專利名稱：作為抗抑郁藥的異噁唑啉衍生物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及具有抗抑郁活性和/或抗焦慮活性和/或體重控制活性的取代的異噁唑啉衍生物、它們的制備方法、含有它們的藥物組合物，以及它們作為藥物的用途，尤其是用于治療抑郁癥、焦慮癥、與抑郁和/或焦慮有關的壓力相關性病癥和包括神經(jīng)性厭食癥和貪食癥的體重疾病的藥物的用途。
本發(fā)明還涉及具有抗抑郁活性和/或抗焦慮活性和/或體重控制活性的取代的異噁唑啉衍生物與抗抑郁藥、抗焦慮藥和/或精神抑制藥的新穎組合。
表現(xiàn)出抗抑郁活性的四氫萘和1，2-二氫化茚衍生物可從EP-361577B1公知。這些化合物除具有的α2-腎上腺素能受體拮抗劑活性外，還屬于典型的單胺再攝取抑制劑，而且它們表現(xiàn)出抗抑郁活性但沒有鎮(zhèn)靜作用。
現(xiàn)有技術與這些化合物相關的問題是，這種化合物會產(chǎn)生相當多的副作用，如惡心、興奮、心跳加速和性功能降低。此外，它需要較長時間(尤其是3-4周)才開始起作用。
本發(fā)明的目的是提供具有抗抑郁藥和/或抗焦慮藥和/或體重控制活性的新穎的化合物衍生物，尤其是沒有上述缺點的化合物。
本發(fā)明涉及通式(I)的新穎的異噁唑啉衍生物 它們的藥物上可接受的酸或堿加成鹽，它們的立體化學異構體，其中X 為CH2、N-R7、S或O；R7選自氫、烷基、苯基、苯烷基、烷羰基、烷氧基羰基和一烷氨基羰基和二烷氨基羰基，苯基和烷基非必須地用一個或多個鹵素原子取代；
R1和R2各自獨立地選自氫、羥基、氰基、鹵素、OSO2H、OSO2CH3、苯基、苯烷基、烷氧基、烷氧基烷氧基、烷氧基烷氧基烷氧基、四氫呋喃基氧基、烷羰基氧基、烷基硫代基、烷氧基烷羰基氧基、吡啶基羰基氧基、烷羰基氧烷氧基、烷氧基羰氧基、鏈烯基氧基、鏈烯基羰氧基和一烷氨基烷氧基和二烷氨基烷氧基，烷基和芳基非必須地用一個或多個羥基或鹵素原子或氨基取代；或R1和R2可一起形成選自-CH2-CH2-O-、-O-CH2-CH2-、-O-CH2-O-、-CH2-O-CH2-和-O-CH2-CH2-O-的二價基-R1-R2-；a和b是不對稱中心；(CH2)m是m個碳原子的直烴基鏈，m為1-4的整數(shù)；Pir 為通式(IIa)、(IIb)或(IIc)的任何一個非必須地取代的基團 其中每個R8相互獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、氰基、鹵素和烷基；n 為1-5的整數(shù)；R9選自氫、烷基和甲酰基；和R3代表非必須地取代的芳族碳環(huán)的或雜環(huán)的環(huán)體系與非必須地取代的和部分或全部氫化的1-6個原子長的烴基鏈一起，其中所述環(huán)體系與Pir基連接且可含有一個或多個選自O、N和S的雜原子。
更具體的，本發(fā)明涉及根據(jù)通式(I)化合物，其中R3為根據(jù)通式(IIIa)、(IIIb)或(IIIc)的任何一個基團
其中d 為單鍵而Z為選自-CH2-、-C(＝O)-、-CH(OH)-、-C(＝N-OH)-、-CH(烷基)-、-O-、-S-、-S(＝O)、-NH-和-SH-的二價基；或d為雙鍵而Z為式＝CH-或＝C(烷基)-的三價基；A 為5元或6元芳族碳環(huán)或雜環(huán)環(huán)，選自苯基、吡喃基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、噻吩基、異噻唑基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、呋喃基、噁二唑基和異噁唑基；P 為0-4的整數(shù)；Q 為0-7的整數(shù)；R4選自氫、烷基、苯基、聯(lián)苯基、萘基、鹵素和氰基，烷基和芳基非必須的用一個或多個羥基或鹵素原子或氨基取代；R5等于R4；或R4和R5一起形成選自-CH2-、＝CH-、-CH2-CH2-、-CH＝CH-、-O-、-NH-、＝N-、-S-、-CH2N(烷基)-、-CH＝N-、-CH2O-和-OCH2-的二價基-R4-R5-；每個R6相互獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、氰基、鹵素、羧基、烷基、苯基、烷氧基、苯氧基、烷羰基氧基、烷氧基羰基、烷基硫代基、一烷氨基和二烷氨基、烷基羰基氨基、一烷氨基羰基和二烷氨基羰基、一烷氨基羰基氧基和二烷氨基羰基氧基、一烷氨基烷氧基和二烷氨基烷氧基，烷基和芳基非必須地用一個或多個羥基或鹵素原子或氨基取代；或兩個相鄰的R6可一起形成選自-CH2-CH2-O-、-O-CH2-CH2-、-O-CH2-C(＝O)-、-O-CH2-O-、-CH2-O-CH2-、-O-CH2-CH2-O-、-CH＝CH-CH＝CH-、-CH＝CH-CH＝N-、-CH＝CH-N＝CH-、-CH＝N-CH＝CH-、-N＝CH-CH＝CH-、-CH2-CH2-CH2-、-CH2-CH2-C(＝O)-和-CH2-CH2-CH2-CH2-的二價基-R6-R6-；和R10選自氫、烷基、苯烷基和苯基。
優(yōu)選的，本發(fā)明涉及其中X＝O或NH；R1和R2均為烷氧基；m＝1；Pir為根據(jù)通式(IIa)的基，其中R8為氫且n＝4；R3為根據(jù)通式(IIIb)的基，其中Z為＝CH-，d為雙鍵，A為苯環(huán)，R4為烷基和R10為氫的那些化合物。
更優(yōu)選的，本發(fā)明涉及其中X＝O；R1和R2均為甲氧基；m＝1；Pir為根據(jù)通式(IIa)的基，其中R8為氫且n＝4；R3為根據(jù)通式(IIIb)的基，其中Z為＝CH-，d為雙鍵，A為苯環(huán)，R4為甲基和R10為氫的化合物。
在本申請書的范圍中，烷基指帶有1-6個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基，例如甲基、乙基、丙基、丁基、1-甲基丙基、1，1-二甲基乙基、戊基、己基；或烷基指帶有3-6個碳原子的環(huán)狀飽和烴基，例如環(huán)丙基、甲基環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。鹵素屬于氟、氯、溴和碘。非必須的用一個或多個鹵素原子取代的烷基是例如多鹵烷基，例如二氟甲基和三氟甲基。
藥物可接受的鹽定義為包含根據(jù)通式(I)化合物能形成的治療活性的無毒加成鹽。所述鹽可通過用合適的酸處理根據(jù)通式(I)化合物的堿來獲得，所述酸是例如無機酸，如氫鹵酸，尤其是鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸和磷酸；有機酸如乙酸、羥乙酸、丙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、環(huán)己烷氨基磺酸、水楊酸、對氨基水楊酸和pamoic acid。
含有酸性質(zhì)子的通式(I)化合物還可以通過用合適的有機和無機堿處理而轉(zhuǎn)化成它們的治療活性的無毒金屬加成鹽或胺加成鹽。合適的堿鹽包括例如銨鹽、堿金屬和堿土金屬鹽，尤其是鋰、鈉、鉀和鈣鹽；與有機堿的鹽，如benzathine、N-甲基-D-葡糖胺、hybramine鹽；以及與氨基酸的鹽，所述氨基酸的例子如精氨酸和賴氨酸。
相反，所述鹽形式可通過用合適的堿或酸處理而轉(zhuǎn)化成游離形式。
用于本申請書的范圍的術語“加成鹽”還包括通式(I)化合物以及它們的鹽能形成的溶劑化物。這種溶劑化物是例如水合物和醇化物。
通式(I)化合物的N-氧化物形式包括其中一個或幾個氮原子被氧化成所謂的N-氧化物的那些通式(I)化合物，尤其是其中哌嗪基的一個或多個氮被N-氧化的那些N-氧化物。
上文所用的術語“立體化學異構體”指通式(I)化合物可具有的所有可能的異構體形式。除非另外提及或指出，化合物的化學表達式均指所有可能的立體化學異構體的混合物，所述混合物含有基本分子結構的所有非對映異構體和對映異構體。更具體的，立體性中心可具有R-或S-構型；二價環(huán)狀(部分地)飽和基上的取代基可具有順式構型或反式構型。包含雙鍵的化合物可在所述雙鍵上具有E或Z-立體化學。通式(I)化合物的立體化學異構體顯然包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
根據(jù)CAS命名法，當分子中存在兩個公知的絕對構型的立體性中心時，用R或S描述符標識(基于Cahn-Ingold-Prelog順序規(guī)則)最小編號的手性中心(參考中心)。第二個立體性中心的構型用相對的描述符[R*，R*]或[R*，S*]表示，其中R*始終確定為參考中心，而[R*，R*]指具有相同手性的中心，[R*，S*]指手性不同的中心。例如，如果分子中最低編號的手性中心具有S構型且第二中心為R構型，立體描述符用S-[R*，S*]表示。如果采用“α”和“β”在具有最低環(huán)數(shù)的環(huán)體系中的不對稱碳原子上最高優(yōu)先級取代基的位置始終任意地處于由該環(huán)體系確定的平均平面的“α”位置。該環(huán)體系中的其他不對稱碳原子上的最高優(yōu)先級取代基的位置(通式(I)化合物中的氫原子)相對于參照原子上的最高優(yōu)先級取代基的位置而言，如果它在由該環(huán)體系確定的平均平面的相同一側(cè)就稱為“α”，或如果在由該環(huán)體系確定的平均平面的另一側(cè)就稱為“β”。
通式(I)化合物和某些中間體的結構中具有至少兩個立體中心，在通式(I)中分別表示為a和b。由于該合成路徑后接著進行三環(huán)體系的合成，那兩種不對稱中心a和b的構型就預先確定，使得中心a的相對構型為S*，而中心b的相對構型為R*。
本發(fā)明還包括本發(fā)明的藥物活性化合物的衍生物化合物(通常稱為“前藥”)，它們在體內(nèi)降解產(chǎn)生本發(fā)明化合物。前藥在靶受體上的活性通常(但不總是)低于它們降解成的化合物。當所需化合物具有使其給藥困難或無效的化學或物理性能時，前藥就特別有用。例如，所需化合物可能很難溶解，也可能很難通過粘膜上皮，或可能具有不理想的短血漿半衰期。有關前藥的進一步討論可參見Stella，V.J.等的“Prodrugs”，Drug Delivery Systems，1985，pp.112-176，和Drugs，1985，29，pp.455-473。
根據(jù)本發(fā)明的藥物活性化合物的前藥形式通常為根據(jù)通式(I)化合物、其藥物可接受酸或堿加成鹽、其立體化學異構體，以及其帶有酯化的或酰胺化了的酸基的N-氧化物形式。這種酯化的酸基包括通式-COORx的基，其中Rx為C1-6烷基、苯基、芐基或以下基之一 酰胺化了的基包括通式-CONRyRz的基，其中Ry為氫、C1-6烷基、苯基或芐基，Rz為-OH、H、C1-6烷基、苯基或芐基。
本發(fā)明的帶有氨基的化合物可用酮或諸如甲醛的醛衍生，形成曼尼期堿。該堿將在水溶液中以第一級動力學水解。
用下文所述方法制備的通式(I)化合物可合成對映異構體的外消旋混合物形式，可根據(jù)現(xiàn)有技術公知的拆分方法互相分離。通式(I)的外消旋化合物可通過與合適的手性酸反應而轉(zhuǎn)化成相應的非對映異構體鹽型。所述非對映異構體鹽型隨后通過例如選擇性或分級結晶而分離，并通過堿處理而放出對映異構體。通式(I)化合物的對映異構體型的作為選擇的分離方法涉及采用手性固定相的液相層析法。所述純立體化學異構體還可衍生自合適原材料的相應的純立體化學異構體，條件是該反應立體專一地發(fā)生。如果需要專一的立體異構體，優(yōu)選的是所述化合物通過立體專一的制備方法合成。這些方法有益地采用純對映異構體原材料。
