專利名稱：一種羊蹄鞣質(zhì)的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種羊蹄鞣質(zhì)的制備方法，尤其是一種采用超臨界二氧化碳萃取技術脫脂和大孔樹脂除雜對羊蹄鞣質(zhì)進行精制純化的方法。
背景技術：
羊蹄為蓼科植物羊蹄或尼泊爾羊蹄的根。分布于西南及陜西、甘肅、青海、江蘇、江西、湖北、湖南、西藏等地。羊蹄根及根莖含有結合及游離的大黃素(emodin)，大黃素甲醚 (physcion)，大黃酚(chrysophanol)，總量1. 73%，其中結合型0. 27%，游離型1.46%。還含有酸模素(musizin)即是尼泊爾羊蹄素；還含有酸模素和鞣質(zhì)。羊蹄具有清熱解毒，止血， 通便，殺蟲的功效。用于鼻出血，吐血衄血，腸風便血，痔血，崩漏功能性子宮出血，血小板減少性紫癜，慢性肝炎，肛門周圍炎，大便秘結；外用治外痔，急性乳腺炎，黃水瘡，疥癬，白禿， 癰瘡腫毒，跌打損傷。鞣質(zhì)又稱單寧，是存在于植物體內(nèi)的一類結構比較復雜的多元酚類化合物。目前對中藥中的鞣質(zhì)研究較少，但是鞣質(zhì)的作用卻不容忽視。鞣質(zhì)具有收斂性，內(nèi)服治療胃出血、水瀉等癥，外用于創(chuàng)傷、灼傷，可使創(chuàng)傷后滲出物中蛋白質(zhì)凝固，形成痂膜，可減少分泌和防止感染，鞣質(zhì)能使創(chuàng)面的微血管收縮，有局部止血作用。還能凝固微生物的原生質(zhì)，有一定的抗菌作用，有的可抗腸道病菌，用作止痢藥；鞣質(zhì)外用能沉淀蛋白質(zhì)，用作創(chuàng)面保護藥和局部止血藥，治療燒、燙傷；鞣質(zhì)還能作為生物堿和重金屬中毒時的化學解毒劑，它能與這些物質(zhì)生成沉淀，減少吸收或不被人體吸收。此外還具有抗衰老抗變態(tài)反應、抗炎、驅(qū)蟲、降血壓等作用。鞣質(zhì)作為一類重要的中藥成分，由于提取與分離的困難，使得鞣質(zhì)的研究一直很少，進展也很慢，所以鞣質(zhì)的其他作用與應用還有待繼續(xù)研究，特別是在提純技術和抗腫瘤、艾滋病研究上具有很大的進展空間。目前，國內(nèi)對鞣質(zhì)的研究較少，尚處于起步階段，趙素霞等(遼寧中醫(yī)藥大學學報， 2008,10 (10):134-135)以70%丙酮超聲提取30min，所得產(chǎn)品純度不高。因此，研究出一種制備羊蹄中鞣質(zhì)的方法是非常必要的，對于擴大藥源以及羊蹄的綜合利用具有很重要的
眉、ο

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種操作簡單，產(chǎn)品純度較高的羊蹄鞣質(zhì)提取方法。為解決上述技術問題，本發(fā)明采用下列技術方案
(1)將羊蹄藥材進行干燥、粉碎，采用超臨界二氧化碳技術萃取羊蹄中的油脂類物質(zhì)；
(2)殘渣加入5-8倍(V/W)丙酮溶液進行超聲循環(huán)提取1-3次，每次1-池，合并提取
液；
(3)提取液回收丙酮，加入熱明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，進行^00-3000rpm的離心，分出沉淀，加入丙酮溶液，在30-50 °C下加熱溶解，30 V保溫30-60min，濾除明膠，得到濾液；
(4)濾液回收丙酮，上大孔樹脂吸附，先用水和10-20%乙醇溶液洗去雜質(zhì)，再用60-70% 的乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，冷凍干燥即得羊蹄鞣質(zhì)。所述步驟(1)中超臨界二氧化碳萃取溫度為30_55°C，壓力為20_28MPa，萃取時間為 0.5-lh。所述步驟(2)中丙酮溶液濃度為50-70%。所述步驟(2)中超聲頻率為25-35KHZ。所述步驟(3)中明膠溶液濃度為2-5%，丙酮溶液濃度為70-100%。所述步驟(4)中大孔樹脂可選HPD-400、ADS_17和S_8中的一種或幾種，洗脫流速為 0. 8-1. 2BV/h0綜上所述，本發(fā)明存在以下優(yōu)點
(1)采用超臨界二氧化碳萃取技術脫除油脂類物質(zhì)，快速、高效；
