專利名稱：用于控制球蟲病的方法和組合物的制作方法
相關(guān)申請(qǐng)的交叉參考本申請(qǐng)要求于2001年7月27日提交的第60/308,215號(hào)美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)。
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及用于控制動(dòng)物球蟲感染的方法和組合物。特別是，本發(fā)明涉及含有酵母細(xì)胞和酵母細(xì)胞壁的制劑在控制哺乳動(dòng)物和鳥類動(dòng)物的球蟲感染中的應(yīng)用。
球蟲病是哺乳動(dòng)物和鳥類動(dòng)物的原生動(dòng)物寄生性感染，其由艾美球蟲屬(Eimeria)球蟲引起，并導(dǎo)致腸損傷、腹瀉、腸炎和死亡。艾美球蟲屬(E.tenella、E.maxima、和E.acervulina)是困擾家禽產(chǎn)業(yè)的三種最常見的球蟲。這些球蟲種類在作用方式上不同。E.tenella攻擊盲腸，而E.maxima和E.acervulina則分別攻擊腸道的中部和上部。
球蟲病在家畜生產(chǎn)中是一種影響經(jīng)濟(jì)效益的疾病，即使不甚嚴(yán)重的感染，也會(huì)導(dǎo)致飼料轉(zhuǎn)化效率下降和重量增加的減少，在現(xiàn)代的集約式動(dòng)物生產(chǎn)中也可以體現(xiàn)出利潤(rùn)與損失之間的差別。球蟲感染已知是其它綜合征，特別是壞死性腸炎(一種在腸的各種部位導(dǎo)致腸內(nèi)層壞死的細(xì)菌感染)的先導(dǎo)因素。
由于它們異常的繁殖能力，以及由于在相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間里為其提供了異常生存能力的其卵囊壁的組成，球蟲生物體得以在環(huán)境中生存下來(lái)。卵囊通過(guò)糞便和褥草傳播，但也可以以空氣傳播的方式傳播，例如通過(guò)塵埃的運(yùn)動(dòng)，和通過(guò)載體生物如蚯蚓、甲蟲、蒼蠅、以及其它害蟲來(lái)傳播。因?yàn)?，例如，將褥草再利用是家禽行業(yè)的慣常做法，所以先前受感染的畜群的褥草中的球蟲就成為將來(lái)感染的來(lái)源。
常規(guī)消毒劑對(duì)于球蟲來(lái)說(shuō)是相對(duì)無(wú)效的。對(duì)于保持適當(dāng)?shù)男l(wèi)生和減少暴露給動(dòng)物和鳥的卵囊的數(shù)量，房舍的徹底清潔和嚴(yán)格的生物安全措施是必要的。遺憾的是，由于潛在的寄主動(dòng)物較快的周轉(zhuǎn)(例如，在烤子雞經(jīng)營(yíng)中雞群的快速更替)，卵囊的持久貯主經(jīng)常就會(huì)保留下來(lái)。甚至少量的卵囊就能夠在幾周內(nèi)引發(fā)大規(guī)模的感染。因此，保持適當(dāng)?shù)男l(wèi)生以外的其它控制措施就很有必要。
目前已知的球蟲控制方法包括使用抗球蟲藥物和接種疫苗。就其預(yù)期目的來(lái)說(shuō)，抗球蟲藥通常是有效的；將其放入飼料或經(jīng)由飲用水可以方便地提供給受治療的動(dòng)物。典型的藥物包括離子載體(莫能星、拉沙洛西)和化學(xué)抗球蟲劑。目前用于治療/對(duì)照球蟲的藥物的突出缺點(diǎn)是，隨著時(shí)間的過(guò)去，治療的生物體對(duì)特定藥物會(huì)變的具有耐藥性。因此，不同的藥物必須以輪流或交錯(cuò)的方式(往復(fù)方案)加以使用。即使在實(shí)行往復(fù)方案的情況下，在抗球蟲藥物改變的過(guò)程中，抗球蟲感染的效果被打折扣也是可能的。另外，某些藥物，雖然在控制球蟲病中是有用的，但是為了確保與肉、乳和蛋的銷售有關(guān)的安全問(wèn)題，在屠宰或消費(fèi)動(dòng)物產(chǎn)品之前，需要預(yù)先將藥物從受治療的動(dòng)物中退出。
