專利名稱：作為HPPARα激活劑的、取代的噁唑與噻唑衍生物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及某些新穎的化合物。確切地說，本發(fā)明涉及激活α亞型人過氧化物酶體增殖蛋白激活性受體(hPPARα)的化合物。本發(fā)明還涉及制備這些化合物的方法和預防或治療PPARα介導的疾病或病癥的方法。
心血管疾病與若干獨立的危險因素有關。它們包括高血壓、纖維蛋白原水平增加、高水平的甘油三酯、LDL膽固醇升高、總膽固醇升高和低水平的HDL膽固醇。HMG CoA還原酶抑制劑(“抑制素”)可用于治療以高LDL-c水平為特征的病癥。已經(jīng)顯示，在有些患者中降低LDL-c不足以減少心血管疾病的危險，特別是具有正常LDL-c水平的那些人。這群人是通過低HDL-c的獨立危險因素加以鑒別的。對于與低HDL-c水平有關的心血管疾病危險增加，目前還沒有成功的藥物療法(也就是說，目前市場上還沒有藥物可用于提高HDL-c＞40％)(Bisgaier，C.L；Pape，M.E.Curr.Pharm.Des.(現(xiàn)行藥物設計)1998，4，53-70)。
X綜合征(包括代謝綜合征)被寬松地定義為多種異常的總稱，包括高胰島素血、肥胖、高水平的甘油三酯、尿酸、纖維蛋白原、低密度LDL-c顆粒和纖溶酶原激活物抑制劑1(PAI-1)水平升高和HDL-c水平降低。
NIDDM被描述為抗胰島素性，它繼而導致葡萄糖輸出異常和骨骼肌攝取葡萄糖降低。這些因素最后引起葡萄糖耐量減少(IGT)和高胰島素血。
過氧化物酶體增殖蛋白激活性受體(PPAR)是器官受體類，屬于類固醇/類視黃醇受體超家族的配體激活性轉錄因子。例如參見Willson，T.M.和Wahli，W.，Curr.Opin.Chem.Biol.(現(xiàn)行的化學與生物學觀點)，(1997)，Vol.1.PP 235-241。
已經(jīng)分離了三種哺乳動物過氧化物酶體增殖蛋白激活性受體，稱為PPAR-α、PPAR-γ和PPAR-δ(也已知為NUC1或PPAR-β)。這些PPAR通過與稱為PPAR應答元件(PPRE)的DNA序列元件結合，調(diào)節(jié)靶基因的表達。迄今，PPRE已被鑒別為大量編碼調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的蛋白質(zhì)的基因的增強子，提示了PPAR在脂肪形成信號級聯(lián)和脂質(zhì)體內(nèi)平衡中扮演關鍵角色(H.Keller和W.Wahli，Trends Endoodn.Met.291-296，4(1993))。
某些激活或者相互作用于一種或多種PPAR的化合物已經(jīng)在動物模型中參與甘油三酯與膽固醇水平的調(diào)節(jié)。例如參見美國專利5,847,008(Doebber等)與5,859,051(Adams等)和PCT公報WO 97/28149(Leibowitz等)與WO 99/04815(Shimokawa等)。
貝特類是一類可以降低血清甘油三酯20-50％、降低LDL-c 10-15％、轉變LDL粒徑從更易導致動脈粥樣化的低密度至正常密度LDL-c、和增加HDL-c 10-15％的藥物。實驗證據(jù)表明，貝特類對血清脂質(zhì)的作用是通過激活PPARα來介導的。例如參見B.Staels等，Curr.Pharm.Des.(現(xiàn)行藥物設計)，1-14，3(1)，(1997)。激活PPARα導致肝內(nèi)增加脂肪酸代謝和減少脂肪酸從頭合成的酶的轉錄，進而導致甘油三酯合成與VLDL-c產(chǎn)生/分泌減少。另外，激活PPARα減少了apoC-III的產(chǎn)生。apoC-III是LPL活性抑制劑，它的減少會增加VLDL-c廓清率。例如參見J.Auwerx等，Atherosclerosis(動脈粥樣硬化)，(Shannon，Irel.)，S29-S37，124(增刊)，(1996)。PPARα配體可以用于治療脂血異常和心血管障礙，參見Fruchart，J.C.，Duriez，P.和Staels，B.Curr.Opin.Lipidol.(脂質(zhì)代謝障礙現(xiàn)行觀點)(1999)，Vol10，pp 245-257。
按照本發(fā)明的第一方面，提供式(I)化合物及其藥學上可接受的鹽、溶劑化物和可水解的酯 其中X1代表O或S；R1和R2獨立地代表H、鹵素、-CH3和-OCH3；n代表1或2；X2代表NH、NCH3或O；Y與Z之一是N，另一個是O或S；R3代表苯基或吡啶基(其中N在2或3位)，并且可選地被一個或多個鹵素、NO2、NH2、CF3、OCF3、OC1-6直鏈或支鏈烷基、C1-6直鏈或支鏈烷基、鏈烯基或炔基取代，其條件是若R3是吡啶基，則N是未取代的；
R4代表CF3或CH3。
在另一方面，本發(fā)明公開了預防或治療人PPARα(hPPARα)介導的疾病或病癥的方法，包括服用治療有效量的本發(fā)明化合物。hPPARα介導的疾病或病癥包括脂血異常，該脂血異常包括聯(lián)合型糖尿病性脂血異常和混合型脂血異常；X綜合征(根據(jù)本申請的定義，它涵蓋代謝綜合征)；心力衰竭；高膽固醇血；心血管疾病，包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯血；II型糖尿?。籌型糖尿??；抗胰島素性；高脂血；和諸如肥胖、食欲缺乏、食欲過盛與神經(jīng)性食欲缺乏等患者食欲與食物攝取的調(diào)節(jié)。其他疾病或病癥包括炎癥。特別是，本發(fā)明化合物可用于治療和預防心血管疾病和病癥，包括動脈粥樣硬化、動脈硬化、高甘油三酯血和混合型脂血異常。
在另一方面，本發(fā)明提供了藥物組合物，包含本發(fā)明的化合物，優(yōu)選地伴有藥學上可接受的稀釋劑或載體。
在另一方面，本發(fā)明提供了用在治療，特別是人用醫(yī)藥中的本發(fā)明化合物。
在另一方面，本發(fā)明提供了本發(fā)明化合物的用途，用于制造治療hPPARα介導的疾病或病癥的藥物。
在另一方面，本發(fā)明提供了治療患有hPPARα介導的疾病或病癥的患者的方法，包括服用治療有效量的本發(fā)明化合物。
本文所用的“本發(fā)明化合物”是指式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或可水解的酯。
盡管可水解的酯包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，不過酸是優(yōu)選的，因為有數(shù)據(jù)提示盡管酯是有用的化合物，不過事實上可能是它們所水解生成的酸是活性化合物。容易水解的酯能夠在測定條件下或者在體內(nèi)生成羧酸。一般來說，羧酸在結合與瞬時轉染測定中都是活性的，而酯通常不充分結合，但是在瞬時轉染測定中是活性的，假定這是由于水解作用。優(yōu)選的可水解的酯是C1-6烷基酯，其中烷基可以是直鏈或支鏈的。甲基或乙基酯是更優(yōu)選的。
X1優(yōu)選代表O。
R1和R2之一優(yōu)選代表H，R1和R2都代表H是更優(yōu)選的。
n優(yōu)選代表1。
X2優(yōu)選代表NH。
Z優(yōu)選代表N。
Y優(yōu)選代表S。
R3優(yōu)選是可選被取代的苯基。R3優(yōu)選是單或二取代的。優(yōu)選的是，若R3是吡啶基，則N在2位。R3優(yōu)選是在對位單取代的，更優(yōu)選為苯基。優(yōu)選的取代基是CF3。
R4優(yōu)選代表CH3。
盡管關于每個可變的優(yōu)選基團一般已經(jīng)分別列在上面，不過優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括其中式(I)中若干個或每個可變基團是選自對于每個可變基團的優(yōu)選、更優(yōu)選或最優(yōu)選的那些基團。因此，本發(fā)明要包括所有優(yōu)選、更優(yōu)選和最優(yōu)選的基團的組合。
優(yōu)選的是，式(I)化合物是hPPARα激動劑。本文所用的“激動劑”或“激活性化合物”或“激活劑”等是表示這樣的化合物，它們在下述結合測定中對相關PPAR、例如hPPARα的pKi至少是6.0，以及在10-5M或其以下的濃度下在下述轉染測定中激活至少50％的相關PPAR(相對適當?shù)年栃詫φ斩?。更優(yōu)選的是，本發(fā)明化合物在10-7M或其以下的濃度下，在轉染測定中激活50％的人PPARα。
最優(yōu)選的是，式(I)化合物是選擇性hPPARα激動劑。本文所用的“選擇性hPPARα激動劑”是一種hPPARα激動劑，它對于PPARα的EC50比對于PPARγ和PPARδ的EC50至少低10倍。這類選擇性化合物可以稱為“10倍選擇性”。EC50是在下述轉染測定中被定義的，是化合物達到其最大活性的50％時的濃度。最優(yōu)選的化合物是大于100倍選擇性的hPPARα激動劑。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸乙基酯N-甲基-2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸乙基酯4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-羧酸4-(1-叔丁氧羰基-1-甲基乙氧基)芐基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-叔丁基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-異丙基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-硝基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氨基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氨基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[3，4-二氯苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[3-氟-4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-溴苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-乙基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-苯基噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氟苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氯苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲氧基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-甲氧基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-乙炔基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-三氟甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯
2-甲基-2-[4-{[(4-三氟甲基-2-[4-叔丁基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-三氟甲基-2-[4-叔丁基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噁唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{{(4-甲基-2-[4-三氟甲基-2-吡啶基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[2-甲氧基-4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[2-甲基-4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[2-甲基-4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[2-甲基-4-{[(4-甲基-2-[4-異丙基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[2-甲基-4-{[(4-甲基-2-[4-異丙基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(5-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-4-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(5-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-4-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(5-甲基-2-[3-三氟甲基苯基]-噻唑-4-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(5-甲基-2-[3-三氟甲基苯基]-噻唑-4-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸。
更優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸
N-甲基-2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-叔丁基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-異丙基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-硝基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[3，4-二氯苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[3-氟-4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-溴苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-乙基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-苯基噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氟苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氯苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲氧基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-甲氧基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-乙炔基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-三氟甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噁唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸
2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基-2-吡啶基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[2-甲氧基-4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸。
特別優(yōu)選的本發(fā)明化合物是2-甲基-2-[4-[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸。
上列優(yōu)選的化合物是選擇性hPPARα激動劑。
還將為本領域技術人員所領會的是，本發(fā)明化合物還可以利用其藥學上可接受的鹽或溶劑化物的形式。式(I)化合物的生理學上可接受的鹽包括常規(guī)的從藥學上可接受的無機或有機酸或堿生成的鹽以及季銨的酸加成鹽。適合的酸鹽的更具體的實例包括鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、高氯酸、富馬酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、甲酸、乳酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、棕櫚酸、丙二酸、羥基馬來酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、甲苯磺酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、苯磺酸、羥基萘甲酸、氫碘酸、蘋果酸、甾酸(steroic)、鞣酸等的鹽。其他酸例如草酸，盡管本身不是藥學上可接受的，也可以用于制備在得到本發(fā)明化合物及其藥學上可接受的鹽中可用作中間體的鹽。適合的堿鹽的更具體的實例包括鈉、鋰、鉀、鎂、鋁、鈣、鋅、N，N’-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺和普魯卡因的鹽。下文所提到的本發(fā)明化合物包括式(I)化合物和它們的藥學上可接受的鹽和溶劑化物。
本發(fā)明化合物及其藥學上可接受的衍生物適宜以藥物組合物的形式給藥。這類組合物可以適宜以常規(guī)方式與一種或多種生理學上可接受的載體或賦形劑混合使用。
若有可能在治療上將本發(fā)明化合物作為原料藥給藥，則優(yōu)選的是活性成分直接作為藥物制劑。在與制劑其他成分相容和對其服藥者無害的意義上，載體必須是“可接受的”。
因此，本發(fā)明進一步提供藥物制劑，包含式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物和一種或多種藥學上可接受的載體，以及含或不含其他治療性和/或預防性成分。
這些制劑包括適合于口服、腸胃外(包括皮下例如注射或藥庫片；真皮內(nèi)；鞘內(nèi)；肌內(nèi)例如藥庫；和靜脈內(nèi))、直腸和局部(包括皮、頰和舌下)給藥，不過最適合的途徑例如可以取決于受藥者的病癥和障礙。該制劑適宜地可以是單位劑型，并且可以通過藥學領域熟知的任一種方法制備。所有方法包括使這些化合物(“活性成分”)與載體締合的步驟，該載體構成一種或多種輔助成分。一般來說，該制劑是這樣制備的，使活性成分與液體載體或微細粉碎的固體載體或二者均勻而緊密地締合，然后如果必要的話，使產(chǎn)物成型為所需的制劑。
適合于口服給藥的制劑可以是不連續(xù)的單元劑型，例如膠囊劑、扁囊劑或片劑(例如咀嚼片，特別是用于兒科給藥)，各自含有預定量的活性成分；可以是粉劑或顆粒劑；可以是在水性液體或非水性液體中的溶液或懸液；或者可以是水包油型液體乳劑或油包水型液體乳劑?；钚猿煞诌€可以是大丸劑、藥糖劑或糊劑。
片劑可以這樣制備，可選地與一種或多種輔助成分一起壓制或模制。壓制片可以這樣制備，在適合的機械中壓制自由流動形式的活性成分，例如粉末或顆粒，可選地與其他常規(guī)賦形劑混合，例如粘合劑(例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、黃蓍膠、淀粉膠漿或聚乙烯吡咯烷酮)、填充劑(例如乳糖、糖、微晶纖維素、玉米淀粉、磷酸鈣或山梨糖醇)、潤滑劑(例如硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、聚乙二醇或二氧化硅)、崩解劑(例如馬鈴薯淀粉或淀粉乙醇酸鈉)或濕潤劑(例如月桂基硫酸鈉)。模制片可以這樣制備，在適合的機械中模制已用惰性液體稀釋劑濕潤過的粉狀化合物。片劑可以可選地被包衣或標記，并且可以經(jīng)過配制成可以緩慢或控制釋放其中的活性成分。可以按照本領域熟知的方法進行片劑包衣。
或者，本發(fā)明化合物可以被摻入到口服液體制備物中，例如水性或油性懸液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑。而且，含有這些化合物的制劑可以是干燥產(chǎn)品，使用前用水或其他適合的載體混合。這類液體制劑可以含有常規(guī)的添加劑，例如懸浮劑，如山梨糖醇糖漿、甲基纖維素、葡萄糖/糖漿、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪；乳化劑，如卵磷脂、脫水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠；非水性載體(可以包括食用油)，如杏仁油、分餾椰子油、油性酯、丙二醇或乙醇；和防腐劑，如對-羥基苯甲酸甲酯或丙酯、或山梨酸。這類制備物還可以配制成栓劑，例如含有常規(guī)的栓劑基質(zhì)，如可可脂或其他甘油酯。
用于腸胃外給藥的制劑包括水性與非水性無菌注射溶液，其中可以含有抗氧化劑、緩沖劑、制菌劑和賦予制劑與受藥者血液等滲的溶質(zhì)；和水性與非水性無菌懸液其中可以包括懸浮劑和增稠劑。
制劑可以存在于單劑量或多劑量容器內(nèi)，例如密封的安瓿和小瓶，并且可以貯存在冷凍干燥(凍干)條件下，僅需要在臨使用前加入無菌的液體載體，例如注射用水。臨時用的注射溶液和懸液可以從前述種類的粉劑、顆粒劑和片劑制成。
用于直腸給藥的制劑可以是栓劑，含有普通的載體，例如可可脂、硬脂肪或聚乙二醇。
用于口腔局部、例如頰部或舌下給藥的制劑包括錠劑，其中在加味的基質(zhì)中包含活性成分，該基質(zhì)例如蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠，還包括軟錠劑，其中在基質(zhì)中包含活性成分，該基質(zhì)例如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠。
化合物還可以配制成藥庫制劑。這類長效制劑可以通過植入(例如皮下或肌內(nèi))或肌內(nèi)注射給藥。因而，例如，化合物可以與適合的聚合物或疏水性材料(例如在可接受的油中的乳劑)或離子交換樹脂進行配制，或者配制成微溶性衍生物，例如微溶性鹽。
除了上面特別提到的成分以外，制劑還可以包括本領域中的其他常規(guī)試劑，因有關制劑的類型而異，例如適合于口服給藥的那些可以包括矯味劑。
將為本領域技術人員所領會到的是，本文所涉及的治療延及預防以及既定疾病或癥狀的治療。而且，將被領會到的是，用于治療所需本發(fā)明化合物的量將因所治療病癥的性質(zhì)和患者的年齡與條件而異，最終將憑主治醫(yī)師或獸醫(yī)處置。不過一般來說，用于成人治療的劑量通常將在0.02-5000mg每天的范圍內(nèi)，優(yōu)選為1-1500mg每天。所需劑量可以適宜是單一的劑量或分開的劑量，按適當?shù)拈g隔給藥，例如每天兩次、三次、四次或更多。根據(jù)本發(fā)明的制劑可以含有0.1-99％活性成分，對片劑和膠囊劑來說適宜為30-95％，對液體制備物來說適宜為3-50％。
用于本發(fā)明的式(I)化合物可以與其他治療劑聯(lián)合使用，例如抑制素和/或其他降低脂質(zhì)的藥物，例如MTP抑制劑和LDLR增量調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明化合物還可以與抗糖尿病劑聯(lián)合使用，例如甲福明、磺酰脲類和/或PPARγ激動劑(例如噻唑烷二酮類，如吡格列酮和羅格列酮(Rosiglitazone))?；衔镞€可以與抗高血壓劑聯(lián)合使用，例如鈣通道拮抗劑和ACE抑制劑。本發(fā)明因而在進一步方面提供包含式(I)化合物與進一步的治療劑的組合在hPPARα介導疾病治療中的用途。
當式(I)化合物與其他治療劑聯(lián)合使用時，這些化合物可以通過任意常規(guī)途徑先后或同時給藥。
上面所涉及的組合可以適宜以藥物制劑的形式使用，因而，包含如上所定義的組合、最好還有藥學上可接受的載體或賦形劑的藥物制劑構成本發(fā)明的進一步方面。這類組合的各個組分可以在單獨或聯(lián)合的藥物制劑中先后或同時給藥。
在同一制劑中時，將被領會到的是兩種化合物必須是穩(wěn)定的，彼此并且與制劑其他組分是相容的，因而可以配制用于給藥。在單獨配制時，它們可以按任何適宜的制劑提供，適宜為本領域關于這類化合物已知的方式。
當式(I)化合物與第二種對相同的hPPARα介導疾病有活性的治療劑聯(lián)合使用時，每種化合物的劑量可以不同于化合物在單獨使用時的劑量。適當?shù)膭┝繉⑹潜绢I域技術人員容易想到的。
本發(fā)明化合物可以適宜于通過利用肽偶聯(lián)反應使如(A)那樣的部分與酸(B)偶聯(lián)的通用方法加以制備，或者通過利用適合的非親核性胺使(A)與酰氯(C)烷基化加以制備。優(yōu)選地，R是C1-6烷基，它可以被水解除去，得到式(I)的酸，或者如果容易水解，可以服用所得的酯。 若X1是O，X2是NH(R1和R2是H)，則(A)的優(yōu)選合成是
注意到這種合成優(yōu)選是用胺進行的，其中醇官能已經(jīng)用被R保護的酸側鏈烷基化。例如，若n是1，X1是O，X2是NH，Y是S，Z是N，R1和R2是H，R3是4-F3C-苯基 有些A型中間體是商業(yè)上可得到的，其他可以通過為本領域技術人員所顯而易見的技術加以合成。B和C型中間體的合成如下所述。
本發(fā)明化合物可以通過另一種方法制備，其中使式(D)化合物與2-溴-2-甲基丙酸乙酯反應，生成式(I)化合物的乙基酯，后者可以水解生成游離酸。 式(D)化合物可以從式(B)化合物與式(E)化合物之間的反應加以制備，若X2是NH或NCH3，則使用HOBT/EDC/NEt3，若X2是O，則使用DIC/DMAP/NEt3。 下列實施例進一步闡述本發(fā)明，它們不應被解釋為對發(fā)明的限制。
中間體1 該方法如Stout，D.M.J.Med.Chem.(醫(yī)藥化學雜志)1983，26(6)，808-13所述。向4-甲氧基芐基胺(25g，0.18mol；Aldrich)加入46％ HBr的H2O溶液(106ml，0.9mol；Aldrich)。使反應回流過夜，然后將反應冷卻至0℃，緩慢用KOH(s)中和至pH7。將反應攪拌～30分鐘，然后將固體過濾，干燥。將固體再次溶于熱的MeOH，過濾，將溶液冷卻，得到19g(85％)中間體1。1H NMR(DMSO-d6)δ8.0(bs，1H)，7.2(d，2H)，6.75(d，2H)，3.85(s，2H)，3.50(bs，2H).
中間體2 使2-氯乙酰乙酸乙酯(35.3g，29.7mL，0.21mol)與4-(三氟甲基)硫代苯甲酰胺(44g，0.21mol)的EtOH(300mL)溶液回流過夜。冷卻至室溫后，在真空中除去溶劑。使終產(chǎn)物(中間體2)從少量MeOH中重結晶，得到40g(59％)終產(chǎn)物，為白色固體。1H NMR(CDCl3)δ8.10(d，2H)，7.70(d，2H)，4.40(q，2H)，2.80(s，3H)，1.4(t，3H).
中間體3 向中間體2(1.84g，5.8mmol)的THF溶液中加入1N LiOH(6mL，6mmol)，將反應在室溫下攪拌?！?小時后，將反應用1N HCl中和，用3×100mL EtOAc萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空下除去溶劑，得到1.5g(89％)中間體3，為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)δ13.55(bs，1H)，8.25(d，2H)，7.95(d，2H)，2.75(s，3H).
