專利名稱：3-取代芳基氧化吲哚類化合物的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種化合物的新用途，特別是涉及3-取代芳基氧化吲哚類的化合物在制備抗腫瘤和抗白血病的藥物中的應用。
通式(I)表示一類3-取代芳基氧化吲哚類化合物。 其中，式(I)的母體化合物，即R1＝R2＝H的化合物和部分衍生物從四十年代起在國內(nèi)外已有報道，如Ann.1942，550，160-74；R.A.Abramoritch & D.H.HeV，J.Chem.Soc.，1954，1697-1730；William B.Wright，JR & Kenneth H.Colling，J.Am.Chem.Soc.，1956，78，221；R.W.Daisley & J.Walker，J.Chem.Soc. (C)1971，3357-63。
在本發(fā)明之前，該類化合物曾被用于治療老年性癡呆和治療慢性感染性疾病等，如EP0393936A1和EP0429685A1，但其抗腫瘤和抗白血病作用一直未被研究過。
本發(fā)明的目的，就是要提供一種3-取代芳基氧化吲哚類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。
本發(fā)明的另一目的在于提供了一種合成3-取代芳基氧化吲哚類化合物的新方法。
我們在研究中發(fā)現(xiàn)，通式(I)所表示的3-取代芳基氧化吲哚類化合物具有抗腫瘤和抗白血病的活性。其中R1為H；鹵素；烷基；烯基；Ph；OH；烷氧基；或OC(O)R，其中，R為烷基；或C(O)R，其中R為H，CH3，Ar，NR′R″，其中R′R″為烷基；或COOR，其中R為H，CH3，C1-3烷基或一價金屬離子M；或NHR，其中R為H，烷基，或NO2；R2為H；CH3；C2H5；Ph；或C(O)R，其中R為H，CH3，Ar，或NR′2，其中R′為H或烷基。
上述的通式(I)所表示的化合物可按如下合成路線①或合成路線②制備 其中，合成路線①在前述文獻中已經(jīng)公開。
合成路線①是將取代的氧化吲哚與鄰硝基苯甲醛進行縮合反應。具體為，將等摩爾的取代氧化吲哚和鄰硝基苯甲醛與適量的無水碳酸鉀混合于無水乙醇中，水浴加熱(35-45℃或回流)攪拌1小時，放置過夜，抽濾水洗，得到的粗品用適宜的溶劑重結(jié)晶。
本發(fā)明提供的合成路線②是將通式(III)的取代吲哚醌與式(IV)的化合物采用Wittig反應合成得到式(I)的化合物或其中間產(chǎn)物。該方法條件溫和，原料易得，可以方便地得到不同取代基的中間體。
合成路線②的具體步驟如下將5毫升的鄰硝基溴化芐溶于10毫升苯中，加入5毫升三苯基膦，室溫反應完全后收集固體，用苯洗滌，得到2.13克白色粉末狀鄰硝基苯亞甲基三苯基溴化膦鹽；將1摩爾的上述膦鹽與1.1摩爾的吲哚醌混合于無水乙醇，無水碳酸鉀催化，室溫反應1小時，過濾得到的粗品用適宜的溶劑重結(jié)晶。
由合成路線①和合成路線②制備的式(I)的化合物可作為中間產(chǎn)物，通過進一步反應制備得到本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明采用上述的兩條合成路線，通過改變R1和R2合成了一系列具有不同油水分配系數(shù)的化合物，以改善該類化合物的溶解度。
通過對合成的已知的和未見報道的3-取代芳基氧化吲哚類化合物的體外細胞毒試驗、動物體內(nèi)療效試驗和急性毒性試驗，表明該類化合物對小鼠P388及L1210腹水瘤和S180實體瘤、W256有效，其中個別化合物對上述的腫瘤細胞具有明顯的抑制作用。
本發(fā)明通式(I)所表示的化合物與常用的抗腫瘤藥物比較，其效果至少與之相當或更好。
以上化合物可制成所有的制劑形式，適用于各種給藥途徑。
下面，通過實施例和試驗例詳細說明本發(fā)明，但不限制本發(fā)明。
實施例下述的合成反應中所用的試劑均為市售的產(chǎn)品。
所使用的儀器為RP-1型熔點測定儀，天津分析一廠，溫度計未經(jīng)校正；紅外分光光度計，日立270-30，日本；質(zhì)譜檢測儀，HP-5988A。
