專利名稱：含有尿酸氧化酶的藥用制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有尿酸氧化酶的藥用制劑，尤其涉及含有尿酸氧化酶的液體或凍干的組合物藥用制劑。
背景技術(shù)：
尿酸氧化酶(尿酸氧化還原酶，EC 1.7.3.3，Urate Oxidase，Uricase)是將尿酸氧化為尿囊素的酶，在自然界普遍存在，是最古老的一種酶。大多數(shù)哺乳動(dòng)物體內(nèi)，該酶參與嘌呤代謝，氧化尿酸。尿酸氧化酶由分子量為34,500Da的四個(gè)相同亞基組成，主要位于肝臟，和過氧化物酶體的功能有關(guān)。人類和一些長靈類動(dòng)物體內(nèi)缺乏有活性的尿酸氧化酶，因此尿酸是人類和這些動(dòng)物嘌呤代謝的最終產(chǎn)物。尿酸氧化酶氧化尿酸為溶解度更高的尿囊素，而且作用迅速。1943年，Oppenheimer首次通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)注射尿酸氧化酶可降低血尿酸水平。1957年，動(dòng)物來源的尿酸氧化酶應(yīng)用于臨床治療就獲得了一定的成功。1957年，Laboureur和Langlois從一株Aspergillus flavus分離到了高純度的尿酸氧化酶，在動(dòng)物體內(nèi)活性專一，抗原性不強(qiáng)，毒性可以忽略，并且可以大量生產(chǎn)。但要使尿酸氧化酶作用于人體或動(dòng)物，尿酸氧化酶必須配制成藥物制劑的形式供臨床使用。而且這種制劑必須要保證尿酸氧化酶在長期的保存過程中物理化學(xué)性質(zhì)的穩(wěn)定和生物學(xué)活性的穩(wěn)定。
中國專利公告號(hào)CN1090972C，公告日是2002年9月18日，發(fā)明名稱為‘含有尿酸氧化酶的穩(wěn)定液體組合物及用于制備該液體組合物的凍干組合物’中公開了含有尿酸氧化酶的藥用制劑的研制方法。其不足之處是產(chǎn)品價(jià)格昂貴。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有含有尿酸氧化酶的藥用制劑價(jià)格昂貴的缺陷，提出了一種可降低產(chǎn)品成本且不同于現(xiàn)有技術(shù)的方法，研制開發(fā)了一種含有尿酸氧化酶的藥用制劑。
本發(fā)明的目的在于提供一種含有尿酸氧化酶的藥用制劑，本發(fā)明的組合物包括活性成分尿酸氧化酶、蔗糖、甘氨酸、表面活性劑和緩沖劑。本發(fā)明中所述的活性成分尿酸氧化酶為天然提取的或基因重組的，尿酸氧化酶氨基酸序列來源于細(xì)菌、真菌、酵母、植物、動(dòng)物的尿酸氧化酶；該組合物是等滲的。本發(fā)明所述藥用制劑的組合物溶解后的pH值為6-9。
本發(fā)明所述藥用制劑的組合物，按重量份數(shù)由以下組分組成尿酸氧化酶0.1-------10蔗糖 1----------50甘氨酸1---------100表面活性劑0.1-------10磷酸鹽緩沖劑 0.1-------17.9本發(fā)明所述的藥用制劑，是一種穩(wěn)定的液體或凍干組合物。組合物的組分中，表面活性劑選用吐溫-80或吐溫-20；磷酸鹽緩沖劑選用磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉，用于調(diào)整pH值。
本發(fā)明所述藥用制劑的組合物，按重量份數(shù)由以下組分組成尿酸氧化酶 0.5------2.0蔗糖 1--------10甘氨酸 5--------20吐溫-80 0.05------1磷酸氫二鈉十二水合物13.6
磷酸二氫鈉二水合物 0.33組合物按重量份數(shù)比的最佳組成是尿酸氧化酶1.5，蔗糖5，甘氨酸25，吐溫-80為1，磷酸氫二鈉十二水合物13.6，磷酸二氫鈉二水合物0.33。
本發(fā)明通過將各組分溶于注射用水或?qū)龈晌锶苡谧⑸溆盟@得藥物溶液，含尿酸氧化酶的藥物溶液通過凍干獲得穩(wěn)定的凍干制劑。該組合物是無菌的，可以通過皮下、靜脈或肌肉注射進(jìn)入人體或動(dòng)物體內(nèi)發(fā)揮作用。
由于采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明提供了一種可降低產(chǎn)品成本且不同于現(xiàn)有技術(shù)的方法，研制開發(fā)了一種含有尿酸氧化酶的藥用制劑，不僅可以達(dá)到臨床使用的要求，而且可以使廣大使用該藥劑的患者從中受益、減少醫(yī)療費(fèi)用的開支。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。但它們不是對(duì)本發(fā)明的限定。
實(shí)施例1通過將以下組分按下述重量份數(shù)溶解于注射用水獲得含有尿酸氧化酶溶液。PH值為8。
尿酸氧化酶 1.5蔗糖 5甘氨酸 25吐溫-801.0磷酸氫二鈉十二水合物 13.6磷酸二氫鈉二水合物 0.33注射用水 1000實(shí)施例2通過將以下組分按下述重量份數(shù)的含有尿酸氧化酶的凍干制劑用注射用水溶解后使用。
