專利名稱：豬和家禽的疾病和傳染病的治療和預(yù)防的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗生素在治療和預(yù)防動物，尤其是豬和家禽的疾病或傳染病中作為醫(yī)獸用藥劑的用途。
背景技術(shù)：
豬和家禽，尤其是集中飼養(yǎng)或大規(guī)模飼養(yǎng)的家禽，易于患上各種疾病或傳染病，或者存在這樣的風(fēng)險，如豬和家禽中的支原體引起的疾病、豬中發(fā)生的散沫花(Lawsonia)傳染病和豬痢疾，以及家禽中的壞死性腸炎。已提出或使用各種藥劑治療這些類型的單種疾病或傳染病。這些藥劑通常要么對大范圍的疾病或傳染病的藥效不高，要么在低劑量水平不能獲得好的效果。因此，例如硫粘菌素，這是一種用于治療豬痢疾的藥劑，它在治療散沫花傳染病中是無效的，并且對支原體引起的疾病也不是非常有效；紅霉素，它用于抵抗支原體，但是并未報道它能抵抗豬痢疾或散沫花傳染病。

發(fā)明內(nèi)容
令人驚訝的是，我們現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，目前已以高劑量治療和控制家禽的支原體引起的疾病的已知的抗生素愛佛洛辛(aivlosin，3-O-乙酰基-4″-O-異戊?；?泰樂霉素)，在預(yù)防和治療豬的散沫花傳染病(回腸炎)和豬痢疾以及家禽的壞死性腸炎中也是有效的。該藥物在治療和控制豬的支原體引起的疾病以及以比迄今為止要低得多的劑量治療和控制家禽的支原體引起的疾病中也是有效的。此外，當(dāng)該藥物與四環(huán)素類(尤其是氯四環(huán)素或土霉素)組合使用后，可獲得協(xié)同的效果。
因此，本發(fā)明提供愛佛洛辛本身或者其藥學(xué)上可接受的(無毒性的)衍生物(如酸加成鹽)在制備治療或預(yù)防豬的散沫花傳染病或豬痢疾或者家禽的壞死性腸炎的醫(yī)獸用藥劑中的用途，以及治療或控制豬的散沫花傳染病或豬痢疾、或者家禽的壞死性腸炎的方法，該方法包括向豬或家禽給予有效量的愛佛洛辛或其藥學(xué)上有效的衍生物。
本發(fā)明包括愛佛洛辛本身或者其藥學(xué)上可接受的衍生物在制備治療或控制豬或家禽的支原體引起的疾病的醫(yī)獸用藥劑中的用途，以少于200ppm(200g/1000kg的飼料)的量將該藥劑加到飼料中；本發(fā)明還包括治療和控制豬和家禽的支原體引起的疾病的相應(yīng)方法。
在一優(yōu)選實施例中，本發(fā)明的3-O-乙酰基-4″-O-異戊?；?泰樂霉素或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其其它衍生物以40-150ppm的量加到飼料中，以治療豬和家禽的支原體疾病。
在一優(yōu)選實施例中，本發(fā)明的醫(yī)獸用藥劑是加到飼料或飲用水中的添加劑。
本發(fā)明另一方面還涉及3-O-乙酰基-4″-O-異戊?；?泰樂霉素或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其其它衍生物用于制備使家禽呈類胸膜肺炎微生物(PPLO)陰性的醫(yī)獸用藥劑的用途。在一優(yōu)選實施例中，該醫(yī)獸用藥劑是可注射的制劑。
本發(fā)明一方面還涉及一種家禽或豬食用的飼料，該飼料含有40-150ppm的3-O-乙?；?4″-O-異戊酰基-泰樂霉素或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其其它衍生物。
本發(fā)明還包括一種醫(yī)獸用藥劑，該藥劑包含作為活性成分的愛佛洛辛與四環(huán)素類(尤其是氯四環(huán)素或土霉素)的混合物。
本發(fā)明還包括加到動物飼料(如給豬或家禽的飼料)中的包衣的組合物，該組合物含有呈微粒形式的愛佛洛辛，該愛佛洛辛被聚乙酰基吡咯烷酮包衣。
具體實施例方式
在英國專利說明書1539907中公開了在3和4″位上具有?；膼鄯鹇逍裂苌镆约八峒映甥}，尤其是酒石酸、乙酸、丙酸、檸檬酸、琥珀酸、鹽酸、硫酸和磷酸的加成鹽。在這些愛佛洛辛衍生物中，具體公開的是3-O-乙?；?4″-O-異戊酰基-泰樂霉素，這種衍生物就是現(xiàn)在所說的愛佛洛辛，它的結(jié)構(gòu)如下
式中，R1是乙酰基，R2是異戊?；?。該文獻中還公開了一種生產(chǎn)愛佛洛辛的方法，該方法包括，在適當(dāng)?shù)孽；w的存在下，采用鏈霉菌屬(Streptomyces)的適當(dāng)酰化微生物對泰樂霉素或者適當(dāng)?shù)夭糠瞩；奶访顾剡M行生化酰化，所述鏈霉菌屬尤其是選自耐熱鏈霉菌(Streptomyces thermotolerans)(ATCC 11416)、殺真菌鏈霉菌針棘霉素亞屬(Streptomyces fungicidus subsp.espinomyceticus)(ATCC 21574)、生米卡鏈霉菌(Streptomyces mycarofaciens)(ATCC 21454)和吸水鏈霉菌(Streptomyceshygroscopicus)(ATCC 21582)，所述?；w尤其是乙酰輔酶A、異戊?；o酶A、乙酸、異戊酸、這些酸的鉀鹽、鈉鹽或銨鹽、這些酸的甲酯和乙酯、這些酸的酰胺以及α-氧代戊酸。