中間體4 向中間體3(1g，7mmol)的CH2Cl2/DMF(1∶1)溶液中加入HOBT(565mg，4.2mmol；Aldrich)、EDC(800mg，4.2mmol；Aldrich)和中間體1(860mg，7mmol)。將反應在室溫下攪拌18小時。在真空中除去溶劑，用H2O處理，用3×100mL CH2Cl2萃取。合并有機相，用1N HCl洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)，得到混合物(N-取代的與N，O-取代的)。將混合物溶于MeOH，用1N NaOH處理。將反應在50℃下攪拌18小時。在真空中除去溶劑，將殘余物溶于CH2Cl2，用H2O洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。蒸發(fā)溶劑，殘余物經(jīng)過色譜純化(CH2Cl2/MeOH99/1)，得到610mg(47％)中間體4，為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)δ9.30(s，1H)，8.80(t，1H)，8.20(d，2H)，6.70(d，2H)，4.35(d，2H)，2.6(s，3H).
用于制備取代的硫代苯甲酰胺的通用方法1向P4O10(0.2mmol)的甲苯(100mL)溶液中加入NaHCO3(2mmol)，將混合物加熱至回流約30分鐘。加入取代的苯甲酰胺(1mmol)，將反應在90℃下攪拌1小時。然后將反應蒸發(fā)至干，用鹽水(100mL)處理，用CH2Cl2萃取(2×50mL)。將有機相干燥，過濾，蒸發(fā)，得到終產(chǎn)物。
中間體5 如通用方法1所述制備標題化合物，得到橙色固體(49％)。1H NMR(CDCl3)δ7.7(d，2H)，7.4(bs，1H)，7.3(d，2H)，7.0(bs，1H)，1.2(s，9H).
中間體6 如通用方法1所述制備標題化合物，得到橙色固體(26％)。
Mp150℃用于制備取代的硫代苯甲酰胺的通用方法2在1分鐘內(nèi)，向取代的芐腈(1mmol)的DMF(30mL)溶液中滴加用HCl(g)飽和的DMF(21mL)。然后加入硫代乙酰胺(2mmol)，將反應加熱至100℃達1小時。通入HCl(g)達約1分鐘，繼續(xù)在100℃下攪拌另外18小時。將反應冷卻至室溫，用冰處理，用Et2O萃取(3×250mL)。將有機相用H2O洗滌(3×300mL)，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)至干。殘余物用異丙醚/戊烷(1∶3)混合物洗滌，得到終產(chǎn)物。
中間體7 如通用方法2所述制備標題化合物，得到橙色固體(83％)。1H NMR(DMSO-d6)δ10.1(bs，1H)，9.7(bs，1H)，8.1(d，2H)，7.9(d，2H).
中間體8 如通用方法2所述制備標題化合物，得到黃色固體(45％)。
MS m/z 207(M+1)
中間體9 如通用方法2所述制備標題化合物，得到橙色固體(84％)。1H NMR(DMSO-d6)δ10.5(bs，1H)，10.05(bs，1H)，8.1(m，3H).
中間體10 向4-溴芐腈(1mmol)加入二硫代磷酸二乙酯(1.2當量)。向該懸液中加入H2O(約100mL)，將反應加熱至80℃達約2小時。將反應冷卻至室溫，用Et2O萃取(3×100mL)。將有機相用飽和NaHCO3洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)至干，得到黃色固體。將固體用異丙醚清洗，過濾收集，得到標題化合物，為黃色固體(55％)。
MS m/z 214中間體11 向加熱至回流的4-乙基苯甲酰胺(1mmol)的甲苯溶液中加入Laweson試劑(1當量)。加入完成后，使反應回流2小時。將反應冷卻至室溫，用Et2O處理，用H2O洗滌，有機相經(jīng)Na2SO4干燥。將溶液過濾，蒸發(fā)至干，殘余物經(jīng)過色譜純化，用CH2Cl2/MeOH(98∶2)洗脫，得到3g標題化合物，為黃色固體(55％)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.8(bs，1H)，9.4(bs，1H)，7.8(d，2H)，7.2(d，2H)，2.6(q，2H)，1.2(t，3H).
用于制備2-取代的苯基-4-甲基-1，3-噻唑-5-羧酸乙基酯的通用方法3向取代的硫代苯甲酰胺(1mmol)的EtOH(100mL)溶液中加入2-氯乙酰乙酸乙酯(1.1mmol)，將混合物加熱至回流過夜。將反應冷卻至室溫，蒸發(fā)溶劑。使固體從Et2O或己烷中結晶，得到終產(chǎn)物。
中間體12 使中間體5如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(95％)。1H NMR(CDCl3)δ8.0(d，2H)，7.55(d，2H)，4.45(q，2H)，3.85(s，3H)，2.5(t，3H)，1.45(s，9H).
中間體13 使中間體6如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(97％)。1H NMR(CDCl3)δ7.85(d，2H)，7.25(d，2H)，4.30(q，2H)，2.90(st，1H)，2.70(s，3H)，1.30(t，3H)，1.20(d，6H).
中間體14 使中間體7如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為黃色固體(74％)。1H NMR(CDCl3)δ8.25(d，2H)，8.05(d，2H)，4.30(q，2H)，2.70(s，3H)，1.30(t，3H).
中間體15 使中間體8如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為淡黃色固體(77％)。1H NMR(CDCl3)δ8.0(d，1H)，7.70(dd，1H)，7.40(d，1H)，4.30(q，2H)，2.70(s，3H)，1.3(s，3H).
中間體16 使中間體9如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(40％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.95(m，3H)，4.30(q，2H)，2.65(s，3H)，1.3(s，3H).
中間體17 使中間體10如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(61％)。1H NMR(CDCl3)δ7.70(d，2H)，7.55(d，2H)，4.25(q，2H)，2.70(s，3H)，1.30(s，3H).
中間體18 使中間體11如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為淡綠色固體(35％)。1H NMR(CDCl3)δ7.70(d，2H)，7.15(d，2H)，4.15(q，2H)，2.50(s，3H)，2.50(q，2H)，1.15(t，3H)，1.05(t，3H).
中間體19 使硫代苯甲酰胺(Aldrich)如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(28％)。1H NMR(CDCl3)δ 8.35(d，2H)，7.60(m，3H)，4.45(q，2H)，3.05(s，3H)，1.30(t，3H).
中間體20
使4-氟硫代苯甲酰胺(Maybridge)如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(100％)。1H NMR(CDCl3)δ 7.75(dd，2H)，6.95(t，2H)，4.15(q，2H)，2.60(s，3H)，1.20(t，3H).
中間體21 使4-氯硫代苯甲酰胺(Lancaster)如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為淡橙色固體(54％)。1H NMR(CDCl3)δ7.60(d，2H)，7.10(d，2H)，4.15(q，2H)，2.55(s，3H)，1.20(t，3H).
中間體22 使4-三氟甲氧基硫代苯甲酰胺(Interchim)如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(100％)。1H NMR(CDCl3)δ7.90(d，2H)，7.15(d，2H)，4.25(q，2H)，2.65(s，3H)，1.30(t，3H).
中間體23 使4-甲氧基硫代苯甲酰胺(Lancaster)如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(52％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.8 (d，2H)，6.95(d，2H)，4.15(q，2H)，3.70(s，3H)，2.50(s，3H)，1.15(t，3H).
用于制備2-取代的苯基-4-甲基-1.3-噻唑-5-羧酸的通用方法4向取代的噻唑酯(1mmol)的EtOH(100mL)溶液中加入1.5當量NaOH(1N)，將混合物加熱至40℃過夜。將反應冷卻至室溫，將溶液用HCl(1N)酸化。收集沉淀，用H2O洗滌，在真空下干燥，得到終產(chǎn)物。
中間體24 使中間體12如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(64％)。1H NMR(CDCl3)δ7.70(d，2H)，7.30(d，2H)，2.60(t，3H)，1.15(s，9H).
中間體25 使中間體13如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(100％)。1H NMR(CDCl3)δ7.75(d，2H)，7.15(d，2H)，2.85(st，1H)，2.65(s，3H)，1.15(d，6H).
中間體26 使中間體14如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為米色固體(99％)。1HNMR(DMSO-d6)δ8.15(d，2H)，8.05(d，2H)，2.50(s，3H).
中間體27 使中間體15如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(91％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.35(d，1H)，8.05(dd，1H)，7.90(d，1H)，2.80(s，3H).中間體28
使中間體16如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(82％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.05(m，3H)，2.75(s，3H).
中間體29 使中間體17如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(87％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.70(d，2H)，7.45(d，2H)，2.45(s，3H).
中間體30 使中間體18如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為淡綠色固體(79％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.05(d，2H)，7.50(d，2H)，2.75(q，2H)，2.75(s，3H)，1.30(t，3H).
中間體31 使中間體19如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(93％)。
Mp 215℃中間體32 使中間體20如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(85％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.0(dd，2H)，7.30(t，2H)，2.60(s，3H).
中間體33 使中間體21如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為淡橙色固體(92％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.95(d，2H)，7.55(d，2H)，2.60(s，3H).
中間體34 使中間體22如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(66％)。
MS m/z 304(M+1)中間體35 使中間體23如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為灰白色固體(98％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.95(d，2H)，7.10(d，2H)，3.90(s，3H)，2.70(s，3H).
中間體36 將中間體17(1mmol)稀釋在MeCN/二噁烷混合物(100ml)中，然后加入CuI(0.05當量)和1，1，3，3-四甲基胍(10當量)，將反應在N2氣氛下攪拌15分鐘。在真空下凈化反應，然后加入三甲基甲硅烷基乙炔(1.1當量)和Pd(PPh3)2Cl2(0.1當量)，將反應在80℃下攪拌2小時。蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于CH2Cl2，用飽和NH4Cl、再用NH4OH、最后用鹽水洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)過色譜純化，用CH2Cl2洗脫，得到標題化合物，為米色固體(100％)。
MS m/z 344(M+1)
中間體37 向中間體36(1mmol)的THF溶液中加入Bu4NF，將反應在室溫下攪拌2小時。蒸發(fā)THF，將殘余物溶于CH2Cl2，用飽和NH4Cl、再用NH4OH、最后用鹽水洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)過色譜純化，用CH2Cl2洗脫，得到標題化合物，為白色固體(44％)。
MS m/z 272(M+1)中間體38 使中間體37如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為淡黃色固體(79％)。
MS m/z 244(M+1)中間體39 向4-三氟甲基硫代苯甲酰胺(1當量，Lancaster)的DMF(150mL)溶液中加入2-氯-4，4，4-三氟乙酰乙酸乙酯(1.5當量，Lancaster)，將反應在100℃下攪拌18小時。將反應冷卻，濃縮，殘余物經(jīng)過色譜純化，用CH2Cl2洗脫。收集黃色的油，用己烷研制，得到標題化合物，為白色固體(13％)。
MS m/z 369中間體40 使中間體39如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為白色固體(94％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.1(d，2H)，7.7(d，2H).