本發(fā)明化合物驚人地具有選擇性5-羥色胺(5-HT)再攝取抑制劑活性，并具有額外的α2-腎上腺素能受體拮抗劑活性，以及表現(xiàn)出強抗抑郁活性和/或抗焦慮活性和/或體重控制活性，而沒有鎮(zhèn)靜作用。此外，由于本發(fā)明化合物具有選擇性5-羥色胺(5-HT)再攝取抑制劑活性，以及α2-腎上腺素能受體拮抗劑活性，因而還適于治療和/或預防其中單獨一種活性或所述活性結合能夠具有治療用途的疾病。具體而言，本發(fā)明化合物適于治療和/或預防以下疾病·中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變，包括·情緒異常，具體包括主要抑郁性病變、具有或不具有以下特征的抑郁癥精神病、緊張癥、憂郁癥、產(chǎn)后發(fā)作的非典型特征，以及在反復發(fā)作的情況下，具有或不具有季節(jié)性形態(tài)、心境惡劣病變、兩極化I型病變、兩極化II型病變、循環(huán)精神病、再發(fā)性短暫抑郁性病變、混和的情感性病變、未具體指明特征的兩極化病變、由于一般醫(yī)學病癥引起的情緒異常、物質(zhì)誘發(fā)的情緒異常、未具體指明特征的情緒異常、季節(jié)性情感異常以及月經(jīng)前煩躁癥。
·焦慮癥，包括恐慌癥、空室恐怖癥、未出現(xiàn)空室恐怖癥的恐慌癥、沒有恐慌癥病史的空室恐怖癥、特異性恐怖癥、社交恐怖癥、強迫觀念-強迫行為性病變、創(chuàng)傷后壓力病變、急性壓力病變、普遍化焦慮癥、一般醫(yī)學病癥引起的焦慮癥、藥物誘發(fā)的焦慮癥，以及未具體指明特征的焦慮癥。
·與抑郁和/或焦慮有關的壓力相關病變，包括急性壓力反應、調(diào)節(jié)性病變(短暫抑郁性反應、長期抑郁性反應、混和的焦慮和抑郁反應、具有顯著的其他情緒障礙的調(diào)節(jié)性病變、具有顯著的行為障礙的調(diào)節(jié)性病變、具有情緒與行為的混和障礙的調(diào)節(jié)性病變、具有其他具體的顯著癥狀的調(diào)節(jié)性病變)以及對于嚴重壓力的其他反應。
·癡呆癥、健忘癥以及未具體指明特征的認知障礙，特別是由于退化性病變、損傷、創(chuàng)傷、感染、血管病變、毒素、缺氧、維生素缺乏或內(nèi)分泌紊亂引起的癡呆癥，或由于酒精或維生素B1缺乏等其他原因引起的健忘癥，由于單純皰疹性腦炎和其他邊緣性腦炎引起的雙側(cè)耳頁損傷，缺氧/低血糖/嚴重痙攣和手術后繼發(fā)的神經(jīng)元損害，退化性病變，血管病變或第III腦室周邊的病變。
·由于其他醫(yī)學病癥導致的認知力受損引起的認知紊亂。
·人格異常，包括患妄想狂的人格異常、精神分裂癥樣人格異常、分裂模式型人格異常、拒絕社交型人格異常、邊緣型人格異常、演戲狀人格異常、自戀型人格異常、回避型人格異常、依賴型人格異常、強迫性神經(jīng)癥型人格異常，以及未另外具體指明的人格異常。
·各種原因引起的情感分裂癥，包括躁狂型、抑郁型、混和型情感分裂癥；妄想狂型、無組織型、緊張型、無差別型和殘余型精神分裂癥；精神分裂癥、情感分裂癥、妄想癥、暫時性精神病、共通型精神病、物質(zhì)誘發(fā)型精神病，以及未具體指明其他癥狀的精神病。
·運動不能癥、運動不能-僵直癥候群、運動障礙和藥物誘發(fā)型帕金森氏癥、圖雷特綜合征及其癥狀、震顫、舞蹈病、肌陣孿、抽搐以及肌緊張不足。
·注意力缺乏/多動癥(ADHD)·帕金森氏癥、藥物誘發(fā)的帕金森氏癥候群、腦炎后發(fā)生的帕金森氏癥候群、漸進性核上癱瘓癥、多重系統(tǒng)萎縮癥、腦皮質(zhì)基底變性癥、帕金森氏癥候群-ALS癡呆綜合癥，以及基底神經(jīng)節(jié)鈣化癥。
·早老性癡呆癥，包括早發(fā)性和晚發(fā)性，具有情緒抑郁。
·癡呆癥和心智遲鈍的行為障礙和舉止異常，包括不安和激動。
·錐體外束運動異常。
·唐氏綜合征(Down’s)。
·靜坐不能。
·攝食異常，包括神經(jīng)性厭食、非常型神經(jīng)性厭食、神經(jīng)性貪食、非常型精神性貪食、與其他心理障礙有關的過度攝食，以及非特異性攝食異常。
·與AIDS有關的癡呆。
·慢性疼痛病癥，包括神經(jīng)病變性疼痛、發(fā)炎性疼痛、癌癥疼痛，以及外科手術(包括牙科手術)后的疼痛。這些適應癥還可包括急性疼痛、骨骼肌肉疼痛、下背疼痛、上肢疼痛、纖維肌肉疼痛和顏面肌肉疼痛癥候群、口腔顏面疼痛、腹部疼痛、幻想疼痛、抽搐性三叉神經(jīng)疼痛和非常型顏面疼痛、神經(jīng)根損害和蜘蛛膜炎、老年病疼痛、中樞神經(jīng)痛以及發(fā)炎疼痛。
·神經(jīng)變性疾病，包括早老性癡呆、亨廷頓舞蹈病、克羅伊茨費爾特-雅各布病、皮克病、諸如多發(fā)性硬化和ALS的髓鞘脫失癥，其他神經(jīng)病變與神經(jīng)痛、多發(fā)性硬化、肌肉萎縮性側(cè)索硬化、中風以及頭部創(chuàng)傷。
·成癮病變，包括·具有或不具有生理依賴性的藥物依賴或濫用，特別地所述藥物為酒精、安非他命、安非他命類似物質(zhì)、咖啡因、大麻、可卡因、引起幻覺的物質(zhì)、吸入劑、尼古丁、類鴉片、苯環(huán)哌啶、苯環(huán)哌啶類似物質(zhì)、鎮(zhèn)靜性安眠藥、苯并二丫庚因和/或其他物質(zhì)，特別適于治療從上述藥物脫癮以及戒酒妄想。
·特別由酒精、安非他命、咖啡因、大麻、可卡因、引起幻覺的物質(zhì)、吸入劑、尼古丁、類鴉片、苯環(huán)哌啶、鎮(zhèn)靜劑、安眠藥、抗焦慮藥和其他物質(zhì)誘發(fā)的情緒異常。
·特別由酒精、安非他命、咖啡因、大麻、可卡因、引起幻覺的物質(zhì)、吸入劑、尼古丁、類鴉片、苯環(huán)哌啶、鎮(zhèn)靜劑、安眠藥、抗焦慮藥和其他物質(zhì)誘發(fā)的焦慮癥，以及出現(xiàn)焦慮的適應不良癥。
·戒煙。
·體重控制，包括肥胖癥。
·睡眠異常與障礙，包括·睡眠障礙和/或深度睡眠作為主要睡眠異常，與另一種心智異常相關的睡眠異常，由一般醫(yī)學病癥引起的睡眠異常，以及藥物誘發(fā)的睡眠異常。
·晝夜節(jié)律異常。
·提高睡眠質(zhì)量。
·性功能障礙，包括性欲異常、性興奮異常、性高潮異常、性疼痛、因一般醫(yī)學病癥引起的性功能障礙、藥物誘發(fā)的性功能障礙，以及未另外指明的性功能障礙。
因此本發(fā)明還涉及以上定義的通式(I)化合物、其醫(yī)藥上可接受的酸或堿加成鹽、其立體化學異構體、其N-氧化物，及其用作藥品的前藥。此外，本發(fā)明還涉及通式(I)化合物、其醫(yī)藥上可接受的酸或堿加成鹽、其立體化學異構體、其N-氧化物，及其前藥用于制造治療抑郁癥、焦慮癥和體重控制異常，或更一般地治療任何一種上述疾病的藥物上的用途。
本發(fā)明化合物還適于與目前已有的或正在開發(fā)的或?qū)砜衫玫目挂钟羲帯⒖菇箲]藥和/或精神抑制藥結合，作為上述疾病中的附加治療和/或預防，以提高藥效和/或改善開始作用速度。在其中抗抑郁藥、抗焦慮藥和/或精神抑制藥表現(xiàn)出活性的嚙齒類模型中進行評價。例如，評價化合物與抗抑郁藥、抗焦慮藥和/或精神抑制藥結合用于減輕壓力誘發(fā)的體溫過高的效果。
因此本發(fā)明還涉及包含本發(fā)明化合物和選自抗抑郁藥、抗焦慮藥和精神抑制藥的一種或多種其他化合物的藥物組合物，以及涉及用這種組合物制造藥物，以改善其在抑郁癥和/或焦慮癥治療中的效果和/或開始作用。
體外受體與神經(jīng)遞質(zhì)傳送物的結合和信號傳遞研究可用于評價本發(fā)明化合物的α2-腎上腺素能受體拮抗劑活性和5-羥色胺(5-HT)再攝取抑制劑活性。可分別用體外α2-腎上腺素能受體和5-羥色胺傳送物占有度作為中樞滲透和抑制α2-腎上腺素能受體和5-羥色胺傳送物的效力的指標。作為體內(nèi)α2-腎上腺素能受體拮抗劑的指標，可采用對老鼠進行皮下注射，或?qū)鲜筮M行靜脈注射medetomidine前口服該化合物，然后觀察老鼠的恢復反射的逆轉(zhuǎn)(medetomidine試驗)。作為5-羥色胺(5-HT)再攝取抑制劑活性的指標，可采用對老鼠進行皮下注射，或在皮下投注對氯安非他命前口服該化合物后，觀察老鼠的頭部抽搐和興奮的抑制作用(pCA試驗)。
本發(fā)明還涉及包含藥物可接受的載體和作為活性成分的治療有效量的本發(fā)明化合物的組合物。本發(fā)明化合物或它們的任何亞群可配制成用于給藥目的的各種藥物劑型。作為合適的組合物，可提及全身給藥常采用的所有組合物。為了制備本發(fā)明的藥物組合物，將有效量的特定化合物(非必須的以加成鹽的形式)作為活性成分，與藥物可接受的載體結合形成最終的混合物，所述載體可依給藥所需的劑型不同而呈多種形式。這些藥物組合物理想的是適合于尤其是口服、經(jīng)直腸、經(jīng)皮膚、胃腸外注射或經(jīng)吸入物給藥的單位劑型。例如，在制備口服劑型組合物時，在諸如懸浮液、糖漿、酏劑、乳液和溶液的口服液體制劑的情況下，可采用諸如例如水、二元醇類、油脂類、醇類等任何常用的藥物介質(zhì)；或在制備粉劑、丸劑、膠囊和片劑的情況下，采用諸如淀粉、糖、高嶺土、稀釋劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等的固體載體。由于片劑和膠囊給藥方便，因而代表了最有益的口服劑型單位，當然采用固體藥物載體。對于胃腸外的組合物，其載體通常包括無菌水(至少占大部分)，盡管還可包括例如幫助溶解的其他成分。制備例如注射液時，其載體包含生理鹽水、葡萄糖溶液或生理鹽水與葡萄糖溶液的混合物。注射用懸浮液也可用合適的液體載體、懸浮劑等制備。還包括在臨使用前才轉(zhuǎn)化成液體劑型的固體劑型。在適于經(jīng)皮膚給藥的組合物中，其載體非必須的包含滲透增強劑和/或合適的潤濕劑，非必須的與少量任何性質(zhì)的合適添加劑結合，所述添加劑不會對皮膚產(chǎn)生顯著的不良作用。所述添加劑可促進對皮膚的給藥和/或可有助于制備所需組合物。這些組合物可以各種方式給藥，例如經(jīng)皮膚貼劑、定點貼劑、軟膏。
特別有益的是將上述藥物組合物配制成給藥方便和劑量均勻的單位劑型。本文所用的單位劑型指適合作為單位劑量的物理上分開的單位，每個單位含有經(jīng)計算與需要的藥物載體結合產(chǎn)生要求療效的預定量活性成分。這種單位劑型的實例是片劑(包括有刻記的和有包衣的片劑)、膠囊、丸劑、粉劑包、糯米紙囊劑、栓劑、可注射的溶液或懸浮液等，以及被隔離的多重劑型。
本發(fā)明化合物通?？捎擅恳徊蕉际潜绢I域普通技術人員公知的連續(xù)步驟制備。
具體的，帶有通式(IIa)Pir基的通式(I)化合物可通過用通式(V)的取代哌嗪在通式(IV)中間體上進行親核性取代反應制備。這些反應可在諸如二噁烷、甲基異丁基酮或N，N’-二甲基甲酰胺的反應惰性溶劑中，在諸如碳酸鉀、碳酸鈉或三乙胺的合適堿存在下，或即使不存在堿，在后一種情況下應用過量的通式(V)的試劑進行。合適的反應溫度為100-150℃。
在化合物(IV)中，L代表任何合適的反應性離去基團，尤其是諸如氯、溴或碘的鹵素，或諸如甲基磺酰氧基或4-甲基苯磺酰氧基的磺酰氧基。
帶有通式(IIa)Pir基的通式(I)化合物還可通過兩步反應式制備，其中通式(IV)中間體首先與通式(VII)的取代哌嗪反應，將R3基引入分子中。反應條件與上述用于通式(VI)的化合物的反應條件相似。
在化合物(IV)中，L代表任何合適的反應性離去基團，尤其是諸如氯、溴或碘的鹵素，或諸如甲基磺酰氧基或4-甲基苯磺酰氧基的磺酰氧基。
在中間體化合物(VII)中，也可例如通過一個叔丁氧羰基保護其中一個氮官能團。

在化合物(IX)中，L代表任何合適的反應性離去基團，尤其是諸如氯、溴或碘的鹵素，或諸如甲基磺酰氧基或4-甲基苯磺酰氧基的磺酰氧基。也可用R3-CHO作為化合物(IX)。