所述說明書提及，可將泰樂霉素20種衍生物給予人或動物，該說明書還指出了這些衍生物抗多種革蘭氏陽性菌的活性，包括抗藥的細菌，但該文獻并未具體指出這些衍生物在治療或控制動物的具體疾病或傳染病中的用途，雖然它指出這些藥物可用于人、牲畜、家養(yǎng)寵物、實驗室用動物和家禽，以類似于大環(huán)內(nèi)酯類抗生素藥物的方式通過腸、腸胃外或局部控制傳染病等。
實際上，以其初始在日本上市的注冊商品(No 4 chika AC1771)為基礎(chǔ)的愛佛洛辛已在市場上銷售一段時間了，并且也已經(jīng)證明了它在飼料中以200-500ppm的高劑量僅用于治療和控制豬和家禽的支原體疾病。還沒有理由推測這種藥物是否適用于治療和預(yù)防豬和家禽的其它傳染病和疾病，尤其是有效抵抗支原體疾病的其它大環(huán)內(nèi)酯類抗生素(如紅霉素)對豬和家禽的其它傳染病(如上述提及的)并未顯示出任何效果或任何顯著的效果。當(dāng)然，在所有主要國家中適用的獲準方案的一個特征是，獲準為具體目的而銷售的醫(yī)獸用藥劑在沒有得到單獨的授權(quán)或者相關(guān)機構(gòu)的批準的情況下，不能為了任何其它具體的目的而銷售或推廣。因此，這對于將已知的抗生素用于新的醫(yī)獸用途反而是一種強烈的刺激。
但是，我們現(xiàn)已從大量的體外和體內(nèi)(動物)試驗工作中發(fā)現(xiàn)并證實，愛佛洛辛及其可接受的衍生物在以合理的劑量預(yù)防和治療豬的散沫花傳染病和豬痢疾(由短螺旋菌Brachyspira hyodysenteriae引起)中是有效的。大量的體外和體內(nèi)(動物)試驗工作還揭示并證實，這些化合物在低劑量預(yù)防和治療家禽和豬的支原體疾病方面是有效的。最后，體外試驗工作表明，這些化合物在預(yù)防和治療家禽的壞死性腸炎(由產(chǎn)氣莢膜梭菌，Clostridium perfringens)所致方面也可能是有效的。
愛佛洛辛可以游離的形式存在，為白色結(jié)晶粉末，熔點為180-184℃，雖然它在正己烷和石油醚中微溶，但它在低級醇如乙醇、酮如丙酮、醚如乙醚、酯如乙酸乙酯和芳烴如甲苯中可溶。它在pH在7左右或以下的水溶液中非常易于溶解，但是在較高pH的水溶液中稍微難于溶解。因為它是一種堿性化合物，它形成酸加成鹽，藥學(xué)上可接受的這種鹽的使用也包括在本發(fā)明中。形成可接受的酸加成鹽的酸包括無機酸，如鹽酸、硫酸或磷酸，和有機酸，如酒石酸、乙酸、丙酸、檸檬酸和琥珀酸?？山邮艿难苌锏奶厥饫邮躯}酸愛佛洛辛(熔點為129-133℃)和酒石酸愛佛洛辛(熔點為119-122℃)。這些衍生物通常比愛佛洛辛本身更能溶于水，因此使用它們可獲得配制上的優(yōu)勢。
根據(jù)本發(fā)明，可以已知的方式，通過使適當(dāng)?shù)墓腆w或液體載體和用于所需的給藥途徑的賦形劑混合，將愛佛洛辛和適當(dāng)?shù)难苌锱渲瞥舍t(yī)獸用的藥劑，例如提供口服、腸或腸胃外給藥用的組合物?？墒褂贸Ｒ?guī)的成分作為載體和賦形劑，例如用于液體制劑的水和鹽水，以及用于口服給藥的固體制劑的硅質(zhì)材料-氧化硅和硅酸鹽(如水合的硅酸鎂)、谷類產(chǎn)品(如大豆粉和小麥粉)和其它藥學(xué)上可接受的固體。通常，這些制劑還可含有佐劑和添加劑，如礦物質(zhì)、潤滑劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、增濕劑、乳化劑、緩沖液和著色劑或增香物質(zhì)。在預(yù)防或控制所述疾病時，特別方便的是將愛佛洛辛或其衍生物作為添加劑加到豬或家禽的動物飼料或飲用水中，但在治療疾病時，可將它們加到可注射的溶液中，或者如果需要，將它們配制成片劑、膠囊或漿液。
可將愛佛洛辛(本身，或者其適當(dāng)?shù)难苌?，例如酸加成鹽，如酒石酸的鹽)配制成具有1-10重量％的各種效力的預(yù)混合料。用于生產(chǎn)這種預(yù)混合料的特別合適的組合物含有愛佛洛辛鹽、填充劑(如大豆粉)和添加劑(如羥丙基纖維素)，其效力為180-220mg/g。
為了確保愛佛洛辛在可能經(jīng)高溫處理成粒狀或擠出形式的動物飼料中的穩(wěn)定性，需要提供成微粒形式的聚乙烯基吡咯烷酮包衣的愛佛洛辛(其本身，或者其適當(dāng)?shù)难苌铮缇剖岬乃峒映甥})。合適的重量比例是活性成分聚乙烯基吡咯烷酮為50∶1到1∶1。惰性的填充劑和其它成分也可存在在這類組合物中，總的聚乙烯基吡咯烷酮濃度較佳為0.1-10重量％。
醫(yī)獸用藥劑還可含有用于治療豬和家禽的傳染病或疾病的其它活性成分，如其它的抗生素，尤其是用于該目的的四環(huán)素類抗生素。從敏感性試驗中我們已發(fā)現(xiàn)，愛佛洛辛與四環(huán)素類抗生素的共同使用與單獨使用任一種抗生素以獲得相同的效果的情況相比，它們兩種抗生素的劑量都要相對較低。
用作飼料添加劑或直接給予的制劑的醫(yī)獸用藥劑可含有任何方便比例的愛佛洛辛，如1重量％或以下到90重量％或更大。液體制劑通常含有50-90重量％，而固體制劑通常含有1-25重量％。
