)，6.35(m，1H)，6.30(m，1H)，6.22(bt，J＝8.6Hz，1H)，5.64(d，J＝7.4Hz，1H)，5.39(m，2H)，4.90(d，J＝9.5Hz，1H)，4.70(dd，J＝5.5，1.8Hz，1H)，4.23(ABq，J＝28.3，8.4Hz，2H)，4.10(t，J＝7.2Hz，2H)，3.94(d，J＝6.7Hz，1H)，3.36(d，J＝5.5Hz，1H)，2.34(s，3H)，2.24-1.12(m，10H)，2.19(s，3H)，1.85(s，3H)，1.71(s，3H)，1.21(s，3H)，1.12(s，3H)，0.81(t，J＝7.3Hz，3H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ206.2，172.3，170.3，169.6，167.2，156.1，151.2，142.5，140.4，133.6，133.5，130.3，129.2，128.7，110.7，107.6，84.6，82.0，79.1，75.8，74.1，72.2，71.8，65.5，52.8，51.9，45.1，42.9，35.7，35.2，30.9，27.0，26.2，22.6，21.5，20.8，18.9，14.7，14.5，13.6;FABMS(NOBA)M+Na calcd for C43H53NO15Na 846，F(xiàn)ound846.
生物學(xué)數(shù)據(jù)小鼠M109模型按照William Rose在Evaluation of Madison 109 Lung Carcinoma as a Model for Screening Antitumor Drugs，Cancer Treatment Reports，65，No.3-4(1981)中所述的方法，向Balb/C×DBA/2 F1雜交小鼠的心包內(nèi)注入0.5ml 2%(W/V)的M109肺癌漿液。
在植入腫瘤后第1、5和9天或第5和8天向該小鼠的心包內(nèi)注入各種劑量的所研究化合物。每天觀察小鼠的存活狀況，直至植入腫瘤后約75-90天。每次實(shí)驗(yàn)中每組小鼠保留一只不處理以作為對(duì)照組。將化合物處理(T)小鼠及對(duì)照(C)小鼠的當(dāng)中存活時(shí)間進(jìn)行比較。對(duì)每一種化合物處理組小鼠，將該兩值之比乘以100，以百分?jǐn)?shù)表示(即%T/C)，表Ⅰ中顯示了一代表化合物的%T/C。
表Ⅰ化合物 % T/C(mg/kg/注射劑量;注射方案)Ⅰb 147(40;d.5+8)本發(fā)明式Ⅰ化合物對(duì)哺乳動(dòng)物具有腫瘤抑制活性。因此，本發(fā)明涉及的另一方面是抑制對(duì)式Ⅰ化合物敏感的哺乳動(dòng)物腫瘤的方法。本發(fā)明還提供了可用于制備式Ⅰ7-脫氧紅豆杉醇衍生物的中間體。
式Ⅰ化合物也可用于制備水溶性前藥。紅豆杉醇的許多水溶性前藥均有記載，如見(jiàn)1991、10、22授予Kingston的美國(guó)專利5，059，699;1990.7.17授予Haugwitz的美國(guó)專利4，942，184;1990、10、2授予Stella等人的美國(guó)專利4，960，790;所有這三篇美國(guó)專利均并入本文以作參考。也可將上述三篇專利中所述的水溶解殘基與式Ⅰ化合物的2-和/或10-羥基相連以使其更溶于水。因此，本發(fā)明還提供了可用于制備其前藥的抗腫瘤化合物。
本發(fā)明還提供了含有式Ⅰ化合物以及與其結(jié)合的一種或多種藥物上可接受的惰性或生理活性的載體、賦形劑、稀釋劑或助劑。紅豆杉醇或其相關(guān)衍生物的配制(包括可能的劑量)在各種文獻(xiàn)中均有報(bào)道，如美國(guó)專利4，960，790和4，814，470。可依照這些例子配制本發(fā)明化合物。例如，新化合物可以片劑、丸劑、粉狀混合物、膠囊、注射液、溶液、栓劑、乳液、分散劑、食品預(yù)混物或其它合適形式給藥。含有該化合物的藥物制劑通常是與無(wú)毒藥用無(wú)機(jī)或有機(jī)載體混合后使用，每劑量單位通常約0.01mg-2500mg，或更高，優(yōu)選50-500mg。可解藥用的載體的典型例子有甘露醇、脲、葡聚糖、乳糖、馬鈴薯或玉米淀粉，硬脂酸鎂、滑石、植物油、聚二醇、乙基纖維素、聚(乙烯吡咯烷酮)、碳酸鈣、油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯、苯甲酸芐酯、碳酸鈉、白明膠、碳酸鉀、硅酸及其它常用載體。藥物制劑也可含有無(wú)毒輔助物質(zhì)如乳化劑、防腐劑，濕潤(rùn)劑等，如脫水山梨糖醇單月桂酸酯、油酸三乙醇胺、聚氧乙烯單硬脂酸酯、甘油三棕櫚酸酯、二辛基硫代琥珀酸鈉等。
本發(fā)明化合物也可冷凍干燥，并可根據(jù)需要與其它可藥用的賦形劑混合，制成適用于非腸道、注射給藥的配方。為此，該配方可在水(通常為鹽水)中或在水與有機(jī)溶劑(如丙二醇、乙醇等)的混合物中再生。
本發(fā)明化合物可基本上按與紅豆杉醇同樣的方式用于治療哺乳動(dòng)物腫瘤。經(jīng)癌癥患者服用紅豆杉醇的模式、劑量及方案等已有廣泛研究，如見(jiàn)Ann.Int.Med.111，PP273-279(1989)。當(dāng)然，本發(fā)明化合物的給藥劑量，無(wú)論是單劑量、多劑量或日劑量，均要根據(jù)所使用的具體化合物(因?yàn)槠湫ЯΣ煌?、給藥途徑、受體大小及患者狀況等而變化。給藥劑量并無(wú)嚴(yán)格界限，但通常為有效量，給藥劑量一般為0.8-8mg/hg體重或50-275mg/m2患者。熟練癌癥治療的腫瘤學(xué)家參照以前的對(duì)紅豆杉醇及其衍生物的研究而不必進(jìn)行不必要的實(shí)驗(yàn)就可確定適當(dāng)?shù)挠行Ыo藥方案。
