專利名稱：化學(xué)方法和裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用諸如放射性核素等報(bào)道子部分標(biāo)記諸如肽等生物活性載體的方法和裝置。所得標(biāo)記綴合物可用作診斷劑，例如更具體
地作為用于正電子發(fā)射斷層顯像(PET)或單電子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層顯像(SPECT),或者用于放射性治療的放射性藥物。
背景技術(shù)：
放射性標(biāo)記的生物活性肽用于診斷性成像的用途在核醫(yī)藥中日
于將放射性輸送到目標(biāo)組織。例如，放射性標(biāo)記肽有著明顯的潛力用于將放射性核素輸送至胂瘤、梗塞和受感染的組織而用于診斷性成像和發(fā)射性治療。18F,具有約110分鐘的半衰期，是諸多受體成像研究中正電子發(fā)射核素的選擇。因此，由于其在PET中定量地檢測(cè)和表征大量疾病的應(yīng)用，"F-標(biāo)記生物活性肽有著重大的臨床應(yīng)用潛力。其他有用的放射性核素包括"C,諸如1251、 1231、 1241、 1311等放射性碘和99mTc。
礙了肽和生物分子用作診斷劑。因此，依然需要諸如18F標(biāo)記輔基等標(biāo)記劑和能快速地化學(xué)選擇性地將諸如放射性核素例如18F等標(biāo)記引入到肽中，在溫和的條件下以高放射性化學(xué)產(chǎn)率和純度得到標(biāo)記產(chǎn)品的方法。另案待審申請(qǐng)WO2006/067376描述了用于標(biāo)記諸如肽等載體用于診斷成像的方法和試劑。因此，需要將能自動(dòng)化的這些方法用于在臨床環(huán)境中協(xié)助診斷劑的制備。本發(fā)明人現(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)WO2006/067376的方法可通過(guò)在用作催化劑以及反應(yīng)容器的狹孔銅容器中進(jìn)行所述方法而得以改進(jìn)。按此方式，放射化學(xué)產(chǎn)率可由約86%提高至超過(guò)99%。此外，所述狹孔銅容器能容易地加入到自動(dòng)合成系統(tǒng)中。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了用于標(biāo)記載體的方法，所述方法包括式(I)化合物與式
(II)化合物的反應(yīng)<image>image see original document page 6</image>或者
式(III)化合物和式(IV)化合物的反應(yīng)<image>image see original document page 6</image>
其中
Ll、 L2、 L3和L4各自為連接子基團(tuán)；11*是報(bào)道子部分；
從而分別得到式(V)或(VI)的綴合物<image>image see original document page 6</image>其中L1、 L2、 L3、 L4和R4口上所定義；其特征在于所述反應(yīng)在狹孔銅容器中進(jìn)行。
連接子基團(tuán)L1、 L2、 L3和L4各自獨(dú)立地是CL6。烴基，適宜地為C!.3o烴基，任選地包括1至30個(gè)雜原子，適宜地為1至10個(gè)雜原子，諸如氧或氮。適宜的連接子基團(tuán)包括烷基、烯基、炔基鏈、芳香、多芳香和雜芳香環(huán)，其中任一種可選地被一種或多種醚、硫醚、磺酰胺或酰胺官能、含有乙二醇、氨基酸或碳水亞單元的單體和聚合物取代。術(shù)語(yǔ)"烴基"指由碳和氫構(gòu)成的有機(jī)取代基，這樣的基團(tuán)包括飽和的、不飽和的或芳香部分。連接子基團(tuán)Ll、 L2、 L3和L4可經(jīng)選擇以提供良好的體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)，諸如所得式(V)或(VI)化合物的有利分泌特征。具有不同親脂性或電荷的連接子基團(tuán)的使用能顯著改變所述肽的體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)以適合診斷需求。例如，當(dāng)希望通過(guò)腎排泄將式(V)或(VI)化合物從體內(nèi)清除時(shí)，使用親水性連接子，而當(dāng)希望通過(guò)肝膽排泄時(shí)，使用疏水性連接子。已發(fā)現(xiàn)具有聚乙二醇部分的連接子具有較慢的血液清除，在一些情況下是所希望的。
W是能由任何成像形式所檢測(cè)到的報(bào)道子部分，諸如適用于體內(nèi)光學(xué)成像的報(bào)道子，含有放射性核素的報(bào)道子或者含有適用于磁共振成像(MRI)或磁共振波譜(MRS)的同位素的報(bào)道子。RM尤選包括放射性核素，例如正電子發(fā)射放射性核素。適于該目的的正電子發(fā)射放射性核素包括"C、 18F、 75Br、 76Br、 I24I、 82Rb、 68Ga、 64Cu和62Cu，其中優(yōu)選"C和"F。在本發(fā)明的一個(gè)方面，所述放射性核素是"F。其他有用的放射性核素包括1231、 125I、 131I、 211At、 ，Tc和111111。金屬放射性核素適合摻入到螯合劑中，例如通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法進(jìn)行直接摻入。金屬報(bào)道子的螯合優(yōu)選在式(I)或(IV)化合物分別與式(II)或(III)化合物反應(yīng)之前進(jìn)行，從而避免Cu(I)催化劑的螯合。
包含在R*t的合適的螯合劑包括式X的這些
(x)
其中
每一個(gè)R"、 R2A、 R"和R4A獨(dú)立地是RA基團(tuán)；
每一個(gè)RA基團(tuán)獨(dú)立地是H或Cwo烷基、Cwo烷基芳基、(32.10烷氧基烷基，Cwo羥基烷基、Cwo烷基胺、Cwo氟烷基，或者兩個(gè)以上的RA基團(tuán)連同其連接的原子形成碳環(huán)、雜環(huán)、飽和的或不飽和的環(huán)(V)
在室溫，近中性pH的水溶液條件下，含有式X的螯合劑的式(II)或(IV)化合物可經(jīng)放射性標(biāo)記而得到良好的放射性化學(xué)純度(RCP)。