對于豬的散沫花傳染病的治療或控制，可以40-120ppm(重量)(即40-120g/1000kg的飼料)的比值給予這些藥劑足夠長的能成功控制或治療該疾病的時間，如7-14天。例如，可使用40-100ppm或50-80ppm。對于控制疾病，給予10天，每天50ppm的量通常是有效的；給予10天，每天100ppm的量則足以非常成功地治療疾病。對于豬痢疾的治療或控制，可使用類似的量和時間。在飼料中以50ppm的量給予10天有可能有效地預(yù)防疾病的爆發(fā)。當(dāng)愛佛洛辛或其衍生物用于治療或預(yù)防壞死性腸炎時，類似的或較低的量和時間也可能會有效。
對于幼小家禽的支原體疾病的控制，可直接將愛佛洛辛制劑注射到蛋中。這還使幾天大的小雞的類胸膜肺炎微生物(PPLO)是陰性的。
試驗給藥的量和時間，以治療或控制家禽和豬的支原體疾病，這個量和時間是驚人地低。原始的日本上市的注冊商品所用的量為飼料中200-400ppm(以重量計)的水平，而本發(fā)明所使用的量為200ppm以下，較佳是40-150ppm或更少，例如在上述范圍之內(nèi)。
當(dāng)將愛佛洛辛或其衍生物直接給予，用于治療和控制散沫花傳染病、豬痢疾或壞死性腸炎時，以體重為基礎(chǔ)的給藥水平可以在1-8mg/kg體重/天、較佳為1-5mg/kg體重/天。
當(dāng)將愛佛洛辛與四環(huán)素類(尤其是氯四環(huán)素或土霉素)混合使用以獲得針對短螺旋菌Brachyspira hyodysenteriae或關(guān)節(jié)液枝原體(Mycoplasma synoviae)的協(xié)同效果時，各成分的量可以大大減少，例如減少到單獨使用該成分時所使用的量的一半或三分之一。該化合物可含有大范圍的重量比的愛佛洛辛和四環(huán)素類，如每重量份愛佛洛辛10重量份或少于10重量份的四環(huán)素類，尤其是10∶1到5∶1或8∶1到6∶1的重量比。
下述實施例闡述的是，根據(jù)本發(fā)明愛佛洛辛在生產(chǎn)治療或預(yù)防豬和家禽傳染病的醫(yī)獸用藥劑或制品中的用途，其中份為重量份。
實施例1將20份溶解在水中的愛佛洛辛API(活性藥物成分)與80份大豆粉混合，然后噴干該化合物，獲得用于飼料的固體添加劑，其中每1000kg含有200kg的愛佛洛辛活性。可將此制劑加到豬和家禽的飼料中，以在飼料中提供每1000kg最終飼料25-200g的愛佛洛辛。
實施例2將25份20％愛佛洛辛與50份水合的硅酸鎂(惰性氧化硅)、24份小麥飼料粉和1份液體石蠟EP混合成粉末混合物，得到用于飼料的的固體添加劑，其中每1000kg含有50kg的愛佛洛辛。將此制劑用于豬和家禽的飼料中，如實施例1所述。
實施例3將5份實施例2中使用的20％愛佛洛辛與40份水合的硅酸鎂、54份小麥飼料粉和1份液體石蠟EP混合成粉末混合物，得到用于飼料的的固體添加劑，其中每1000kg含有10kg的愛佛洛辛。將此制劑用于豬和家禽的飼料中，如實施例1所述。
實施例4將愛佛洛辛溶解在水中，得到含有80-90％愛佛洛辛活性的水溶液，用于豬或家禽的飲用水?？蓪⒋酥苿┘拥斤嬘盟?，以提供每200升飲用水含有25-100g的愛佛洛辛濃度。
實施例5將含有80％w/w以上的愛佛洛辛酒石酸鹽的愛佛洛辛API混合到850kg的批次中，該批次含有以下成分愛佛洛辛API163-169kg羥丙基纖維素，歐洲藥用級(Ph.Eur.) 8.2-8.5kg水，歐洲藥用級 800-1200升脫脂大豆粉 720kg加工這個批次，在加工過程中除去水。由HPLC測定根據(jù)粗原料的游離堿的含量調(diào)整加入的愛佛洛辛API，以使最終的產(chǎn)品其生物檢測效力為180-220mg/g。該產(chǎn)品(AIVLOSIN FG 200)也可以其它批次大小生產(chǎn)，它適用于生產(chǎn)1-10％的各種效力的愛佛洛辛預(yù)混合料。
實施例6以1000kg批量(也可使用其它批量)生產(chǎn)在高溫加工粒狀的或擠出形式的飼料后，在動物飼料中穩(wěn)定的包衣的愛佛洛辛制劑，其成分如下AIVLOSIN FG 200(參見實施例5)250.0kg輕質(zhì)狀石蠟，歐洲藥用級 10.0kg小麥飼料粉 240.0kg聚乙烯基吡咯烷酮10.0-100.0kg海泡石 加到1000.0kg試驗結(jié)果1.散沫花傳染病豬的散沫花傳染病(回腸炎或增殖性豬腸病)是由散沫花屬Lawsoniaintracellularis病原體引起，此病原體僅在6年前才分離得到，它停留在豬的下小腸的內(nèi)壁細胞中。到目前為止，已認識到少數(shù)幾種抗微生物劑能有效預(yù)防和治療這種在世界上廣泛傳播且在豬飼養(yǎng)和哺育方面帶來巨大的經(jīng)濟重要性的疾病。我們已經(jīng)在豬體外和體內(nèi)進行了大量的試驗工作，這些工作顯示，愛佛洛辛對于治療這種疾病并預(yù)防其擴散到其所感染的環(huán)境之外方面是非常有效的。下表1顯示我們進行的愛佛洛辛豬增殖性腸病藥效研究的結(jié)果。
表1

