專利名稱：一種從蟾酥中提取華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從中藥蟾酥中提取高純度華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物的方法，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
中藥蟾酥來源于蟾蜍科動物中華大蟾蜍Bufo bufo gar gar i z an s Cantor或黑眶蟾蜍Bufo melanostictus Schneider的干燥分泌物。辛,溫；有毒。歸心經(jīng)，具有解毒，止痛，開竅醒神功能，有毒。用于癰疽疔瘡，咽喉腫痛，中暑神昏，痧脹腹痛吐瀉。蟾酥因現(xiàn)代藥理研究表明其具有抗腫瘤、抗病原微生物和強(qiáng)心等作用而受到了國內(nèi)外的重視，其所含的華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物即是其活性成分之一，且是蟾酥中含量較高的活性成分。蟾酥因產(chǎn)地不同、加工方法不同和采收季節(jié)和時間的差異，蟾酥中華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物的含量差異較大，不利于較好的控制其藥效，因此提純蟾酥中的活性成分是較好的保證其安全性和有效性的手段。但現(xiàn)有技術(shù)中這兩種成分的提取物，純度一般都很低。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種從中藥蟾酥中提取高純度華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物的方法，華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物的含量大于80%。其提取方法如下:
(1)蟾酥粉碎成通過40目篩的粗粉，加入20 40倍蟾酥量的70 95%乙醇，加熱回流提取2 3次，每次提取2 4小時，提取液濾過，濾液回收乙醇至無乙醇味，得乙醇提取液A ；
(2)提取液A中，加入5倍蟾酥量，粒度為100 200目的硅膠，蒸干，加入已裝有硅膠的層析柱的頂端(硅膠柱的徑高比為1:3 10，裝量為提取液A中蟾酥量的20 30倍)，先以石油醚-丙酮(9:1)混合溶劑為洗脫劑，洗脫，棄去洗脫液，繼以石油醚-丙酮(8.5:1.5)混合溶劑為洗脫劑，洗脫至華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物成分洗脫完全，得洗脫液B ；
(3)洗脫液B加熱回收溶劑至無溶劑味，減壓干燥器內(nèi)干燥48h，得高純度的華蟾酥毒基和膽毒靈混合物提取物；
(4)測定華蟾酥毒基和蟾毒靈的含量。下面為本發(fā)明的實驗內(nèi)容及結(jié)果
1.提取方法: 根據(jù)蟾酥藥材的性質(zhì)，藥材的粒度選擇為40目。根據(jù)影響提取的因素，用正交試驗法考察提乙醇濃度(A)、提取時間(B)、料液比(C)對提取效果的影響，考察的因素及水平見表1，考察指標(biāo)為提取的華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物的量和提取浸膏量。考察因素及水平見表I。表I蟾酥提取條件考察L9 (33)正交水平設(shè)計表
權(quán)利要求
1.一種從蟾酥中提取華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物的制備方法，其特征是，蟾酥粉碎成中粗粉后，加入70 95%乙醇提取，提取液經(jīng)過硅膠柱層析分離，得到高純度的華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物，華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物的含量達(dá)到80%以上。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，包括以下步驟: (1)蟾酥粉碎成通過40目篩的粗粉，每次加入20 40倍蟾酥量的70 95%乙醇，力口熱回流提取2 3次，每次提取2 4小時，提取液濾過，濾液回收乙醇至無乙醇味，得乙醇提取液A ； (2)提取液A中，加入5倍蟾酥量，粒度為100 200目的硅膠，蒸干，得上樣硅膠，加入已裝有硅膠的層析柱的頂端，先以體積比為9:1的石油醚-丙酮混合溶劑為洗脫劑，洗脫，棄去洗脫液，繼以體積比為8.5:1.5的石油醚-丙酮混合溶劑為洗脫劑，洗脫至華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物成分洗脫完全，得洗脫液B ； (3)洗脫液B加熱回收溶劑至無溶劑味，減壓干燥器內(nèi)干燥48h，得高純度的華蟾酥毒基和膽毒靈混合物提取物； (4)高純度華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物提取物的含量測定； 所述硅膠柱的徑高比為1:3 10，裝量為提取液A中蟾酥量的10 30倍。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，提取用乙醇的濃度為95%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述硅膠柱的徑高比為·2.5:13.5。
全文摘要
本發(fā)明一種從蟾酥中提取華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物的制備方法，其特征是，蟾酥粉碎成中粗粉后，加入70～95%乙醇提取，提取液經(jīng)過硅膠柱層析分離，得到高純度的華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物，華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物的含量達(dá)到80%以上。用本發(fā)明的制備方法提取的華蟾酥毒基和蟾毒靈混合物的總含量達(dá)80%以上。
文檔編號A61K31/585GK103191133SQ20131014235
公開日2013年7月10日 申請日期2013年4月23日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月23日
發(fā)明者林桂濤, 張超, 鄧華亮 申請人:山東中醫(yī)藥大學(xué)