專利名稱：人胚胎皮膚復(fù)合類脂的提取及在化妝品上的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種從人胚胎皮膚細(xì)胞中提取的復(fù)合類脂——皮膚自然潤(rùn)澤因子和皮膚自然營(yíng)養(yǎng)因子應(yīng)用在化妝品上的一種營(yíng)養(yǎng)添加劑，以此制備成美容霜。
化妝品領(lǐng)域目前采用的添加劑一般采用蛋白質(zhì)、肽、氨基酸等類型，對(duì)表皮細(xì)胞起營(yíng)養(yǎng)作用，由于表皮細(xì)胞暴露在外，這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)往往較難保持皮膚穩(wěn)定的水合作用，保水、保濕性能相對(duì)有限。
本發(fā)明的目的在于避免上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處，提供一種與人同源同胚層的人胚胎皮膚細(xì)胞中提取的復(fù)合類脂(二類主要成分分別定名為皮膚自然潤(rùn)澤因子naturalmoisturizingfactors，NMF和皮膚自然營(yíng)養(yǎng)因子naturaltrophicfactors，NTF)作為添加劑應(yīng)用于化妝品中。
本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下措施來(lái)達(dá)到本發(fā)明的化妝品營(yíng)養(yǎng)添加劑NMF和NTF通過(guò)生物化學(xué)技術(shù)提取，其具體方法如下1、取人胚胎皮膚的表皮層、真皮層和皮下組織，破碎細(xì)胞，制成細(xì)胞勻漿。
2、用2倍體積的無(wú)水乙醇攪勻，在40℃-50℃條件下水浴攪拌4-5小時(shí)，趁熱過(guò)濾，濾渣再用等體積的無(wú)水乙醇攪勻，在40℃-50℃條件下水浴攪拌1-2小時(shí)，趁熱過(guò)濾，合并二次濾液作NTF提取，濾渣作NMF提取。
3、將第2步所得濾液0℃-4℃靜置48-60小時(shí)，真空濃縮，加等量丙酮沉淀，真空干燥沉淀物得NTF。
4、將第2步中的濾渣加2倍體積的無(wú)水乙醚，在58℃-62℃條件下水浴攪拌1-2小時(shí)，趁熱過(guò)濾，濾渣再用等體積的無(wú)水乙醚攪勻，在58℃-62℃條件下水浴攪拌1-2小時(shí)，趁熱過(guò)濾，合并二次濾液，-18℃靜置48-60小時(shí)，0℃～4℃過(guò)濾，真空濃縮干燥沉淀物得NMF。
5、第4步所剩濾渣還可綜合利用，用5%Nacl和1%NaHCO3清洗，再溶于10倍量的pH2.5蒸餾水中，加入10mg%胃蛋白酶和5mg%金霉素，20℃以下攪拌5天，所得粘稠溶解物用紗布過(guò)濾，用NaOH調(diào)濾液pH為10.0，4℃下放置4小時(shí)使胃蛋白酶失活，再用HCl調(diào)pH至7.5，離心收集沉淀物，冷凍干燥后加入至NTF中，可增強(qiáng)NTF的營(yíng)養(yǎng)作用。
本發(fā)明下面將結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步敘述取5千克人胚胎皮膚(4～6月胎齡)，手術(shù)剪破碎組織細(xì)胞，組織粉碎機(jī)破碎細(xì)胞，制成細(xì)胞勻漿。加入10升無(wú)水乙醇(分析純)攪勻，45℃恒溫水浴中連續(xù)攪拌4小時(shí)，趁熱用濾紙過(guò)濾，濾渣再用5升無(wú)水乙醇攪勻，45℃攪拌2小時(shí)，趁熱過(guò)濾，合并2次濾液作NTF提取，濾渣作NMF提取。
上述濾液4℃靜置48小時(shí)，取沉淀部分，上清部分用等體積丙酮沉淀，丙酮邊加邊攪拌，4℃靜置48小時(shí)，過(guò)濾后，沉淀加入上述沉淀中一起真空干燥為NTF。
將上述作NMF提取的濾渣加入8升無(wú)水乙醚(分析純)攪勻，在60℃恒溫水浴中連續(xù)攪拌1小時(shí)，保持微沸狀態(tài)，趁熱過(guò)濾，濾渣用4升無(wú)水乙醚攪勻，60℃恒溫水浴中連續(xù)攪拌1小時(shí)，趁熱過(guò)濾，合并二次濾液，冷后在-18℃靜置48小時(shí)，4℃冷藏柜中用濾紙過(guò)濾，或用真空濃縮，沉淀用真空干燥得NMF。