就其預(yù)期目的來(lái)說(shuō)，目前使用的抗球蟲生物體疫苗由于在受治療的動(dòng)物中產(chǎn)生了抗感染的活性免疫因而通常是有效的。然而，疫苗非常昂貴，并且具有這樣的缺點(diǎn)，即必須含有適宜的、對(duì)涉及致病作用的每一種類的球蟲生物體激起保護(hù)性免疫反應(yīng)的抗原。例如，在家禽中，這就可能是感染雞的七種艾美球蟲當(dāng)中的一種或全部。此外，疫苗接種可能會(huì)引起各種嚴(yán)重的亞臨床感染，并因此在那些接種疫苗的動(dòng)物中對(duì)生產(chǎn)率產(chǎn)生負(fù)面影響。
因此，在本領(lǐng)域中，仍然需要控制家畜球蟲感染的可供選擇的方法，而這種方法的益處是具有改進(jìn)的生產(chǎn)率和經(jīng)濟(jì)效果，并且不會(huì)導(dǎo)致生物體耐藥性的發(fā)生和/或屠宰前需要長(zhǎng)期的藥物退出時(shí)間。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了用于預(yù)防、減輕或改善包括豬和家禽在內(nèi)的家畜的球蟲感染的方法和組合物。所述組合物一般可以被描述為含有酵母細(xì)胞或酵母細(xì)胞壁的制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物包含得自酵母細(xì)胞壁的制劑，其中所述制劑包含大量甘露低聚糖(mannanoligosaccharide)類，例如甘露低聚糖。本發(fā)明方法包括將一定量的含有酵母細(xì)胞壁或含有酵母細(xì)胞的組合物喂給動(dòng)物，以在被喂給所述組合物的動(dòng)物中預(yù)防或減輕球蟲感染，或一旦發(fā)生球蟲感染改善球蟲感染的有害作用?？梢詫⒏事兜途厶呛?或含有酵母細(xì)胞壁或含有酵母細(xì)胞的組合物混合到動(dòng)物的飼料配給中，或可以將該組合物作為添加劑提供給動(dòng)物。本發(fā)明組合物可以由可食用的酵母制備，所述酵母包括但不限于啤酒糖酵母(Saccharomyces cerevisiae)(或其它糖酵母屬(Saccharomyces)酵母)、假絲酵母屬(Candida)、克魯維氏酵母屬(Kluyveromyces)或有孢圓酵母屬(Torulaspora)。作為本發(fā)明的具體實(shí)例，得自酵母的制劑由啤酒糖酵母NCYC 1026的細(xì)胞制得。當(dāng)含有酵母細(xì)胞或酵母細(xì)胞壁的組合物還含有抗球蟲離子載體(例如莫能星或拉沙洛西)和/或甾類表面活性劑(例如皂苷元)時(shí)，就能夠進(jìn)一步增強(qiáng)預(yù)防、減輕或改善球蟲感染的效果。
從下面說(shuō)明和描述本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案的說(shuō)明中，通過(guò)最適合實(shí)施本發(fā)明的方式的一個(gè)舉例說(shuō)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本發(fā)明的其它目的將會(huì)變的顯而易見。正如可以認(rèn)識(shí)到的，本發(fā)明可以具有其它不同的實(shí)施方案，并且，在不背離本發(fā)明的前提下，可對(duì)其若干細(xì)節(jié)在各種明顯的方面加以修改。因此，本文的描述就性質(zhì)上來(lái)說(shuō)應(yīng)當(dāng)被看作說(shuō)明性的而不是限制性的。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了預(yù)防、減輕或改善動(dòng)物球蟲感染的新方法。