權(quán)利要求
1.式Ⅰ化合物
其中R1為-COR2，其中R2為RO-或R；Rg為C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6鏈炔基、C3-6環(huán)烷基，或?yàn)槭?W-RX的殘基，其中W為一鍵、C2-6鏈烯二基或-(CH2)t-，其中t為1-6；RX為萘基、苯基或雜芳基，且RX可任意被選自C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素或-CF3基團(tuán)的1-3個(gè)相同或不同基團(tuán)取代；R2為-OCOR、H、OH、-OR、-OSO2R、-OCONR0R、-OCONHR、-OCOO(CH2)tR或-OCOOR；且R和R0各自獨(dú)立為C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基、C2-6鏈炔基或苯基，它們可被選自C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素或-CF3的1-3個(gè)相同或不同基團(tuán)取代。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R2為氫或乙酰氧基;Rg為苯基、2-呋喃基、4-噁唑基、2-甲基-4-噁唑基或2-噻吩基;且R1為C1-6烷氧羰基或苯甲?；?。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，它為N-脫苯甲酰基-N-叔丁氧羰基-7-脫氧紅豆杉醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，它為7-脫氧紅豆杉醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，它為N-脫苯甲?；?N-叔丁氧羰基-7-脫氧-10-脫乙酸基紅豆杉醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，它為7-脫氧-10-脫乙酸基紅豆杉醇。
7.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，它為N-脫苯甲?；?N-叔丁氧羰基-3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-7-脫氧紅豆杉醇。
8.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，它為N-脫苯甲酰基-N-叔丁氧羰基-3′-脫苯基-3′-(2-噻吩基)-7-脫氧紅豆杉醇。
9.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，它為N-脫氧苯甲酰基-N-異丙氧羰基-3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-7-脫氧紅豆杉醇。
10.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，它為N-脫苯甲酰基-N-正丁氧羰基-3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-7-脫氧紅豆杉醇。
11.一種藥物配方，它包括作為活性成分的權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的化合物以及與其結(jié)合的一種或多種可作藥用的載體、賦形劑或稀釋劑。
12.一種治療哺乳動(dòng)物腫瘤的方法，它包括給哺乳動(dòng)物服用腫瘤敏感量的權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的化合物。
13.下式化合物
其中R2等于-OCOR、H、OH、-OR、-OSO2R、-OCONR0R、-OCONHR、-OCOO(CH2)tR或-OCOOR，其中R和R0獨(dú)自為C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基、C2-6鏈炔基或苯基，它們可任意被選自C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素或-CF3的1-3個(gè)相同或不同基團(tuán)取代;且t等于1-6。
14.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物，其中R2為氫。
15.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物，其中R2為乙酸基。
16.下式化合物
17.下式化合物
18.下式化合物
全文摘要
本發(fā)明提供了新的式I脫氧紅豆杉醇，用于制備式I化合物的中間體及其藥物配方，還提供了用式I化合物治療哺乳動(dòng)物腫瘤的方法。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1085553SQ93109348
公開(kāi)日1994年4月20日 申請(qǐng)日期1993年7月30日 優(yōu)先權(quán)日1992年10月1日
發(fā)明者V·法瑞娜, S-H·陳, D·R·蘭利, M·D·威特曼, J·坎特, D·萬(wàn)斯 申請(qǐng)人:布里斯托爾-米爾斯·斯奎布公司