專利名稱：一種苦參素注射液的制備方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種苦參素注射液的制備方法。本方法為將苦參素經(jīng)水沉、冷藏、超濾技術(shù)處理后，得到苦參素超濾液，在避光、通入氮氣配制、灌裝，經(jīng)過滅菌、燈檢、包裝后，制成苦參素小容量注射劑成品，屬于化學藥品制劑領域。該產(chǎn)品可靜脈滴注，具有抗乙型肝炎病毒作用，能降低動物的血清轉(zhuǎn)氨酶和肝臟中羥脯氨酸含量，減輕肝臟的病變程度和降低感染乙型肝炎病毒(HBV)鴨的血清DHBV-DNA水平；能抑制膠原活動度和防治肝纖維化；可阻斷肝細胞異常凋亡；可增強NK細胞活性，改善和糾正免疫系統(tǒng)紊亂狀態(tài)，使免疫系統(tǒng)識別和清除病毒能力增強；具有抗過敏、抗炎升高白細胞作用。主要用于慢性乙型肝炎的治療及腫瘤放療、化療引起的白細胞低下及其他原因引起的白細胞減少癥。
背景技術(shù)：
苦豆子為豆科槐屬植物。別名苦甘草、苦參草、苦豆根及西豆根，全株味極苦、性寒，具有清熱解毒、抗菌消炎作用?？鄥⑺厥菑闹兴幙喽棺印⒖鄥⒅刑崛〉纳飰A，主要成分是氧化苦參堿和極少量的氧化槐果堿，其有效成分為氧化苦參堿。具有抗乙型肝炎病毒作用，能降低動物的血清轉(zhuǎn)氨酶和肝臟中羥脯氨酸含量，減輕肝臟的病變程度和降低感染乙型肝炎病毒(HBV)鴨的血清DHBV-DNA水平；能抑制膠原活動度和防治肝纖維化；可阻斷肝細胞異常凋亡；可增強NK細胞活性，改善和糾正免疫系統(tǒng)紊亂狀態(tài)，使免疫系統(tǒng)識別和清除病毒能力增強；具有抗過敏、抗炎升高白細胞作用。
目前，國內(nèi)市場上的苦參素注射液有多家企業(yè)生產(chǎn)，均采用傳統(tǒng)工藝配制而成，其存在的產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定性差，藥液刺激性強，澄明度不合格率高，PH值下降，含量下降，顏色加深，療效不穩(wěn)定等問題始終無法解決。其主要原因在于苦參素在制備過程中部分雜質(zhì)如蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、槐果堿、槐胺堿等未完全去除，再加上苦參素本身的不穩(wěn)定性造成。我公司苦參素注射液工藝的突破從根本上解決了上述問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種苦參素注射液的制備方法。
本發(fā)明所述的制備方法包括如下步驟將苦參素、依地酸二鈉分別經(jīng)水沉、冷藏、超濾技術(shù)處理后，得超濾液，然后將兩種超濾液在避光、通氮氣條件下配制、灌裝，經(jīng)滅菌燈檢后包裝，即得苦參素注射液成品。
本發(fā)明所述的制備方法具體過程如下A)取配制量40～70％80～90℃新鮮注射用水，通入氮氣后，避光加入處方中的苦參素，充分攪拌溶解，放置至室溫，遮光密閉，0℃～10℃冷藏12～48小時，用截留分子量為1～3萬的超濾膜超濾，得超濾液I。
B)取配制量10％～30％80℃～90℃的新鮮注射用水，加入處方中的依地酸二鈉溶解，放置至室溫，0℃～10℃冷藏12～48小時，用截留分子量為1萬～3萬的超濾膜超濾，得超濾液II。
C)將上述超濾液I、II混合均勻，定容，調(diào)PH值4.5～6.5，中間產(chǎn)品檢驗合格后，將藥液經(jīng)終端除菌過濾后，避光、充氮條件下灌裝，滅菌，燈檢，包裝，即得苦參素注射液成品。
更為優(yōu)選的制備方法包括如下步驟A)取配制量50％90℃新鮮注射用水，通入氮氣后，避光加入處方中的苦參素，充分攪拌溶解，放置至室溫，遮光密閉，4℃冷藏24小時，用截留分子量為1萬的超濾膜超濾，得超濾液I。
B)取配制量20％90℃的新鮮注射用水，加入處方中的依地酸二鈉溶解，放置至室溫，4℃冷藏24小時，用截留分子量為1萬的超濾膜超濾，得超濾液II。