特別是，本發(fā)明提供了預(yù)防或改善動(dòng)物球蟲感染的方法，包括將有效量的得自酵母的制劑喂給動(dòng)物，所述制劑合乎需要地含有包括甘露低聚糖在內(nèi)的酵母細(xì)胞壁材料。用于本發(fā)明組合物和方法的得自酵母細(xì)胞的制劑可用多種可食用的酵母細(xì)胞制備，所述酵母包括但不限于糖酵母屬、假絲酵母屬、克魯維氏酵母屬或有孢圓酵母屬。在具體舉例說(shuō)明的實(shí)施方案中，所述酵母是啤酒糖酵母主NCYC 1026。該菌株保存在American Type Culture Collection，Manassas，VA(保藏號(hào)46785)和Agricultural Research Service，Peoria，IL(保藏號(hào)NRRLY-11875)中。作為具體實(shí)例，得自酵母細(xì)胞的組合物可以從Alllech，Inc.，Nicholasville，KY(BIO-MOS)購(gòu)得。該組合物含有酵母細(xì)胞壁材料和由酵母產(chǎn)生的甘露低聚糖。
如本文所述的本發(fā)明組合物可以作為添加劑喂給動(dòng)物或混合到市售的飼料中。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠認(rèn)識(shí)到，喂給動(dòng)物的組合物的量隨動(dòng)物的種類、動(dòng)物的年齡、動(dòng)物的大小以及加入組合物的飼料的類型或根據(jù)作為單獨(dú)營(yíng)養(yǎng)添加劑的應(yīng)用而變化。
本發(fā)明方法以及所描述的組合物適用于預(yù)防或改善任何動(dòng)物，包括但不限于牛、豬、鳥類、馬、綿羊、兔和山羊的球蟲感染。不是所有的獸群或鳥群都會(huì)感染球蟲，也不是在所有的農(nóng)業(yè)環(huán)境都有球蟲感染。可以喂給含有酵母細(xì)胞壁的組合物以預(yù)防、減輕或改善球蟲感染的鳥類包括家禽、鴿子和寵物鳥(金剛鸚鵡、長(zhǎng)尾小鸚鵡、鳳頭鸚鵡、金絲雀、雀類、鸚鵡等)。飼養(yǎng)供產(chǎn)蛋、肉或娛樂的鳥包括但不限于鵪鶉、松雞、野雞、小雞、鵝鴨子、火雞等。哺乳動(dòng)物也能夠受益于得自酵母的添加劑中，特別是那些在農(nóng)業(yè)上非常重要的動(dòng)物，例如豬、牛、野牛、馬、綿羊、山羊等。
臨床上的免疫攻擊研究包括用口服特定劑量的球蟲使幼鳥感染，然后測(cè)定感染的水平、腸內(nèi)組織的損害、死亡率以及感染對(duì)生產(chǎn)率的影響(重量增加飼料轉(zhuǎn)化)。
如在下文實(shí)施例中所舉例說(shuō)明的那樣，用得自酵母細(xì)胞的組合物，特別是如下文所述制得的含有酵母細(xì)胞壁和甘露低聚糖的組合物喂給鳥類動(dòng)物，減輕了損害比率、感染對(duì)重量增加的消極影響以及腸損害的嚴(yán)重程度。這些實(shí)施例不應(yīng)當(dāng)被解釋為對(duì)本發(fā)明范圍的限制。當(dāng)含有酵母細(xì)胞或含有酵母細(xì)胞壁的組合物還含有抗球蟲的離子載體如莫能星或拉沙洛西和/或抗球蟲甾類皂苷元(見例如EP 1,082,909)時(shí)，在抗球蟲效果方面的性能就可以得到進(jìn)一步的提高。
當(dāng)使用時(shí)，縮寫和術(shù)語(yǔ)被認(rèn)為在本領(lǐng)域內(nèi)是標(biāo)準(zhǔn)的，并且常用于專業(yè)雜志例如在本文中引用的雜志。
在不與本公開相矛盾的程度上，本申請(qǐng)引用的所有參考文獻(xiàn)引入本文以作參考。
實(shí)施例實(shí)施例1用360只Cornish Rock雄性烤焙小雞進(jìn)行28天的試驗(yàn)，來(lái)研究?jī)煞N含藥物的飼料對(duì)E.tenella有害作用的抑制效果(見表I&II)。