中間體41 向中間體5(1當量)的EtOH(25mL)溶液中加入2-氯-4，4，4-三氟乙酰乙酸乙酯(1當量，Lancaster)，將反應在回流下攪拌91小時。將反應冷卻，濃縮，將殘余物溶于戊烷，過濾。在真空下除去溶劑，得到標題化合物，為褐色的油，含有2種化合物，使用時無需進一步純化。
中間體42 使中間體41如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為2種化合物的混合物。該混合物經(jīng)過色譜純化，用環(huán)己烷/乙酸乙酯(7/3)回收雜質(zhì)，然后用CH2Cl2/MeOH(98/2)回收標題化合物，為白色固體(9.7％)。
MS m/z 329(M+1)中間體43 向4-三氟甲基硫代苯甲酰胺(1當量，Lancaster)的EtOH(100mL)溶液中加入3-溴-2-氧代丁酸乙酯(1.1當量)，將反應在回流下攪拌18小時。將反應冷卻至室溫，濃縮，將殘余物溶于CH2Cl2。將有機層用飽和NaHCO3、然后用H2O洗滌，經(jīng)Na2HCO4干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑至干。粗產(chǎn)物經(jīng)過色譜純化，用CH2Cl2洗脫，得到標題化合物，為白色固體(60％)。中間體44
使中間體43如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為白色固體(74％)。
MS m/z 287中間體45 向3-三氟甲基硫代苯甲酰胺(1當量，Lancaster)的EtOH(100mL)溶液中加入3-溴-2-氧代丁酸乙酯(1.1當量)，將反應在回流下攪拌18小時。將反應冷卻至室溫，濃縮，將殘余物溶于CH2Cl2。將有機層用飽和NaHCO3、然后用H2O洗滌，經(jīng)Na2HCO4干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑至干。粗產(chǎn)物經(jīng)過色譜純化，用CH2Cl2洗脫，得到標題化合物，為黃色的油(81％)。
MS m/z 315中間體46 使中間體45如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為白色固體(92％)。
MS m/z 288(M+1)中間體47 向中間體5(1當量)的EtOH(100mL)溶液中加入3-溴-2-氧代丁酸乙酯(1.1當量)，將反應在回流下攪拌18小時。將反應冷卻至室溫，濃縮，將殘余物溶于CH2Cl2。將有機層用飽和NaHCO3、然后用H2O洗滌，經(jīng)Na2HCO4干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑至干。粗產(chǎn)物經(jīng)過色譜純化，用CH2Cl2洗脫，得到標題化合物，為淡黃色固體(56％)。
Mp 108℃
中間體48 使中間體47如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為淡黃色固體(99％)。
Mp 155℃中間體49 向中間體6(1當量)的EtOH(100mL)溶液中加入3-溴-2-氧代丁酸乙酯(1.1當量)，將反應在回流下攪拌18小時。將反應冷卻至室溫，濃縮，將殘余物溶于CH2Cl2。將有機層用飽和NaHCO3、然后用H2O洗滌，經(jīng)Na2HCO4干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑至干。粗產(chǎn)物經(jīng)過色譜純化，用CH2Cl2洗脫，得到標題化合物，為黃色的油(48％)。
MS m/z 289中間體50 使中間體49如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為白色固體(73％)。
MS m/z 262(M+1)中間體51 向4-(三氟甲基)苯甲酰胺(1當量)的甲苯(150mL)溶液中滴加3-溴-2-氧代丁酸甲酯(1當量)，將反應在回流下攪拌20小時。將反應用EtOAc(100mL)稀釋，連續(xù)用NaOH(1N)、HCl(1N)和水洗滌(3×100mL)，干燥，過濾，蒸發(fā)至糖漿狀物。所得混合物經(jīng)過快速柱色譜純化(先用CH2Cl2，再用CH2Cl2/MeOH(99.5∶0.5)洗脫)，得到標題化合物，為白色固體(9％)。
MS m/z 285中間體52 使中間體51如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為白色固體(86％)。
Mp 189中間體53 使(4-三氟甲基-2-吡啶基)硫酰胺(Lancaster)如通用方法3所述反應，得到標題化合物，為白色固體(48％)。
中間體54 使中間體53如通用方法4所述反應，得到標題化合物，為灰色固體(84％)。1H NMR(DMSO-d6)δ 9.13(d，1H)，8.43(dd，1H)，8.35(d，1H)，2.75(s，3H).
中間體55 在0℃下，向鹽酸4-羥基-3-甲氧基芐胺(1當量，Aldrich)的CH2Cl2(300mL)溶液中加入Et3N(3當量)。滴加Boc酸酐(0.95當量)的CH2Cl2(50mL)溶液。使反應升溫至室溫，繼續(xù)攪拌18小時。然后將反應倒在NaOH(1N)中，混合物用NaOH萃取(3×50mL)。合并含水相，用HCl(1N)酸化，用CH2Cl2萃取(3×100mL)。將有機層用H2O洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空下除去溶劑，得到標題化合物，為澄清的油(97％)。1HNMR(CDCl3)δ6.75(m，3H)，5.55(bs，1H)，4.75(bs，1H)，4.15(d，2H)，3.80(s，3H)，1.40(s，9H).
中間體56 向中間體55(1當量)的DMSO(100mL)溶液中加入K2CO3(3當量)和2-溴-2-甲基丙酸乙酯(1.3當量)。攪拌反應，同時在100℃下加熱3小時。將反應倒在冰上，用CH2Cl2萃取(3×150mL)。合并有機層，用NaOH(1N)、再用H2O洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。將溶液過濾，蒸發(fā)至干，使粗產(chǎn)物從熱己烷中結晶，得到標題化合物，為褐色固體(63％)。
Mp 107-109℃中間體57 在室溫下，向中間體56(1當量)的CH2Cl2(10mL)溶液中滴加CF3COOH(7當量)，將反應在室溫下攪拌18小時。將反應蒸發(fā)至干，用飽和K2CO3溶液處理，用CH2Cl2萃取(3×150mL)。合并有機層，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)至干，得到標題化合物，為油(100％)。
MS m/z 267中間體58
在室溫下，向4-甲氧基-3-甲基苯甲醛(1當量，Acros)的EtOH(150mL)溶液中加入H2NOH，HCl(1.6當量)，(3當量)NaOAc的150mL H2O溶液，將反應攪拌2小時。蒸發(fā)EtOH，殘余物用CH2Cl2萃取(3×50mL)。合并有機層，用H2O洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)至干，得到標題化合物，為白色固體(93％)。
Mp 71-73℃中間體59 在室溫下，向中間體58(1當量)的MeOH(200mL)溶液中加入[MeCO2]NH4(6當量)、Pd/C(0.01當量)和分子篩。然后將反應加熱至回流達18小時。將反應通過C鹽過濾，蒸發(fā)至干，用HCl(1N)處理。將含水層用CH2Cl2洗滌，過濾，堿化至pH＞14，用CH2Cl2萃取(3×50mL)。合并有機層，用H2O洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)至干，得到標題化合物，為油(46％)。
MS m/z 151中間體60 使中間體59(1當量)在過量40％ HBr/H2O(Aldrich)中回流18小時。然后將反應蒸發(fā)至干，得到標題化合物的氫溴酸鹽，為灰色固體(97％)。
Mp 235-237℃中間體61
在0℃下，向中間體60(1當量)的CH2Cl2(300mL)溶液中加入Et3N(3當量)。滴加Boc酸酐(0.95當量)的CH2Cl2(50mL)溶液。使反應升溫至室溫，繼續(xù)攪拌18小時。加入HCl(1N)，反應用CH2Cl2萃取(3×100mL)。將有機層用H2O洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，在真空下除去溶劑，得到標題化合物，為白色固體(96％)。
Mp 105-107℃中間體62 向中間體61(1當量)的DMF(150mL)溶液中加入K2CO3(3當量)，將反應加熱至70℃。滴加2-溴-2-甲基丙酸乙酯(1.3當量)，將反應在70℃下攪拌72小時。將反應倒在冰上，用CH2Cl2萃取(3×150mL)。合并有機層，用NaOH(0.5N)、再用H2O洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。將溶液過濾，蒸發(fā)至干，得到標題化合物，為油(69％)。1H NMR(CDCl3)δ7.05(d，1H)，6.90(dd，1H)，6.60(d，1H)，4.80(bs，1H)，4.25(q，2H)，4.20(d，2H)，2.20(s，3H)，1.60(s，6H)，1.45(s，9H)，1.25(t，3H).
中間體63 在室溫下，向中間體62(1當量)的CH2Cl2(10mL)溶液中滴加CF3COOH(7當量)，將反應在室溫下攪拌18小時。將反應蒸發(fā)至干，用飽和K2CO3溶液處理，用CH2Cl2萃取(3×150mL)。合并有機層，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)至干，得到標題化合物，為油(82％)。1H NMR(CDCl3)δ7.00(d，1H)，6.90(dd，1H)，6.55(d，1H)，4.20(q，2H)，3.70(s，2H)，2.15(s，3H)，1.85(bs，2H)，1.50(s，6H)，1.20(t，3H).
中間體64 向4-羥基苯甲醛(1當量)的DMF(150mL)溶液中加入NaH(1.5當量)，將反應在80℃下攪拌30分鐘。滴加2-溴-2-甲基丙酸乙酯(1.2當量)，將反應在80℃下攪拌24小時。將反應蒸發(fā)至干，將殘余物用NaOH處理，用CH2Cl2萃取(5×100mL)。合并有機層，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑，得到粗的中間體64。經(jīng)過色譜純化，用CH2Cl2/MeOH(98∶2)洗脫，得到標題化合物，為油(20％)。1H NMR(CDCl3)δ9.80(s，1H)，7.75(d，2H)，6.80(d，2H)，1.55(s，6H)，1.3(s，9H).
中間體65 在室溫下，向中間體64(1當量)的MeOH(50mL)溶液中加入NaBH4(1當量)，將反應在室溫下攪拌，同時進行TLC[CH2Cl2/MeOH(98∶2)；Rf＝0.45]。當全部原料消失后，蒸發(fā)溶劑至干，將殘余物用H2O處理，用CH2Cl2萃取(3×50mL)。合并有機層，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)至干，得到標題化合物，為半固體(100％)。
1H NMR(CDCl3)δ7.20(d，2H)，6.80(d，2H)，4.55(s，2H)，1.50(s，6H)，1.35(s，9H).
中間體66 在室溫下，向4-羥基苯乙胺(1當量)的DMF(75mL)溶液中加入HOBT(1.1當量)、EDC(1.1當量)和Et3N(1.5當量)。向該混合物中滴加中間體3的DMF溶液，將反應在室溫下攪拌18小時。將反應蒸發(fā)至干，用HCl(1N)處理，用EtOAc萃取(3×150mL)。合并有機層，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)至干。粗中間體66經(jīng)過色譜純化，用CH2Cl2/MeOH(9∶1)洗脫，得到標題化合物，為白色固體(64％)。1H NMR(CDCl3)δ9.2(s，1H)，8.40(t，3H)，8.10(d，2H)，7.85(d，2H)，7.05(d，2H)，6.70(d，2H)，3.40(m，2H)，2.70(m，2H)，2.60(s，3H).