C)將上述超濾液I、II混合均勻，定容，調(diào)PH值5.0～6.0，中間產(chǎn)品檢驗合格后，將藥液經(jīng)終端0.22μm濾膜除菌過濾后，避光、充氮氣條件下灌裝于安瓿中，滅菌，燈檢，包裝，即得苦參素注射液成品。
上述制備方法中，為使產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，所用注射用水的溫度為90℃，冷藏溫度為4℃，冷藏時間為24小時，PH值嚴格控制在5.0～6.0。
上述制備方法中，采用截流分子量為1萬的超濾膜超濾，是所配制藥液中無效成分的控制步驟，所用超濾膜為市售產(chǎn)品。其生產(chǎn)商應為行業(yè)認可的生產(chǎn)單位。
上述制備方法中，避光、通氮氣條件是藥液配制、灌裝過程的關鍵步驟。
上述制備方法中，終端除菌過濾所使用的濾膜孔徑為0.22μm。為使產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，濾膜應盡可能由固定生產(chǎn)商供應。
本發(fā)明所述之苦參素注射液臨床應用時靜脈滴注，一日一次，一次0.6g，加100ml氯化鈉注射液或5％葡萄糖注射液中靜脈滴注。滴注速度以每分鐘約60滴為宜。2個月為一個療程，或遵醫(yī)囑。肌內(nèi)注射，一日一次，一次0.4g～0.6g。
本發(fā)明所述之苦參素注射液，具有抗乙型肝炎病毒作用，能降低動物的血清轉(zhuǎn)氨酶和肝臟中羥脯氨酸含量，減輕肝臟的病變程度和降低感染乙型肝炎病毒(HBV)鴨的血清DHBV-DNA水平；能抑制膠原活動度和防治肝纖維化；可阻斷肝細胞異常凋亡；可增強NK細胞活性，改善和糾正免疫系統(tǒng)紊亂狀態(tài)，使免疫系統(tǒng)識別和清除病毒能力增強；具有抗過敏、抗炎升高白細胞作用。主要用于慢性乙型肝炎的治療及腫瘤放療、化療引起的白細胞低下及其他原因引起的白細胞減少癥。
本發(fā)明采用水沉、冷藏、超濾技術(shù)處理，并采取避光、充氮等保護措施，確保了無效成分被完全去除，避免了苦參素的降解，減少了制劑中的有關物質(zhì)，使制成的制劑穩(wěn)定性增加、刺激性減小、澄明度改善，療效更加穩(wěn)定。
具體實施例方式
下面用實施例進一步描述本發(fā)明，但所述實施例僅用于說明本發(fā)明而不是限制本發(fā)明。
實施例1A)取配制量70％80℃新鮮注射用水，通入氮氣后，避光加入處方中的苦參素，充分攪拌溶解，放置至室溫，遮光密閉，10℃冷藏48小時，用截留分子量為2萬的超濾膜超濾，得超濾液I。
B)取配制量10％80℃的新鮮注射用水，加入處方中的依地酸二鈉溶解，放置至室溫，10℃冷藏48小時，用截留分子量為2萬的超濾膜超濾，得超濾液II。
C)將上述超濾液I、II混合均勻，定容，調(diào)PH值6.5，中間產(chǎn)品檢驗合格后，將藥液經(jīng)終端0.22μm濾膜除菌過濾后，避光、充氮氣條件下灌裝于安瓿中，滅菌，燈檢，包裝，即得苦參素注射液成品。
實施例2A)取配制量40％90℃新鮮注射用水，通入氮氣后，避光加入處方中的苦參素，充分攪拌溶解，放置至室溫，遮光密閉，2℃冷藏12小時，用截留分子量為3萬的超濾膜超濾，得超濾液I。
B)取配制量30％90℃的新鮮注射用水，加入處方中的依地酸二鈉溶解，放置至室溫，2℃冷藏12小時，用截留分子量為3萬的超濾膜超濾，得超濾液II。
C)將上述超濾液I、II混合均勻，定容，調(diào)PH值4.5，中間產(chǎn)品檢驗合格后，將藥液經(jīng)終端0.22μm濾膜除菌過濾后，避光、充氮氣條件下灌裝于安瓿中，滅菌，燈檢，包裝，即得苦參素注射液成品。
實施例3A)取配制量60％85℃新鮮注射用水，通入氮氣后，避光加入處方中的苦參素，充分攪拌溶解，放置至室溫，遮光密閉，8℃冷藏36小時，用截留分子量為1萬的超濾膜超濾，得超濾液I。
B)取配制量15％85℃的新鮮注射用水，加入處方中的依地酸二鈉溶解，放置至室溫，8℃冷藏36小時，用截留分子量為1萬的超濾膜超濾，得超濾液II。