給一天大小的小雞喂含有莫能星(60g/kg)或含有酵母細(xì)胞壁/甘露低聚糖組合物(BIO-MOS，Alltech，Inc.，Nichola sville，KY)(1kg/頓)的標(biāo)準(zhǔn)玉米大豆飼料。試驗(yàn)組包括1)陰性對(duì)照組(未藥物治療，未攻擊)；2)陽(yáng)性對(duì)照組(未藥物治療，攻擊)；3)莫能星治療，攻擊組和4)BIO-MOS-治療，攻擊組。在每個(gè)治療組中，將小雞隨機(jī)分配到的三個(gè)同樣的圍欄中。在14天大時(shí)，通過(guò)用管飼給予的E.tenella(50,000個(gè)卵囊/小雞)將小雞感染。測(cè)定的反應(yīng)變量包括所描述的每周的體重增加和盲腸損害得分(Johnson和Reid.1970“Anticoccidial DrugsLesion Scoring Technique in Batteryand Floor Pen Experiments with Chickens.”Exp.Parasitol.2830-36)。把圍欄用作試驗(yàn)單位，通過(guò)使用LDS方法和常規(guī)線性模型方法(SAS Institute，1985，Cary，NC)來(lái)評(píng)估治療差異。模型報(bào)告僅包括治療效果。當(dāng)觀察到顯著差異時(shí)(P＜0.05)，應(yīng)用最小有效差異(LSD)法來(lái)測(cè)定治療之間的差異。
給藥莫能星和BIT-MOST都顯著(P＜.05)減輕了如盲腸損害得分所表示的E.tenella感染的嚴(yán)重程度(表I)。相對(duì)于E.tenella-攻擊對(duì)照，接受BIO-MOS的小雞，其改善的健康狀況在平均重量增加的改善中得到了反映(表II)。接受BIO-MOS的小雞，其平均重量增加與在未攻擊的(健康的)對(duì)照組所觀察到的相似，并且比在未藥物治療的E.tenella-攻擊組所觀察到的高5％。在接受標(biāo)準(zhǔn)的莫能星治療的小雞中沒有看到重量增加的類似改善。
實(shí)施例2用360只Cornish Rock雄性烤焙小雞進(jìn)行28天的試驗(yàn)，來(lái)研究?jī)煞N含藥物的飼料對(duì)E.maxima感染的抑制作用。將每個(gè)治療組三十只一天大小的小雞放在并列式籠子里，并喂給標(biāo)準(zhǔn)的大豆玉米食物，該食物包含莫能星(60g/kg)或含有酵母細(xì)胞壁材料和甘露低聚糖的市售得自酵母細(xì)胞的組合物(BIO-MOS)(1kg/噸)。四個(gè)試驗(yàn)組包括1)陰性對(duì)照組(未藥物治療，未攻擊)；2)陽(yáng)性對(duì)照組(未藥物治療，攻擊)；3)莫能星治療，攻擊組，和4)BIO-MOS-治療，攻擊組。如實(shí)施例1所述，把小雞分配到各個(gè)治療組和同樣的圍欄中。
在14天大時(shí)，通過(guò)用管飼給予的E.maxima(50,000個(gè)卵囊/小雞)將小雞感染。測(cè)定的反應(yīng)變量包括每周的體重增加和盲腸損害得分。如實(shí)施例1所述，將這樣的測(cè)定進(jìn)行方差條件。
莫能星和BIT-MOS治療分別顯著減輕了與E.maxima感染有關(guān)的盲腸損害得分。莫能星將平均盲腸損害減輕了21％，而BIO-MOS將平均盲腸損害減輕了28％(表III)。這些結(jié)果證實(shí)，BIO-MOS食物添加劑改善了由E.maxima感染引起的盲腸損害的嚴(yán)重程度。
BIO-MOS治療的小雞2-4周的平均體重增加是陽(yáng)性對(duì)照(未藥物治療，攻擊)小雞平均體重增加的27％(表IV)，并且在克服與球蟲攻擊有關(guān)的生長(zhǎng)抑制方面比莫能星更有效。因此，在有E.maxima攻擊的情況下，喂給BIO-MOS的小雞能夠保持作為生產(chǎn)率指標(biāo)的體重增加。