當(dāng)11*適用于體內(nèi)光學(xué)成像的報(bào)道子時(shí)，所述報(bào)道子是在光學(xué)成像方法中能被直接或間接檢測(cè)的任何部分。所述報(bào)道子可以是光散射劑(例如有色或無(wú)色顆粒)、光吸收劑或發(fā)光劑。更優(yōu)選所述報(bào)道子是諸如發(fā)色團(tuán)或熒光化合物等染料。所述染料可以是與電磁光譜中波長(zhǎng)由紫外光至近紅外的光線相互作用的任何染料。最優(yōu)選所述報(bào)道子具有焚光性質(zhì)。優(yōu)選的有機(jī)發(fā)色和熒光報(bào)道子包括具有廣離域電子體系的基團(tuán)，例如花青、部花青、吲哚花青、酞菁、萘菁、三苯基次曱基、卟啉、吡啶鐵染料、噻喃錄染料、方酸鐺染料、克酮鑰染料、吡咯鐵染料、卩引咮苯胺、苯并吩噁。秦鑰染料、苯并噻吩噻嗪鎗染料、蒽醌、萘醌、陰丹士林、鄰苯二甲酰吖啶酮、三苯酚合苯醌、偶氮染料、分子內(nèi)和分子間電荷轉(zhuǎn)移染料和染料復(fù)合物、環(huán)庚三烯酮、四嗪、雙(硫代雙烯)復(fù)合物、二(苯-二硫綸)復(fù)合物、碘苯胺染料、雙(S,O-硫代雙烯)復(fù)合物。熒光蛋白，諸如綠熒光蛋白(GFP)和具有不同吸收/發(fā)射性
質(zhì)的GFP的修飾也是有用的。某些稀土元素(例如銪、釤、鋱或鏑)可
用在某些情況下，如在熒光納米晶體(量子點(diǎn))中。
可以使用的發(fā)色團(tuán)的具體例子包括熒光素、磺酰羅丹明IOI(德克薩斯紅)、羅丹明B、羅丹明6G、羅丹明19、吲哚花青綠、Cy2、Cy3、 Cy3.5、 Cy5、 Cy5.5、 Cy7、海軍藍(lán)、太平洋藍(lán)、俄勒岡綠88、俄勒岡綠514、四曱基羅丹明和Alexa Fl菌350、Alexa Fluor 430、 AlexaFl麗532、 AlexaFl雨546、 AlexaFl匿555、 AlexaFl麗568、 AlexaFl麗594、 Alexa Fluor 633、 AlexaFl匿647、 AlexaFl麗660、 AlexaFl麗680、 Alexa Fluor 700和Alexa Fl匿750。
用于引入發(fā)色團(tuán)的合適方法在WO 98/048838中詳細(xì)描述。
當(dāng)11*含有適用于磁性共振成像(MRI)或磁性共振光譜(MRS)的同位素時(shí)，這些同位素適宜地選自"F和13。
在式(I)和(III)以及本發(fā)明的其他方面中，除非另外具體指明，用于標(biāo)記的合適載體是肽，其可以包括生長(zhǎng)激素抑制素類似物，諸如奧曲肽、蛙皮素、血管活性腸內(nèi)肽、趨化肽類似物、a-黑素細(xì)胞刺激荷爾蒙、神經(jīng)降壓素、Arg-Gly-Asp肽、人類前胰島素連接肽、胰島素、內(nèi)皮素、血管緊縮素、緩激肽、內(nèi)皮抑制素、血管增生抑制素、谷胱甘肽、降血鈣素、爪蟾抗菌肽I和II、促黃體生成激素釋放激素、胃泌激素、cholecystochinin、物質(zhì)P、后葉加壓素、甲酸基-正亮氨酰-亮氨酰-苯丙氨酰-正亮氨酰-酪氨酰-賴氨酸、膜聯(lián)蛋白V類似物、血
管活性蛋白-l(VAP-l)肽和胱天蛋白酶肽底物。優(yōu)選用于標(biāo)記的肽是Arg-Gly-Asp及其類似物，諸如在WO 01/77415和WO 03/006491中描述的那些，優(yōu)選含有以下片段的肽0:
O
O
三 H 11 i H
o
HO
HN=(
NH
NH,
更優(yōu)選式(A)的肽:
I H 8 I H S \ H S \ H
)=0 HO
NH
HN HN=(
:0 NH，
(A)
-H，C
其中X 是-NH2或
其中a是l至10的整數(shù)，優(yōu)選a是l。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將能理解，本發(fā)明的方法也可用于諸如蛋白質(zhì)、 激素、多糖、寡聚核苷酸和抗體片段、細(xì)胞、細(xì)菌、病毒以及小的類 藥分子等其他生物分子的放射性標(biāo)記從而提供各種診斷劑。在式(I)和 (III)和本發(fā)明的其他方面，除非另外指明，特別合適的用于放射性標(biāo) 記的載體是肽、蛋白質(zhì)、激素、細(xì)胞、細(xì)菌、病毒和小類藥分子。
在狹孔銅容器中，式(i)化合物與式(n)化合物或者式(m)與式(iv)
化合物的反應(yīng)可在合適的溶劑中或者水中，在5。C至20(TC,優(yōu)選50 。C至15(TC的溫度下進(jìn)行，所述合適的溶劑例如乙腈、CM烷基醇、 二甲基曱酰胺、四氬呔喃或二曱亞>5風(fēng)或其任意的水性混合物。
用于進(jìn)行反應(yīng)的狹孔銅容器優(yōu)選采用帶有狹孔的管子形式，例如 未充填固體載體的HPLC環(huán)。狹孔銅容器可方便地由金屬銅制成，或 者可被本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解，狹孔銅容器可由其他一些合適的材料 制成，但具有金屬銅的內(nèi)表面。狹孔銅容器的內(nèi)徑通常為約1毫米至1.5 mm,優(yōu)選40至200 ^im。如果狹孔銅容器的兩端均敞開則特別方 便，因此反應(yīng)物可流動(dòng)通過(guò)。
但又足夠:以S在容器中的駐留時(shí)間^短。當(dāng)狹孔銅容器為具有狹孔 的管子形式時(shí)，便利的長(zhǎng)度為約5 cm至50 cm長(zhǎng)，更通常為5 cm至 20cm，并通常為約15cm。
在反應(yīng)中，Cu(I)固有地存在于狹孔銅容器的內(nèi)表面上用作催化劑。
在本發(fā)明的另 一方面，用于進(jìn)行反應(yīng)的狹孔銅容器是微流體裝 置，所述微流體裝置包括界定了第一孔、第二孔和在二者之間流體連 通的至少 一個(gè)伸長(zhǎng)微流體通道的裝置體，其中所述微流體通道的至少 一部分由所述裝置體的金屬銅部分所界定。在這樣的微流體裝置中， 通常直徑為10-300 nm，更通常為50-300 pm的預(yù)定孩i流體通道經(jīng)蝕 刻或者其他機(jī)械加工到裝置體之中，便利地位于其表面上。裝置體可 便利地由銅塊制成，或者可供選擇地是例如玻璃、硅、聚合物或金屬， 并且通過(guò)濺射、電鍍或其他沉積技術(shù)在形成于其中的微流體通道上涂 覆銅鍍層。