C)將上述超濾液I、II混合均勻，定容，調(diào)PH值5.5，中間產(chǎn)品檢驗合格后，將藥液經(jīng)終端0.22μm濾膜除菌過濾后，避光、充氮氣條件下灌裝于安瓿中，滅菌，燈檢，包裝，即得苦參素注射液成品。
實施例4A)取配制量55％80℃新鮮注射用水，通入氮氣后，避光加入處方中的苦參素，充分攪拌溶解，放置至室溫，遮光密閉，6℃冷藏24小時，用截留分子量為3萬的超濾膜超濾，得超濾液I。
B)取配制量25％80℃的新鮮注射用水，加入處方中的依地酸二鈉溶解，放置至室溫，6℃冷藏24小時，用截留分子量為1萬的超濾膜超濾，得超濾液II。
C)將上述超濾液I、II混合均勻，定容，調(diào)PH值5.0，中間產(chǎn)品檢驗合格后，將藥液經(jīng)終端0.22μm濾膜除菌過濾后，避光、充氮氣條件下灌裝于安瓿中，滅菌，燈檢，包裝，即得苦參素注射液成品。
實施例5A)取配制量65％85℃新鮮注射用水，通入氮氣后，避光加入處方中的苦參素，充分攪拌溶解，放置至室溫，遮光密閉，4℃冷藏12小時，用截留分子量為2萬的超濾膜超濾，得超濾液I。
B)取配制量20％85℃的新鮮注射用水，加入處方中的依地酸二鈉溶解，放置至室溫，4℃冷藏12小時，用截留分子量為2萬的超濾膜超濾，得超濾液II。
C)將上述超濾液I、II混合均勻，定容，調(diào)PH值6.0，中間產(chǎn)品檢驗合格后，將藥液經(jīng)終端0.22μm濾膜除菌過濾后，避光、充氮氣條件下灌裝于安瓿中，滅菌，燈檢，包裝，即得苦參素注射液成品。
實驗例1本實驗例為本發(fā)明所制備的苦參素注射液的性狀、PH值及注射劑項下有關的各項規(guī)定項目的檢測。
性狀本品為幾乎無色或微黃色的澄明液體，符合規(guī)定。
PH值取本品，依法測定(中國藥典2000年版二部附錄VIH)，PH值為4.5～6.5，符合規(guī)定。
其他符合注射劑項下有關的各項規(guī)定(中國藥典2000年版二部附錄IB)。
實驗例2本實驗例為本發(fā)明所制備的苦參素注射液的定性測定。
(1)取本品1ml，加碘化汞鉀試液1滴，即生成白色沉淀，符合規(guī)定。
(2)取本品1ml，加碘化鉍鉀試液1滴，即生成橙紅色沉淀，符合規(guī)定。
(3)取本品適量(約相當于苦參素50mg)，加無水乙醇至25ml，搖勻，作為供試品溶液；另取氧化苦參堿對照品加無水乙醇制成每1ml中約含2mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法(中國藥典2000年版二部附錄VB)試驗，吸取上述兩種溶液各20μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨溶液(5∶0.6∶0.3)為展開劑；展開后，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液顯色。供試品溶液所顯主斑點的顏色和位置與對照品溶液主斑點相同，符合規(guī)定。
以上的實驗說明本發(fā)明所制備的苦參素注射液中含有確定的組分。
實驗例3本實驗例為本發(fā)明所制備的苦參素注射液中有關物質(zhì)檢查。
有關物質(zhì)取本品適量，用無水乙醇制成每1ml中含苦參素2.0mg的溶液，作為供試品溶液；另取氧化槐果堿對照品，用無水乙醇制成每1中含0.04mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法(中國藥典2000年版二部附錄VB)試驗，吸取上述兩種溶液各20μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨溶液(50∶6∶3)為展開劑；展開后，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液顯色，除主斑點外供試品溶液如顯與氧化槐果堿對照品相應位置的斑點，其顏色不得比對照品更深，并不得有其他雜質(zhì)斑點。
本發(fā)明所制備的苦參素注射液經(jīng)過三批的測定，有關物質(zhì)項目符合規(guī)定。