實施例2 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸向實施例1(680mg，1.39mmol)的MeOH溶液中加入1N NaOH(1.6mL，1.6mmol)，將反應在60℃下攪拌。18小時后，將反應冷卻至室溫，蒸發(fā)溶劑。將殘余物用1N HCl處理，用3×20mL THF萃取，在真空下除去溶劑。500mg(75％)。從少量體積的CH2Cl2和戊烷中沉淀出標題化合物，為白色固體。mp在60-70℃之間變化。LC/MS(m/z)477.22(100％，AP-)，479.12(100％，AP+)；C23H2，F(xiàn)3N204S分析值C 5.71(57.73)，H 4.56(4.42)，N 5.77(5.85)，S 6.15(6.70).
改進的2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸的合成是中間體67 在35分鐘內(nèi)，向冷卻至15℃的212.8g(1.79摩爾)對羥基芐腈的1.7LDMF(8vol.)溶液中分批加入121g(3.04mol，1.7當量)NaH的石蠟分散系(60％)?；謴椭潦覝睾?，將混合物攪拌30分鐘，在1小時內(nèi)緩慢加入393ml(2.68mol，1.5當量)溴異丁酸乙酯。在加入期間，通過冷卻使內(nèi)部溫度保持在25℃以下，因為發(fā)生輕微放熱作用。將混合物在室溫下攪拌過夜，在80℃下加熱2小時。冷卻至20℃以下后，通過加入600ml 1N氫氧化鈉溶液破壞過量氫化鈉。水溶液用1 L乙醚萃取3次。合并有機層，用200ml1N氫氧化鈉溶液(以消除痕量對羥基芐腈)和500ml鹽水洗滌兩次。在硫酸鎂上干燥后，過濾，濃縮至干，潷析油性殘余物，除去33.5g石蠟油(上層)。189.9g油性殘余物據(jù)估計混合有14.9g殘留的石蠟油。粗中間體67在使用時無需進一步純化。收率據(jù)估計約為42％(約175g)。
中間體68 在1L氫化器內(nèi)，將59.3g中間體67(0.254mol(最多))、43.6ml(0.762mol，3當量)冰乙酸與6g(10％w/w)Pd/C在250ml乙醇中的混合物用2巴氫在室溫下氫化。8小時后反應停止，此時吸附了8.7L氫(理論體積11.4L)。過濾催化劑后，蒸發(fā)溶液至干，得到中間體68的乙酸鹽(油性殘余物)。將殘余物倒在300ml水(pH＝5)中，含水層用200ml環(huán)己烷萃取兩次。在該操作期間，產(chǎn)生膠狀固體，留在含水層中(可能是一部分乙酸鹽)。加入400ml乙酸乙酯后，將兩相混合物冷卻至15℃，用500ml 1NNaOH溶液處理(至pH＝12)。潷析后，含水層用400ml乙酸乙酯萃取兩次。合并有機層，用200ml鹽水洗滌。
在硫酸鎂上干燥后，將有機層過濾，濃縮至干，得到35.5g粗中間體68(黃色的油，收率＝58.9％)，無需進一步純化即可用于下面的步驟(LC-MS純度＝約90％)。
中間體69 在室溫下，向302.4g(1.47mol)4-(三氟甲基)硫代苯甲酰胺的1.5L(5vol.)乙醇懸液中一次性加入203.8ml(1當量)2-氯乙酰乙酸乙酯。使溶液回流24小時。對反應進行TLC(CH2Cl2)和HPLC。反應完全后，在減壓下除去溶劑。將固體物質(zhì)用500ml冷己烷攪拌30分鐘，過濾，用150ml己烷洗滌兩次。干燥后，得到352.9g粗中間體69。濃縮己烷至50ml后得到第二批25.7g?？偸章蕿?1.5％(378.6g)。
中間體70 向冷卻的378.6g(1.2mol)中間體69的2L(5vol.)乙醇溶液中加入96.15g(2當量)氫氧化鈉的2L水溶液。將溶液在85℃下加熱1.5小時。蒸發(fā)乙醇后，將水溶液用2L水稀釋，用濃鹽酸水溶液酸化至pH＝1。將固體物質(zhì)過濾，用1L水和1L二氯甲烷洗滌。在真空爐內(nèi)干燥后，得到267.2g灰白色粉末。濃縮二氯甲烷和用戊烷研制，得到第二批25.7g?？偸章蕿?5％(292.9g)。
實施例3 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使38.7g(0.13mol)粗中間體70的200ml(5vol.)亞硫酰氯懸液回流3小時?；謴椭潦覝睾?，在減壓下除去亞硫酰氯，將殘余物懸浮在甲苯(100ml)中兩次，蒸發(fā)至干。使用所得粗酰氯(灰白色固體)時無需進一步純化。在20分鐘內(nèi)，向保持在10℃的、35.5g(1當量/LC-MS純度90％)粗中間體68與20.62ml(1.1當量)三乙胺的350ml二氯甲烷(10vol.)溶液中分批加入酰氯。然后將混合物在室溫下攪拌過夜。加入200ml水猝滅反應，攪拌5分鐘。潷析兩相混合物，含水層用200ml二氯甲烷萃取兩次。全體有機層分別用200ml鹽酸(1N)、200ml水、200ml飽和碳酸鈉水溶液和200ml鹽水洗滌。在硫酸鎂上干燥后，過濾，濃縮至干，將粗物質(zhì)懸浮在200ml異丙醚中，研制，過濾，干燥，得到47.6g實施例3(白色粉末，收率＝69.7％)。
實施例4 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸向230.8g(0.46mol)實施例3的1.2L(5vol.)四氫呋喃溶液中加入480ml(1.05當量)含水鈉(1N)。將該溶液在回流下攪拌18小時。在減壓下除去THF后，加入500ml 1N NaOH和100ml甲醇。將含水層用400ml二氯甲烷萃取兩次，用濃鹽酸水溶液酸化至pH＝1。油性殘余物用二氯甲烷萃取(3×400ml)。全體有機層用600ml鹽水洗滌。在硫酸鎂上干燥、過濾和濃縮至干后，將油性殘余物用500ml戊烷有機化，過濾，用250ml戊烷洗滌兩次，干燥后得到207.2g粗實施例4(白色粉末)。將固體物質(zhì)溶于310ml(1.5vol.)回流的甲苯。過濾熱溶液和恢復至室溫后，過濾所結晶的物質(zhì)，用200ml甲苯洗滌兩次，在真空爐內(nèi)干燥，得到196.3g實施例4的白色粉末(收率＝90％)，mp＝130-131℃，TLC(CH2Cl2/MeOH＝9/1)單斑點，HPLC分析99.5％(在310nm下檢測)。
實施例5 N-甲基-2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯向實施例4(600mg，1.2mmol)的50mL DMF溶液中加入32mg(1.1當量)NaH，將混合物在40℃下攪拌30分鐘。然后加入85μL(1.1當量)MeI，將反應在40℃下攪拌18小時。在減壓下除去DMF后，將殘余物用H2O洗滌，用Et2O萃取(3×50mL)。合并有機層，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)至干，經(jīng)過色譜純化，用100％ CH2Cl2、再用99∶1 CH2Cl2/MeOH洗脫，得到300mg實施例5，為澄清的油(收率＝49％)。
MS m/z 521(M+1)實施例6 N-甲基-2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸向實施例5(300mg，0.6mmol)的50mL EtOH溶液中加入692μL(1.2當量)NaOH(1N)，將混合物在60℃下攪拌18小時。在減壓下除去EtOH后，殘余物用HCl處理，收集固體，在真空下干燥，從iPr2O中重結晶，得到230mg實施例6，為白色固體(收率＝49％)。
MS m/z 493(M+1)用于制備2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸鹽的通用方法5在室溫下，向500mg實施例2的25ml乙腈溶液中加入1當量堿*。攪拌3或24小時*后，過濾混合物，將固體物質(zhì)用戊烷洗滌，在真空爐內(nèi)干燥*(*見下表1結果)。
表1 實施例9 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸乙酯向中間體66(1當量)的DMF(150mL)溶液中加入K2CO3(1.2當量)、2-溴-2-甲基丙酸乙酯(1.1當量)，將反應在80℃下攪拌18小時。將反應蒸發(fā)至干，將殘余物用NaOH(1N)處理，用EtOAc萃取(4×50mL)。合并有機層，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑，得到粗實施例9。經(jīng)過色譜純化，用CH2Cl2/MeOH(95∶5)洗脫，得到標題化合物，為白色固體(86％)。1H NMR(CDCl3)δ7.95(d，2H)，7.6(d，2H)，7.05(d，2H)，6.75(d，2H)，5.70(t，1H)，4.20(q，2H)，3.60(m，2H)，2.80(m，2H)，2.75(s，3H)，1.50(s，6H)，1.20(t，3H).
用于A型與B型中間體之間肽偶聯(lián)反應的通用方法6在室溫下，向中間體B(1當量)的CH2Cl2(75mL)溶液中加入HOBT(1.1當量)、EDC(1.1當量)和Et3N(3當量)。向該混合物中加入中間體A，將反應在室溫下攪拌18小時。反應用HCl(1N)、NaOH(1N)和2×H2O洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)至干。粗化合物酌情經(jīng)過色譜和結晶純化，得到終產(chǎn)物。
用干A型與C型中間體之間烷基化反應的通用方法7向中間體B(1當量)的甲苯(25mL)溶液中加入SOCl2，將反應在80℃下加熱18小時。將反應蒸發(fā)至干，得到粗中間體C，將其再次溶于10mL甲苯，再次蒸發(fā)至干。在室溫下，向中間體A和Et3N(3當量)的CH2Cl2(50mL)溶液中加入中間體C(1當量)的CH2Cl2溶液，將反應在室溫下攪拌3小時。反應用HCl(1N)、NaOH(1N)和2×H2O洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)至干。粗化合物酌情經(jīng)過色譜和結晶純化，得到終產(chǎn)物。
用于水解乙基酯的通用方法8向乙基酯(1mmol)的MeOH(50mL)溶液中加入(3當量)NaOH(1N)，將該混合物加熱至60℃過夜。將反應冷卻至室溫，將溶液用HCl(1N)酸化，用CH2Cl2萃取(3×25mL)。合并有機層，用H2O洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)至干。將固體用Et2O研制，收集，在真空下干燥，得到終產(chǎn)物。
實施例10 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸使實施例9如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(74％)。
MS m/z 493(M+1)實施例11 4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-羧酸4-(1-叔丁氧羰基-1-甲基乙氧基)芐基酯向中間體65(1當量)的DMF(150mL)溶液中加入中間體3(1當量)、DMAP(0.1當量)和DIC(1.1當量)。將反應在室溫下攪拌，同時進行TLC[CH2Cl2/MeOH(98∶2)；Rf＝0.85]。將反應蒸發(fā)至干，將殘余物用NaOH(1N)處理，用CH2Cl2萃取(5×100mL)。合并有機層，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑，得到粗實施例11。經(jīng)過色譜純化，用CH2Cl2/MeOH(80∶20)洗脫，得到標題化合物，為澄清的油，靜置后固化(44％)。
Mp 72℃實施例12 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-叔丁基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體24與中間體68如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為白色固體(72％)。色譜CH2Cl2，然后CH2Cl2/MeOH(99∶1)，然后CH2Cl2/MeOH(98∶2)。
MS m/z 495(M+1)
實施例13 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-叔丁基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例12如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(22％)。
MS m/z 466(M+1)實施例14 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-異丙基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體25與中間體68如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為白色固體(54％)。色譜CH2Cl2，然后CH2Cl2/MeOH(99∶1)，然后CH2Cl2/MeOH(98∶2)。
MS m/z 481(M+1)實施例15 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-異丙基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例14如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(100％)。
MS m/z 453(M+1)
實施例16 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-硝基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體26與中間體68如通用方法7所述反應，得到標題化合物，為褐黃色油(71％)。色譜CH2Cl2/MeOH(99.5∶0.5)。1H NMR(CDCl3)δ8.15(d，2H)，7.95(d，2H)，7.15(d，2H)，6.75(d，2H)，6.15(t，1H)，4.45(d，2H)，4.15(q，2H)，2.65(s，3H)，1.50(s，6H)，1.15(t，3H).