這些微流體通道可部分地由蓋板的方式界定，優(yōu)選由銅制成，或 者可供選擇地由如上所述的覆蓋有銅的其他金屬或更常見(jiàn)的玻璃制 成。由蓋板的方式界定所述微流體通道形成了能操作皮升體積的液體 或氣體的內(nèi)含網(wǎng)絡(luò)。用于在恰當(dāng)?shù)奈恢妹芊馍w板的方法取決于所選擇 的材料，但便利地是鉗緊，可選地包括在兩層表面之間的惰性墊圏密 封(例如Teflon 密封)。所述裝置能處理多至每分鐘數(shù)百毫升的流體。 這可以例如通過(guò)堆疊多個(gè)裝置而進(jìn)一步提高。這些裝置可經(jīng)設(shè)計(jì)或者 與泵、微注射泵(例如由Kloehen Limited, Las Vegas, USA所提供的 那些)一起使用，或者利用融合硅石毛細(xì)管進(jìn)行電滲流動(dòng)從而與反應(yīng)物 相接觸。所述蓋板可選地界定微流體通道的一部分。
在優(yōu)選實(shí)施方式中，微流體裝置通過(guò)在銅塊中蝕刻微流體通道而 形成，這可以通過(guò)采用化學(xué)蝕刻劑(例如氯化鐵)，然后用可選地界定 了至少部分微流體通道的銅蓋板覆蓋而形成。
以上所述的用于進(jìn)行本發(fā)明的方法的某些微流體裝置是新穎的， 因此構(gòu)成本發(fā)明的另一個(gè)方面。因此，根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了用于進(jìn)行本發(fā)明的方法 的微流體裝置，其特征在于所述裝置包括界定了第一孔(C)、第二孔(d)
和在二者之間流體連通的至少一個(gè)伸長(zhǎng)微流體通道(a)的裝置體，其中 所述微流體通道(a)的至少一部分由所述裝置體的金屬銅部分所界定。 合適地，界定所述至少一個(gè)微流體通道的裝置體由金屬銅制成。
在另一個(gè)方面，裝置體進(jìn)一步包括基體部分和蓋子部分，界定了 所述第一孔、第二孔和在二者之間流體連通的至少一個(gè)伸長(zhǎng)微流體通 道的裝置體。合適地，所述微流體通道包括形成在基體部分或者蓋子 部分或者同時(shí)在兩個(gè)部分中疊置配準(zhǔn)的通道。
根據(jù)本發(fā)明的還一個(gè)方面，提供了如上述的微流體裝置，其中所 述微流體通道裝有前文所限定的式(I)、 (11)、 (III)或(IV)的化合物。
用于進(jìn)行放射性合成的微制造或者微流體裝置的應(yīng)用描述在 WO03/078358中。關(guān)于構(gòu)建微制造裝置的方法及其在合成化學(xué)中的應(yīng) 用的綜述可在DeWitt, (1999) "Mic腦actors for Chemical Synthesis"， Current Opinion in Chemical Biology, 2:350-6; Haswell, Middleton等 (2001) "The Application of Microreactors to Synthetic Chemistry", Chemical Communications: 391-8; Haswell和Skelton(2000) "Chemical and Biochemical Microreactors" ， Trends in Analytical Chemistry 19f6)， 389-395; 以及Jensen (2001) "Microreaction Engineering- Is Small Better " Chemical Engineering Science, M:293-303中找到。
本發(fā)明的該方面的一個(gè)實(shí)施方式現(xiàn)在參考圖2進(jìn)行描述并且適用 于進(jìn)行本發(fā)明的方法，圖2提供了本發(fā)明的微制造裝置的分解圖。形 成在基體部分(ll)的銅微流體通道具有1米的長(zhǎng)度和0.22 mm的內(nèi)徑 (管體積38 yL)。改變(12)在合適的問(wèn)題鉗緊從而密封所述微流體通 道。氣密注射器(Hamilton, 500 ju l)(未示出)通過(guò)精細(xì)孔塑料注入管(未 示出)與微制造裝置相連。塑料注入管采用合適的壓合接頭通過(guò)螺紋入 口(8)與微制造裝置相連。相似的方法用于通過(guò)出口(9)與導(dǎo)出管相連。 反應(yīng)混合物可以高至300。C的溫度和快至0.5 ml/min的流速經(jīng)泵入流 過(guò)所述微制造裝置。放置在加熱腔(13)中的電加熱筒可采用合適的溫 度控制器進(jìn)行加熱。
本發(fā)明提供了用于放射性標(biāo)記的化學(xué)選擇方法，其中引入標(biāo)記的 精確位置是在肽或載體前體的合成時(shí)預(yù)先選定的。在載體的預(yù)定位置發(fā)生的連接反應(yīng)給出唯一可能的產(chǎn)物。該方法因此是化學(xué)選擇性的， 并且其用途被認(rèn)為普適于各種肽、生物分子和低分子量藥物。此外， 炔官能團(tuán)和疊氮官能團(tuán)在大多數(shù)反應(yīng)條件下穩(wěn)定并且不與最常見(jiàn)的 肽官能團(tuán)相反應(yīng)，因此減少了標(biāo)記合成中所需要的保護(hù)和脫保護(hù)步 驟。此外，在標(biāo)記反應(yīng)中形成的三唑環(huán)不水解并且對(duì)氧化還原高度穩(wěn) 定，意味著標(biāo)記載體具有很高的體內(nèi)穩(wěn)定性。三唑環(huán)在尺寸和極性上 也可比于酰胺，因此標(biāo)記肽或蛋白是其天然對(duì)應(yīng)物的優(yōu)異模擬物。
其中載體是肽或蛋白的式(i)和(ni)的化合物可通過(guò)肽合成標(biāo)準(zhǔn)方
法進(jìn)行制備，例如固相肽合成，如Atherton， E.和Sheppard， R.C.; "Solid Phase Synthesis"; IRL Press: Oxford, 1989所述。在式(I)或(III)的化合 物中引入炔基或疊氮基可通過(guò)肽的N端或C端或者與肽序列內(nèi)含有的 一些其他官能團(tuán)相反應(yīng)而實(shí)現(xiàn)，其修飾并不影響載體的結(jié)合特性。優(yōu)