實驗例4本實驗例為本發(fā)明所制備的苦參素注射液的含量測定。
含量測定陰離子交換樹脂的制備取717苯乙烯型強堿性陰離子交換樹脂約30g，置燒杯中，用水傾瀉洗滌兩次以除去混入樹脂中的雜質(zhì)，瀝干，加入60％～80％的乙醇中浸泡一晝夜，次日用供交換的水反復淘洗至無乙醇味為止，瀝干，用4％的氫氧化鈉溶液浸泡2小時，傾去堿液，繼以水分次洗滌至對酚酞指示液呈中性，然后將樹脂連水一起移入底部預先墊有玻璃纖維的30ml離子交換器中，上部蓋玻璃纖維少許，以防止加入液體時有樹脂顆粒上浮，柱內(nèi)不得有氣泡，即可供試驗用。
測定法精密量取本品3ml(相當于苦參素0.3g)，移入上述交換器中，以每分鐘2ml的流速洗脫，再加水仍維持原流速洗脫至洗脫液達80ml時，加碘化鈉使其濃度為4mol/L，加茜素磺酸鈉指示液，用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定，至溶液顯黃色(此時用另一接受器接收洗脫液20ml，試驗是否有余堿洗出，若仍有消耗則將兩次消耗毫升數(shù)合并計算)，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。每1ml的硫酸滴定液(0.05mol/L)相當于28.24mg的C15H24N2O2·H2O。
標準規(guī)定含氧化苦參堿(C15H24N2O2·H2O)，應為標示量的90.0％～110.0％。
通過三批的含量測定，結(jié)果見下表

實驗例5本實驗例為本發(fā)明所制備的苦參素注射液的安全性檢查。
無菌按中國藥典2000年版二部附錄XIH檢查，符合規(guī)定。
熱原按中國藥典2000年版二部附錄XID檢查，符合規(guī)定。
長期毒性測定連續(xù)給藥三個月觀察血尿檢查、病理檢查均未見異常。
通過以上實驗說明本發(fā)明所制備的苦參素注射液的安全性符合注射劑要求，無任何毒性作用，應用人體安全。
比較例1本比較例說明本發(fā)明所制備的苦參素注射液的澄明度優(yōu)于用常規(guī)制備方法生產(chǎn)的。
澄明度判斷標準(1)未發(fā)現(xiàn)有異物或僅帶微量白點者，作合格論。
(2)每瓶含短于0.5cm的毛和0.1～0.2mm的白點、白塊或色點總數(shù)未超過5個者，作合格論。
(3)不合格率未超過5％，該批產(chǎn)品作合格論。
有關概念白塊系指用規(guī)定的檢查方法，能看到有明顯的平面或棱角的白色物質(zhì)。
白點不能辨清平面或棱角的按白點計。
微量白點在規(guī)定的時間內(nèi)僅見到3個或3個以下白點者。
異物包括玻璃屑、纖維、色點、色塊及其它外來異物。
檢查方法分別取采用本發(fā)明所制備的苦參素注射液和采用常規(guī)工藝制備的產(chǎn)品各200支，按《澄明度檢查細則和判斷標準》和以上標準檢查，結(jié)果見下表。

通過以上實驗說明本發(fā)明所制備的苦參素注射液的澄明度明顯優(yōu)于用常規(guī)制備方法生產(chǎn)的。
比較例2
本比較例說明本發(fā)明所制備的苦參素注射液在臨床應用時刺激性較小。

比較例3本比較例說明采用本發(fā)明所制備的苦參素注射液與采用常規(guī)制備方法生產(chǎn)的苦參素注射液通過六個月加速實驗的穩(wěn)性比較，結(jié)果見下表。
標準規(guī)定含量本品含氧化苦參堿(C15H24N2O2·H2O)，應為標示量的90.0％～110.0％。
PH值應為4.5～6.5澄明度合格率應不低于95％顏色應為幾乎無色或微黃色的澄明液體


通過以上實驗可以看出，發(fā)明組在經(jīng)過加速實驗六個月后，其含量、PH值、澄明度、顏色并未發(fā)生明顯變化，而常規(guī)組的含量、PH值均有明顯降低，澄明度、顏色均不符合規(guī)定，表明本發(fā)明所制備的苦參素注射液明顯優(yōu)于采用常規(guī)制備方法生產(chǎn)的。
權(quán)利要求