帶有通式(IIa)Pir基的通式(I)化合物還可通過兩步反應方案制備，其中通式(VIII)中間體與通式(X)酸反應，然后還原中間體(XI)的羰基官能團。步驟1的反應可在諸如氯仿、二氯甲烷、四氫呋喃、二甲基甲酰胺或它們的混合物的反應惰性溶劑中進行，采用本領域普通技術人員公知的任何方法，使用諸如1，1’-羰基二咪唑、N，N’-二環(huán)己基碳化二亞胺的縮合試劑，或先將通式(X)的羧酸轉(zhuǎn)變成其相應的?；取２襟E2所示的反應可用諸如氫化鋰鋁或氫化鋁的合適還原劑，在例如四氫呋喃的合適溶劑中進行。通常這些反應可在從-20℃到室溫的溫度下進行。
在中間體化合物(XI)和(XII)中，A基團代表非必須取代的芳族碳環(huán)或雜環(huán)體系，所述體系包括長5個原子的部分或全部氫化的烴基鏈，其中一個或多個碳原子可選自氧、氮和硫的一個或多個原子代替，該環(huán)體系通過所述烴基鏈與上述Pir基連接。
取代基R1和R2可通過諸如脫甲基化、?；Ⅴセ?、胺化和酰胺化的本領域公知的方法改變或相互轉(zhuǎn)化。
原材料和某些中間體是可商購的，或可根據(jù)本領域公知的常用反應方法制備。例如，其中X＝O的通式(IV)中間體可根據(jù)以下反應方案(方案1)制備方案1 在中間體化合物(XIV)中，L代表任何合適的反應性離去基團，尤其是諸如氯、溴或碘的鹵素，或諸如甲基磺酰氧基或4-甲基苯磺酰氧基的磺酰氧基。此外，中間體化合物(XIV)中的Alk代表任何C1-6烷基，尤其是乙基，m見通式(I)的定義。
其中X＝NH的通式(IV)中間體也可以根據(jù)上述步驟1相同的方式制備，條件是中間體化合物(XIII)用其胺類似物(XVI)代替，優(yōu)選的用例如COCF3基保護胺基。烷基化步驟可在例如四氫呋喃或二甲基甲酰胺的反應惰性溶劑中，在諸如氫化鈉或氫化鉀的強堿存在下，并加入諸如18-冠-6或15-冠-5的冠醚進行。合適的反應溫度為室溫到60℃。

可采用本領域公知的技術，例如采用鹽酸羥胺的技術，在NaHCO3或吡啶存在下，在例如乙醇的反應惰性溶劑中，將通式(XVII)的中間體轉(zhuǎn)化成通式(XVIII)的肟。中間體(XVIII)被氧化成它的腈氧化物，并就地進行分子內(nèi)的環(huán)加成反應，產(chǎn)生通式(XIX)的化合物。這種氧化反應可用次氯酸鈉溶液，在三乙胺存在下，在諸如二氯甲烷的惰性溶劑中，在室溫下進行。氧化反應也可用氯胺-T(N-氯-4-甲基-苯磺酰氨，鈉鹽)，在諸如回流的乙醇的溶劑中攪拌加熱進行。在這一階段形成了通式(I)的兩個立體中心a和b。
通式(XX)的化合物可用本領域公知的方法制備，例如通過在例如氫硼化鈉的合適還原劑存在下，在諸如水、醇、四氫呋喃或它們的混合物的合適溶劑中，一般在室溫下還原通式(XIX)的羰基化合物來制備。
通式(IV)中間體可用標準技術從通式(XX)中間體制備。因此，在諸如三乙胺的堿存在下，在例如二氯甲烷的反應惰性溶劑中，在0℃到室溫的反應溫度下，與甲烷磺酰氯或4-甲基苯磺酰氯反應，產(chǎn)生相應的磺酰氧基衍生物中間體(IV)。還可制備相應的鹵代衍生物，例如在四氯甲烷存在下，在諸如四氫呋喃的反應惰性溶劑中，用三苯基膦處理通式(XX)中間體，攪拌并回流混合物。
由以上和以下反應顯見，可將反應產(chǎn)物從反應介質(zhì)中分離，如果需要，還可根據(jù)諸如萃取法、結晶法和色譜法的本領域一般公知的方法進一步純化?？蛇M一步顯見的是，以一種以上對映異構體形式存在的反應產(chǎn)物可通過公知的技術從它們的混合物中分離出來，特別應用諸如制備性HPLC的制備色譜法。典型的是，中間化合物(IV)和通式(I)的最終化合物可分離成它們的對映異構體形式。
其中X＝CH2的本發(fā)明化合物可根據(jù)以下反應方案(方案2)制備，其中根據(jù)通式(V)的中間化合物首先與通式(XX)的二鹵代衍生物用標準的技術，在或不在堿存在下，在諸如氯仿、二氯甲烷或1，2-二氯乙烷的惰性反應溶劑中，在從室溫到80℃的反應溫度下，進行N-烷基化反應，產(chǎn)生通式(XXI)中間體。在諸如甲苯的非質(zhì)子性溶劑中，在回流溫度下攪拌加熱，用諸如Dean-Stark水分離器的標準裝置除去水，將通式(XXII)的醛與叔丁基胺反應，產(chǎn)生通式(XXIV)的亞胺。通式(XXIV)的中間化合物與通式(XXI)中間體的C-烷基化反應可在諸如正丁基鋰的烷基鋰衍生物存在下，在惰性氣氛下和諸如四氫呋喃的干燥惰性溶劑中，在-78-0℃的低溫下進行，產(chǎn)生通式(XXV)中間體。通式(XXVI)的中間化合物可通過在諸如碳酸氫鈉的堿存在下，在諸如類似乙醇的低級烷基醇的溶劑中，通常在室溫下將通式(XXV)的化合物與羥基胺反應來制備。最后，通式(XXVI)的肟衍生物氧化成其腈氧化物，以及隨后就地環(huán)加成反應得到通式(XXVII)的化合物的過程，可通過與諸如從通式(XVIII)中間體得到通式(XIX)化合物的上述方法相似的標準技術實現(xiàn)。
方案2 可見以上公開的反應步驟可適用于具體的反應產(chǎn)物。該反應步驟可以本領域普通技術人員公知的任何方式進行，包括在溶液中或作為固體相反應，后者的反應產(chǎn)物與樹脂材料結合，并在最終的裂解步驟中從樹脂材料上釋放。這種實施方式和修改的實例已在本說明書中通過實施例的方式進一步公開。
化合物3，3a，4，5-四氫萘并[1，2-c]異噁唑-3-乙酸(通式(IV)，其中每個R1和R2為H，m＝0，X＝CH2和L＝COOH)已公開在SyntheticCommunications，27(16)，2733-2742(1997)中，作為合成消炎性、止痛和解熱性化合物的中間體，不包括在專利保護范圍內(nèi)。
以下實施例說明本發(fā)明但不限于此。
試驗部分本申請書采用的通式(I)化合物的碳環(huán)編號體系如下 對于某些化合物，其中的立體性碳原子的絕對立體化學構型不由試驗確定。此時首先分離出的立體化學異構體記為“A”，其次分離出的記為“B”，而不再參考其真實的立體化學構型。然而，所述“A”和“B”異構體型可由本領域普通技術人員用例如X射線衍射法的公知方法清楚地表征。通式(I)中的立體性中心a和b分別具有3a和3的環(huán)編號。
在下文中，“DMF”定義為N，N-二甲基甲酰胺，“DIPE”定義為二異丙基醚，而“THF”定義為四氫呋喃。
A、中間化合物的制備實施例A1.a中間體1的制備 將4-溴-2-丁烯酸甲酯(0.1647mol)在DMF(50ml)中的溶液滴加到2-羥基-4，5-二甲氧基苯甲醛(0.0823mol)與K2CO3(0.1647mol)在DMF(200ml)中的混合物中。在室溫下攪拌反應混合物2小時，過濾并蒸發(fā)干燥濾液。用10％NaOH水溶液清洗殘渣，然后用CH2Cl2萃取。將分離出的有機層干燥(Na2SO4)過濾，并蒸發(fā)溶劑。用二乙醚清洗殘渣然后干燥。產(chǎn)物20g中間體1(87％)。
實施例A1.b中間體2的制備 在中間體1(0.041mol)在乙醇(150ml)中的溶液中加入羥基胺(0.045mol)。加入吡啶(57ml)。在室溫下攪拌反應混合物2小時，然后倒入水中，用濃HCl酸化。用CH2Cl2萃取該混合物。將分離出的有機層干燥(Na2SO4)過濾，并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物11.7％(96％，粗產(chǎn)物)。通過硅膠高壓液相色譜法對試樣(2g)提純(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH95/5)。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。用二乙醚清洗殘渣然后干燥。產(chǎn)物0.9g中間體2。
實施例A1.c中間體3的制備 在中間體2(0.037mol)和Et3N(1ml)在CH2Cl2(220ml)中的混合物中滴加NaOCl，5％(130ml)。在室溫下攪拌反應混合物4小時，然后用水清洗，干燥(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)濾液。通過短開放硅膠柱色譜法對殘渣提純(洗脫劑CH2Cl2/2-丙酮100/0到95/5)。收集所需部分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物5.8g(54％，不再提純地用于下一個反應步驟)。將試樣(2g)從EtOAc再結晶。濾除沉淀并干燥。產(chǎn)物1.7g中間體3。
實施例A1.d中間體4的制備 將NaBH4(0.043mol)分批加入中間體3(0.017mol)在THF(50ml)和H2O(5ml)中的溶液中，并在冰浴上攪拌冷卻。在室溫下攪拌所得反應混合物2小時。加入2-丙酮并攪拌30分鐘。用水清洗反應混合物并用CH2Cl2萃取。用鹽水清洗分離出的有機層，干燥(Na2SO4)，過濾并蒸發(fā)溶劑。通過短開硅膠柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 95/5)并通過硅膠高壓液相色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 98/2)對殘渣提純。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。用二乙醚處理試樣(1.8g)然后干燥。產(chǎn)物1.2g中間體4(59％)。
實施例A1.e中間體5的制備 將Et3N(0.016mol)加入中間體4(根據(jù)A3制備的)(0.0109mol)在CH2Cl2(60ml)中的溶液中。在冰浴中冷卻混合物。加入甲磺酰氯(0.012mol)并攪拌所得反應混合物30分鐘。然后用水清洗混合物，干燥(Na2SO4)，過濾并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物3.5g中間體5(82％，不再提純地用于下一個反應步驟)。
實施例A1.f中間體6的制備 反應在N2氣氛下進行。將BBr3(0.04368mol)攪拌滴加到中間體5(根據(jù)A1.e制備的)(0.00873mol)在CH2Cl2(100ml)中的溶液中，冷卻到-78℃。將反應混合物升溫到-40℃并在-40℃下繼續(xù)攪拌2小時。然后將混合物倒入冰水中并用CH2Cl2萃取。將分離出的有機層干燥(MgSO4)，過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠閃蒸塔色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 97/3)，然后通過HPLC(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 99.5/0.5到90/10)對殘渣提純。收集兩種產(chǎn)物部分并蒸發(fā)它們的溶劑。產(chǎn)物0.750g中間體6(26％)。
實施例A1.g中間體7的制備 在100℃下攪拌中間體5(根據(jù)A1.e制備的)(0.0422mol)和哌嗪(0.1267mol)在1，4-二噁烷(15ml)中的混合物2小時。蒸發(fā)掉溶劑。用水清洗殘渣并用CH2Cl2萃取。將分離出的有機層干燥(Na2SO4)，過濾并蒸發(fā)掉溶劑。產(chǎn)物13g中間體7(NMR85％)。
實施例A1.h中間體8的制備 通過手性柱色譜法，經(jīng)具有固定相的柱LC110-2 CHIRALPAK-AD(2000g，堆積壓力45bar，檢測范圍2.56，波長240nm，溫度30℃；注射溶液200g在8.4L CH3CN中；然后加入19.6L甲醇(+2％乙醇)，然后過濾；注射容積700ml；洗脫劑CH3OH/CH3CN 70/30v/v)將中間體5(根據(jù)A1.e制備的)(200g，0.58mol)分離成其對映異構體。收集兩種產(chǎn)物部分并蒸發(fā)掉它們的溶劑。產(chǎn)物95g中間體8。
