專利名稱：海蟑螂活性成分的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從海洋生物海蟑螂中提取藥用活性成份的方法。
海洋生物海蟑螂[ligia exotica(roux)]又名海蛆、海岸水虱，是一種長年生活在海岸邊的水陸兩棲動物，屬甲殼綱，海蟑螂科。民間曾將海蟑螂作為藥物使用。據(jù)記載，以海蟑螂為主藥有消疳、活血、解毒之功效，可治小兒疳積、癬、跌打損傷、痛疽初起之癥等(余傳隆、黃太唐《中藥辭?！肪矶?，1993年)。
對海蟑螂民間應(yīng)用主要有兩種方式其一，將海蟑螂用新瓦焙干，然后粉碎成末，用于口服，可以消腫止痛；其二，將海蟑螂搗碎，用于外敷，可治癬并消腫。上述應(yīng)用方式十分原始，且其藥效和活性成份未得到進(jìn)一步的研究和確認(rèn)。
本發(fā)明的目的在于改變民間應(yīng)用海蟑螂的原始方式，提出一種提取海蟑螂藥物活性成份的方法，以便提高海蟑螂藥物利用的效率，并開辟新的來自海洋的天然消炎止痛藥物或功能性食品的渠道。
本發(fā)明以海洋生物海蟑螂為原料，海蟑螂蟲體扁，呈卵形，漆黑有光澤，形體大者為金黃色。海蟑螂的藥物活性成份的提取方法如下1.預(yù)處理即將海蟑螂自然風(fēng)干、真空干燥、粉碎成粉未。
海蟑螂捕獲后，用開水燙死，洗凈，自然風(fēng)干。然后在真空中干燥至恒重。再進(jìn)行粉碎，過80目篩，得粉末。
2.活性成份的提取將海蟑螂粉未用30-40℃溫水提取2-3次，每次15-30小時，合并初提液，-10～-20℃低溫真空濃縮；加入活性碳，用以脫色，再加熱至微沸，保持3-5分鐘，然后冷卻，提濾，抽濾液調(diào)節(jié)濃度至25-35g生藥/ml；加入防腐劑，調(diào)至等滲；調(diào)pH值至中性；分裝，消毒，即可。
上述提取過程中，加入的防腐劑可為尼泊金酯類，如尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯等。加入量為使終濃度達(dá)0.03～0.08％。
上述提取過程中，加入活性碳的量為使終濃度達(dá)0.3～0.5％。
經(jīng)動物實驗，發(fā)現(xiàn)上述海蟑螂提取物具有顯著的消炎止痛作用，實驗方法和結(jié)果如下一、實驗藥物1.海蟑螂提取物如上配置，供腹腔注射用。
2.消炎痛上海醫(yī)藥公司產(chǎn)品，臨用前，制成4mg/ml，供腹腔注射用。
二、實驗動物昆明小鼠，雄性，體重18±2g，購自第二軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心。(普通級，合格證書醫(yī)動字第02-25-1號)。
三、實驗方法參照中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局主編《新藥臨床前研究指導(dǎo)原則匯編》的方式。
2.小鼠扭體實驗。
小鼠分組后，以生理鹽水作陰性對照，消炎痛作陽性對照，腹腔注射給藥，40-60分鐘后，腹腔注射0.6％醋酸0.2ml，在其后15分鐘內(nèi)觀察小鼠扭體次數(shù)。比較組間顯著性差異。
說明小鼠扭體反應(yīng)指小鼠因受到疼痛刺激而產(chǎn)生的腹部內(nèi)凹，軀干與后腿伸張，臀部高起的現(xiàn)象。
2.小鼠耳殼致炎法小鼠分組后，用生理鹽水作陰性對照，消炎痛作陽性對照，藥物注射劑腹腔注射。給藥30分鐘后，二甲苯0.03-0.05ml滴抹在小鼠右耳耳殼內(nèi)外。3小時后處死小鼠并取下右耳殼，同時取下左耳殼對照，7mm的打孔器分別在左、右耳打下圓耳片后，于分析天平上稱量，計算出腫脹度。(腫脹度＝右耳耳殼重量-左耳耳殼重量)。比較組間顯著性差異。