選通過(guò)形成穩(wěn)定的酰胺鍵將炔基或疊氮基引入到式(i)或(m)的化合物 中，例如在肽合成之時(shí)或者之后，通過(guò)肽胺官能團(tuán)與活化酸的反應(yīng)， 或者可供選擇地通過(guò)肽酸官能團(tuán)與胺官能團(tuán)的反應(yīng)形成。將炔基或疊
氮基引入到諸如細(xì)胞、病毒、病菌等載體中的方法可在H.C.Kob和 K.B. Sharpless， Drug Discovery Today, Vol 8 (24), 2003年12月中找 到，并作為參考。用于在式(I)或(III)的化合物中引入炔基或疊氮基的 合適的中間體包括14
H2N、芳基H2N、雜芳基 ,H2 /
II HI
OHSH 廣NH2 H代糖
n鳴
U CNH 人，2
N3—L3—NH2 N3——L3 — C02H N3—L3tc02H
NH,
s03H
N3—L3—S03H N3 — L3— OH N3—L3 — SH
用在本發(fā)明的方法中的優(yōu)選式(IV)的化合物包括:
0
JL\ 廣Q
其中11*包含"C放射性標(biāo)記的式(II)化合物可例如按照如下方案制
備
基
芳I
c、 lrt
基
c、
H
cl^NH2 _i w a yNH"CH3
N3
11ch3i ,
,7 N3"CH3
"ch3i
N「 L2— NuH IT" N廣L2— Nu"CH3
其中，-NuH是親核反應(yīng)中性，諸如羥基、硫醇或胺官能團(tuán)。
其中!^是"F的式(II)化合物可以通過(guò)親電或親核氟化反應(yīng)而制備，例
如
,oh i>NaN3 _7 o丁s18F '.化f
Br< ii)TsCI Na Kryptofix222 N,
(^)~連接子-離去基團(tuán) -\. _一 ^^ f
N3 Kryptofix 222
N3 —。一、離去基團(tuán)
用于制備式(n)化合物的合適的放射性氟化方法包括在諸如環(huán)聚醚例
如18-冠-6或Kryptofix 2.2.2.等相轉(zhuǎn)移劑的存在下引入離去基團(tuán)(諸如烷基 或芳基磺酸酯，例如曱磺酸酯、三氟曱基磺酸酯或曱苯磺酸酯；硝基或 三烷基銨鹽)的前體與18F的反應(yīng)。該反應(yīng)可在本領(lǐng)域中已知的標(biāo)準(zhǔn)條件 [例如,M丄Welch和C.S. Redvanly "Handbook of Radiopharmaceuticals", 由Wiley出版]下在溶液相中進(jìn)行，或者利用WO 03/002157中描述的方法 采用固體載體以促進(jìn)式(II)化合物的純化。
式(IV)的化合物可通過(guò)類似于所描述的那些用于合成式(II)的化合物 的方法由合適的乙炔前體制備。
式(V)和(VI)的標(biāo)記載體可以以足夠產(chǎn)生所需信號(hào)的量施用給患者以用于體內(nèi)成像，PET或SPECT成像的典型放射性核素劑量0.01 至100 mCi,優(yōu)選0.1至50mCi對(duì)于70 kg體重而言通常是足夠的。
因此可以以完全在本領(lǐng)域內(nèi)的方式采用生理可接受的載體或賦 形劑配制式(V)或(VI)的標(biāo)記載體。例如，所述化合物，可選地同時(shí)加 有可藥用賦形劑，能懸浮或溶解在水性介質(zhì)中，隨后對(duì)所得溶液或懸 浮液進(jìn)行滅菌。
本文所描述的化學(xué)也可用以制備放射性標(biāo)記載體庫(kù)，適合于篩選
診斷藥物或體內(nèi)成像劑。因此，式(n)或(iv)式的人工基團(tuán)的混合物可 采用上述方法分別與一種或多種式(i)或(in)的化合物而生成放射性標(biāo) 記載體庫(kù)。
實(shí)施例
通過(guò)實(shí)施例的方式描述本發(fā)明，其中使用了以下縮寫:
HPLC:高效液相色譜
DMF: N,N-二曱基曱酰胺
DMSO: 二曱亞砜
ESI-MS:電噴霧離子化質(zhì)譜
r.t.:室溫
TOF-ESI-MS:飛行時(shí)間電噴霧離子化質(zhì)譜 FT-IR:傅里葉變換紅外 ppm: 百萬(wàn)分之一 TFA:三氟乙酸 ACN:乙腈
實(shí)施例1:卩8F]-4-(2-氟乙基)-三唑-l-基-[KGFGK]的制備，采用銅
環(huán)反應(yīng)器
該實(shí)施例參考圖l進(jìn)行描述。加熱的銅管長(zhǎng)1.0m，內(nèi)徑0.56mm， 管體積246 ial)。<formula>formula see original document page 17</formula>
模型肽1(2.4 mg,4.08 [imol)的溶液，磷酸鈉緩沖液(0.2 ml，pH6.0, 250 mM)， DMF(0.05 ml)與[18F]2-氟乙基疊氮化物(0.6 mCi， 23 MBq) 在乙腈(0.2ml)中混合。將標(biāo)記混合物裝入漢密爾頓密封玻璃注射器(1) 中，隨后在80。C,以0.2ml/min的流速在泵的作用下流過(guò)銅環(huán)(2)。通 過(guò)帶有溫度控制單元(5)的加熱模塊(4)將電加熱筒(3)加熱至200°C。反 應(yīng)混合物收集在裝配有出口(7)的小瓶(6)中。反應(yīng)混合物經(jīng)HPLC分 析，顯示了在約3-4分鐘以后以85%的放射性化學(xué)產(chǎn)率生成2。在相 同條件下將所述標(biāo)記混合物再次注入到銅環(huán)反應(yīng)器中得到〉99 %的放 射性化學(xué)產(chǎn)率。
在比較例11中，獲得較低的86%的標(biāo)記產(chǎn)率，盡管在比較例11 中肽濃度甚至更高(17Mm對(duì)比9Mm)。因此，該實(shí)施例證實(shí)了使用銅 環(huán)反應(yīng)器裝置催化偶極1,3-環(huán)加成反應(yīng)的益處。
實(shí)施例2:化合物20的制備，采用銅環(huán)反應(yīng)器 參考比較例12由化合物19制備化合物20。
將化合物19(2.9 mg， 2,04 limol)溶解在加有二曱基曱酰胺(25 pl) 的磷酸鈉緩沖液(IOO nl， pH6.0， 100mM)中。在加入乙腈(IOO inl)中 的化合物11 (518 j^Ci/19MBq)之后，在80°C ,以0.1 ml/min將混合物 泵入預(yù)加熱的銅環(huán)反應(yīng)器中。隨后，用水(0,5 ml)沖洗體系。第一和第 二組分的HPLC分析揭示了分別為9%和34%的標(biāo)記效率。從系統(tǒng)中 回收的總放射活性為53%。