實施例A1.i中間體9的制備
將中間體8(根據(jù)A1.h制備的)(0.0728mol)與1-(叔丁氧基羰基)哌嗪(0.087mol)在二噁烷(500ml)中的混合物攪拌并回流48小時。蒸發(fā)溶劑并加入CH2Cl2。再加入H2O和NaOH(50％)并用CH2Cl2萃取混合物。將分離出的有機層干燥(MgSO4)并在真空下蒸發(fā)溶劑。
產(chǎn)物中間體9。
實施例A1.j中間體10的制備 將中間體9(0.00318mol)和2，2，2-三氟乙酸(189ml)在CH2Cl2(500ml)中的混合物在室溫下攪拌1小時。蒸發(fā)溶劑并將殘余物溶解在CH2Cl2中。加入NaOH(50％)并萃取混合物。將分離出的有機層干燥(MgSO4)，過濾并真空蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/(MeOH/NH3)100/0；95/5)對殘渣提純。收集純餾分并蒸發(fā)掉溶劑。產(chǎn)物14.32g中間體10(59％)。
實施例A1.k中間體11的制備 將中間體10(0.00599mol)、1-氯-2-丙酮(0.00599mol)和K2CO3(0.01199mol)在DMF(200ml)中的混合物在室溫下攪拌24小時。蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶解在CH2Cl2中。用水洗滌有機溶液，干燥(MgSO4)，過濾并真空蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物(定量得到)中間體11。
實施例A1.l中間體12的制備 反應在N2氣氛下進行。將3，4-二氫-2-萘甲酸(0.0043mol)和1，1’-羰基雙[1H-咪唑](0.0047mol)的無水CH2Cl2混合物在室溫下攪拌1小時。加入中間體7(根據(jù)A1.g制備的)(0.0043mol)的無水CH2Cl2溶液，在室溫下攪拌所得反應溶液±24小時。用水洗滌溶液，然后用CH2Cl2萃取。將分離出的有機層干燥(Na2SO4)，過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 97/3)對殘渣提純。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.4g中間體12(22％)。
實施例A1.m中間體13的制備將乙烯基三苯基溴化(0.0025mol)加入中間體7(根據(jù)A1.g制備)(0.003mol)的CH2Cl2(20ml)溶液中。在室溫下攪拌所得反應混合物4小時。減壓蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物2.2g中間體13，不經(jīng)進一步提純就用于下一反應步驟。
實施例A1.n中間體14的制備 在室溫和氮氣流下，將1，1’-羰基雙[1H-咪唑](0.0099mol)加入(E)-3-碘代-2-甲基丙烯酸(0.009mol)的無水CH2Cl2溶液中。攪拌混合物1小時，然后加入中間體7(根據(jù)A1.g制備)(0.009mol)。在室溫下攪拌反應混合物16小時，用水和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并減壓蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/MeOH99/1)對殘余物(白色泡沫)提純。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物3.82g中間體14(白色固體，81％)。
實施例A1.o中間體15的制備攪拌LiAlH4、1.0M/THF(0.00848mol)的THF(100ml)溶液，并在-20℃和氮氣流下回流。一次性加入AlCl3(0.0093mol)并在-20℃下攪拌所得混合物10分鐘。滴加中間體14(根據(jù)A1.n制備)(0.0077mol)的THF(100ml)溶液，并在-20℃下攪拌所得混合物1小時。在-10℃下滴加20％的飽和NH4Cl溶液，并將反應混合物升溫到室溫。將水加入懸浮液并用CH2Cl2萃取。干燥(Na2SO4)分離出的有機層并減壓蒸發(fā)溶劑。用Et2O處理殘余物并干燥。產(chǎn)物3.73g中間體15(白色固體，94％)。
實施例A1.p中間體16的制備將中間體7(根據(jù)A1.g制備)(0.015mol)、1-氯-2-丙酮(0.015mol)和K2CO3(0.030mol)在CH3CN(60ml)中的混合物在室溫下攪拌24小時。蒸發(fā)掉溶劑。將殘余物分配到水和CH2Cl2之間。將分離出的有機層干燥(Na2SO4)，過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 95/5)對殘渣提純。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物4.79g中間體16(82％)。
實施例A1.q中間體17的制備 在0℃下將NaBH4(0.0128mol)分批添加到中間體16(根據(jù)A1.p制備)(0.0051mol)和水(3.2ml)的THF(40.5ml)溶液中。在室溫下攪拌反應混合物一夜，然后用10％的NH4Cl水溶液處理。用CH2Cl2萃取該混合物。將分離出的有機層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 97/3)對殘渣提純。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物1.6g中間體17(80％)。
實施例A1.r中間體18的制備將中間體7(根據(jù)A1.g制備)(0.03mol)溶解在CH3CN(200ml)中并添加K2CO3(0.27ml)。添加環(huán)氧乙烷甲醇(0.27mol)并在60℃下在周末攪拌反應混合物。真空蒸發(fā)溶劑。將殘余物分配在水和CH2Cl2之間。分離有機層，干燥(Na2SO4)、過濾并減壓蒸發(fā)溶劑。通過制備性HPLC提純殘余物((1)洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)95/5，然后(2)洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 90/10)。收集產(chǎn)物部分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物7.5g(61％)純中間體18和3.5g原材料/目標化合物1/1的混合物。
實施例A1.s中間體19的制備 將中間體18(根據(jù)A1.r制備)(0.0012mol)溶解在CH2Cl2(200ml)中。添加高碘酸鈉鹽(0.0024mol)的NaHCO3/H2O(足量)溶液，并劇烈攪拌所得反應混合物2小時。將殘余物分配在水和CH2Cl2之間。用鹽水洗滌分離出的有機層，干燥(Na2SO4)、過濾并真空蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.430g中間體19(定量產(chǎn)物；不再提純地用于下一反應步驟)。
實施例A2.a中間體20的制備 反應在N2氣氛下進行。將2，2，2-三氟-N-(2-甲酰苯基)-乙酰胺(0.1869mol)的DMF(375ml)溶液滴加到含NaH(0.2055mol)的DMF(375ml)中。室溫下攪拌混合物30分鐘。滴加4-溴-3-丁烯酸甲酯(0.2803mol)的DMF(200ml)溶液。然后添加18-冠-6(催化用量)。在60℃攪拌所得反應混合物2小時，然后在室溫放置一夜。蒸發(fā)溶劑。用水洗滌殘余物并用CH2Cl2萃取。將分離出的有機層干燥(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/己烷90/10、100/0和CH2Cl2/2-丙酮96/4、90/10和80/20)對殘渣提純。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物44.37g中間體20(75％，不再提純地用于下一步反應)。
實施例A2.b中間體20的制備 將羥胺(0.169mol)和吡啶(0.211mol)添加到中間體20(根據(jù)A2.a制備)(0.1407mol)的乙醇(450ml)溶液中，并在室溫下攪拌所得反應混合物3小時。用10％的檸檬酸溶液洗滌混合物，然后用CH2Cl2萃取。將分離出的有機層干燥(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物45.76g中間體21(98％，不再提純地用于下一步反應)。
實施例A2.c中間體22的制備 將中間體21(根據(jù)A2.b制備)(0.0658mol)與N-氯-4-甲基-苯磺酰胺的鈉鹽(0.0658mol)在乙醇(500ml)中的混合物攪拌并回流2小時。真空濃縮混合物，經(jīng)dicalite過濾，用水和鹽水洗滌濾液，然后用CH2Cl2萃取。將分離出的有機層干燥(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/2-丙酮100/0、96/4、90/10和80/20)對殘渣提純。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。用己烷結晶殘余物(糖漿狀物)，然后用DIPE洗滌并干燥。產(chǎn)物12.32g中間體22(57％)。
實施例A2.d中間體23的制備 將NaBH4(0.0289mol)分批添加到中間體22(根據(jù)A2.c制備)(0.0116mol)在THF(81ml)和H2O(6.8ml)中的混合物中，攪拌并在冰浴上冷卻。室溫攪拌所得反應混合物一夜。用飽和NH4Cl水溶液處理混合物，然后用EtOAc萃取。將分離出的有機層干燥(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)溶劑。用CH2Cl2洗滌殘余物，然后從EtOAc重結晶。濾除沉淀物并干燥。產(chǎn)物0.9g中間體23(38％)。
實施例A2.e中間體24的制備 將中間體23(根據(jù)A2.d制備)(0.001468mol)和三苯基膦(0.001909mol)在四氯甲烷(30ml)和THF(20ml)中的混合物攪拌并回流3小時。蒸發(fā)溶劑至干燥。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/己烷90/10，然后100/0)對殘渣提純。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。從甲醇中結晶出殘余物。濾除沉淀并干燥。產(chǎn)物2.6g中間體24(79％)。
實施例A3.a中間體25的制備 將1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙酯(0.02mol)分批加入1，4-二氯-2-丁烯(0.025mol)的CHCl3(60ml)溶液中。室溫下攪拌反應混合物24小時，然后攪拌回流24小時。用飽和NaHCO3溶液使反應終止，干燥(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/EtOAc)對殘渣提純。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物2.2g中間體25(40％)。