實(shí)施例3用360只Cornish Rock雄性烤焙小雞進(jìn)行28天的試驗(yàn)，來(lái)研究?jī)煞N含藥物的飼料對(duì)于E.acervulina感染的抑制效果。
給一天大小的小雞喂含有沙利霉素(6mg/kg)或BIO-MOS(1千克/噸)的標(biāo)準(zhǔn)玉米大豆食物。四個(gè)試驗(yàn)組是1)陰性對(duì)照，未藥物治療，未攻擊組；2)沙利霉素治療，攻擊組；3)BIO-MOS治療，攻擊組，和4)BIO-MOS治療，未攻擊組。在每個(gè)治療組中，將小雞隨機(jī)分配到的三個(gè)同樣的圍欄中。在14天大時(shí)，通過(guò)用管飼給予的E.acervulina(500,000個(gè)卵囊/小雞)將小雞感染。測(cè)定的反應(yīng)變量包括每周的體重增加和盲腸損害得分。如實(shí)施例1所述，使用常規(guī)線性模型方法(SAS Institute，Cary，NC)將數(shù)據(jù)進(jìn)行ANOVA分析。
與沙利霉素一樣，BIO-MOS顯著減輕了如盲腸損害得分所表示的盲腸損害。BIO-MOS將損害嚴(yán)重程度減輕49％，而沙利霉素將損害嚴(yán)重程度減輕了57％(表V)。BIO-MOS治療的小雞的平均體重增加比陽(yáng)性對(duì)照小雞高12％(表VI)。結(jié)果證實(shí)，添加酵母細(xì)胞壁制劑可以用來(lái)保持用E.acervulina進(jìn)行攻擊的小雞的生產(chǎn)率。
實(shí)施例4進(jìn)行20-天的試驗(yàn)，來(lái)確定酵母細(xì)胞組合物在用形成孢子的艾美球蟲屬感染的烤焙型小雞(Cobb)中的抗球蟲活性。將160只小雞(一天大小)放到并列式籠子中(每個(gè)籠子10只小雞，459平方厘米/小雞)。每個(gè)治療組有四個(gè)同樣的籠子。提供標(biāo)準(zhǔn)玉米大豆食物，和可自由獲得的水。試驗(yàn)組如下1)陰性對(duì)照組(未藥物治療，未攻擊)；2)陽(yáng)性對(duì)照組(未藥物治療，攻擊)；3)BIO-MOS，1kg/噸(攻擊)組；和4)沙利霉素60g/噸(攻擊)組。
在14天大時(shí)，通過(guò)管飼法分別口服給予含有50,000 E.acervulina、5,000 E.maxima或40,000 E.tenella卵囊的攻擊接種液。在9、14和20天大時(shí)，測(cè)定體重和飼料的消耗量。感染后六天，將全部小雞處死，并用上文Johnson和Reid(1970)的方法給損害評(píng)分。在腸的上部(E.acervulina)、中部(E.maxima)和盲腸(E.tenella)部位評(píng)估損害得分。
對(duì)于BIO-MOS治療和沙利霉素治療的小雞，與兩個(gè)對(duì)照組比較，在腸的上部和中部，盲腸損害得分分別顯著地(P＜0.05)減小(表VII)。兩個(gè)治療組盲腸損害得分的減小顯示，與未藥物治療的、攻擊的對(duì)照組比較，BIO-MOS和沙利霉素都能夠控制球蟲攻擊。
在攻擊對(duì)照組中，攻擊后的重量增加顯著(P＜0.05)低于(18.48％)未攻擊對(duì)照組(表VIII)。在接受BIO-MOS的小雞中，觀察到不太嚴(yán)重的重量減少(11.6％)。
當(dāng)用艾美球蟲屬進(jìn)行攻擊時(shí)，BIO-MOS能夠減輕損害得分并使攻擊后的重量增加得到改善。這些發(fā)現(xiàn)支持了這樣的結(jié)論，即在有球蟲感染的情況下，BIO-MOS能夠減輕感染的嚴(yán)重程度并提高生產(chǎn)率。