尿酸氧化酶 1.5蔗糖 5甘氨酸 25吐溫-801磷酸氫二鈉十二水合物 13.6磷酸二氫鈉二水合物 0.33實(shí)施例3通過將以下組分按下述重量份數(shù)溶解于注射用水獲得含有尿酸氧化酶溶液。PH值為6。
尿酸氧化酶 0.2蔗糖 10甘氨酸 15吐溫-801磷酸氫二鈉十二水合物 13.6磷酸二氫鈉二水合物 0.33注射用水 1000實(shí)施例4通過將以下組分按下述重量份數(shù)的含有尿酸氧化酶的凍干制劑用注射用水溶解后使用。
尿酸氧化酶0.2蔗糖 10甘氨酸15吐溫-80 1磷酸氫二鈉十二水合物 13.6
磷酸二氫鈉二水合物0.33實(shí)施例5通過將以下組分按下述重量份數(shù)溶解于注射用水獲得含有尿酸氧化酶溶液。PH值為9。
尿酸氧化酶 8蔗糖 15甘氨酸 50吐溫-801磷酸氫二鈉十二水合物 13.6磷酸二氫鈉二水合物 0.33注射用水 1000實(shí)施例6通過將以下組分按下述重量份數(shù)的含有尿酸氧化酶的凍干制劑用注射用水溶解后使用。
尿酸氧化酶8蔗糖 15甘氨酸50吐溫-80 1磷酸氫二鈉十二水合物 13.6磷酸二氫鈉二水合物0.33實(shí)施例7上述組合物的穩(wěn)定性考察，將尿酸氧化酶溶液和凍干制劑分別在不同的溫度和時(shí)間保存，考察其外觀、pH值、酶活性，結(jié)果總結(jié)于下表。

凍存的樣品自然化凍后進(jìn)行分析檢測，凍干制劑用注射用水溶解后檢測，酶活性的單位為EAU，即酶活性單位。
尿酸氧化酶活性分析方法如下用文獻(xiàn)報(bào)道的方法(Legoux R.et al.，J.Biol.Chem.，1992，267，(12)，8565-8570)分析酶活性，3ml緩沖液體系(TEA buffer，7.5g三乙醇胺；0.38g EDTA)中含尿酸0.18μmol，pH 8.9，30℃保溫，檢測波長292nm，每分鐘將1μmol尿酸氧化為尿囊酸所需的酶量為一個(gè)酶活性單位。
權(quán)利要求
1.一種含有尿酸氧化酶的藥用制劑，其特征在于該制劑包括活性成分尿酸氧化酶、蔗糖、甘氨酸、表面活性劑和緩沖劑，該組合物按重量份數(shù)由以下組分組成尿酸氧化酶 0.1-------10蔗糖1----------50甘氨酸 1---------100表面活性劑 0.1-------10磷酸鹽緩沖劑0.1-------17.9
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥用制劑，表面活性劑是吐溫-80或吐溫-20。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥用制劑，磷酸鹽緩沖劑是磷酸氫二鈉十二水合物和磷酸二氫鈉二水合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥用制劑，該組合物是等滲的。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥用制劑，其中所述的活性成分尿酸氧化酶為天然提取的或基因重組的，尿酸氧化酶氨基酸序列來源于細(xì)菌、真菌、酵母、植物、動(dòng)物的尿酸氧化酶。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥用制劑，是一種液體組合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥用制劑，是一種凍干組合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的藥用制劑，該組合物按重量份數(shù)由以下組分組成尿酸氧化酶 0.5------2.0蔗糖 1---------10甘氨酸 5--------20吐溫-800.05-------1磷酸氫二鈉十二水合物 13.6磷酸二氫鈉二水合物 0.33
9.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的藥用制劑，該組合物按重量份數(shù)由以下組分組成尿酸氧化酶 1.5蔗糖 5甘氨酸 25吐溫-801.0磷酸氫二鈉十二水合物 13.6磷酸二氫鈉二水合物 0.3全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有尿酸氧化酶的藥用制劑，尤其涉及含有尿酸氧化酶的液體或凍干的組合物藥用制劑。本發(fā)明的組合物包括活性成分尿酸氧化酶、蔗糖、甘氨酸、表面活性劑和緩沖劑；該組合物是無菌的，可以通過皮下、靜脈或肌肉注射進(jìn)入人體或動(dòng)物體內(nèi)發(fā)揮作用。
文檔編號(hào)A61K9/19GK1864744SQ20051005035
公開日2006年11月22日 申請(qǐng)日期2005年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月18日
發(fā)明者劉國安, 劉沐榮, 康經(jīng)武 申請(qǐng)人:杭州北斗生物技術(shù)有限公司