實施例A3.b中間體26的制備 反應在N2流下進行。將60％的NaH(0.0579mol)與18-冠-6(催化用量)在THF(25ml)中的混合物冷卻。分批添加2-氨基-4，5-二甲氧基苯甲醛(0.0579mol)與THF(50ml)的混合物。室溫下攪拌反應混合物30分鐘。分批添加中間體25(根據(jù)A3.a制備)(0.0386mol)與THF(50ml)的混合物。室溫下攪拌混合物3天，然后用NH4Cl(10％)處理。用CH2Cl2萃取混合物。分離有機層，干燥、過濾并蒸發(fā)溶劑直至干燥。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 99/1和98/2)對殘渣提純。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物5.5g中間體26(23％)。
實施例A3.c中間體27的制備反應在N2流下進行。向60％的NaH(0.03mol)與THF(20ml)的混合物中分批添加中間體26(根據(jù)A3.b制備)(0.02mol)與THF(80ml)的混合物以及18-冠-6(催化用量)。室溫下攪拌混合物20分鐘。分批添加三氟乙酸酐(0.022mol)。室溫下攪拌混合物3小時，用NH4Cl(20％)溶液處理，然后用CH2Cl2萃取，并蒸發(fā)溶劑直至干燥。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 99/1和98/2)對殘渣提純。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物5.3g中間體27(58％)。
實施例A3.d中間體28的制備 將中間體27(根據(jù)A3.c制備)(0.0115mol)、羥胺(0.0126mol)和NaHCO3(0.023mol)與無水乙醇(60ml)的混合物在室溫下攪拌24小時，過濾并蒸發(fā)溶劑直至干燥。產(chǎn)物5.8g中間體28(95％)。
實施例A3.e中間體29的制備 將1-氯-2，5-吡咯烷二酮(0.0272mol)分批添加到中間體28(根據(jù)A3.d制備)(0.0109mol)的CH2Cl2(100ml)溶液中。室溫下攪拌混合物2小時。滴加Et3N(0.0272mol)。室溫下攪拌混合物一夜，用10％的K2CO3溶液終止反應，然后萃取并蒸發(fā)溶劑至干燥。產(chǎn)物中間體29。
實施例A3.f中間體30的制備 將中間體29(根據(jù)A3.e制備)(0.0109mol)與LiOH(0.0109mol)在H2O(17.5ml)和1，4-二噁烷(70ml)中的混合物在室溫下攪拌3小時。用NaOH(2N)溶液處理混合物，然后用CH2Cl2萃取。蒸發(fā)溶劑直至干燥。通過短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 98/2)對殘渣提純。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物2.07g中間體30(45％)。
實施例A3.g中間體31的制備 將三氟乙酸(7.9ml)滴加到中間體30(0.0047mol)的CH2Cl2(33ml)溶液中。室溫下攪拌混合物3小時，冷卻并用50％的NaOH溶液堿化。萃取混合物并蒸發(fā)溶劑直至干燥。產(chǎn)物1.6g化合物31(100％)。
實施例A4.a中間體32的制備 將1，4-二氯-2-丁烯(0.03mol)加入1-(2-萘甲基)哌嗪(0.025mol)和NaHCO3(0.025mol)在CH3Cl2(75ml)中的混合物中。室溫下攪拌反應混合物24小時。濾除固體，然后用CH2Cl2洗滌，用10％的Na2CO3溶液洗滌有機溶液，脫水(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/EtOAc/2-丙酮)對殘渣提純。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物3.4g中間體32(43％)。
實施例A4.b中間體33的制備攪拌NS(0.0546mol)和叔丁基胺(0.0983mol)的甲苯(75ml)溶液，并用Dean-Stark水分離器回流24小時。蒸發(fā)溶劑。蒸餾提純殘余物(0.5mmHg下的沸點75℃)。產(chǎn)物8.1g中間體33(72％)。
實施例A4.c中間體34的制備 反應在氮氣氣氛下進行。在-78℃攪拌下將n-BuLi(0.014mol)滴加到中間體33(根據(jù)A4.a制備)(0.0125mol)和2，2，6，6-四甲基哌啶(0.0012mol)的無水THF(25ml)溶液中。在-10℃下攪拌混合物3小時。在-10℃下分批添加中間體32(根據(jù)A4.b制備)(0.0083mol)的無水THF(25ml)溶液。室溫下攪拌反應混合物24小時，然后用NH4Cl(10％)終止反應，并分離有機層。用CH2Cl2萃取含水層。將混和的有機層脫水(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物5.6g中間體34(100％)。
實施例A4.d中間體35的制備 將NaHCO3(0.015mol)和羥胺(0.0125mol)添加到中間體34(根據(jù)A4.c制備)(0.0083mol)的無水乙醇(50ml)溶液中。室溫下攪拌反應混合物24小時。添加CH3Cl2，濾除固體并用CH2Cl2洗滌。蒸發(fā)溶劑。將殘余物倒入CH2Cl2中并用10％的Na2CO3和用鹽水洗滌。分離有機層，脫水(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/EtOAc/2-丙酮)對殘渣提純。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.9g中間體35(24％)。
實施例A5.a化合物36的制備 將A(0.029mol)和中間體5(根據(jù)A1.e制備)(0.0058mol)在1，4-二噁烷(5ml)中的混合物在100℃下攪拌6小時。蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 98/2-97/3)對殘渣提純。收集產(chǎn)物部分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物3.3g中間體36。
實施例A5.b化合物37的制備將三氟乙酸(11.7ml)滴加到中間體36(根據(jù)A5.f制備)(0.0071mol)的CHCl3(50ml)溶液中，并在±10℃下攪拌所得反應混合物3小時。冷卻反應混合物，然后再用50％的NaOH堿化。萃取該混合物并蒸發(fā)萃取的溶劑。產(chǎn)物2.5g中間體37(定量產(chǎn)物；不再提純地用于下一反應步驟)。
B、最終化合物的制備實施例B1.a化合物1的制備 將中間體5(根據(jù)A1.e制備)(0.0291mol)與1-(3-苯基-2-丙烯基)-哌嗪(0.0582mol)的混合物在100℃下加熱2小時。用水洗滌粗反應混合物，并用CH2Cl2萃取。分離有機層并脫水(Na2SO4)，過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 95/5)，并通過硅膠HPLC(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 80/20)提純殘余物。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。通過手性柱色譜法經(jīng)Chiralpak AD(洗脫劑C2H5OH/CH3CN 90/10)將該部分分離成其光學對映異構體。收集(B)-對映異構體部分并蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶解在甲醇中并轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽(1∶2)。過濾沉淀并干燥。產(chǎn)物2.47g化合物1。
實施例B1.b化合物2的制備 將中間體5(根據(jù)A1.e制備)(0.0044mol)與(3-苯基-2-丙烯基)-哌嗪(0.0087mol)的混合物在100℃下攪拌2小時。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 95/5)，然后通過硅膠高壓液相色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 96/4)對反應混合物提純。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。用二乙醚處理殘余物(1.4g)，然后干燥。產(chǎn)物1.2g化合物2(60％)。
實施例B1.c化合物3的制備 將中間體6(0.00227mol)、(E)1-(2-甲基-3-苯基-2-丙烯基)哌嗪(0.00273mol)和NaHCO3(0.00455mol)在二噁烷(30ml)中的混合物攪拌并回流48小時。蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶解在CH2Cl2中。用水洗滌有機溶液，脫水(MgSO4)，過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)99/1)，然后通過HPLC(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 99.5/0.5-98/2)提純殘余物。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.17g化合物3。
實施例B1.d化合物4的制備將中間體8(根據(jù)A1.h制備)(0.0058mol)與 (0.0116mol)在二噁烷(10ml)中的混合物攪拌并回流8小時，然后在室溫下攪拌一夜，然后攪拌回流18小時。用水處理混合物并用CH2Cl2萃取。蒸發(fā)分離出的有機層的溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/MeOH 97/3)提純殘余物。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。用二乙醚處理殘余物然后干燥。產(chǎn)物0.9g化合物4(33％)。
實施例B1.e化合物5的制備 將中間體10(根據(jù)A1.i制備)(0.0029mol)與 (0.0058mol)、AcOH(0.48g)和(AcO)3BHNa(0.4g)在1，2-二氯乙烷(20ml)中的混合物攪拌并回流一夜。用水處理混合物并萃取。蒸發(fā)分離出的有機層的溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/MeOH 97/3)提純殘余物。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。用二乙醚處理殘余物然后干燥。產(chǎn)物1.07g化合物5(82％)。
實施例B1.f化合物6的制備將化合物3(根據(jù)實施例B1.c制備)(0.00020mol)、乙酰氯(0.00024mol)和Et3N(0.00061mol)在氯仿(10ml)中的混合物在室溫下攪拌2小時。添加水并用CH2Cl2萃取該混合物。將分離的有機層脫水(MgSO4)、過濾并真空蒸發(fā)溶劑。通過Chromatotron上的CC-TLC(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 97/3；然后99/1)提純殘余物。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.022g化合物6。