實施例17 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-硝基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例16如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為黃色固體(34％)。
Mp 164℃實施例18 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氨基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯向中間體16的EtOH(75mL)溶液中加入10％ Pd/C(0.01當量)。使反應脫氣，放置在H2氣氛和室溫下達18小時。使反應通過C鹽過濾，在真空下除去溶劑，得到標題化合物，為黃色的油(100％)。
MS m/z 454(M+1)
實施例19 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氨基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例18如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為黃色固體(80％)。
MS m/z 426(M+1)實施例20 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[3，4-二氯苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體27與中間體68如通用方法7所述反應，得到標題化合物，為白色固體(55％)。色譜CH2Cl2，然后CH2Cl2/MeOH(99.5∶0.5)。
MS m/z 507實施例21 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[3，4-二氯苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例20如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(84％)。
MS m/z 480(M+1)
實施例22 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[3-氟-4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體28與中間體68如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為澄清的油(52％)。色譜環(huán)己烷/EtOAc(9∶1至7∶3)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.90(t，1H)，8.00(m，3H)，7.25(d，2H)，6.75(d，2H)，4.40(d，2H)，4.15(q，2H)，2.65(s，3H)，1.55(s，6H)，1.15(t，3H).
實施例23 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[3-氟-4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例22如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(70％)。
MS(AP-) m/z 495(M-1)實施例24 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-溴苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體29與中間體68如通用方法7所述反應，得到標題化合物，為白色固體(52％)。色譜CH2Cl2，然后CH2Cl2/MeOH(99.5∶0.5)，然后CH2Cl2/MeOH(99∶1)。1H NMR(CDCl3)δ7.55(d，2H)，7.35(d，2H)，7.05(d，2H)，6.65(d，2H)，6.25(t，1H)，4.35(d，2H)，4.10(q，2H)，2.55(s，3H)，1.45(s，6H)，1.10(t，3H).
實施例25 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-溴苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例24如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(90％)。
MS m/z 489實施例26 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-乙基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體30與中間體68如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為澄清的油(54％)。色譜環(huán)己烷/EtOAc(8∶2至6∶4)。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.55(t，1H)，7.65(d，2H)，7.10(d，2H)，7.00(d，2H)，6.55(d，2H)，4.15(d，2H)，3.95(q，2H)，2.45(q，2H)，2.40(s，3H)，1.30(s，6H)，1.00(t，3H)，0.95(t，3H).
實施例27 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-乙基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例26如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(62％)。
MS m/z 439(M+1)實施例28 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-苯基噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體31與中間體68如通用方法7所述反應，得到標題化合物，為澄清的油(52％)。1H NMR(CDCl3)δ7.85(m，2H)，7.35(m，3H)，7.15(d，2H)，6.75(d，2H)，6.00(t，1H)，4.50(d，2H)，4.15(q，2H)，2.65(s，3H)，1.5(s，6H)，1.2(t，3H).
實施例29 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-苯基噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例28如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(46％)。
Mp 179℃實施例30 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氟苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體32與中間體68如通用方法7所述反應，得到標題化合物，為澄清的油，放置后固化(63％)。色譜CH2Cl2，然后CH2Cl2/MeOH(99.5∶0.5)。1H NMR(CDCl3)δ7.85(dd，2H)，7.20(d，2H)，7.08(t，2H)，6.80(d，2H)，6.35(t，1H)，4.50(d，2H)，4.20(q，2H)，2.63(s，3H)，1.55(s，6H)，1.23(t，3H).
實施例31 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氟苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例30如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(72％)。
Mp 159℃；MS m/z 429(M+1)實施例32 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氯苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體33與中間體68如通用方法7所述反應，得到標題化合物，為澄清的油(78％)。色譜CH2Cl2，然后CH2Cl2/MeOH(99∶1)。1H NMR(CDCl3)δ7.75(d，2H)，7.35(d，2H)，7.15(d，2H)，6.75(d，2H)，6.05(t，1H)，4.45(d，2H)，4.20(q，2H)，2.65(s，3H)，1.50(s，6H)，1.20(t，3H).
實施例33 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氯苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例32如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(30％)。
Mp 131℃實施例34 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲氧基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體34與中間體68如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為黃色的油(41％)。色譜CH2Cl2/MeOH(99.5∶0.5)。1H NMR(CDCl3)δ7.90(d，2H)，7.20(d，2H)，7.15(d，2H)，6.75(d，2H)，6.05(t，1H)，4.45(d，2H)，4.15(q，2H)，2.65(s，3H)，1.50(s，6H)，1.20(t，3H).
實施例35 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲氧基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例34如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為褐色粘性的油(45％)。1H NMR(CDCl3)δ7.85(d，2H)，7.20(d，2H)，7.20(d，2H)，6.85(d，2H)，6.05(t，1H)，4.50(d，2H)，2.65(s，3H)，1.50(s，6H).
實施例36 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-甲氧基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體35與中間體68如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為澄清的油，放置后固化(22％)。色譜環(huán)己烷/EtOAc(1∶1)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.75(t，1H)，7.90(d，2H)，7.20(d，2H)，7.05(d，2H)，6.75(d，2H)，4.35(d，2H)，4.15(q，2H)，3.80(s，3H)，2.55(s，3H)，1.50(s，6H)，1.15(t，3H).
實施例37 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-甲氧基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例36如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為米色固體(51％)。
MS m/z 441(M+1)實施例38 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-乙炔基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體38與中間體68如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為褐色的油，放置后固化(84％)。色譜CH2Cl2/EtOAc(95∶5)。
MS m/z 463(M+1)實施例39
2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-乙炔基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例38如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為淡玫瑰色固體(44％)。
MS(AP-)m/z 433(M-1)實施例40 2-甲基-2-[4-{[(4-三氟甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體42與中間體68如通用方法7所述反應，得到標題化合物，為澄清的油(69％)。色譜CH2Cl2。1H NMR(CDCl3)δ8.00(d，2H)，7.65(d，2H)，7.15(d，2H)，6.75(d，2H)，6.35(t，1H)，4.50(d，2H)，4.15(q，2H)，1.50(s，6H)，1.20(t，3H).
實施例41 2-甲基-2-[4-{[(4-三氟甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例40如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為澄清的油，在戊烷中沉淀為白色固體(19％)。色譜CH2Cl2/MeOH(95∶5)，然后CH2Cl2/MeOH/AcOH(95∶5∶2mL)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.55(t，1H)，8.25(d，2H)，8.00(d，2H)，7.25(d，2H)，6.85(d，2H)，4.45(d，2H)，1.55(s，6H).
實施例42
2-甲基-2-[4-{[(4-三氟甲基-2-[4-叔丁基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體42與中間體68如通用方法7所述反應，得到標題化合物，為澄清的油(21％)。色譜CH2Cl2。1H NMR(CDCl3)δ7.85(d，2H)，7.45(d，2H)，7.25(d，2H)，6.85(d，2H)，6.40(t，1H)，4.60(d，2H)，4.25(q，2H)，1.60(s，6H)，1.35(s，9H)，1.25(t，3H).
實施例43 2-甲基-2-[4-{[(4-三氟甲基-2-[4-叔丁基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例42如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為澄清的油，在戊烷中沉淀為白色固體(100％)。
MS m/z 521(M+1)實施例44 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噁唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體52與中間體68如通用方法7所述反應，得到標題化合物，為澄清的油(58％)。色譜CH2Cl2/MeOH(99.5∶0.5)。1H NMR(CDCl3)δ8.05(d，2H)，7.65(d，2H)，7.25(t，1H)，7.15(d，2H)，6.75(d，2H)，4.50(d，2H)，4.15(q，2H)，2.70(s，3H)，1.50(s，6H)，1.20(t，3H).
實施例45
2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噁唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例44如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為黃色固體(98％)。
MS(AP-)m/z 461(M-1)實施例46 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基-2-吡啶基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體54與中間體68如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為澄清的油(58％)。色譜CH2Cl2/MeOH(99.5∶0.5)。
MS m/z 508(M+1)實施例47 2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基-2-吡啶基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例46如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(11％；游離堿與鹽酸鹽的混合物)。1H NMR(CDCl3)δ8.75(s，1H)，8.20(d，2H)，7.95(d，2H)，7.15(d，2H)，6.85(d，2H)，6.20(t，1H)，4.45(d，2H)，2.65(s，3H)，1.50(s，6H).
實施例48
2-甲基-2-[2-甲氧基-4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體3與中間體57如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為澄清的油(37％)。
MS m/z 537(M+1)實施例49 2-甲基-2-[2-甲氧基-4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例48如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(53％)。
MS m/z 508實施例50 2-甲基-2-[2-甲基-4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體3與中間體63如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為白色固體(33％)。1H NMR(CDCl3)δ7.95(d，2H)，7.65(d，2H)，7.05(d，1H)，6.95(dd，1H)，6.55(d，1H)，5.95(t，1H)，4.45(d，2H)，4.15(q，2H)，2.65(s，3H)，2.15(s，3H)，1.50(s，6H)，1.15(t，3H).