實(shí)施例3: 「"Fl-4-(2-氟乙基)-三唑-l-基-「KGFGKl的制備，采用銅
環(huán)反應(yīng)器
模型肽1(2.4 mg，4.08 (imol)的溶液，磷酸鈉緩沖液(0.2 ml，pH 6.0， 250 mM), DMF(0.05 ml)與["F]2-氟乙基疊氮化物(0.9 mCi， 34MBq)在乙腈(0.2ml)中混合。如同實(shí)施例1將混合物泵入加熱銅環(huán)中，4旦采 用0.1 ml/min的流速?；旌衔锏牧鹘?jīng)時(shí)間為3分鐘以及總反應(yīng)時(shí)間為 IO分鐘。標(biāo)記肽2以77%(衰變修正)回收率得以收集。放射性化學(xué)純 度為>99%。用水(lml)、水/TFA 1/1 (2 ml)、水(2 ml)、乙腈(3 ml)清 洗銅環(huán)反應(yīng)器，用氮?dú)饬?l 1111，50 1111/1^11)干燥。采用相同活性的[1^]2-氟乙基疊氮化物重復(fù)試驗(yàn)。分離物2的放射性化學(xué)產(chǎn)率為71% (衰變 修正)，放射性純度為98%。 對(duì)照化合物的制備
<formula>formula see original document page 18</formula>
比較例l -化合物(2)- l-疊氮基2-氟乙烷的制備 曱苯-4-磺酸2-氟-乙基酯，化合物(l)按照E. U. T. van Velzen等在 Synthesis (1995) 989-997中的描述進(jìn)行制備。化合物(l) (128 mg, 0.586 mmoI)和疊氮化鈉(114mg, 1.758 mmol)與無(wú)水DMF(10 ml)相混合，并 在室溫下攪拌48小時(shí)。過(guò)濾反應(yīng)混合物，但并未從反應(yīng)溶液中分離產(chǎn) 物(2)。
比較例2 -化合物G) - 1-(2-氟-乙基)-4-苯基-1//-「1,2,31三唑的制
DMF(l ml)中的苯乙炔(105 fil， 0.977 mmol)在氮?dú)庀录尤氲浇?jīng)攪 拌的五水合硫酸銅(II) (12 mg， 0.0489 mmol)和L-抗壞血酸(16 mg，0.0977 mmol)在水(0.3 ml)中形成的溶液中。在加入DMF(5 ml)中的化 合物(2) (1.172 mmol)后，在室溫持續(xù)攪拌21小時(shí)。反應(yīng)混合物經(jīng)水(5 ml)稀釋，用二氯曱烷(3x5ml)萃取粗產(chǎn)物并用碳酸氫鈉(10。/Q， 3x10 ml)和鹽水(l x 5 ml)洗滌。在用硫酸鈉干燥后，減壓除去溶劑，用快速 層析(硅膠，己烷/乙酸乙酯)純化粗材料。
產(chǎn)率32mg(17。/o)白色晶體，m.p. 83-85°C
'H國(guó)NMR (CDC13): 5 = 4.70(m, 1H, CH2), 4.76 (m, 1H， CH2), 4.80 (m, 1H, CH2)， 4.89 (m, 1H, CH2)， 7.35 (tt, 1.0 Hz， 7,5 Hz, 1H, HAr)， 7.44 (m, 2H， HAr)， 7.84 (m， 2H, HAr)， 7.89 (d， lHz， 1H, CH-三唑)ppm
GC-MS: m/z= 191
TOF畫ESI-MS:測(cè)量值m/z = 192.0935 [MH]+，計(jì)算值d。H,。N3F [MH]+m/z= 192.0932
比較例3 -化合物(4) - 4-「1-(2-氟-乙基)-1//-『1,2,31三唑-4-基1-苯
胺的制備
DMF(0.7 ml)中的4-乙炔基苯胺(40 mg, 0.344 mmol)在氮?dú)庀录?入到經(jīng)攪拌的五水合碌u酸銅(II) (129 mg, 0.516 mmol)和L-抗壞血酸 (182 mg, 1.032 mmol)在水(1.2ml)中形成的溶液中。在加入DMF(2.45 ml)中的化合物(2) (0.287 mmol)后，在室溫持續(xù)攪拌4小時(shí)。用氫氧化 鈉溶液(1M, 5ml)終止反應(yīng)混合物。用乙酸乙酯(3 x 5 ml)萃取產(chǎn)物， 并用水(5 ml)和鹽水(2ml)洗滌。在用硫酸鈉干燥后，減壓除去溶劑， 用快速層析(硅膠，己烷/乙酸乙酯)純化粗材料。產(chǎn)率15mg(25%)， 淺褐色晶體，m.p. 79-82。C。
!H-麗R (CDC13): 5 = 4.70(m, 1H, CH2), 4.72 (m， 1H， CH2), 4.77 (m， 1H， CH2), 4.88 (m, 1H, CH2), 6.74 (m， 2 H, HAr)， 7.63 (m, 2H, HAr)， 7.74 (d， 0.1 Hz， 1H， CH國(guó)三唑)ppm
TOF-ESI畫MS:測(cè)量值m/z = 207.1030 [MH]+,計(jì)算值d。HuN47 [MH]+m/z = 207.1040。
比較例4 -化合物(5) - 1-〖2-氟-乙基)-1//-[~1,2,31三唑-4-羧酸苯曱
酰胺
按照G. M. Coppola和R. E. Damon在Synthetic Communications 23 (1993) 2003-2010中的方案制備的丙炔酸苯曱酰胺(50 mg, 0.314mmoI)溶解在DMF (1 ml)中，并在氮?dú)庀录尤氲浇?jīng)攪拌的五水合硫酸 銅(II)(3.9mg, 0.0157 mmol)和L陽(yáng)抗壞血酸(ll mg， 0.0628 mmol)在7K (0.4 ml)中形成的溶液中。在加入DMF(3.2 ml)中的化合物(2) (0.377 mmol)后，在室溫持續(xù)攪拌48小時(shí)。反應(yīng)混合物經(jīng)碳酸氫鈉(10%， 5 ml) 稀釋，用二氯曱烷(3x5 ml)萃取粗產(chǎn)物并用鹽水(5 ml)洗滌。在用硫 酸鈉干燥后，減壓除去溶劑，從乙酸乙酯/二乙基醚中重結(jié)晶純化粗材 料。
產(chǎn)率8mg(10%)白色晶體，m.p. 165-167°C