實施例B1.g化合物7的制備 化合物8的制備 分離化合物2(根據(jù)B1.b制備)(0.0022mol)并通過手性柱色譜法經(jīng)Chiralpak AD(洗脫劑C2H5OH/CH3CN 90/10)提純成其光學對映異構體。收集這兩部分并蒸發(fā)其溶劑。產(chǎn)物±1.5g的餾分1(LCI純度＞99.5％)和±1.5g的餾分2(LCI純度＞99.5％)。餾分1通過用己烷處理并攪拌一夜而結晶。濾出沉淀物并干燥。產(chǎn)物1.08g化合物7(潤滑脂固體)。餾分2通過用EtOAc處理并攪拌一夜而結晶。濾出沉淀物并干燥。產(chǎn)物0.54g化合物8(潤滑脂固體)。
實施例B2.a化合物9的制備 將中間體24(根據(jù)A2.e制備)(0.0022mol)、1-(2-萘甲基)哌嗪(0.0044mol)和KI(催化用量)在1，4-二噁烷(2.5ml)中的混合物攪拌并回流一夜。用水洗滌反應混合物并用CH2Cl2萃取該混合物。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 98/2)，然后通過HPLC(洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)96/4)提純殘余物。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。用DIPE處理殘余物，過濾并干燥。產(chǎn)物0.3g化合物9(30％)。
實施例B2.b化合物10的制備 反應在氮氣氣氛下進行。將化合物9(根據(jù)B2.a制備)(0.0012mol)的無水THF(3ml)溶液和18-冠-6(催化用量)緩慢添加到NaH，60％(0.0018mol)的無水THF(2ml)溶液中。在室溫下攪拌反應混合物30分鐘。滴加乙酰氯(0.0013mol)并在室溫下攪拌反應混合物3小時。用含水NH4Cl處理并用CH2Cl2萃取該反應混合物。將分離的有機層脫水、過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 98/2)，然后通過HPLC(洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)98/2)提純殘余物。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.26g化合物10(52％)。
實施例B3.a化合物11的制備 將中間體31(根據(jù)A3.g制備)(0.0045mol)、(E)-(3-氯-2-甲基-1-丙烯基)-苯(0.0037mol)和K2CO3(0.0037mol)在DMF(15ml)中的混合物在70℃下攪拌2小時。用水洗滌混合物然后用CH2Cl2萃取。分離有機層，脫水、過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 98/2)提純殘余物。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。再通過HPLC(洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)98/2)提純殘余物。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。用DIPE處理殘余物。過濾沉淀物并干燥。產(chǎn)物0.34g化合物11(20％)。
實施例B3.b化合物12的制備 化合物13的制備 通過高壓液相色譜法經(jīng)Chiralcel OJ(洗脫劑己烷/MeOH/EtOH20/24/56)提純化合物11(根據(jù)B3.a制備)(0.00605mol)。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物餾分A和B。餾分A通過高壓液相色譜法經(jīng)RP BDS C18(洗脫劑(0.5％的NH4OAc水溶液/CH3CN(90/10))/MeOH70/30)提純。收集純餾分并蒸發(fā)有機溶劑。用CH2Cl2萃取含水層。將分離的有機層脫水(MgSO4)，過濾并蒸發(fā)溶劑。在己烷中攪拌殘余物并濾除沉淀。產(chǎn)物0.69g化合物12。餾分B通過高壓液相色譜法經(jīng)RP BDS C18(洗脫劑(0.5％的NH4OAc溶液/CH3CN(90/10))/MeOH70/30)提純。收集純餾分并蒸發(fā)有機溶劑。用CH2Cl2萃取含水層。將分離的有機層脫水(MgSO4)，過濾并蒸發(fā)溶劑。在己烷中攪拌殘余物并濾除沉淀。產(chǎn)物0.67g化合物13。
實施例4化合物14的制備 反應用Quest 210合成器(Argonaut Technologies，San Carlos，USA)以固體相進行。將N，N-二異丙基乙胺(0.0036mol)添加到 (0.0006mol)在乙腈(4ml)中的懸浮液中。加入1-(2-氯苯基甲基)哌嗪(0.0012mol)，并在80℃下攪拌所得反應混合物2 0小時。然后過濾每個反應容器并蒸發(fā)濾液。用HPLC提純殘余物。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.102g化合物14。
實施例B5.a化合物15的制備 將中間體7(根據(jù)A1.g制備)(0.0036mol)、2-(溴甲基)萘(0.0055mol)和K2CO3(0.0055mol)在MIK(15ml)中的混合物在100℃下攪拌±24小時。用水洗滌粗反應混合物，然后用CH2Cl2萃取。將分離的有機層脫水(Na2SO4)，過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠高壓液相色譜法(2次)((I)洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 95/5；(II)洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)98/2)提純殘余物。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.2g化合物15(11％)。
實施例B5.b化合物16的制備
化合物17的制備 通過柱色譜法(洗脫劑己烷/C2H5OH梯度30/70-0/100；柱CHIRALPAK AD 1000埃20μm DIACEL)將化合物15(根據(jù)B5.a制備)(0.0106mol)分離成其對映異構體。收集兩種純餾分并蒸發(fā)其溶劑。將殘余物溶解在CH3OH中并轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽(1∶2)。濾除沉淀物并干燥。
產(chǎn)物2.08g化合物16(36％)和2.19g化合物17(38％)。
實施例B6化合物18的制備 將中間體7(根據(jù)A1.g制備)(0.0045mol)、2-甲基-3-(3-噻吩基)-2-丙烯醛(0.00675mol)、NaBH(OAc)3(0.00675mol)和HOAc(2滴)在1，2-二氯乙烷(30ml)中的混合物在室溫下攪拌一夜。添加飽和NH4Cl水溶液并用CH2Cl2萃取該混合物。將分離出的有機層脫水(MgSO4)、過濾并在真空下蒸發(fā)溶劑。通過硅膠閃蒸柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)97/3)，然后通過HPLC(洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)99/1-98/2)提純殘余物。收集產(chǎn)物餾分并蒸發(fā)溶劑。
產(chǎn)物0.965g化合物18(46％；還含有3％的(Z)異構體！)。
實施例B7化合物19的制備 將中間體10(根據(jù)A1.j制備)(0.003mol)、4-氯苯甲醛(0.0045mol)和(AcO)3BHNa(0.0045mol)在1，2-二氯乙烷(30ml)中的混合物在室溫下攪拌并回流2小時。添加飽和NH4Cl水溶液并用CH2Cl2萃取該混合物。將分離出的有機層脫水(MgSO4)、過濾并在真空下蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/(MeOH/NH3)97/3)提純殘余物。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。從DIPE沉淀出殘余物。產(chǎn)物1.180g化合物19(57％)。
實施例B8化合物20的制備 將 (0.00036mol)、2-甲基苯甲醛(0.00108mol)和NaOCH3的30％CH3OH溶液(0.00108mol)在無水CH3OH(8ml)中的混合物在65℃下攪拌16小時(反應用Quest 210合成器(Argonaut Technologies，San Carlos，USA)以固體相進行)。過濾混合物并用HPLC(洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)98/2)提純?yōu)V液。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.032g化合物20。
實施例B9化合物21的制備 反應在氮氣氣氛下進行。將LiAlH4，1M/THF(0.8ml)溶液在-20℃下攪拌。一次性加入AlCl3(0.0009mol)。將所得溶液在-20℃下攪拌10分鐘。滴加中間體12(根據(jù)A1.1制備)(0.0008mol)的無水THF(5ml)溶液，將所得反應混合物在-20℃下攪拌1小時。然后小心加入飽和NH4Cl水溶液。用水洗滌反應混合物，然后用CH2Cl2萃取。將分離出的有機層脫水(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)溶劑。用醚處理殘余物。通過CC-TLC Chromatotron(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 97/3)提純殘余物(0.13g)。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.09g化合物21(30％)。
實施例B10化合物22的制備 反應在N2氣流下進行。在室溫下攪拌中間體13(根據(jù)A1.m制備)(0.001mol)在無水CH3OH(20ml)中的混合物。添加NaOCH3的30％CH3OH溶液(0.002mol)。加入1，2-二氫化茚-5-甲醛(0.002mol)，并將所得反應混合物攪拌回流16小時。將反應混合物冷卻到室溫。加入20％的NH4Cl，并用CH2Cl2萃取該混合物。用水以及鹽水洗滌分離的有機層，脫水(Na2SO4)、過濾并減壓蒸發(fā)溶劑。通過短開柱色譜法以及CC-TLC法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 98/2)提純殘余物。收集產(chǎn)物餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.035g化合物22(7.2％，淺棕色固體)。