*從其它組別獲得的統(tǒng)計學(xué)上顯著性〔P＜O.001〕。
愛佛洛辛治療組在食物攝取、增重和進食效力方面還有明顯的改善。對所有這些成果參數(shù)，愛佛洛辛表現(xiàn)良好。
以每噸(1000kg)飼料含有50g的愛佛洛辛的量(50ppm)給予10天能有效控制該疾病，而以100ppm的量給予10天則能非常成功地治療疾病的發(fā)作。
2.豬痢疾豬痢疾是由短螺旋菌Brachyspira hyodysenteriae引起的，該細菌停留在豬大腸的內(nèi)腔中，在那里它隱藏在小囊中，并在粘膜上攝取食物。先前是使用硝基咪唑進行治療，但是這些物質(zhì)現(xiàn)在被禁止用于人將食用的動物。從截短側(cè)耳素獲得的化學(xué)物質(zhì)，尤其是硫粘菌素，已用于治療該疾病，并且過去也曾建議食用泰樂霉素，雖然今年來由于病原體對泰樂霉素的抗性不斷發(fā)展的緣故，其使用已大大減少。
我們已在體外和體內(nèi)測試了愛佛洛辛與硫粘菌素和泰樂霉素相比抵抗細菌的效力。體外測試的結(jié)果顯示在下表2中(MIC指最小抑制濃度，即抑制所研究的短螺旋菌Brachyspira hyodysenteriae株的生長的活性成分的最小濃度，以mcg/ml計)。
表2