實(shí)施例5進(jìn)行20天的試驗(yàn)，以確定BIO-MOS在用形成孢子的艾美球蟲屬進(jìn)行攻擊的烤焙型小雞(Cobb)中的抗球蟲活性。將160只小雞(一天大小)放到并列式籠子中(每個(gè)籠子10只小雞，459平方厘米/小雞)。每個(gè)治療組有四個(gè)同樣的籠子。提供標(biāo)準(zhǔn)玉米大豆食物，和可自由獲得的水。試驗(yàn)組如下1)陰性對(duì)照組(未藥物治療，未攻擊)；2)陽(yáng)性對(duì)照組(未藥物治療，攻擊)；3)BIO-MOS，1kg/噸(攻擊)組；和4)沙利霉素60g/噸(攻擊)組。
在14天大時(shí)，通過(guò)管飼法分別口服給予含有50,000 E.acervulina、5,000 E.maxima或40,000 E.tenella卵囊的攻擊接種液。在0、14和20天大時(shí)，測(cè)定體重和飼料的消耗量。
感染后六天，將全部小雞處死，并用上文Johnson和Reid的方法給損害評(píng)分。在腸的上部(E.acervulina)、中部(E.maxima)和盲腸(E.tenella)部位評(píng)估損害得分。
與對(duì)照組比較，在腸的全部區(qū)域，BIO-MOS治療和沙利霉素治療組的損害得分顯著減小(表IX)。BIO-MOS將損害減輕了33％。BIO-MOS也能夠用于保持小雞的生產(chǎn)率，這在與陽(yáng)性對(duì)照(未藥物治療的、進(jìn)行了攻擊的)組相比，攻擊后104％的重量增加上得到了反映。該攻擊后的重量增加反映了在有艾美球蟲屬感染的情況下，小雞生產(chǎn)率的改善。
實(shí)施例6進(jìn)行三個(gè)42天的實(shí)驗(yàn)，以評(píng)估AVATEC(拉沙洛西、Alpharma、Fort Lee、NJ)—一種抗球蟲的離子載體(90.7g/噸)；桿菌肽Zn(50g/噸)和BIO-MOS(0.5kg/噸)對(duì)在循環(huán)褥草上飼養(yǎng)的烤焙型小雞生長(zhǎng)的影響。將6 0只(一天大小)Cornish Rock雄性烤焙型小雞放到四個(gè)試驗(yàn)組中(重復(fù)三次)，其包括1)對(duì)照(未藥物治療的小雞)組；2)BIO-MOS治療組，3)AVATEC治療組，和4)桿菌肽ZN治療組。將松木刨花用做試驗(yàn)的循環(huán)褥草，其中此前用E.tenella、E.maxima、和E.acervulina感染的烤焙型小雞已經(jīng)在該循環(huán)褥草上生長(zhǎng)過(guò)。試驗(yàn)開始之前，把含有該循環(huán)褥草的圍欄分配到四個(gè)治療組，并將一天大小的小雞放入其中，用此相同的循環(huán)褥草進(jìn)行三個(gè)連續(xù)依次試驗(yàn)。
為了符合1994 National Research Counil的要求，食物主要由補(bǔ)充以必要的維生素和礦物質(zhì)的玉米和大豆組成。每周測(cè)量體重。在全部三個(gè)試驗(yàn)中，喂給添加以BIO-MOS的小雞的平均體重顯著地高于對(duì)照組的小雞(P＜0.05)，并與喂給桿菌肽和AVATEC(拉沙洛西)的小雞的體重相差不大(表XI)。由于感染的原因，全部治療的小雞的平均體重的平均值，隨著褥草再使用的每一個(gè)循環(huán)而減輕。然而，對(duì)于全部三個(gè)試驗(yàn)，接受BIO-MOS的小雞的平均體重比對(duì)照組的平均體重平均高出7％，這說(shuō)明BIO-MOS在有球蟲攻擊的情況下，能夠保持生產(chǎn)率。
實(shí)施例7