實施例B11化合物23的制備 將中間體15(根據(jù)A1.o制備)(0.00136mol)、2-(三甲基甲錫烷基)吡啶(0.0027mol)和Pd(PPh3)4(0.00013mol)在甲苯(20ml)中的混合物加熱到100℃。攪拌反應混合物16小時并冷卻到室溫。加入水并用CH2Cl2萃取該混合物。收集分離的有機層，用水以及鹽水洗滌，脫水(Na2SO4)并減壓蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/MeOH 98/2)提純殘余物。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。將所得殘余物通過CC-TLC在Chromatotron(洗脫劑CH2Cl2/MeOH 98/2)提純。收集純餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.044g化合物23(淺棕色固體，7％)。
實施例B12化合物24的制備 反應在N2氣氛下進行。將n-BuLi，2.5M/己烷(0.0062mol)滴加到攪拌的(對氟芐基)三苯基氯化(0.0062mol)的THF(20ml)溶液中。攪拌混合物15分鐘。滴加中間體11(根據(jù)A1.k制備)(0.00514mol)的THF(20ml)溶液。在50℃下攪拌反應混合物16小時。加入水并用Et2O萃取該混合物。將分離出的有機層脫水(MgSO4)、過濾并在真空下蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 97/3)，然后通過HPLC(洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)99/1)提純殘余物，以分離(E)/(Z)異構體。收集兩種產(chǎn)物餾分并蒸發(fā)它們的溶劑。產(chǎn)物0.651g化合物24(26％，(E))。
實施例B13化合物25的制備 將樹脂 (0.0016mol；1.5mmol/g)懸浮在THF中。加入1.6M的BuLi(0.0015mol)并攪拌混合物15分鐘。過濾混合物并用無水THF(3×)洗滌過濾的殘余物(樹脂)。將樹脂懸浮在THF(5ml)中。加入中間體19(根據(jù)A1.s制備)(0.0004mol)并在100℃下攪拌反應混合物一夜。將混合物冷卻、過濾并真空蒸發(fā)濾液。通過制備性HPLC(洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)97/3)提純殘余物。收集產(chǎn)物餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.168g化合物25。
實施例B14化合物26的制備將中間體16(根據(jù)A1.p制備)(0.0025mol)、苯胺(0.0028mol)和NaBH4(0.0028mol)在HOAc(50ml)中的混合物在室溫下攪拌2小時。加入NH4OH水溶液。用CH2Cl2萃取該混合物。將分離的有機層脫水(MgSO4)、過濾并在真空下蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)99/1)，然后通過硅膠閃蒸柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/(CH3OH/NH3)98/2)提純殘余物。收集產(chǎn)物餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.181g化合物26(15％)。
實施例B15化合物27的制備 將 (0.0018mol)在N2氣氛下滴加到中間體17(根據(jù)A1.q制備)(0.0012mol)、3-氟苯酚(0.0018mol)和PPh3，pol.(0.0024mol)的無水THF(10ml)溶液中。在室溫下攪拌反應混合物一夜。過濾混合物，用CH2Cl2和CH3OH洗滌，蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/EtOAc 2/1和CH2Cl2/CH3OH 96/4)，然后通過硅膠閃蒸柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 97/3)提純殘余物。收集產(chǎn)物餾分并蒸發(fā)溶劑。產(chǎn)物0.29g化合物27(50％)。
實施例B16化合物28的制備
將NaClO(4％)(0.005mol)加入中間體35(根據(jù)A4.d制備)(0.002mol)的CH2Cl2(10ml)溶液中。在室溫下攪拌反應混合物4小時。加入Et3N(0.004mol)并在室溫下攪拌反應混合物24小時。分離有機層，用Na2SO3(10％)洗滌，脫水(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑EtOAc和CH2Cl2/CH3OH 95/5)提純殘余物。收集所需餾分并蒸發(fā)溶劑。將殘余物倒入二乙醚中，然后通過dicalite過濾并蒸發(fā)濾液。將殘余物溶解在二乙醚中并轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽(1∶2)。過濾沉淀，用2-丙酮和二乙醚洗滌，并脫水。產(chǎn)物0.15g化合物28(15％)。
實施例B17化合物29的制備 將中間體37(根據(jù)A5.g制備)(0.006mol)和2-(溴甲基)萘(0.003mol)在二噁烷(40ml)中的混合物在100℃下攪拌6小時，然后在室溫下攪拌一夜。用10％的K2CO3水溶液處理反應混合物，然后用CH2Cl2萃取。蒸發(fā)分離的有機層。通過硅膠短開柱色譜法(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH 95/5和90/10和CH2Cl2/(CH3OH/NH3)95/5)提純殘余物。收集產(chǎn)物餾分并蒸發(fā)溶劑。用二乙醚處理殘余物(1.49g)，然后干燥。產(chǎn)物0.8g化合物29(53％)。
下表(表1-5)中給出了已根據(jù)以上任何一個實施例制備的許多化合物。所有化合物都測試了其藥理活性。
表1











表2A

表2B
表2C
表3A

表3B
表3C 表4
表5 C、藥理學實施例實施例C1對α2-腎上腺素能受體亞型和對5-HT轉(zhuǎn)運蛋白的結合性試驗一般說明通式(I)化合物與hα2-受體和h5-HT轉(zhuǎn)運蛋白的相互作用在體外放射性配位體結合性試驗中評定。一般來說，對特定受體或轉(zhuǎn)運蛋白具有高結合性親和力的低濃度放射性配位體，用在特定受體或轉(zhuǎn)運蛋白中富含的組織制劑的試樣，或用在緩沖介質(zhì)中表達了克隆的人受體的細胞制劑培養(yǎng)。在培養(yǎng)期間，放射性配位體與受體或轉(zhuǎn)運蛋白結合。當這種結合達到平衡時，將結合了放射性活性的受體與未結合放射性活性的受體分開，并對結合了活性的受體或轉(zhuǎn)運蛋白計數(shù)。測試化合物與受體的相互作用在競爭性結合試驗中評估。將各種濃度的測試化合物添加到含有受體制劑或轉(zhuǎn)運蛋白制劑和放射性配位體的培養(yǎng)混合物中。與其結合親和力和其濃度成比例的測試化合物抑制了放射性配位體的結合。用于hα2A、hα2B和hα2C受體結合性的放射性配位體為[3H]-raulwolscine，用于h5-HT轉(zhuǎn)運蛋白的放射性配體是[3H]paroxetine。
細胞培養(yǎng)與膜制劑在Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium(DMEM)/Nutrient混合物Ham’s F12(比例1∶1)(Gibco，Gent-Belgium)中培養(yǎng)與人腎上腺素能的α2A、α2B或α2C受體cDNA穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染的CHO細胞，其中所述培養(yǎng)基以10％熱失活的胎牛血清(Life Technologies，Merelbeke-Belgium)和抗生素(100IU/ml青霉素G、100μg/ml硫酸鏈霉素、110μg/ml丙酮酸和100μg/ml L-谷氨酰胺)為補充。在收集的前一天，用5mM丁酸鈉誘發(fā)細胞。達到80-90％融合時，在不含Ca2+和Mg2+的磷酸緩沖鹽水中刮下細胞，并以1500×g離心收集10分鐘。用Ultraturrax均質(zhì)器將細胞在Tris-HCl 50mM中均質(zhì)化，并以23500×g離心10分鐘。丸劑經(jīng)再懸浮和再均質(zhì)化以洗滌一次，并將最終的丸劑再懸浮在Tris-HCl中，分成每份1ml并在-70℃下儲存。
α2-腎上腺素能受體亞型的結合性試驗將膜解凍，并在培養(yǎng)緩沖液(N-甘氨酰甘氨酸25mM，pH8.0)中再均質(zhì)化。在500μl的總?cè)莘e中，用帶有或不帶有競爭劑的[3H]raulwolscine(NET-722)(New England Nuclear，USA)(1nM最終濃度)中在25℃下培養(yǎng)2-10μg蛋白質(zhì)60分鐘，然后用Filtermate 196收集器(Packard，Meriden，CT)經(jīng)GF/B濾紙快速過濾。用冰冷的洗滌緩沖劑(Tris-HCl，50mM，pH7.4)徹底洗滌濾紙。與濾紙結合的放射性活度在Topcount(Packard，Meriden，CT)中通過閃爍計數(shù)器確定，結果以每分鐘的計數(shù)(cpm)表示。在1μM的oxymetazoline(對于hα2A受體和hα2B受體)存在下，和在1μM的spiroxatrine(對于hα2C受體)存在下測定非特意性結合。
對于5-HT轉(zhuǎn)運蛋白的結合性試驗將人血小板膜(Oceanix Biosciences Corporation，Hanover，MD，USA)解凍，在緩沖劑(Tris-HCl 50mM，120mMNaCl和5mM KCl)中稀釋并用Ultraturrax均質(zhì)器快速(最多3秒)均質(zhì)化。在250μl的總?cè)莘e中，用帶有或不帶有競爭劑的[3H]paroxetine(NET-869)(NewEngland Nuclear，USA)(0.5nM最終濃度)在25℃下培養(yǎng)50-100μg蛋白質(zhì)60分鐘。用Filtermate 196收集器(Packard，Meriden，CT)，通過用0.1％聚乙烯胺預潤濕的GF/B濾紙快速過濾培養(yǎng)混合物，以中止培養(yǎng)。用冰冷的緩沖劑徹底洗滌濾紙，并在Topcount液體閃爍計數(shù)器(Packard，Meriden，CT)中計量濾紙上的放射性。數(shù)據(jù)用cpm表示。用丙咪嗪(在1μM的最終濃度下)確定非特意性結合。
數(shù)據(jù)分析與結果存在化合物時的試驗數(shù)據(jù)以不存在測試化合物時測量的總結合性的百分比計算。自動生成以總結合性的百分比與測試化合物的濃度對數(shù)值的關系繪制的抑制性曲線，用非線性回歸法擬合出S形抑制性曲線。測試化合物的pIC50值從單個曲線得出。
根據(jù)通式(I)的所有化合物在10-6M-10-9M的測試濃度范圍內(nèi)，至少在hα2A位置(但往往還在hα2B和hα2C位置)上，且同時在5-HT轉(zhuǎn)運蛋白位置上，以濃度相關的方式產(chǎn)生50％(pIC50)以上的抑制性。對于選擇數(shù)量的化合物，它涵蓋了通式(I)的各種實施方式的絕大部分，其體外研究結果示于表6。
表6體外試驗的某些結果(pIC50-值)(n.d.不確定)