明顯的是，在體外，愛佛洛辛遠比泰樂霉素有效得多。
我們在動物疾病模型(其中，用細菌的致命菌株人工感染無感染的豬)中進行的測試顯示，當(dāng)以50ppm的量的飼料給予10天時，愛佛洛辛有效預(yù)防了疾病的發(fā)作，而泰樂霉素則需要提供21天或更長，硫粘菌素需要在豬存在風(fēng)險的整個期間都提供。
在治療該疾病時，50ppm的愛佛洛辛的表現(xiàn)要好于或等于硫粘菌素(在結(jié)果上)和泰樂霉素(在持續(xù)期間上)。
臨床疾病的預(yù)防組1未治療的進行免疫試驗的組組2以50ppm的量給予1天的治療組組3未進行免疫試驗的未治療組治療期間的結(jié)果

臨床發(fā)作的治療平均分＝平均臨床分0＝正常，6＝垂死

3.壞死性腸炎壞死性腸炎是一種由產(chǎn)氣莢膜梭菌產(chǎn)生的毒素引起的疾病，這種疾病可導(dǎo)致腸襯里的廣泛破壞，其結(jié)果導(dǎo)致死亡率增加和低的生長比例。過去曾使用威里霉素和桿菌肽鋅作為生長促進劑，以控制這種疾病，但是，它們最近被禁止使用。目前還沒有提議使用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素來治療或控制壞死性腸炎，也沒有任何預(yù)期認為這種抗生素可能是有效的。
但是，我們進行的體外試驗顯示，愛佛洛辛抵抗產(chǎn)氣莢膜梭菌的各種菌株要比桿菌肽鋅有效得多，如下表3所示。
表3