把200只(一天大小)小雞放在十個(gè)微生物隔離室中。在15天大時(shí)，將150只小雞隨機(jī)平均分配到10個(gè)微生物隔離室中。五個(gè)對(duì)照室中的小雞接受未處理的引酵物飼料；治療室中的小雞接受添加了0.1％BIO-MOS的相同飼料。在22天時(shí)，全部小雞通過(guò)管飼法口服接受2.9×105個(gè)E.acervulina卵囊。在每一個(gè)隔離室的花紋鐵絲網(wǎng)地板下面收集小雞的糞便，并從21至35天計(jì)數(shù)蟲卵的數(shù)量。在第26、27和29天時(shí)，治療的小雞糞便中的蟲卵數(shù)量較低(P＜0.05)，說(shuō)明BIO MOS在感染的高峰時(shí)能夠顯著減少卵囊的數(shù)量。這反映了在家禽的生產(chǎn)系統(tǒng)，BIO-MOS能夠減少E.acervulina的繁殖。
實(shí)施例8在本文所述的試驗(yàn)中，得自酵母的組合物是用啤酒糖酵母株NCYC1026(American Type Culture Coltection，Manassas，VA，保藏號(hào)46885；Agricultural Research Service，Peoria，IL，保藏號(hào)NRRL Y-11875)的細(xì)胞制備的。用本領(lǐng)域通常已知的方法獲得酵母細(xì)胞壁提取物(見Pepper，H.J.1979。酵母的生產(chǎn)和酵母產(chǎn)品，157頁(yè)微生物技術(shù)&微生物工藝，Vol.1(第2版)，Academic Press)。簡(jiǎn)單地說(shuō)，酵母生物可以按照與食品有關(guān)的發(fā)酵和飲料工業(yè)中使用的普通技術(shù)進(jìn)行生長(zhǎng)?？梢允褂霉┛焖俜敝辰湍讣?xì)胞用的復(fù)合培養(yǎng)基。很多普通的含糖培養(yǎng)基，例如稀糖蜜，也可以用于細(xì)胞生長(zhǎng)。其它可以使用的培養(yǎng)基組分包括玉米、木糖、亞硫酸鹽廢液和乳清。然后，將酵母細(xì)胞，例如，用離心法從用盡的培養(yǎng)基中分離出來(lái)，洗滌并再次收集，生成“酵母乳油”。
分離后，將酵母乳油中的細(xì)胞裂解。本領(lǐng)域里的很多常用方法都可以用來(lái)裂解酵母生物體，包括自溶、水解或機(jī)械方法(凍結(jié)-融化、擠出或超聲)。作為具體實(shí)例，將酵母細(xì)胞懸浮液用水稀釋至濃度為10-12％干燥固體，然后加熱至140°F。將pH值用例如氫氧化鈉調(diào)整至大約8.5。在溶解期間，可加入蛋白酶如木瓜蛋白酶或多種堿性或中性蛋白酶，以便加速酵母蛋白在破碎的細(xì)胞材料中的溶解。在用蛋白酶初步培養(yǎng)通常大約2小時(shí)后，將pH值調(diào)至約8.0，并將混合物的溫度緩慢地增加至大約158°F。將該混合物在158 °F保持30分鐘。用離心法收集含有酵母細(xì)胞壁的顆粒材料，以除去低分子量的細(xì)胞內(nèi)組分，并將細(xì)胞壁提取物濃縮。將所得濃縮物干燥(用多種本領(lǐng)域已知方法，包括噴霧干燥或轉(zhuǎn)鼓式干燥)以形成吸濕性、水溶性的粉末。該干燥粉末可以以約0.5-約20kg/噸的比例直接加到動(dòng)物飼料中。
前述實(shí)施例證明了本發(fā)明方法，即將得自酵母的組合物提供給具有感染球蟲危險(xiǎn)的動(dòng)物，能夠有效地減輕球蟲感染的病害作用。在代表性的現(xiàn)代家畜生產(chǎn)條件下，本發(fā)明可有效地減輕由常見的球蟲生物體引起的球蟲感染有害作用。此外，本發(fā)明方法和組合物比得上或優(yōu)于包括用莫能星和沙利霉素治療的現(xiàn)有的控制球蟲感染的方法。有利的是，本發(fā)明方法和組合物能夠改善球蟲感染的有害作用，并且沒有產(chǎn)生耐藥性球蟲生物體的危險(xiǎn)，也不會(huì)在受治療動(dòng)物的蛋、肉或乳品銷售之前，需要一個(gè)長(zhǎng)期的屠宰前的藥物退出階段。