'H-NMR (CDC13): 5 = 4.70(m, 6H， CH2), 7.34 (m, 5H， HAr), 7.46 (m, 1H， NH), 8,20 (s, 1H， CH國(guó)三唑)卯m
TOF-ESI-MS:測(cè)量值m/z = 249.1143 [MH]十，計(jì)算值C12H13N4OF [MH]+m/z = 249,1146
比較例5 -化合物(6)-N-苯曱基-3-「l-(2-氟-乙基)-l/Z-n，2,31三唑 _4-基1-丙酰胺的制備
戊-4-酸苯曱酰胺 一 除了分離iV-琥珀酰亞胺中間體以外，采用與 G. M. Coppola和R. E. Damon (參見(jiàn)實(shí)施例4)所描述相似的方法合成 該化合物。
產(chǎn)率100mg(53%)，白色針狀，m.p. 50-55°C 'H-NMR(CDCl3): 5=1.98(m， 1H，炔-CH)， 2.44 (m, 2H， CH2), 2.56 (m， 2H, CH2)， 4.46 (d， 2H, CH2N), 7.29-7.25 (m, 5H， HAr) ppm FT-IR(膜)1651， 1629 cnf1
TOF-ESI-MS:測(cè)量值m/z = 188.1073 [MH]+,計(jì)算值C12H13NO [MH]+m/z= 188.1070
N-苯曱基-3-[l-(2-氟-乙基)-lH-[l，2,3]三唑-4-基]-丙酰胺 一 曱醇 (0.5 ml)中的戊-4-酸苯曱酰胺(50 mg， 0.267 mmol), DMF (2.62 ml)中 的化合物(2) (0.320 mmol)和二異丙基胺(0.233 ml, 1.335 mmol)在氮?dú)?下加入到在曱醇(0.8 ml)中的碘化銅(I) (255 mg, 1.335 mmol)的攪拌懸 浮液中。攪拌在室溫下持續(xù)2小時(shí)。用磷酸氫二鈉(lg)在水(10ml)中 的溶液終止反應(yīng)混合物并經(jīng)硅藻土過(guò)濾。用乙酸乙酯(3x20 ml)萃取 粗產(chǎn)物，并用鹽水(20ml)洗滌。在經(jīng)硫酸鈉干燥后，減壓除去溶劑， 使用硅膠和乙酸乙酯/己烷經(jīng)柱色譜純化粗材料。
產(chǎn)率19mg(26%)，白色晶體，m.p. 127-133°C'H-NMR(CDC13): 5 = 2.66(t, 7,0 Hz, 2H， CH2), 3,09 (t， 7.0 Hz， 2H， CH2)， 4.40 (d， 5.7 Hz， 2H，苯曱基-CH2), 4.56 (m, 2H， CH2)， 4.61 (m， 2H， CH2)， 4.70 (m, 2H, CH2)， 4.80 (m， 2H, CH2)， 6.0 (s， 1H, NH)， 7.0-7.3 (m, 5H， HAr), 7.44 (s， 1H， CH國(guó)三唑)ppm
TOF-ESI-MS:測(cè)量值m/z = 277.1474 [MH]+，計(jì)算值C12H13N4OF [MH]+m/z = 277,1459
比較例6 -化合物(7) - 4-n-(2-氟-乙基Vl/Ml,2,31三唑-4-基l-苯
曱酸的制備
DMF(1.5 ml)中的4-乙炔基苯曱酸鈉(50 mg， 0.297 mmol)在氮?dú)?下加入到經(jīng)攪拌的五水合石克酸銅(II) (3.7 mg， 0.0149 mmol)和L-抗壞血 酸(10.5 mg， 0.0595 mmol)在水(0.2 ml)中形成的溶液中。在加入 DMF(0.76 ml)中的化合物(2) (0.356 mmol)后，在室溫持續(xù)攪拌12小時(shí)。 反應(yīng)混合物經(jīng)HC1(20 ml， 1M)稀釋。用乙酸乙酯(3 x 10 ml)萃取粗產(chǎn) 物并用鹽水(10ml)洗滌。在用硫酸鈉干燥后，減壓除去溶劑，從乙酸 乙酯/己烷中重結(jié)晶純化粗材料。
產(chǎn)率37mg(52%),白色晶體，m.p. 236-240°C
'H-麗R(DMS0-d6): S = 4.74(m, 1H， CH2)， 4.80 (m， 2H, CH2), 4,90 (m， 1H, CH2)， 8.70 (s， 1Hz, 1H， CH-三唑)ppm
TOF-ESI-MS : 測(cè)量值 m/z = 236.0838 [MH]+ , 計(jì)算值 CuH10N3O2F [MH]+ m/z = 236.0830
比較例7 -化合物(8〗-1-(2-氟-乙基)-1//-『1,2,31三唑-4-羧酸的制
蚤
DMF(0.5 ml)中的丙炔酸(60 jil， 0.977 mmol)在氮?dú)庀录尤氲浇?jīng)攪 拌的五水合碌u酸銅(II) (12 mg, 0.0489 mmol)和L-抗壞血酸(34 mg, 0.135 mmol)在水(0.4 ml)中形成的溶液中。在加入DMF(2.5 ml)中的化 合物(2) (1.172 mmol)后，在室溫持續(xù)攪拌四小時(shí)。反應(yīng)混合物經(jīng)HC1(20 ml, 1M)稀釋。用乙酸乙酯(3 x 20 ml)萃取粗產(chǎn)物。在用鹽水(5ml)洗 滌后經(jīng)硫酸鈉干燥，減壓除去溶劑，從乙酸乙酯/己烷中重結(jié)晶純化粗 材料。
產(chǎn)率16mg(10%)，白色晶體，m.p. 160-165。C'H-NMR (DMSO-d6): 5 = 4.74(m, 1H， CH2), 4.80 (m, 2H, CH2)， 4.90 (m， 1H， CH2), 8.71 (s, 1H， CH-三唑)ppm
TOF-ESI-MS:測(cè)量值m/z = 160.0518 [MH]+,計(jì)算值C5H6N302F [MH]+m/z= 160.0517
比較例8 -化合物(9〗-2-乙酰氨基-3-『1-(2-氟-乙基)-1//-「1,2,31三 唑_4_基1_丙酸乙基酯的制備
曱醇(l ml)中2-乙酰氨基-戊-4-酸乙基酯(200 mg， 1.09 mmol)在氮 氣下加入到銅粉(200 mg, 40目)中，隨后加入化合物(2) ( 1.09mmo1) 在DMF(3 ml)中的溶液。混合物攪拌90分鐘，隨后加熱至80。C達(dá)三小 時(shí)。通過(guò)反向快速色譜(乙腈/水)分離化合物(9)。
產(chǎn)率145mg(49%),油狀物，在4。C保存后變?yōu)榫w，m.p. 55-60
。C