4.細菌對單獨的愛佛洛辛和四環(huán)素類或者它們的組合的敏感性敏感性以抑制測試細菌的生長的抗生素的最低濃度表示(mcg/ml)(MIC＝最小抑制濃度)。
短螺旋菌Brachyspira hyodysenteriae愛佛洛辛(AIV)和氯四環(huán)素(CTC)的組合。

關(guān)節(jié)液枝原體愛佛洛辛與氯四環(huán)素的組合。

愛佛洛辛和土霉素(OTC)的組合。

5.AIVLOSIN注射劑直接將AIVLOSIN注射劑注射到蛋中，以預(yù)防幼小的小雞的支原體疾病。這種注射也使幾天大的小雞呈PPLO(類胸膜肺炎微生物)陰性。
使用EMBREX卵內(nèi)(IN OVO)注射系統(tǒng)進行下述關(guān)于AIV的工作。
口服的愛佛洛辛的吸收與泰樂霉素相比要好150-200％，它滲透到靶位點的情況也是較好的。與泰樂霉素的MIC相比，其MIC得到提高。
將40g用水溶解的AIVLOSIN活性加到1升無菌鹽水中，制得AIVLOSIN注射劑。
為了研究在卵內(nèi)注射的AIVLOSIN抵抗小雞或火雞的支原體的效果，進行以下試驗。
進行一個前導(dǎo)試驗，以測試卵內(nèi)注射的幾種抗生素對胚化18天的蛋的毒性。以每個蛋1、3和5mg的量(0.05ml)試驗愛佛洛辛，每組25個蛋。結(jié)果非常好。
孵化％1mg為100％3mg為95.8％(1個胚胎活著但不孵出小家禽)5mg為100％。
結(jié)論用Aivlosin(每個蛋4mg，為0.05ml鹽水)注射并未影響治療組的孵化率。
用鹽水(每個蛋0.05ml)注射也沒有影響對照組的孵化率。

**所有的氣室仍保持完整(注射前對光檢查過)
孵出3天后小雞的重量(在孵化場孵化后2天)

權(quán)利要求
1. 3-O-乙?；?4″-O-異戊?；?泰樂霉素或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其其它衍生物的用途，其特征在于，用于制備用于治療或預(yù)防豬的散沫花傳染病的醫(yī)獸用藥劑。
2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述醫(yī)獸用藥劑是加到飼料或飲用水中的添加劑。
3.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，在所述醫(yī)獸用藥劑中，所述3-O-乙?；?4″-O-異戊酰基-泰樂霉素或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其其它衍生物成聚乙烯基吡咯烷酮包衣的微粒形式。
4.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述醫(yī)獸用藥劑還含有四環(huán)素。
5.如權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于，所述四環(huán)素是氯四環(huán)素或土霉素。
6.如權(quán)利要求4或5所述的用途，其特征在于，所述醫(yī)獸用藥劑含有的活性成分的重量比為1∶5到1∶10。
全文摘要
愛佛洛辛本身或其藥學(xué)上可接受的(無毒的)衍生物(如酸加成鹽)在制備治療或預(yù)防豬和家禽的疾病和傳染病的醫(yī)獸用藥劑中的用途。具體而言，所述可治療的疾病和傳染病是家禽的壞死性腸炎和豬的散沫花傳染病、支原體疾病和豬痢疾。
文檔編號A61K9/16GK1771980SQ200510089368
公開日2006年5月17日 申請日期2001年10月15日 優(yōu)先權(quán)日2000年10月18日
發(fā)明者M·J·桑德斯 申請人:?？苿游锝】涤邢薰?br>