實施例51
2-甲基-2-[2-甲基-4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例50如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(93％)。
MS m/z 493(M+1)實施例52 2-甲基-2-[2-甲基-4-{[(4-甲基-2-[4-異丙基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體25與中間體63如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為白色固體(51％)。
Mp 129-131℃實施例53 2-甲基-2-[2-甲基-4-{[(4-甲基-2-[4-異丙基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例52如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(85％)。
MS m/z 467(M+1)實施例54
2-甲基-2-[4-{[(5-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-4-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體44與中間體68如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為白色固體(85％)。
MS m/z 507(M+1)實施例55 2-甲基-2-[4-{[(5-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-4-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例54如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(39％)。
MS m/z 479(M+1)實施例56 2-甲基-2-[4-{[(5-甲基-2-[3-三氟甲基苯基]噻唑-4-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯使中間體25與中間體63如通用方法6所述反應，得到標題化合物，為淡黃色油(43％)。
MS m/z 507(M+1)實施例57 2-甲基-2-[4-{[(5-甲基-2-[3-三氟甲基苯基]噻唑-4-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸使實施例56如通用方法8所述反應，得到標題化合物，為白色固體(74％)。
MS m/z 479(M+1)制備下列中間體和配體，用于下述結合與轉染測定。
(i)2-(4-(2-(2，3-二氚-1-庚基-3-(2，4-二氟苯基)脲基)乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸在下述結合測定中使用該化合物作為hPPARα的對照放射性配體。它也被描述在WO 00/08002中，其合成再現(xiàn)如下中間體A2-(4-(2-(苯基甲氧羰基氨基)乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸將4-(2-(苯基甲氧羰基氨基)乙基)苯酚(5.74g，21.16mmol)的2-丁酮(17mL)與氯仿(6g)溶液滴加到氫氧化鈉(9.0g，225mmol)與2-丁酮(67mL)的混合物中，同時保持反應溫度在30℃以下。將該混合物在30℃下攪拌4小時。加入乙醚(100mL)，過濾收集所得固體，用乙醚(100mL)洗滌。將該固體溶于水(70mL)，蒸發(fā)除去所有殘留的乙醚。加入1N鹽酸，調(diào)節(jié)pH至1，所得的油用二氯甲烷萃取(3×50mL)。合并萃取液，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)，得到黃色的油(3.82g，49％)。1H-NMR(CDCl3)δ7.26(s，5H)，7.09(d，2H，J＝7.9Hz)，6.88(d，2H，J＝8.4Hz)，5.09(s，2H)，4.75(br s，1H)，3.42-3.44(m，2H)，2.75(t，2H，J＝6.7Hz)，1.92-2.00(m，2H)，1.47(s，3H)，1.04(t，3H，J＝2.6Hz).質(zhì)譜ES-，m/e(M+H)+＝372.
中間體B2-(4-(2-(苯基甲氧羰基氨基)乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸甲酯將中間體A(2.0g，5.38mmol)的二甲基甲酰胺(12mL)溶液用碳酸鉀(2.23g，16.14mmol)和甲基碘(1.54g，10.76mmol)處理，將所得混合物在23℃下攪拌2小時。過濾混合物，收集固體，用乙酸乙酯(70mL)洗滌。將濾液用鹽水洗滌(4×50mL)，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過硅膠色譜純化，用己烷、再用33％乙酸乙酯-己烷作為洗脫劑，得到無色的油(1.27g，61％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ7.31(m，5H)，7.06(d，2H，J＝8.4Hz)，6.68(d，2H，J＝8.4Hz)，4.98(s，2H)，3.67(s，3H)，3.15(m，2H)，2.62(t，2H，J＝7.1Hz)，1.86(m，2H)，1.38(s，3H)，0.86(t，3H，J＝7.3Hz).質(zhì)譜ES+，m/e(M+Na)+＝408.
中間體C2-(4-(2-氨基乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸甲酯乙酸鹽將中間體B(1.27g，3.29mmol)的甲醇(50mL)與乙酸(0.4g)溶液用10％披鈀碳處理，在氫氣氛(50psi)中搖動2小時。通過C鹽過濾催化劑，蒸發(fā)溶劑，以定量收率得到黃色的油(1.04g)。1H-NMR(CDCl3)δ7.06(d，2H，J＝8.4Hz)，6.77(d，2H，J＝8.4Hz)，6.70(br s，2H)，3.76(s，3H)，3.02(br s，2H)，2.82(m，2H)，1.99(s，3H)，1.92(m，2H)，1.48(s，3H)，0.96(t，3H，J＝7.4Hz).質(zhì)譜普ES+，m/e(M+H)+＝252.
中間體D2-(4-(2-(2，4-二硝基苯磺酰氨基)乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸甲酯將中間體C(2g，6.42mmol)的CH2Cl2(40mL)溶液用飽和碳酸氫鈉溶液處理，分離有機層。含水層用CH2Cl2萃取(5×50mL)，合并有機層，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)，得到游離堿，為黃色的油(1.61g，100％)。將其溶于CH2Cl2(40mL)，用吡啶(0.45g，5.61mmol)和2，4-二硝基苯磺酰氯(1.5g，5.61mmol)處理，將混合物在23℃下攪拌3小時。加入水(60mL)，分離有機層，用水(3×40mL)和飽和碳酸氫鈉(40mL)洗滌。將有機層干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)，殘余物經(jīng)過色譜純化，用15-20％ EtOAc-己烷作為洗脫劑，得到淺黃色固體(1.38g，51％)。1H-NMR(CDCl3)δ8.63(d，1H，J＝2.3Hz)，8.49(dd，1H，J＝8.4Hz，J′＝2.3Hz)，8.07(d，1H，J＝8.4Hz)，6.89(d，2H，J＝8.4Hz)，6.54(d，2H，J＝8.4Hz)，5.34(t，1H，J＝5.3Hz)，3.78(s，3H)，3.48(q，2H，J＝8.3Hz)，2.75(t，2H，J＝6.6Hz)，1.92(m，2H)，1.42(s，3H)，0.93(t，3H，J＝7.5Hz).
中間體E2-(4-(2-((2，4-二硝基苯磺酰基)(庚-2-烯-1-基)氨基)乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸甲酯將中間體D(315mg，0.654mmol)的THF(15mL)溶液用三苯膦(343mg，1.308mmol)、庚-2-烯-1-醇(150mg，1.308mmol)和偶氮二羧酸二乙酯(228mg，1.308mmol)處理，將該混合物在23℃下攪拌1小時。蒸發(fā)溶劑，殘余物經(jīng)過色譜純化，用10-15％ EtOAc-己烷作為洗脫劑，得到半固體(400mg，＞100％)。TLC和NMR顯示含有所需化合物以及1，2-(二乙氧羰基)肼。
中間體F2-(4-(2-(庚-2-烯-1-基氨基)乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸甲酯將中間體E(400mg，0.654mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液用三乙胺(132mg，1.308mmol)和巰基乙酸(78mg，0.85mmol)處理，將該混合物在23℃下攪拌1小時。將混合物用EtOAc(30mL)稀釋，用水(3×20mL)和碳酸氫鈉水溶液(30mL)洗滌。將有機層干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)，殘余物經(jīng)過色譜純化，用10％ EtOAc-己烷、再用50％ EtOAc-己烷、再用MeOH作為洗脫劑，得到油(177mg，從中間體24計78％)。1H-NMR(CDCl3)δ7.06(d，2H，J＝7.5Hz)，6.75(d，2H，J＝7.5Hz)，5.59(m，2H)，3.76(s，3H)，3.30(d，2H，J＝6.3Hz)，2.87(m，4H)，1.96(m，4H)，1.47(s，3H)，1.28(m，5H)，0.96(t，3H，J＝7.6Hz)，0.86(t，3H，J＝6.9Hz).
中間體G2-(4-(2-(1-庚-2-烯基-3-(2，4-二氟苯基)脲基)乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸甲酯將中間體F(157mg，0.452mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液用2，4-二氟苯基異氰酸酯(140mg，0.904mmol)處理，將該混合物在23℃下放置18小時。蒸發(fā)溶劑，殘余物經(jīng)過硅膠色譜純化，用10％、再用15％乙酸乙酯-己烷作為洗脫劑，得到黃色半固體(212mg，93％)。被柱共同洗脫的雙-(2，4-二氟苯基)脲所污染。1H-NMR(CDCl3)δ8.85(brs，1H)，8.02(m，1H)，7.09(d，2H，J＝8.4Hz)，6.77-6.90(m，4H)，5.70(m，1H)，5.36(m，1H)，3.76(s，3H)，3.54(t，2H，J＝7.3Hz)，2.84(t，2H，J＝7.1Hz)，1.55(br s，1H)，1.46(s，3H)，1.25-1.35(m，5H)，0.96(t，3H，J＝7.3Hz)，0.88(t，3H，J＝7.4Hz).質(zhì)譜CI/AP+，m/e(M+H)+＝503.
2-(4-(2-(1-庚-2-烯基-3-(2，4-二氟苯基)脲基)乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸(放射性配體前體)將中間體G(370mg，0.736mmol)的甲醇(15mL)溶液用1N NaOH(7.5mL)處理，將該混合物在回流下加熱2小時。將混合物用1N HCl酸化，用乙酸乙酯萃取(3×25mL)。合并有機層，用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過硅膠色譜純化，用20％乙酸乙酯-己烷、再用乙酸乙酯作為洗脫劑，得到黃褐色油(280mg，78％)。1H-NMR(CDCl3)δ7.95-8.09(m，1H)，7.14(d，2H，J＝7.1Hz)，6.90(d，2H，J＝7.4Hz)，6.81(d，2H，J＝5.2Hz)，5.66(m，1H)，5.37(m，1H)，3.56(t，2H，J＝7.4Hz)，2.87(t，2H，J＝7.4Hz)，2.00(m，4H)，1.44(s，3H)，1.27(m，6H)，1.03(t，3H，J＝7.3Hz)，0.88(t，3H，J＝7.3Hz).質(zhì)譜ES+，m/e(M+H)+＝489。
放射性配體2-(4-(2-(2，3-二硝基-1-庚基-3-(2，4-二氟苯基)脲基)乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸將如上制備的放射性配體前體(10mg)的無水DMF(3.5mL)溶液轉移到含有10％ Pd/C(9.8mg)的反應容器內(nèi)。經(jīng)由一個冷凍-融化-排空周期使反應容器排空和脫氣，然后暴露在氚氣(10.1Ci)下。4小時后，將混合物通過C鹽過濾，蒸發(fā)，將殘余物溶于乙腈。一部分該溶液(0.8mL，26.6mCi)經(jīng)過HPLC純化(Dynamax C8，25分鐘梯度，從4∶1乙腈0.1％TFA至9∶1乙腈0.1％ TFA，235nm)。合并含有純物質(zhì)的部分，在氮下蒸發(fā)。將殘余物再次溶于乙腈，得到標題化合物的溶液(82.0Ci/mmol，放射化學純度99％)。
2-(4-(2-(1-庚基-3-(2，4-二氟苯基)脲基)乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸制備未標記(“冷”)型式的上述放射性配體作為對照。將中間體G(10mg)的無水DMF(3.5mL)溶液轉移到含有10％ Pd/C(9.8mg)的反應容器內(nèi)。經(jīng)由一個冷凍-融化-排空周期使反應容器排空和脫氣，然后暴露在氫氣下。4小時后，將混合物通過C鹽過濾，蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過色譜純化，用2％ MeOH/CH2Cl2作為洗脫劑，得到膠(7mg)。
(ii)2-{2-甲基-4-[({4-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1，3-噻唑-5-基}甲基)硫烷基]苯氧基}乙酸在轉染測定中使用該化合物作為PPARδ的陽性對照，并可以將其制備為如下所示的化合物中間體H 將氯磺酸(15mL)冷卻至0℃，然后歷經(jīng)10分鐘加入10.0g(0.05M)(2-甲基苯氧基)乙酸乙酯。將反應混合物在0-5℃下攪拌30分鐘，然后除去冷卻浴，繼續(xù)攪拌2小時。將反應混合物倒在冰中，生成白色固體，將其用冰水洗滌，在高真空下干燥，得到標題化合物(12.846g，86％)。
2-{2-甲基-4-[({4-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1，3-噻唑-5-基}甲基)硫烷基]苯氧基}乙酸 使中間體H(4.68g，16mM)與9.6g錫粉在乙醇(20mL)和二噁烷/HCl(20mL)中回流。3小時后，將反應混合物倒在冰和CH2Cl2(200mL)中，過濾。分離各相，含水層用2X 50mL CH2Cl2萃取。合并有機層，干燥(MgSO4)，過濾，蒸發(fā)，得到3.5g(97％)。該物質(zhì)容易生成二硫化物，因此立即使用。將其與中間體2(4.0g，14.0mM)和Cs2CO3(10.1g，31.0mM)溶于乙腈(50mL)，攪拌1小時，然后用乙醚(200mL)和水(200mL)稀釋。分離各相，將有機相用2X NaOH 0.1N(50mL)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物(6.57g)，將其懸浮在己烷∶乙醚(1∶1)中，過濾，得到純的中間體59(5.0g，74％)。然后將該物質(zhì)如下所述水解，以制備標題化合物。將對應的酯(1mmol)的THF(10mL)溶液(在有些情況下，加入幾滴MeOH有助于溶解)用1N LiOH的水溶液(2mL，2mmol)處理，在室溫下攪拌16小時(若反應緩慢，則升溫至50℃)。用1N HCl(2mL，2mmol)中和溶液，蒸發(fā)有機溶劑，得到含有不溶性產(chǎn)物的水溶液。如果不溶物是固體，那么過濾并干燥，得到終產(chǎn)物。如果不溶物是油，那么用EtOAc(30mL)萃取。分離有機溶液，用水洗滌(2×30mL)，干燥，過濾，蒸發(fā)，得到終產(chǎn)物。