四、實驗結(jié)果表1海蟑螂提取物對醋酸誘導(dǎo)小鼠扭體的抑制作用<
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*P＜005，**P＜0.01與生理鹽水組相比。
從表1可知，海蟑螂對醋酸誘導(dǎo)的小鼠扭體有顯著的抑制作用，且作用強(qiáng)度與劑量相關(guān)。2個劑量組優(yōu)于消炎痛。
表2海蟑螂提取物對二甲苯誘導(dǎo)的小鼠耳殼腫脹的抑制作用
*P＜0.05，**P＜0.01與生理鹽水組相比。
由表2可知，海蟑螂提取物對小鼠耳殼腫脹有顯著的抑制作用，抑制作用隨劑量的增加而增加。且作用強(qiáng)度強(qiáng)于消炎痛組。
本實驗結(jié)果表明，本發(fā)明的海蟑螂提取物具有顯著的消炎止痛作用，作用強(qiáng)于消炎痛?？梢娮鳛榫哂兴幬锘钚缘暮Ｑ笊锞哂虚_發(fā)和應(yīng)用價值，可以用于制備新的來自海洋的天然消炎止痛藥物或功能性食品。
實施例，在中國浙江省舟山地區(qū)采集的海蟑螂，經(jīng)過前述預(yù)處理，獲得海蟑螂粉未。稱取3g粉未，用注射用水在37℃下提取2次，每次提時24小時，合并提取液。在-15℃下真空濃縮。加入針劑用活性碳使終濃度為0.3％，加熱至微沸，保持4分鐘，然后冷卻，抽濾，其抽濾液濃度為30g海蟑螂藥粉/ml；加入防腐劑尼泊金丙酯，調(diào)至等滲。加入注射用水，調(diào)pH值至7.2，最后分裝、消毒，即得所需的海蟑螂活性成份提取物。該提取物的消炎止痛的作用見表1和表2。
權(quán)利要求
1.一種海蟑螂活性成份的提取方法，以海蟑螂為原料，經(jīng)過自然風(fēng)干，真空干燥、粉碎預(yù)處理步驟，其特征在于將海蟑螂粉來用30-40℃溫水提取2-3次，每次15-30小時，合并初提液，在-10～-20℃低溫真空濃縮；加入活性碳，加熱至微沸，保持3-5分鐘，然后冷卻，抽濾，抽濾液調(diào)節(jié)濃度至25-35g生藥/ml；加入防腐劑，調(diào)至等透；調(diào)pH值至中性，分裝，消毒。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海蟑螂活性成份提取方法，其特征在于加入的防腐劑為尼泊金酯類，加入量為使終濃度達(dá)0.03～0.08％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海蟑螂活性成份提取方法，其特征在于活性碳的加入量為使終濃度達(dá)0.3～0.5％。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從海蟑螂中提取藥用活性成分的方法。其步驟為先對海蟑螂進(jìn)行自然風(fēng)干、真空干燥、粉碎等預(yù)處理,然后經(jīng)過溫水提取、真空濃縮、防腐處理、活性炭脫色等步驟,獲得25～35g生藥/ml的濾液。經(jīng)動物實驗證明,上述提取物具有顯著的消炎止痛作用,可用于制備來自海洋的天然消炎止痛藥物或功能食物。
文檔編號A61K35/56GK1253780SQ9912401
公開日2000年5月24日 申請日期1999年11月11日 優(yōu)先權(quán)日1999年11月11日
發(fā)明者曾華武, 卞俊, 蔡定國 申請人:中國人民解放軍第四一一醫(yī)院