(2)采用超聲循環(huán)提取的方法提取羊蹄鞣質(zhì)，提取效率高；
(3)以50-70%的丙酮溶液作為提取溶劑，減少了多糖的溶出；
(4)采用大孔樹脂粗分羊蹄鞣質(zhì)，成本低，分離效果好；
(5)本發(fā)明所有工藝步驟均在相對較低的溫度下進行，節(jié)省能源，且保證了鞣質(zhì)的生物活性。下面將結合具體實施方式
對本發(fā)明做進一步闡述，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1
將羊蹄藥材進行干燥、粉碎，取lkg，采用超臨界二氧化碳技術萃取羊蹄中的油脂類物質(zhì)，萃取溫度為30°c，壓力為20MPa，萃取時間為lh，殘渣加入5倍(V/W) 70%丙酮溶液進行超聲循環(huán)提取3次，每次lh，超聲頻率為25KHz，合并提取液，回收丙酮，加入5%熱明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，進行3000rpm的離心，分出沉淀，加入100%丙酮溶液，在30°C下加熱溶解，30°C保溫60min，濾除明膠，得到濾液，回收丙酮，上ADS-17型大孔樹脂吸附，先用水和10%乙醇溶液洗去雜質(zhì)，再用60%的乙醇溶液洗脫，洗脫流速為1. 2BV/h，收集洗脫液， 濃縮，冷凍干燥即得羊蹄鞣質(zhì)15. 9g，含量為73. 1%。實施例2:
將羊蹄藥材進行干燥、粉碎，取lkg，采用超臨界二氧化碳技術萃取羊蹄中的油脂類物質(zhì)，萃取溫度為35°C，壓力為25MPa，萃取時間為lh，殘渣加入8倍(V/W) 50%丙酮溶液進行超聲循環(huán)提取1次，超聲頻率為25KHz，每次池，合并提取液，回收丙酮，加入3%熱明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，進行^OOrpm的離心，分出沉淀，加入90%丙酮溶液，在40°C下加熱溶解，30°C保溫50min，濾除明膠，得到濾液，回收丙酮，上ADS-17型大孔樹脂吸附，先用水和15%乙醇溶液洗去雜質(zhì)，再用70%的乙醇溶液洗脫，洗脫流速為0. 8BV/h，收集洗脫液， 濃縮，冷凍干燥即得羊蹄鞣質(zhì)23. 7g，含量為72. 0%。實施例3:將羊蹄藥材進行干燥、粉碎，取lkg，采用超臨界二氧化碳技術萃取羊蹄中的油脂類物質(zhì)，萃取溫度為55°C，壓力為^MPa,萃取時間為0.證，殘渣加入5倍(V/W) 60%丙酮溶液進行超聲循環(huán)提取2次，超聲頻率為35KHz，每次lh，合并提取液，回收丙酮，加入洲熱明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，進行^OOrpm的離心，分出沉淀，加入70%丙酮溶液，在50°C下加熱溶解，30°C保溫30min，濾除明膠，得到濾液，回收丙酮，上ADS-17型大孔樹脂吸附，先用水和20%乙醇溶液洗去雜質(zhì)，再用70%的乙醇溶液洗脫，洗脫流速為1. 2BV/h，收集洗脫液， 濃縮，冷凍干燥即得羊蹄鞣質(zhì)22. lg，含量為65. 8%。實施例4:
將羊蹄藥材進行干燥、粉碎，取lkg，采用超臨界二氧化碳技術萃取羊蹄中的油脂類物質(zhì)，萃取溫度為45°C，壓力為25MPa，萃取時間為0.證，殘渣加入8倍(V/W) 60%丙酮溶液進行超聲循環(huán)提取3次，超聲頻率為25KHz，每次1.證，合并提取液，回收丙酮，加入5%熱明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，進行^OOrpm的離心，分出沉淀，加入80%丙酮溶液，在30°C下加熱溶解，30°C保溫60min，濾除明膠，得到濾液，回收丙酮，上HPD-400型大孔樹脂吸附，先用水和15%乙醇溶液洗去雜質(zhì)，再用65%的乙醇溶液洗脫，洗脫流速為lBV/h，收集洗脫液， 濃縮，冷凍干燥即得羊蹄鞣質(zhì)22. 0g，含量為66. 3%。實施例5:
將羊蹄藥材進行干燥、粉碎，取lkg，采用超臨界二氧化碳技術萃取羊蹄中的油脂類物質(zhì)，萃取溫度為55°C，壓力為25MPa，萃取時間為lh，殘渣加入8倍(V/W) 70%丙酮溶液進行超聲循環(huán)提取3次，超聲頻率為25KHz，每次lh，合并提取液，回收丙酮，加入5%熱明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，進行3000rpm的離心，分出沉淀，加入90%丙酮溶液，在50°C下加熱溶解，30°C保溫30min，濾除明膠，得到濾液，回收丙酮，上S-8型大孔樹脂吸附，先用水和 15%乙醇溶液洗去雜質(zhì)，再用65%的乙醇溶液洗脫，洗脫流速為1. 2BV/h,收集洗脫液，濃縮， 冷凍干燥即得羊蹄鞣質(zhì)18. 7g，含量為82. 5%。
權利要求
1.一種羊蹄鞣質(zhì)的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)將羊蹄藥材進行干燥、粉碎，采用超臨界二氧化碳技術萃取羊蹄中的油脂類物質(zhì)；(2)殘渣加入5-8倍(V/W)丙酮溶液進行超聲循環(huán)提取1-3次，每次1-池，合并提取液；(3)提取液回收丙酮，加入熱明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，進行^00-3000rpm的離心，分出沉淀，加入丙酮溶液，在30-50°C下加熱溶解，30°C保溫30-60min，濾除明膠，得到濾液；(4)濾液回收丙酮，上大孔樹脂吸附，先用水和10-20%乙醇溶液洗去雜質(zhì)，再用60-70% 的乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，冷凍干燥即得羊蹄鞣質(zhì)。
2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中超臨界二氧化碳萃取溫度為30-55°C，壓力為20-28MPa，萃取時間為0. 5_lh。
3.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中丙酮溶液濃度為 50-70%ο
4.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中超聲頻率為25-35KHZ。
5.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中明膠溶液濃度為2-5%， 丙酮溶液濃度為70-100%。
6.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟(4)中大孔樹脂可選 HPD-400、ADS-17和S-8中的一種或幾種，洗脫流速為0. 8-1. 2BV/h。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種羊蹄鞣質(zhì)的制備方法，包括以下步驟(1)將羊蹄藥材進行干燥、粉碎，采用超臨界二氧化碳技術萃取羊蹄中的油脂類物質(zhì)；(2)殘渣加丙酮溶液進行超聲循環(huán)提?。?3)提取液回收丙酮，加入熱明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，離心，分出沉淀，加入丙酮溶液，加熱溶解，保溫30-60min，濾除明膠，得到濾液；(4)濾液回收丙酮，上大孔樹脂吸附，先用水和10-20%乙醇溶液洗去雜質(zhì)，再用60-70%的乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，冷凍干燥即得產(chǎn)品。本發(fā)明可得到含量較高的鞣質(zhì)，含量可到65%以上，且工藝方法提取溶劑少，提取周期短，提取率高，易于實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號A61P29/00GK102283904SQ20111026485
公開日2011年12月21日 申請日期2011年9月8日 優(yōu)先權日2011年9月8日
發(fā)明者萬冬梅, 劉東鋒 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司