(iii)2-(2-甲基-3-[3-{3-(4-環(huán)己氨基)-[6-(4-氟苯基哌嗪-1-基)][1，3，5]三嗪-2-基氨基}丙基]苯硫基)-2-甲基丙酸在下述轉染測定中使用該化合物作為PPARα參照，它是按照下列方法制備的 結合測定利用閃爍親近測定法(SPA)，試驗化合物與hPPARγ、hPPARα或PPARδ結合的能力。使PPAR配體結合結構域(LBD)在大腸桿菌中表達為polyHis標記的融合蛋白并純化。然后將LBD用生物素標記，固定在抗生蛋白鏈菌素-改性的閃爍親近珠粒上。然后將珠粒與恒量的適當?shù)姆派湫耘潴w(關于PPARγ是3H-BRL 49653，關于hPPARα是放射性標記的2-(4-(2-(2，3-二氚-1-庚基-3-(2，4-二氟苯基)脲基)乙基)苯氧基)-2-甲基丁酸，關于PPARδ是標記的GW 2433(參見Brown，P.J.等Chem.Biol.(化學與生物學)1997，4，909-918。有關這種配體的結構和合成))和可變濃度的供試化合物一起保溫，平衡后利用閃爍計數(shù)器測量與珠粒結合的放射性。從每個數(shù)據(jù)點減去非特異性結合的量，這是利用含有50μM對應的未標記的配體的對照孔評估的。關于所試驗的每種化合物，將配體濃度對所結合的放射性配體的CPM作圖，從假定為簡單的競爭性結合的數(shù)據(jù)的非線性最小二乘方擬合估計表觀Ki值。這種測定法的細節(jié)另有報道(參見Blanchard，S.G.等Development of a Scintillation Proximitv Assay for Peroxisone Proliferator-Activated Receptor gamma Ligand Binding Domain.Anal.Biochem.(分析生物化學)1998，257，112-119)。
轉染測定在對CV-1細胞激活亞型PPAR能力的瞬時轉染測定(反式激活測定)中篩選化合物的功能性效價。利用預先建立的嵌合受體系統(tǒng)可以比較受體亞型對相同靶基因的相對轉錄活性并防止內(nèi)源性受體激活使結果的解釋復雜化。例如參見Lehmann，J.M.；Moore，L.B.；Smith-Oliver，T.A.；Wilkison，W.O.；Willson，T.M.；Kliewer，S.A.，An antidiabeticthiazolidinedione is a high affinity ligand for peroxisome proliferator-activated receptorγ(PPARγ)(抗糖尿病的四氫噻唑二酮是PPARγ的高親和性配體)，J.Biol.Chem.(生物化學雜志)，1995，270，12953-6。使關于鼠和人的PPARα、PPARγ和PPARδ的配體結合結構域各自與酵母轉錄因子GAL4 DNA結合結構域融合。將CV-1細胞用各自與一個報道基因構建體相關的PPAR嵌合體的表達載體進行瞬時轉染，該構建體含有驅動表達分泌型胎盤堿性磷酸酶(SPAP)和β-半乳糖苷酶GAL4 DNA結合位點的五個副本。16小時后，將培養(yǎng)基交換為補充有10％脫脂胎牛血清和適當濃度供試化合物的DME培養(yǎng)基。另外24小時后，制備細胞提取物，測定堿性磷酸酶和β-半乳糖苷酶的活性。使用β-半乳糖苷酶活性作為內(nèi)標(例如參見Kliewer，S.A.等，Cell(細胞)83，813-819(1995))將堿性磷酸酶活性校正為轉染效率。在hPPARγ測定中使用Rosiglitazone(BRL 49653)作為陽性對照。在hPPARα測定中的陽性對照是2-(2-甲基-3-[3-{3-(4-環(huán)己氨基)-[6-(4-氟苯基哌嗪-1-基)][1，3，5]三嗪-2-基氨基}丙基]苯硫基)-2-甲基丙酸。關于PPARδ測定的陽性對照是2-{2-甲基-4-[({4-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1，3-噻唑-5-基}甲基)硫烷基]苯氧基}乙酸。
表2所選擇的化合物的PPAR反式激活活性實施例編號人αEC50μM 人δEC50μM 人γEC50μM實施例1 0.017 10.000 10.000實施例2 0.005 2.950 10.000實施例6 0.230 10.000 10.000實施例10 0.108 10.000 10.000實施例13 0.005 10.000 0.850實施例15 0.001 4.370 2.640實施例17 0.027 10.000 10.000實施例21 0.028 10.000 10.000實施例23 0.007 9.190 10.000實施例25 0.010 2.700 10.000實施例27 0.002 4.080 8.820實施例29 0.122 10.000 10.000實施例31 0.044 10.000 10.000實施例33 0.014 5.360 10.000實施例35 0.004 4.590 10.000實施例37 0.020 10.000 10.000實施例39 0.036 2.480 10.000實施例41 0.005 10.000 0.832實施例45 0.400 1.640 10.000實施例47 0.020 7.300 10.000實施例49 0.010 1.000 10.000
權利要求
1.式(I)化合物及其藥學上可接受的鹽、溶劑化物和可水解的酯 其中X1代表O或S；R1和R2獨立地代表H、鹵素、-CH3和-OCH3；n代表1或2；X2代表NH、NCH3或O；Y與Z之一是N，另一個是O或S；R3代表苯基或吡啶基(其中N在2或3位)，并且可選地被一個或多個鹵素、NO2、NH2、CF3、OCF3、OC1-6直鏈或支鏈烷基、C1-6直鏈或支鏈烷基、鏈烯基或炔基取代，其條件是若R3是吡啶基，則N是未取代的；R4代表CF3或CH3。
2.式(I)化合物，它是hPPARα激動劑。
3.根據(jù)權利要求2的化合物，它是選擇性hPPARα激動劑。
4.根據(jù)權利要求1-3的化合物，其中X1代表O。
5.根據(jù)權利要求1-4的化合物，其中R1和R2之一是H。
6.根據(jù)權利要求5的化合物，其中R1和R2都代表H。
7.根據(jù)權利要求1-6中任一項的化合物，其中n代表1。
8.根據(jù)權利要求1-7中任一項的化合物，其中X2代表NH。
9.根據(jù)權利要求1-8的化合物，其中Z代表N。
10.根據(jù)權利要求1-9的化合物，其中Y代表S。
11.根據(jù)權利要求1-10中任一項的化合物，其中R3是單取代的。
12.根據(jù)權利要求11的化合物，其中R3是被CF3單取代的。
13.根據(jù)權利要求11或12的化合物，其中R3是在對位單取代的。
14.根據(jù)前述權利要求中任一項的化合物，其中R3是苯基。
15.根據(jù)前述權利要求中任一項的化合物，其中R4是CH3。
16.化合物，選自2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸乙基酯N-甲基-2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸乙基酯4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-羧酸4-(1-叔丁氧羰基-1-甲基乙氧基)芐基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-叔丁基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-異丙基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-硝基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氨基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氨基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[3，4-二氯苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[3-氟-4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-溴苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-乙基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-苯基噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氟苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氯苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲氧基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-甲氧基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-乙炔基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-三氟甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-三氟甲基-2-[4-叔丁基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-三氟甲基-2-[4-叔丁基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噁唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基-2-吡啶基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[2-甲氧基-4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[2-甲基-4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[2-甲基-4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[2-甲基-4-{[(4-甲基-2-[4-異丙基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[2-甲基-4-{[(4-甲基-2-[4-異丙基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(5-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-4-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(5-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-4-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(5-甲基-2-[3-三氟甲基苯基]-噻唑-4-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]內(nèi)酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(5-甲基-2-[3-三氟甲基苯基]-噻唑-4-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸。
17.化合物，選自2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸乙基酯2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸N-甲基-2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-叔丁基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-異丙基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-硝基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[3，4-二氯苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[3-氟-4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-溴苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-乙基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-苯基噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氟苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-氯苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲氧基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-甲氧基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-乙炔基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-三氟甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噁唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基-2-吡啶基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[2-甲氧基-4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸。
18.2-甲基-2-[4-[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸。
19.用于治療的根據(jù)權利要求1-17中任一項的化合物。
20.藥物組合物，包含根據(jù)權利要求1-17中任一項的化合物。
21.根據(jù)權利要求20的藥物組合物，進一步包含藥學上可接受的稀釋劑或載體。
22.根據(jù)權利要求1-17中任一項的化合物的用途，用于制造治療hPPARα疾病或病癥的藥物。
23.根據(jù)權利要求22的用途，其中該hPPARα介導的疾病或病癥是脂血異常、X綜合征、心力衰竭、高膽固醇血、心血管疾病、II型糖尿病、I型糖尿病、抗胰島素性、高脂血、肥胖、炎癥、食欲缺乏、食欲過盛和神經(jīng)性食欲缺乏。
24.治療患者hPPARα介導的疾病或病癥的方法，包括服用治療上有效量的根據(jù)權利要求1-17中任一項的化合物。
25.根據(jù)權利要求24的方法，其中該hPPARα介導的疾病或病癥是脂血異常、X綜合征、心力衰竭、高膽固醇血、心血管疾病、II型糖尿病、I型糖尿病、抗胰島素性、高脂血、肥胖、炎癥、食欲缺乏、食欲過盛和神經(jīng)性食欲缺乏。
全文摘要
式(I)化合物及其藥學上可接受的鹽、溶劑化物和可水解的酯，其中X
文檔編號A61P29/00GK1402716SQ00816631
公開日2003年3月12日 申請日期2000年11月30日 優(yōu)先權日1999年12月2日
發(fā)明者邁克爾·L·西拉 申請人:葛蘭素集團有限公司