前面所述的本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案，是出于舉例說(shuō)明和描述的目的，而非意圖窮盡本發(fā)明或?qū)⒈景l(fā)明限制于所公開的確切形式。根據(jù)上面的講授，明顯的改變或變化是可能的。選擇和描述實(shí)施方案是為了提供本發(fā)明原理的最好的舉例說(shuō)明和實(shí)際應(yīng)用，以使本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能夠?qū)⒈景l(fā)明應(yīng)用于各種實(shí)施方案，并按照預(yù)期的具體應(yīng)用而做各種改變。當(dāng)按照公平、合理和合法的尺度理解時(shí)，所有這樣的改變和變化都在權(quán)利要求書所確定的本發(fā)明范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.在患有球蟲感染或容易受到球蟲感染的動(dòng)物中預(yù)防或減輕球蟲感染的方法，所述方法包括將有效預(yù)防或減輕球蟲感染的量的包含酵母細(xì)胞壁的組合物喂給所述動(dòng)物的步驟。
2.權(quán)利要求1的方法，其中在喂給所述動(dòng)物之前，將所述組合物與飼料摻和在一起。
3.權(quán)利要求1的方法，其中將所述組合物作為飼料添加劑喂給動(dòng)物。
4.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物含有至少一種由酵母產(chǎn)生的甘露低聚糖。
5.權(quán)利要求1的方法，其中將所述組合物配制成用于喂給牛、豬、鳥、馬、羊、兔和山羊的形式。
6.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物得自選自酵母屬、假絲酵母屬、克魯維氏酵母屬和有孢圓酵母屬的物種。
7.權(quán)利要求6的方法，其中所述組合物得自啤酒糖酵母。
8.權(quán)利要求7的方法，其中所述組合物得自啤酒糖酵母株NCYC1026。
9.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物含有干燥的酵母細(xì)胞。
10.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物還含有甘露低聚糖。
11.權(quán)利要求5的方法，其中所述動(dòng)物是豬或鳥類動(dòng)物。
12.權(quán)利要求11的方法，其中所述鳥類動(dòng)物是小雞、火雞、鴨子、鵝、野雞、鵪鶉或?qū)櫸秫B。
13.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物還含有至少一種抗球蟲的離子載體。
14.權(quán)利要求1的方法，其中所述還含有至少一種抗球蟲的甾類皂苷元。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述組合物還含有至少一種抗球蟲的甾類皂苷元。
16.權(quán)利要求1的方法，其中在喂給含有酵母細(xì)胞壁的組合物的步驟之前或之后，對(duì)動(dòng)物進(jìn)行監(jiān)測(cè)以確定球蟲感染的存在。
全文摘要
給容易受到球蟲感染或感染了球蟲的動(dòng)物，特別是暴露于致病艾美球蟲屬的家禽喂以含有酵母細(xì)胞壁的組合物，包括含有甘露低聚糖的組合物，結(jié)果使得與未被喂給這樣的組合物的動(dòng)物相比，家畜的生產(chǎn)率和身體狀況得到改善。
文檔編號(hào)A61K31/715GK1607955SQ02818854
公開日2005年4月20日 申請(qǐng)日期2002年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2001年7月27日
發(fā)明者K·A·道森, A·E·塞夫頓 申請(qǐng)人:全技術(shù)公司