10g甘油在90℃預(yù)處理10分鐘，在70～80℃加入NTF或NMF8mg，加入按基礎(chǔ)化妝品配制的膏體中?；A(chǔ)化妝品配制膏體的方法較多，不同劑型有不同的配法。例如“護(hù)膚神”營(yíng)養(yǎng)霜底膏可用白凡士林5g，羊毛脂2g，硬脂酸3g，十六醇5g，單硬脂酸甘油酯4g，十二烷基硫酸鈉3g，再加入適量香精和防腐劑。這樣配制成的膏體約可制備成200g化妝品，則每100g化妝品中含4mgNMF或NTF。也可加在洗面奶膏體中，按每100g洗面奶基質(zhì)含4mgNMF或NTF配制。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下優(yōu)點(diǎn)用NTF或NMF制備的化妝品，由于采用與人皮膚同源同胚層組份，親合作用強(qiáng)，更易為皮膚所吸收。NTF所形成的水脂乳化物可在正常皮膚表層形成保護(hù)膜，起良好的保護(hù)作用，可保持皮膚角質(zhì)層的柔潤(rùn)和防止皮膚干裂。NMF可使皮膚角質(zhì)層的含水量相對(duì)衡定，使皮膚保持穩(wěn)定的水合作用，防止皮膚處于干燥狀態(tài)。NTF和NMF均為復(fù)合類脂成份，可補(bǔ)充皮膚細(xì)胞的類脂成份的缺乏，維護(hù)皮膚細(xì)胞正常的功效，促進(jìn)皮膚的復(fù)層扁平上皮細(xì)胞的新陳代謝，延長(zhǎng)細(xì)胞的壽命，因此用NTF和NMF配制的美容霜，可使皮膚變嫩，具有抗皺、防衰老、防曬和增白作用，使皮膚保持柔軟細(xì)膩、光澤潔白和富有彈性。本發(fā)明的另一特點(diǎn)是工藝設(shè)計(jì)相對(duì)簡(jiǎn)單，人胚胎皮膚細(xì)胞材料可充分利用，利于該發(fā)明在一般實(shí)驗(yàn)條件的實(shí)驗(yàn)室、化妝品廠推廣應(yīng)用。
權(quán)利要求
1.一種人胚胎皮膚復(fù)合類脂(主要成分分別定名為皮膚自然潤(rùn)澤因子NMF和皮膚自然營(yíng)養(yǎng)因子NTF)的提取及在化妝品上的應(yīng)用，其特征在于復(fù)合類脂NTF和NMF的提取方法如下a、取人胚胎皮膚制成細(xì)胞勻漿；b、用2倍體積的無(wú)水乙醇在40℃～50℃條件下水浴攪拌4-5小時(shí)，趁熱過(guò)濾，濾液用等體積丙酮沉淀，真空干燥沉淀物得NTF；c、將b步中的濾渣用2倍體積的無(wú)水乙醚在58℃～62℃條件下水浴攪拌1-2小時(shí)，趁熱過(guò)濾，濾液在-18℃靜置48-60小時(shí)，過(guò)濾，真空干燥沉淀物得NMF。
2.一種人胚胎皮膚復(fù)合類脂的提取及在化妝品上的應(yīng)用，其特征在于在70℃～80℃條件下用甘油溶解NMF或NTF，加入至化妝品基質(zhì)(膏體)中制備成美容霜化妝品。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的人胚胎皮膚復(fù)合類脂的提取及在化妝品上的應(yīng)用，其特征在于按200克化妝品基質(zhì)中添加8mgNMF或NTF配比加入。
全文摘要
一種人胚胎皮膚復(fù)合類脂(主要成分分別定名為皮膚自然潤(rùn)澤因子NMF和皮膚自然營(yíng)養(yǎng)因子NTF)的提取及在化妝品上的應(yīng)用，其特征在于復(fù)合類脂NTF和NMF的提取方法如下a、取人胚胎皮膚制成細(xì)胞勻漿；b、用2倍體積的無(wú)水乙醇在40℃～50℃條件下水浴攪拌4—5小時(shí)，趁熱過(guò)濾，濾液用等體積丙酮沉淀，真空干燥沉淀物得NTF；c、將b步中的濾渣用2倍體積的無(wú)水乙醚在58℃～62℃條件下水浴攪拌1—2小時(shí)，趁熱過(guò)濾，濾液在-18℃靜置48—60小時(shí)，過(guò)濾，真空干燥沉淀物得NMF。
文檔編號(hào)A61K35/54GK1099269SQ9311172
公開(kāi)日1995年3月1日 申請(qǐng)日期1993年8月26日 優(yōu)先權(quán)日1993年8月26日
發(fā)明者徐根興, 張?jiān)迄i, 湯先忻 申請(qǐng)人:徐根興