iH-NMR (CDC13): 5=1.13(t, 3H, CH2Ci/》，1.82(s，3H, CH3)， 2.97 (dd， V=14.9Hz， V=8.5Hz, 1H,丙酸國(guó)CH2)， 3.07 (dd, V= 14.9 Hz, V=6,0Hz, 1H，丙酸隱CH2), 4.05 (m， 2H， OC//2CH3), 4.47 (m， 1H， CH)， 4.46 (m， 1H， CH2), 4.64 (m, 1H, CH2), 4.70 (m, 1H， CH2), 4.81 (m, 1H, CH2)， 7.89 (s， 1H，三唑國(guó)CH), 8.31 (d， 1H， NH) ppm
TOF-ESI-MS : 測(cè)量值 m/z = 273.1372 [MH]+ ， 計(jì)算值 CuH17N403F [MH]+ m/z = 273.1357
放射性化學(xué) MeCN, 15 min @ 80 。C
u
比較例9-化合物ni)-["Fll-疊氮基-2-氟-乙烷的制備 通過(guò)回旋加速器，采用富集[180] 120靶的19 MeV質(zhì)子輻射的 "0(p,n"F核反應(yīng)制備"F-氟化物。在輻射后，Kryptofix (5mg)、碳 酸鉀(l mg)和乙腈(l ml)的混合物加入"F-水(1 ml)。在80°C ，氮?dú)饬?(100 ml/min)下加熱除去溶劑。隨后，加入乙腈(0.5 ml),并在加熱和
TsO A 10氮?dú)饬飨抡羟?。該過(guò)程重復(fù)兩次。在冷卻至室溫后，加入化合物(IO)在無(wú)水乙腈(0.2)的溶液。反應(yīng)混合物在80。C攪拌30分鐘。 經(jīng)蒸鎦分離化合物(ll),衰變修正后的產(chǎn)率為40±14%(" = 7)[效率 76±8 % (" = 7)].
比較例10-化合物(12W16)-「1^1「1-(2-氟-乙基)-1//-「1,2,31三唑
R
化合物 R R.C.Y.*
1239 %.
13又H，7%
144勺<1 %
1569%
16 >99 %
，通iiHPLC,"己分離，■—步反應(yīng)
在DMF(0.1ml)中的炔試劑(0.015 mmol)溶液在氮?dú)庀录尤氲搅蛩?銅(II) (5當(dāng)量)和L-抗壞血酸(20當(dāng)量)的混合物中。加入化合物(ll)的 乙腈(0.2ml)溶液。在80。C攪拌30分鐘后，通過(guò)HPLC分析反應(yīng)混合物。
比較例ll —化合物(18) - r8Fl(S)-6-氨基-2-(2-((SV2-「2-(TSV6-氨 基-2-U4-(2-氟-乙基)-n,2,31三唑-l-羰基l-氨基卜己酰氨基)-乙酰氨 基l-3-苯基-丙酰胺基卜乙酰氨基V己酸(i)化合物19: Cys2-6; crCHfO-Lys(DL-Pra-Ac)-Cys-Arg-Glv-Asp- Cvs-Phe-Cvsl-CCX6-NH2
的制備
<formula>formula see original document page 24</formula>化合物(17) (1 mg， 1.7 iumol)溶解在磷酸鈉緩沖液(pH 6.0, 0.25 M， 0.05 ml)中。加入在乙腈(0.05 ml)中的化合物(l 1) (175 pCi， 6.5 MBq)， 隨后加入銅顆粒(400 mg， 10-40目)?；旌衔镌?0。C加熱5分鐘。HPLC 分析表明86%的放射性標(biāo)記肽(18)。
比較例12-化合物(20)的制備
<formula>formula see original document page 24</formula>(DMF)(3 mL)中，在加入溶解在DMF(4mL)中的如WO2005/003166 所述制備的
ClCH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-PEG-NH2 (126 mg)之前，混合物攪拌5分鐘。反應(yīng)混合物攪拌45分鐘。加入更多的 ClCH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-PEG-NH2 (132 mg)和NMM(44pL)，并持續(xù)攪拌45分鐘。在真空中蒸除DMF，用 10%乙腈(ACN)/水(100mL)稀釋殘留物(5 mL),用制備HPLC純化產(chǎn) 物。
純化和表征
經(jīng)稀釋的殘留物經(jīng)制備HPLC的純化(梯度60分鐘里10-40% B， 其中A = H2O/0.1%TFA,而B = ACN/0.1%TFA,流速50mL/min, 柱PhenomenexLuna5^iC18 (2) 250 x 50 mm，檢測(cè)UV214nm，產(chǎn) 物保留時(shí)間31.3min)得到170 mg純AH-112145。
所述純產(chǎn)物經(jīng)分析HPLC的分析(梯度10分鐘里10-40% B，其 中A = H2O/0.1% TFA,而B = ACN/0.1% TFA,流速0.3 mL/min, 柱Phenomenex Luna 3|u C18 (2) 50 x 2 mm, 4企測(cè)UV214nm，產(chǎn)物 保留時(shí)間6.32 min)。采用電噴霧質(zhì)譜進(jìn)一步進(jìn)行產(chǎn)物表征(MH+計(jì) 算值1395.5， MH+測(cè)量值1395.7)。 化合物20的制備
化合物(19) (0.5 mg， 0.35 ^imol)溶解在磷酸鈉緩沖液(pH 6.0， 50 mM)中，并與化合物(ll) (25 [il， 728 |_iCi/25 MBq)的溶液和銅粉(200 mg, 40目)相混合。在70。C加熱15分鐘，混合物經(jīng)放射HPLC分析。
使用半制備HPLC(柱L醒C18(2)， 100 x 10 mm，流速2.0 ml/min; 溶劑A:水(0.085%磷酸v/v)，溶劑B:水(30%乙醇v/v),梯度在 15分鐘內(nèi)由50。/。B至1000/。B分離該綴合產(chǎn)物。得到標(biāo)記肽(20)，衰 變修正的放射性產(chǎn)率為10%,放射化學(xué)純度>99%。通過(guò)與化合物(20) 的共同注射證實(shí)了該放射性產(chǎn)物峰(k， = 2.03)。