實施例13-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(1，R1＝R2＝H)的制備實施例1-A4.0克(0.03摩爾)氧化吲哚，4.5克(0.03摩爾)鄰硝基苯甲醛，3克無水碳酸鉀與80毫升無水乙醇混合，水浴加熱(35-45℃)攪拌1小時，放置過夜，抽濾水洗得桔紅色固體，用無水乙醇重結(jié)晶，得到產(chǎn)物，熔點237-8℃，產(chǎn)率66.6％。
實施例1-B2.0克(4.1毫摩爾)鄰硝基苯亞甲基三苯基溴化膦鹽溶于15毫升無水乙醇中，加1.5克碳酸鉀，混合物為呈藍色的溶液，加0.66克(4.5毫摩爾)吲哚醌，反應混合物室溫攪拌1小時，過濾收集得到桔紅色固體，用乙醇和水洗滌，得到0.6克產(chǎn)品，再用乙醇重結(jié)晶，得到的產(chǎn)物溶點237-8℃，紅外光譜、質(zhì)譜等均與實施例1-A得到的產(chǎn)品相同。
實施例2-4分別用5-硝基-，5-甲基-，5-苯?；趸胚岽鎸嵤├?-A中的氧化吲哚，重復實施例1-A的方法制備得到產(chǎn)物2-4。
實施例25-硝基-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(2，R1＝NO2，R2＝H)，產(chǎn)率70.0％，熔點254-6℃。
實施例35-甲基-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(3，R1＝CH3，R2＝H)，產(chǎn)率60.8％，熔點240-1℃。
實施例45-苯甲酰-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(4， R2＝H)，產(chǎn)率44.0％，熔點235-7℃。
實施例5-12分別用5-甲氧基，5-氯，5-溴，4-氯，6-氯，6-氟，5，7-二溴吲哚醌代替吲哚醌，重復實施例1-B的方法，制得產(chǎn)品6-12。
實施例55-甲氧基-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(6，R1＝CH3O，R2＝H)，產(chǎn)率44.8％，熔點215-7℃(分解)。
實施例65-氯-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(7，R1＝Cl，R2＝H)，產(chǎn)率42.8％，熔點243-6℃。
實施例75-溴-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(8，R1＝Br，R2＝H)，產(chǎn)率78.6％，熔點249-51℃。
實施例84-氯-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(9，R1＝Cl，R2＝H)，產(chǎn)率59.3％，熔點275-7℃。
實施例96-氯-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(10，R1＝Cl，R2＝H)，產(chǎn)率29.0％，熔點266-7℃。
實施例106-氟-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(11，R1＝F，R2＝H)，產(chǎn)率77.0％，熔點227-30℃。
實施例115，7-二溴-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(12，R1＝5，7-di-Br，R2＝H)，產(chǎn)率33.0％，熔點261-3℃。
實施例125-氯乙酰-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(13，R1＝ClCH2CO，R2＝H)25克(0.173摩爾)無水三氯化鋁懸浮于50毫升1，2-二氯乙烷中，冰水冷卻，攪拌下滴加7毫升(約0.086摩爾)氯乙酰氯，滴畢攪拌反應40分鐘，然后加入11.5克(0.043摩爾)3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(1，實施例1制得的產(chǎn)品)，混合物在0-25℃攪拌3小時，50-60℃反應5.5小時，傾入1000毫升冰水中，過濾水洗，得到14克粗品，用四氫呋喃重結(jié)晶得11.2克黃色粉末狀固體。
產(chǎn)率76.0％，熔點224-7℃。