實施例C2對于α2-腎上腺素能受體拮抗作用和對于5-羥色胺(5-HT)再攝取抑制活性的體內(nèi)試驗A、Medetomidine試驗在饑餓了一夜的Wiga雄鼠(200-250g)上記錄medetomidine(0.10mg/kg，i.v.)誘發(fā)的行為喪失的開始和結束。行為喪失強度記錄為0＝行為正常，1＝輕度運動失調(diào)，2＝顯著運動失調(diào)，3＝行為喪失期小于5分鐘，4＝行為喪失期大于5分鐘。在標準條件下，在medetomidine測試前1小時給藥測試化合物或溶劑(s.c或p.o.)。藥物誘發(fā)的拮抗作用的標準(1)行為喪失的拮抗作用持續(xù)＝0分鐘(1.4％偽陽性對照；n＝74)；(2)運動失調(diào)的逆轉(zhuǎn)得分＜2(0％偽陽性)。藥物誘發(fā)的增強的標準行為喪失反射超過120分鐘(0％偽陽性)。中樞作用性α2-腎上腺素能受體拮抗劑或行為刺激劑拮抗行為喪失；鎮(zhèn)靜劑化合物可導致作用延長。
進行以下觀察行為喪失開始(分鐘)、行為喪失結束(分鐘)和行為喪失強度(0-4分)。分別在s.c.(溶液)或p.o.(懸浮液)給藥后1小時進行觀察。起始劑量為10mg/kg(參考文獻Berger，U.V.，Grzanna，R.，Molliver，M.E.，Exp.Neurol.103，111-115(1989)；Fuller，R.W.，Perry，K.W.，Molloy，B.B.，Eur.J.Pharmacol.33，119-124(1975)和Lassen，B.J.，Psychopharmacol.57，151-153(1978))。
B、pCA試驗采用雄Wiga鼠(體重200±20g)。給藥試驗化合物或溶劑1小時后，皮下注射pCA溶液(5mg/kg；10ml/kg)。pCA注射45分鐘后，記錄頭部抽搐(HTW)的老鼠數(shù)，并從pCA給藥45、50和55分鐘開始，以3個連續(xù)5分鐘的間隙對興奮度(EXC)打分。由經(jīng)訓練的觀察者根據(jù)強度等級打分0＝?jīng)]有或疑似，1＝有，2＝顯著，3＝最大。將15分鐘觀察時間內(nèi)頭部抽搐的次數(shù)累計，用于統(tǒng)計分析。對于其他現(xiàn)象，采用3個5分鐘間隙的中間值。
在s.c.或p.o.給藥后1小時進行標準觀察。起始劑量通常為10mg/kg。先以起始劑量給藥2個動物。當兩個動物在至少一種觀察中都表現(xiàn)出活性時，就認為該化合物是活性的，并以降低4倍的劑量重復試驗。當僅在兩個動物之一上發(fā)現(xiàn)活性時，就測試另外的動物。當在這個另外的動物中發(fā)現(xiàn)活性時，也認為該化合物是活性的，并以降低4倍的劑量重復試驗。在所有其他情況下，在具體的時間-路徑-劑量下，都認為該化合物是無活性的(參考文獻Janssen，P.A.J.，Niemegeers，C.J.E.，Awouters，F(xiàn).，Schellekens，K.H.L.，Megens，A.A.H.P.，Meert，T.F.J.，Pharmacol.Exp.Therap.244，685-693(1988))。
結果根據(jù)本發(fā)明的大量化合物在小于或等于10mg/kg的劑量下，在medetomidine試驗和pCA試驗中都表現(xiàn)出中樞活性(最小有效劑量)。
實施例C3[35S]GTPγS結合性試驗取hα2A腎上腺素能受體表達的CHO細胞株的膜解凍，并在20mMHepes緩沖劑中再均質(zhì)化。96孔板的每個孔中培養(yǎng)介質(zhì)包括20mMHepes緩沖劑，pH7.5，1μM GDP，3mM MgCl2，100mM NaCl，0.25nM[35S]GTPγS和10μg蛋白質(zhì)。在[35S]GTPγS前20分鐘加入拮抗肌和參照激動劑去甲腎上腺素(3μM)。通過GF/B濾紙快速過濾結束培養(yǎng)(20分鐘，37℃)，并通過液體閃爍計數(shù)器計量結合性。
結果在GTPγS結合性試驗中評價的所有本發(fā)明化合物在高達10μM時，未表現(xiàn)出結合到hα2A受體的[35S]GTPγS明顯增加。在該試驗中評價的所有化合物能抑制去甲腎上腺素誘發(fā)的[35S]GTPγS結合性的增加，從而在該受體上表現(xiàn)出它們的拮抗特性。
權利要求
1.根據(jù)通式(I)化合物 其藥物上可接受的酸或堿加成鹽，其立體化學異構體及其N-氧化物，其中X 為CH2、N-R7、S或O；R7選自氫、烷基、苯基、苯烷基、烷羰基、烷氧基羰基和一烷氨基羰基和二烷氨基羰基，苯基和烷基非必須地用一個或多個鹵素原子取代；R1和R2各自獨立地選自氫、羥基、氰基、鹵素、OSO2H、OSO2CH3、苯基、苯烷基、烷氧基、烷氧基烷氧基、烷氧基烷氧基烷氧基、四氫呋喃基氧基、烷羰基氧基、烷基硫代基、烷氧基烷羰基氧基、吡啶基羰基氧基、烷羰基氧基烷氧基、烷氧基羰氧基、鏈烯基氧基、鏈烯基羰氧基和一烷氨基烷氧基和二烷氨基烷氧基，烷基和芳基非必須地用一個或多個羥基或鹵素原子或氨基取代；或R1和R2可一起形成選自-CH2-CH2-O-、-O-CH2-CH2-、-O-CH2-O-、-CH2-O-CH2-和-O-CH2-CH2-O-的二價基-R1-R2-；a和b是不對稱中心；(CH2)m是m個碳原子的直烴基鏈，m為1-4的整數(shù)；Pir 為根據(jù)通式(IIa)、(IIb)或(IIc)的任何一個的非必須地取代的基團 其中每個R8相互獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、氰基、鹵素和烷基；n 為1-5的整數(shù)；R9選自氫、烷基和甲酰基；和R3代表與非必須地取代的和部分或全部氫化的1-6個原子長的烴基鏈一起的非必須地取代的芳族碳環(huán)的或雜環(huán)的環(huán)體系，其中所述環(huán)體系與Pir基連接且可含有一個或多個選自O、N和S的雜原子。
2.根據(jù)權利要求1的化合物，其特征在于R3為根據(jù)通式(III)任何一個基團 其中d 為單鍵Z為選自-CH2-、-C(＝O)-、-CH(OH)-、-C(＝N-OH)-、-CH(烷基)-、-O-、-S-、-S(＝O)、-NH-和-SH-的二價基；或d為雙鍵而Z為式＝CH-或＝C(烷基)-的三價基；A 為5節(jié)或6節(jié)芳族碳環(huán)或雜環(huán)環(huán)，選自苯基、吡喃基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、噻吩基、異噻唑基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、呋喃基、噁二唑基和異噁唑基；p 為0-4的整數(shù)；q 為0-7的整數(shù)；R4選自氫、烷基、苯基、聯(lián)苯基、萘基、鹵素和氰基，其中烷基和芳基非必須的用一個或多個羥基或鹵素原子或氨基取代；R5等于R4；或R4和R5可一起形成選自-CH2-、＝CH-、-CH2-CH2-、-CH＝CH-、-O-、-NH-、＝N-、-S-、-CH2N(烷基)-、-CH＝N-、-CH2O-和-OCH2-的二價基-R4-R5-；每個R6各自獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、氰基、鹵素、羧基、烷基、苯基、烷氧基、苯氧基、烷羰基氧基、烷氧基羰基、烷基硫代基、一烷氨基和二烷氨基、烷羰基氨基、一烷氨基羰基和二烷氨基羰基、一烷氨基羰基氧基和二烷氨基羰基氧基、一烷氨基烷氧基和二烷氨基烷氧基，烷基和芳基非必須地用一個或多個羥基或鹵素原子或氨基取代；或兩個相鄰基R6可一起形成選自-CH2-CH2-O-、-O-CH2-CH2-、-O-CH2-C(＝O)-、-O-CH2-O-、-CH2-O-CH2-、-O-CH2-CH2-O-、-CH＝CH-CH＝CH-、-CH＝CH-CH＝N-、-CH＝CH-N＝CH-、-CH＝N-CH＝CH-、-N＝CH-CH＝CH-、-CH2-CH2-CH2-、-CH2-CH2-C(＝O)-和-CH2-CH2-CH2-CH2-的二價基-R6-R6-；和R10選自氫、烷基、苯烷基和苯基。
3.根據(jù)權利要求2的化合物，其特征在于X＝O或NH；R1和R2均為烷氧基；m＝1；Pir為根據(jù)通式(IIa)的基，其中R8為氫且n＝4；R3為根據(jù)通式(IIIb)的基，其中Z為＝CH-，d為雙鍵，A為苯環(huán)，R4為烷基和R10為氫。
4.用作藥品的根據(jù)權利要求1到3任何一項的化合物。
5.在活體內(nèi)降解產(chǎn)生根據(jù)權利要求1到3任何一項的化合物的化合物。
6.包含藥物可接受的載體和作為活性成分的治療有效量的根據(jù)權利要求1到3任何一項的化合物或根據(jù)權利要求5的化合物的藥物組合物。
7.根據(jù)權利要求6的藥物組合物的制備方法，包括將根據(jù)權利要求1到3任何一項的化合物或根據(jù)權利要求5的化合物與藥物可接受的載體混和。
8.根據(jù)權利要求1到3任何一項的化合物或根據(jù)權利要求5的化合物在制造治療抑郁癥、焦慮癥和體重異常的藥物中的應用。
9.包含藥物可接受的載體和作為活性成分的治用有效量的根據(jù)權利要求1到3任何一項的化合物或根據(jù)權利要求5的化合物，以及選自抗抑郁藥、抗焦慮藥和精神抑制藥的一種或多種其他化合物的藥物組合物。
10.根據(jù)權利要求9的藥物組合物在制造在抑郁癥、焦慮癥和體重異常的治療中提高療效和/或開始作用的藥物中的用途。
11.根據(jù)權利要求1到3任何一項的化合物或根據(jù)權利要求5的化合物在制造治療抑郁癥、焦慮癥和體重異常的藥物上的用途，所述治療包括把權利要求1到3任何一項的化合物或根據(jù)權利要求5的化合物或選自抗抑郁藥、抗焦慮藥和精神抑制藥的一種或多種其他化合物同時或依次給藥。
12.選自抗抑郁藥、抗焦慮藥和精神抑制藥的一種或多種化合物在制造治療抑郁癥、焦慮癥和體重異常的藥物上的用途，所述治療包括把選自抗抑郁藥、抗焦慮藥和精神抑制藥的一種或多種化合物，和根據(jù)權利要求1到3任何一項的化合物或根據(jù)權利要求5的化合物同時或依次給藥。
13.根據(jù)權利要求9的藥物組合物在抑郁癥、焦慮癥和體重異常的治療中提高療效和/或開始作用上的用途。
14.根據(jù)權利要求9的藥物組合物的制造方法，包括將權利要求1到3任何一項的化合物或根據(jù)權利要求5的化合物與選自抗抑郁藥、抗焦慮藥和精神抑制藥的化合物和藥物可接受的載體混和。
15.根據(jù)權利要求1到3任何一項的化合物的制備方法，其特征在于根據(jù)通式(IV)的化合物與根據(jù)通式(V)或通式(VII)的化合物反應。
16.根據(jù)通式(IV)的化合物 其中R1、R2、X和m的定義與通式(I)相同且L為離去基，所述化合物不包括3，3a，4，5-四氫萘并[1，2-c]異噁唑-3-乙酸。
17.根據(jù)通式(VIII)的化合物 其中R1、R2、X、m、R8和n的定義與通式(I)相同。
18.根據(jù)權利要求16的化合物，其特征在于L選自OSO2C6H4(CH3)、OSO2CH3、Cl、Br和I。
全文摘要
本發(fā)明涉及根據(jù)通式(I)的取代異噁唑啉衍生物其中X＝CH
文檔編號A61K31/454GK1492871SQ02805243
公開日2004年4月28日 申請日期2002年2月13日 優(yōu)先權日2001年2月21日
發(fā)明者J·I·安德雷斯-吉爾, F·J·費爾南德斯-加德, M·J·阿爾卡扎-瓦卡, J·M·茨德-努內(nèi)斯, J·帕斯托爾-費爾南德斯, A·A·H·P·梅根斯, G·I·C·M·海倫, X·J·M·朗洛伊斯, M·H·M·貝克, T·H·W·斯特克勒, C M 海倫, H P 梅根斯, J I 安德雷斯-吉爾, M 朗洛伊斯, M 貝克, W 斯特克勒, 茨德-努內(nèi)斯, 費爾南德斯-加德, 阿爾卡扎-瓦卡, 雇卸 費爾南德斯 申請人:詹森藥業(yè)有限公司