比較例13-用于制備化合物(20)的反應(yīng)參數(shù)的優(yōu)化 一疾#嚴(yán)向化合物(19)(0.5 mg, 0.35 pmol)在緩沖液(50 緩 沖液A:磷酸鈉，pH6.0, 50mM;緩沖液B:碳酸鈉，pH9.3， 50 mM) 中的溶液中加入乙腈(IOO ial)中的化合物(ll) (0.1 mCi， 3.7 MBq),隨后加入銅催化劑(催化劑1:銅顆粒10+40目，催化劑2:銅粉-40目， 催化劑3:銅粉，枝晶，3 |im)?；旌衔镌赟0。C溫育15分鐘，并經(jīng)HPLC 分析。
表2.由HPLC測(cè)定的根據(jù)pH和催化劑(400 mg)由化合物(19)形 成化合物(20)的標(biāo)記效率
緩沖液催化劑1催化劑2催化劑3
A12%44 %—*
B-33 %—*
*未發(fā)現(xiàn)肽前體的uv峰
表3.由HPLC測(cè)定的根據(jù)在pH 6.0,根據(jù)催化劑3的量由化合 物(19)形成化合物(20)的標(biāo)記效率
催化劑3的量化合物(20)的標(biāo)記效率
200 mg23 %
100 mg37 %
50 mg27 %
本文所描述并請(qǐng)求保護(hù)的發(fā)明并非受限制于本文所公開的具體 實(shí)施方式的范圍，這是因?yàn)檫@些實(shí)施方式是旨在描述本發(fā)明的幾個(gè)方 面。任何相當(dāng)?shù)膶?shí)施方式均在本發(fā)明的范圍內(nèi)。實(shí)際上，根據(jù)前文的 描述，除本文顯示和描述的這些，本發(fā)明的各種修改對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù) 人員是顯而易見(jiàn)的。這些修改也落在所附權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種標(biāo)記載體的方法，所述方法包括式(I)化合物與式(II)化合物的反應(yīng)R*-L2-N3(II)或者式(III)化合物和式(IV)化合物的反應(yīng)其中L1、L2、L3和L4各自為連接子基團(tuán)；R*是報(bào)道子部分；從而分別得到式(V)或(VI)的綴合物其中L1、L2、L3、L4和R*如上所定義；其特征在于所述反應(yīng)在狹孔銅容器中進(jìn)行。
1. 一種標(biāo)記載體的方法，所述方法包括式(I)化合物與式(II)化合物的反應(yīng)其中L1、 L2、 L3、 L4和I^如上所定義；其特征在于所述反應(yīng)在狹孔銅容器中進(jìn)行。
2. 如權(quán)利要求l所述的方法，其中11*包含放射性核素。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的方法，其中11*包含正電子發(fā)射放射性核素，優(yōu)選UC或"F。
4. 如權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述載體是肽、蛋白質(zhì)、激素、細(xì)胞、細(xì)菌、病毒以及小的類藥分子，最優(yōu)選為肽。
5. 如權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述載體是l U ~)載體(I)R*-L2 —N3 (II)或者式(III)化合物和式(IV)化合物的反應(yīng)l_3載體(川)R*——L4(IV)其中Ll、 L2、 L3和L4各自為連接子基團(tuán)；11*是報(bào)道子部分；從而分別得到式(V)或(VI)的綴合物1ST/-L1 —載體(V)R*—L2體載Arg-GIy-Asp肽或其類似物。
6.如權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述載體是包含以下片段的肽
7.如權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所迷的方法，其中所述載體是式(A)的肽(A)其中X〒是-NH2或o o其中a是l至10的整數(shù)，優(yōu)選a是l。
8. —種用于進(jìn)行如權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的方法的微流體裝置，其特征在于所述裝置包括界定了第一孔、第二孔和在二者之間流體連通的至少 一 個(gè)伸長(zhǎng)微流體通道的裝置體，其中所述微流體通道的至少一部分由所述裝置體的金屬銅部分所界定。
9. 如權(quán)利要求8所述的微流體裝置，其中界定所述至少一條微流體通道的裝置體由金屬銅制成。
10. 如權(quán)利要求8或9所述的微流體裝置，其中所述裝置體進(jìn)一步包括基體部分和蓋子部分，界定了所述第一孔、第二孔和在二者之間流體連通的至少 一 個(gè)伸長(zhǎng)微流體通道。
11. 如權(quán)利要求10所述的微流體裝置，其中，所述微流體通道包括形成在基體部分或者蓋子部分或者同時(shí)在兩個(gè)部分中疊置配準(zhǔn)的通道。
12. 如權(quán)利要求8至11中任一項(xiàng)所述的微流體裝置，其中所述微流體通道裝有如權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)限定的式(1)、 (11)、 (III)或(IV)的化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及用諸如放射性核素等報(bào)道子部分標(biāo)記諸如肽等生物活性載體的方法和裝置。所述方法包括在狹孔銅容器中式(I)化合物與式(II)化合物的反應(yīng)，或者式(III)化合物和式(IV)化合物的反應(yīng)，其中L1、L2、L3和L4各自為連接子基團(tuán)；R^*是報(bào)道子部分。本發(fā)明也要求保護(hù)進(jìn)行本發(fā)明的方法的微流體裝置。
文檔編號(hào)A61K51/02GK101563357SQ200780031258
公開日2009年10月21日 申請(qǐng)日期2007年6月20日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月21日
發(fā)明者C·J·斯蒂爾, E·阿斯塔 申請(qǐng)人:哈默史密斯網(wǎng)上成像有限公司