實施例131-甲基-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(15，R1＝H，R2＝CH3)0.54克(2毫摩爾)3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(1，實施例1制得的產(chǎn)品)，和55毫升無水乙醇加入250毫升三頸燒瓶中，攪拌下滴加10％的氫氧化鉀-乙醇溶液6毫升，反應液由黃變成棕紅色，滴入0.28毫升(3毫摩爾)的硫酸二甲酯，加熱溫度在55-70℃，反應約7小時，放置過夜，過濾，濾液濃縮放置，析出結(jié)晶，乙醇重結(jié)晶，得到產(chǎn)品0.12克。
產(chǎn)率21.4％，熔點156-7℃。
實施例14
1-乙?；?3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(16，R1＝H，R2＝CH3CO)0.54克(2毫摩爾)3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚(1，實施例1制得的產(chǎn)品)，3.8毫升乙酸酐加入到25毫升圓底燒瓶中，加熱攪拌反應，并使溫度控制在110-120℃，反應完全后放冷，加入水2毫升，繼續(xù)攪拌，析出黃色固體，放冷，過濾水洗，干燥得黃色固體0.49克，熔點155-8℃，丙酮重結(jié)晶，得黃色片狀結(jié)晶0.12克。
產(chǎn)率20％，熔點160.5-161.5℃。
上述由實施例1-14得到的產(chǎn)物，其理化性質(zhì)列于表1中。
實驗例1-4實驗材料倒置生物顯微鏡(XSZ-D2)，重慶光學儀器廠)；各種瘤株均由中國醫(yī)學科學院血液學研究所藥物藥理室傳代培養(yǎng)；體內(nèi)試驗用DBA/2小鼠由中國醫(yī)學科學院動物中心提供。
實驗例13-取代芳基氧化吲哚類化合物的體外抗腫瘤活性體外抗腫瘤活性(細胞毒作用)，測定化合物對小鼠L1210細胞系抑制50％細胞生長的濃度IC50(摩爾/升)，方法如下
取96孔板，每孔加入2×104個/170微升的L1210細胞，將已經(jīng)配好并用生理鹽水稀釋成6個不同濃度的化合物溶液30微升分別加入不同的孔中，每個濃度做兩個平行樣，對照組只加生理鹽水，在5％二氧化碳孵箱中37℃下培養(yǎng)72小時，取出，臺盼蘭染色，計活細胞數(shù)，以對照組的細胞數(shù)為對照，計算不同濃度化合物對細胞的百分抑制率細胞生長抑制率＝ 以百分抑制率為Y(％)，化合物相應的濃度的對數(shù)為X，回歸求得Y與X關(guān)系的方程，再由方程計算出IC50(摩爾/升)。
實驗例1-14制備的化合物對L1210細胞毒試驗的結(jié)果如表2所示。
表2、化合物對L1210細胞株72小時細胞毒試驗化合物編號IC50(μMol/L)1 0.4032 1.653 0.8214 3.776 1.527 5.398 3.409 5.1110 6.9311 1.5612 9.9813 2.3415 /16 /實驗例2-4體內(nèi)抗腫瘤活性和急性毒性試驗參照徐叔云等主編的《藥理實驗方法學》(人民衛(wèi)生出版社，1991年，第二版)中所敘述的相應方法進行。
實驗例2化合物1的體內(nèi)抗P388、L1210、S180、U14和EAC的活性分別給接種由P388、L1210、S180、U14和EAC的小鼠用化合物1進行體內(nèi)的抗腫瘤試驗，試驗結(jié)果列入表3中表3、化合物1的抗腫瘤活性瘤株劑量給藥途徑生命延長率或抑制率(ml/kg)和次數(shù) (T/C×100％)P38820 i.p×6 19140 i.p×6 292L1210 25.3 i.p×6 231.745 i.p×6 256.4S18025.3 i.p×6 193.445 i.p×6 224.9U14 75 i.p×7 155.8EAC40i.p×6 295.6實驗例3化合物1在小鼠體內(nèi)的抗肝癌腹水瘤的作用以每組7只小鼠按下表(表4)進行試驗，結(jié)果列于表4中表4、化合物1的抗肝癌腹水瘤的作用化合物給藥途徑 劑量 存活天數(shù) 抑制率(ml/kg)(天) (％)對照組 腹腔 / 9.33±0.87 /1 腹腔4015.29 ±4.5463.99實驗例4急性毒性試驗靜脈注射化合物1，LD50大于2000mg/kg。
實驗例5化合物1與常用抗腫瘤藥物的比較試驗分別給接種由L1210、S180的W256的小鼠用化合物1進行體內(nèi)的抗腫瘤試驗，結(jié)果列入表5-7中。