1.一種苦參素注射液的制備方法，所述的制備方法具體過程如下A)取新鮮注射用水，通入氮氣后，避光加入處方中的苦參素溶解，密閉，冷藏，超濾，得超濾液I；B)取新鮮注射用水，加入處方中的依地酸二鈉溶解，冷藏，超濾，得超濾液II；C)將上述超濾液I、II混合均勻，定容，調(diào)PH值，中間產(chǎn)品檢驗合格后，將藥液經(jīng)終端過濾后，避光條件下充氮灌裝，滅菌，燈檢，包裝，即得苦參素注射液成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求書1所述的制備方法，其特征在于包括如下步驟A)取配制量40～70％80～90℃新鮮注射用水，通入氮氣后，避光加入處方中的苦參素，充分攪拌溶解，放置至室溫，遮光密閉，0℃～10℃冷藏12～48小時，用截留分子量為1～3萬的超濾膜超濾，得超濾液I；B)取配制量10％～30％80℃～90℃的新鮮注射用水，加入處方中的依地酸二鈉溶解，放置至室溫，0℃～10℃冷藏12～48小時，用截留分子量為1萬～3萬的超濾膜超濾，得超濾液II；C)將上述超濾液I、II混合均勻，定容，調(diào)PH值4.5～6.5，中間產(chǎn)品檢驗合格后，將藥液經(jīng)終端除菌過濾后，避光、充氮條件下灌裝，滅菌，燈檢，包裝，即得苦參素注射液成品。
3.根據(jù)權(quán)利要求書1所述的制備方法，其特征在于包括如下步驟A)取配制量50％90℃新鮮注射用水，通入氮氣后，避光加入處方中的苦參素，充分攪拌溶解，放置至室溫，遮光密閉，4℃冷藏24小時，用截留分子量為1萬的超濾膜超濾，得超濾液I；B)取配制量20％90℃的新鮮注射用水，加入處方中的依地酸二鈉溶解，放置至室溫，4℃冷藏24小時，用截留分子量為1萬的超濾膜超濾，得超濾液II；C)將上述超濾液I、II混合均勻，定容，調(diào)PH值5.0～6.0，中間產(chǎn)品檢驗合格后，將藥液經(jīng)終端0.22μm濾膜除菌過濾后，避光、充氮氣條件下灌裝于安瓿中，滅菌，燈檢，包裝，即得苦參素注射液成品。
4.根據(jù)權(quán)利要求書1、2或3所述的制備方法，其特征在于配制產(chǎn)品所用注射用水的溫度為80℃～90℃。
5.根據(jù)權(quán)利要求書1、2或3所述的制備方法，其特征在于冷藏溫度為0℃～10℃，冷藏時間為12～48小時，冷藏條件為遮光。
6.根據(jù)權(quán)利要求書1、2或3所述的制備方法，其特征在于超濾所使用的超濾膜為截留分子量為1萬～3萬的超濾膜。
7.根據(jù)權(quán)利要求書1、2或3所述的制備方法，其特征在于配制、灌裝過程中的條件為通氮氣、避光。
8.根據(jù)權(quán)利要求書1、2或3所述的制備方法，其特征在于所用PH值調(diào)節(jié)劑為10％氫氧化鈉溶液或10％鹽酸溶液，PH值控制在5.0～6.0。
9.根據(jù)權(quán)利要求書1、2或3所述的制備方法，其特征在于終端除菌過濾所使用的濾膜孔徑為0.22μm。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種苦參素注射液的制備方法。本方法為將苦參素經(jīng)水沉、冷藏、超濾技術(shù)處理后，得到苦參素超濾液，在避光、通入氮氣條件下配制，灌裝，經(jīng)過滅菌、燈檢、包裝后，制成苦參素小容量注射劑成品。本工藝過程中苦參素經(jīng)過水沉、冷藏、超濾技術(shù)處理，并有避光、充氮保護，避免了苦參素的降解，確保了無效成分被完全去除，減少了制劑中的有關物質(zhì)，使制成的制劑穩(wěn)定性增加、刺激性減小、澄明度改善，療效穩(wěn)定。經(jīng)臨床實驗證明，可靜脈滴注，主要用于慢性乙型肝炎的治療及腫瘤放療、化療引起的白細胞低下及其他原因引起的白細胞減少癥。
文檔編號A61P1/16GK1830444SQ20051005148
公開日2006年9月13日 申請日期2005年3月8日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月8日
發(fā)明者郭智華 申請人:巴里莫爾制藥(通化)有限公司