表5、化合物1與5-氟嘧啶的抗L1210活性(n＝10，i.p×6)劑量(mg/Kg) 生命延長率(T/C×100％)25.3231.745 256.460 285.512.5(5-Fu陽性對照) 280表6、化合物1與5-氟嘧啶對S180腹水瘤的療效劑量(mg/Kg)生命延長率(T/C×100％)25.3193.445 224.960 225.912.5(5-FU) 176.4表7、化合物1與噻替派對W256的療效(n＝10，i.p×6)劑量(mg/kg)抑制率[(T-C)/C×100％]20-2240-6480-64(顯示毒性)2(TSPA) -96
表1、化合物的理化性質(zhì)
續(xù)表1、化合物的理化性質(zhì)
權(quán)利要求
1.一種具有如下結(jié)構(gòu)通式(I)的化合物在制備抗腫瘤和/或抗白血病藥物中的應用 其中R1為H；鹵素；烷基；烯基；Ph；OH；烷氧基；或OC(O)R，其中，R為烷基；或C(O)R，其中R為H，CH3，Ar，NR′R″，其中R′R″為烷基；或COOR，其中R為H，CH3，C1-3烷基或一價金屬離子M；或NHR，其中R為H，烷基，或NO2；R2為H；CH3；C2H5；Ph；或C(O)R，其中R為H，CH3，Ar，或NR′2，其中R′為H或烷基。
2.如權(quán)利要求1所述的應用，其特征在于所述的化合物選自如下化合物中的一種或多種3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；5-硝基-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；5-甲基-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；5-苯甲酰-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；5-甲氧基-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；5-氯-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；5-溴-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；4-氯-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；6-氯-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；6-氟-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；5，7-二溴-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；5-氯乙酰-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；1-甲基-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚；1-乙酰基-3-(鄰硝基苯亞甲基)氧化吲哚之一的化合物。
3.一種制備具有結(jié)構(gòu)通式(I)的化合物的方法， 其特征在于，是將通式(III)的化合物 與通式(IV)的化合物 按Wittig反應合成通式(I)的化合物或其中間產(chǎn)物，所述的中間產(chǎn)物經(jīng)傅氏反應得到通式(I)的化合物，式中R1和R2與權(quán)利要求1具有相同的定義。
4.一種按權(quán)利要求3的方法制備的化合物。
5.一種包含有按權(quán)利要求3的方法制備的化合物的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明提供一類以通式(I)表示的3-取代芳基氧化吲哚類化合物，在制備抗腫瘤和/或抗白血病藥物中的應用。
文檔編號A61K31/403GK1115640SQ9410795
公開日1996年1月31日 申請日期1994年7月26日 優(yōu)先權(quán)日1994年7月26日
發(fā)明者楊純正, 謝評, 段建榮, 苗華, 宋先梅 申請人:中國醫(yī)學科學院血液學研究所